Vous êtes sur la page 1sur 64

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS







Gua de Prcticas de laboratorio de


ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL II

Tercera Edicin

Recopilacin:
Dr. Wilson Parra
Dr. Ivn Tapia





Abril 2014
2




Contenido

1 ESPECTROSCOP A DE EMI SI ON I ............................................................................ 8
2 FOTOMETRI A DE EMI SI ON DE LLAMA I I ........................................................... 14
3 FOTOMETRI A DE EMI SI ON DE LLAMA I I I .......................................................... 18
4 ESPECTROFOTOMETRI A DE ABSORCI ON ATOMI CA ....................................... 22
5 ABSORCI N ATMI CA I I ......................................................................................... 27
6 ABSORCI N ATMI CA I I I ........................................................................................ 30
7 ESPECTROFOTOMETRI A I NFRARROJ A ............................................................... 32
8 ESPECTROFOTOMETRI A I NFRARROJ A I I ........................................................... 35
9 CONDUCTI METRI A I ................................................................................................. 38
10 CONDUCTI METRI A I I ................................................................................................ 42
11 POTENCI OMETRI A I .................................................................................................. 45
12 POTENCI OMETRI A I I ................................................................................................ 48
13 CROMATOGRAF A LQUI DA HPLC ........................................................................ 51
14 CROMATOGRAF A LQUI DA HPLC I I .................................................................... 54
15 CROMATOGRAF A DE GASES ................................................................................. 56
16 CROMATOGRAF A DE GASES I I ............................................................................. 58
17 ANEXOS ........................................................................................................................ 61

3

REGLAMENTO DE SEGURIDAD


Normas de laboratorio

Para el desarrollo y aprovechamiento del trabajo en el laboratorio de prcticas es importante tanto la
disciplina general como particular. Cada prctica tiene su instructivo completo en donde se
especifican objetivos, equipos, material de vidrio y algunos reactivos particulares. Este material no
debe mezclarse con el correspondiente a otra prctica. Por otra parte, cada alumno tendr un material
de uso individual, como gafas protectoras, pera de succin y material de grupo de trabajo como
lminas de aluminio, plstico de embalaje, papel filtro y otros que sern solicitados al inicio del ciclo
semestral.

Existe un material comn: bidones con agua destilada, reactivos qumicos en la estantera
correspondiente, pipetas, embudos, probetas, vidrios de reloj, varillas para agitar, esptulas,
balanzas, agitadores, algunos de los cuales sern entregados a un representante del grupo de trabajo
al inicio de la prctica. Se evitar dispersar este material por el laboratorio y, en lo referente al
material de vidrio, es preciso limpiarlo antes y despus de su utilizacin. Es de inters general
mantener el orden y la limpieza en los espacios fsicos individuales y comunes. As mismo habr
recipientes para recoger los distintos tipos de residuos generados. Al finalizar la prctica, debe
dejarse el material en las mismas condiciones como se lo recibi.

Es obligatorio cumplir con el horario de prcticas. Las sesiones de prcticas durarn tres horas y si el
estudiante debe salir por alguna razn deber solicitar permiso de ausencia al instructor o su
ayudante.

Seguridad en el laboratorio

El trabajo de laboratorio presenta caractersticas que lo diferencian de otras reas. En primer lugar, la
variedad de riesgos. Es frecuente encontrar en un laboratorio riesgos elctricos, de incendio,
biolgicos, de intoxicacin, etc. Dentro de este ltimo, la situacin es especialmente compleja por la
gran variedad de productos qumicos con los que se trabaja habitualmente. Adems, y sobre todo en
los cursos iniciales, la destreza de los alumnos en las tareas es escasa, lo que se traduce en
conductas y comportamientos de riesgo.


Conducta en el laboratorio

Existen tres reglas fundamentales para trabajar en el laboratorio: limpieza, seguridad y disciplina.
- Hay que trabajar siempre con mandil o ropa protectora apropiada y llevarla abotonada.
- Es preciso mantener el rea de trabajo ordenada y limpia.
- Los desperdicios slidos y lquidos hay que depositarlos en contenedores apropiados.
- Hay que leer detenidamente la etiqueta de los recipientes antes de usar su contenido.
- No se deben cambiar las etiquetas de los reactivos ni los recipientes con productos distintos a los
que indica dicha etiqueta.
- El almacenamiento de reactivos preparados en el laboratorio se llevar a cabo en recipientes
adecuados a su reactividad y sern debidamente etiquetados.
- Hay que evitar usar y almacenar excesivas cantidades de reactivos qumicos.
- Es muy importante no contaminar los reactivos de los botes con otros productos. No se debe
pipetear directamente de los mismos y en caso de slidos hay que usar esptulas recin limpias.
- No se deben calentar recipientes de vidrio aforados (pipetas, buretas, matraces aforados, etc.),
botellas pesadas ni recipientes hermticamente cerrados.
- No hay que ir con prisas. Es necesario leer cuidadosamente el instructivo antes de empezar los
experimentos y seguir los consejos del profesor.
- Se deben consultar las dudas existentes al profesor encargado o su ayudante y no al compaero.
- Al terminar el experimento, hay que limpiar el rea de trabajo, banquetas, balanzas, mesas,
campanas extractoras, etc.




4

Normas de seguridad para el trabajo en el laboratorio

- Hay que usar gafas de seguridad
- Hay que utilizar mascarilla de respiracin cuando se trabaje con sustancias voltiles o slidos en
forma de polvo.
- Hay que usar guantes de goma cuando se manejen sustancias potencialmente peligrosas al
contacto con la piel.
- No se deben llevar comidas ni bebidas al laboratorio.
- Esta prohibido fumar. Los cigarrillos son puntos de combustin incontrolados.
- No se deben llevar prendas d vestir sueltas y si se tiene el cabello largo deber estar recogido
hacia atrs.
- No se deben mantener mecheros encendidos cuando no se usan. Siempre que estn encendidos
deber permanecer una persona vigilndolos.
- No se debe trabajar con lquidos inflamables cerca de la llama de los mecheros.
- Hay que mantener los recipientes de los productos qumicos perfectamente tapados y ordenados.
- No se debe situar la cara cerca de los recipientes con lquidos voltiles.
- Nunca hay que probar el sabor ni el olor de productos y mezclas qumicas.
- Hay que usar aspiradores (peras de goma) para pipetear reactivos o disoluciones.
- Hay que utilizar la campana extractora de seguridad (sorbona9 para reacciones que involucran la
emisin de humos, vapores corrosivos o venosos.
- No se deben hacer en solitario trabajos experimentales que entraen el ms mnimo riesgo.
- Los experimentos que, debido a su largo duracin, han de continuar durante toda la noche sern
debidamente sealizados, indicando claramente en una nota su posible peligrosidad y el telfono
de contacto de la persona responsable.
- No se deben calentar recipientes de vidrio directamente a la llama, procurando elevar su
temperatura poco a poco. Hay que evitar colocar los recipientes que estn calientes junto a un
foco fro, puesto que el choque trmico podra romperlos.
- No se debe dirigir la boca de recipientes que se estn calentando o agitando hacia los
compaeros, con el fin de evitar proyecciones peligrosas.

Normas de seguridad contra incendios

Precauciones generales

- Esta prohibido fumar en el laboratorio.
- No hay que mantener mecheros encendidos sin usarlos.
- No se debe trabajar con lquidos inflamables cerca de la llama de los mecheros.
- Se ha de conocer perfectamente la inflamabilidad de los reactivos con que se trabaja.
- No se deben sobrecargar los puntos de suministro elctrico.
- En los experimentos que sean potencialmente peligrosos de provocar incendios, se extremarn
las precauciones anteriores.
- Hay que seguir estrictamente las normas de evacuacin en los simulacros de incendios.
- Se debe conocer perfectamente la ruta de evacuacin a seguir en caso de incendio.
- Hay que conocer la localizacin exacta de los medios de extincin existente (mangueras,
extintores y mantas).

Lucha contra el fuego

- No se deben correr riesgos personales.
- En caso de producirse un conato de incendio, es necesario procurar no perder la calma apagando
el fuego con el equipo de lucha contra incendios ms adecuado que se disponga.
- Hay que cerrar todas las puertas y ventanas, eliminando las corrientes de aire, para evitar el
aporte de oxgeno a la zona de combustin.
- Si el fuego es tan serio como para requerir ms de un extintor o, en el caso se estime que esta
fuera de control, hay que hacer sonar la alarma de incendios, advertir a las personas ms
cercanas de la necesaria evacuacin y llamar a los bomberos dando la posicin exacta del fuego.




5


Evacuacin

- Cuando suene la alarma hay que evacuar inmediatamente el laboratorio.
- La evacuacin debe ser ordenada y sin prisas.
- Todos los responsables del instrumental abandonaran el edificio tras comprobar que todos los
aparatos estn apagados.
- Antes de abandonar el edificio hay que apagar los mecheros bunsen, cortar el suministro general
de gases (cerrar vlvulas de los tanques), cerrar los grifos de agua y desconectar los equipos
elctricos, siempre y cuando lo permitan las condiciones del incendio.
- Los profesores responsables de las prcticas debern comprobar que no se ha quedado ningn
alumno y que todos los aparatos estn desconectados.
- Como prevencin todos los pasillos y salidas deben estar libres de obstrucciones. Todas las
puertas de los laboratorios deben estar siempre desbloqueadas.

Algunos percances usuales y su tratamiento

En el laboratorio debe existir un botiqun provisto de un material mnimo, como algodn, gasas,
tijeras, esparadrapo, yodo y alcohol sanitario, agua oxigenada, crema para quemaduras, bicarbonato
sdico, analgsicos, etc.

Ingestin de sustancias:

Es necesario conseguir la mayor informacin posible sobre el producto ingerido y trasladar
inmediatamente a la persona intoxicada a un centro sanitario. En caso de dudas de la peligrosidad de
la sustancia, se puede pedir informacin al Centro de Informacin de Medicamentos y Txicos
CIMET (2500-535).

Lesiones superficiales:

En general, hay que proceder al lavado con agua abundante, salvo si la lesin se ha producido por
cido sulfrico. En este caso se neutraliza con agua jabonosa y se aplica sustancias oleosas. En
particular, para cidos fuertes hay que lavar abundantemente con agua bicarbonatada y para bases
fuertes como sosa castica hay que lavar abundantemente con agua acidulada o vinagre.

En caso de cortaduras superficiales, lavar con abundante agua y desinfectar con un antisptico y
aplicar presin con una gasa estril para detener el sangrado, realizar un vendaje en la zona
afectada.

En caso de quemaduras, aplicar crema para quemaduras o cubrir con jelonet al rea afectada, y
sobre este colocar una gasa y vendar apropiadamente.





















