La estandarizacin de las tcnicas resulta esencial para el buen funcionamiento
de una red de laboratorios coordinada y de apoyo a un programa de control de la tuberculosis. MUESTRAS Una buena muestra es aquella que proviene del sitio de la lesin, en cantidad sufciente, recolectada en un envase adecuado y conservada correctamente. Es responsabilidad del personal de enfermera o del laboratorio, dependiendo de la organizacin del servicio, dar las indicaciones al paciente para la recoleccin de todas aquellas muestras de obtencin espontnea. Estas indicaciones se referen al momento en que debe tomarse la muestra, cmo debe obtenerse, qu volumen es el adecuado, en qu envase debe depositarse y cmo debe rotularse. !e acuerdo a la diversas localizaciones de la tuberculosis el laboratorio puede recibir las siguientes muestras" Localizaci n Obtencin #ulmonar E$pectoracin" %uestra ideal por su buen rendimiento. En nuestro medio se recomienda tomar dos muestras para diagnstico" una inmediata &en momento de la consulta' y la otra matinal, al da siguiente, solicitndose un mnimo de ( ml. por muestra. E$pectoracin inducida" En pacientes que no pueden producir una muestra espontnea o en ni)os, se puede inducir la e$pectoracin por maniobras *insicas o por nebulizacin larngea. +roncofbroscopa" , travs de este procedimiento se pueden obtener diversos tipos de muestras para la investigacin de tuberculosis" secrecin bronquial por aspiracin, cepillado de mucosa bronquial, biopsia bronquial y lquido recuperado de lavado broncoalveolar- estas muestras, que tienen indicacinde cultivo, deben procesarse precozmente, ya que los anestsicos empleados en la broncoscopia disminuyen la viabilidad del bacilo. .ontenido gstrico" !estinado preferentemente a la investigacin de tuberculosis pulmonar en ni)os. La indicacin es la e$traccin de contenido gstrico despus de un ayuno de /( 0rs. Es una muestra que no se recomienda usar en controles de tratamiento, ya que su rendimiento es .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as Universidad de 5arapac 6acultad de 5ecnologa %dica ,rica 7 .0ile prcticamente nulo. !ebe procesarse precozmente para el cultivo. 4enal 8rina" 8btencin en forma espontnea. En este caso se aconse3a 9 muestras matinales tomadas en das sucesivos, despus de un aseo genital proli3o, del segundo c0orro y o3al en un volumen no inferior a :; ml. 8btencin orina" #or cateterismo #ost masa3e prosttico <enital +iopsia de endometrio, trompa, etc" Esta muestra, al igual que todos los te3idos, debe llegar al laboratorio incluida en agua destilada o suero fsiolgico, en el mnimo volumen necesario para mantenerla 0idratada- 3ams en formalina. =angre menstrual. +iopsia de epiddimo. #leural Lquido pleural" #uede usarse anticoagulante / mg de citrato de sodio por ml de lquido- cantidad ideal" (; ml. +iopsia pleural. %enngea Lquido cefalorraqudeo" .antidad ideal sobre ( ml. <anglionar +iopsia de ganglio. .ontenido ganglionar. 8steoarticu lar 5e3ido seo. Lquido articular. El laboratorio no 0ace investigacin de tuberculosis en deposiciones debido a que la baciloscopa no es confable, ya que la presencia de +,,4 puede deberse a %. tuberculosis de procedencia pulmonar &por deglucin de la e$pectoracin' o a micobacterias no tuberculosas- adems, el cultivo se contamina en una alta proporcin. TRANSPORTE DE LA MUESTRA Las muestras deben ser transportadas en receptculos con cierre 0ermtico, protegidas de la luz y el calor e$cesivo &ca3a de aislapol'. =e debe tener especial precaucin para que la muestra no se derrame durante su transporte, ya que esto imposibilita su procesamiento en el laboratorio. #ara evitar el derrame se recomienda que cada ca3a que contenga muestras mucosas &e$pectoracin' debe sellarse con tela ad0esiva- en el caso de muestras lquidas, se recomienda que stas se mantengan en posicin vertical. RECEPCIN DE MUESTRAS #ara que las muestras sean recibidas, adems de los requisitos antes mencionados, es necesario que cada una se enve correctamente identifcada, con el nombre del paciente en la pared e$terna del envase. