Unidad 8

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BIOLOGIA

CURSO PAU25
Pg.
UNIVERSIDAD MIGUEL HERNNDEZ Prof. Jos H. Villanueva Roig
1 Unidad VIII
Tema 8
UNIDAD DIDCTICA VIII: Gentica Molecular.
(3 sesiones)

1. NDICE:
1 Sesin:
8.1.- EL ADN COMO PORTADOR DE LA INFORMACIN GENTICA.
8.2.- CONCEPTO DE GEN.
8.3.- EL CDIGO GENTICO.
8.4.- DUPLICACIN DEL ADN.
2 Sesin:
8.5.- TRANSCRIPCIN Y TRADUCCIN DEL MENSAJE GENTICO.
3 Sesin:
8.6.- ALTERACIONES EN LA INFORMACIN GENTICA.
8.7.- LA INGENIERA GENTICA: SUS TCNICAS Y APLICACIONES EN
MEDICINA Y EN AGRICULTURA.

2. INTRODUCCIN GENERAL A LA UNIDAD Y ORIENTACIONES PARA EL
ESTUDIO
-En esta unidad se intentar que los alumnos/as conozcan todo lo referente al
material gentico como molcula informativa, estudiando las vas mediante las
cuales la informacin o mensaje gentico se transfiere hasta la aparicin de
protenas especficas de la clula. Igualmente se explicara la tecnologa que
permite modificar dicha informacin de modo dirigido para conseguir ciertos fines
determinados tanto en medicina como para fines industriales.

3. OBJETIVOS ESPECFICOS
- Conocer la estructura del ADN y justificar porqu es el portador de la informacin
gentica.
- Conocer el concepto de gen.
- Conocer de una manera sencilla los mecanismos de la replicacin, transcripcin y
traduccin y saber interpretar esquemas sencillos de estos procesos.
- Conocer las caractersticas del cdigo gentico: universalidad, degeneracin,
tripletes-aminocidos.
- Saber obtener a partir de una secuencia de ADN el correspondiente ARN mensajero
(ARNm), y a partir de este el polipptido empleando tablas de correspondencia
entre tripletas y aminocidos.
- Conocer el concepto de mutacin.
- Conocer las tcnicas ms importantes de Ingeniera gentica y sus aplicaciones.
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4. DESARROLLO DE LOS CONTENIDOS

1 Sesin:


- En 1944, Avery demostr que el ADN constituye el material gentico. Este hecho
constituye el nacimiento de la Gentica molecular.
- En 1950, Chargaff demostr que la composicin de bases nitrogenadas en los ADN
vara segn la especie considerada, y estableci la llamada ley de equivalencia entre
las bases (A-T y C-G).
- En 1953, Watson y Crick establecieron la estructura de estas molculas que
constituyen, sin ninguna duda, el material gentico.

8.1.1.-Dogma central de la Biologa Molecular
- La informacin gentica se almacena en la doble hlice del ADN, cuya
estructura es idnea para mantener la integridad de dicha informacin.
- Cuando una clula se divide, transmite su informacin gentica a las clulas
hijas; para ello, duplica previamente su ADN mediante el mecanismo de la
replicacin.
-En 1970, Crick enunci el llamado dogma central de la Biologa molecular:
"la informacin gentica contenida en el ADN es transcrita en forma de ARN y
traducida a protenas"
DNA RNA Protena
Replicacin
Transcripcin
Transcripcin
Inversa
Traduccin

(Los virus con ARN constituyen la nica excepcin a esta regla).
- Sin embargo, hay que observar que, no todos los genes se expresan a la
vez, es decir, no todas las protenas se sintetizan al mismo tiempo.
El control de la expresin gnica se puede realizar de distintas formas, pero
casi siempre tiene lugar mediante la regulacin de su transcripcin.

8.2.- CONCEPTO DE GEN
- Se sigue aceptando la ya clsica definicin de Beadle-Tatum (1948) de un gen-una
cadena polipeptdica, es decir, un segmento de ADN que codifica una sola protena.
En los casos en que la misma secuencia de ADN codifica para ms de un polipptido
(a causa de la maduracin del ARN), se considera que en el cromosoma se
superponen dos o ms genes.