6



PLAN DIDACTICO DE ESTUDIOS


MTODOS DE CALIBRACIN Y ESTANDARIZACIN

Calibracin de las seales
Mtodos de estandarizacin
Reactivos usados como patrn
Estandarizacin con un punto o varios puntos
Patrones externos
Adicin de patrn
Patrones internos
Curvas de calibracin


ESPECTROSCOPIA ATOMICA

Introduccin
Propiedades generales de la radiacin electromagntica
Propiedades ondulatorias de la radiacin electromagntica
El espectro electromagntico
Espectros pticos atmicos
Diagramas de niveles de energa
Espectros de emisin atmica
Espectros de fluorescencia atmica
Anchuras de las lneas atmicas
Ensanchamiento de lnea por efecto de incertidumbre
Ensanchamiento por efecto Doopler
Ensanchamiento por presin
Efecto de la temperatura en los espectros atmicos
Espectros de bandas y continuos
Mtodos de atomizacin
Mtodos de introduccin de la muestra
Instrumentos

ESPECTROMETRIA DE ABSORCION ATOMICA

Introduccin
Tcnicas de atomizacin de la muestra
Instrumentacin para la absorcin atmica
Tcnicas analticas de absorcin atmica
Ejercicios de aplicacin

ESPECTROMETRA DE ABSORCION EN EL INFRARROJO

Introduccin
Teora de la espectrometra de absorcin en el infrarrojo
Cambios en el dipolo durante las vibraciones y rotaciones
Transiciones rotacionales
Transiciones vibracionales/rotacionales
Tipos de vibraciones moleculares
Modelo mecnico de la vibracin de tensin de una molcula diatmica
Energa potencial de un oscilador armnico
Frecuencia de vibracin
Vibraciones moleculares
Tratamiento cuntico de las vibraciones
Modos de vibracin



7

INSTRUMENTOS DE INFRARROJO

Fuentes y detectores de radiacin en el infrarrojo
Instrumentos dispersivos
Instrumentos no dispersivos
Espectrmetros de trasformadas de Fourier
Ejercicios de aplicacin

APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRIA EN EL INFRARROJO

Manipulacin de la muestra
Anlisis cualitativo
Aplicaciones cuantitativas

METODOS CONDUCTIMETRICOS

Introduccin
Conductancia electroltica
Titulaciones conductimtricas
Aplicaciones de las medidas de conductancia directas
Ejercicios de aplicacin

METODOS POTENCIOMETRICOS

Introduccin
Celdas electroqumicas
Conduccin en una celda
Transferencia de masa en celdas
Celdas galvnicas y electrolticas
nodos y ctodos
Celdas sin uniones liquidas
Representacin esquemtica de las celdas
Potenciales en celdas electroanalticas
Dinmica de los potenciales de celdas
Potenciales de unin liquida
Potenciales de electrodo
Electrodos de referencia
Electrodo de calomelanos
Electrodos de plata/cloruro de plata
Electrodos indicadores metlicos
Electrodos indicadores de membrana
Potencial de electrodo
Medida de los potenciales de electrodo
Potenciales de celda
Corrientes en celdas electroqumicas
Ejercicios de aplicacin

METODOS DE SEPARACION

Introduccin a las separaciones cromatogrficas
Clasificacin de los mtodos cromatogrficos
Cromatografa de elucin en columna
Velocidades de migracin de los solutos
Ensanchamiento de banda y eficacia de la columna
Variables crticas que influyen en el ensanchamiento de banda
Optimizacin de la eficacia de la columna
Aplicaciones de la cromatografa
Cromatografa de lquidos de alta eficacia
Cromatografa de gases
Ejercicios de aplicacin

8

_______________________________________________________________Prctica N:

1 ESPECTROSCOPA DE EMISION I

1.1 OBJ ETIVOS

- Examinar y operar el espectroscopio de Bunsen.
- Observar espectros continuos y espectros de lneas.
- Manejar tablas de informacin espectroscpica.
- Conocer y manejar un espectrofotmetro de emisin
- Analizar la concentracin de Na y K en varias muestras.

1.2 TEORIA

1.2.1 Fundamento

Los elementos qumicos tienen la propiedad de emitir espectros de lneas
caractersticas cuando se someten a diferentes formas de excitacin (llama,
arco, chispa, descarga). Estas lneas de emisin son tiles para fines analticos
ya que a medida que aumenta la concentracin de dichos elementos las lneas
de emisin tambin aumentan.
Para determinar la concentracin de un analito en particular es necesario
mtodos de estandarizacin con patrones. El mtodo de estandarizacin ms
comn utiliza varios patrones externos que se analizan independientemente de
la muestra, la intensidad de emisin es proporcional a la concentracin, por lo
tanto se pueden construir curvas de calibracin para estos elementos como E
vs C.

1.2.2 Consulta

- Fundamento de la emisin atmica.
- Espectros de bandas, continuos y discretos.
- Tipos de compuestos qumicos que forman las diferentes clases de espectros.
- Valores normales de los principales cationes en el agua potable.
- Limitaciones de las mediciones cuantitativas por fotometra de emisin de llama.

1.3 METODOLOGA

1.3.1 Materiales y reactivos

- Espectroscopio de Bunsen
- Espectrofotmetro de emisin atmica (Flapho 4 PerkinElmer AA200)
- Lmpara de sodio
- Lmpara de Tungsteno
- Lmpara fluorescente
- Soluciones de metales (Sr, Li, K, Ba, Ca).
- Soluciones patrn de Na y K
- Agua tipo I
- Balones volumtricos
- Tubos Nessler

1.3.2 Procedimiento

Parte A
- Observar el espectroscopio de Bunsen, examinar sus partes y su funcionamiento.
9

- Encender la lmpara de sodio y situarla frente a la rendija de entrada del espectroscopio.
Buscar la lnea amarilla intensa que debe encontrarse alrededor de los 590 nm. Ubicar la
lnea en el centro del ocular y determinar si en la escala de longitudes de onda, se marcan
los 589nm, si no coincide la longitud de onda entonces el aparato se halla descalibrado y
es necesario volverlo a calibrar segn indicaciones.
- Encender la lmpara de tungsteno y colocarla justo frente a la rendija de entrada del
espectroscopio. Observar y anotar las longitudes de onda de los diferentes colores que
forman la luz blanca. Hacer un grfico. Observar con la lmpara de mercurio en la rendija
lateral.
- Encender la lmpara fluorescente y ubicarla frente a la rendija de entrada, observar y
anotar.
- Introducir las diferentes soluciones en el quemador del fotmetro de llama y observar la
intensidad de las lneas de emisin del elemento qumico.

Parte B
- Soluciones stock: A partir de reactivos NaCl y KCl qumicamente puros, preparar soluciones
de 500 ppm de Na y 500 ppm de K (para todas stas soluciones utilizar agua tipo I)
- A partir de la solucin stock preparar las soluciones de la siguiente tabla:
Tabla 1-1 Soluciones estndar de cloruro de sodio y cloruro de potasio
Na
+
(ppm) K
+
(ppm)
0.4 0.4
0.8 0.8
1.2 1.2
1.6 1.6
2.0 2.0

- Leer el porcentaje de Emisin, de cada estndar segn indicaciones del ayudante y
posteriormente leer los valores de emisin de cada muestra.

Muestras a analizar:
- Agua potable
- Agua mineral
- Agua envasada
- Agua destilada de gasolinera

- Con los valores de emisin obtenidos para los estndares preparar una curva de
calibracin (%E vs C) e interpolar el valor de las muestras.

1.4 TABLAS DE DATOS
1.4.1 Espectro contino de una lmpara de tungsteno.



4000 7500 ->
0
, A

COLOR
Rango de aprox.
Rojo
Anaranjado
Amarillo
Verde
Azul
Violeta
10


1.4.2 Espectro de lneas emitido por una lmpara de sodio.




Longitud de onda Color de lnea Intensidad (dbil; media; intensa)




1.4.3 Espectro de una lmpara fluorescente.




Longitud de onda Color de lnea Intensidad (dbil; media; intensa)




1.4.4 Espectro de la lmpara de mercurio.




Longitud de onda Color de lnea Intensidad (dbil; media; intensa)




1.4.5 Espectros de lneas de los varios elementos qumicos.




Elemento Longitud de onda Color de lnea Intensidad (dbil; media; intensa)





Tabla 1-2 Valores de emisin de soluciones estndar de sodio
St.
Concentracin
(ppm)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 0.4
1 0.8
2 1.2
3 1.6
4 2.0
Muestra

Para encontrar las emisiones corregidas, aplicar la ecuacin de regresin
lineal

11



Tabla 1-3 Valores de emisin de soluciones estndar de potasio

St.
Concentracin
(ppm)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 0.0
1 0.4
2 0.8
3 1.2
4 1.6
5 2.0
Muestra
Para encontrar las emisiones corregidas, aplicar la ecuacin de regresin
lineal

1.5 CLCULOS Y RESULTADOS

1.5.1 Determinacin de Na
+
y K
+
por el mtodo de curva de calibracin.

- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica (S), que en
este caso ser la emisin, versus concentracin de analito acorde a la forma y = a + bx,
determinar la sensibilidad de calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:


S = S
0
+ k
s
C

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
sodio y potasio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) del mtodo para cada analito.





- Reportar los resultados de concentracin de sodio y potasio en las unidades que se
indican en la siguiente tabla:

12


Tabla 1-4 Concentracin de Na y K en las muestras

Agua potable Agua mineral Agua envasada
Agua
destilada
ppm Na

%P/V Na
meq/10ml Na
Kg/m
3
Na

ppm NaCl
%P/V NaCl

meq/10ml NaCl
Kg/m
3
NaCl

ppm Na
2
SO
4

%P/V Na
2
SO
4

meq/10ml Na
2
SO
4


Kg/m
3
Na
2
SO
4

ppm K

%P/V K
meq/10ml K

Kg/m
3
K
ppm KCl
%P/V KCl

meq/10ml KCl
Kg/m
3
KCl

ppm K
2
SO
4

%P/V K
2
SO
4


meq/10ml K
2
SO
4

Kg/m
3
K
2
SO
4




1.6 CUESTIONARIO


1.6.1 Consulte las tablas e incluya un cuadro con las lneas de emisin ms intensas
de los elementos analizados.


1.6.2 Haga un diagrama de los niveles orbitales del sodio que explique el origen de
sus principales lneas de emisin.


1.6.3 Para cul de los dos elementos es mejor el mtodo y por qu?



13


1.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


1.8 BIBLIOGRAFA

[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 390392.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
227243.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 219223.
[4]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis. Continental.
Mxico. p. 383387.
[5]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin.Harla. Mxico. p. 260261, 502
506.
[6]. MELOAN, C. y KISER, R. (1973). Problemas y experimentos en Anlisis Instrumental. Reverte.
Mxico. p. 6567.
[7]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico. p. 166
171.


14

Prctica N:

2 FOTOMETRIA DE EMISION DE LLAMA II


2.1 OBJ ETIVOS

- Determinar potasio en agua potable por el mediante una curva de calibracin estndar.
- Determinar potasio en agua potable por el mtodo de adicin de estndar a volumen
constante.
- Comparar los resultados obtenidos por los dos mtodos.


