Manual de Laboratorio de Biologa Tisular

Primera edicin, abril de 2007

Primera redigitalizacin, abril de 2008
Segunda redigitalizacin, agosto de 2008
DR

Universidad Nacional Autnoma de Mxico.

Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia.
Ciudad Universitaria, Mxico 04510, DF.
Hecho en Mxico
ISBN 970-32-4054-2
DIRECTORIO
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Dr. Jos Narro Robles
Rector
Dr. Sergio Alcocer Martnez de Castro
Secretario General
Mtro. Juan Jos Prez Castaeda
Secretario Administrativo
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Dr. Francisco Jos Trigo Tavera
Director
Dra. Silvia Elena Buntinx Dios
Secretaria General
LC Alfonso Ayala Rico
Secretario Administrativo
MVZ Vernica Fernndez Saavedra
Secretaria de Comunicacin
El Comit Editorial de la FMVZ agradece al Dr. Miguel Angel Cornejo Corts su valiosa participacin
como revisor tcnico de esta obra.
Correccin de estilo: Lic. Marcela Chapou Videgaray
Cuidado de la edicin: MVZ Laura Edith Martnez lvarez
Diseo y formacin electrnica: DG Alma Anglica Chvez Rodrguez
Diseo interactivo y realizacin del video: Tec. Jos Mario Escamilla G. Cantn
Diseo de portada: LSCA Edgar Emmanuel Herrera
Los autores agradecen al Programa de Apoyo a Proyectos para la Inovacin y Mejoramiento de la
Enseanza (PAPIME) PE204605, el financiamiento para llevar a cabo la publicacin de esta obra.
Queda rigurosamente prohibida, sin autorizacin escrita de los titulares del copyright, bajo las sanciones
establecidas por las leyes, la reproduccin total o parcial de esta obra por cualquier medio o
procedimiento, comprendidos la reprografa y el tratamiento informtico.
Prefacio
El estudio y conocimiento de la Biologa Tisular resulta
necesario en la formacin y ejercicio profesional de todo
Mdico Veterinario Zootecnista, por lo que la presente
obra pretende apoyar la enseanza de esta rama de las
ciencias morfolgicas, con el fin de que los estudiantes
cuenten con el conocimiento y puedan comprender los
principios de la tcnica del procesamiento de muestras
histolgicas, el funcionamiento del microscopio fotnico
y la identificacin al microscopio de los tejidos y rga-
nos que componen los aparatos y sistemas de los animales
domsticos.
Los editores de esta obra hacen un profundo reco-
nocimiento in memorian a Jorge Tolosa Snchez

quien fue
el principal promotor de este trabajo, su entusiasmo y
dedicacin dejaron una huella imborrable en varios de
nosotros, su amor por la institucin, su ejemplo y ense-
anzas sern una gua permanente en nuestro desarrollo
acadmico.
Este trabajo cont con la participacin de varios aca-
dmicos del Departamento de Morfologa de la FMVZ de
la UNAM. Por orden alfabtico: Arturo Carmona Man-
cilla, Manuel Espinosa Pedroza, Alberto Fouilloux
Morales, Ana Mara Fras Godoy

, Isabel Rodrguez
Romero, Hctor Villaseor Gaona, Rosa Mara Vigueras
Villaseor y David Zepeda Domnguez; quienes en al-
gn momento contribuyeron en el desarrollo del mismo
y en la elaboracin de algunas de las imgenes que se
incluyen.
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ndice
Presentacin................................................................... 5
Prctica 1. Recoleccin y envo de muestras .................................... 6
Prctica 2. Principios de la tcnica histolgica ............................ 15
Prctica 3. Microscopa ............................................................. 26
Video Principios Bsicos del Microscopio fotnico... 43
Prctica 4. Tejido epitelial de revestimiento ................................... 44
Prctica 5. Tejido epitelial glandular ........................................... 49
Prctica 6. Tejido conjuntivo ordinario ....................................... 55
Prctica 7. Tejido conjuntivo especializado de sostn .................... 59
Prctica 8. Tejido conjuntivo especializado: hematopoytico
y sangre .................................................................... 64
Prctica 9. Tejido muscular ......................................................... 69
Prctica 10. Tejido nervioso .......................................................... 72
Prctica 11. Aparato cardiovascular y rganos linfoides ............... 78
Prctica 12. Aparato respiratorio .................................................. 88
Prctica 13. Aparato digestivo I: lengua y rganos tubulares .......... 91
Prctica 14. Aparato digestivo II: preestmagos
de los rumiantes ......................................................... 99
Prctica 15. Glndulas anexas del aparato digestivo ................... 102
Prctica 16. Aparato urinario .................................................... 107
Prctica 17. rganos endocrinos ................................................ 111
Prctica 18. Aparato reproductor masculino ............................... 118
Prctica 19. Aparato reproductor femenino .................................. 123
Prctica 20. Sistema integumentario: piel y glndula mamaria......... 127
5
Presentacin
La biologa tisular es uno de los temas bsicos en los estudios y
la vida profesional del mdico veterinario zootecnista, ya que
para poder determinar el nivel del dao en un proceso patol-
gico y tomar decisiones de tipo clnico resulta fundamental
conocer la morfologa y las relaciones funcionales de los dife-
rentes tejidos que conforman un organismo.
De esta manera, la prctica en la asignatura de Biologa
Tisular de la licenciatura en Medicina Veterinaria y Zootecnia
representa un paso muy relevante en el conocimiento del rea
mdica y decisivo en la formacin del estudiante.
Si bien este trabajo no est planteado como un atlas
histolgico, s est diseado para ejercitar las habilidades de
identificacin de rganos y tejidos y de la relacin entre am-
bos, segn sus funciones primarias. El manual permite al alum-
no acceder a un microscopio virtual para realizar las actividades
que se indican. No sustituye, de ninguna manera, el manejo
directo del instrumento ptico, pero representa un accesorio
til cuando la disponibilidad de un equipo de cmputo es ma-
yor que la de un microscopio.
Se espera que la presente obra contribuya al proceso de ade-
cuacin de los materiales educativos que se ofrecen en la FMVZ, y
a la constitucin de un acervo didctico ms amplio.
Este manual fue elaborado con la participacin del perso-
nal del rea de Biologa Tisular del Departamento de Morfolo-
ga, y est planeada su revisin peridica, con el fin de
incrementar y mejorar su contenido.

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Prctica 1
Recoleccin y envo de
muestras
OBJETIVOS
1. Comprender los principios bsicos de recoleccin, mane-
jo y envo adecuados de una muestra para su estudio
histolgico.
1.1. Mencionar los cuidados que se deben tener en la recolec-
cin de una muestra para su estudio histolgico.
1.2. Mencionar el rango del tamao que debe tener una mues-
tra para su estudio histolgico.
1.3. Mencionar los principales factores que provocan el dete-
rioro de una muestra para su estudio histolgico.
1.4. Mencionar el propsito del uso de un fijador.
1.5. Mencionar los mtodos fsicos y qumicos usados con ms
frecuencia para la fijacin de un tejido animal.
1.6. Enlistar cuatro caractersticas deseables en un buen fija-
dor.
1.7. Describir los mtodos de fijacin: in situ, por perfusin
(intravascular e intraluminal) y por inmersin.
1.8. Mencionar tres de los lquidos fijadores ms comnmente
empleados y las indicaciones para su uso.
1.9. Enlistar los datos indispensables de identificacin que tie-
nen que acompaar a una muestra cuando se enva al labo-
ratorio para su procesamiento y estudio.
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INTRODUCCIN
En la prctica profesional del mdico veterinario dedicado al
diagnstico de enfermedades es comn la recoleccin de mues-
tras y su envo al laboratorio para un estudio histolgico; de los
cuidados que se tengan para hacerlo depende en muchas oca-
siones el xito del diagnstico y la posibilidad de prescribir un
tratamiento especfico. Por esto resulta indispensable que des-
de su proceso formativo el mdico ve-
terinario conozca los mtodos para
recolectar y enviar muestras, as como
para el procesamiento de muestras
histolgicas.
Los tejidos deben recolectarse lo
ms pronto posible despus de la muerte del animal.
En general el tipo de muestra y el
procesado dependen de la clase de an-
lisis que requiera el clnico para el diag-
nstico de la enfermedad. En este caso
se trata del procesamiento de fragmen-
tos de rganos para su estudio
histolgico, pero cabe aclarar que las
muestras se pueden mandar a un labora-
torio para estudios hematolgicos,
virolgicos, parasitolgicos, serolgicos,
toxicolgicos, etctera, y en cada uno
de estos hay diferentes indicaciones
para recoleccin y envo.
El tamao de la muestra de-
pende del tejido; por regla general,
para microscopa ptica es recomen-
dable que no sea menor de 0.5 cm
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ni mayor de 2 cm
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. Una vez recolectada la muestra, es necesario
someterla a la accin de agentes fsicos o qumicos para evitar
su descomposicin. Cuando se toman muestras demasiado grue-
sas, slo las partes perifricas reciben la accin de los agentes
que evitan su deterioro; esto trae como consecuencia que en las
porciones centrales continen los procesos de autlisis o de
descomposicin. Los recipientes para enviar o transportar las
muestras debern ser de boca ancha para que stas se puedan
meter o sacar con facilidad y sin estropearse.
La tapa del frasco, de preferencia, debe tener rosca y ce-
rrar lo ms hermticamente posible. Los fragmentos de rga-
nos recolectados pueden ser invadidos por bacterias, ya que
estos microorganismos utilizan materia orgnica para su nutri-
cin y reproduccin. Adems, las clulas de los fragmentos de
los rganos pueden destruirse a s mismas por la accin de sus
propias enzimas, es decir, pueden sufrir autlisis; sin embargo,
muchos de los agentes fsicos y qumicos que evitan la descom-
posicin de los tejidos, llamados fijadores, no permiten que es-
tos factores acten.
DESCRIPCIN Y CARACTERSTICAS
DE LOS FIJADORES
El empleo de fijadores tiene la finalidad de preservar la morfo-
loga y la composicin bioqumica de los diferentes compo-
nentes citolgicos y tisulares, de modo que lo que se observe
en el microscopio corresponda a lo que exista cuando los teji-
dos formaban parte del animal vivo.
Con el uso de fijadores lo que se pretende es:
1. Proteger la muestra del ataque bacteriano.
2. Evitar la autlisis del tejido.
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3. Insolubilizar los constituyentes celulares que se van a
estudiar.
4. Impedir distorsiones y retracciones.
5. Preparar las diversas estructuras para que reaccionen ms
intensamente a los colorantes y as se facilite su identi-
ficacin.
Cualquier sustancia que acondiciona los componentes
tisulares para que reaccionen intensamente a un colorante se
denomina mordente. No todos los fijadores son mordentes,
ni todas las tcnicas de tincin requieren de mordentes para
poder realizarse. En la mayora de los estudios se persigue la
conservacin de las protenas, puesto que son los principa-
les constituyentes de las estructuras celulares y las responsa-
bles de todos los procesos metablicos. La mayora de los
fijadores son soluciones que actan sobre las protenas de
las clulas; gracias a esto los fijadores detienen el metabolis-
mo y, por consiguiente, el proceso de autlisis. Se considera
un buen fijador aquel que precipita las protenas en forma
fina y, si es posible, en agregados ultramicroscpicos, para
que el aspecto de las clulas no se modifique.
El estudio histolgico de una muestra puede pretender
slo el anlisis morfolgico, o bien, la observacin y carac-
terizacin de los componentes bioqumicos de las clulas y
sustancias intercelulares, es decir, su estudio histoqumico.
En el primer caso, evidentemente lo que ms interesa es la
preservacin de la morfologa; en el segundo, evitar la diso-
lucin de algn compuesto. Aunque hay fijadores que pue-
den efectuar ambas funciones, no existe un fijador universal
para todas las tinciones y tejidos.
Los mtodos de fijacin se pueden dividir en fsicos y
qumicos:
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a) Fsicos
Refrigeracin
Congelacin
Liofilizacin
b) Qumicos
Aldehdos:
glutaraldehdo
formaldehdo
paraformaldehdo
Solventes polares:
alcohol
acetona
cloroformo
cidos:
cido actico
cido pcrico
cido frmico
cido ntrico
cido smico
Sales:
dicromato de potasio
cloruro de mercurio
nitrato de plomo
sulfato cprico
Los mtodos fsicos ms utilizados son el de congelacin y
el de liofilizacin. Sin embargo, en la prctica de la medicina
veterinaria son ms comunes la refrigeracin y el uso de agen-
tes qumicos, y de stos, el formol al 10% es el que generalmen-
te se utiliza para fijar toda clase de rganos.
Las caractersticas deseables de un buen fijador son:
1. Que produzca muerte bacteriana.
2. Que no produzca distorsiones ni disuelva porciones tisulares.
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3. Que inactive las enzimas.
4. Que modifique los componentes tisulares para mantener
la forma cuando la muestra se sujete a los procesos de des-
hidratacin, aclaracin, impregnacin con parafina o resi-
nas plsticas, corte, tincin y montaje.
No todos los agentes fijadores qumicos son tiles para
actuar sobre los distintos componentes tisulares, pues mientras
unos actan sobre las protenas, otros lo hacen preferentemen-
te sobre los carbohidratos, o bien, algunas sustancias fijadoras
producen la retraccin del tejido, y otras que causan su expan-
sin, por ello es comn el uso de mezclas de agentes qumicos.
Se han elaborado diferentes mezclas de agentes qumicos con
accin fijadora; por lo general dichas mezclas llevan el nombre
del investigador que las propuso. Entre las ms usadas est el
lquido de Bouin, compuesto de una solucin acuosa saturada
de cido pcrico (150 ml), que se agrega momentos antes de
meter el rgano a fijar; formaldehdo (50 ml) y cido actico
(10 ml); esta mezcla es sumamente til para la fijacin de tejido
testcular. El lquido de Zenker est indicado cuando se quiere
aplicar a los tejidos ciertas tcnicas de tincin especiales, hay
algunas tiles para mostrar polisacridos, ciertas protenas
fibrilares y tejido endocrino, que requieren de la fijacin en el
lquido de Zenker para garantizar buenos resultados; este lqui-
do es una mezcla de dicromato de potasio (25 g), cloruro de
mercurio (50 g), el cual se agrega momentos antes de meter el
rgano a fijar; sulfato de sodio (100 g), cido actico glacial (5
ml) y agua destilada (cbp 1 000 ml). El lquido de Helly es
prcticamente igual al de Zenker, slo que en lugar de cido
actico glacial contiene formaldehdo en la misma proporcin.
El lquido de Carnoy es una mezcla de alcohol absoluto (75 ml)
y cido actico (25 ml) que se utiliza para preservar
mucopolisacridos.
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Existen cuatro formas de fijar los fragmentos de rgano cuan-
do se emplean agentes fijadores qumicos: fijacin in situ, por per-
fusin intravascular, por perfusin intraluminal y por inmersin.
El mtodo de fijacin in situ consiste en fijar el rgano o
tejido en el lugar donde normalmente se encuentra el animal
vivo, a ste se le anestesia o practica la eutanasia, e inmediata-
mente, antes de proceder a diseccionar el rea donde se locali-
za el rgano que interesa, se vierte el lquido fijador para que
empiece a ejercer su accin directamente sobre los tejidos de
inters y para evitar los cambios autolticos; despus se proce-
de a obtener los fragmentos del rgano, los cuales se deposita-
rn en un frasco con el fijador elegido y de esta manera el proceso
de la fijacin contina.
El mtodo de fijacin por perfusin intravascular consiste
en fijar el rgano o tejido utilizando los vasos sanguneos que
lo irrigan. Para llevarlo a cabo se anestesia al animal, se diseca
el vaso arterial de mayor calibre que irriga el rea donde se
encuentra el rgano en cuestin, ste se abre cuidadosamente
para introducir en l un catter a travs del cual se administra
una solucin salina fisiolgica con xilocana al 2%. Antes de
dejar fluir la solucin se corta el vaso venoso que se correspon-
de con el arterial que se est trabajando, inmediatamente des-
pus se deja fluir la solucin y se espera hasta que el lquido
salga por la vena que se ha cortado previamente.
Posterioremente, se introduce el lquido fijador a travs del ca-
tter y se espera unos minutos hasta que se tenga la seguridad
de que el fijador est saliendo por el vaso venoso. En todo este
procedimiento hay que tener perfectamente regulada y calcu-
lada la presin con que fluye la SSF o el lquido fijador, para no
romper vasos o capilares sanguneos por exceso de presin. Los
fragmentos de rganos perfundidos se colectan y se depositan
en un frasco que contenga el fijador elegido.