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- La clave que establece la correspondencia entre una secuencia de bases
nitrogenadas del ARNm con una secuencia de AA de una protena es lo que define el
cdigo gentico.
- La unidad de esta clave gentica o unidad codificadora es el codn y est
constituido por un triplete de bases nitrogenadas del ARNm al que corresponde un
determinado AA de la protena.

-Caractersticas del cdigo gentico:
1) El cdigo posee toda la informacin para llevar a cabo su funcin (control del
metabolismo) y es lo suficientemente estable como para que, tras la reproduccin,
los descendientes estn dotados de la misma informacin.

2) El cdigo es degenerado, lo que significa que existen AA que son codificados por
ms de un codn (excepto el triptfano y la metionina, los dems AA estn
codificados por ms de un codn).
Esta degeneracin no es uniforme, ya que no todos los AA se codifican por el mismo
nmero de tripletes (por ejemplo: la serina lo est por seis y la tironina por dos).
3) Existen codones-stop que no codifican AA y actan a modo de seales que indican
el final de la traduccin. Asimismo, hay un codn (AUG, codificador de la metionina)
que acta como seal de iniciacin de la traduccin del mensaje.
4) No hay imbricacin o solapamiento de bases, es decir, cada base slo pertenece
a un codn.
5)El cdigo es universal, pues es el mismo en todos los seres vivos.

8.4.- DUPLICACIN DEL ADN: REPLICACION.

- Messelson y Stahl (1958) demostraron que la hiptesis semiconservativa era la
correcta, adems de congruente con el modelo de la doble hlice de Watson y Crick.
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-La duplicacin del ADN se produce de acuerdo con las siguientes
caractersticas:

Molcula de DNA
parental
Primera Generacin
DNA hbrido

1) Es semiconservativa.
2) Bidireccional: a partir de un punto
dado del cromosoma, la replicacin
progresa en dos direcciones
3) En virus y bacterias hay un nico punto
de inicio de la replicacin, mientras que
en eucariotas hay varios.
4) La replicacin avanza por adicin de
desoxirribonucletidos-monofosfato
(dNMP) en el sentido 5' 3'.
5) Semidiscontinua: una hebra se replica
de forma continua y la complementaria
de modo discontinuo (fragmentos de
Okazaki).
6) La iniciacin de la sntesis de cada
hebra y de cada fragmento requiere de
un cebador o primer (ARN).

ENZIMAS DE LA REPLICACIN
- Las ms importantes son las ADN polimerasas, que catalizan la formacin de los
enlaces fosfodister entre nucletidos y van aadiendo el nucletido complementario
al de la hebra molde.
Para ello, utilizan desoxirribonucletidos-trifosfato (dNTP) que, adems, aportan la
energa necesaria para la reaccin y desprenden restos de fosfato inorgnico (P):
(Cadena polinucletida)
n
+ dNTP (Cadena polinucletida)
n+1
+ P+P
- Las ADN polimerasas son diferentes en procariotas y en eucariotas, aunque en todos
los casos requieren un ADN-molde y un fragmento polinucletido que proporcione el
grupo 3' -OH libre al que ir aadiendo desoxirribonucletidos. Este segmento es un
ARN cebador llamado tambin iniciador o primer.
5-P
3-OH 5-P
3-OH
Sentido de Sntesis (Replicacin): 5 3
Sentido de Lectura del molde: 3 5
DNA molde
Cebador(primer)

-Otras enzimas importantes son:
1) Primasas (ARN polimerasas dependientes de ADN): Sintetizan el ARN cebador
usando como molde una hebra de ADN
2) Girasas (topoisomerasas): Actan desenrollando el ADN
3) Helicasas: Separan las dos hebras del ADN, para que cada una acte de molde.
4) Protenas SSB (single strand-binding) (estabilizadoras): Se unen a las hebras,
estabilizndolas (mantenindolas separadas) mientras tiene lugar la replicacin.
Actan conjuntamente con las helicasas.
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5) Nucleasas: Rompen los enlaces fosfodister entre nucletidos, dando lugar a un
'punto de origen' o inicio de replicacin.
6) Ligasas: Unen fragmentos adyacentes mediente enlaces fosfodister.

