CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS E AMBIENTAIS CURSO DE BACHARELADO EM AGROECOLOGIA
ANTONIO MANOEL DA SILVA FILHO
MANEJO AGROECOLGICO DA MANCHA MARROM DE ALTERNRIA EM TANGERINA COM EXTRATOS VEGETAIS
LAGOA SECA PB 2014
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MANEJO AGROECOLGICO DA MANCHA MARROM DE ALTERNRIA EM TANGERINA COM EXTRATOS VEGETAIS
ANTONIO MANOEL DA SILVA FILHO
Monografia apresentada ao Curso de Bacharelado em Agroecologia da Universidade Estadual da Paraba, como parte das exigncias para obteno do ttulo de Bacharel em Agroecologia.
Orientadora: Prof. DSc. lida Barbosa Corra
LAGOA SECA PB 2014
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MANEJO AGROECOLGICO DA MANCHA MARROM DE ALTERNRIA EM TANGERINA COM EXTRATOS VEGETAIS
ANTONIO MANOEL DA SILVA FILHO
Monografia apresentada ao Curso de Bacharelado em Agroecologia da Universidade Estadual da Paraba, como parte das exigncias para obteno do ttulo de Bacharel em Agroecologia.
Aprovada em 07 de fevereiro de 2014
Banca Examinadora
___________________________________________________________ Prof. lida Barbosa Corra (D. Sc., Proteo de Plantas) UEPB. Orientadora ___________________________________________________________________ Prof. Leandro Oliveira de Andrade (D. Sc., Engenharia Agrcola) UEPB. Avaliador
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DEDICATRIA
Este trabalho reflete a soma de esforos mtuos, dedicao e compromisso para o cumprimento de objetivos e metas estabelecidas ao longo dessa jornada que tomei como sendo um ideal de vida.... A minha esposa Emanuela Soares e minha filha Karen Emanuela. Aos meus pais, Antonio Manoel e Luzia Nunes. v
AGRADECIMENTOS
A meu Pai Celestial e amigo, que chamo de Deus, o Grande El-Shadai, que em sua infinita graa e misericrdia me elegeu em Cristo Jesus antes da fundao do mundo. minha amada famlia. Minha esposa Emanuela Soares da Silva e minha filha Karen Emanuela Soares da Silva, por tanto amor e compreenso, mesmo quando eu no tinha tempo para elas. Aos meus pais, Antonio Manoel da Silva e Luzia Nunes da Silva que mesmo sem grau de estudo me incentivaram a buscar a vitria atravs do conhecimento, acreditando que eu seria vencedor. Aos meus irmos, Gerlndio Nunes, Gilberlndio Nunes, Gilvanildo Nunes, Gilvneide Nunes, Giliarde Nunes, Gildevnio Nunes, Gilderlndia Nunes, Gerleandro Nunes, Gelcilene Nunes, s gmeas Luziene Nunes e Luciene Nunes por estarem sempre me incentivando a acreditar no amanh e especialmente a Gelcilndio Nunes pela alegria e energia fornecida. Aos meus avs Alzira Tertulina, Francisco Cirilo Nunes (I n memorian), Manoel Josino Ricarte e Maria Ana Nunes, pelo amor incondicional demonstrado durante essa rdua caminhada. minha orientadora Prof. DSc. lida Barbosa Corra, pela confiana depositada e oportunidades dadas durante o perodo em que estive sob sua orientao. Aos meus amigos lisson Queiroz Moura e Jackson Figuerdo Ricardo pela amizade e companheirismo e incentivo carreira acadmica. Aos amigos e colegas de Curso Adelma Silva, Adriano Santos, Ailsa Cristiane, Ana Lcia, Barbara Monalisa, Emanuela Maria, Felipe Montenegro, Helder Sampaio, Janailson Santos, Joo Eduardo, Jos Emidio, Maisy Moreira, Mariana Coelho, Natanael Alves, Nbia Coeli, Oclcio Maciel, Raquel Hellen, Roberta Leal, Ruana Chagas, Sandra Alice, Tiago de Tarcio e Walkyria Manuela, pelos bons momentos que compartilhamos durante essa jornada. Ao Corpo Docente do CCAA em especial aos docentes, Beatriz Stamato, Carlos Henrique S. G. Meneses, Diogo Gonalves Neder, lida Barbosa Corra, Ivan Coelho Dantas (I n memorian), Leandro Oliveira de Andrade, Rodrigo Machado e Shirleyde vi
Santos que tive o privilegio de cumprir carga horria inerente aos seus componentes curriculares. Ao docente Francisco Loureiro Marinho, pela grande representao na criao deste curso, onde tive a oportunidade de me graduar. docente Maria do Socorro Bezerra Duarte, pelas oportunidades concedidas durante a minha graduao. Ao docente Alexandre Costa Leo, pelo conhecimento construdo durante toda caminhada acadmica. Aos meus amigos Jos Bruno Malaquias e Rener Luciano de Souza Ferraz, pelo empenho e prazer em me ensinar quando no tinha tempo disponvel e, pelas confeces de trabalhos cientficos e apoio sempre nesta jornada acadmica. docente da Universidade Federal da Paraba Maria Jos Arajo Wanderley, pelo empenho, dedicao e esforo em me ensinar e, confeccionar alguns artigos. Aos tcnicos do Laboratrio de Microbiologia do CCAA, Yuri Santos e Trycia Farias, pelo empenho, dedicao e assistncia prestada durante o perodo de desenvolvimento deste trabalho. Aos colegas de Laboratrio, pela troca de experincias, Adriana Noberto, lisson Queiroz Moura, Antonio Paulino, Edvnia Abdon, Kercio Silva Estevam, Marcia Paloma, Thiago Costa Ferreira e Wagner Kleber Silva Herculano, por tudo que conquistamos juntos nesta caminhada. Residncia Universitria da Universidade Estadual da Paraba, pelo tempo em que residi e pelos amigos que l conheci. Ao Centro Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico, pela concesso de bolsa de Iniciao Cientfica. Universidade Estadual da Paraba, pelo apoio logstico e tcnico, que foi muito importante para o desenvolvimento deste trabalho.