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El mtodo de fijacin por perfusin intraluminal se practi-
ca en rganos huecos como son el intestino, los bronquios,
bronquolos y sacos alveolares. En el caso del intestino, este
mtodo consiste en recolectar el fragmento del rgano del ani-
mal sacrificado, lavar con cuidado la luz del rgano con una
jeringa sin aguja, utilizando SSF, hasta quitar perfectamente el
contenido intestinal; en seguida, lavar la luz del rgano con el
fijador, empleando tambin una jeringa y, por ltimo, deposi-
tarlo en un frasco que contenga el fijador elegido.
El mtodo de fijacin por inmersin consiste en la obten-
cin de un fragmento del rgano, cuyo estudio se desea llevar a
cabo despus de que se ha sacrificado al animal. Dicho frag-
mento se coloca en la mezcla elegida para su fijacin. Con este
mtodo siempre debe utilizarse una proporcin de 1:10, es de-
cir, 10 veces el volumen del fijador por una vez el volumen de
la muestra. Un fragmento de rgano de 1 cm
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deber fijarse en
un frasco que contenga 10 ml de fijador. En el caso de rganos
que tienden a flotar, como pulmn, piel y otros, se recomienda
envolverlos con una gasa y amarrarlos a un contrapeso, para
evitar que salgan a la superficie. Para lograr buenos resultados
es necesario que todas las partes del rgano que se sometern a
fijacin se mantengan en contacto con el fijador. En algunos
laboratorios se recomienda que el rgano se sumerja en el fija-
dor envuelto en gasas.
Una vez que los fragmentos de tejido se han
colectado para su fijacin, deben anotarse
en el frasco todos los elementos que per-
mitan su identificacin:
Fecha y nombre de la persona que lle-
v a cabo la recoleccin.
Especie animal.
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Sexo.
rgano o tejido.
Nombre del fijador.
La informacin que se recomienda anexar en hojas por se-
parado a las muestras que se envan para su estudio clnico son:
Nombre, direccin y telfono del clnico.
Nombre, direccin y telfono del dueo del animal.
Especie animal, edad, sexo y raza.
Hora de la toma de la muestra y fecha.
Tipo de anlisis que se pide.
Nmero de animales en el hato.
Nmero de animales afectados.
Tiempo de evolucin de la enfermedad.
Signos clnicos que present el paciente.
Datos sobre la mortalidad y morbilidad en el hato.
Vacunacin y tratamiento.
Hallazgos en otras necropsias procedentes del mismo
brote.
Casos similares en la zona.
Diagnstico presuntivo del clnico.
Material enviado al laboratorio y fijador usado.
Los recipientes para enviar las muestras por lo general son
de plstico o de vidrio y deben ser empacados cuidadosamente
para evitar que se rompan durante el transporte.
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Prctica 2
Principios de la tcnica
histolgica
OBJETIVOS
2. Comprender los principios bsicos que fundamentan
la tcnica histolgica.
2.1. Enlistar los distintos mtodos con los que se puede
procesar un rgano para su estudio histolgico.
2.2. Describir el mtodo para procesar rganos que vayan
a cortarse por congelacin.
2.3. Describir el mtodo para inclusin de rganos en pa-
rafina.
2.4. Describir el mtodo para inclusin de rganos en resi-
nas plsticas.
2.5. Describir los mtodos para realizar los cortes
histolgicos de rganos para su estudio.
2.6. Definir lo que es un colorante basfilo en relacin con
las estructuras celulares que tie.
2.7. Definir lo que es un colorante acidfilo en relacin
con las estructuras celulares que tie.
2.8. Mencionar el papel que juega cada uno de los coloran-
tes que participan en la tcnica de hematoxilina y eosina.
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2.9. Mencionar el nombre de una tcnica de tincin selec-
tiva para polisacridos, cidos nucleicos, lpidos y para
fibras conjuntivas.
2.10. Mencionar los distintos medios de montaje para pre-
parados histolgicos.
2.11. Mencionar los requisitos que debe tener una sustancia
para ser utilizada como medio de montaje.
2.12. Enlistar en orden consecutivo los pasos necesarios en
la fijacin de un rgano para su estudio histolgico.
2.13. Describir el mtodo para el estudio de clulas
exfoliadas.
2.14. Describir el mtodo para la realizacin de frotis y de
impronta.
INTRODUCCIN
Los fragmentos de rgano que se desee estudiar al microscopio
pueden procesarse por distintos mtodos. Los tres ms comn-
mente empleados son: el mtodo de congelacin, el de inclu-
sin en parafina y el de inclusin en resinas plsticas.
El mtodo por congelacin es rpido y muy adecuado cuan-
do se requiere la observacin del tejido lo antes posible, como
en el caso de intervenciones quirrgicas; el mtodo consiste en
congelar paulatinamente el tejido hasta que se encuentre lo su-
ficientemente duro como para cortar rebanadas de menos de
10 micrmetros de grosor. Esta tcnica es muy conveniente
cuando se desea demostrar lpidos, ya que la tcnica de inclu-
sin en parafina, como se ver ms adelante, utiliza solventes
orgnicos que impiden el estudio de los compuestos no pola-
res. La congelacin puede hacerse con bixido de carbono.
El mtodo de inclusin en parafina es ms tardado que el
anterior y consiste en sustituir el agua de los tejidos fijados y
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sumergirlos en parafina, para ello se emplea el siguiente proce-
dimiento previo: deshidratacin de la muestra, cuyo propsito
es eliminar toda el agua de los tejidos y sustituirla gradualmen-
te por un solvente orgnico que se mezcle con el agua; para
esto se utiliza el alcohol. Primero se depositan las muestras en
alcohol etlico al 60%, despus de cierto tiempo (casi siempre
una hora), se pasan a alcohol al 70%, donde se mantienen otro
tiempo y as sucesivamente en alcoholes cada vez ms concen-
trados hasta llegar al alcohol absoluto. Cuando el agua del teji-
do ya ha sido reemplazada por el alcohol se procede a sustituir
este ltimo por una sustancia que puede mezclarse con el alco-
hol y con la parafina,y que torna las piezas traslcidas, por ello,
a este paso se le denomina aclaramiento o diafanizacin. Las
sustancias que se usan comnmente en este paso son el xileno o
el benceno, durante una hora.
Una vez aclaradas las muestras se pasan a recipientes que
contienen parafina fundida a 55 C, este paso tiene la finalidad
de desplazar la sustancia utilizada du-
rante el aclaramiento por la parafina, lo
que se logra con dos pases, cada uno de
media hora aproximadamente. Esta fase
recibe el nombre de impregnacin. La
deshidratacin, el aclaramiento y la im-
pregnacin pueden hacerse manualmen-
te, pero tambin automticamente por medio de un procesador
de tejidos automtico.
Ya que las muestras se encuen-
tran embebidas en parafina, se colo-
can en recipientes cbicos que
contienen parafina fundida; se depo-
sitan en ellos con una pinza, ya sea
en posicin horizontal o vertical,
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hasta el fondo, y se espera a que la parafina se solidifique a
temperatura ambiente; de esta manera se obtienen bloques c-
bicos que contienen en su interior la porcin del rgano a estu-
diar. Este paso del procesamiento se denomina inclusin.
El objetivo de incluir los rganos en un material como la
parafina es que el rgano adquiera la suficiente dureza para per-
mitir realizar cortes delgados. Una vez que la muestra se ha
incluido en parafina se procede al corte.
El mtodo de inclusin en resinas plsticas se utiliza co-
mnmente para la preparacin de muestras que van a ser obser-
vadas con el microscopio electrnico, los procedimientos son
similares al del mtodo de inclusin en parafina; en ocasiones,
en lugar de etanol se utiliza acetona, se comienza con una con-
centracin de 25% que se incrementa en forma gradual hasta
100% y posteriormente se pasan al medio de inclusin, que
est constituido por resinas sintticas de epxido o epoxil, como
son el epon y la araldita. Estos plsticos son bastante duros, lo
que permite hacer cortes sumamente delgados. Despus de la
congelacin del rgano, o bien de la inclusin en parafina o
resinas plsticas, segn sea el caso, el paso siguiente es el corte.
El aparato que se utiliza para cortar muestras de tejido para su
observacin al microscopio se denomina micrtomo.
Existen diversas adaptaciones de este aparato, las cuales
dependen de que el rgano est congelado, o incluido en para-
fina o en resinas plsticas. Para muestras congeladas se utiliza
un aparato denominado cristato, que consiste en un micrtomo
encerrado en una cmara refrigerada que mantiene temperatu-
ras por debajo de los 0 C, en forma ideal, -18 C, esto permite
que tanto el tejido como la cuchilla se mantengan a temperatu-
ras inferiores a las de congelacin.
Si las muestras de los rganos se encuentran incluidas en
bloques de parafina, se colocan en el micrtomo para hacer
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cortes entre 4 y 7 micrmetros de
grosor. Las rebanadas obtenidas en
el micrtomo se extienden en una
tina de flotacin que contenga agua
y grenetina. La tensin superficial del
agua ayuda a extender el corte y la
grenetina ayuda a que la muestra se
adhiera firmemente al portaobjetos, la cual es identificada con
el empleo de un lpiz de punta de diamante.
En el caso de las muestras incluidas en resina plstica, se
colocan en un ultramicrtomo, un micrtomo que tiene la par-
ticularidad de estar equipado con navaja de vidrio o de diaman-
te, especial para obtener cortes muy delgados, de 0.02 a 0.1 m
de grosor, que se conocen con el nombre de semifinos, los cua-
les se extienden al flotar en el agua de un pequeo recipiente
que se encuentra debajo de la navaja;
posteriormente se colocan sobre un
portaobjetos y se tien, a fin de obser-
varlos y seleccionar las regiones para
hacer cortes an ms delgados, llama-
dos cortes finos, los cuales se colocan
en rejillas de cobre o nquel, y se prepa-
ran para ob-
servarse al microscopio electrnico.
Para mejorar la adhesin del
corte al portaobjetos, la muestra se
coloca en una platina termoelctrica.
El proceso de la muestra hasta
esta etapa consta de los siguientes
pasos:
1. Deshidratacin.
2. Aclaramiento.
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3. Impregnacin.
4. Inclusin.
5. Corte.
6. Extendido.
7. Adhesin.
La mayora de los tejidos son incoloros, por lo que des-
pus del corte, extendido y adhesin de la muestra deben teir-
se para facilitar su observacin al microscopio y poder
diferenciarlos.
Cuando se va a observar una muestra en el microscopio
fotnico (microscopios que aprovechan las propiedades de los
fotones) se sigue una tcnica para teir los tejidos, cuyo princi-
pio se basa en el uso de colorantes cidos y colorantes bsicos o
alcalinos para distinguir los diferentes componentes tisulares.
Despus de la fijacin, los diferentes componentes celulares y
elementos tisulares conservan
cierto grado de alcalinidad o de
acidez que determina su
reactividad ante la presencia de
un colorante cido o bsico.
Para teir un corte de teji-
do, por lo general se suelen
utilizar por lo menos dos colo-
rantes: uno cido y otro bsi-
co. La combinacin ms empleada es la de hematoxilina
(colorante bsico) y la eosina (colorante cido). A esta tcnica
de tincin se le denomina comnmente tincin de HE. Los com-
ponentes de la clula y de los tejidos con un pH cido se tien
fcilmente con los colorantes bsicos y se les denomina basfilos
(philein: afinidad por). Los componentes de las clulas y de los
tejidos que tienen un pH bsico o alcalino reaccionan con los
colorantes cidos y se denominan acidfilos.
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En la clula una gran proporcin de molculas cidas, como
el cido ribonucleico y el cido desoxirribonucleico, se con-
centra en el ncleo, por lo cual ste es considerado como
basfilo, mientras que el citoplasma contiene una significativa
cantidad de compuestos bsicos o alcalinos, por lo que se le
considera un componente acidfilo.
Existen, sin embargo, diversos tipos celulares que tienen
un abundante retculo endoplsmico rugoso y por ello su cito-
plasma es basfilo. Los diversos componentes tisulares del com-
partimiento intercelular pueden presentar tambin distintas
afinidades por los colorantes, es decir, hay componentes
intercelulares basfilos y hay componentes intercelulares
acidfilos.
Adems de la tcnica de HE, que es la tcnica de rutina,
existen tcnicas especiales para poner de manifiesto y de ma-
nera selectiva diversos elementos o componentes celulares y
tisulares. Para evidenciar cidos nucleicos se utilizan coloran-
tes como la pironina o la tionina en combinacin con verde de
metilo. Con el uso de estos colorantes es posible distinguir in-
cluso los dos tipos de cidos nucleicos. En las clulas teidas
con cualquiera de las dos combinaciones sealadas es posible
observar la cromatina en verde y el RNA citoplasmtico o el
nuclolo en rojo. Existe un buen nmero de tcnicas para expo-
ner mucopolisacridos, entre los ms comunes tenemos la tc-
nica del azul de alciano y la del cido perydico de Schiff (PAS).
sta ltima sirve tambin para mostrar las mucoprotenas.
En el caso de las tinciones que faciliten la observacin de
los lpidos, se usan frecuentemente colorantes como el Sudn III,
que los tie de amarillo; el Sudn IV, que los tie de anaranjado
o rojo y el Sudn negro, que los tie de negro. En estos casos se
necesitan cortes procesados por el mtodo de congelacin.
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En las fibras intercelulares se emplean tcnicas tintoriales
a base de sales de plata, especficas para fibras reticulares, las
cuales se manifiestan en color negro, mientras que con otras
tcnicas de rutina no pueden distinguirse claramente de los de-
ms tipos de fibras.
Para las fibras colgenas pueden usarse diversas tcnicas,
entre las que destacan la de Masson y la de Mallory, que evi-
dencian estas fibras en azul. Las fibras elsticas se tien de co-
lor negro con la tcnica de Verhoeff.
Para el sistema nervioso existe una gran variedad de tcni-
cas, algunas muy simples como la del azul de toluidina, que tie
el tejido y marca muy claramente los grumos basfilos de las
neuronas, en cambio, otras un poco ms complejas que pintan
de manera selectiva cada uno de los diversos tipos celulares del
tejido nervioso. Entre estas tcnicas podemos destacar la de
Golgi y la de Cajal; la primera utiliza sales de mercurio (HgCl
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),
la segunda suele emplear sales de plata (AgNO
3
); en ambos ca-
sos los elementos celulares se impregnan con estas sales me-
diante la aplicacin de reveladores para fotografa; dichas sales
se hacen virar para que tomen un color negro.
Una vez que las muestras han sido teidas se procede al
montaje, que consiste en aadir un medio de montaje sobre el
corte de tejido (el cual se encuentra adherido a un portaobjetos)
y colocar encima un cubreobjetos de vidrio. Existen diversos
medios de montaje, su uso depende del tratamiento que se le
haya dado al tejido. Si los cortes se procesaron mediante la
tcnica de congelacin y se desea mostrar lpidos se utilizan
medios de montaje acuosos, tales como la glicerina; en cambio,
si se procesaron cortes por congelacin de rganos en los cua-
les no se pretende demostrar compuestos solubles en solventes
no polares, o bien, cortes de rganos incluidos en parafina,
se utilizarn substancias que puedan mezclarse en solventes
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orgnicos como el xileno; como ejemplos de estas sustancias
tenemos diversas resinas naturales y sintticas. Las resinas na-
turales tienen la desventaja de ser cidas, por lo que cada vez
son menos usadas; entre ellas estn el blsamo de Canad y la
goma de Damar. Las resinas sintticas son neutras y su uso es
cada vez ms frecuente, entre otras, estn la de Permount, la de
Harleco y el Histoclad. Cualquier medio de montaje debe te-
ner en solucin un ndice de refraccin entre 1.5 y 1.6, secar
rpidamente, no afectar la integridad del tejido ni alterar la
tincin de la muestra.
Para estudiar los tejidos o la integridad de las clulas que
lo componen, existen otros mtodos, adems de los descritos.
Entre stos cabe mencionar el que sirve para estudiar clulas
sueltas o descamadas.
A las clulas que se desprenden de los tejidos se les conoce
como clulas exfoliadas. Para su observacin se suele hacer un
frotis que consiste en extender las clulas sobre un portaobjetos.
Se pueden realizar frotis de clulas sanguneas o de clulas
exfoliadas. La citologa exfoliativa es un mtodo que ha sido
utilizado cada vez con mayor frecuencia para la determinacin
del ciclo estral en determinadas especies domsticas como la
perra, la gata y animales de laboratorio, as como en el estudio
de neoplasias.
La realizacin del frotis de clulas sanguneas requiere el
siguiente procedimiento:
1. Se coloca una pequea gota de sangre sobre un extremo
del portaobjetos y en seguida, con otro portaobjetos, se
procede a hacer el extendido de la sangre. Para ello es ne-
cesario acercar el segundo portaobjetos hasta la gota, for-
mando un ngulo de 45 grados con el portaobjetos que
contiene la gota de sangre. Al ponerse en contacto
el portaobjetos con la superficie de la gota de sangre, se
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espera a que sta se distribuya por capilaridad a todo lo
ancho del portaobjetos; en este momento, con un movi-
miento rpido, uniforme y sin variar el ngulo que forman
ambos portaobjetos, se extienden las clulas sanguneas por
arrastre sobre la superficie del portaobjetos en el que ini-
cialmente se coloc la gota.