3
3
3
5
5
5
3
SSB
(protenas fijadoras
de monohebra)
SSB
SSB
Helicasa
PRIMOSOMA
(sntesis de primer)
DNApol III
Holoenzima
(replicasa)
DNA-ligasa
(cerrar Nicks)
DNApol I
(reparacin)
P
P
"Primer"
P
Hebra Lider
Hebra Retardada
MODELO DE HORQUILLA REPLICATIVA DE E.coli

-En eucariotas sigue el mismo esquema bsico para el mecanismo, aunque ofrece
algunas diferencias destacables:
a) la clula eucariota contiene ms ADN y sus molculas tienen mayor longitud
(ms o menos 50 mm., frente a poco ms de 1 mm. en bacterias).
b) debido a ello, la replicacin comienza simultneamente en varios 'puntos de
origen', con lo cual se acorta el tiempo del proceso, formndose numerosas
horquillas de replicacin.
c) el ADN de eucariotas consta de replicones (unidades de replicacin) alineados
uno tras otro (suele haber alrededor de 100 replicones por cromosoma).
d) cada replicn tiene un punto de origen (O), donde se inicia la replicacin, y dos
puntos de terminacin (T), uno a cada lado del origen, en los que acaba ese
replicn y se encuentra el adyacente.
e) los fragmentos de Okazaki son ms pequeos (alrededor de 100-200
nucletidos) que en procariotas.

2 Sesin:

8.5.1.- Transcripcin:
8.5.1.- Transcripcin en procariotas
-La transcripcin es el paso de una secuencia de ADN a una secuencia de
ARN (ya sea ARNm, ARNr o ARNt).
-Etapas de la transcripcin:
1) Iniciacin:
-La ARN polimerasa (ARN pol), se asocia con un factor sigma, que
permite a esta enzima reconocer y asociarse a esa regin concreta del
ADN que llamamos promotor (regin reguladora).
El promotor, a veces, es comn a varios genes.
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En el promotor se han descubierto dos 'secuencias de consenso',
iguales o parecidas a TTGACA y TATAAT (que se encuentran a distintas
distancias antes del punto de inicio o regin estructural).
- Ahora la ARN pol est en condiciones de separar las dos hebras del
ADN y comenzar su 'trabajo' (polimerizacin de ARN).
- El factor sigma se separa de la ARN pol y se inicia la transcripcin de la
regin estructural con la incorporacin del primer ribonucletido trifosfato
(rNTP), siguiendo la ley de complementariedad de bases.
2) Elongacin:
- La sntesis progresa en sentido 5'->3', con una velocidad que vara en
funcin de la formacin de bucles, aunque en general se transcriben 20-
50 nucletidos por segundo.
3) Finalizacin:
- La ARN pol concluye el proceso al encontrar otra secuencia especfica
(rica en C y G) que acta como 'seal stop'.
- El ARN recin sintetizado se desprende y el ADN recupera su estructura
de doble hlice.
4) Maduracin:
- Si el ARN formado es ARNm, no hay maduracin; si se trata de ARNr o
ARNt, hay un transcrito primario que sufre un proceso de 'cortes y
empalmes'.
El ARNm de procariotas puede originar varias protenas (policistrnico).
-Para terminar, apuntaremos dos cosas ms:
a) Durante la transcripcin, slo se transcribe un fragmento (cordn
codogentico) de una de las hebras del ADN, la hebra molde (la otra se
llama 'complementaria').
b) No todas las secuencias molde estn en la misma hebra; por ello, hay
genes que se transcriben a partir de una hebra, mientras otros tienen su
molde en la contraria.

8.5.2.- Transcripcin en eucariotas

- La base mecnica o fundamento del mecanismo de la transcripcin es similar
al descrito en procariotas, aunque hay que considerar tres aspectos:
a) son varias las ARN polimerasas que intervienen.
b) intervienen tambin unas protenas reguladoras llamadas 'factores de
transcripcin' (TF).
c) el proceso (no conocido del todo) es ms complejo porque el ADN est
asociado a histonas y, adems, el ARNm contiene secuencias
codificadoras (exones) y otras no codificadoras (intrones).
-Las ARN pol que intervienen son:
a) ARN pol I
-Interviene en la sntesis de las subunidades grandes de los ribosomas,
que se elaboran separadamente de las subunidades pequeas.
b) ARN pol II
-Responsable de la sntesis de los precursores de los ARNm, que se
traducirn en protenas.
c) ARN pol III
-Controla la sntesis de los ARNt, las subunidades pequeas de los
ribosomas y de las histonas.