2.2 TEORIA

2.2.1 Fundamento

Las seales analticas pueden ser medidas utilizando equipos e instrumentos que
hayan sido calibrados de tal forma que se eliminen los errores sistemticos. Cuando la
composicin de una muestra es desconocida o compleja, se afecta su seal analtica
por los otros componentes de la muestra producindose el llamado efecto de matriz,
cuando ste es considerable debido a la complejidad de la muestra, puede emplearse
el mtodo de adicin de estndar.

En el mtodo de la adicin de patrn o estndar se aaden cantidades conocidas de
una solucin estndar a la muestra problema cuyo analito se desea determinar, como
en el caso de las curvas de calibracin con patrones externos, el mtodo requiere una
respuesta lineal de la seal analtica frente a su concentracin. La adicin de estndar a
volumen constante emplea varias alcuotas iguales de patrn de diferentes
concentraciones.

2.2.2 Consulta

- Tipos de llamas utilizados en la espectroscopa atmica
- Atomizadores de llama
- Diseo de los fotmetros de emisin
- Obtencin de curvas de calibrado por los mtodos de estndar externo e interno.


2.3 METODOLOGA

2.3.1 Materiales y reactivos

Espectrofotmetro de emisin atmica Perkin Elmer AA200
Compresor de aire
Cilindro de gas butano-propano
Cilindro de Gas de acetileno grado extra puro para AA
Cilindro de gas de xido Nitroso grado extra puro para AA
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Bureta
Balones aforados
Pipetas
KCl
Agua tipo I
15


2.3.2 Procedimiento

- A partir de reactivo KCl qumicamente puro, preparar 100 ml de solucin stock de 500 ppm
de K
+
.
- A partir de la solucin stock preparar las siguientes soluciones de K
+
: 0.4, 0.8, 1.2, 1.6 y
2.0 ppm.
- Ajustar el monocromador del equipo a una longitud de onda de 766.5 nm
- Leer el porcentaje de Emisin, y posteriormente leer los valores de emisin de las muestras
de agua.
- Con los valores obtenidos de emisin de los estndares preparar una curva de calibracin e
interpolar el valor de las muestras.
- Para el mtodo de adicin estndar, en un juego de matraces volumtricos o tubos Nessler
preparar la serie de estndares indicados en la tabla 2 - 2

2.4 TABLAS DE DATOS

Tabla 2-1 Valores de emisin de soluciones de Potasio mediante mtodo de
curva de calibrado
St.
Concentracin
(ppm)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 0.0
1 0.4
2 0.8
3 1.2
4 1.6
5 2.0
Muestra

Tabla 2-2 Valores de emisin de soluciones de potasio obtenidos por el
mtodo de la adicin del estndar
St.
Muestra
(ml)
Volumen aadido
(vol. Final 25ml)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 10 + 15ml del estndar de 0.0 ppm
1 10 + 15ml del estndar de 0.4 ppm
2 10 + 15ml del estndar de 0.8 ppm
3 10 + 15ml del estndar de 1.2 ppm
4 10 + 15ml del estndar de 1.6 ppm
5 10 + 15ml del estndar de 2.0 ppm


2.5 CALCULOS Y RESULTADOS

2.5.1 Determinacin de K
+
por el mtodo de curva de calibracin.

- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica (S), que en
este caso ser la emisin, versus concentracin de analito acorde a la forma y = a + bx,
determinar la sensibilidad de calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:


S = S
0
+ k
s
C

16

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
potasio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) del mtodo





2.5.2 Clculo de la concentracin de K
+
por el mtodo de adicin del estndar.

- Para el clculo por el segundo mtodo realizar un grfico que relacione la seal analtica
(S) con la concentracin de estndar aadido (C).
- Obtener la recta de mejor ajuste tambin de la forma y = a + bx y determinar los valores de
la pendiente (b) y ordenada (a).
- Con el volumen de la muestra (V
x
), los valores de las constantes a y b y el volumen del
estndar (V
s
), determinar la concentracin de sodio en la muestra, la seal analtica (S) en
este caso tambin ser la emisin de la muestra.







2.5.3 Comparacin de mtodos

- Sobre la base de los resultados indicar cul mtodo es el de mayor exactitud y por qu.


17


2.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


2.7 BIBLIOGRAFA

[1]. HARRIS, DANIEL (2007). Anlisis Qumico Cuantitativo 3. edicin. Editorial Revert, S.A. p. 80
98.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
187189, 241245.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 1619, 222225.


18

Prctica N:


3 FOTOMETRIA DE EMISION DE LLAMA III


3.1 OBJ ETIVOS

- Determinar sodio en agua potable por el mediante una curva de calibracin estndar
- Determinar sodio en agua potable por el mtodo de adicin de estndar a concentracin
constante.
- Comparar los resultados obtenidos por los dos mtodos.


3.2 TEORIA

3.2.1 Fundamento


Se pueden producir diferencias significativas en los resultados obtenidos en las
determinaciones de una sustancia utilizando diferentes mtodos de trabajo. El mtodo
de la adicin de estndar es un tipo de estandarizacin, en el cual, se aaden
cantidades de una disolucin patrn a alcuotas de la muestra. Para reducir el efecto
matriz, la forma ms comn de aplicar este mtodo implica la adicin de diferentes
volmenes de una disolucin patrn de concentracin conocida a varias alcuotas de la
muestra del mismo tamao.


3.2.2 Consulta

- Tipos de llamas utilizados en la espectroscopa atmica
- Atomizadores de llama
- Diseo de los fotmetros de emisin


3.3 METODOLOGA


3.3.1 Materiales y reactivos

Espectrofotmetro de emisin atmica Perkin Elmer AA200
Compresor de aire
Cilindro de gas butano-propano
Cilindro de Gas de acetileno grado extra puro para AA
Cilindro de gas de xido Nitroso grado extra puro para AA
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Bureta
Balones aforados
Pipetas
NaCl
Agua tipo I


19

3.3.2 Procedimiento

- A partir de reactivo NaCl qumicamente puro, preparar 100.00 ml de solucin madre de 500
ppm de Na
+
.
- Tomar una muestra de agua y dependiendo de la cantidad de sodio presente realizar las
diluciones respectivas, en muestras de agua embotellada se recomienda realizar una
dilucin 1:10 para el anlisis.
- A partir de la solucin madre preparar una solucin stock de 10 ppm de Na
+

- Ajustar el monocromador a una longitud de onda de 589.6 nm y leer el porcentaje de
Emisin, posteriormente leer el valor de emisin de la muestra de agua.
- Con los valores obtenidos de emisin de los estndares preparar una curva de calibracin e
interpolar el valor de la muestra de agua.
- Para el mtodo de adicin estndar, en un juego de matraces volumtricos o tubos Nessler
preparar una solucin de 10 ppm de Na
+
y de sta aadir 4.00, 8.00, 12.00, 16.00 y 20.00
mL de estndar a 10.00 mL de muestra de agua diluida y aforar a 100.00 mL.



3.4 TABLAS DE DATOS

Tabla 3-1 Valores de emisin de soluciones de sodio mediante mtodo de
curva de calibracin
St.
Concentracin
(ppm)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 0.0
1 0.4
2 0.8
3 1.2
4 1.6
5 2.0
Muestra

Tabla 3-2 Valores de emisin de soluciones de sodio obtenidos por el mtodo
de la adicin del estndar
St.
Muestra
(mL)
Volumen de Na
+

aadido
(mL)
Volumen
final
(mL)
Emisin
(leda)
Emisin
(ajustada)
0 10.00 0.00 100.00
1 10.00 4.00 100.00
2 10.00 8.00 100.00
3 10.00 12.00 100.00
4 10.00 16.00 100.00
5 10.00 20.00 100.00


3.5 CALCULOS Y RESULTADOS

3.5.1 Determinacin de Na
+
por el mtodo de curva de calibracin.

- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica (emisin)
versus concentracin de analito acorde a la forma y = a + bx, determinar la sensibilidad de
calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:
20



S = S
0
+ k
s
C

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
sodio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) del mtodo





3.5.2 Clculo de la concentracin de Na
+
por el mtodo de adicin del estndar.

- Para el clculo por el segundo mtodo realizar un grfico que relacione la seal analtica
(S) con el volumen de estndar aadido (V).
- Obtener la recta de mejor ajuste tambin de la forma y = a + bx y determinar los valores de
la pendiente (b) y ordenada (a).
- Con el volumen de la muestra (V
x
), los valores de las constantes a y b y la concentracin
del estndar (C
s
), determinar la concentracin de sodio en la muestra, la seal analtica (S)
en este caso tambin ser la emisin de la muestra.







3.5.3 Comparacin de mtodos

- Cul mtodo es el de mayor exactitud y por qu?


21


3.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


3.7 BIBLIOGRAFA

[1]. HARRIS, DANIEL (2007). Anlisis Qumico Cuantitativo 3 edicin. Editorial Revert, S.A. p. 80
98.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
187189, 241245.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 1619, 222225.



22

Prctica N:

4 ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION ATOMICA


4.1 OBJ ETIVOS

- Examinar y operar el espectrofotmetro de Absorcin Atmica PERKIN ELMER modelo
AANALYST1200 y sus correspondientes accesorios.


4.2 TEORIA

4.2.1 Fundamento

Existe una relacin lineal entre la absorcin de la radiacin por los tomos en el
estado fundamental que se encuentran en una llama y la concentracin de los
mismos. Por medio de las curvas de calibracin A vs. C es posible determinar la
concentracin de iones metlicos en cualquier muestra.

