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Prctica 4

Medicin y error
La fotosntesis
Objetivos
El alumno:
4.1. Describir el concepto de estudio cuantitativo
4.2. Reconocer la importancia de la medicin en los trabajos experimentales.
4.3. Mencionara algunos de los errores ms frecuentes en la medicin de las variables de
un experimento.
4.4. Utilizar una hoja de clculo para ordenar y graficar los datos obtenidos en un
experimento.
4.5. Encontrar relaciones sencillas entre las variables independientes y dependientes en
un fenmeno.
4.6. Identificara a la fotosntesis como una reaccin de reduccin favorecida por la luz
solar.
4.7. Ordenar en una ecuacin de reaccin los principales reactivos y productos de la
fotosntesis.
4.8. Identificar las principales longitudes de onda de la luz solar aprovechadas por la
fotosntesis.
4.9. Atribuir el inicio de la cadena energtico alimenticia para el sustento de la vida en
la tierra al fenmeno de la fotosntesis.
Introduccin
En todo fenmeno podemos encontrar cualidades que le son propias, es decir que lo
caracterizan y distinguen de los dems; generalmente la presencia de estas caractersticas es
la primera en estudiarse. Posteriormente se hace necesario relacionar dichas caractersticas
con algunos otros factores que intervienen en el fenmeno, y al ir profundizando en el
estudio, se torna indispensable cuantificar unos y otros, ya que en las ciencias, ningn
conocimiento puede ser completo si no ha sido cuantificado.
Cualquier conocimiento (y an en las ciencias) en un inicio es cuantitativo, pero
conforme progresa se convierte en cualitativo. Por ejemplo en el caso de la fotosntesis
Aristteles ya relacion la luz del sol con el color verde de las plantas.
Para cuantificar las caractersticas de un fenmeno necesitamos medirlas, lo que
significa comparar sus magnitudes y expresar esa medicin en forma tal que pueda ser
entendida y reproducida por otras personas, por lo que debe estar referida a un patrn de
medicin, es decir un objeto, aparato o cualidad que tiene una caracterstica constante y
que transformado en unidades permite expresar numricamente la magnitud con que dicha
propiedad se manifiesta en el fenmeno.
Las unidades derivadas del patrn de medicin se plasman en la escala que
presentan los instrumentos utilizados para medir. El instrumento de medicin debe ser
invariable y accesible al mismo tiempo, lo cual es difcil de lograr y casi siempre se
sacrifica una de las caractersticas para aumentar la otra, segn las necesidades del trabajo.
As por ejemplo, una balanza analtica es ms invariable y exacta en sus mediciones que
una granataria, sin embargo la segunda es ms accesible y tiene mayor capacidad; la
utilizacin de una u otra depender de lo que se necesite pesar y de la precisin que se
pretenda obtener.
El acto de medir lleva implcito una serie de limitantes, entre las que podemos
contar:
a) Error humano. Puede deberse al descuido y provocar una mala lectura. Este error
se puede reducir haciendo lecturas repetidas y diseando los instrumentos de
medicin de forma tal que las medidas se tomen correctamente.
b) Limitaciones instrumentales. Todos los instrumentos de medicin llevan
implcitas algunas limitaciones. La forma de reducir este error est asociada con el
avance de la tecnologa y el diseo de los instrumentos. Sin embargo, en muchas
ocasiones aunque existe el instrumento adecuado, no se dispone de l, por ello es
muy importante el aprender a valorar la exactitud de las medidas hechas con
nuestros instrumentos.
c) Influencias extraas durante la medicin. Si queremos medir el volumen de un
lquido, aunque dispongamos de un matraz aforado nos encontraremos con que este
ha sido calibrado a una temperatura dada y si nosotros medimos el volumen del
lquido a una temperatura diferente, el volumen del matraz ya no ser el mismo al
original y tambin se habr modificado el volumen del lquido, aunque en diferente
proporcin.
d) Muestras no significativas. En las ciencias biolgicas, generalmente nos interesa
encontrar relaciones y caractersticas de poblaciones, no particularidades de un
individuo, por ello trabajamos con muestras de poblaciones. No importa que tan
cuidadosas se hayan hecho las mediciones, si la muestra no es representativa de la
poblacin a la que pertenecen no tendrn ninguna validez. La representatividad de
las muestras es muy importante en las ciencias biolgicas ya que en toda poblacin
existen diferencias individuales. Una forma de solucionar este error es tomar
muestras al azar.
e) Error por tamao de la muestra. En el ejemplo anterior, an si la muestra es
tomada al azar, pero su tamao es reducido, no se obtienen ejemplares
representativos de todas las variantes y la muestra solo indica las caractersticas de
una parte de la poblacin.
f) Perturbaciones causadas por el acto de la observacin. La inmersin de un
termmetro fro, en un recipiente con un lquido al que se le quiere medir la
temperatura, altera su temperatura original. Este tipo de perturbacin es
particularmente aplicable a las ciencias biolgicas, por ejemplo: tan pronto como se
intenta estudiar el comportamiento de un animal bajo condiciones controladas, el
animal puede modificar su conducta por el solo hecho de estar siendo observado.
La fotosntesis
Es el proceso por medio del cual el CO
2
-de la atmsfera en el caso de las plantas terrestres,
o el CO
2
disuelto en el agua- se utiliza para sintetizar azcares (molculas complejas)
mediante la transformacin de la energa luminosa en energa qumica y su incorporacin
(reaccin endergnica) en enlaces de alta energa. La luz es captada por las molculas de la
clorofila que se encuentran en el citoplasma de las clulas procariontes, como las algas, o
en los cloroplastos de las clulas eucariontes. En la fotosntesis aerbica la molcula del
agua se fragmenta en una reaccin conocida como fotlisis que proporciona electrones y el
O
2
del agua se libera a la atmsfera. Adems de azcares la fotosntesis proporciona las
cadenas carbonadas necesarias para la sntesis de las principales molculas orgnicas de las
clulas vegetales. La fotosntesis es tambin el nico proceso de sobresaturar de oxgeno
disuelto el agua, fenmeno vital para el desarrollo dela vida en los mares y otros
ecosistemas acuticos.
La respiracin es el proceso por medio del cual se oxida una molcula compleja como el
azcar para liberar energa que se utiliza para la sntesis de ATP y que tiene como
productos resultantes el CO
2
y H
2
O. Este proceso se lleva a cabo en el citoplasma
(glicolisis) y en las mitocondrias. Dicha energa se utiliza para el metabolismo de los seres
vivos.