-En cuanto a los TF:
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a) son protenas reguladoras capaces de identificar al promotor.
b) se unen a la ARN pol para facilitar la ubicacin correcta de sta sobre la
hebra de ADN y posibilitar la transcripcin.
c) son especficas para cada promotor.
- En el caso de la sntesis de ARNm, se distinguen las etapas siguientes:
1) Iniciacin:
- La ARN pol II se asocia a un factor de transcripcin, que permite a la
enzima reconocer al promotor ('caja TATA o CAAT') que est a cierta
distancia del punto de inicio de la transcripcin.
- Ahora, la ARN pol II est en condiciones de comenzar el proceso. El factor
de transcripcin se separa de la ARN pol II.
2) Elongacin:
- El proceso de sntesis se ejecuta en sentido 5'->3', y al cabo de unos 300
nucletidos transcritos se aade la 'caperuza de metil-G-trifosfato' al
extremo 5'.
3) Finalizacin:
- La finalizacin de la sntesis del ARNm parece estar ligada con la
secuencia TTATTT.
- Antes de concluir la sntesis se aade al extremo 3' la llamada 'cola de poli-
A' (ms o menos unos 200 nucletidos de adenina).
- El resultado es la formacin de una molcula de ARNm llamada transcrito
primario.
4) Maduracin (diferencial):
- Se produce en el ncleo, donde los intrones son eliminados mediante
procesos de corte y unin en los que intervienen ribozimas y ARN ligasas.
- Un determinado transcrito primario puede sufrir diferentes cortes y
empalmes que originan diversas molculas de ARNm con informacin para
diferentes protenas. Cada ARNm, por tanto, origina una protena (este
ARNm siempre es monocistrnico).
- En los casos del ARNt y ARNr, los transcritos primarios elaborados por las
ARN pol I y III, tambin sufren un proceso de maduracin algo distinto, que
incluye la adquisicin de su correcta configuracin espacial.

8.5.2.- Traduccin:

- Antes de la polimerizacin se activan los AA: cada uno de ellos se une a un
determinado ARNt, constituyendo un complejo de transferencia.
Los ARNt de los complejos de transferencia determinan el punto donde se debe unir
cada AA durante la sntesis proteica. Por esta razn, la unin del AA al ARNt
correspondiente requiere gran precisin y est catalizada por las enzimas aminoacil-
ARNt-sintetasas (hay 20, una para cada AA).
- Las cadenas proteicas se sintetizan desde su extremo amino (-NH
2
) terminal hacia su
extremo carboxilo (-HOOC). La reaccin fundamental de la traduccin es la formacin
de los enlaces peptdicos entre el grupo -HOOC de la cadena que crece y el grupo -
NH
2
del AA que se incorpora.

-Etapas:
1) Iniciacin del proceso: Tiene lugar cuando el ARNm se dispone linealmente en la
subunidad inferior del ribosoma, comenzando con su tripleta AUG (>Metionina),
avisadora del comienzo de sntesis. El complejo de transferencia Met-ARNt iniciador
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se coloca en el lugar P del ribosoma complementando su anticodn con el codn del
ARNm y comenzando as la sntesis de una protena.
2) Alargamiento de la cadena peptdica: Se trata de una etapa cclica en la que pueden
distinguirse tres momentos fundamentales:
1/ El de la unin del complejo de transferencia AA2-ARNt especfico al codn
correspondiente, que se sita en el lugar A del ribosoma.
2/ El de la formacin del enlace peptdico entre los dos aminocidos considerados
hasta ahora, quedando libre el ARNt iniciador y constituyndose un dipptido unido al
ARNt que ocupa el lugar A.
3/ El de la translocacin, en el que se producen tres desplazamientos:
* el ARNt iniciador, libre de la Metionina y que ocupa el lugar P, deja el ribosoma y
vuelve al citoplasma, donde podr aceptar otra vez su aminocido.
* el complejo dipptido-ARNt del lugar A se traslada al lugar P, debido a que el
ribosoma se desplaza el espacio correspondiente a tres nucletidos en el sentido de
la lectura del ARNm.
* el lugar A queda vaco y en condiciones de albergar otro complejo de transferencia
AA3-ARNt, empezando as un nuevo ciclo.
3) Terminacin: La finalizacin de la cadena polipeptdica se produce cuando el
ribosoma alcanza un codn de terminacin ("stop").

