Introduccin

Bacterias

Las bacterias son organismos unicelulares microscpicos, sin ncleo ni
clorofila, que pueden presentarse desnudas o con una cpsula gelatinosa,
aisladas o en grupos y que pueden tener cilios o flagelos.
La bacteria es el ms simple y abundante de los organismos y puede
vivir en tierra, agua, materia orgnica o en plantas y animales.
Tienen una gran importancia en la naturaleza, pues estn presentes en
los ciclos naturales del nitrgeno, del carbono, del fsforo, etc. y pueden
transformar sustancias orgnicas en inorgnicas y viceversa.
Son tambin muy importantes en las fermentaciones aprovechadas por la
industria y en la produccin de antibiticos.

Bacteriologa

La Bacteriologa es la rama de la Biologa que estudia la
morfologa, ecologa, gentica y bioqumica de las bacterias as
como otros muchos aspectos relacionados con ellas. Es de gran
importancia para el hombre por sus implicaciones mdicas,
alimentarias y tecnolgicas.


Tincion de Gram

La tincin de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaos,
morfologas celulares y reaccin Gram (color). A nivel del laboratorio es til como test para un
rpido diagnstico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como en cultivos en
crecimiento, y adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra clnica. Las bacterias se
tien gram positivas (+), gram negativas () o no se tien debido a sus diferencias en la
composicin de su pared y arquitectura celular.
Las bacterias gram (+) tienen una gruesa capa de pptidoglucano y gran cantidad de cidos
teicicos que no son afectados por la decoloracin con alcohol y/o acetona, reteniendo el colorante
inicial acomplejado con iodo y visualizndose en distintos
grados de tonos desde el violeta al azul claro, dependiendo de
si la naturaleza de su pared celular est intacta o daada (por
tratamientos antibiticos, edad celular).
Las bacterias gram () tienen en su pared celular una
delgada capa de peptidoglucano ligada a una membrana
externa por molculas de lipopolisacridos. Esta membrana
externa es daada por el alcohol y/o acetona de la
decoloracin, permitiendo que el primer colorante
acomplejado con iodo escape y sea reemplazado por el
contracolorante.

Procedimiento:

Recoger muestras.
-Hacer el extendido en espiral.
-Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un
mechero.
-Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
-Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 minuto. Todas las clulas
gram positivas y gram negativas se tien de color azul-prpura.
-Enjuagar con agua.
-Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
-Enjuagar con agua.
-Agregar acetona y/o alcohol y esperar de 8 a 15 segundos aproximadamente (parte crtica de la
coloracin).
-Enjuagar con agua.
-Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 45 segundos. Este tinte dejar
de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.
-Para observar al microscopio ptico es conveniente hacerlo a 100x con aceite de inmersin.


Staphylococcus aureus


Staphylococcus aureus, conocido como estafilococo ureo, o comnmente estafilococo dorado, es
una bacteria anaerobia facultativa, grampositiva, productora de coagulasa, catalasa, inmvil y no
esporulada que se encuentra ampliamente distribuida por todo el mundo, estimndose que una de
cada tres personas se hallan colonizadas, aunque no infectadas, por ella.

Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones cutneas y de las
mucosas relativamente benignas, tales como foliculitis, forunculosis o conjuntivitis, hasta
enfermedades de riesgo vital, como celulitis, abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis,
endocarditis o neumona. Adems, tambin puede afectar al aparato gastrointestinal, ya sea por
presencia fsica de Staphylococcus aureus o por la ingesta de la
enterotoxina estafiloccica secretada por la bacteria.

En la actualidad, este microorganismo se encuentra como el
principal causante de las infecciones nosocomiales. Esta situacin
se ve favorecida por el hecho de que esta especie habita tanto en
las mucosas como en la piel de los seres humanos, lo que permite
que a travs de las heridas quirrgicas pueda penetrar en el
torrente sanguneo del paciente por medio del contacto directo o
indirecto con el personal sanitario, con un objeto contaminado o
incluso con otro paciente.

Las cepas habituales de Staphylococcus aureus son resistentes a la
penicilina, dejando como los antibiticos ms eficaces para
combatirlos a los aminoglucsidos, las cefalosporinas, la oxacilina o la nafcilina.Adems de la
administracin del tratamiento antimicrobiano correspondiente, puede ser conveniente, en
funcin del caso, la eliminacin de puertas de entradas como catteres venosos permanentes o
drenajes quirrgicos.

Prctica III
Bacterias

Objetivo de la prctica:
Conocer a las bacterias

Material:
Caja Petri
Mechero Bunsen
Pipeta pasteur
As bacteriolgica
Microscopio
Porta objetos
Cristal violeta
Lugol
Alcohol
Safranina
Portaobjetos

Procedimiento:

Procedimos a encender el mechero Bunsen, despus tomamos la asa bacteriolgica y la caja Petri,
que previamente contena un cultivo de staphylococcus areus. Estando en un permetro de
esterilidad de 30 cm cerca de la flama del mechero; lo primero que hicimos fue esterilizar la asa
bacteriolgica calentndola al rojo vivo, despus deja que se
enfriara y tomamos un porcin del cultivo del staphylococcus
areus, con cuidado de mantenernos en la zona de esterilidad
producida por la flama. Dejamos la caja Petri con el cultivo boca
abajo en en la mesa y por lo que tomamos con el as bacteriolgica
lo colocamos en el portaobjetos, esparcindolo de manera
uniforme. Al terminar de colocar la muerta adecuadamente en el
porta objetos, volvimos a esterilizar el asa en el fuego
calentndolo hasta el rojo vivo y pasmos el portaobjetos con la
muestra en la flama para lograr que se quedara "sellada".
Posteriormente procedimos a hacer la tincion de Gram:
-colocando cristal violeta sobre la muestra, esperando 45 seg. Y
enjuagando con agua.
-luego agregando lugol esperando 30 seg. Y volviendo a enjuagar.
-posteriormente le echamos alcohol de "pasada", como si lo hubiramos enjuagado. Despus de eso
de nuevo enjuagamos con agua.
- para terminar agregamos safranina y lo dejamos 45 seg. Luego volvimos a enjuagar.
Terminado la tincion, fuimos al microscopio a colocar la muestra y obtener una imagen clara del
staphylococcus areus.

Observaciones

Se observa en el microscopio al staphylococcus areus que es una Gram positiva, estn en
grupos y estn en forma de bolitas. Por su puesto, tambin
observamos, hicimos y aprendimos el procedimiento para
la tincion de Gram.




















Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Colegio de Ciencias y Humanidades
Plantel Vallejo








Prctica III
Bacterias
Staphylococcus Aureus












Estrada Mares Valeria
Tesorero Snchez Rodrigo
Armando
680
Biologa IV