4.2.2 Consulta

- Espectrofotometra de Absorcin Atmica
- Relacin entre la Absorcin de la radiacin y la concentracin de los metales en una llama.
- Diseo y funcionamiento de los instrumentos

Tabla 4-1 principales lneas de emisin del cobre

(nm)
Rendija espectral
(nm)
Rango ptimo de Trabajo
(mg/ l)
Sensibilidad Tpica
(mg/ l)
324,7 0,2 2 8 0,04
327,4 0,2 6 24 0,14
217,9 0,2 15 60 0,33
218,2 0,2 10 80 0,44
222,6 0,1 70 280 1,5
249,2 0,5 200 800 4,9
244,2 1,0 500 2000 11,2


CONDICIONES DE TRABAJO:

1
= 324.75nm
Rendija mecnica: 0,10 mm
Rendija espectral: 0,15 mm
Corriente lmpara: 5mA Tres Pasos
Filtros : ninguno
Llama : C
2
H
2
-Aire
Caracterstica de llama: azul





23

4.3 METODOLOGA

4.3.1 Materiales y reactivos

- Espectrofotmetro de Absorcin Atmica Perkin Elmer
- Segn instrucciones del mtodo normalizado


4.3.2 Procedimiento

PROTOCOLO DE OPERACIN DEL ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCION ATOMICA
MARCA PERKIN ELMER AAnalyst 200

1. Revisar purga de compresor de aire, verificar que est cerrado.
2. Leer el manmetro del compresor de aire, si la presin es inferior a 10 psi se encender
automticamente al momento de abrir la llave del acetileno.
3. Conectar el equipo y el compresor al estabilizador de voltaje (cortapicos o UPS), que
debe estar conectado a la red elctrica.
4. Encender el estabilizador.
5. Abrimos la llave del tanque de acetileno.
6. Abrir la compuerta del panel de control.
7. Buscar el botn de encendido (power 0 / 1), que se encuentra en la parte inferior
izquierda. Esperar 5 minutos aproximadamente hasta que inicie el equipo.
8. Se desplegar una ventana de dialogo solicitando elegir la tcnica a usar, seleccionar
llama y activar el botn de detalles y desplegar la pantalla de diagnstico, verificar que
todos los parmetros estn en OK excepto el de la presin de N2O y C2H2, pulsar el
botn de aceptar, se cerrara la ventana de diagnstico.
9. En la pantalla de inicio pulsar aceptar.
10. Instalar la lmpara de ctodo hueco, (si se usa de otra marca varian usar el adaptador
correspondiente) introducir la lmpara en el socket correspondiente haciendo coincidir
el plug de energia.
11. Si se usa adaptador verificar que el adaptado de vidrio tubular est completamente
introducido. Conectar el plug de la lmpara.
12. Con el lpiz ptico de color azul, desplegar en la pantalla la interfaz de lmpara.
13. Con el lpiz ptico pulsar el botn, instalar lmparas, en la ventana desplegada. En
lmparas Perkin Elmer el equipo reconocer automticamente el elemento, tipo de
lmpara y corriente. En lmparas Varian verificar en la ficha tcnica de la lmpara la
corriente recomendada. Pulsar en el espacio de elemento y seleccionar el elemento a
usar, seleccionar aceptar. Pulsar el espacio correspondiente a corriente y desplegar la
ventana corriente, introducir la corriente recomendada, cuidando no sobrepasar el
mximo permitido y pulsar aceptar. En la ventana instalar lmparas activar la lmpara
seleccionada y pulsar aceptar. Los parmetros de longitud de onda y ranura quedaran
automticamente seleccionados por defecto, si se necesita cambiar estos parmetros
desplegar las ventanas correspondientes.
14. Configurar la intensidad de seal de la lmpara moviendo las perillas blancas del panel
de control hasta encontrar la mxima intensidad de seal. Una vez terminado este
proceso ir a la siguiente interface.
15. Con el lpiz ptico pulse el botn configurar instrumento, el equipo inmediatamente
emitir un ruido indicndonos esto que empieza a mover el monocromador para
establecer las condiciones antes sealadas de longitud de onda, ancho de banda,
elemento elegido e intensidad de la corriente de la lmpara.
16. Hasta que el equipo configure las condiciones espectrofotomtricas de anlisis,
pulsamos el botn de la parte inferior, Parmetros, en la cual observaremos dos
botones ms, Espectrofotmetro y Calibracin, para lo cual pulsaremos primero
calibracin y en cada una de las celdas que aparecern se introducir las
concentraciones exactas de los estndares tan solo, no del blanco ya que el blanco se
24

lo analiza en la botn de Analizar.
17. Con el lpiz ptico pulsamos en el botn de Llama. Fijndo los parmetros de
velocidad de flujo de los gases de acuerdo a la tcnica usada. En esta interfaz
verificamos los principales parmetros de anlisis, pulsando el botn Interbloqueos, se
desplegara una ventana indicndonos el estado de cada uno, si todos los parmetros
de anlisis de nuestro inters se encuentran marcados con visto, pulsamos aceptar, de
lo contrario, solucionamos el parmetro de anlisis que este bloqueado y pulsamos
actualizar, recuerde que estos parmetros corresponden a sensores que tiene el equipo
en cada punto crtico. Luego de la verificacin, encienda el motor extractor de gases
que se encuentra al lado izquierdo del equipo, es un interruptor que se encuentra en la
pared, con el lpiz ptico pulse el botn de encendido que se encuentra junto al de
interbloqueos para encender el mechero.
18. Con el lpiz ptico pulse el botn de analizar y posterior a esto introduzca el capilar del
nebulizador en el blanco que se usar en la tcnica de anlisis, luego pulse con el lpiz
ptico el botn blanco, no retirar el baln del capilar hasta observar que en la esquina
superior derecha nos indique la finalizacin de la medicin una barra de color verde, de
igual forma se har con cada uno de los estndares, pulsando el botn de estndar y
finalmente el botn muestra, cuando se pulse el botn de muestra el equipo indicar la
concentracin de la muestra analizada en las unidad elegida en la programacin.
19. IMPORTANTE: Luego de terminar el anlisis, pulsar el botn Llama, inmediatamente
despus pulsar el botn de apagado que se encuentra junto al de interbloqueos para
apagar la llama.
Luego pulso el botn configurar instrumento y posteriormente pulso instalar lmparas
y apago la lmpara.
En seguida se abre la compuerta del panel de control, retiramos la lmpara del socket
con cuidado y buscamos el botn de encendido (power 0 / 1), que se encuentra en la
parte inferior izquierda y apagamos el equipo.
Finalmente cerramos la llave del tanque de acetileno y desconectamos el equipo de la
red elctrica.

4.4 TABLA DE DATOS

Tabla 4-2 Valores de absorcin atmica de varias soluciones estndar y
muestra
Estndar Concentracin Absorcin
0 0.0
1 2.0
2 4.0
3 6.0
4 8.0
Muestra


4.5 CALCULOS Y RESULTADOS


4.5.1 Calculo de la cantidad de reactivos y volmenes de solucin necesarios para
preparar las soluciones patrn y estndar de la curva de calibracin.

4.5.2 Ajuste de los datos experimentales obtenidos a rectas del tipo:

y = a + b x y = k x

(1) A = a + bC (2) A = k C

25

A = absorbancia atmica
C = concentracin
a, b, k = constantes



4.5.3 Valores ajuste de absorbancia utilizando las ecuaciones (1) y (2):

Cu g/ml 2 A.exp. A.ajust.(1) A.ajust.(2)


4.5.4 Determinacin de Cu
++
por el mtodo de curva de calibracin.

- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica (S), que para
este caso ser la absorbancia atmica, versus concentracin de analito segn el modelo
para recta y = a + bx, determinar la sensibilidad de calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:

S = S
0
+ k
s
C

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
sodio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) del mtodo.







4.6 CUESTIONARIO


4.6.1 Aplicaciones de la absorcin atmica, limitaciones, ventajas y desventajas sobre otros
mtodos


26


4.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

4.8 BIBLIOGRAFA

[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 392398.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
245268.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 227239.
[4]. VARIAN TECHTRON. Analytical Methods for flame Spectroscopy. p. 9/72.




27

Prctica N:

5 ABSORCIN ATMICA II

Anlisis de hierro en muestras de harina

5.1 OBJ ETIVOS:
- Aplicar una digestin cida en muestras de alimentos
- Cuantificar Fe, en muestras de harina

5.2 TEORIA
5.2.1
5.2.2 Fundamento:

La digestin hmeda se trata de una tcnica no de cuantificacin sino de
tratamiento de las muestras previo a su cuantificacin mediante un mtodo,
en este caso el mtodo de anlisis ser mediante AAS, por tanto los metales
que pueden ser analizados necesitan primero ser liberados de la matriz, por
ejemplo, si se desea analizar una muestra de harina, tejidos de plantas o
sangre humana, los metales presentes en dichas muestras deben ser
separados de la materia orgnica de la que forman parte, la digestin hmeda
o digestin cida hace que estos metales al reaccionar con cidos formen
sales totalmente solubles en agua, lo que hace que puedan extraerse del
medio en forma acuosa.

5.2.3 Consulta:

- Valores normales de hierro, calcio, magnesio, potasio, sodio, Cromo, Cobre,
Arsnico, Plomo, Mercurio en harinas.
- Concentraciones normales de manganeso, magnesio, hierro, potasio, sodio en
plantas
- Digestin hmeda, digestin seca, digestin por microondas.


5.3 METODOLOGA

5.3.1 Materiales y reactivos:

Espectrofotmetro de absorcin atmicaPerkinElmer AA200
Lmparas de ctodo hueco de varios elementos
Soluciones estndar de Fe
Pipetas volumtricas
Balones volumtricos
Vasos de precipitacin
Juego de Tubos Nessler
Equipo de reflujo
Papel filtro cuantitativo
Agua desionizada (Tipo I)
cido Clorhdrico p.a. 37%
cido ntrico 68% p.a.
cido Perclrico p.a.
5.3.2 Procedimiento:

- Tarar un crisol en estufa a 140C hasta peso constante, una vez tarado, preservar en
28

un desecador.
- Pesar en el crisol tarado con exactitud de +0.1 g alrededor de 2,5 g de muestra de
harina. En una sorbona carbonizar la muestra en el crisol a fuego directo, usando un
mechero, hasta que deje de salir humo.
- Las muestras carbonizadas llevar a calcinacin a temperatura de entre 500 600
o
C,
en mufla por 2 horas, hasta observar cenizas de color gris o ligeramente blanco,
caso contrario aadir de 3 a 5 gotas de cido ntrico concentrado, evaporar en la
sorbona y volver a calcinar por 30 minutos, luego dejar enfriar, pesar y anotar el
peso.
- Luego del proceso adecuado de calcinacin, en la sorbona y con el material
adecuado de proteccin, en el crisol aadir 1 mL de cido ntrico concentrado, 2 mL
de cido clorhdrico concentrado y 1 mL de agua destilada.
- Filtrar y aforar con agua destilada en un matraz volumtrico de 100 mL.
- Preparar una serie de estndares de acuerdo a las indicaciones del Analytical
Method for Flame Espectroscopy, usando soluciones stock de 1000 ppm.
- Fijar las condiciones espectrofotomtricas de anlisis en el equipo, para el hierro.
- Realizar la lectura de estndares y muestra.

5.4 CLCULOS Y RESULTADOS

5.4.1 Determinacin de Fe por el mtodo de curva de calibracin.

- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica (absorbancia)
versus concentracin de analito acorde a la forma y = a + bx, determinar la sensibilidad de
calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:

S = S
0
+ k
s
C

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
sodio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) y el lmite de cuantificacin (LQ) del mtodo






29


Tabla 20-1 Resultados para muestras de harina.





