2. Se fija la muestra por secado al aire.
3. Se fija la muestra con alcohol metlico absoluto.
4. Se tie (las tcnicas de tincin ms utilizadas para clulas
sanguineas son la de Wright y Giemsa).
5. Se lava en el chorro de agua.
6. Se seca.
7. Se aclara con xileno.
8. Se monta con resina sinttica.
Para la realizacin del frotis de clulas exfoliadas se sigue
este procedimiento:
La obtencin de las clulas libres puede hacerse mediante
un lavado con solucin salina fisiolgica, o bien, a travs del
uso de un hisopo. En el caso de obtener las clulas por medio
de lavado, se dejan caer unas gotas de solucin salina con las
clulas sobre el portaobjetos, se extienden sobre la laminilla y
se secan al aire. Si se obtuvieron las clulas mediante un hiso-
po, ste se hace rotar sobre el portaobjetos para distribuir las
clulas. Posteriormente se tien con la tcnica de Papanicolau,
con lugol o yodo.
Otra tcnica para la observacin de clulas libres es la im-
pronta, la cual resulta fcil y rpida para el estudio de clulas
que forman parte de un rgano. Para realizarla es necesario cor-
tar el rgano, despus acercar el portaobjetos hasta tocar el r-
gano por la parte incidida, secar rpidamente al aire y teirla
con la tcnica de Papanicolau o de hematoxilina y eosina.
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Actividad
En una serie de microfotografas, observa las caractersti-
cas de los diferentes tejidos presentados con diversas
tinciones y elabora un cuadro colocando el color que co-
rresponda al tipo de estructura que adviertas.
Prctica 3
Microscopa
OBJETIVOS
3.1. Manejar correctamente un microscopio fotnico.
3.1.1. Identificar las partes pticas, mecnicas y de iluminacin.
3.1.2. Mencionar la funcin de los principales elementos de
cada una de las partes.
3.1.3. Mencionar los procedimientos de rutina en el manejo
del microscopio fotnico.
3.1.4. Enfocar en forma adecuada y observar una prepara-
cin histolgica.
3.2. Comprender los fundamentos tcnicos elementales en
los que se basa la microscopa fotnica.
3.2.1. Mencionar los diferentes tipos de microscopios.
3.2.2. Entender el concepto de poder de resolucin del sis-
tema ptico.
3.2.3. Conocer la frmula matemtica del lmite de resolucin.
3.2.4. Determinar las limitaciones del microscopio fotnico y
su complementacin con otros tipos de microscopios.
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INTRODUCCIN
En el transcurso de los aos ha ido aumentando el nmero de
mdicos veterinarios que requieren del microscopio fotnico
para desempear satisfactoriamente su trabajo. Es por ello con-
veniente que desde el primer ao el estudiante se familiarice
con el manejo de dicho instrumento. Diversos aspectos prcti-
cos de la histologa, microbiologa, patologa y parasitologa se
resuelven con el uso del microscopio. Por tal motivo, el cono-
cimiento de todas sus partes, lo mismo que el funcionamiento
de cada una de ellas en la observacin de un objeto son de
utilidad en la formacin profesional.
El microscopio fotnico est constituido por una parte
mecnica, una parte ptica y una fuente de luz.
MICROSCOPIO FOTNICO
I. I. I. I. I. Parte mecnica Parte mecnica Parte mecnica Parte mecnica Parte mecnica
1) Base
2) Brazo
3) Cabezal o cabeza
4) Revlver
5) Platina
6) Tornillos macromtrico y micromtrico
7) Porta condensador
8) Tornillo del condensador
Esta parte consta de una base, un brazo, un cabezal o cabeza,
un revlver, una platina y dos tornillos: a) macromtrico y b)
micromtrico; un porta condensador, un tornillo del condensa-
dor y una cremallera.
La base o pie generalmente tiene forma de herradura, ade-
ms de sostener todo el peso del microscopio, da solidez y es-
tabilidad al aparato. En una gran variedad de modelos de
microscopios, la fuente de luz aparece incorporada a la base.
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El brazo o columna sirve de asa para sujetar y transportar el
microscopio; es recomendable tomar el microscopio del brazo
o columna con una mano, y sostenerlo de la base con la otra
mano. En la columna estn conectados los tornillos
macromtrico y micromtrico que son los que elevan o des-
cienden la platina, la cual se apoya en la columna. Tambin en
la columna se apoyan el soporte del condensador del diafragma
as como el tornillo y la cremallera que regulan su movimiento.
La cabeza o cabezal se encuentra hacia el extremo superior del
microscopio; tiene la forma de una media esfera, su funcin es
servir de sostn al prisma de cristal que forma parte del sistema
ptico del microscopio. Del cabezal parten hacia arriba los tu-
bos donde se apoyan los lentes oculares, hacia abajo se encuen-
tra el revlver portaobjetivos. Se denomina revlver al disco
giratorio colocado en la superficie plana e inferior del cabezal y
gracias al movimiento giratorio es posible cambiar de objetivo;
cuando se desee este cambio es necesario hacerlo en direccin
de las manecillas del reloj y con la yema de los dedos sobre el
borde estriado del revlver. Se debe evitar, tomar el objetivo
para girar el revlver, ya que con este tipo de manejo al cabo
del tiempo el aparato se desajusta. El revlver se gira hasta sen-
tir un tope sutil, que ser fcilmente apreciado si el movimiento
es lento y se realiza con la yema de los dedos. Cuando se perci-
be el tope, se puede estar seguro de tener el nuevo objetivo en
posicin adecuada para llevar a cabo
la observacin.
La platina es la porcin del
microscopio donde se coloca la pre-
paracin histolgica para su observa-
cin; se localiza debajo de los
objetivos. Es una superficie plana de
forma cuadrangular que tiene en el
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centro un orificio circular, a travs del cual pasa el haz lumino-
so que atraviesa el corte histolgico y permite su observacin.
En ocasiones los microscopios presentan un carro, as se le de-
nomina a la estructura que sujeta el portaobjetos por sus extre-
mos y mediante los tornillos que contiene hacia el borde lateral
derecho de la platina, permitiendo el movimiento de las prepa-
raciones hacia adelante, atrs y a los lados. De acuerdo con la
marca o modelo del microscopio se pueden encontrar diferen-
cias, sin embargo, en trminos generales, hay dos formas como
los fabricantes de un microscopio resuelven la construccin de
los mismos. Unos prefieren colocar los tornillos macro y
micromtricos separados; otros en cambio, en un mismo
accionador presentan ambos; en estos casos y por lo general, el
enfoque macromtrico se realiza con la perilla estriada de ma-
yor dimetro, mientras que el enfoque micromtrico, con la
perilla estriada central y ms pequea. El tornillo macromtrico
hace subir o bajar la platina y como regla general deber enfo-
carse usando primero el tornillo macromtrico y el objetivo de
menor aumento. Cuando se procede de esta manera no es ne-
cesario usar el tornillo macromtrico para cambiar a otros len-
tes objetivo, slo es necesario hacer el enfoque fino con el
micromtrico. Algunos modelos de microscopios (tipo estudian-
te) carecen de las partes mecnicas que a continuacin se des-
criben. El portacondensador es una estructura que consta de un
aro que sujeta el condensador y lo une al brazo o columna,
sobre este aro se encuentra un tornillo que libera al condensa-
dor y de esta forma permite la adecuada limpieza o ajuste sobre
el mismo, esto ltimo deber realizarse con cuidado de manera
espordica y slo por personal entrenado para ello. La funcin
del portacondensador es sostener el complejo condensador-
diafragma. El tornillo para subir o bajar el portacondensador se
encuentra debajo y delante de los tornillos macro y micromtricos.
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El condensador (incluido o sostenido por el porta condensa-
dor) se sube y se baja con el fin de que el haz luminoso coincida
exactamente con el objeto a observar y obtener as la mejor
iluminacin. La cremallera es la placa de superficie dentada que
se encuentra montada sobre la columna. A travs de los dientes
engranes se articula tanto en el soporte del condensador o
diafragma como en la platina.
II. II. II. II. II. Parte ptica Parte ptica Parte ptica Parte ptica Parte ptica
La parte ptica la constituyen, en trminos
generales, los lentes:
1) oculares
2) objetivos
3) del condensador
Oculares
Existen microscopios con un solo ocular, denominados
monoculares; o bien, los que presentan dos oculares, denomi-
nados binoculares. En cualquier caso, los oculares se localizan
en el extremo superior del cabezal y es en ellos donde se colo-
can los ojos del observador. Hay oculares de diferentes aumen-
tos, stos por lo general pueden ser de 10x, 15x y 20x. El nmero
seguido del signo x (por) se refiere a las veces que aumenta el
tamao original del objeto observado. En el caso
de los microscopios binoculares, la distancia en-
tre los oculares puede ajustarse a la distancia que
cada observador en particular tiene entre los
ojos. Esto puede lograrse si se acciona un torni-
llo que regularmente est entre los dos ocula-
res; esta separacin queda indicada por una
escala circular situada entre ambos oculares.
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Objetivos
Reciben este nombre las lentes ms prximas al objeto a obser-
var. Se localizan en la parte inferior del cabezal unidos a ste
por medio del revlver; los objetivos reciben diversos nombres
de acuerdo con los aumentos que tienen.
MICROSCOPIO OLYMPUS ZEISS
1. objetivo panormico 4 x 3.2 x
2. seco dbil 10 x 10 x
3. seco fuerte 40 x 40 x
4. de inmersin 100 x 100 x
El objetivo proyecta una imagen ms aumentada en direc-
cin del ocular. Los objetivos presentan en la porcin metlica
una serie de datos que a continuacin se describen. Una lectura
correcta comnmente se hace de izquierda a derecha y de arri-
ba a abajo. El primer nmero significa el aumento del objetivo;
la siguiente cifra representa la abertura numrica (AN), su de-
terminacin depende del fabricante y se refiere al menor ndice
de refraccin del lente del objetivo multiplicado por el seno del
semingulo de abertura. En este caso: AN=1.35 o 0.22.
En el rengln de abajo, la cifra 160 corresponde a la longi-
tud en milmetros del tubo del microscopio en el cual deben ser
utilizados (algunos en lugar de 160 tienen 170); la ltima cifra
(0.17), que no todos los objetivos la tienen anotada; aparece en
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un tercer rengln, y se refiere al espesor en milmetros del
cubreobjetos que debe emplearse. En las preparaciones
histolgicas sta medida es importante para evitar estrellar la
laminilla con el objetivo; la laminilla siempre se debe colocar
con el cubreobjetos dirigido hacia arriba, ya que la medida an-
tes citada est calculada para que vaya de esta forma. Es un
hecho indudable que la calidad del microscopio est determi-
nada esencialmente por la calidad del objetivo, pues es ste el
que produce la imagen aumentada del objeto, cuya nitidez, en
cuanto a los detalles estructurales y aspecto general, no puede
ser mejorada por los dems elementos. Para clasificar y diferen-
ciar los objetivos algunos fabricantes utilizan colores. As, un
color suele corresponderse con un aumento dado (ver cuadro
1), por ejemplo, todos los objetivos de aumento 10x llevan una
banda amarilla alrededor del tubo.
CUADRO 1
1. objetivo panormico banda color caf
2. seco dbil banda color amarillo
3. seco fuerte banda color azul
4. de inmersin banda color negro o blanco
a) Aumento nominal: viene grabado en el cuerpo del objeti-
vo y siempre se asocia con la longitud del tubo del micros-
copio (o la distancia entre el objetivo y el ocular); en los
microscopios americanos la distancia es de 160 mm y en
los europeos, japoneses y rusos de 170 mm.
b) Aumento total: es el que se observa al mirar por el ocular.
Se calcula multiplicando el aumento del ocular y el objeti-
vo, ejemplo: 15 X 40 = 600x. El objeto observado est au-
mentado 600 veces su tamao natural.
c) Poder de resolucin: es la capacidad que tiene un sistema
ptico de separar detalles.
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Al poder o lmite de resolucin se le asigna un valor num-
rico y equivale a la mnima distancia que debe existir entre dos
puntos para que cada uno de ellos aparezca individualizado. El
lmite de resolucin de los mejores lentes utilizados en los mi-
croscopios fotnicos comunes es de 0.2 m (0.0002 mm). La
riqueza en el detalle de una imagen depender del poder de
resolucin. La parte que determina el lmite de resolucin de
un sistema ptico es el objetivo, aunque ste puede ser modifi-
cado ligeramente por el complejo condensador-diafragma. El
lmite de resolucin se obtiene con la frmula:
LR= Ks/AN
Donde:
K = una constante estimada en 0.61
s = longitud de onda de la luz empleada
AN = abertura numrica (un valor grabado sobre la super-
ficie del tubo del objetivo empleado y es calculado
previamente por el fabricante).
Condensador-diafragma
El complejo condensador-diafragma forma parte del sistema
ptico y lumnico. Los microscopios modelo estudiante sue-
len tener un sustituto muy simplificado que hace las funciones
de ste; sin embargo, es una parte muy importante del micros-
copio que para fines informativos conviene describir. El con-
densador est formado por un lente convergente que favorece
una iluminacin ptima de la preparacin y de esta manera de-
termina la riqueza de los detalles y la nitidez del objeto en
observacin, es decir, aumenta el poder de resolucin. Para
buscar una altura del condensador que permita el mximo de
luz y resolucin se har ascender o descender el complejo
condensador-diafragma mediante el tornillo correspondiente.
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El diafragma tiene la funcin de regular la cantidad de rayos
luminosos que lleguen al lente del condensador para posterior-
mente iluminar el objeto a observar. El diafragma puede
improvisarse con una pequea lmina de metal o cualquier ma-
terial opaco, perforado para permitir el paso de slo una deter-
minada cantidad de rayos luminosos.
III. III. III. III. III. Sistema de iluminacin (fuente de luz) Sistema de iluminacin (fuente de luz) Sistema de iluminacin (fuente de luz) Sistema de iluminacin (fuente de luz) Sistema de iluminacin (fuente de luz)
Consta de las siguientes partes: regulador de voltaje, lmpara o
espejo y condensador.
Regulador de voltaje
El regulador de voltaje es un accesorio que, segn el fabricante,
puede venir separado del microscopio o bien integrado al mis-
mo. Cuando est separado consiste en una caja metlica que
posee, en uno de sus extremos, una clavija, la cual se conecta a
la fuente de corriente elctrica y, en el otro extremo, un cable
que va directamente a la fuente de luz del microscopio. El regu-
lador de voltaje tiene un interruptor a travs del cual se encien-
de (ON) o se apaga (OFF). Antes de prender el regulador hay
que asegurarse de que la perilla que regula la intensidad de luz
est en el nivel ms bajo. Algunos reguladores presentan graba-
das en letras o rayas rojas las zonas de alta intensidad de luz que
pueden poner en peligro la integridad del filamento del foco.
Siempre se deber procurar NO llegar hasta esta zona, pues la
duracin del filamento del foco ser menor y la retina del ob-
servador podra sufrir algn dao. En aquellos microscopios que
presentan el regulador de voltaje integrado, la perilla que regu-
la la intensidad de luz se encuentra casi siempre en la base del
microscopio. Para cuidar la retina del observador, la perilla
debera estar en el nivel ms bajo de luz, para luego adecuar la
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posicin del condensador o su sustituto para encontrar el pun-
to o altura del condensador en el cual est ms iluminado el
campo con la mnima intensidad de luz. Una vez logrado esto
se incrementa la intensidad poco a poco para lograr una ilumi-
nacin del campo visual satisfactoria para el observador.
Lmpara
La lmpara integrada al microscopio posee un diafragma que
deber estar abierto siempre y con ello permitir el paso de una
adecuada cantidad de luz.
Espejo
El espejo slo existe en aquellos microscopios que no tienen adap-
tada una fuente de luz; en estos microscopios el espejo ocupa la
parte inferior del mismo, colocado sobre el pie o base. El espejo
consta de dos superficies o caras, una plana y otra cncava; pue-
de hacerse girar manualmente de tal forma que es posible expo-
ner hacia arriba cualquiera de las dos caras. La cara plana se utiliza
cuando la fuente de luz es natural (sin lmpara de ningn tipo); la
cara cncava, cuando la fuente de luz es artificial. La orientacin
de la cara deber hacerse observando el campo visual y usando la
cara del espejo adecuada. La funcin del espejo es la de reflejar el
haz luminoso proveniente de la fuente de luz natural o artificial y
dirigirlo hacia la preparacin. El observador, antes de iniciar su
trabajo con el microscopio, debe asegurarse de que la superfi-
cie del espejo est libre de manchas dactilares, para ello es til
tener a la mano un trapo limpio de algo-
dn. La finalidad de las diferentes partes
del microscopio es la de permitir la obser-
vacin de una muestra con el mejor enfo-
que posible, con la iluminacin ms
adecuada y sin movimiento.