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SUMRIO
RESUMO ...................................................................................................................... viii ABSTRACT .................................................................................................................... ix LISTA DE FIGURAS ....................................................................................................... x LISTA DE TABELAS .................................................................................................... xi 1.0. INTRODUO ........................................................................................................ 12 2.0. REVISO DE LITERATURA ................................................................................ 13 2.1. A Agroecologia ......................................................................................... 13 2.2. A Tangerina ............................................................................................... 14 2.2.1. Breve histria ........................................................................ 14 2.2.2. Aspectos econmicos ............................................................ 15 2.2.3. Aspectos botnicos ................................................................ 15 2.2.4. O uso dos extratos na agricultura .......................................... 16 2.2.5. A doena ................................................................................ 16 3.0. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 17 3.1.Caracterizao da rea experimental ......................................................... 17 3.2. Isolamento de Alternaria alternata f. sp. citri ........................................... 17 3.3. Extratos vegetais ........................................................................................ 17 3.4. Avaliao do controle da doena em frutos de tangerina Dancy ............ 18 3.5. Avaliao do controle da doena em folhas de tangerina Dancy............. 18 3.6. Avaliao do efeito de extratos vegetais de folhas de melo-de-so- caetano e goiabeira sobre o crescimento micelial de A. alternata f.sp. citri .. 19 3.7. Analise estatstica dos dados ..................................................................... 19 4.0. RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 20 4.1.Efeito de extratos vegetais no controle da mancha marrom de alternaria em frutos de tangerina Dancy ........................................................................ 20 4.2.Avaliao do controle da doena em folhas .............................................. 24 4.3.Avaliao do efeito de extratos vegetais de folhas de melo-de-so-caetano e goiabeira no crescimento micelial de A. alternata f.sp. citri ................. 27 5.0. CONCLUSES ........................................................................................................ 30 6.0. REFERNCIAS ................................................................................................................ 31
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RESUMO
O manejo agroecolgico a associao de boas prticas que visam sanar ou evitar danos ambientais e socioeconmicos. Dentre as estratgias de manejo agroecolgico de doenas de plantas podemos citar a utilizao de extratos vegetais. A tangerina (Citrus tangerina Hort.) uma das principais culturas exploradas no Brasil e na Paraba, sendo o Brasil o maior produtor e exportador de suco de laranja do mundo. O Estado de So Paulo o maior produtor e na regio Nordeste destaca-se a Paraba como o Estado que mais produz tangerina, com destaque para a produo no municpio de Matinhas, dentre outras. No entanto, a produo de tangerina paraibana est sendo ameaada pela mancha marrom de alternria ou mancha de alternria. Portanto, este trabalho teve como objetivo desenvolver alternativas ecologicamente corretas, com custos viveis e culturalmente aceitas, baseadas na utilizao de extratos vegetais para o manejo da mancha marrom de alternaria, causada por Alternaria alternata f. sp. citri. A avaliao dos extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano (Momordica charantia), goiabeira (Psidium guajava), mamona (Ricinus communis L), mulungu (Erythrina mulungu Mart.) e pinho-manso (Jatropha curcas L.) foi realizada quanto ao controle da doena. Extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira foram avaliados quanto a inibio do crescimento micelial de Alternaria alternata f. sp. citri. O extrato de melo-de-So-Caetano e goiabeira promoveram reduo acentuada no crescimento da mancha marrom nas folhas de tangerina, sendo essa reduo de 10,1; 42,3; 53,2 e 78,1% para o extrato de melo-de-So-Caetano nas concentraes de 1, 5, 10, 20%, respectivamente e para as concentraes testadas do extrato de folhas de goiabeira de 1, 5, 10, 20% a reduo no crescimento das leses nas folhas foi de 0,24; 35,4; 64,6 e 83,9%. Extratos melo-de-So-Caetano e goiabeira promoveram reduo no crescimento da doena em frutos de tangerina em 13,39; 23,21; 28,57 e 45,08% para concentraes de 1, 5, 10, 20%. Constatou-se que os extratos de melo-de-So-Caetano e goiabeira na concentrao de 20% inibiram em 100% o crescimento micelial do fungo. Conclui-se que extratos de melo-de-So-Caetano e goiabeira so potenciais ferramentas para o manejo agroecolgico da mancha marrom de alternria em tangerina Dancy. Palavras-chave: Alternaria alternata f. sp. citri, Psidium guajava, Momordica charantia, Citrus tangerina, controle alternativo.
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ABSTRACT
The agroecological management is the combination of good practice aimed at remedying or avoiding environmental and socioeconomic damage. Among the strategies for agro- ecological management of plant diseases we can cite the use of plant extracts. The tangerine (Citrus tangerine Hort.). Is one of the main crops grown in Brazil and Paraba, Brazil is the largest producer and exporter of orange juice in the world. The State of So Paulo is the largest producer and the Northeast the Paraba State is the one that produces most tangerine, with emphasis on production in the Matinhas county, among others. Among the main phytosanitary problems that affect the culture of tangerine in Paraba the alternaria brown spot is the most important. Therefore, this study aimed to develop environmentally friendly alternatives as viable costs and culturally acceptable, based on the use of plant extracts for the management of alternaria brown spot, caused by Alternaria alternata f. sp. citri., in tangerine. The evaluation of plant extracts of leaves of bitter melon (Momordica charantia), guava (Psidium guajava), castor bean (Ricinus communis L.), coral tree (Erythrina mulungu Mart.) and jatropha (Jatropha curcas L.) was conducted to control the disease. Plant extracts of bitter melon and guava leaves were evaluated for the inhibition of mycelial growth of Alternaria alternata f. sp. citri. The extract of bitter melon and guava reduced significantly the development of the disease on leaves of tangerine, where the reduction was up to 10.1, 42.3, 53.2 and 78.1% for the extract of bitter melon at the concentrations of 1, 5, 10, 20%, respectively and for guava extract the tested concentrations of 1, 5, 10, 20% were what reduced the growth of lesions on the leaves up to 0.24, 35.4, 64.6 and 83.9%, respectively. Extracts of bitter melon and guava promoted a reduction in the growth of the disease on fruits in 13.39, 23.21, 28.57 and 45.08% at 1, 5, 10 20% concentrations. Extracts of bitter melon and guava in the concentration of 20% inhibited by 100% the pathogen mycelial growth. It was concluded that the extracts of bitter melon and guava are alternaria brown spot agroecological management potential tools on Dancy tangerine. Keywords: Alternaria alternata f. sp. citri, Psidium guajava, Momordica charantia, Citrus tangerine, alternative control.