El CO
2
de la atmsfera se disuelve en el agua y da lugar a una cadena de reacciones:
1) CO
2 (gas)
+ H
2
O H
2
CO
3

Dado que el cido carbnico que resulta es muy inestable se liberan iones hidrgeno y se
obtiene bicarbonato:
2) H
2
CO
3
HCO
3
-

+ H
+

El bicarbonato a su vez libera iones hidrgeno y carbonato
3)

HCO
3
-

CO
3
--

+ H
+


La grfica 4.1 representa la proporcin en porcentaje de cada uno de los compuestos
carbonatados y el pH correspondiente. El Rojo de Cresol es un reactivo indicador de pH
que revela la composicin de la mezcla.


Grafica 4.1. Mezcla de los tres componentes carbonatados producto de la reaccin
entre CO
2
atmosfrico y el agua respecto al pH resultante (Snchez San Romn F.J.
2012 Depto. de Geologa, Universidad de Salamanca)
La Elodea es una angiosperma, herbcea, acutica lacustre y perenne; que pertenece al
gnero Elodea, Familia Hydrocharitaceae, Orden Alismatales, Clase Liliopsida, Filo
Magnoliophyta del Reino Plantae; el clornquima de las hojas tiene numerosos cloroplastos
por clula. Las especies de Elodea se usan como plantas ornamentales en acuarios y son de
amplia distribucin mundial. Algunas especies se han reportado como parte de la
vegetacin acutica natural en Mxico como en las Lagunas de Zempoala (Rzedowski,
1983).
Ejercicio 1
Los propsitos de este ejercicio son evidenciar el efecto de la luz en la fijacin del bixido
de carbono y la produccin de O
2
por las clulas del parnquima cloroflico de las hojas del
gnero Elodea y la respiracin en vegetales.