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Actividad
Despus de leer todas las instrucciones que a continuacin
se presentan, maneja el microscopio para enfocar una la-
minilla o preparado histolgico.
Iluminacin
Conecta la clavija al enchufe, ya sea de la lmpara o del micros-
copio con luz integrada. En aquellos microscopios que tienen
integrada la fuente de iluminacin y presentan un caja metlica
como regulador coloca el interruptor en encendido (ON) y pro-
cura que la perilla que est sobre su superficie est colocada en
el punto ms bajo de iluminacin, despus podrs aumentar pau-
latinamente la iluminacin girndola despacio hacia la derecha
sin llegar a la escala roja. En algunos microscopios con fuente
de luz integrada, la intensidad luminosa se regula con una peri-
lla colocada sobre la superficie derecha de la base, de tal forma
que girndola de acuerdo con las manecillas del reloj la intensi-
dad aumenta. En los microscopios sin fuente de luz integrada
es necesario verificar que la cara cncava del espejo est dirigi-
da hacia arriba; observando por el (los) ocular(es) con el objeti-
vo de menor aumento (panormico), se mueve el espejo hasta
que el campo quede adecuadamente iluminado, esto puede
mejorarse an ms si se acciona el tornillo del condensador y se
ajusta este ltimo hasta obtener la mxima iluminacin.
Colocacin de la preparacin
Una preparacin histolgica es un corte muy delgado de tejido
colocado entre dos laminillas de vidrio, una ms gruesa y larga
denominada portaobjetos. Se coloca el portaobjetos sobre
la platina, procurando siempre que el cubreobjetos quede
hacia arriba, pues la distancia entre el objetivo y la laminilla
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est calibrada de esta forma. Con el procedimiento antes men-
cionado se evita romper la preparacin con alguno de los obje-
tivos. Posteriormente el portaobjetos se fija, ya sea por medio
de las dos pinzas, colocadas sobre la platina, que oprimen la
laminilla por sus bordes; o bien, con una pinza mvil, que se
encuentra sobre la superficie izquierda de la platina; esta pinza
se debe accionar primero hacia atrs para permitir la entrada de
la laminilla; despus se sujeta lentamente para que la pinza apri-
sione el portaobjetos, el cual queda fijo de esta manera. Por
medio de los tornillos del carro se mueve el portaobjetos para
que el objeto a observar quede exactamente arriba del conden-
sador y pueda recibir el haz luminoso.
Enfoque del objeto
En los microscopios binocu-
lares es necesario regular la
abertura de los oculares de tal
forma que se pueda observar
cmodamente con ambos
oculares. Se cierra el ojo iz-
quierdo y se enfoca la pre-
paracin utilizando slo el
tornillo macromtrico.
En un microscopio monocular no es conveniente cerrar el
ojo que no se est usando para ver la preparacin histolgica.
Algunos microscopios binoculares tienen una escala gra-
bada sobre el tubo del ocular izquierdo, la cual se denomina
tornillo diptrico y sirve para calibrar el microscopio a la agu-
deza visual particular del observador, sobre todo para aquellos
casos en que el observador no tiene la misma agudeza visual en
los dos ojos, para lo cual cierra el ojo derecho y enfoca la
preparacin girando el tornillo diptrico con la yema de los
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dedos ndice y pulgar izquierdos hasta
lograr una imagen lo ms ntida posi-
ble. La observacin, de ahora en ade-
lante, se har utilizando ambos ojos.
Una vez enfocado, con el tornillo
macromtrico se procede a enfocar la
preparacin histolgica. La observacin
con el objetivo panormico sirve para
dar una idea general del objeto obser-
vado, hay que procurar mirar siempre
varios campos microscpicos y seguir el contorno del corte
histolgico que se observa. Se gira el revlver colocando la yema
de los dedos ndice y pulgar sobre la superficie dentada del mis-
mo, de acuerdo con las manecillas del reloj, hasta sentir un tope
o pase suave, de esta manera el siguiente objetivo (10x) estar
en el sitio adecuado. Se procede a enfocar la preparacin nica-
mente con el tornillo micromtrico. Hay que observar varios cam-
pos microscpicos antes de pasar al siguiente objetivo y realizar
el mismo procedimiento descrito. Despus de terminar una se-
sin de observacin, se coloca en posicin de observar el objeti-
vo 4x, se quita la preparacin, se apaga el microscopio, se
desconecta la clavija y finalmente se cubre para evitar que se
empolve. El polvo y la humedad son los peores enemigos del
microscopio.
Recomendaciones importantes
El microscopio es un aparato delicado, hay que manejarlo con
mucho cuidado. Debe permanecer en un lugar bien ventilado y
seco para evitar la formacin de colonias de hongos que pudie-
ran alterar la calidad de los lentes, tambin debe estar fijo en un
lugar pues el constante movimiento del aparato puede causar el
desajuste de los lentes que integran la parte ptica y de esta
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manera perderse la calidad de la imagen. No se debe hacer girar
el revlver tomando los objetivos, sino colocando la yema de los
dedos pulgar e ndice sobre el borde de la placa dentada circular
del revlver, y en la direccin de las manecillas del reloj. En la
prctica, como regla general, es conveniente que al examinar
cualquier preparacin se observen varios campos microscpicos
antes de pasar al siguiente objetivo, para tener una idea general
de lo que se observa. Tanto en los microscopios monoculares
como en los binoculares siempre se debern emplear los dos ojos
y no cerrar uno de ellos (excepcin hecha en el proceso de enfo-
que), ya que este vicio a la larga trae dificultades visuales. En el
caso de los microscopios monoculares se recomienda cubrir el
ojo que no se emplea en la observacin con la palma de la mano,
pero este ojo no deber estar cerrado. La base del microscopio
tiene que permanecer a una distancia no menor de 10 cm del
borde de la mesa, la cual debe ser lisa, firme y no inclinada. En
caso de utilizar el objetivo de inmersin se colocar primero una
gota de aceite de inmersin. Cuando se termina la observacin
siempre hay que limpiar el aceite con un papel especial que no
raye el objetivo. Por ningn motivo se puede dejar sin limpiar el
objetivo de inmersin despus de usarlo. La preparacin siempre
tendr que colocarse de tal forma que el cubreobjetos est dirigi-
do hacia los objetivos y nunca hacia el condensador.
IV IV IV IV IV. . . . . Modalidades de micr Modalidades de micr Modalidades de micr Modalidades de micr Modalidades de microscopios oscopios oscopios oscopios oscopios
Al microscopio fotnico es posible hacer una serie de cambios
y adaptaciones en el sistema ptico, para realizar con mayor
facilidad los estudios que se describen a continuacin.
Iluminacin en campo oscuro
Se utiliza para la observacin de objetos muy transparentes;
la iluminacin en campo oscuro aumenta el contraste entre el
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propio objeto y su fondo. Esto se logra evitando que la luz del
condensador llegue al objetivo, de tal modo que esta falta de
luz constituya un fondo oscuro sobre el que resalte el objeto a
estudiar.
Para la iluminacin con campo oscuro se requiere:
1. Condensador especial de campo oscuro.
2. Montura centrable.
3. Diafragma iris en el objetivo.
4. Iluminacin de gran intensidad.
5. Portaobjetos de 1 o 2 mm de grueso.
6. Aceite de inmersin.
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
Es una tcnica que permite ver con bastante detalle y buen con-
traste objetos muy transparentes, que con la luz ordinaria son
prcticamente invisibles; sirve tambin para detectar diferen-
cias muy pequeas de grosor y densidad del objeto sin necesi-
dad de alterarlo por tincin o cualquier otro procedimiento, de
modo que podemos ver clulas y tejidos vivos en su estado na-
tural. Puede realizarse con microscopios monoculares o bino-
culares y se requiere de los siguientes accesorios: lmpara
(control de intensidad); un disco anular (situado en el conden-
sador); una placa de fase (disco de cristal que en una de sus
caras tiene una depresin o cara anular), cada objetivo debe
tener su placa correspondiente y un tubo telescpico auxiliar
para poder ver la placa de fase dentro del objetivo cuando se
pone en lugar del ocular normal.
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MICROSCOPIO CON LUZ POLARIZADA
Se usa mucho en geologa, mineraloga y qumica para la obser-
vacin e identificacin de cristales, piedras preciosas, estudios
de efectos de calor, etctera; la aplicacin ms sencilla es la
determinacin de la presencia o ausencia de sustancias ptima-
mente activas (que se ven como objetos brillantes que destacan
sobre el fondo).
Aplicaciones en medicina:
Identificacin de partculas de slice en tejido de pulmn
(silicosis) o de partculas de asbesto (asbestosis).
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
La fluorescencia es un fenmeno que presentan ciertas sustan-
cias, por el cual, si se les ilumina con luz de onda corta, que es
invisible (ultravioleta), son capaces de convertirla en luz de onda
larga, que es visible. Existen sustancias vegetales y minerales
que sin ninguna preparacin previa presentan fluorescencia de
colores especficos cuando se radian con luz ultravioleta, a esta
fluorescencia natural se le denomina fluorescencia primaria. A
las sustancias de inters en zoologa y medicina deben agregarse
ciertos colorantes (fluorocromos); esto se denomina fluorescen-
cia secundaria; en este caso las sustancias son de gran especifi-
cidad, y por ello cada tejido puede distinguirse e identificarse
segn el tipo de fluorescencia o fluorocromo asimilado.
Fluorocromos ms usados: acrimina, azul de anilina, naranja de
acridina, tioflavinas, fucsina, isotiocianato de fluorescena e in-
cluso el antibitico tetraciclina.
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Aplicaciones en medicina:
Tincin con auramina para la observacin de los bacilos
de la tuberculosis en esputos; tcnica de naranja de acridina
para el diagnstico temprano de tumores malignos; la tc-
nica de anticuerpos marcados (mtodo de Coon), la cual
se basa en hacer visibles las sustancias extraas que pene-
tran en el organismo denominadas antgenos, marcando
los anticuerpos que reaccionan ante ellos con un colorante
fluorescente. Esta ltima tcnica permite, entre otras co-
sas, el diagnstico de la rabia y para realizarla, se requiere
una fuente de luz ultravioleta.
MICROSCOPIO ESTEREOSCPICO
Este microscopio permite la observacin del objeto
tridimensionalmente (con longitud, anchura y profundidad). El
microscopio estereoscpico consta realmente de dos micros-
copios completos, cada uno con su objetivo y su ocular.
Su fundamento radica en el hecho de que por estar los
ojos del observador separados, cada ojo ve las cosas desde un
ngulo ligeramente distinto, con lo cual puede precisarse la dis-
tancia relativa a que se encuentran los distintos objetos. Las
partes pticas del microscopio estereoscpico difieren de las
encontradas en un microscopio fotnico.
Aplicaciones en medicina:
Determinacin de la forma de las colonias bacterianas, exa-
men minucioso de ciertos parsitos macroscpicos,
disecciones finas de tejidos animales y otros.
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MICROSCOPIO ELECTRNICO
Para la observacin de muestras, estos microscopios no utilizan
fotones, sino electrones. Los electrones se desplazan en lnea
recta cuando se mueven en el vaco y su velocidad de desplaza-
miento puede ser ms rpida gracias a la ayuda de condensadores
magnticos. El microscopio electrnico tiene fijo el aumento
del objetivo y pueden variar los aumentos gracias a modifica-
ciones en la fuerza del campo magntico de ciertas lentes pro-
tectoras que son equivalentes a los oculares. Los electrones son
desviados por las porciones con peso atmico elevado del ob-
jeto a observar, de tal forma que se observan manchas oscuras
en la pantalla fluorescente, llamadas porciones electrodensas;
aquellos sitios que no desvan los electrones por no tener un
peso atmico elevado no forman dichas manchas y se dice que
son porciones electroclaras. En la imagen se observa el contras-
te entre zonas o estructuras electroclaras y electrodensas. El
lmite de resolucin del m. e. es de 2 a 3.5 , en teora, porque
en la prctica suele ser de 10 .
Aplicaciones en medicina:
Permite el estudio de todos los aspectos ultraestructurales
que facilitan la comprensin de procesos patolgicos y fi-
siolgicos de los distintos tipos celulares que conforman a
los animales domsticos, as como tambin de los
microorganismos que provocan las diversas enfermedades.
Para visualizar el video Principios Bsicos del Microscopio
Fotnico haga click aqu
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Prctica 4
Tejido epitelial
de revestimiento
OBJETIVOS
4. Identificar al microscopio fotnico las diferentes varieda-
des de epitelios de revestimiento.
4.1. Identificar el endotelio de un vaso sanguneo.
4.2. Identificar el epitelio que reviste los conductos secretores
de las glndulas salivales.
4.3. Identificar el epitelio que reviste el intestino.
4.4. Identificar el epitelio que reviste la trquea.
4.5. Identificar el epitelio que constituye la epidermis de la piel.
4.6. Identificar el epitelio que reviste la vejiga.
INTRODUCCIN
El tejido epitelial de revestimiento es una variedad que cubre
las superficies externas del organismo y las cavidades internas
del mismo. Sus clulas se disponen en una o varias capas, por lo
que se habla de epitelio simple o estratificado, respectivamen-
te; adems, la forma de las clulas del estrato ms superficial
sirven para clasificarlo.
Los vasos sanguneos (cualquiera que sea su dimensin)
presentan hacia su porcin central, que en adelante se le
denominar luz del rgano, un epitelio de revestimiento que se
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caracteriza por estar constituido por un solo estrato o capa de
clulas epiteliales aplanadas, que recibe el nombre de epitelio
plano simple, y endotelio, genricamente, cuando forma parte
de un vaso sanguneo.
Actividad
En un corte histolgico de vaso san-
guneo estudia el endotelio, iden-
tifica su localizacin y realiza un
dibujo del mismo.
GLNDULA SALIVAL
Los conductos secretores de las glndulas salivales presentan
un epitelio cbico simple, es decir, una sola capa de clulas c-
bicas, las cuales tienen ncleos esfricos y centrales.
Actividad
En un corte histolgico de
glndula salival estudia e
identifica la localizacin de
un conducto secretor y rea-
liza un dibujo del mismo.
EPITELIO DE REVESTIMIENTO
El epitelio de revestimiento del intestino delgado es un epitelio
cilndrico simple; ste se caracteriza por tener clulas mas altas
que anchas, sus ncleos suelen ser ovoides.
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Actividad
Estudia el corte histolgico transversal de intestino y loca-
liza el epitelio intestinal.
Haz un dibujo del epitelio de revestimiento del intestino.
El epitelio de revestimiento de la trquea es
seudoestratificado cilndrico ciliado; este tipo de epitelio es ca-
racterstico de las vas respiratorias, por lo que se le denomina
epitelio respiratorio. Se dice que es seudoestratificado porque a
pesar de tener solo un estrato celular, sus ncleos se encuentran
a diferentes alturas, por lo cual dan la apariencia de que hay
ms de una capa de clulas; su forma es cilndrica y presenta
prolongaciones de membrana llamadas cilios hacia la porcin
externa (tambin denominada porcin apical o luminal, por estar
en contacto con la luz externa del rgano); stos, a diferencia
de las microvellosidades, s pueden apreciarse claramente al mi-
croscopio fotnico.
Actividad
Estudia el corte histolgico
transversal de trquea para lo-
calizar el epitelio de revesti-
miento.
Haz un dibujo del epitelio de
revestimiento de la trquea.
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La piel presenta un epitelio de revestimiento formado por
varios estratos celulares; la ltima capa est formada por una
banda de una sustancia carente de ncleos, esta banda repre-
senta el estrato crneo y es acelular, por debajo de esta capa
pueden distinguirse clulas aplanadas, por lo que a este tipo de
epitelio de revestimiento se le denomina epitelio estratificado
plano con queratina, que es la sustancia que constituye el estrato
crneo.
Actividad
Estudia el corte histolgico de piel y localiza el epitelio.
Elabora un dibujo de las estructuras mencionadas.
El epitelio de revestimiento de la vejiga recibe el nombre
de epitelio transicional; este epitelio se clasifica como
estratificado, aunque existen algunos autores que lo clasifican
como seudoestratificado; se caracteriza porque la capa de clu-
las ms superficial (o las clulas que estn en contacto con la
luz del rgano) puede adoptar diversas formas, esto depende
del estado funcional del rgano.
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Actividad
Estudia el corte histolgico de
vejiga para localizar el epitelio
de transicin o modificable.
Dibuja el epitelio transicional.
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Prctica 5
Tejido epitelial glandular
OBJETIVOS
5. Al microscopio fotnico, identificar las diferentes varieda-
des de epitelios glandulares.