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LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em funo do tempo, mediante aplicao de extratos de melo-de-So-Caetano, mamona, mulungu, goiaba, pinho-manso e gua. As letras caracterizam que foi aplicado o teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro e as barras representam o erro padro.. ........................................................................................................... 21 Figura 2. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de melo- de-So-Caetano em frutos de tangerina Dancy. .......................................... 22 Figura 3. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de goiaba em frutos de tangerina Dancy.. ................................................................... 23 Figura 4. Efeito da aplicao de extratos de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira, na concentrao de 20% no desenvolvimento na mancha marrom de alternria (cm) em folhas de tangerina Dancy. As letras caracterizam que foi aplicado o teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro e as barras representam o erro padro. ............................................................................. 24 Figura 5. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de goiabeira em folhas de tangerina Dancy. ...................................................... 25 Figura 6. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de melo- de-So-Caetano em folhas de tangerina Dancy.. ......................................... 26 xi
Figura 7. Efeito da aplicao de extratos de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira, na concentrao de 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri., em placas de Petri. ...................................................... 28 Figura 8. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So- Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri em placas de Petri em 48 horas. ........................................................................................................................ 28 Figura 9. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So- Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri, em placas de Petri, aps 96 horas. ............................................................................................................. 29 Figura 10. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So- Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri, em placas de Petri, aps 120 horas. ............................................................................................................. 29
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Resumo da anlise de varincia para as variveis; avaliao 1, 48 horas (AV1), avaliao 2, 96 horas (AV2) e avaliao 3, 120 horas (AV3) no crescimento de A. alternata em tangerina Dancy, sob aplicao de extratos vegetais. Lagoa Seca, PB, 2013.. .................................................................... 20 Tabela 2. Valores mdios e teste de mdias para as variveis avaliaes 1 e 2 ( 48h) e (192h) nos tratamentos em suas respectivas concentraes, no controle da mancha de alternaria em frutos de tangerina Dancy, Lagoa Seca, PB, 2013 ........................................................................................................................ 24 Tabela 3. Valores mdios e teste de mdias para as variveis avaliaes (AV1) avaliao 1 (48h) e (AV2) avaliao 2 (192h), nos tratamentos em suas respectivas concentraes, no controle da mancha de alternaria em folhas de tangerina Dancy, Lagoa Seca, PB, 20132013 ............................................. 27 12
1.0. INTRODUO
A agroecologia busca aplicar, a todo o momento, o princpio da preveno, fortalecendo o solo e as plantas atravs da promoo do equilbrio ecolgico em todo o ambiente. O manejo agroecolgico baseado no reconhecimento da vida, do equilbrio entre os seres vivos: humano, vegetal e animal, visando o perfeito equilbrio ecolgico de um sistema. O manejo agroecolgico possibilita ao produtor rural um ambiente com sustentabilidade produtiva-ambiental, com o uso racional do solo e da gua, amenizando assim os impactos adversos causados pela agricultura convencional; promovendo a utilizao de prticas de fcil execuo com materiais j existentes na rea, favorecendo a viabilidade econmica e tornando a rea sustentvel (COSTA et al., 2013). A tangerina (Citrus tangerina Hort.) uma das principais culturas exploradas no Brasil, bem como no Estado da Paraba. Em 2010 o Brasil ocupou a quarta maior produo mundial de tangerina (SPREEN, 2010), sendo o Brasil o maior produtor e exportador de suco de laranja do mundo (AGRIANUAL, 2010). A regio Sudeste se destaca como a maior produtora de tangerina do Brasil, sendo o Estado de So Paulo o maior produtor. Em ordem decrescente em produo de tangerina podemos listar as regies: Sudeste, Sul, Nordeste, Centro-Oeste e Norte. Na regio Nordeste, o Estado da Paraba o maior produtor, com destaque para a produo nos Municpios de Matinhas, Alagoa Nova, Esperana, So Sebastio de Lagoa de Roa e Remgio (EMBRAPA, 2009; GOVERNO DA PARABA, 2011). A cultura dos citros afetada por vrias doenas causadas por fungos, bactrias, vrus, virides e nematoides que ameaam a sua viabilidade econmica (KIMATI et al., 1997). Dentre os principais problemas fitossanitrios que afetam a cultura da tangerina na Paraba podemos citar a mancha marrom de alternria ou mancha de alternria (GOVERNO DA PARABA, 2011; LOPES et al., 2009). A mancha marrom de alternria foi diagnosticada recentemente no Estado, sendo essa descrita em artigo publicado por Lopes et al. 2009 onde os autores relataram a grande preocupao com a produo da fruta dos agricultores da regio onde a doena estava incidindo. Os danos causados pela doena dependem da sua intensidade, onde as leses podem causar a desfolha da planta, morte de ramos e queda prematura de frutos. Os frutos que se mantm fixos planta perdem seu valor para o mercado in natura devido s leses necrticas provocadas pelo fungo (SPSITO et al., 2003). A principal forma de controle da mancha marrom de alternria a qumica, resultando em srios danos ao meio ambiente. No entanto, diversas formas de manejo sustentvel de doenas de plantas vm sendo desenvolvidas e utilizadas por produtores no mundo todo para minimizar os 13
danos ambientais causados pelo controle qumico. Dentre as formas de controle alternativas aos agrotxicos, podemos citar o uso do controle biolgico e a utilizao de extratos e leos essenciais (BETTIOL et al., 2009; CARVALHO et al., 2011). O manejo alternativo de doenas causadas por espcies de Alternaria j foi demonstrado por Carvalho et al. (2011) utilizando extratos de plantas e por Singh & Deverall (1984) e Sharma et al. (2009) empregando o antagonismo entre os microrganismos. As caractersticas do cultivo de tangerina e de seus hbridos na Paraba so predominantemente de pequenos a mdios agricultores, que utilizam mo de obra familiar e que usam pouco ou nenhum agrotxico, e, outros em transio agroecolgica. A tangerina paraibana vem ganhando, a cada ano, espao no comrcio e aumentando a procura pelos consumidores das principais cidades do pas. A qualidade do produto ofertado o principal fator de sucesso da atividade. Em muitas propriedades o cultivo da tangerina na Paraba semelhante ao extrativismo e ao cultivo agroecolgico (ARAJO, 2011). Tal caracterstica valoriza o produto colhido, pois o consumidor ir adquirir uma fruta sem resduos de agrotxicos. Em matria publicada no site do Governo da Paraba, salienta-se essa caracterstica da tangerina produzida no Estado, promovendo a sua comercializao para outros Estados (GOVERNO DA PARABA, 2011). Nesta conjectura a utilizao de medidas de controle para a mancha marrom de alternria na realidade socioeconmica de produo de tangerina no Estado da Paraba requer o desenvolvimento de alternativas agroecolgicas, que promovam a produo de frutas sem resduos qumicos e que garantam a viabilidade econmica da atividade agrcola na regio, portanto, este trabalho teve como objetivo desenvolver alternativas ecologicamente corretas, socialmente justas, com custos viveis e culturalmente aceitas, baseadas na utilizao de extratos vegetais para o manejo da mancha marrom de alternaria, causada por A. alternata f. sp. citri.