3 Sesin:

-Una mutacin es cualquier cambio del material gentico que es detectable y
heredable. Por tanto, ha de afectar a las clulas germinales.
-Dependiendo del nivel en que se producen los cambios se distinguen tres categoras
de mutaciones:
Genmicas: si afectan al genoma modificando el nmero de cromosomas o de
juegos cromosmicos.
Cromosmicas: si afectan a la estructura de uno o varios cromosomas,
respecto a la secuencia de sus genes.
Gnicas: si afectan a la secuencia de nucletidos de un gen.

AGENTES MUTAGNICOS Y ALTERACIONES
-Las mutaciones pueden surgir de forma espontnea (mutaciones naturales) o ser
inducidas de manera artificial (mutaciones inducidas) mediante radiaciones y
determinadas sustancias qumicas a las que llamamos agentes mutgenos. Estos
agentes aumentan significativamente la frecuencia normal de mutacin.
As pues, distinguimos:
1) Radiaciones, que, segn su efecto, pueden ser:
a) No ionizantes, como los rayos ultravioleta (UV) que son muy absorbidos por el
ADN y favorecen la formacin de enlaces covalentes entre pirimidinas contiguas
(dmeros de timina, por ejemplo) y la aparicin de formas tautomricas que
originan mutaciones gnicas.
b) Ionizantes, como los rayos X y los rayos gamma, que son mucho ms
energticos que los UV; pueden originar formas tautmricas, romper los anillos
de las bases nitrogenadas o los enlaces fosfodister con la correspondiente rotura
del ADN y, por tanto, de los cromosomas.
2) Sustancias qumicas que reaccionan con el ADN y que pueden provocar las
alteraciones siguientes:
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a) Modificacin de bases nitrogenadas. As, el HNO
2
las desamina, la
hidroxilamina les adiciona grupos hidroxilo, el gas mostaza aade grupos metilo,
etilo...
b) Sustitucin de una base por otra anloga. Esto provoca emparejamientos
entre basses distintas de las complementarias.
c) Intercalacin de molculas. Se trata de molculas parecidas a un par de bases
enlazadas, capaces de alojarse entre los pares de bases del ADN. Cuando se
produce la duplicacin pueden surgir inserciones o delecciones de un par de
bases con el correspondiente desplazamiento en la pauta de lectura.

CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES
-En resumen, las mutaciones son la base de:
a) el origen y la evolucin de las especies.
b) la variabilidad gentica dentro de cada especie.
c) la aparicin de enfermedades hereditarias.

8.7.- LA INGENIERA GENTICA: SUS TCNICAS Y APLICACIONES EN
MEDICINA Y EN AGRICULTURA.

- La Ingeniera Gentica es una nueva ciencia que trata de la manipulacin de los
genes y de sus productos. Sus mtodos de trabajo son tambin conocidos como
tcnicas del ADN recombinante.
La Ingeniera Gentica naci como consecuencia del descubrimiento de que algunas
bacterias resistentes a los fagos tienen unas enzimas que cortan en trozos pequeos
las molculas de ADN extraas a las mismas, antes de que puedan replicarse o
transcribirse. Estas enzimas se conocen como enzimas de restriccin o restrictasas
(son endonucleasas).
- Las tcnicas del ADN recombinante bsicamente consisten en lo siguiente:
a) se toman fragmentos de ADN de distintos organismos y se unen 'in vitro'
(proceso llamado 'recombinacin in vitro'); el ADN que resulta se conoce como
ADN recombinante.
b) el ADN recombinante se introduce en otras clulas, en las cuales se logra la
expresin de sus genes en forma de protenas.
c) esas protenas pueden tener valor por s mismas si es el caso, por ejemplo, de
una hormona con aplicacin mdica.
-La Ingeniera Gentica utiliza otras tcnicas de trabajo, como son las siguientes:
1) Obtencin de fragmentos de ADN de tamao tal que pueden ser estudiados y
manipulados. Para ello se utilizan:
a) enzimas de restriccin (se conocen ms de 200).
b) retrotranscriptasas.
2) Clonacin gnica para la obtencin de gran cantidad de fragmentos de ADN. Se
consigue por dos mtodos:
a) la clonacin molecular.
b) la PCR (reaccin en cadena de la polimerasa).
3)Determinacin de la secuencia de nucletidos de fragmentos de ADN.