5.1. Identificar las clulas caliciformes en el epitelio de la tr-
quea.
5.2. Identificar los acinos serosos, mucosos y mixtos de una
glndula salival.
5.3. Identificar una glndula holocrina.
5.4. Identificar una glndula endocrina cordonal y una folicular.
INTRODUCCIN
El tejido epitelial glandular puede clasificarse de muy diversas
maneras, sin embargo, en esta prctica abordaremos aquellas
caractersticas estructurales que nos permitan identificar fcil-
mente, en una forma general, el tejido epitelial glandular.
Las glndulas unicelulares son aquellas en que la glndula
es una sola clula, como ejemplo de stas tenemos las clulas
caliciformes que pueden encontrarse intercaladas entre las c-
lulas epiteliales de revestimiento de las vas respiratorias y del
intestino. Estas clulas se observan como espacios aparentemen-
te vacos o se detectan, al utilizar tcnicas de rutina como las de
hematoxilina y eosina, porque se tien dbilmente y adoptan la
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forma de cliz o copa;
tienen la porcin
basal ms estrecha y la
porcin apical ms
ancha, el ncleo se
encuentra hacia la
base y es alargado.
La causa de que
no se tian adecuada-
mente es que el pro-
ducto de su secrecin est constituido por glucoprotenas, las
cuales deben teirse con tinciones especiales como la tincin
de PAS (cido perydico de Schiff).
Actividad
Estudia un corte histolgico transversal de trquea y loca-
liza las clulas caliciformes.
Identifica las clulas caliciformes intercaladas en el epite-
lio de revestimiento y dibjalas.
La mayora de las glndulas son pluricelulares y se pueden
clasificar de acuerdo con el sitio donde vierten su secrecin: en
glndulas exocrinas porque vierten su secrecin al exterior a
travs de conductos y en glndulas endocrinas, porque vierten
su secrecin directamente a la sangre.
La porcin de una glndula exocrina que elabora el pro-
ducto de secrecin es el adenmero. Los adenmeros pueden
tener forma de tubo o de acino. El acino es una estructura esf-
rica constituida por clulas piramidales que presentan ncleos
hacia la base y una pequea luz al centro. Entre los acinos pue-
den localizarse conductos que comunican con el exterior y per-
miten la salida del producto secretado. Tomando en cuenta la
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naturaleza de la secrecin, existen tres tipos de acinos: serosos
(que secretan protenas), mucosos (que secretan moco) y mix-
tos o seromucosos. Los acinos serosos presentan el ncleo basal
y esfrico; en cortes teidos con hematoxilina y eosina (H y E)
el citoplasma situado en la periferia del ncleo es de color mo-
rado, un poco ms claro que el ncleo; se dice entonces que el
citoplasma es basfilo, por la presen-
cia de retculo endoplsmico rugo-
so en esta porcin; hacia la regin
apical, el citoplasma es del color ro-
sado de la eosina, se dice entonces
que es acidfilo, esta porcin con-
tiene el aparato de Golgi.
En los acinos mucosos el ncleo es
aplanado y est orientado hacia la base
de la clula, en estos casos el citoplas-
ma de las clulas no se tie bien con las
tinciones de rutina, de tal manera que
se ve cristalino espumoso.
Cuando los acinos mucosos se ti-
en con la tcnica de PAS, el citoplas-
ma aparece de color rosa fuerte, ya que
es positivo a la reaccin de PAS.
Los acinos seromucosos son una
combinacin de ambos tipos; presen-
tan una disposicin muy caracterstica:
la parte mucosa est en el centro y las
clulas seromucosas, en la periferia, for-
mando una media luna alrededor deno-
minada media luna serosa.
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Actividad
Estudia el corte histolgico de glndula salival e identifica
los diferentes tipos de acinos: serosos, mucosos y mixtos.
Otro tipo de glndulas exocrinas son las glndulas
tubulares; reciben este nombre porque el conjunto de clulas
glandulares adopta una forma cilndrica, en cuya luz es vertida
la secrecin; en los cortes histolgicos no siempre se observa
su comunicacin con la superficie, por lo que en ciertas reas se
ven cortes oblicuos de las glndulas y en otras, si el corte es
paralelo a la direccin longitudinal de la glndula, se observa su
unin con la luz del rgano; las glndulas tubulares a veces apa-
recen enrolladas (como las sudorparas), o bien, conectadas con
alvolos o acinos; en tales casos la secrecin provendr tanto
de estas ltimas estructuras como de las glndulas tubulares con
las que se unen directamente. No debern confundirse las gln-
dulas tubulares con los conductos excretores, que nicamente
conducen la secrecin, pero no la producen.
Actividad
Estudia el corte histolgico de intestino grueso, identifica
las glndulas intestinales.
Observa e identifica en un corte
de piel los diferentes tipos de gln-
dulas sudorparas (tubulares) y haz
un esquema de esto.
Las glndulas endocrinas, de acuer-
do con la forma que adopta el conjun-
to de sus clulas, pueden clasificarse en
glndulas endocrinas cordonales, cuyas
clulas se disponen formando cordones
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separados entre s por capilares sanguneos (la mayora de las
glndulas endocrinas son cordonales) y en las glndulas
foliculares, cuya caracterstica es que sus clulas forman esferas
o folculos completamente hermticos, en el centro de los cua-
les almacenan el producto de la secrecin.
Actividad
Estudia el corte histolgico de una glndula cordonal as
como de una glndula folicular y rea-
liza el reconocimiento de cada una.
En un corte de adrenal identifica los
cordones que forman las clulas
epiteliales glandulares.
En un corte de tiroides localiza los
folculos tiroideos.
Las glndulas pueden clasificarse
tambin de acuerdo con la integridad
de las clulas que la forman al terminar
su ciclo secretor; de esta manera, se pue-
den encontrar glndulas merocrinas (en
las que la integridad permanece intacta
al terminar el ciclo secretor), apocrinas
(en las que parte de su citoplasma cons-
tituye el producto de secrecin) y las
glndulas holocrinas (en las que el producto de secrecin es la
totalidad de la clula).
Debido a que los conceptos mencionados se refieren a pro-
cesos dinmicos de las clulas glandulares, en el caso de las
glndulas merocrinas, y otras de este tipo, es difcil apreciar en
una prctica de rutina el proceso de secrecin; sin embargo, en
las glndulas holocrinas (como es el caso de las glndulas
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sebceas de la piel) y en las apocrinas (como es el caso de la
glndula mamaria) es posible observar las clulas que apenas
comienzan el ciclo secretor, as como las clulas que terminan
dicho ciclo.
Actividad
Estudia un corte histolgico de
piel para ayudarte en la locali-
zacin de las glndulas sebceas
(holocrinas) y dibujalas.
Estudia un corte histolgico de gln-
dula mamaria en produccin y loca-
liza las clulas que elaboran la
secrecin lctea (glndulas apocrinas)
y dibjalas.
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Prctica 6
Tejido conjuntivo ordinario
OBJETIVOS
6. Con el microscopio fotnico, identificar los tipos de tejido
conjuntivo ordinario que ms frecuentemente aparecen en
los cortes histolgicos.
6.1. Identificar el tejido conjuntivo ordinario laxo areolar.
6.2. Identificar el tejido conjuntivo adiposo.
6.3. Identificar el tejido conjuntivo denso irregular.
INTRODUCCIN
En un corte histolgico de cualquier rgano del aparato diges-
tivo o del aparato respiratorio, por lo general est presente el
tejido epitelial, el tejido conjuntivo y el tejido muscular, oca-
sionalmente hay tambin algunos nervios. En prcticas ante-
riores se ha aprendido a identificar el tejido epitelial en sus dos
variedades: revestimiento y glandular. En esta prctica se apren-
der a identificar los tipos de tejido conjuntivo ordinario: laxo
y denso. Del primero se distinguirn el areolar y el adiposo,
mientras que del segundo slo se estudiar el denso irregular. El
tejido conjuntivo se caracteriza por contar con diversos tipos
celulares separados por fibras y sustancia fundamentalmente
amorfa. La proporcin que guardan estos elementos entre s da
lugar a las variedades y subtipos de tejido.
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El tejido conjuntivo ordinario laxo se diferencia del denso
en la cantidad de fibras y sustancia fundamental amorfa que se
observa en el espacio intercelular. En el primero es posible apre-
ciar tanto fibras como sustancia fundamental amorfa o, mejor
dicho, el espacio que estuvo ocupado por la sustancia funda-
mental amorfa; en el tejido conjuntivo denso, el espacio
intercelular est ocupado casi exclusiva-
mente por fibras.
Si queremos localizar fcilmente el
tejido conjuntivo ordinario laxo en un cor-
te de un rgano dado, debemos primero
identificar el tejido epitelial. Por lo gene-
ral, el tejido que encontramos inmediata-
mente por debajo del tejido epitelial es el
tejido conjuntivo ordinario laxo areolar.
En un corte de piel se puede encon-
trar el tejido conjuntivo ordinario laxo
areolar por debajo del epitelio plano
estratificado; en un corte de vejiga se le localiza debajo del epi-
telio transicional; en un corte de glndula salival es posible ob-
servarlo distribuido entre los acinos glandulares y los conductos
excretores.
Actividad
Estudia el corte histolgico de piel, identifica el tejido
conjuntivo ordinario laxo areolar y dibjalo.
El tejido conjuntivo adiposo se encuentra distribuido en todo
el organismo; las clulas que lo constituyen, las adiposas, son
fciles de identificar mediante las siguientes caractersticas: su
forma es esfrica o polidrica, su citoplasma est ocupado casi en
su totalidad por lpidos, su ncleo es aplanado y aparece despla-
zado hacia la periferia. El tejido adiposo formado por este tipo
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de clulas, microscpicamente, es de
color blanco y se denomina tejido
adiposo unilocular.
Las clulas adiposas tambin
pueden presentar un ncleo central
y varias esferas pequeas llenas de
lpidos repartidas en el citoplasma.
El tejido adiposo constituido por este
tipo de clulas, visto de manera
macroscpica, es de color gris y se
denomina tejido adiposo multilocular.
Los lpidos que contienen las clulas adiposas cualquiera
que sea el tipo se disuelven en el alcohol y xilol usados en el
procesamiento histolgico de rutina, por
lo que estas clulas pueden observarse
como una gran esfera vaca limitada por
una delgada porcin de citoplasma, o
bien, como un conjunto de pequeas es-
feras vacas repartidas en el citoplasma.
Adems de clulas adiposas, el tejido
conjuntivo adiposo tiene fibras reticulares
y en ocasiones se observan clulas ceba-
das dispersas.
Actividad
Estudia un corte histolgico donde aparezca el tejido adi-
poso, identifcalo en la laminilla y haz un dibujo del mismo.
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Para aprender a identificar el tejido conjuntivo ordinario
denso irregular es necesario contar con el corte histolgico de
un rgano de los denominados compactos o parenquimatosos.
El bazo, los linfonodos, el rin y el hgado son algunos ejem-
plos de rganos parenquimatosos.
Estos rganos siempre se encuentran limitados en toda su
periferia por una cpsula constituida por tejido conjuntivo den-
so irregular.
Actividad
Estudia un corte histolgico de
linfonodo y uno de bazo, identifi-
ca el tejido conjuntivo denso irre-
gular y haz un dibujo del mismo.
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Prctica 7
Tejido conjuntivo
especializado de sostn
OBJETIVOS
7. Con el microscopio fotnico, identificar los dos diferen-
tes tipos de tejido conjuntivo de sostn.
7.1. Identificar el tejido cartilaginoso hialino, elstico y fibroso.
7.2. Identificar el pericondrio, los grupos isognicos y la ma-
triz cartilaginosa.
7.3. Identificar los diferentes tipos celulares que estn presen-
tes en el cartlago.
7.4. Identificar el tejido seo maduro e inmaduro.
7.5. Identificar el periostio, endostio y conductos de la osteona.
7.6. Identificar los diferentes tipos celulares que estn presen-
tes en el tejido seo.
INTRODUCCIN
En el tejido conjuntivo especializado de sostn existen dos va-
riedades: el tejido cartilaginoso y el tejido seo. El tejido
cartilaginoso incluye a tres tipos: a) cartlago hialino, b) cartla-
go elstico, y c) cartlago fibroso o fibrocartlago.
En el cartlago hialino existe una misma proporcin de clu-
las, fibras y sustancia fundamental. Aunque en ste predominan
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las fibras colgenas, en las prepara-
ciones comunes no se observan, esto
se debe a que las fibras presentan
principalmente una estructura de
fibrillas que slo son apreciables con
el objetivo de inmersin y a que las
fibras tienen un ndice de refraccin muy similar al de la sustan-
cia fundamental que las rodea, por lo que las fibrillas no pueden
distinguirse o individualizarse. La periferia del cartlago se de-
nomina pericondrio; ste est formado por tejido conjuntivo
denso irregular, con capilares sanguneos en la porcin interna
y fibroblastos en la externa.
Las clulas se encuentran dispersas y suelen formar peque-
os grupos. En general, en el cartlago es posible distinguir tres
tipos de clulas: a) condrocitos, b) condroblastos y c) clulas
condrgenas.
Cuando el cartlago hialino forma parte del cartlago
epifisiario, los condrocitos se disponen en hileras formando co-
lumnas. En cortes teidos con H y E, la matriz cartilaginosa se
tie de un color dbilmente morado, y con la tcnica tricrmica
de Masson, se tie de color azulado.
Actividad
Estudia y localiza en un corte histolgico de cartlago las
diferentes partes del cartlago hialino.
En un corte transversal de trquea identifica el cartlago
hialino, la matriz, las clulas y el pericondrio.
El cartlago elstico contiene en su matriz gran cantidad
de fibras elsticas que se conectan con el pericondrio. En
este tipo de cartlago existe una proporcin equilibrada de c-
lulas y fibras, mientras que la sustancia fundamental es escasa.
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Las fibras elsticas pueden apreciarse en
las preparaciones de rutina, pero en
aquellos cortes teidos con H y E con-
viene observarlas con el objetivo seco
fuerte (40x), mientras que en las
tinciones tricrmicas de Masson no es
necesario, pues son fcilmente
reconocibles por el color rojizo que pre-
sentan.
Actividad
Estudia el corte histolgico de un cartlago elstico e iden-
tifica sus partes.
En un corte de pabelln auricular, identifica el cartlago
elstico.
El cartlago fibroso, o fibrocartlago, se considera un teji-
do de transicin entre el cartlago hialino y el tejido conjuntivo
denso irregular porque contiene gran cantidad de fibras
colgenas. Este tipo de cartlago carece de pericondrio
bien delimitado, se caracteriza por tener pocas clulas, escasa
sustancia fundamental amorfa y una gran
cantidad de fibras colgenas, que pueden
verse con el microscopio fotnico.
Actividad
Estudia el corte histolgico de un car-
tlago fibroso e identifica sus partes.
En un corte de snfisis pbica, identifi-
ca el cartlago fibroso.
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El hueso o tejido seo es tambin un tipo de tejido
conjuntivo especializado de sostn y constituye el esqueleto de
los animales vertebrados.
Los cortes histolgicos del tejido seo requieren de trata-
mientos especiales para poder ser cortados por el micrtomo,
entre ellos est el de preparar finas lminas por desgaste. En
este tipo de preparacin las clulas no estn presentes pero se
pueden estudiar las lagunas y canalculos; otra tcnica es la des-
calcificacin con una solucin cida, que permite el estudio de
las clulas.
Por sus caractersticas histoqumicas, el tejido seo puede
dividirse en dos tipos: a) tejido seo primario o inmaduro, y
b) tejido seo maduro o secundario. El tejido seo inmaduro o
primario se encuentra durante la
vida embrionaria, pero en la
vida posnatal puede observarse
en ciertos sitios como los dis-
cos epifisiarios y los alvolos
dentarios, su caracterstica prin-
cipal es que su matriz sea es
basfila, es decir, que se tie de
un color azuloso con H y E.
El tejido seo maduro se encuentra en los animales adultos
y se caracteriza por presentar fibrillas colgenas paralelas y
concntricas en torno a un espacio central que contiene uno o
dos vasos sanguneos. Este espacio
se denomina canal o conducto de
la osteona. La matriz sea del teji-
do maduro es acidfila. La colora-
cin se ve influida por los procesos
de descalcificacin utilizados (ci-
do clorhdrico o cido ntrico).
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Actividad
Estudia un corte histolgico transversal de hueso e identi-
fica el tejido seo maduro y el inmaduro.