5.5 DISCUSION Y CONCLUSIONES:
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________



5.6 BIBLIOGRAFA:

[1]. MTODOS ESTANDARIZADOS EPA, EPA 1999 (CD de aplicaciones de la
presente gua).
[2]. VARIAN TECHTRONIC, 1977, LIBRO DE APLICACIONES Y ESTNDARES
PARA ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORSIN ATMICA.
[3]. Perkin Elmer AAnalyst 1200 COOKBOOK (incluye en el software de manejo del
equipo)




Muestra:
(harina o planta)
RESULTADO:
mg.g
-1

g.kg
-1



Kg.T
-1



mg.ml
-1



%P/V


%P/P


Ppm
30

Prctica N:

6 ABSORCIN ATMICA III


USO DE LA CORRECIN DE BACKGROUND DE DEUTERIO EN EL ANLISIS DE ZINC

6.1 Objetivos:

- Determinar el efecto que se produce sobre la seal analtica al aplicar la correccin
de background.
- Determinar ventajas o desventajas del efecto de correccin de fondo.

6.2 Teora

6.2.1 Fundamento:

El deuterio es un elemento que emite radiacin electromagntica en todo el
espectro ultravioleta desde los 190 a los 380nm. La correccin de background
por deuterio permite obtener una mejor y ms real seal analtica debido a las
interferencias espectrales que puedan presentarse durante el anlisis y
dependiendo del analito que est en estudio.

6.2.2 Consulta:
- El efecto Ziemann
- Qu es la correccin de fondo o Background
- Anlisis donde se debe utilizar la correccin de fondo

6.3 Metodologa:
6.3.1 Materiales y reactivos:

Espectrofotmetro de absorcin atmica Perkin Elmer AAnalyst 1200
Lmpara de ctodo hueco de Zinc
Solucin estndar de 1000 mg/L de Zn
Matraces Erlenmeyers
Agua desionizada (tipo I)
Aire y acetileno grado analtico

6.3.2 Procedimiento:

- Optimizar y alinear el mechero de 10 cm para aire-acetileno
- Ir a modo AA en el equipo, colocar la lmpara de Zn y optimizarla con corriente y slit
adecuados y 213,9 nm, deje calentar la lmpara.
- Programar mtodo de Zn con tres rplicas por muestra y tres segundos de
integracin, ingresar concentracin de estndar de 1000 mg/L
- Ir al modo continuo del instrumento y encerar el equipo, LA LLAMA DEBE ESTAR
APAGADA, la absorbancia debe estar cerca de cero.
- Encender el browler y la llama con los flujos adecuados y SIN ASPIRAR NINGUNA
SOLUCIN registre el valor de absorbancia.
- Encerar el instrumento aspirando agua desionizada
- Aspirar el estndar de 1000 mg/L DE Zn, REGISTRAR EL VALOR DE
ABSORBANCIA.
31

- Ir a modo de anlisis y autoencerar, calibrar con el estndar y despus medir una
muestra, registrar la concentracin y absorbancia de la muestra.
- Apagar la llama.
- IR A MODO BG (BACKGROUND) en este punto nicamente debe estar encendida la
lmpara de deuterio, permita calentar la misma por cinco minutos.
- Autoencere el instrumento con la llama apagada, ENCIENDA LA LAMA Y
REGISTRE LA ABSORBANCIA.
- Encerar con la llama prendida, leer el estndar y REGISTRAR LA ABSORBANCIA.
- Aspire la muestra y REGISTRE LA ABSORBANCIA
- Apagar la llama.
- Preparar un mtodo de Zn en modo AA-BG, usando tres rplicas con tres segundos
de integracin, ingresar la concentracin del estndar de 1000 mg/L.
- Ir a modo continuo y encerar con la llama apagada, asegurarse que la absorbancia
est cerca de cero.
- Encender la llama de aire-acetileno y SIN ASPIRAR NINGUNA SOLUCIN
REGISTRE EL VALOR DE ABSORBANCIA.
- Encerar el instrumento con agua desionizada, aspirar luego el estndar de 1000
mg/L de Zn, REGISTRAR LA ABSORBANCIA.
- Ir al modo Anlisis del equipo, encerar con agua desionizada, calibrar con el
estndar y luego leer la muestra, REGISTRAR LOS VALORES DE ABSORBANCIA
Y CONCENTRACIN DE LA MUESTRA.
- Apagar la llama, purgar los gases, apagar las lmparas y apagar el equipo.

6.3.3 Clculos yresultados:

Tabla 21-1 Resultados de las mediciones

ABSORBACIA
MUESTRA
AA BG AA-BG
Lmpara de deuterio ---------------
Lmpara de Zn
Estndar de Zn
Muestra de Zn
Llama
Concentracin de la
muestra


6.4 Cuestionario:

[1]. Compare los valores de absorbancia de la muestra en los tres modos (AA, BG,
AA-BG) Cmo se relacionan entre ellos?
[2]. Por qu la llama sola produce una seal, cmo afectara esto en sus anlisis?
[3]. Por qu el estndar de Zn tiene valor cero en modo BG?
[4]. Cul es el mejor modo de operacin para el anlisis de una muestra
desconocida? (justifique)

6.5 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
Bibliografa:
Perkin Elmer, Mtodos de Anlisis
32

________________________________________________________________Prctica N

7 ESPECTROFOTOMETRIA INFRARROJA


7.1 OBJ ETIVOS

- Examinary operar el Espectrofotmetro de transformadas de FourierVarian 660
- Examinar el Espectrofotmetro infrarrojo dispersivoBeckman "IR 18-A"
- Calibrar el equipo
- Obtener espectros IR de substancias slidas en forma de pelcula.
- Obtener espectros de sustancias lquidas.
- Obtener espectros slidos en suspensin con nujol.


7.2 TEORIA

7.2.1 Fundamento

La espectroscopia IR es una tcnica analtica que permite fundamentalmente
realizar determinaciones cualitativas de compuestos principalmente orgnicos,
debido a las interacciones que se producen entre las radiacin electromagntica
de estas longitudes de onda y los principales enlaces atmicos.

7.2.2 Consulta

- Fundamento y aplicaciones de la absorcin IR.


7.3 METODOLOGA

7.3.1 Materiales y Reactivos

Espectrofotmetro FT-IR Varian 660 FT-IR Spectrometer
Mortero de gata
Celdas de NaCl
Frascos goteros
Cloranfenicol
Acetona anhidra
Poliestireno
Metanol
Nujol
Prensa para pastillas

7.3.2 Procedimiento

- Obtener el espectro IR de una pelcula de poliestireno, para la calibracin del
espectrofotmetro.

- Obtener los espectros IR de las diferentes sustancias para lo cual se debe seguir
cuidadosamente las instrucciones que se darn en el desarrollo de la prctica.




33


7.4 TABLA DE DATOS

Tabla 7-1Calibracin del instrumento: Espectro del poliestireno
Nmero
de pico

v tabulado, cm
-1

v exp, cm
-1

Diferencia
1
2
3
4
5
6
8
9
10

4000 - 2000cm
-1
( 10cm
-1
)*
2000 - 600cm
-1
( 5cm
-1
)*

*Variaciones que se pueden aceptar para concluir que el aparato est calibrado. Actualmente, el software
incluido en los equipos determina la autocalibracin del mismo y su estado de aprobacin o rechazo de
dicho procedimiento

7.5 CLCULOS Y RESULTADOS

7.5.1 Interpretacin de los espectros

- Espectro del poliestireno. (Incluir la frmula desarrollada del compuesto.
- Incluir en los siguientes cuadros los datos de las bandas ms importantes y caractersticas.

Compuesto:

Tabla 7-2Tipos de vibraciones moleculares asociadas a los grupos funcionales
N de
pico

v , cm
-1

Intensidad y forma de
la banda
Grupo de tomos
involucrados
Tipo de vibracin










- Espectro del poliestireno
- Espectro del nujol + cloranfenicol
- Espectro del metanol


34

7.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


7.7 BIBLIOGRAFA

[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 342344.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
296306.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 409412, 417419.
[4]. WINGROVE, A. y CARET, R. (1981). Qumica Orgnica.Harla. Mxico. p. 563571.
[5]. MERCK. Uvasol disolventes para espectroscopia. p. 12, 38, 90, 132, 170, 184.




























35

_________________________________________________________________Prctica N:

8 ESPECTROFOTOMETRIA INFRARROJA II


8.1 OBJ ETIVOS

- Obtener los espectros IR de sustancias slidas en forma de pastilla con KBr.
- Determinar cuantitativamente Ciclohexanona en octanol
- Familiarizarse con las determinaciones cuantitativas IR.


8.2 TEORIA

8.2.1 Fundamento

Se puede determinar cuantitativamente el contenido de una cetona disuelto en
un alcohol debido a la fuerte banda de absorcin del grupo carbonilo
aproximadamente a 1700cm
-1
, la cual es proporcional a la concentracin de la
cetona en la mezcla.


8.2.2 Consulta

- Diseo y funcionamiento de los equipos
- Mtodos de anlisis cuantitativo por IR.


8.3 METODOLOGA

8.3.1 Materiales y reactivos

Espectrofotmetro "Varian 660 IR FT-IR Spectrometer"
Celdas de KBr (para determinaciones cuantitativas)
Mortero de gata
Jeringuillas
Acetona anhidra
Guantes de latex
KBr
Sustancias slidas problema, cloranfenicol (anhidras)
Ciclohexanona
Octanol
Nujol
Prensa para pastillas
Esptulas

8.3.2 Procedimiento

8.3.2.1 MUESTRAS SOLI DAS

PREPARACIN DE LA PASTILLA DEKBr:

- Moler en un mortero de gata 1,0g de KBr hasta que sea impalpable al tacto
- Mezclar y moler ntimamente 200mg del KBr anterior con 1mg de la sustancia cuyo
espectro IR se va a obtener
36

- Pesar 200mg. de la mezcla anterior y obtener una pastilla en la prensa correspondiente;
siguiendo las instrucciones dadas en la prctica.


8.3.2.2 MUESTRAS LI QUI DAS

CURVA DE CALIBRACIN.

Tabla 28-1Curva de calibracin para ciclohexanona

Estndar
(ciclohexanona)
V (mL) cetona
V (mL)
octanol

A
0
1
2
3
4
Muestra

- Medir los volmenes de ciclohexanona indicados en la tabla.
- Aforar a 10,0 ml con octanol.
- Armar la celda para anlisis de lquidos, usando guantes de ltex y siguiendo las
instrucciones.
- Utilizando una celda sellada para determinaciones cuantitativas y con el espaciador
adecuado; obtener el espectro parcial desde 1900 hasta 1600 cm
-1
de todas las soluciones
y de la muestra problema.
- Obtener los valores de absorbancia para cada estndar y para la muestra utilizando el
mtodo de la lnea base.
- Graficar A vs. % V/V de Ciclohexanona e interpolar para la absorbancia de la muestra.

8.4 CALCULOS Y RESULTADOS

8.4.1 Clculo de los valores de absorbancia de las soluciones utilizando el mtodo de la
lnea base.

8.4.2 Clculo de la concentracin de la muestra por interpolacin grfica, matemtica y por
comparacin con el estndar ms cercano.

8.4.3 Interpretacin de los espectros obtenidos.


8.5 CUESTIONARIO

- Cmo determinara el contenido de alcohol disuelto en una cetona?