8.7.1.- Obtencin de fragmentos de ADN.
-Obtencin por enzimas de restriccin:
-El ADN de cualquier organismo puede ser cortado en fragmentos (fragmentos
de restriccin) lo suficientemente pequeos para ser analizados y
manipulados, gracias a las restrictasas.
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-Las restrictasas son endonucleasas que poseen muchas bacterias y que
tienen la propiedad de cortar el ADN extrao que penetra en la clula. Lo
cortan por sitios especficos llamados secuencias de reconocimiento,
formadas por cuatro u ocho pares de bases, que, en la bacteria original, estn
protegidas para evitar que se destruya su propio ADN.
-Estas enzimas 'tijeras biolgicas' cortan el ADN de forma que en cada extremo
queda un trozo de hebra monocatenaria formada por las bases de la secuencia
de reconocimiento.
Estos extremos se llaman adherentes o cohesivos, ya que es por ellos por
donde se pueden unir a otros fragmentos de ADN cortados por la misma
enzima de restriccin, al ser sus bases complementarias.

-Obtencin por retrotranscriptasas:
-Esta tcnica se utiliza tambin para obtener fragmentos de ADN, cada uno de
los cuales corresponde a un gen estructural, cuando se conoce la secuencia de
aminocidos de una protena.
-Consiste en sintetizar en 'in vitro' el ARNm correspondiente, o bien aislar de la
clula el ARNm deseado (hay tcnicas para conseguirlo). Entonces, utilizando
el ARNm adecuado, mediante transcriptasa inversa, se sintetiza el ADN
correspondiente.

8.7.2.- Clonacin gnica.
-Los trabajos genticos necesitan gran cantidad de fragmentos de ADN idnticos para
poder manipularlos, y para ello se siguen dos mtodos:
1) Clonacin molecular:
- Consiste en la formacin de mltiples copias de un determinado fragmento de
ADN, mediante el poder replicativo de organismos vivos (bacterias).
Para ello es necesario:
a) unir el fragmento de ADN del que se quieren obtener copias, obtenido
por una restrictasa, a otro ADN, llamado vector de clonacin. (Los
vectores de clonacin son pequeos elementos genticos, tales como
plsmidos o fagos).
b) introducir el ADN resultante (recombinante) en clulas hospedadoras
(por ejemplo, bacterias) donde se replica formando nuevas copias.
- Para realizar la unin del fragmento deseado al vector escogido, ste tambin
debe ser cortado por la misma restrictasa utilizada para obtener el fragmento.
De esta manera los segmentos cohesivos de uno y otro fragmento estn
formados por bases complementarias y pueden unirse (hibridacin). La ADN-
ligasa cataliza la unin de los extremos de los fragmentos.

Se consigue as que el fragmento de ADN deseado se una al ADN del vector,
formando un ADN recombinante por la unin de ambos.
- Para unir el ADN recombinante en las clulas hospedadoras (bacterias) se
utilizan las tcnicas de transformacin, transduccin y conjugacin bacterianas
(que veremos en el siguiente tema).
En cualquier caso (sese plsmidos o fagos), las copias del ADN recombinante
obtenidas en las clulas hospedadoras, se conocen como clones.