En un corte de hueso podemos encontrar dos porciones:
una que reviste la superficie externa del hueso, llamada periostio,
y otra que recubre las paredes medulares o centrales del hueso,
llamada endostio. Las clulas presentes en el tejido seo son
ostegenas, osteoblastos, osteocitos y osteoclastos. Las clulas
ostegenas forman parte del periostio y del endostio. Tienen
una forma ovoide-aplanada, en el primero, y cbica con ncleo
esfrico, en el segundo. Los osteoblastos se encuentran debajo
de las clulas ostegenas y cuentan con citoplasma basfilo y
ncleo ovalado. Los osteocitos estn en la matriz sea, presen-
tan prolongaciones citoplasmticas, forma alargada, ncleo
ovoide y cromatina condensada. Los osteoclastos son clulas
grandes y multinucleadas, que suelen localizarse en los bordes
de la matriz sea.
Actividad
Estudia el corte histolgico de un hueso compacto e iden-
tifica sus componentes histolgicos.
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Prctica 8
Tejido conjuntivo
especializado:
hematopoytico y sangre
OBJETIVOS
8. Con uso del microscopio fotnico, identificar los dos di-
ferentes tipos de tejido hematopoytico y los diferentes
componentes sanguneos.
8.1. Identificar el tejido conjuntivo linfoide.
8.2. Identificar el tejido conjuntivo mieloide.
8.3. Identificar los diferentes elementos figurados de la sangre
en las diferentes especies domsticas.
INTRODUCCIN
Dentro de la clasificacin de tejido conjuntivo, los que partici-
pan en los procesos de hematopoyesis son el tejido linfoide y el
tejido mieloide.
El tejido linfoide est constituido por una trama
tridimensional de clulas y fibras reticulares.
Entre las clulas hay macrfagos fijos y libres, clulas de
la serie linfoide en proceso de diferenciacin (linfoblastos y
clulas precursoras), adems de clulas maduras como linfocitos
y clulas plasmticas.
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Este tipo de tejido hematopoytico
tiene como una de sus principales fun-
ciones la produccin de clulas que par-
ticipen en la defensa del organismo,
como es el caso de los linfocitos, clu-
las plasmticas y macrfagos.
Siguiendo el estudio del tejido
conjuntivo con base en la cantidad y
disposicin de clulas, fibras y sustancia fundamental, pode-
mos clasificar el tejido linfoide de la siguiente manera:
a) Tejido linfoide laxo.
b) Tejido linfoide denso.
c) Tejido linfoide nodular.
En el tejido linfoide laxo hay una mayor proporcin de
clulas fijas que de clulas libres. Se denomina tejido linfoide
denso, a aqul en el que predominan las clulas libres, particu-
larmente los linfocitos. En el tejido linfoide nodular tambin
son ms abundantes las clulas libres (linfocitos principalmen-
te), es un tipo de tejido linfoide denso, pero en este caso las
clulas se agrupan en estructuras esfricas, tpicas del tejido
linfoide, denominadas ndulos linfticos.
Actividad
En un corte de rgano linfoide identifica el tejido linfoide
y clasifcalo en denso, laxo o nodular.
El otro tipo de tejido hematopoytico es el tejido mieloide.
Este tejido constituye la mdula sea; se localiza en el canal
medular de la difisis y en las cavidades del hueso esponjoso,
incluyendo el diploe, que es la porcin sea trabecular entre dos
lminas de hueso plano, como los huesos de la mandbula.
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Existen dos variedades en el adulto:
a) Mdula sea amarilla, constituida prin-
cipalmente de tejido adiposo sin funcin
hematopoytica.
b) Mdula sea roja o hematgena, con fun-
cin hematopoytica.
El tejido mieloide est constituido
por una trama de fibras y clulas
reticulares, vasos sanguneos y clulas
libres distribuidas en dicha trama.
Las clulas libres son distintos
tipos celulares en diversas etapas de ma-
duracin, que dan lugar a eritrocitos o leucocitos; existen ade-
ms otros tipos celulares como adipocitos, fibroblastos,
macrfagos y un tipo de clulas muy grandes, tpico de la m-
dula sea que se denomina megacariocito. Los megacariocitos
dan origen a las plaquetas, las cuales tienen ncleo grande y
lobulado, citoplasma abundante y ligeramente basfilo, con nu-
merosas granulaciones en su citoplasma.
Actividad
Estudia un corte histolgico transversal de hueso, identifi-
ca el tejido mieloide y observa lo dispuesto en la mdula
sea.
La sangre y la linfa constituyen un tipo de tejido conjuntivo
especializado cuya funcin es la de transporte.
La sangre est formada por una fase lquida denominada
plasma y una fase slida constituida por los elementos figura-
dos de la sangre, es decir, los eritrocitos, los leucocitos y las
plaquetas. Los eritrocitos en los mamferos tienen la forma de
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un disco bicncavo y cuando se obser-
van de frente presentan un contorno cir-
cular, la caracterstica ms importante
es que carecen de ncleo, cada uno es
de color anaranjado plido y en con-
junto dan el color rojo caracterstico de
la sangre. Los eritrocitos de las aves s
tienen ncleo y es ovalado.
Los leucocitos se dividen en
leucocitos agranulosos (linfocitos y
monocitos) y leucocitos granulosos (basfilos, neutrfilos y
eosinfilos).
Los linfocitos pueden ser grandes, medianos y pequeos,
se caracterizan por presentar un ncleo grande y un citoplasma
escaso que se observa como un halo basfilo alrededor del n-
cleo. El linfocito grande presenta ncleo
vesicular y ncleo prominente. Los
monocitos son clulas grandes que miden
de 2 a 3 m dimetros de eritrocito, el n-
cleo es excntrico y grande, en forma de
herradura, y se tie dbilmente; el citoplas-
ma es relativamente abundante, con la tc-
nica de Wright se
tie de color gris
azuloso.
Los neutrfilos son un tipo de
leucocitos granulosos, su ncleo puede
ser de diversas formas; hay neutrfilos
cuyos ncleos presentan de dos a cinco
lbulos ovales irregulares conectados
por filamentos de cromatina; se dice
que las clulas con mayor nmero de
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lbulos son ms maduras. Su citoplasma puede te-
ner grnulos muy finos con afinidades tintoriales
variadas: basfilas y acidfilas. En los frotis, di-
chos grnulos son difciles de observar.
Los eosinfilos contienen grnulos acidfilos
cuyo dimetro vara segn la especie, el ncleo es
lobulado.
Los basfilos son difciles de encontrar en los
frotis sanguneos; son del mismo tamao que los
neutrfilos, presentan un ncleo lobulado de con-
torno irregular; los grnulos son basfilos y en
ocasiones hay tantos que el ncleo no se aprecia
con claridad.
Las plaquetas son ms pequeas que los
eritrocitos, carecen de ncleo y tienen diversas for-
mas, son de color lila y en su interior presentan
grnulos pequeos. En las aves, las funciones de la
plaqueta son llevadas a cabo por unas clulas de-
nominadas trombocitos.
Actividad
Estudia un frotis sanguneo para identificar los diferentes
elementos figurados de la sangre en las distintas especies
domsticas.
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Prctica 9
Tejido muscular
OBJETIVOS
9. Con el uso del microscopio fotnico, identificar los tres
diferentes tipos de tejido muscular.
9.1. Identificar el tejido muscular estriado esqueltico.
9.2. Identificar las fibroclulas musculares estriadas cardacas
tpicas y los discos intercalares.
9.3. Identificar las fibroclulas conductoras.
9.4. Identificar el tejido muscular liso.
INTRODUCCIN
El tejido muscular est constituido por clulas que poseen un
aparato contrctil, que es el responsable de los movimientos
corporales.
Por sus caractersticas morfolgicas y funcionales pueden
distinguirse tres tipos de tejidos musculares: tejido muscular
estriado esqueltico, tejido muscular estriado cardaco y tejido
muscular liso. Cualquiera que sea el tipo de tejido muscular,
con la tcnica de H y E, se observa de color rosa intenso, y con
la tincin tricrmica de Masson, de color rojo.
El tejido muscular estriado esqueltico presenta estras
transversales al eje longitudinal de las fibras musculares. En el
microscopio ptico, dichas estras aparecen como pequeas
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lneas oscuras sobre el citoplasma de la clula muscular, que
slo pueden observarse con objetivo seco fuerte (40x) o con el
de inmersin de aceite (100x). Las clulas tienen varios ncleos
que se sitan en la periferia; esto ltimo puede apreciarse en los
cortes longitudinales, pero an ms en los cortes transversales
de las fibras celulares.
Actividad
En un corte histolgico de msculo estriado esqueltico,
estudia las estructuras antes mencionadas.
En un corte histolgico de msculo estriado esqueltico,
identifica la posicin de los ncleos y las estriaciones de
las fibras musculares; elabora un esquema de lo observado.
El tejido muscular estriado cardaco est formado por tres
tipos de clulas: clulas musculares estriadas cardacas tpicas,
clulas nodales y miofibras cardacas conductoras.
Las fibras musculares estriadas cardacas tpicas presentan
estriaciones transversales, al igual que el msculo estriado es-
queltico; sus clulas tienen uno o dos ncleos alargados y cen-
trales; en el punto de unin entre dos
clulas adyacentes, con el objetivo seco
fuerte (40x) o con el de inmersin en
aceite (100x), se pueden observar las
lneas oscuras ms gruesas que las
estriaciones, estas lneas se denominan
discos intercalares.
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Las miofibras cardacas conducto-
ras son clulas ms grandes que las fi-
bras musculares cardacas tpicas, son
fusiformes, presentan un ncleo central;
el citoplasma es poco acidfilo, porque
contiene gran cantidad de glucgeno,
y no se observan estriaciones en l.
Actividad
Estudia el corte histolgico transversal de corazn para
identificar las estructuras antes descritas.
Localiza en el corte las fibras musculares cardacas tpicas,
los discos intercalares y las fibroclulas conductoras.
El tejido muscular liso tambin es llamado involuntario o
visceral, forma parte del aparato digestivo, urogenital, respira-
torio y vascular. Morfolgicamente, sus
clulas presentan un solo ncleo cen-
tral y no se encuentran estriaciones en
su citoplasma. En un corte transversal
se observan estructuras circulares o
poligonales con un ncleo central. En
un corte longitudinal se aprecian los n-
cleos alargados e irregulares. Los lmi-
tes celulares son muy poco detectables
con la tcnica de H y E.
Actividad
Estudia un corte histolgico transversal de tero e identi-
fica el tejido muscular liso.
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Prctica 10
Tejido nervioso
OBJETIVOS
10. Con el uso del microscopio fotnico, identificar las
diferentes porciones del sistema nervioso de inters
en un diagnstico histopatolgico.
10.1. Identificar la capa molecular y los pericariones
piramidales presentes en la sustancia gris del cerebro.
10.2. Identificar las diferentes porciones de la sustancia gris
del cerebelo.
10.3. Identificar las diferentes porciones de la sustancia gris
de la mdula espinal.
10.4. Identificar las clulas propias de un ganglio nervioso.
10.5. Identificar la apariencia de un corte transversal o
longitudinal de un nervio perifrico.
INTRODUCCIN
El tejido nervioso tiene como una de sus principales funciones
la coordinacin de las actividades de otros tejidos del cuerpo.
Est constituido por clulas nerviosas o neuronas altamente
especializadas y por clulas de sostn, llamadas en conjunto
clulas de la neuroglia. Anatmicamente el sistema nervioso se
divide en sistema nervioso central (SNC) y sistema nervioso pe-
rifrico (SNP). El primero est formado por el encfalo y la
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mdula espinal; el segundo, por los ganglios nerviosos y los
nervios. Al encfalo lo constituyen los hemisferios cerebrales,
el diencfalo, el tallo cerebral, el cerebelo y el bulbo raqudeo.
En esta prctica se identificaran cortes histolgicos de los he-
misferios cerebrales, del cerebelo, de la mdula espinal, de un
ganglio nervioso y de un nervio.
CEREBRO
Los hemisferios cerebrales son dos, cada uno presenta hacia su
superficie externa una serie de pequeos pliegues denominados
circunvoluciones cerebrales. stas se pueden apreciar bien en
los mamferos domsticos, pero no en las aves. La sustancia gris
del cerebro se llama corteza cerebral; por debajo de sta se en-
cuentra la sustancia blanca. En la sustancia gris se puede apre-
ciar una zona superficial denominada capa molecular; por debajo
de esta capa es posible observar somas de neuronas piramidales,
granulares, estrelladas, fusiformes y otras. La sustancia blanca
est formada nicamente de fibras nerviosas y clulas de la
neuroglia, sin embargo, en ocasiones se distinguen algunos
acmulos de cuerpos o somas neuronales que entre esta sustan-
cia reciben el nombre de ncleos grises.
Actividad
En un corte transversal de cerebro
identifica en la corteza cerebral la
capa molecular y las clulas
piramidales y granulosas; asimis-
mo, la sustancia blanca y elabora
un esquema.
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CEREBELO
Macroscpicamente el cerebelo consta de dos hemisferios la-
terales y una eminencia central llamada vermis. Al cortarse por
la lnea media, el cerebelo presenta un aspecto de arborizacin
o foliacin.
Como en los hemisferios, en el cerebelo la sustancia gris
constituye la corteza, y la sustancia blanca, el centro. El cere-
belo presenta externamente ondulaciones marcadas llamadas
folias cerebelosas; estos pliegues tienen el aspecto de un tallo
central con numerosas ramas, por esto al cerebelo tambin se le
conoce como el rbol de la vida. La sustancia gris se localiza en la
porcin cortical, por lo cual recibe el nombre de corteza
cerebelosa. En ella se distinguen tres capas que, de las meninges
hacia la porcin medular, son:
1) Capa molecular.
2) Capa de las neuronas piriformes.
3) Capa granulosa.
La capa molecular contiene pocas neuronas y muchas fi-
bras nerviosas, por lo que se ve como una capa con pequeos
puntos y se tie dbilmente. La capa de las neuronas piramidales
est formada por una hilera de clulas muy grandes alineadas
paralelamente a lo largo de la superficie de las folias cerebelares;
son clulas piriformes, de citoplasma ms bien acidfilo, cuyas
dendritas se dirigen con prolongaciones hacia la capa molecular
y los axones hacia la capa granulosa. La capa granulosa es la
ms interna, presenta numerosos cuerpos neuronales pequeos
que forman en conjunto una zona que se tie basfila por la
presencia de una gran cantidad de neuronas con escaso cito-
plasma. Por debajo de las tres capas de la sustancia gris se en-
cuentra la sustancia blanca, compuesta por fibras nerviosas y
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clulas de la neuroglia; esta porcin se distingue por ser un poco
ms clara que la capa granulosa.
Actividad
Identifica en un corte histolgico de cerebelo las tres ca-
pas de la sustancia gris y la sustancia blanca, y elabora un
esquema.
MDULA ESPINAL
La mdula espinal es ovoide, con dos invaginaciones dirigidas
hacia el centro, una dorsal y la otra ventral. La invaginacin
superior se llama septum dorsal o, simplemente dorsal y la infe-
rior o ventral, fisura ventral. Hacia la porcin central de la m-
dula se encuentra la sustancia gris, que tiene una forma peculiar
semejante a una H. En el centro existe un orificio o conducto
central aplanado, denominado canal del epndimo o canal
ependimario. El canal del epndimo est revestido por clulas
que se asemejan a un epitelio cbico o cilndrico simple que
est en contacto con el lquido cefalorraqudeo que ah circula.
La sustancia blanca se localiza en la periferia de la mdula espinal
y est constituida por axones, alrededor de los cuales se obser-
van clulas de la neuroglia.
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Actividad
Estudia el corte histolgico transversal de mdula espinal,
localiza las sustancias gris y blanca, as como el canal o
conducto ependimario, y elabora un esquema.
GANGLIOS
Los ganglios nerviosos son acmulos de cuerpos neuronales fuera
del SNC; en ellos es posible distinguir los somas neuronales.
En un ganglio nervioso tambin se puede observar tejido
conjuntivo formando un estroma fino, as como la cpsula y las
trabculas. Los ganglios nerviosos que
se localizan en las paredes de rganos
como el intestino pertenecen a la por-
cin parasimptica del sistema nervio-
so autnomo, estos ganglios por lo
general carecen de anficitos y los somas
neuronales se encuentran limitados por
fibroblastos. Los somas neuronales son
redondeados, con ncleo central gran-
de y plido, y suele contener un solo
nuclolo muy visible.
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Actividad
Estudia el corte histolgico transversal de un ganglio ner-
vioso para identificar los diferentes tipos celulares presen-
tes en el mismo y elabora un esquema.
FIBRAS NERVIOSAS
Cada fibra nerviosa est cubierta por el neurilema, el cual es
una vaina formada por el citoplasma de los neurilemocitos (c-
lulas de Schwann). Las fibras mielnicas estn recubiertas por
varias vueltas de la membrana plasmtica de las clulas, mien-
tras que las fibras amielnicas estn rodeadas una sola vez por
dicha membrana. Esta envoltura est constituida por
lipoprotenas que se disuelven con el uso de deshidratantes y
aclaradores (solventes de las grasas), dejando alrededor de la
fibra nerviosa una red de material protenico denominado
neuroqueratina. Los neurilemocitos (clulas de Schwann) pre-
sentan un ncleo aplanado y en posicin central en la clula. La
mielina puede teirse y fijarse bien con tetraxido de osmio.