Material Biolgico
Plantas frescas de Elodea

Material
3 vasos de precipitados de 50 mL 1 vaso de precipitados de 500 mL
12 tubos de ensaye de 20 mL, con tapa
y etiquetados, por cada equipo
1 pipeta de 10 mL 1 bureta de 50 mL
1 soporte universal 1 pinza para bureta
1 matraz de 100 mL 1 termmetro
1 gradilla 1 regla
Papel aluminio

Reactivos:
Rojo de Crsol. Cresolsulfonftaleina, formula C
21
H
18
O
5
S. Indicador de pH: 0.2 rojizo 1.8 a
7 amarillo, de 8.8 a 14 morado. Peso molecular 382.94. Slido en polvo.
Solucin de NaOH al 0.1N
cido Actico Glacial
Fenolftalena
Papel indicador de pH
Agua purificada

Equipos:
1 Microscopio de diseccin 1 Microscopio ptico
1 Parrilla de calentamiento 1 Cmara fotogrfica

Mtodo:
a) Realizar observaciones microscpicas para identificar y describir el tejido de clornquima en las
hojas de Elodea.
b) Preparar una solucin al 0.04% de rojo de Cresol (Cresolsulfonaftaleina) considerar que, cada
bioensayo por equipo utilizar 45 mL de solucin.
c) Reconocer los cambios de color del Rojo de Cresol utilizando: una solucin de NaOH 0.1N, y una
solucin de cido Actico Glacial 1 mL en 20 mL de agua. Verificar el pH con papel indicador.
d) Enjuagar la Elodea con agua y cortar 8 ramas de 10 cm.
e) Colocar cada rama en un tubo de ensaye y aadir agua purificada en 4 tubos y solucin de Rojo de
Cresol en otros cuatro tubos.
f) Colocar 15 mL de la solucin de Rojo de Cresol al 0.1% en cuatro tubos de ensaye sin Elodea.
g) Cubrir con papel aluminio dos tubos de cada juego (dos con Elodea y Rojo de Cresol, dos tubos de
Elodea en agua y dos tubos con rojo de Cresol nicamente).
h) Mida el pH con papel indicador en cada tubo y antelo en la tabla 4.1. Tape todos los tubos para
que los gases de respiracin y fotosntesis queden contenidos y reaccionen con la solucin de agua y
el Rojo de Cresol.
i) Un tubo de cada juego (6 tubos) se colocarn a temperatura ambiente y otro juego (6 tubos) en bao
Mara a 30 C durante 3 horas se determinar nuevamente el pH al final del experimento con tiras
de papel y se discutirn los resultados.
j) Realizar una titulacin comparando tubos con Elodea y agua a temperatura ambiente, y a 30C tanto
cubiertos con papel aluminio como descubiertos.
k) Tomar fotografas para documentar la prctica.
l) Elaborar un reporte.
Medidas de seguridad
Debe evitarse el contacto con la piel del Rojo de Cresol y con el cido actico glacial,
ambos son irritantes.
Cuestionario
Cules son las reacciones qumicas que se suceden a partir del CO
2
disuelto en el agua a
temperatura ambiente?
Qu resultado obtuvo con el Rojo de Cresol como indicador de pH?
Qu resultado obtuvo con el Rojo de Cresol con la Elodea a la luz y a la oscuridad a
temperatura ambiente y en 30 C? Explique los resultados en funcin a la fotosntesis y la
respiracin.
Ejercicio 2
El propsito de este ejercicio es mostrar que la fotosntesis depende de la luz y en particular
de algunas longitudes de onda. Adems mostrar que el gas producido es oxgeno y que este
es proporcional a la actividad fotosinttica desarrollada por la cantidad y calidad de luz.
Otro propsito adicional es ejercitarse con tcnicas analticas sencillas como la
determinacin de oxgeno disuelto en agua.
El mtodo de Wrinkler que aqu realizaremos se utiliza con mucha frecuencia para conocer
la concentracin de oxgeno libre presente en una muestra de agua, y por tanto disponible
para ser dispuesto por los diferentes organismos vivos en sus procesos metablicos. La
prueba es til para monitorear las condiciones de oxigenacin de diferentes cuerpos de agua
y sirve a la vez como un indicador de contaminacin.