- Qu longitud de onda escogera y por qu?

- Realice una comparacin entre la sensibilidad de las determinaciones cuantitativas por IR,
fluorometra y UV/Vis.


37


8.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


8.7 BIBLIOGRAFA

[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 462-463.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p.
306323.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 419423.
[4]. WILLARD, H., MERRITT, L. y DEAN, J. (1981). Mtodos Instrumentales de Anlisis. Continental.
Mxico. p. 176-189.



























38


Prctica N:

9 CONDUCTIMETRIA I


9.1 OBJ ETIVOS

- Examinar el medidor de conductividad "Mettler Toledo"
- Determinar la calidad de diferentes tipos de aguas: destilada, desionizada, para bateras,
potable, etc.
- Determinar el contenido de NaCl ( KCl) en una muestra.


9.2 TEORIA

9.2.1 Fundamento

Las mediciones de la conductividad especfica en soluciones permiten
determinar la cantidad de iones en solucin. Son muy tiles tambin para
comprobar la calidad del agua destilada y para realizar determinaciones
cuantitativas de electrolitos en mezclas binarias.

9.2.2 Consulta

- Aplicaciones instrumentales de la conductividad limitaciones y ventajas sobre otros
mtodos
- Sensibilidad del mtodo comparada con otros ya estudiados (Colorimetra, Refractometra,
EEA, AAS, Fluorometra, etc.)
- Relacin de conductancia y de conductividad especfica con la concentracin.
- Ecuacin de Kohlrausch
- Diseo y funcionamiento de los instrumentos.


9.3 METODOLOGA


9.3.1 Materiales y reactivos

Medidor de conductividad, "METTLER TOLEDO"
Balanza Analtica
Vasos de precipitacin
Balones
Pipetas
Solucin Estndar de NaCl
Solucin 0.01 N KCl
Agua destilada
Muestras

39


9.3.2 Procedimiento

- Calibrar el equipo con una solucin estndar de KCl 0.01 N comparando con el valor dado
en tablas (tomar en cuenta la temperatura).

- Determinar la conductividad especfica en mS/cm o en S/cm segn convenga al caso
para cada tipo de agua, registrar el valor de temperatura medido por el equipo.

- Variacin de la conductividad especfica con la concentracin: Preparar las siguientes
soluciones estndar de NaCl en agua:

Tabla 9-1 Curva de preparacin de estndares
St.
M
NaCl
0 0,00
1 0,01
2 0,02
3 0,04
4 0,05

- Medir las conductividades especficas de cada solucin.
- Medir la conductividad de la muestra proporcionada por el laboratorio.
- Registrar el valor de la constante de celda (o) proporcionada por el fabricante.


9.4 TABLAS DE DATOS
Tabla 9-2 Valores de conductividad y resistencia de estndares y muestra de
NaCl
Estndar M
NaCl
Conductividad Especfica
(mS / cm. o S/cm)
Resistencia
Ohmios
o = , cm
-1

0 0,00
1 0,01
2 0,02
3 0,04
4 0,05
M


Tabla 9-3 Valores de conductividad especfica de varias muestras
Muestra
Conductividad especfica
(S/cm.)
T (C)
Agua Potable
Agua Destilada
Agua embotellada
Agua desionizada


40


9.5 CLCULOS Y RESULTADOS

9.5.1 Determinacin de NaCl por el mtodo de curva de calibracin.

- Expresar las concentraciones en moles por litro (M) y equivalentes por litro (N) y obtener
por medicin o clculo los resultados de la constante de celda (o), resistencia (R),
conductancia (L), conductividad especfica |L|, conductancia molar (A
m
) y conductancia
equivalente (A).




[]

[]



A
[]




- Realizar grficas de resistencia vs. concentracin, conductancia vs. concentracin,
conductividad especfica vs. concentracin, conductancia equivalente vs. raz cuadrada de
concentracin normal y, por medio de la ecuacin de Kohlrausch, extrapolar el valor de la
conductancia equivalente a dilucin infinita (A
0
).


- Por mnimos cuadrados determinar la recta de regresin de la seal analtica
(conductividad especfica) versus concentracin de analito acorde a la forma y = a + bx,
determinar la sensibilidad de calibrado (k
s
) y obtener la ecuacin:

S = S
0
+ k
s
C

- Con la curva de mejor ajuste interpolar de forma grfica y matemtica la concentracin de
sodio en la muestra de agua.



- Obtener la desviacin estndar de la correlacin (S
y/x
) y determinar el lmite de deteccin
(LD) del mtodo.




- Reportar los valores conductividad especfica y temperatura de muestras de agua potable,
destilada, embotellada y desionizada, comparar con los valores de norma.


41



9.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________


9.7 BIBLIOGRAFA

[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin.Harla. Mxico. p. 513521.
[2]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 240243.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D. (1987). Anlisis Instrumental 2da. Edicin. Interamericana. Mxico. p.
676680.
[4]. LEVINE, I.(1994). Fsico Qumica 3ra. Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 572579.


42


Prctica N:

10 CONDUCTIMETRIA II


10.1 OBJ ETIVOS

- Determinar los slidos totales en muestras (S, ms,ppm)
- Determinar el punto de equivalencia de soluciones de cido fuerte-base fuerte, acido dbil-base
fuerte, acido dbil-base fuerte

10.2 Fundamento

Las valoraciones conductimtricas se basan en la medida del cambio de la conductancia de una
disolucin a medida que se agrega el reactivo valorante. La conductancia de una disolucin
vara, entre otros factores, con el nmero, tamao y carga de los iones, por lo que iones
diferentes contribuirn en forma diferente a la conductancia de una disolucin. De esta manera,
durante una valoracin, la sustitucin de algunas especies inicas por otras producir un cambio
en la conductancia, el cual puede ser ventajosamente aprovechado para determinar el punto
final de una valoracin.
En las valoraciones conductimtricas, la conductancia de la disolucin a valorar se mide luego
de la adicin de cantidades determinas de reactivo valorante. Si se grafican los valores de
conductancia en funcin del volumen del valorante agregado, se obtendrn dos rectas de
pendientes diferentes, de cuya interseccin se podr obtener el punto final de una valoracin.


10.3 Consulta.
- Aplicaciones y fundamentos de las valoraciones conductimtrias
- Ejemplos de ensayos en los cuales s mejor utilizar valoraciones conductimtricas
- .
10.4 METODOLOGA

10.4.1 Materiales y reactivos

Medidor de conductividad, "METTLER TOLEDO"
Balanza Analtica
Vasos de precipitacin
Balones
Pipetas
Solucin Estndar de NaCl
Solucin 0,001 N de NaOH y HCl
Solucin 0,01 N KCl
Agua destilada
Muestras
43

10.4.2 Procedimiento


- Calibrar el equipo con una solucin estndar de kCl 0,01 comparando con el valor
dado en tablas (tomar en cuenta la temperatura).
- Preparar soluciones 0,001N de HCl y NaOH
- Determinarla conductividad especfica en mS/cm o en S/cm segn convenga al
caso para cada solucin, registrar el valor de temperatura medido por el equipo.
- Realizar una valoracin previa con fenolftalena.
- Valorar el HCl agregando poco a poco NaOH

10.4.3 TABLA DE DATOS

Tabla 10.1 Registro de valores de pH, primera y segunda derivada y
potencial elctrico de una valoracin conductimtrica

V (ml) NaOH
0.001 N
Conductividad






















10.5 CLCULOS Y RESULTADOS

- Realizar grficas de Conductividad Especfica vs. Volumen (ml de titulante) y extrapolar el
valor del volumen mediante el punto de corte de dos rectas.
- Calcular la concentracin de cido ctirico en una muestra de jugo comercial.



44

10.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________


10.7 BIBLIOGRAFA
[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin. Harla. Mxico. p. 513-521
[2]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 240-243
[3]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 676-680.




45


Prctica N:

11 POTENCIOMETRIA I


11.1 OBJ ETIVOS


- Examinar y operar diferentes potencimetros
- Preparar soluciones tampn y calibrar los instrumentos.
- Valorar potenciomtricamente una solucin problema.


11.2 TEORIA

11.2.1 Fundamento

La concentracin de los iones hidrgeno en solucin se puede medir en forma
muy rpida y precisa mediante un electrodo sensible de vidrio y un electrodo de
referencia, la diferencia de potencial que se produce es funcin de la
concentracin de los [H
+
] en solucin.

11.2.2 Consulta

- Precauciones y cuidados en el manejo de los electrodos.
- Ventajas y desventajas de los mtodos de valoracin potenciomtricos
- Diseo y funcionamiento de los instrumentos.


11.3 METODOLOGA


11.3.1 Materiales y reactivos

Potencimetros
Agitadores magnticos
Termmetro
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
ftalato cido de potasio
fosfato monobsico de potasio
sodio hidrgeno fosfato
H
2
O desionizada
NaOH 0,1 N
HCl 0,1 N
46


11.3.2 PROCEDIMIENTO

- Observar los instrumentos, sus partes, su funcionamiento.
- Examinar los electrodos y las precauciones necesarias para su funcionamiento.
- Preparar las soluciones tampn recomendadas para calibrar los medidores de pH. (pH =
4, 7 y 9). Incluir clculos.
- Realizar las lecturas de pH,mV y los resultados incluir en la tabla de datos.
- Graficar mV vs. pH de los datos de las tres soluciones estndar.
- Valorar potenciomtricamente la acidez de un jugo.
- Clculo grfico del punto final.


11.4 TABLA DE DATOS
Tabla 11-1 Registro de valores de pH, primera y segunda derivada y
potencial elctrico de una valoracin potenciomtrica
V (ml) NaOH
0.1 N
pH AV A pH A pH/AV A"A/AV" mV









































47


11.5 CLCULOS Y RESULTADOS
11.5.1 Calcular el porcentaje de cido ctrico de la muestra


Encontrar mediante las grficas de la primera y segunda derivada del pH vs volumen de
titulante el punto de equivalencia en la titulacin y determinar la concentracin de cido
ctrico en la muestra.




11.6 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________



11.7 BIBLIOGRAFA

[1]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin.Harla. Mxico. p. 529538.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 634635, 639651, 665668.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico. p. 447
457.



48

Prctica N:

12 POTENCIOMETRIA II


12.1 OBJ ETIVOS


- Examinar y operar diferentes potencimetros.
- Determinar la pureza del CuSO4, realizando una valoracin redox, por el mtodo de ion
selectivo.


12.2 TEORIA

12.2.1 Fundamento

6 4 2 3 2 2 2
2 2 2
2
2 2
4 4 2
O S Na NaI O S Na I
K I I Cu KI Cu
+ +
+ + +
+


12.2.2 Consulta

- Precauciones y cuidados en el manejo de los electrodos de ion selectivo
- Ventajas y desventajas de los mtodos de valoracin redox
- Diseo y funcionamiento de los instrumentos.