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as ,dems, cada muestra debe traer la orden de >=olicitud de estudio bacteriolgico de 5+.? llenada en forma completa y con letra clara. BACILOSCOPA! TECNICA DE "IE#L NIELSEN La baciloscopa consiste en la observacin microscpica de una muestra te)ida con colorantes especfcos para micobacterias" 6ucsina fenicada ,zul de metileno =olucin decolorante ,lco0ol Eter PREPARCIN DEL $ROTIS Tipo %e M&est'a P'epa'acin %ucosas 7 Elegir la porcin ms purulenta y colocarla sobre un portaob3etos ya identifcado. 7 .on otro portaob3etos presionar la muestra, e$tendindola y alternando con el batido calor suave del mec0ero, 0asta obtener una pelcula 0omognea en (@A del portaob3eto. Lquidas 7 .entrifugar a A;;; rpm por A; minutos. =i es orina, un volumen mnimo de :; ml- de otras muestras el volumen total. 7 .olocar una o dos gotas del sedimento sobre un portaob3etos y de3ar sacar a ABC. o a temperatura ambiente 0asta el da siguiente. 5e3ido 7 %acerar el te3ido en un mortero estril- si es necesario, ayudarse con un poco de arena estril. 7 ,gregar una peque)a cantidad de agua destilada estril o suero fsiolgico. 7 .olocar una o dos gotas con una pipeta sobre un portaob3etos y de3ar secar a ABC. o a temperatura ambiente 0asta el da siguiente. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as $I(ACIN DE LA MUESTRA %uestras mucosas" En estas muestras la f3acin se 0ace simultneamente con el e$tendido, alternando el calor suave del mec0ero con el batido entre los portaob3etos. %uestras Lquidas" =e coloca sobre el sedimento una o dos gotas de alco0ol7ter y se enciende el alco0ol ter, que se evapora completamente. TINCIN DE LOS E)TENDIDOS 7 .oloracin especfca" .ubrir con fucsina- calentar por deba3o de la lmina con un 0isopo encendido impregnado en alco0ol 0asta que 0aya emisin de vapores blancos- retirar la fuente de calor, repetir dos veces ms la misma operacin- cuidar que el colorante no se derrame, no se seque o 0ierva- si esto ocurre, agregar ms fucsina a la preparacin. El tiempo de contacto con la fucsina es apro$imadamente de : min. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as 7 !ecoloracin" !ecolorar con alco0ol cido las veces que sea necesario 0asta que las partes menos espesas queden incoloras. La decoloracin se alterna con lavado suave con agua corriente fra &el agua tibia desprende los e$tendidos'. Esta operacin tarda alrededor de ( minutos. 7 .oloracin de fondo" .ubrir los e$tendidos con azul de metileno por A; segundos como mnimo. Lavar con agua corriente suavemente. Limpiar con algodn impregnado en alco0ol, por deba3o de la lmina. =ecar las preparaciones a temperatura ambiente sobre un papel absorbente y limpio. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as LECTURA La observacin microscpica se 0ace con lente de inmersin y ocular B a D$. =e debe leer un mnimo de cinco zonas que sean representativas del e$tendido y un mnimo de /;; campos Etiles. ,l cambiar la lmina, debe limpiarse el aceite ad0erido al lente de inmersin, especialmente si sta 0a sido positiva, con un papel seco y suave. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as PAUTA DE IN$ORME SEMI*CUANTITATI+O &+,,4F bacilos cidos7 alco0ol resistentes' 7 ,usencia de +,,4 " Go se observan +,,4 en /;; campos microscpicos. 7 +,,4 &H' " %enos de un +,,4 promedio por campo, en /;; campos observados. &%enos de /; +,,4 totales" informar nEmero' 7 +,,4 &HH' " Uno a diez +,,4 promedio por campo, en :; campos observados. 7 +,,4 &HHH' " %s de diez +,,4 promedio por campo, en (; campos observados. .uando slo se encuentra de /7A +,,4, pese a que la lectura se 0aya e$tendido a un mayor nEmero de campos" 7 Iacer otro e$tendido de la misma muestra y observar acuciosamente. =i no se encuentran ms bacilos, se informa negativa y si es posible se 0ace cultivo. 7 =olicitar nueva muestra. .laudia ,valos 1 Linda #astn 1 2vn #eralta 1 ,le3andro 4o3as