2.0. REVISO DE LITERATURA
2.1. A Agroecologia
A agroecologia surge como perspectiva terica, recuperando a necessidade de conservao da biodiversidade ecolgica e cultural, assim como o enfoque sistmico para a abordagem dos aspectos relativos ao fluxo de energia e de materiais nos sistemas econmicos (CAPORAL & COSTABEBER, 2000). 14
Estudando a agroecologia em sentido mais amplo Sevilla Guzmn e Gonzlez de Molina (1996), descrevem a Agroecologia como um campo de estudos que busca o manejo ecolgico dos recursos naturais, para, atravs de uma ao social coletiva de carter participativo, de um enfoque holstico e de estratgia sistmica, reconduzir o curso alterado da coevoluo social e ecolgica, mediante o controle das foras produtivas que estanque seletivamente as formas degradantes e exploradoras da natureza e da sociedade. A agroecologia busca integrar os saberes histricos dos agricultores com os conhecimentos de diferentes cincias, permitindo tanto a compreenso, anlise e crtica do atual modelo do desenvolvimento e de agricultura, como o estabelecimento de novas estratgias para o desenvolvimento rural e novos desenhos de agriculturas mais sustentveis, desde uma abordagem transdisciplinar holstica (CAPORAL & AZEVEDO, 2011).
2.2. A Tangerina
2.2.1. Breve histria
Segundo Vilela (2012) a tangerina teve seu marco histrico inicial na sia. Segundo Donadio et al .(1998) a origem , provavelmente, no nordeste da ndia e sul da China, embora as outras espcies podem ter se originado fora destes centros de origem principais. Assim, a tangerina King citada como de origem na Indochina, a Satsuma no Japo e a Mexerica na Itlia, mas j como centros secundrios de origem, provavelmente todas provenientes de Citrus reticulata, esta considerada uma das espcies ancestrais dos citros. O comrcio entre as naes e as guerras ajudou a expandir o cultivo dos citros, de modo que, na Idade Mdia, a laranja foi levada pelos rabes para a Europa. Nos anos de 1500, na expedio de Cristvo Colombo, mudas de frutas ctricas foram trazidas para o continente americano (NEVES et al., 2010). Introduzida no Brasil logo no incio da colonizao, a tangerina encontrou no pas melhores condies para se desenvolver e produzir do que nas prprias regies de origem, expandindo-se por todo o territrio nacional. A citricultura destacou-se em vrios Estados, porm, foi a partir da dcada de 1920 que se criou o primeiro ncleo de citricultura (NEVES et al., 2010). importante frisar que, recentemente, novas tecnologias para produo de tangerina esto sendo disponibilizadas aos produtores, com destaque para planejamento do pomar, procedimentos de coleta de amostra de solo, tcnicas de sistematizao do terreno, caractersticas das principais variedades de copas, caractersticas das principais variedades de porta-enxertos, preparo do terreno, 15
aplicao de calcrio e fertilizante, plantio de mudas e tratos culturais, controle fitossanitrio, colheita; segurana e sade no trabalho e preservao do meio ambiente (JORNAL ENTRE-RIOS, 2013).
2.2.2. Aspectos econmicos
A tangerina uma cultura que desempenha um papel de destaque no mbito econmico, figurando dentre as principais culturas de interesse para o setor agrcola em diversas partes do mundo (AZEVEDO, 2003). No Brasil, o Estado de So Paulo o maior produtor, enquanto a Paraba assumiu posio de destaque, sendo a fruta que mais empregou no Estado (RECORD RURAL NEWS, 2012). A safra nacional de 2013, de 402,1 milhes de caixas de 40,8 kg, apresentou decrscimo de 14,2%, em relao safra colhida em 2012. O principal produtor continua sendo So Paulo, que participou com 72,4% da safra nacional em 2013. A citricultura paulista sofreu grande impacto com a crise da demanda internacional e apresentou decrscimos de 12,4% na rea plantada, 15,4% na rea destinada colheita e 18,0% na produo. Alm dos fatos j citados, So Paulo enfrenta grandes problemas de ordem fitossanitria, alm das cotaes baixas para as frutas destinadas indstria (IBGE, 2013). No perodo de 1962 a 1998 a citricultura exportou, em valores de 1997, quase US$ 60 bilhes, trazendo, em mdia, US$ 1,3 bilho por ano em divisas ao pas, dessa maneira evidenciando a importncia econmica para o Brasil (DONADIO et al., 1998).
2.2.3. Aspectos botnicos
A planta vigorosa, de tamanho mdio (3m) a grande (6m), crescimento ereto, com poucos espinhos, folhagem densa, com folhas mdias, lanceoladas e de largura mdia. Tem grande tendncia de produzir alternadamente. Os frutos so de tamanho mdio, forma oblata, base com pescoo pequeno e pice pouco deprimido. A casca fina, firme, mas fcil de remover; superfcie lisa, de cor laranja a vermelha, com 9 a 13 segmentos, facilmente separveis e eixo mdio e aberto. Cor da polpa laranja, sucosa, s vezes, aromtica; poucas sementes, mono ou poliembrinicas e cotildones usualmente verdes. Maturao de meia estao a tardia. Tem folhas lanceoladas, com ponta e com a nervura central proeminente; o pecolo tpico, no alado. As flores so usualmente brancas, pequenas, isoladas, ou em inflorescncia de pednculos 16
curtos. A planta normalmente alternante. H espcies mono e outras poliembrinicas (ANDERSON, 1996; HODGSON, 1967; SAUNT, 1992). Em regies de clima subtropical, com invernos frios, o fruto desenvolve colorao avermelhada, tanto interna como externamente, ou seja, na casca. As sementes tm cotildones verdes, mas h excees (DONADIO, et al., 1998). A planta muito resistente ao frio, enquanto o fruto no. Devido s suas diferentes espcies, hbridos e tambm variedades dentro delas, a adaptao a diferentes condies climticas muito grande (DAVIES & ALBRIGO, 1994).
2.2.4. O uso de extratos vegetais na agricultura
A utilizao de partes de plantas com atividade inseticida, fungicida e herbicida no uma tcnica recente no controle de pragas, doenas e plantas espontneas, sendo essa anterior ao surgimento dos pesticidas sintticos. Os primeiros extratos botnicos utilizados foram a nicotina extrada do fumo (Nicotiana tabacum), a piretrina extrada do crisntemo (Chrysanthemum cinerariaefolium), a rotenona extrada de Derris spp. e Lonchocarpus spp., a sabadina e outros alcalides extrados de Schoenocaulon officinale e a rianodina extrada de Rhyania speciosa (LAGUNES & RODRGUEZ, 1992). Em se tratando de extratos vegetais para utilizao na citricultura, diversos materiais tm sido empregados. Dentre os materiais j utilizados na citricultura destacamos com efeito fungicida: a manipueira, extrato ou leo de citronela, extrato de nim, extrato de pimenta, jequitib-rosa, figueira, arruda e angico-branco (CARVALHO et al., 2011; SORRIANO, 2011).