12.3 METODOLOGA


12.3.1 Materiales y reactivos

Potencimetros
Electrodo de ion selectivo, cobre
Electrodo de referencia
Agitadores magnticos
Balanza analtica
Vasos de precipitacin
Balones aforados
Pipetas
H
2
O desionizada
CuSO4 impuro (muestra)
KI
Na
2
S
2
O
3
0,1 N


49


12.4 PROCEDIMIENTO

- Observar los instrumentos, partes y funcionamiento.
- Examinar los electrodos usados para la valoracin redoxy las precauciones necesarias
para su funcionamiento.
- Se pesan con la precisin adecuada 5 g de CuSO
4
impuro, se disuelve y lleva a aforo con
agua destilada en un baln de 50 ml, de esta se toma una alcuota de 10 mL con una
pipeta volumtrica y se afora a 100 mL, Tomar 20 mL de esta solucin y aadir 10 mL de
agua destilada para su posterior valoracin con tiosulfato de sodio valorado, se aade
yoduro de potasio (aproximadamente 0.25g, hasta observar una coloracin marrn),
agitar para disolver y empezar inmediatamente la valoracin.
- Se realizar una primera valoracin haciendo incrementos de 1 ml de tiosulfato de sodio
hasta llegar a los 20 mL, esta ser una valoracin de prueba para observar el punto de
equivalencia, haciendo la grafica respectiva de potencial (mV) versus volumen de
titulante (mL).
- Se realizar una segunda valoracin, la cual se va a usar para los clculos respectivos,
haciendo los incrementos necesarios para poder determinar con mayor detalle el punto
de equivalencia, cerca de este (ya con la referencia de la titulacin anterior) realizar
incrementos pequeos de titulante. No olvidar colocar el KI en cada valoracin.
- Realizar las lecturas de volumen de titulante (V
titulante
) y potencial (mV) y los resultados
incluir en la tabla de datos.
- Graficar mV vs. V
titulante
(mL).
- Graficar mV/V vs. V
titulante
(mL) y determinar el punto de equivalencia
- Graficar mV/V vs. V
titulante
(mL), y determinar el puntol punto de equivalencia.

12.5 TABLA DE DATOS
Tabla 12-1 Registro de valores de pCu, primera y segunda derivada y
potencial elctrico de una valoracin potenciomtrica
V (mL)
Na
2
S
2
O
3
0,1 N

mV

E
o
(V)

E (V)

V (mL)

p
Cu


p
Cu
/V

p
Cu
/V

0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342


0,342



50

12.6 CLCULOS Y RESULTADOS
12.6.1 Calcular el porcentaje de cobre y sulfato de cobre en la muestra.

- Incluir un ejemplo de clculo del potencial de celda [E (V)], de cada proceso de la
valoracin redox, antes del punto de equivalencia, en el punto de equivalencia y despus
del punto de equivalencia.


12.7 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________

12.8 BIBLIOGRAFA

[4]. AYRES, G.(1970). Anlisis Qumico Cuantitativo 2da Edicin.Harla. Mxico. p. 529538.
[5]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta. Edicin.
Mc Graw Hill. Madrid. p. 634635, 639651, 665668.
[6]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico. p. 447
457.

























51

Prctica N:

13 CROMATOGRAFA LQUIDA HPLC

13.1 OBJ ETIVOS

- Conocer el mtodo de cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC)
- Estudiar las aplicaciones cuantitativas de los mtodos de HPLC
- Analizar una mezcla de vitaminas hidrosolubles y cido flico
- Determinar la concentracin de cido ascrbico en una forma farmacutica

13.2 TEORA

13.2.1 Fundamento

Se basa en los principios conocidos y estudiados en el mtodo clsico de la
cromatografa lquida en columna, para acelerar el procedimiento se requiere
de instrumentos complejos que mejoran tambin su eficacia. Por esta razn
se utiliza a veces el nombre de cromatografa lquida de alto rendimiento
(highperformance liquidchromatography).

13.2.2 Consulta

- Diseo y funcionamiento de un Cromatgrafo HPLC


13.3 METODOLOGA

13.3.1 Materiales y reactivos

Mortero
Baln aforado de 100ml
Filtro milipore
Jeringuilla hipodrmica de 50ml
Jeringuilla para HPLC
Matraces volumtricos de 500ml
Pipeta graduada de 1ml
Pipetas volumtricas de 25ml
Pipeta volumtrica de 5ml
Probeta de 100ml
Acido fosfrico 0.1% pH 2.2 (grado cromatogrfico)
PIC B6 (cido hexano sulfnico 20mM grado cromatogrfico)
Metanol 75:25 (grado cromatogrfico)
cido actico glacial (grado cromatogrfico)
Vitamina C (grado cromatogrfico)
Agua destilada

52

13.3.2 Procedimiento

13.3.2.1 PREPARACIN DE LA FASE MOVIL
Para preparar 300ml:
- Pesar 0.8470g de PIC B6
- Mezclar 0.23ml de cido fosfrico con 200ml de agua destilada, agregar el
PIC B6 y completar el volumen hasta 225ml. Para completar la fase mvil,
agregar metanol hasta completar 300ml de mezcla.

13.3.2.2 PREPARACIN DE LA SOLUCION DILUYENTE
Para preparar 500ml:
- Mezclar 470ml de agua destilada, 25ml de acetonitrilo y 5ml de cido actico
glacial.

13.3.2.3 PREPARACIN DEL ESTANDAR
- Clculo de la masa de estndar:
pt
m d
st
m
m m
m

=
m
s
: masa de estndar
m
d
: masa declarada de principio activo
m
m
: masa de muestra
m
pt
: peso promedio de las tabletas

- Pesar con exactitud de 0.1mg, la masa calculada de estandr y diluir con una
solucin diluyente en un baln aforado de 100ml. Agitar en vortex durante
diez minutos, filtrar en caso de ser necesario.

13.3.2.4 PREPARACIN DE LA MUESTRA
- Pesar 30 tabletas y calcular el peso promedio.
- Moler finamente y pesar con exactitud de 0.1mg, 0.1g de muestra.
- Diluir con solucin diluyente en un baln aforado de 100ml. Agitar en vortex
para asegurar una disolucin completa.


13.4 CALCULOS
13.4.1 Clculo de la concentracin de vitamina C
ST
M ST
M
A
A C
C

=
C
M
= concentracin de la muestra
C
ST
= concentracin del estndar
A
M
= rea del pico de la muestra
A
ST
= rea del estndar


53


13.5 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________

13.6 BIBLIOGRAFA
[1]. RUBINSON, K. (2001). Anlisis Instrumental. Prentice Hall. Madrid. p. 636670.
[2]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 730746.
[3]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 785-800.
[4]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc
Graw Hill. Mxico. p. 703715.







































54

Prctica N:

14 CROMATOGRAFA LQUIDA HPLC II

CUANTIFICACIN DE CLORAMFENICOL EN CPSULAS MEDIANTE HPLC


14.1 OBJ ETIVOS:

- Cuantificar y dosificar cpsulas de cloramfenicol mediante curva de calibracin
en cromatografa lquida de alta eficacia.

14.2 Fundamento:
La cromatografa lquida es una aplicacin de separacin de una matriz
con diferentes analitos, se convierte en una tcnica de cuantificacin
cuando se incluye un mtodo en el cual, una vez separado el compuesto
de inters, se puede determinar una propiedad fsica o qumica del mismo
que vaya en relacin directamente proporcional a su concentracin, por lo
cual puede construirse la respectiva curva de calibrado e interpolar en la
misma su concentracin o simplemente se puede analizar por comparacin
directa con un estndar pero dentro del rango de linealidad.

14.3 Metodologa
14.3.1 Consulta:

- Interferencias de otros compuestos con el cloramfenicol
- Constantes de acidez y de disociacin del cloramfenicol
- Estructura del cloramfenicol

14.3.2 Materiales y reactivos:

HPLC DionexUltimate 3000

Balones aforados
Pipetas volumtricas
Equipo de microfiltracin
Agitador ultrasnico

Viales de vidrio
Columna Acclaim 120
Metanol grado HPLC
Agua desionizada (tipo I)
cido Actico Glacial grado cromatogrfico
Acetonitrilo grado cromatogrfico
Cloramfenicol grado USP


14.3.3 Procedimiento:

- Preparar unos 500ml de fase mvil a partir de metanol:agua:cido actico
glacial en proporcin 55:45:0,1 ml respectivamente.
- Pesar con exactitud de + 0,001g alrededor de 0,0500g de estndar, aforar a
55

100ml y realizar diversas diluciones hasta conseguir una serie de estndares
de 1, 2.5, 5, 7.5 g/ml. Los aforos se realizarn con la misma fase movil
- De la muestra, pesar el equivalente a 50mg de principio activo, aforar con fase
movil y realizar diluciones para obtener una muestra que entre en la curva.
- Calibrar el equipo con el detector a 280nm, adems iniciar un proceso de purga
de bomba de acuerdo a indicaciones, luego de esto mantener un flujo de fase
mvil de 0,1 ml/min para acondicionar la bomba y la celda del detector; al
momento de realizar los anlisis el flujo debe aumentar a 1,0ml/min. Todo esto
debe ser adecuadamente cargado en el programa del mtodo a seguir
mediante el software de control del equipo; dentro de esto programar tres
rplicas por estndar y cinco rplicas de la muestra (si hay ms muestras
entonces solo replicar tres veces cada muestra).
- Observar las indicaciones para el correcto uso del equipo.
- Realizar el anlisis y procesar los datos adquiridos.
- En caso de falta de fase movil durante el anlisis prepararla de acuerdo a la
necesidad.
- Una vez concluido el Batch de anlisis apagar las lmparas del detector y
cambiar la fase mvil por acetonitrilo y manejar un flujo de 0,5ml/min para
homogenizar la columna en esta nueva solucin (se puede homogenizar con
solucin acetonitrilo:agua 70:30 respectivamente).
- Cuando se homogenice la columna y bomba, cambiar el flujo de la misma a 0,0
ml/min cuando la presin de la bomba caiga a cero entonces se puede apagar
la bomba. Antes de apagar la bomba, verificar que no est en proceso el auto
lavado de los sellos, si es as, permitir este proceso y apagar la bomba.

14.4 Clculos, resultados, discusiones y conclusiones:
Todo esto se reportar de acuerdo al formato del sistema de reporte de resultados que
se encuentra en el software del equipo, al cual se puede incluir lo concerniente a las
discusiones y a las conclusiones, sin olvidarse de reportar las muestras como
contenido de p.a. por cpsula o comprimido.

Bibliografa:

[1]. USP XXVI, The United States Pharmacopeia N 26 2003
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 785-803.





56

Prctica N:

15 CROMATOGRAFA DE GASES
TCNICA DE INYECCIN E INTRODUCCIN A LA ESTADSTICA


15.1 OBJ ETIVOS

- Introducir los principios de la tcnica de inyeccin.
- Determinar la precisin y repetibilidad del anlisis.