2) Tcnica PCR (reaccin en cadena de la polimerasa):
-Gracias a esta tcnica se replican pequeos fragmentos de ADN 'in vitro', a
una velocidad mucho mayor que mediante la clonacin molecular.
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(A ttulo anecdtico, se produce un ciclo cada 4 o 5 minutos, lo que supone
aproximadamente unos 100.000 millones de copias en una sola tarde...)
-El procedimiento PCR requiere conocer las secuencias de bases del
fragmento de ADN que se pretende replicar.
Con estas secuencias se deben sintetizar pequeas cadenas complementarias
de ADN (de unos 20 nucletidos), que actuarn como cebador o primer para la
ADN-polimerasa.
-En resumen, la tcnica PCR se desarrolla as:
a) el fragmento de ADN a replicar se introduce en una disolucin que
contiene ADN-pol.
b) se aaden desoxirribonucletidos en cantidad y las molculas de
cebador sintetizadas.
c) al calentar, se separan las hebras complementarias de los fragmentos
de ADN.
d) si se enfra, se unen los cebadores a las hebras simples de
nucletidos, lo cual es reconocido por la ADN pol que comienza a aadir
nucletidos formando la hebra complementaria.
e) calentando y enfriando alternativamente la solucin, se pueden obtener
millones de copias de ADN en perodos de tiempo cortos.

8.7.3.- Secuenciacin del ADN.

- Una de las tcnicas ms empleadas para la determinacin de la secuencia de
nucletidos de un ADN es la conocida 'tcnica de terminacin de Singer (Nobel
Qumica, 1980) o tambin llamada 'tcnica del didesoxi' (basada en la sntesis del
ADN).
Se la califica as porque precisa de didesoxirribonucletidos, que no son ms que
nucletidos que han perdido el grupo -OH del carbono 3'.

As pues, lo que va a suceder cuando los nucletidos se unen es que si en un
momento dado se encuentran con un 'didesoxi', la unin no se realizar y la cadena
terminar ah.

APLICACIONES PRCTICAS DE LA INGENIERA GENTICA
-Las aplicaciones son de gran inters e importancia, sobre todo, en tres mbitos: en
medicina, en agricultura y en animales.
EN MEDICINA
-Las aplicaciones se pueden concretar en cuatro aspectos:
1) La produccin de sustancias con efectos teraputicos.
Entre estas sustancias podemos citar a ttulo de ejemplos ms relevantes:
- Somatostanina (SS) que, segregada por el hipotlamo, inhibe la sntesis de
somatotropina (GH) u hormona del crecimiento.
- Insulina que, segregada por el pncreas, regula la concentracin de glucosa
en sangre.
-Somatotropina (GH) que, segregada por la adenohipfisis controla y regula el
normal crecimiento (evitando enanismo).
- Interferones, que son protenas elaboradas por clulas animales en respuesta
a una infeccin vrica.
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- Factor VIII antihemoflico (AHF), es una globulina que estimula a las
plaquetas (para la coagulacin sangunea).
- Renina, es una enzima que cuaja la leche, necesaria para la elaboracin de
quesos (o para algunos frmacos).
- Celulasa, enzima hidroltica de la celulosa, es utilizada en algunos preparados
digestivos.
- Vacunas recombinantes, como la de la hepatitis B.
2) El diagnstico de enfermedades hereditarias.
Para ello se utilizan tcnicas como la amniocentesis, basadas en la extracin de
clulas amniticas del feto. Se pueden diagnosticar enfermedades como la
hemofilia, la anemias falciforme, la diastrofia muscular y otras, que son debidas a
mutaciones genticas.
3) La identificacin de genes humanos especficos.
Se trata de localizar e identificar el gen responsable de una enfermedad que se
sabe que es herditaria. Aunque es un problema tan arduo como el de 'encontrar
una aguja en un pajar', se ha logrado algn xito como es el caso de la
identificacin de la fibrosis qustica (enfermedad, sobre todo, pulmonar).
4) La terapia gnica.
A grandes rasgos, este tipo de terapia o curacin de enfermedades consiste en
reemplazar en las clulas un gen defectuoso, causante de la enfermedad, por un
gen normal.
Como realizar tal cambio en todas las clulas de una persona es imposible, los
ensayos se realizan introduciendo genes sanos en clulas seleccionadas. Por
ejemplo, si la enfermedad es debida al mal funcionamiento de las clulas madre de
la sangre, en la mdula sea, es en esas clulas donde se lleva a cabo la terapia.