2.2.5. A doena
A mancha marrom de alternria uma doena fngica, causada por Alternaria alternata f.sp. citri (PEEVER et al., 2004). Alternaria alternata f.sp. citri possui as formas (i) pattipo limo rugoso, especfico para o limo rugoso (Citrus jambhiri Lush) e limo Cravo (Citrus limonia Osbeck), e causa leses em folhas destas duas espcies, e o (ii) pattipo tangerina, que causa doena em tangerineiras e em seus hbridos (tangores e tangelos). As variedades de tangerina mais suscetveis a mancha de alternaria so a tangerina Dancy (Citrus tangerina Hort.); os tangelos Orlando, Nova e Minneola; e o tangor Murcott. Dentre as tangerinas citadas, a Ponkan possui maior grau de resistncia (SPSITO et al. 2003). Alternaria alternata f. sp. citri infecta folhas novas, frutos e ramos, causando leses necrticas com halo amarelado. O perodo de suscetibilidade da planta varia de acordo com o 17
tecido; onde as folhas so suscetveis at a sua expanso mxima, e os frutos so suscetveis desde a queda das ptalas at o seu desenvolvimento, estando essees suscetveis at quatro meses aps a florada. Os danos causados pela doena dependem da sua intensidade, onde as leses podem causar a desfolha da planta, morte de ramos e queda prematura de frutos (SPSITO et al. 2003).
3. MATERIAL E MTODOS
3.1. Caracterizao da rea experimental
O presente estudo foi realizado no Laboratrio de Microbiologia, pertencente ao Centro de Cincias Agrrias e Ambientais, (CCAA), da Universidade Estadual da Paraba, localizado no Municpio de Lagoa Seca, PB.
3.2. Isolamento de Alternaria alternata f. sp. citri
O isolamento do fungo A. alternata f. sp. citri foi realizado a partir de frutos sintomticos de tangerina Dancy. Dez fragmentos (10 mm 2 ) de tecido doente foram desinfestados com etanol a 70% (30-60 segundos) e hipoclorito de sdio a 2% (30-60 segundos), seguidos de lavagem com gua destilada estril por 30 segundos, sendo a lavagem realizada trs vezes. Os fragmentos foram transferidos para placas de Petri contendo meio Batata-Dextrose-gar (BDA), preparado com o cozimento de 200g de batata para 1L de gua, 16g de gar, 20g de dextrose, aps a pesagem e cozimento todos os ingredientes foram misturados e autoclavados. As culturas foram incubadas por sete dias a 25C no escuro. Aps o perodo descrito os isolados foram repicados para novas placas de Petri contendo o mesmo meio de cultura, purificados e armazenados em tubos de ensaio contendo o meio de cultura BDA. O fungo foi preservado em tubos de ensaio acrescido de meio de cultura BDA e leo mineral.
3.3. Extratos vegetais
O preparado dos extratos vegetais foi realizada de acordo com metodologia descrita por Carvalho et al. (2011), onde as plantas foram secas em estufa a 60C, modas e imersas em lcool a 70%, por 48h em temperatura ambiente. Os extratos resultantes foram filtrados em papel filtro e armazenados em frasco de vidro protegido da luz com o envolvimento de papel alumnio e jornal. 18
3.4. Avaliao do controle da doena em frutos de tangerina Dancy
Dois experimentos foram realizados para a avaliao de extratos vegetais no controle da mancha marrom de alternria em frutos de tangerina Dancy, onde no primeiro experimento avaliou-se extratos de folhas de melo-de-So-Caetano (Momordica charantia L.), de mamona (Ricinus communis L), de mulung (Erythrina mulungu Mart.), de goiabeira (Psiduim guajava) e de pinho-manso (Jatropha curcas L.) na concentrao de 20%, com duas testemunhas, inoculada e sem inoculao, e no segundo experimento avaliou-se extratos de folhas de melo- de-So-Caetano e goiabeira nas concentraes de 1, 5, 10 e 20% com duas testemunhas, inoculada e sem inoculao. Para o primeiro experimento, frutos maduros e sadios de tangerina Dancy foram lavados em gua corrente e aps a secagem foram selecionados dois pontos prximos ao pednculo dos frutos para a inoculao do patgeno, por meio de duas perfuraes com uma agulha estril (aproximadamente 3mm de profundidade). A inoculao dos frutos foi realizada aps a pulverizao de 26mL de cada extrato a 20%, separadamente, por tratamento. Aps a pulverizao foi realizado um ferimento com uma agulha estril e a inoculao com um disco de 4mm de meio de cultura com o patgeno. Para o tratamento testemunha sem inoculao um disco com meio de cultura BDA, sem crescimento de A. alternata f. sp. citri foi utilizado. Os frutos foram acondicionados em placas de Petri com um algodo umedecido com gua destilada autoclavada, sendo acondicionados dentro de sacos plsticos. Avaliou-se o crescimento lesional aps 48, 96 e 120 horas aps a inoculao. O experimento foi realizado em delineamento inteiramente casualizado com sete tratamentos e quatro repeties. No segundo experimento, a mesma metodologia descrita para o primeiro experimento foi utilizada, no entanto, os extratos testados foram de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira nas concentraes de 1, 5, 10 e 20%. O experimento foi realizado com 10 repeties para cada tratamento. O crescimento lesional foi avaliado aps 48h e 192h aps a inoculao.
3.5. Avaliao do controle da doena em folhas de tangerina Dancy
Para a avaliao do controle da mancha de alternaria em folhas de tangerina Dancy foram realizados dois experimentos, onde no primeiro foram testados extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira na concentrao de 20% e para o segundo experimento os extratos vegetais foram utilizados na concentrao de 1, 5, 10 e 20%. 19
No primeiro experimento, folhas jovens e sadias de tangerina foram utilizadas, sendo essas pulverizadas com 1mL de cada extrato vegetal a 20%. Os tratamentos testemunha inoculada e sem inoculao foram pulverizados com gua destilada autoclavada. Aps a pulverizao das folhas (acondicionadas em placas de Petri) o patgeno foi inoculado, depositando-se um disco de cultura (4mm) na superfcie das folhas com ferimentos. As folhas foram acondicionadas em placas de Petri em cmara mida. O comprimento das leses foi avaliado aps 48h da inoculao. Para a avaliao de diferentes concentraes de extratos de folhas de goiabeira e melo-de- So-Caetano (1, 5, 10 e 20%) foi utilizada a mesma metodologia descrita para o primeiro experimento. Alm dos tratamentos com os extratos vegetais, avaliou-se a testemunha inoculada com o patgeno e testemunha sem inoculao. Foram realizadas duas avaliaes (48 e 192h aps a inoculao). Os experimentos foram arranjados em delineamento inteiramente casualizado com dez repeties.