En un corte longitudinal se aprecia la
fibra nerviosa como una lnea continua y
central, muy delgada, envuelta por los
neurilemocitos que se interrumpen en cier-
tos sitios, y que constituyen los nodos
intermielnicos.
Actividad
Estudia un corte histolgico transversal o longitudinal de
nervio perifrico, localiza los ncleos de los neurilemocitos
y la mielina, y elabora un esquema.
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Prctica 11
Aparato cardiovascular
y rganos linfoides
OBJETIVOS
11.1. Con el uso del microscopio fotnico, identificar las
diversas capas histolgicas del corazn y los vasos san-
guneos.
11.1.1. Identificar el endocardio, miocardio y pericardio.
11.1.2. Identificar la tnica ntima, media y adventicia de ar-
terias y venas.
11.2. Con el uso del microscopio fotnico, identificar los r-
ganos linfoides: bazo, linfonodos, bolsa cloacal y timo.
11.2.1. Conocer las principales caractersticas histolgicas de
los rganos parenquimatosos.
11.2.2. En un corte de bazo, identificar la cpsula, trabculas,
pulpa roja, pulpa blanca y arterias centrales.
11.2.3. En una preparacin histolgica de un linfonodo, identi-
ficar la cpsula, trabculas, la zona cortical, los ndulos
linfticos, la zona medular y los cordones medulares.
11.2.4. En una preparacin histolgica de la bolsa cloacal,
identificar la mucosa, lmina propia, muscular, folculos
bursales y clulas epitelioides.
11.2.5. En una preparacin histolgica de timo, identificar la
cpsula, trabculas, y en los lobulillos tmicos las es-
tructuras histolgicas de la corteza y mdula de estos
ltimos.
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CORAZN
Es un rgano muscular que acta como una bomba que impulsa
la sangre a los pulmones para su oxigenacin o al resto del cuer-
po para cumplir los requerimientos nutricionales de los tejidos.
El corazn tiene tres capas histolgicas: endocardio, miocardio
y pericardio. El endocardio es una capa adyacente a la luz del
corazn y en contacto con la sangre; est formado por un
endotelio (epitelio plano simple) y por tejido conjuntivo laxo
areolar. Debajo del endocardio se encuentra el miocardio, com-
puesto de tejido muscular estriado cardaco, dispuesto en espi-
ral; esta capa es sumamente gruesa la cual contiene algunos vasos
sanguneos y algo de tejido conjuntivo; en un corte histolgico,
es posible observar en ciertas regiones, entre las clulas muscu-
lares cardacas tpicas, clulas ms grandes con citoplasma te-
nuemente acidfilo y con ncleos ovoides y alargados, estas
clulas corresponden a las fibroclulas conductoras y forman
parte del sistema de conduccin de impulsos del corazn. La
ltima capa corresponde al pericardio, cuya descripcin
histolgica es la de una serosa, es decir, una capa de conjuntivo
laxo areolar, con tejido adiposo para el caso particular del cora-
zn y recubierto por un mesotelio (epitelio de revestimiento
plano simple). El pericardio tiene dos hojas: una visceral,
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en contacto con el miocardio (que es la que se observa en la
mayora de las preparaciones) y otra parietal, que est en con-
tacto con otros rganos de la cavidad torcica. La hoja visceral
del pericardio suele denominarse epicardio.
Actividad
Estudia un corte histolgico del corazn e identifica el
endocardio, el miocardio y el pericardio.
Haz un esquema de lo observado.
VASOS SANGUNEOS
Los vasos sanguneos estn constituidos por tres capas
histolgicas: ntima, media y adventicia. La primera est for-
mada por un endotelio y tejido conjuntivo, que presenta un
engrosamiento de fibras elsticas (denominado membrana
limitante elstica interna); la tnica media consiste en msculo
liso y tejido conjuntivo, en tanto que la tnica adventicia cons-
ta de tejido conjuntivo laxo areolar, que relaciona el vaso san-
guneo con el resto de los tejidos adyacentes. La proporcin de
cada una de estas capas vara si el vaso es una arteria o una vena.
Una vena presenta escasa capa media y tiene muy desarrolladas
las capas adventicia e ntima. La luz es ovoide en un corte trans-
versal y, en muchas ocasiones, se observan glbulos rojos en su
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interior; por otro lado, en las arterias est muy desarrollada la
capa media y la luz es esfrica, y pequea en relacin con el
grosor de la pared vascular; generalmente, no hay glbulos ro-
jos en su interior.
Actividad
En un corte histolgico de vasos sanguneos, estudia las
capas histolgicas que los constituyen y establece la dife-
rencia entre una arteria y una vena, segn las caractersti-
cas del tejido.
Haz un esquema de lo observado.
IDENTIFICACIN MICROSCPICA
DE LOS RGANOS PARENQUIMATOSOS
En los animales domsticos existen bsicamente dos tipos de
rganos o vsceras: los rganos parenquimatosos (o compac-
tos) y los rganos huecos (o tubulares) que tienen una luz. Los
rganos parenquimatosos estn constituidos por dos compo-
nentes estructurales: el estroma, que es la porcin de soporte y
sostn grueso del rgano, y el parnquima, que es el conjunto
de sus clulas funcionales. El estroma est constituido por la
cpsula, que es tejido conjuntivo denso irregular (salvo ciertas
excepciones) que limita a los rganos, y las trabculas, las cua-
les son proyecciones del tejido conjuntivo de la cpsula hacia
el interior del rgano. De la cpsula y trabculas emergen fi-
bras reticulares hacia el interior del rgano. Estas fibras consti-
tuyen lo que se denomina el estroma fino (no observable con
tinciones rutinarias).
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IDENTIFICACIN MICROSCPICA
DE LOS RGANOS TUBULARES
Los rganos tubulares son rganos huecos, es decir, presentan
una luz. Su estructura suele describirse a partir del centro. sta
generalmente consta de las capas mucosa, submucosa, muscu-
lar del rgano y serosa o adventicia. La mucosa est formada
por el epitelio que reviste la luz, una capa de tejido conjuntivo
laxo areolar que se denomina lmina propia y una delgada capa
de fibras musculares lisas que recibe el nombre de muscular de
la mucosa. La submucosa suele ser de conjuntivo laxo areolar,
le sigue la capa muscular del rgano que consta de dos o tres
estratos de tejido muscular en diferente direccin, comnmen-
te es de msculo liso pero puede ser de msculo estriado esque-
ltico; la ltima capa histolgica es la serosa o adventicia; se
denomina serosa a una fina capa de conjuntivo laxo areolar
recubierta externamente por un mesotelio (un epitelio plano
simple), cuando no existe el mesotelio se denomina adventicia
(constituida nicamente por conjuntivo laxo).
BAZO
El bazo es un rgano linfoide que est involucrado en la circu-
lacin sangunea, participa en procesos inmunolgicos, produ-
ce monocitos y destruye eritrocitos viejos. Presenta una gruesa
cpsula y trabculas de tejido conjuntivo denso irregular con
fibras musculares lisas intercaladas. El parnquima del bazo se
divide en dos grandes porciones denominadas: pulpa blanca y
pulpa roja. La pulpa blanca est constituida por tejido linfoide
nodular, los ndulos presentan una zona central ms clara y
una zona perifrica ms oscura; en el caso particular del bazo
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pueden encontrarse uno o dos vasos sanguneos hacia la zona
perifrica denominados arterias centrales. Los ndulos linfticos
del bazo estn dispuestos indistintamente en el parnquima del
bazo. La pulpa roja es aquella parte del parnquima que queda
por fuera de la pulpa blanca y entre las trabculas, no tiene una
formacin o lmite definido y es toda esa porcin que no es
estroma ni pulpa blanca, su nombre se debe a que en ella en-
contramos eritrocitos.
Actividad
Estudia un corte histolgico de bazo identifica la cpsula,
las trabculas, la pulpa roja, la pulpa blanca y las arterias
centrales, y realiza un esquema de lo observado.
LINFONODOS (GANGLIOS LINFTICOS)
Los linfonodos se encuentran distribuidos en la circulacin
linftica, son estructuras de forma semejante al rin, es decir,
una porcin convexa y otra cncava; sin embargo, no todos
los linfonodos tienen esa forma considerada como tpica. Estas
estructuras poseen una cpsula y trabculas de tejido conjuntivo
denso irregular. El parnquima se divide en una zona cortical
y una medular. La zona cortical se encuentra hacia la porcin
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convexa en la que se observan ndulos linfticos con una zona
ms clara hacia el centro que recibe el nombre de centro
germinativo y est formado principalmente de linfocitos
inmaduros. En la zona medular no hay ndulos linfticos, pero
s existe tejido hematopoytico linfoide, el cual se dispone en
forma de cordones denominados cordones medulares; entre los
que se observan espacios irregulares conocidos con el nombre
de senos medulares, por donde circula la linfa, los cuales estn
revestidos por un epitelio plano sim-
ple. Hacia el centro de la zona
medular se aprecia una escotadura,
denominada hilio. Los vasos que
drenan linfa son los aferentes, y los
que reciben del linfonodo, los
eferentes. Un caso especial es en el
cerdo, en el cual las estructuras pre-
sentes en la zona cortical y zona
medular estn invertidas, es decir, en
la zona cortical se encuentran los se-
nos con el tejido linfoide dispuesto
en cordones y en la zona medular
estn los ndulos linfoides.
Actividad
En un corte histolgico de linfonodo, estudia el sitio don-
de se localiza la cpsula, las trabculas, la zona medular, la
zona cortical, los ndulos linfticos y los cordones
medulares; y seala si pertenece al cerdo o a otro mamfe-
ro domstico.
Realiza un esquema de lo observado.
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BOLSA CLOACAL
Es un rgano linfoide diferenciador de linfocitos B presente en
aves y reptiles, el cual est localizado dorsalmente a la cloaca.
Es el nico rgano linfoide que tiene una luz, por ello se conoce
como rgano linfoepitelial. Desde el punto de vista histiolgico
es un rgano tubular, por lo que se recomienda al estudiante
leer la descripcin general de rganos tubulares para entender
las siguientes estructuras, las cuales conforman la bolsa cloacal.
Mucosa
Constituida por el epitelio de revestimiento que vara entre ci-
lndrico simple y cilndrico pseudoestratificado, dependiendo
del corte histolgico si es craneal o caudal, respectivamente.
Debajo del epitelio encontramos una capa ancha de tejido
conjuntivo denominada lmina propia; por no existir la capa
muscular de la mucosa, diversos autores llaman a esta regin
lmina propia-submucosa; en este caso, la bolsa cloacal est
formada de tejido linfoide que le da una apariencia general
basfila, ste se organiza en estructuras redondeadas denomi-
nadas folculos bursales. Los folculos presentan una zona
perifrica con linfocitos maduros y clulas plasmticas (corte-
za), son basfilos que se tien intensamente, y una zona central
menos basfila (mdula) con linfocitos maduros e inmaduros
(linfoblastos). Una caracterstica importante es la presencia de
un grupo de clulas acidfilas que se ordenan como una cadena
exactamente en el lmite entre la zona central y perifrica. Di-
chas clulas corresponden a clulas epitelioides degeneradas
que en etapas primitivas del desarrollo del ave formaban un
tejido epitelial simple. La demarcacin exacta entre las dos zo-
nas (dada por la presencia de las clulas epitelioides) es una
caracterstica nica de la bolsa cloacal.
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Submucosa
Esta capa histolgica, morfolgicamente, es continuacin de la
lmina propia, por lo que con fines prcticos no existe.
Muscular
Las capas musculares son variables, dependiendo del nivel del
corte pueden observarse regiones formadas por dos capas de
msculo liso: una capa circular adyacente a la lmina propia-
submucosa seguida de otra longitudinal; existen otras porcio-
nes en las que se distinguen tres capas: dos capas compuestas por
fibras musculares longitudinales y una capa circular intermedia.
La direccin de las fibras musculares generalmente es difcil de
definir con claridad, dado que en muchos casos estas fibras son
muy delgadas. A pesar de estas varia-
ciones, podemos afirmar que en la por-
cin adyacente a la serosa se aprecian
generalmente dos capas musculares que
corren perpendiculares entre s, es de-
cir, que sus fibras forman ngulos rec-
tos unos con otros.
Serosa
Es la ltima porcin del rgano que est constituida por tejido
conjuntivo laxo areolar y un mesotelio, por lo que es una serosa
tpica.
Actividad
En un corte histolgico transversal de bolsa cloacal identi-
fica y localiza las estructuras mencionadas.
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TIMO
Es un rgano linfoide primario, responsable de la diferencia-
cin de linfocitos T, presenta cierta actividad endocrina y tien-
de a involucionar despus de la pubertad. Est formado por dos
lbulos unidos por tejido conjuntivo; cada lbulo cuenta con
una cpsula de tejido conjuntivo denso irregular que emite
trabculas al interior del rgano dividiendo el parnquima en
lobulillos tmicos; en cada lobulillo se pueden distinguir dos
zonas, la corteza y la mdula. La corteza se caracteriza por ser
ms basfila y estar en la periferia; sta porcin presenta
linfocitos inmaduros y un tipo de clulas caractersticas del timo,
denominadas clulas reticulares epiteliales (clulas acidfilas con
aspecto estrellado). En la mdula predominan las clulas
reticulares epiteliales y existe un menor nmero de linfocitos
maduros.
Cuando el timo se acerca a la poca de involucin, en la
mdula de los lobulillos aparecen estructuras esfricas altamente
acidfilas, hialinizadas (con aparien-
cia de vidrio cortado) denominadas
corpsculos tmicos.
Las divisiones de las trabculas
son incompletas, de tal modo las zo-
nas corticales y medulares de los
lobulillos adyacentes se fusionan.
ACTIVIDAD
En un corte histolgico de timo, estudia las estructuras pre-
sentes en la corteza y en la mdula de los lobulillos tmicos.
Estudia otro corte histolgico de timo y determina si exis-
ten los corpsculos tmicos, y realiza un esquema.
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Prctica 12
Aparato respiratorio
OBJETIVOS
12. Con el microscopio fotnico, identificar las principa-
les caractersticas de la trquea y el pulmn.
12.1. Identificar en trquea las capas mucosa, submucosa
(anillos cartilaginosos), muscular y adventicia.
12.2. Identificar los bronquios, bronquiolos y sacos
alveolares del parnquima pulmonar.
TRQUEA
La trquea presenta un epitelio respiratorio hacia su luz, por
debajo de ste se encuentra la lmina propia, la cual contiene
fibras elsticas; en la trquea no se observa la capa muscular de
la mucosa. La submucosa est formada por un anillo incomple-
to de cartlago hialino (aunque en el caso de las aves este anillo
se cierra traslapndose en sus extremos sin que ste se fusione),
en forma de C o de herradura. En los extremos de dicho cart-
lago se observan fibras de msculo liso en direccin transversal
(msculo traqueal), el cual puede considerarse la capa muscular
del rgano y, por ltimo, hay una capa de conjuntivo laxo areolar,
provista de vasos sanguneos y nervios que relacionan la tr-
quea con las dems estructuras, a la que se le denomina capa
adventicia.
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Actividad
Estudia el esquema de un corte transversal de trquea.
En un corte transversal de trquea, identifica las estructu-
ras presentes en este rgano.
PULMN
El pulmn se encuentra recubierto externamente por una mem-
brana mesotelial, conocida como pleura, la cul est formada
por dos capas: la pleura parietal y la pleura visceral, sta ltima
en contacto con el parnquima pulmonar. La membrana pleural
est constituida por un epitelio plano simple (mesotelio) y una
pequea capa de tejido conjuntivo laxo; a partir de ste se emi-
ten proyecciones que dividen al pulmn en lbulos y lobulillos.
Los elementos sobresalientes del parnquima pulmonar son:
los bronquios, los bronquiolos y los sacos alveolares. Los bron-
quios presentan hacia la luz un epitelio respiratorio; a diferen-
cia de los bronquios extrapulmonares, los intrapulmonares tienen
placas de cartlago hialino en nmero variable (en el caso del
gato estas placas presentan en la periferia gran cantidad de fi-
bras elsticas y en el centro, cartlago hialino tpico), adems se
observan fibras musculares lisas entre el conjuntivo dispuesto
por debajo del epitelio (lmina propia) y las placas de cartlago.
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Conforme los bronquios penetran en el pulmn, el nmero de
clulas caliciformes del epitelio disminuye, los cilios van des-
apareciendo y las clulas van siendo cbicas.