EN AGRICULTURA
-En el mbito de la agricultura siempre se ha pretendido obtener plantas cultivables,
cuyos rendimientos sean ptimos.
Desde hace muchos aos se utilizan los conocimientos de la Gentica, aunque
muchas veces de una forma inadvertida, y en este sentido deben entenderse los
procesos de seleccin gnica realizados provocando cruces y originando poliploidas,
para luego seleccionar aquellas plantas de buenos resultados y multiplicarlas
asexualmente, formando clones con ellas.
-La aplicacin de tcnicas de Ingeniera Gentica estn dando resultados
espectaculares en la obtencin de plantas transgnicas, es decir, plantas a las que
se ha introducido ADN clonado (recombinante) y que lo han incorporado a su genoma
de forma estable.
Los principales caracteres conseguidos en las plantas transgnicas, son:
a) Resistencia a herbicidas, a insectos y enfermedades microbianas.
b) Incremento del rendimiento fotosinttico.
c) Mejora en la calidad de los productos agrcolas.

EN ANIMALES
- En animales, la aplicacin de las tcnicas de la Ingeniera Gentica persiguen los
objetivos siguientes:
a) favorecer la investigacin biomdica para estudiar la fisiologa de los genes y
la biologa del desarrollo.
BIOLOGIA

CURSO PAU25
Pg.
13 Unidad VIII
b) mejorar la productividad o la resistencia a las enfermedades de animales
tiles para los hombres.
c) produccin de protenas de valor farmacolgico.

5. RESUMEN
1 Sesin:
8.1.1.-Dogma central de la Biologa Molecular

8.2.- CONCEPTO DE GEN


8.4.- DUPLICACIN DEL ADN: REPLICACION.
ENZIMAS DE LA REPLICACIN

2 Sesin:

8.5.1.- Transcripcin:
8.5.1.- Transcripcin en procariotas
8.5.2.- Transcripcin en eucariotas
8.5.2.- Traduccin:

3 Sesin:
AGENTES MUTAGNICOS Y ALTERACIONES
CONSECUENCIAS DE LAS MUTACIONES

8.7.- LA INGENIERA GENTICA: SUS TCNICAS Y APLICACIONES EN MEDICINA
Y EN AGRICULTURA.
8.7.1.- Obtencin de fragmentos de ADN.
8.7.2.- Clonacin gnica.
1) Clonacin molecular:
2) Tcnica PCR (reaccin en cadena de la polimerasa):
8.7.3.- Secuenciacin del ADN.
APLICACIONES PRCTICAS DE LA INGENIERA GENTICA

BIOLOGIA

CURSO PAU25
Pg.
14 Unidad VIII

6. BIBLIOGRAFA
Biologa / 2 Bachillerato
Mtodo @pruebas
ISBN: 978-84-481-6708-0
Editorial:
McGraw-
Hill
Fernandez (y otros autores)
BIOLOGA: Ed. Bruo (2009). ISBN:
978-84-216-6443-8
Editorial:
Bruo,
S,L.
Panadero Cuartero (y otros)
Biologa 2 Bto.
ISBN: 978-84-706-5820-4
Editorial:
ECIR
Varios Autores
Biologa
ISBM: 978-84-977-1062-6

Editorial:
EDITEX
Salamanca (y otros)

- Cualquiera de los libros recomendados actualmente en los institutos para la
asignatura de Biologa de 2 de Bachiller.

7. ACTIVIDADES
Explicaciones de aula.
Discusiones y debates.
Planteamiento de trabajos en la biblioteca, buscando informacin (en libros,
revistas, peridicos...) sobre los diversos temas.
Consultar ciertas webs especializadas de Biologa.
Ayuda mediante el correo electrnico.

8. GLOSARIO

9. EJERCICIOS DE AUTOCOMPROBACIN
Durante el desarrollo de la clase el profesor interrogar frecuentemente a los alumnos con la
finalidad de evaluar los conocimientos adquiridos y su propia labor con la finalidad de detectar
los errores en el aprendizaje y en la enseanza.

10. SOLUCIONES A LOS EJERCICIOS DE AUTOEVALUACIN

Unidad 8

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