3.6. Avaliao do efeito de extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira sobre o crescimento micelial de A. alternata f.sp. citri
Para a avaliao do efeito de extratos vegetais sobre o crescimento micelial do fitopatgenos foram realizados dois experimentos, onde (i) testou-se os extratos vegetais na concentrao de 20% e (ii) testou-se os extratos vegetais nas concentraes de 0, 1, 5, 10 e 20%. Para tanto, no experimento (i) extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira foram adicionados em meio BDA fundente, na concentrao de 20%, em placas de Petri, onde um disco de quatro mm de cinco isolados do fitopatgeno foram depositados no centro das placas de Petri, separadamente. O comprimento da leso foi medido aps 48 horas da inoculao do patgeno. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado com quatro tratamentos e cinco repeties. Para o experimento (ii), concentraes de 0, 1, 5, 10 e 20% de extratos de folhas de goiaba e melo-de-So-Caetano foram testados, de acordo com metodologia descrita no primeiro experimento. Avaliaes do crescimento micelial foram realizadas aps, 48h, 72h e 120h, da deposio do disco com a cultura do patgeno na placa de Petri. Os experimentos (i e ii) foram arranjados em delineamento inteiramente casualisado, utilizando-se cinco repeties por tratamento.
3.7. Analise estatstica dos dados 20
Realizou-se a anlise de varincia para os dados qualitativos e aplicao do teste de Shapiro- Wilk para verificar a normalidade dos dados, no necessitando de qualquer transformao, aplicando-se em seguida o teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro, com auxlios dos programas estatsticos R (R CORE TEAM, 2013) e o SigmaPlot verso 11.0 (SIGMAPLOT, 2008), para anlises e confeco dos grficos, respectivamente. Para os dados quantitativos aplicou-se anlise de regresso em caso de significncia utilizando o programa SigmaPlot verso 11.0 (SIGMAPLOT, 2008), com o mesmo sendo utilizado para a confeco dos grficos.
4. RESULTADOS E DISCUSSO
4.1. Efeito de extratos vegetais no controle da mancha marrom de alternaria em frutos de tangerina Dancy
Constatou-se efeito significativo dos tratamentos no controle da mancha marrom de alternria nos trs perodos de avaliao (Tabela 1). Tabela 1. Resumo da anlise de varincia para as variveis; avaliao 1, 48 horas (AV1), avaliao 2, 96 horas (AV2) e avaliao 3, 120 horas (AV3) no crescimento de A. alternata em tangerina Dancy, sob aplicao de extratos vegetais. Lagoa Seca, PB, 2013. F.V G.L Quadrados Mdios 48 horas 96 horas 120 horas Tratamentos 5 0,01949** 0,12266** 0,20799** Resduo 18 0,00192 0,00962 0,01450 CV (%) 11.96 17.95 16.87 **, * - Significativo a 1 e 5% respectivamente; FV= Fontes de Variao, GL= Graus de Liberdade, CV= Coeficiente de Variao, AV=Avaliao.
Verificou-se que aps 48h da inoculao o extrato de goiabeira foi mais efetivo no controle da doena, com diferena percentual de 45,6% com relao testemunha inoculada. No mesmo perodo, o extrato de mulungu tambm se mostrou eficaz para controlar a doena quando comparado com a testemunha, com reduo de 26,1% (Figura 1). Os extratos de melo-de-So- Caetano, mamona e pinho-manso tiveram mdias semelhantes entre si, no diferindo da testemunha inoculada. Transcorridas 96h aps a inoculao, verificou-se que todos os extratos foram eficazes no controle da doena (Figura 1). Calculou-se redues de 60,7; 47,6; 45,2; 30,5% e 28,5; para
os extratos de goiabeira, melo-de-So-Caetano, mulung, pinho manso, mamona, respectivamente em relao testemunha. 21
Na ltima avaliao (120h aps a inoculao) o extrato de goiaba foi o mais eficiente reduzindo o crescimento da doena em 58,2%. Neste mesmo perodo, os extratos de melo-de- So-Caetano, mulungu e pinho-manso e mamona, tambm se mostraram eficientes no controle do patgeno, reduzindo o dimetro da leso em 44,5, 49,1; 32,7% e 26,4, respectivamente (Figura 1). Em estudos realizados por Carvalho et al.(2011), foram testados 105 extratos de plantas para o controle da mancha marrom de alternaria em frutos de tangor Murcortt, tambm em placas de Petri, avaliando a inibio micelial do patgeno pela bioatividade dos extratos. Entre as plantas estudadas, a mais promissora foi Anadenanthera colubrina, oito dias aps inoculao, o qual reduziu o desenvolvimento da doena nos frutos a nveis estatisticamente iguais aos observados para os fungicidas comerciais. Tratamentos Melo S.C Mamona Mulung Goiaba P. Manso Testemunha C r e s c i m e n t o
( c m ) 0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 48 horas 96 horas 120 horas ab bc bc ab b b bc bc bc c c c b b ab a a a
Figura 1. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em funo do tempo, mediante aplicao de extratos de melo-de-So-Caetano, mamona, mulungu, goiaba, pinho-manso e gua. As letras caracterizam que foi aplicado o teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro e as barras representam o erro padro. No experimento com diferentes concentraes do extrato de melo-de-So-Caetano, constatou-se que o aumento da concentrao do extrato promoveu expressiva reduo no crescimento do patgeno nos frutos de tangerina aps 48 horas de inoculao. As mdias dessa varivel ajustaram-se linearmente, com alta capacidade preditiva com coeficiente de determinao (R 2 = 0, 97). Observou-se nesta avaliao que a concentrao de 1% inibiu o crescimento radial da doena em 7,54% e a de 5% inibiu em 18,86%, porm, os melhores resultados foram registrados por meio da aplicao das concentraes de 20% e 10%, com inibio do crescimento radial em 48,42 e 26,41%, respectivamente (Figura 2A). 22
Ao transcorrer de 192 horas aps a inoculao, constatou-se que o aumento da concentrao do extrato de melo-de-So-Caetano promoveu reduo acentuada no crescimento do patgeno nos frutos de tangerina, onde as mdias se ajustaram ao modelo linear com boa capacidade preditiva (R 2 = 0, 85). Verificou-se que as concentraes de extrato de 1, 5, 10, 20% diminuram em 9,37, 21,8, 30,8 e 38,39% a doena, respectivamente (Figura 2B).
Extrato de melo-de-so-caetano (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 Extrato de melo-de-so-caetano (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4 y = 1,529-3,5826x R = 0,9764** y = 2,0795-3,9725x R = 0,8585** A) B) Figura 2. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de melo-de-So-Caetano em frutos de tangerina Dancy.