Material Biolgico
50 g de plantas frescas de Elodea por equipo
Material por grupo
1balanza granataria
Material (Por equipo)
5 matraces Erlenmeyer de 250 ml 5 tapones de hule del No. 6
Papel aluminio papel celofn transparente, rojo azul y verde
Materiales y soluciones para determinacin de oxgeno

5 Botellas de 100 ml 1 Pipeta graduada de 5 ml
1 Pipeta graduada de 10 ml 1 Propipeta
1 Bureta de 50 ml 1 Soporte para bureta
5 Matraces Erlenmeyer de 125 ml
1. Solucin de sulfato manganoso
2. Solucin yoduro-alcalino
3. Solucin indicadora de almidn
4. Solucin de tiosulfato de sodio (0.025 N)

Mtodo
a) Forre sendos matraces con el celofn y el aluminio.
b) Agregue 200ml de agua a cada uno de los matraces y coloque aproximadamente 10
g de Elodea en cada matraz.
c) Tpelos y pngalos al sol o al menos bajo luz intensa por un lapso de 2 horas
d) Al cabo del tiempo lleve los matraces sin agitar al laboratorio y haga la
determinacin de oxgeno disuelto en agua.
Determinacin de oxgeno disuelto en agua
1. Colocar la muestra de agua en las botellas, llenadas hasta rebosamiento, procurando no
burbujear la muestra.
2. Agregar 1 ml sulfato manganoso y 1 ml del reactivo yoduro-alcalino. Ambas adiciones
se deben hacer por debajo de la superficie del lquido.
3. Colocar el tapn, con cuidad para evitar burbujas dentro del frasco, y agitar por inversin
varias veces el frasco (aproximadamente por espacio de 20 segundos). Espere a que se
sedimente el precipitado hasta aproximadamente dos tercios de la altura del frasco.
4. Para realizar el anlisis de las muestras, destapar la botella y agregar 1 ml de cido
sulfrico concentrado, dejando que ste escurra por el cuello del frasco. Tapar y agitar hasta
homogenizacin (desaparece el precipitado).
5. Dejar reposar 5 minutos, tomar 50 ml y transferir a un matraz Erlenmeyer de 125 ml.
Adicionar 1 a 2 ml de solucin indicadora de almidn (se produce un color azul oscuro) y
titular con la solucin de tiosulfato de sodio 0.025 N (previamente colocada en la bureta de
50 ml) hasta un vire de color de azul intenso a transparente.
CLCULOS
La concentracin de Oxgeno disuelto se calcula con la siguiente ecuacin:
ppm (mg/L) OD = V
1
x N x Eq x 1000/V
2
Dnde:
V
1
= Volumen del tiosulfato de sodio en la titulacin.
N = Normalidad del tiosulfato de sodio (0.025)
Eq = Equivalente qumico del oxgeno (8)
1000 = factor de correccin
V
2
= Volumen de la muestra (ml)

Cuestionario
1) En qu color de filtro se produjo menor oxgeno y en cual mayor?
2) Explique las diferencias anteriores
3) Indique las reacciones que ocurren en el mtodo de Wrinkler para la determinacin de
oxgeno disuelto.

Bibliografa
APHA, AWWA, WPCF. 1994. Mtodos estndar para el examen de aguas y aguas de
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Azcn-Bieto J. Y Taln, M. 2003. Fundamentos de Fisiologa Vegetal. Ed. Interamericana-
McGraw-Hill. 1 ed., Espaa.
Cariou F., Charles M., Dewitz N., Furstoss H., Gallizia M., Krogmann S., Laville C., Noss
P., Salgueiro E., Scmitt F., Stephan V., Schott A. 2000. Sciences de la Vie et de la
Terre, Unite 3. La cellule chlorophyllienne et le dioxyde de carbone. Belin Editions,
Paris. pp. 202-203.
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Kesler S.E. y Ohmoto H. (ed.). 2006. Evolution of the early atmosphere, hydrosphere and
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Taiz D. and Zieger E, 2006. Plant Physiology. Sinauer Associates, Inc. Pub. USA. 764 pg.

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