15.2 TEORA

15.2.1 Fundamento

El tamao de la jeringa de inyeccin necesaria depende del tipo de detector, con los
aparatos de conductividad trmica se emplean jeringas de 10 l o an menos, con los
detectores de ionizacin se inyectan muestras que normalmente son de 1 l o an
menores por lo que suelen usarse microjeringas de este volumen. Estos volmenes
son realmente muy pequeos, lo cual es causa que las microjeringas sean objetos
muy delicados.

Para que los resultados sean reproducibles, es necesario adiestrar al operador del
equipo de forma tal que, al trabajar en las mismas condiciones, se obtenga siempre la
misma respuesta del equipo. Una forma de evaluar el procedimiento es mediante la
obtencin de los errores absoluto y relativo.

El error absoluto(E) de una medida es la diferencia entre el valor observado Xi y el
valor aceptado como verdadero, que puede ser la media aritmtica de un conjunto de
determinaciones.
x x E
i
=

Una medida ms til que el error absoluto es el error relativo (%E), expresado en
tanto por ciento.
100
/ 1
%
x
x x n
E
i

=

15.3 METODOLOGA

15.3.1 Materiales y reactivos

Cromatgrafo de gases.
Microjeringa.
Micropipeta.
Balones aforados.
Papel absorbente.
Metanol al 1%

15.3.2 Procedimiento

- Examinar la temperatura del inyector, detector y columna.
57

- Ajustar las condiciones a las requeridas para el anlisis y suministradas por la
tcnica.
- Tomar de 1 a 2 microlitros de muestra.
- Sostener el cilindro de la jeringa entre los dedos de la mano derecha, manteniendo
el dedo ndice apoyado sobre el mbolo.
- Introducir la jeringa en el inyector y apretar para que la aguja atraviese la placa de
silicona (septum) del bloque de inyeccin.
- Una vez que la aguja haya penetrado, pero no antes, empujar bruscamente el
mbolo.
- Inyectar repetidamente tres muestras, una tras otra, limpia y rpidamente sin doblar
el mbolo.
- Medir la altura de los picos en milmetros.


15.4 CALCULOS

15.4.1 Calcular el promedio de las alturas de picos (h)

15.4.2 Calcular el error individual (error absoluto)

15.4.3 Calcular el error relativo

15.4.4 Calcular la desviacin estndar

15.4.5 Calcular el lmite de confianza


15.5 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________

15.6 BIBLIOGRAFA

[1]. SKOOG, D. y LEARY, J. (1994). Anlisis Instrumental 4ta. Edicin. Mc Graw Hill.
Madrid. p. 814827.
[2]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 919933.
[3]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico.
p. 107159.


58

Prctica N:

16 CROMATOGRAFA DE GASES II

16.1 OBJ ETIVOS

- Familiarizarse con el principio de operacin del cromatgrafo de gas.
- Determinar la altura del plato terico en la columna cromatogrfica.
- Determinar el efecto de la variacin del flujo del gas portador en la altura del plato
terico.
- Determinar el nmero de platos tericos.


16.2 TEORA

16.2.1 Fundamento

Se designa con el nombre de cromatografa un grupo de mtodos de separacin de
mezclas complejas aplicable tambin a la determinacin de las cantidades de los
constituyentes.

Los componentes esenciales de un sistema cromatogrfico son los siguientes: una
fasefijaoestacionaria, constituida generalmente por un slido granular finamente
dividido; una fase mvil, que puede ser un gas o un lquido y los sustratos o solutos,
dos o ms sustancias que hay que separar. Los sustratos se disuelven previamente en
un disolvente, o son introducidos directamente en estado de vapor. Como regla
general, la fase estacionaria est contenida dentro de un tubo o columna. En la
cromatografa de gases, las muestras en estado de vapor son arrastradas por una
corriente de gas inerte, como el helio o el nitrgeno, llamado gas de arrastre o
gasportador.

La eficacia de una columna cromatogrfica puede determinarse cuantitativamente
mediante dos parmetros: la altura del plato terico H (HeightEquivalentto a
TheoricalPlate o HEPT) y el nmero (NEPT) de platos tericos N. Los dos estn
relacionados por la ecuacin:

N = L/H

Donde L es la longitud (normalmente en centmetros)del relleno de la columna. La
eficacia de la columna cromatogrfica aumenta cuanto mayor es el nmero de platos y
menor sea la altura de los platos.

Los factores que influyen sobre la altura del plato terico son: la difusinturbulenta, o
movimiento aleatorio del soluto rodeado de las partculas de slidos, la
difusinlongitudinal de las molculas de sustrato de la parte ms concentrada hacia
las zonas ms diluidas, es decir hacia delante y hacia atrs en la direccin del eje del
desplazamiento; y, el transporte de materia, es decir el movimiento del sustrato de una
fase a otra, de la fase mvil a la fija y viceversa.

Cuando en un proceso cromatogrfico se relaciona la eficacia obtenida, con la velocidad
lineal del eluyente en la columna se obtiene una curva caracterstica. Estudiando este
comportamiento, Van Dempter encontr la siguiente ecuacin relacin:

H = A + Bu + C/u
59


Siendo u la velocidad lineal media del eluyente y los parmetros
A: coeficiente de difusin longitudinal, debido bsicamente a la multiplicidad de caminos.
B: Difusin del soluto en el seno del eluyente.
C: dificultades de transferencia de masas en la interfase de equilibrio.

16.3 METODOLOGA

16.3.1 Materiales y reactivos

Cromatgrafo de gases.
Microjeringa.
Micropipeta.
Balones aforados.
Papel absorbente.
Metanol al 1%

16.3.2 Procedimiento

- Observar los instrumentos, sus partes, su funcionamiento.
- Examinar el cilindro de gas portador, conexiones, horno, columnas, detectores,
registrador y observar las precauciones necesarias para su funcionamiento.
- Encender los equipos siguiendo las indicaciones del instructor.
- Establecer las condiciones de trabajo del equipo.
- Inicializar el programa de funcionamiento en el orden de secuencia establecido por
el fabricante e indicado en el manual del equipo.
- Inyectar la muestra y correr el cromatograma.
- Una vez obtenidos los resultados apagar el equipo segn instrucciones.


16.4 CALCULOS Y RESULTADOS

16.4.1 Calcular el nmero de platos tericos.
16.4.2 Calcular la altura del plato terico.
16.4.3 Con los valores obtenidos, graficar la altura del plato terico en funcin de
la velocidad de flujo de gas en ml/min.
16.4.4 Determinar la velocidad de flujo ptimo para la mxima eficiencia.


60


16.5 DISCUSIN Y CONCLUSIONES
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________



16.6 BIBLIOGRAFA

[1]. SKOOG, D., HOLLER, J. y NIEMAN, T. (2001). Principios de Anlisis Instrumental 5ta.
Edicin. Mc Graw Hill. Madrid. p. 729744.
[2]. SKOOG, D. y WEST, D.(2001). Qumica Analtica 7ma. Edicin. Mc Graw Hill. Mxico.
p. 658684, 687703.

61

17 ANEXOS
NORMAS BSICAS PARA
EL LABORATORIO DE ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL

1. La entrada al laboratorio es restringida al personal del laboratorio o
personal autorizado

2. Los estudiantes pueden ingresar al laboratorio hasta mximo 10 minutos
despus de la hora, pasado ese tiempo ningn estudiante entra o sale del
laboratorio sin autorizacin.

3. Material para el laboratorio:

a. Mandil (por alumno)
b. Material requerido por grupo (se indicar adecuadamente)
c. Material de seguridad
d. Gua de prcticas de laboratorio (por alumno)
e. Calculadora con funcin de regresin lineal

4. Calificacin:
a. La evaluacin de laboratorio se realizar sobre 6 puntos y
contemplar evaluaciones orales, escritas e informes de laboratorio.
5. Semanero: sta persona cumplir las siguientes funciones:
a. Organizar al grupo para mantener el orden y la limpieza del
laboratorio.
b. Retirar el material a utilizar, verificar su estado y entregarlo en el
mismo estado al final de la prctica.

6. Se aplicarn las sanciones adecuadas si se rompen las normas del
laboratorio, especialmente en lo referente a la seguridad, el orden,
atrasos y limpieza de material y del laboratorio.
7. Las faltas a clase prctica se justificaran si hubiesen motivos de fuerza
mayor, debidamente respaldadas por comunicado oficial del decanato.

8. Queda estrictamente prohibido fumar, beber o comer en el laboratorio.

62

(FORMATO PROPUESTO PARA INFORME)
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS
LABORATORIO DE ANLISIS QUMICO INSTRUMENTAL II

PRCTICA N:___________ Fecha de entrega:__________________
TEMA:
____________________________________________________________________
OBJETIVOS:
____________________________________________________________________

INTEGRANTES: GRUPO N: ________
DIA: ______________
HORA: ____________
_________________________________
_________________________________
_________________________________
_________________________________
_________________________________
1. REPORTE DE DATOS:
1.1. Datos experimentales:
Ttulo de la tabla







Elaborado por: Apellido de un integrante del grupo y otros.

2. CLCULOS Y RESULTADOS:
2.1. Clculos Modelo:
A + B = C + D = N +
Y = ax + b
63

2.2. Presentacin de Resultados:
Ttulo de la tabla
Elaborado por: Apellido de un integrante del grupo y otros.

3. CURVA DE CALIBRACIN:


Estadsticos principales y ejemplo de clculo de cada uno, no olvidar las
UNI DADESque acompaen a los resultados si estos tuvieren

_
x : ________ LOD:________ LOQ: ________ K
s
: _________
CV: ________ y/x: _________ r : ________ LC: ________





Series1
Lineal (Series1)





64

4. DISCUSIN:
El propsito de la discusin es interpretar y comparar los resultados obtenidos.
La discusin debe ser puntual y enfocarse en las ventajas y desventajas del trabajo
experimental. Se debe relacionar el fundamento terico aprendido en la clase terica
con lo aprendido en la clase experimental. Brevemente se describe las implicaciones
lgicas de los resultados. Se sugiere mejoras para obtener mejores resultados. Si los
datos no resultaren concordantes trata de discutir una posible fuente de error,
cometido ya que si se tratare de un error craso se debera repetir el experimento. Dicho
de una manera ms sencilla la finalidad principal de una Discusin es mostrar las
relaciones existentes entre los hechos observados.

5. CONCLUSIONES:
Las conclusiones se escriben de acuerdo a los objetivos planteados en el experimento, si
estos han sido alcanzados; en infinitivo, Se observ, Se verific, Se analiz la siguiente
muestra, etc.
Como una gua en esta seccin se responde a las siguientes preguntas:
- Qu dicen los datos obtenidos respecto al experimento?
- Qu sucedi en la prctica?
- Qu aprendiste al completar esta prctica?

6. BIBLIOGRAFIA:
De acuerdo a la normativa del APA, o con la herramienta de Microsoft Word 2007 que
se encuentra en la interfaz de referencias e Insertar cita.