As mdias de inibio do crescimento mediante a aplicao do extrato de goiabeira em frutos de tangerina Dancy foram significativas na probabilidade de erro de 1%, ajustando-se ao modelo linear simples com uma alta capacidade preditiva (Figura 3A) e boa capacidade preditiva (Figura 3B), cujos coeficientes de determinao foram R 2 = 0, 98 (Figura 3A) e R 2 = 0, 89 (Figura, 3B), nos dois perodos de avaliao, respectivamente. Analisando-se ainda a figura 3A observa-se que as maiores concentraes (10% e 20%) do extrato de goiabeira, aps 48 horas de inoculao, promoveram um decrscimo de 18,2 e 43,3% no crescimento da doena. Perpassando s 192 horas da inoculao esse extrato foi capaz de reduzir o crescimento do patgeno sobre o tecido do fruto em 13,39; 23,21; 28,57 e 45,8% para as concentraes de 1, 5, 10 e 20%, respectivamente (Figura 3B). De acordo com Ribeiro e Bedendo (1999), os maiores efeitos dos extratos so alcanados quando se aumentam as concentraes, visto que o princpio ativo permanece por mais tempo na superfcie dos frutos e das folhas. 23
Extrato de goiabeira (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0,9 1,0 1,1 1,2 1,3 1,4 1,5 1,6 1,7 Extrato de goiabeira (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4 y = 1,5715-2,9996x R = 0,9838** y = 2,0667-4,3897x R = 0,8997** A) B) Figura 3. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de goiaba em frutos de tangerina Dancy.
Observando-se a tabela 2 verifica-se que os dois extratos nas concentraes de 1, 5 e 10% no diferiram estatisticamente entre si e do tratamento controle nos dois perodos de avaliaes. No entanto na concentrao de 20% aps s 192 horas da inoculao, o extrato de melo-de- So-Caetano no diferiu do tratamento controle e goiabeira, mas houve diferena mnima significativa para o extrato de goiabeira quando comparado ao tratamento testemunha. A capacidade de controle da mancha marrom de alternria com extrato de melo-de-So-Caetano foi de 38,5% nos frutos.
24
4.2. Avaliao do controle da doena em folhas
A aplicao dos extratos vegetais diminuiu significativamente o desenvolvimento da mancha de alternaria nas folhas de tangerina (Figura 4). O extrato de goiaba foi eficiente no controle mancha de alternaria em 50% e o extrato de melo-de-So-Caetano no controle em 55% em relao testemunha, conforme demonstrado na figura 4.
Tratamentos Testemunha Extrato de goiabeira Extrato de melo-de-so-caetano C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 a b b
Figura 4. Efeito da aplicao de extratos de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira, na concentrao de 20% no desenvolvimento na mancha marrom de alternria (cm) em folhas de tangerina Dancy. As letras caracterizam que foi aplicado o teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro e as barras representam o erro padro. Tabela 2. Valores mdios e teste de mdias para as variveis avaliaes 1 e 2 ( 48h) e (192h) nos tratamentos em suas respectivas concentraes, no controle da mancha de alternaria em frutos de tangerina Dancy, Lagoa Seca, PB, 2013. Tratamentos ---------- concentrao 1%--------- ---------- concentrao 5%--------- AV1 AV2 AV1 AV2 Controle 1,59250 a 2,24750 a 1,59250 a 2,24750 a M.S.C. 1,47250 a 2,03000 a 1,29000 a 1,75250 a GOI 1,50750 a 1,94250 a 1,40750 a 1,72250 a D.M.S. 0,46352 0,91610 0,56150 0,91623 ---------- concentrao 10%------- ---------- concentrao 20%------- Controle 1,59250 a 2,24750 a 1,59250 a 2,24750 a M.S.C 1,17250 a 1,55750 a 0,82750 b 1,38000 ab GOI 1,31500 a 1,60550 a 0,95500 b 1,23500 b D.M.S. 0,45593 0,83437 0,46000 0,87443 M.S.C. e GOI.: extratos de melo-de-so-caetano e goiaba. D.M.S.: diferena mnima significativa, as mdias seguidas das mesmas letras no diferem estatisticamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro. 25
Aps as 48 horas de inoculao, o aumento da concentrao do extrato de goiabeira promoveu reduo acentuada no crescimento do patgeno nas folhas de tangerina (Figura 5A). As mdias dessa varivel tiveram ajuste ao modelo linear simples com uma capacidade preditiva razovel, cujo coeficiente de determinao foi R 2 = 0,73. Nesta avaliao pode ser observado que a concentrao de 1% inibiu o desenvolvimento da leso em 34,12%, mas os melhores resultados foram registrados para a aplicao de 20, 10, 5% com inibio do crescimento radial em 76,3; 62 e 50,7% respectivamente (Figura 5A). Transcorridas as 192 horas aps a inoculao, observou-se tambm, que o aumento da concentrao do extrato de goiabeira promoveu reduo acentuada no crescimento do patgeno sobre as folhas de tangerina, onde as mdias se ajustaram ao modelo linear com tima capacidade preditiva (R 2 = 0,91). Constatou-se que as concentraes de extrato de 1, 5, 10, 20% diminuram a leso em 0,24, 35,14, 64,6 e 83,9%, respectivamente (Figura 5B). Extrato de goiabeira (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 y =1,6393 -6,434x R = 0,7368** A) Extrato de goiabeira (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0 1 2 3 4 5 y = 3,8393 -17,81x R = 0,9109** B) Figura 5. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de goiabeira em folhas de tangerina Dancy.
O aumento da concentrao do extrato de melo-de-So-Caetano promoveu reduo acentuada no crescimento da doena nas folhas de tangerina aps 48 horas de inoculao. As mdias dessa varivel tiveram ajuste ao modelo linear com uma tima capacidade preditiva com coeficiente de determinao (R 2 = 0,94). Observou-se nesta avaliao que a concentrao de 1% inibiu o crescimento radial da leso em 15,63%, mas os melhores resultados foram registrados para a aplicao de 20, 10, 5% com inibio do crescimento radial em 80, 48 e 38% respectivamente (Figura 6A). 26
O melo-de-So-Caetano (Momordica charantia L.) uma espcie pertencente famlia das cucurbitceas, comumente encontrada em reas urbanas e rurais, sendo conhecida e utilizada por suas propriedades medicinais (RIBEIRO et al., 2003). Esta planta de ocorrncia espontnea, desta maneira facilitando a vida dos citricultores, pois no ir onerar os custos, visto que o melo-de-so-caetano pode ser encontrado em diversos agroecossistemas (SILVA FILHO et al, 2013). Ao observar a figura 6B, perpassado o perodo 192 horas, constatou-se que o aumento da concentrao do extrato de melo-de-So-Caetano promoveu reduo acentuada no crescimento do patgeno nas folhas de tangerina, onde as mdias se ajustaram ao modelo linear com boa capacidade preditiva (R 2 = 90). Cientificou-se que as concentraes de extrato de 1, 5, 10, 20% diminuram o desenvolvimento da doena em 10,14, 42,36, 53,21 e 78,21%, respectivamente. Ao se estudar o efeito do extrato de melo-de-So-Caetano nos dois perodos de avaliao, pode-se inferir que a bioatividade na concentrao de 1% e 20% foi maior na primeira avaliao inibindo em 15,63% e 80% o crescimento do fungo, enquanto na segunda avaliao inibiu apenas 10,14% e 78, 1% (Figura 6). Extrato de melo-de-so-caetano (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4 y =1,8993-7,7406x R = 0,9435** A) Extrato de melo-de-so-caetano (%) 0 5 10 15 20 C r e s c i m e n t o
r a d i a l
( c m ) 0 1 2 3 4 5 y = 3,641 -15,042x R = 0,908** B) Figura 6. Crescimento lesional da mancha marrom de alternria em diferentes avaliaes 48 horas (A) e 192 horas (B) aps inoculao, mediante aplicao de diferentes concentraes (0%, 1%, 5%, 10% e 20%) do extrato de melo-de-So-Caetano em folhas de tangerina Dancy.
Observa-se na concentrao de 1% nos dois perodos de avaliao que os extratos no diferiram estatisticamente entre si e da testemunha inoculada, apesar de terem reduzido o crescimento do fungo em estudo. No entanto na concentrao de 5% aps as 48 horas os tratamentos diferiram da testemunha, mas no diferiram entre si (Tabela 3). 27
Ao se avaliar a tabela 3, verifica-se que nas concentraes de 10 e 20%, nos dois perodos de avaliao os extratos de melo-de-So-Caetano e goiabeira diferiram estatisticamente da testemunha, controlando a mancha marrom de alternria.
4.3. Avaliao do efeito de extratos vegetais de folhas de goiabeira e melo-de-So-Caetano no crescimento micelial de A. alternata f.sp. citri
Extratos de melo-de-So-Caetano e goiabeira na concentrao de 20% (48 horas) inibiram em 100% o crescimento micelial de todos isolados testados de Alternaria alternata f sp. citri (Figura 7). Tabela 3. Valores mdios e teste de mdias para as variveis avaliaes (AV1) avaliao 1 (48h) e (AV2) avaliao 2 (192h), nos tratamentos em suas respectivas concentraes, no controle da mancha de alternaria em folhas de tangerina Dancy, Lagoa Seca, PB, 2013. Tratamentos ---------- concentrao 1%-------- ---------- concentrao 5%-------- AV1 AV2 AV1 AV2 Controle 2,11000 a 4,04500 a 2,11000 a 4,04500 a M.S.C 1,8000 a 3,63000 a 1,30500 b 2,33500 a GOI 1,4000 a 4,03500 a 1,04500 b 2,62000 a D.M.S. 0.80250 1,83811 0.55266 1,80588 ---------- concentrao 10%------- ---------- concentrao 20%------- Controle 2,11000 a 4,04500 a 2,11000 a 4,04500 a M.S.C 1,08500 b 1,89500 b 0,42500 b 0,88500 b GOI 0,80500 b 1,43000 b 0,52500 b 0,65500 b D.M.S. 0,48046 1,40106 0,42529 1,30694 M.S.C. e GOI.: extratos de melo-de-So-Caetano e goiaba. D.M.S.: diferena mnima significativa, as mdias seguidas das mesmas letras no diferem estatisticamente pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade de erro. 28
Tratamentos Testemunha Melo S.C. Goiabeira C r e s c i m e n t o
m i c e l i a l
( c m ) 0 1 2 3 4 5 6 7 a b b
Figura 7. Efeito da aplicao de extratos de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira, na concentrao de 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri., em placas de Petri. A utilizao do extrato de goiabeira e melo-de-So-Caetano a 1% inibiu o crescimento do fitopatgeno em 21,1% aps 48 horas de inoculao (Figura 8). O extrato de goiabeira nas concentraes de 5, 10 e 20% foi capaz de inibir o crescimento do patgeno em 100% (Figura 8A). O extrato de melo-de-So-Caetano nas concentraes de 10 e 20% inibiu o crescimento do patgeno em 100% e na concentrao de 5% em 58,7% (Figura 8B). Extrato de melo-de-so-caetano 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
m i c e l i a l
( c m ) 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 Extrato de goiabeira 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
m i c e l i a l
( c m ) 0,0 0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 A) B)
Figura 8. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So-Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri em placas de Petri em 48 horas. Aps 96 horas da adio do fungo ao meio de cultura com os extratos, verificou-se que as concentraes (1, 5, 10 e 20%) dos extratos de goiabeira e melo-de-So-Caetano continuaram inibindo o crescimento micelial de A. alternata f.sp. citri (Figura 9AB). O extrato de goiabeira na concentrao de 1% inibiu em 41,8% enquanto as demais concentraes inibiram em 100% o 29
crescimento do fungo (Figura 9A). O extrato melo-de-So-Caetano no mesmo perodo de avaliao foi capaz de inibir o crescimento do fungo em 46,9%; 52,5%; 100% e 100% para as concentraes de 1, 5, 10 e 20%, respectivamente. Extrato de melo-de-so-caetano 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
m i c e l i a l
( c m ) 0 1 2 3 4 5 Extrato de goiabeira 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
m i c e l i a l
( c m ) 0 1 2 3 4 5 A) B)
Figura 9. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So-Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri, em placas de Petri, aps 96 horas. Ao transcorrer das 120 horas aps a adio do fungo ao meio de cultura com os extratos constatou-se que esses continuaram inibindo o crescimento de A. alternata f.sp. citri (Figura 10AB). O extrato de goiabeira na concentrao de 1% inibiu o crescimento do fungo em 21,5% e em 100% para as concentraes de 5, 10 e 20% (Figura 10A). Cientificou-se tambm reduo no crescimento do fungo em 41,2 e 53,5% para as concentraes de 1% e 5%, enquanto as demais concentraes inibiram em 100%, quando fundido o extrato de melo-de-so-caetano ao meio de cultura (Figura 10B) Extrato de melo-de-so-caetano 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
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( c m ) 0 1 2 3 4 5 6 Extrato de goiabeira 0% 1% 5% 10% 20% C r e s c i m e n t o
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( c m ) 0 1 2 3 4 5 6 A) B) Figura 10. Efeito da aplicao de extratos de folhas de goiabeira (A) e melo-de-So-Caetano (B) nas concentraes de 0%, 1%, 5%, 10% e 20% no crescimento micelial de Alternaria alternata f.sp. citri, em placas de Petri, aps 120 horas. 30
5.0. CONCLUSES
A aplicao dos extratos vegetais de folhas de melo-de-So-Caetano e goiabeira controlaram a mancha-marrom-de-alternria em frutos e folhas destacados de tangerina Dancy; As concentraes dos extratos de 20% foram mais efetivas no controle da doena do que nas demais concentraes testadas (1%; 5%; 10%; 20%). A atividade fungitxica dos extratos de melo-de-So-Caetano e goiabeira possuem efeito dose dependente sob condies controladas.
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6.0. REFERNCIAS
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