Los bronquiolos tienen una estructura semejante a la de
los bronquios intrapulmonares pero con la caracterstica esen-
cial de la ausencia de placas de cartlago hialino, en su lugar
presentan un engrosamiento de la capa muscular lisa; su epite-
lio sufre variaciones semejantes a las del bronquio intrapulmonar.
Las estructuras ms abundantes en el parnquima pulmonar
son los sacos alveolares, los cuales tienen forma polidrica y se
comunican con un bronquiolo, factor que permite la difusin
de los gases; estn recubiertos por clulas epiteliales planas y
entre las paredes de los alveolos se pueden observar capilares
sanguneos.
Actividad
Estudia e identifica en un corte histolgico de pulmn, los
bronquioos con sus diferentes capas, los bronquiolos y los
sacos alveolares.
En un corte histolgico de pulmn identifica los bronquios
intrapulmonares, bronquiolos y sacos alveolares.
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Prctica 13
Aparato digestivo I:
lengua y rganos tubulares
OBJETIVOS
13. Con el uso del microscopio fotnico, identificar las
caractersticas histolgicas del aparato digestivo: len-
gua, esfago, estmago e intestinos delgado y grueso.
13.1. Conocer las principales capas histolgicas que consti-
tuyen un rgano tubular.
13.2. Identificar las capas histolgicas de la lengua, las papilas
y las glndulas linguales.
13.3. Identificar las diversas capas histolgicas del esfago
y diferenciar un corte histolgico de un ave y un ma-
mfero.
13.4. Identificar las diversas capas histolgicas del estma-
go, as como las fosetas gstricas, glndulas gstricas,
clulas parietales y clulas principales.
13.5. Identificar la mucosa, submucosa, muscular y serosa
de los intestinos delgado y grueso, as como las princi-
pales diferencias entre ambos rganos.
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INTRODUCCIN
En el aparato digestivo se estudiarn la lengua y los rganos
tubulares que lo conforman. Estos rganos constan de varias
capas o tnicas constituidas, a su vez, por una o varias lminas
que desde la luz hasta el exterior, se llaman: mucosa, submucosa,
muscular del rgano y finalmente una serosa o una adventicia.
LENGUA
La lengua no es un rgano tubular propiamente dicho, la des-
cripcin histolgica que se le asigna comnmente es la de un
rgano de esa naturaleza por ser la proyeccin del piso de la
cavidad bucal. Puesto que carece de una luz, la revisin de sus
capas histolgicas se har de la parte dorsal a la ventral.
La mucosa de la parte dorsal presenta un epitelio
estratificado plano queratinizado, debajo de l se encuentra la
lmina propia del tejido conjuntivo laxo areolar, las elevacio-
nes de esta capa sobre el epitelio constituyen las estructuras
llamadas papilas linguales, de las que existen diversas formas:
filiformes (alargadas), fungiformes (forma de hongo), foliadas
(forma de hoja), caliciformes o circunvaladas (que en realidad
son invaginaciones en forma de copa), etctera; en algunas de
ellas se observa un conjunto de estructuras plidas y ovoides
intercaladas en el epitelio de revestimiento stas estructuras
constan de clulas sensitivas que perciben los diversos sabores
y se denominan yemas gustativas.
Entre la lmina propia encontramos glndulas acinares
mucosas (en ovinos y carnvoros) o seromucosas; el conjunto
de glndulas constituye las glndulas salivales linguales, que
contribuyen escasamente a la produccin total de saliva. No
existe muscular de la mucosa ni submucosa.
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La muscular del rgano est integrada por fibras de ms-
culo estriado esqueltico dispuestas en todas direcciones, lo que
permite que la lengua tenga gran movilidad (entre las fibras
musculares puede observarse la acumulacin de tejido adipo-
so). No hay serosa ni adventicia pues, siguiendo la descripcin
de la porcin dorsal a la ventral, las capas se repiten en el orden
inverso, terminando en el epitelio de revestimiento de la super-
ficie ventral, el cual no presenta papilas linguales, es estratificado
plano y puede o no tener queratina, segn sea la especie animal
de que se trate.
Actividad
En un corte histolgico de lengua, identifica la mucosa y
la muscular del rgano; distingue tambin las papilas y gln-
dulas linguales, as como sus estructuras histolgicas.
Haz un esquema de lo observado.
ESFAGO
Es un rgano tubular tpico porque presenta todas las capas
histolgicas propias de los rganos tubulares.
La mucosa tiene un epitelio de revestimiento plano
estratificado sin queratina, o bien, con diversos grados de
queratinizacin, segn la especie animal de que se trate y de sus
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respectivos hbitos alimenticios; as, en el ser humano y los
carnvoros no existe queratina, en los cerdos es escasa, hay ms
en los equinos y abunda en los rumiantes y aves.
Por debajo de la mucosa se localiza la lmina propia de
tejido conjuntivo laxo areolar que contiene fibras elsticas en-
tremezcladas con fibras de colgena; las aves cuentan con gln-
dulas acinares mucosas que tienden a lubricar el alimento al
pasar por la luz del esfago.
En la lmina propia se encuentra la capa muscular de la
mucosa que est formada por haces delgados de fibras muscu-
lares lisas longitudinales (esta capa est ausente en la parte cra-
neal del esfago en el cerdo y el perro). La submucosa tambin
es de tejido conjuntivo laxo areolar, aqu se localizan las gln-
dulas acinares mucosas en los mamferos (o bien, seromucosas,
como en suinos y caninos); estas glndulas estn a todo lo largo
del esfago del perro, a diferencia de la mayora de las especies
domsticas en las que slo estn en la unin de la faringe con el
esfago, o en el cerdo, en el que slo abarca la mitad craneal
del esfago.
La muscular est formada por dos capas de fibras muscula-
res: la capa adyacente a la submucosa, que tiene una direccin
circular, y la capa siguiente, de fibras longitudinales; la natura-
leza de estas capas puede ser de estriado esqueltico, o bien, de
msculo liso, esto depende de la especie animal y del sitio don-
de se haya hecho el corte histolgico, en los rumiantes y cani-
nos es de estriado esqueltico en la mayor parte de su longitud;
en el ser humano y el cerdo, el tercio craneal es de estriado
esqueltico, el tercio medio es una mezcla de fibras estriadas
esquelticas con fibras musculares lisas y el tercio caudal es
nicamente liso; en los felinos solamente el extremo caudal,
que corresponde a la quinta parte de toda la longitud esofgica,
es de msculo liso, mientras que las cuatro quintas partes
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craneales son de estriado esqueltico. El esfago presenta una
adventicia que lo relaciona con los dems rganos de la regin
cervical y torcica, y nicamente en equinos y carnvoros exis-
te una pequea porcin intraabdominal que es cubierta por la
serosa del peritoneo.
En el esfago, en los compartimientos gstricos de los ru-
miantes, en el estmago (abomaso) y en los intestinos (delgado
y grueso) pueden observarse ganglios nerviosos intramurales
del parasimptico localizados en dos capas histolgicas:
la submucosa (plexo nervioso submucoso ) y muscular del r-
gano (plexo mientrico). La descripcin histolgica de los
ganglios nerviosos ya ha sido expuesta en la prctica acerca del
sistema nervioso.
Actividad
En un corte histolgico de esfago, identifica cada una de
sus capas histolgicas. Haz un esquema de lo observado.
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ESTMAGO
El estmago es un rgano tubular en el que se distinguen dife-
rentes regiones; de acuerdo con sus caractersticas histolgicas,
son: esofgica, cardaca, fndica, antral y pilrica.
La porcin esofgica es una continuacin de la mucosa del
esfago que no secreta jugo gstrico; las otras porciones tienen
una naturaleza similar a la de la zona fndica, que a continua-
cin se describe. La mucosa est formada por un epitelio de
revestimiento que se invagina para formar las fosas gstricas,
estas dos porciones estn revestidas de epitelio cilndrico sim-
ple. Las glndulas gstricas son glndulas tubulares que se abren
en el piso de las fosas gstricas; estas glndulas estn constitui-
das por diversas clases celulares entre las que destacan: las clu-
las parietales y las clulas principales (o cimgenas).
Las clulas parietales son piramidales de ncleo esfrico y
basal con citoplasma intensamente acidfilo (productoras de
cido clorhdrico); las clulas principales son tambin
piramidales con ncleo basal y esfrico pero con citoplasma
basfilo en la parte basal, y con grnulos acidfilos en la zona
apical que le dan una apariencia espumosa; estos dos tipos celu-
lares suelen estar en la parte intermedia de las glndulas gstricas.
Entre las glndulas y las fosetas gstricas se encuentra la
lmina propia del tejido conjuntivo laxo areolar con fibras els-
ticas. La muscular de la mucosa es delgada y est representada
por fibras de msculo liso. La submucosa es de tejido conjuntivo
laxo areolar. La capa muscular del estmago es de msculo liso
dispuesta en tres direcciones: la capa adyacente a la submucosa
es oblicua, la intermedia es circular y la ltima longitudinal,
estas capas ayudan a identificar al rgano. Finalmente encon-
tramos una serosa tpica.
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Actividad
En un corte histolgico de es-
tmago identifica las diferentes
capas histolgicas y en las gln-
dulas gstricas las clulas
parietales y principales.
En un corte transversal de estmago localiza y distingue
las estructuras antes descritas.
INTESTINOS DELGADO Y GRUESO
La mucosa del intestino delgado consta de un epitelio cilndri-
co simple con microvellosidades, las cuales, al microscopio
fotnico se observan como un reborde en la porcin apical del
epitelio. Se aprecia una evaginacin del epitelio y de la lmina
propia hacia la luz; las proyecciones de la lmina propia reves-
tidas por el epitelio se denominan vellosidades intestinales y
son caractersticas del intestino delgado. Hacia la base de las
vellosidades pueden observarse pequeas invaginaciones hacia
el interior de la mucosa, las cuales constituyen las glndulas o
criptas intestinales. En el epitelio del intestino delgado existen
diversos tipos celulares, entre los ms importantes se advierten
las clulas absorbentes, clulas caliciformes, clulas
enterocromafines y clulas seroenzimticas; stas se localizan
slo en la porcin profunda del adenmero de las glndulas
intestinales en los rumiantes, equinos y en el hombre.
La lmina propia est formada por tejido conjuntivo laxo
reticular, debajo de sta se encuentra una pequea capa de fi-
bras musculares lisas que constituyen la muscular de la mucosa.
La submucosa tambin es de conjuntivo laxo; en esta capa
histolgica, en la porcin inicial y media del duodeno, hay un
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conjunto de glndulas tubulares ramificadas llamadas glndulas
submucosas duodenales, sin embargo, el trmino es inadecua-
do en medicina veterinaria pues en equinos, suinos y bovinos
se extienden hasta la mitad del yeyuno. Su naturaleza vara se-
gn la especie: mucosas en perros y rumiantes, serosas en cerdos
y mixtas en gatos. Tambin pueden encontrarse ndulos linfticos
aislados y si stos se agrupan en conjunto, se denominan ndulos
linfticos agregados (o placas linfoides intestinales).
La capa muscular del rgano presenta dos direcciones, una
circular, la ms cercana a la submucosa, y otra longitudinal, cer-
cana a la serosa, que es la ltima capa histolgica. En un corte
histolgico de intestino grueso es posible observar caractersti-
cas que lo diferencian del intestino delgado. En la mucosa del
intestino grueso no se observan vellosidades intestinales, hay
gran cantidad de clulas caliciformes y las glndulas o criptas
intestinales son sumamente profundas. Las placas de Peyer son
ms abundantes en el intestino grueso que en el delgado. La
submucosa es similar a la del intestino delgado (aunque no exis-
ten glndulas submucosas). La muscular del rgano est consti-
tuida por dos capas de fibras musculares
lisas, una circular y otra longitudinal, y una
capa serosa.
Actividad
Estudia un corte histolgico transver-
sal de los intestinos delgado y grue-
so, e identifica las diferencias
estructurales.
En un corte histolgico transversal de
los intestinos delgado y grueso iden-
tifica las diferentes porciones que los
constituyen.
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Prctica 14
Aparato digestivo II:
preestmagos de los
rumiantes
OBJETIVOS
14. Con el microscopio fotnico, realizar la identificacin
de las principales caractersticas histolgicas de los
preestmagos de los rumiantes.
14.1. Identificar la mucosa, submucosa, muscular y serosa
de los siguientes rganos: rumen, retculo y omaso.
14.2. Identificar las principales caractersticas histolgicas
distintivas de la mucosa del rumen, retculo y omaso.
INTRODUCCIN
Los preestmagos de los rumiantes son: rumen, retculo y omaso.
Se les conoce con el nombre de preestmagos porque el
abomaso es el estmago verdadero de estos animales y su es-
tructura histolgica corresponde fielmente a este rgano, por
lo cual no ser descrito en la presente prctica.
La mucosa de los preestmagos es la capa que permite iden-
tificarlos y diferenciarlos, es por ello que se sealarn las caracte-
rsticas especiales de cada uno; las dems capas son comunes a
los tres.
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La submucosa es de tejido conjuntivo ordinario laxo areolar,
la muscular del rgano est formada por dos capas de msculo
liso: una circular (junto a la submucosa) y la otra longitudinal;
finalmente presenta una tnica serosa.
RUMEN
Tiene un epitelio estratificado plano queratinizado (la queratina
es sumamente gruesa en los compartimientos gstricos). La l-
mina propia es de tejido conjuntivo
denso irregular y se eleva sobre el epi-
telio para formar las papilas ruminales.
Una caracterstica distintiva del rumen
es que carece de muscular de la mucosa.
RETCULO
La naturaleza del epitelio es la misma que en el rumen, al igual
que la de la lmina propia; esta ltima, presenta elevaciones
sobre el epitelio denominadas papilas
reticulares. La muscular de la mucosa
se observa exclusivamente en la punta
de las papilas de mayor tamao y est
constituida por msculo liso.
OMASO
Al igual que en los otros rganos, el epitelio es estratificado
plano queratinizado y la lmina propia es de tejido conjuntivo
denso irregular, la cual se eleva para formar las papilas omasales
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que se caracterizan por tener paredes con ondulaciones. En las
papilas de mayor tamao (tambin llamados pliegues principa-
les) se localiza a lo largo de toda la papila la muscular de la
mucosa (constituida por msculo liso); adems, la muscular del
rgano emite proyecciones que recorren
en toda su longitud la parte central,
mientras que en las papilas un poco ms
pequeas slo se observa la presencia de
la muscular de la mucosa.
Actividad
En un corte histolgico de los compartimientos gstricos
de los rumiantes, estudia y localiza sus capas histolgicas,
y la caracterstica especfica de la mucosa de cada uno.
En cortes histolgicos de los compartimientos gstricos
de los rumiantes, identifica las estructuras caractersticas
de cada compartimiento.
102
Prctica 15
Glndulas anexas
del aparato digestivo
OBJETIVOS
15. Con el microscopio fotnico, identificar las glndulas
anexas del aparato digestivo: hgado, pncreas y gln-
dulas salivales.
15.1. Identificar las trabculas, cpsula, acinos glandulares
y su naturaleza secretoria en una preparacin
histolgica de glndula salival.
15.2. Identificar la porcin exocrina del pncreas (acinos,
clulas centroacinares y conductos), la porcin
endocrina (islotes pancreticos) as como la cpsula y
trabculas en una preparacin histolgica.
15.3. Identificar las siguientes estructuras propias del hga-
do: lobulillos hepticos, espacio porta, vena central,
cordones de hepatocitos, sinusoides hepticos; la vena,
la arteria y el conducto biliar del espacio porta.
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GLNDULA SALIVAL
Las glndulas salivales de mayor importancia en los animales
domsticos son: partida, submaxilar (o mandibular) y
sublingual. Todas ellas son glndulas acinares compuestas. El
estroma est formado por una cpsula de tejido conjuntivo denso
irregular que emite trabculas dividiendo el parnquima en l-
bulos y lobulillos, la naturaleza de los acinos puede ser: serosa,
mucosa o mixta, esto depender del tipo de glndula salival de
que se trate y de la especie de animal; as, la glndula partida
tiene acinos serosos en todas las especies domsticas; la gln-
dula submaxilar presenta un predominio de acinos mucosos en
los carnvoros, o bien, seromucosos en las dems especies; mien-
tras que la glndula sublingual tiene acinos mixtos en equinos,
carnvoros y el hombre, y acinos mucosos en las restantes espe-
cies (domsticas).
Actividad
En un esquema correspondiente a un corte de glndula
salival identifica sus adenmeros y su naturaleza secretora,
as como el sistema de conductos.
En un corte histolgico de glndula salival, identifica sus
estructuras histolgicas y plantea cul podra ser la gln-
dula salival que observas y a qu especie pertenece.
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PNCREAS
El pncreas es una glndula anficrina pues se encarga de produ-
cir enzimas digestivas (secrecin exocrina) y hormonas (secre-
cin endocrina). Presenta agrupamientos especializados para
cada una de estas funciones: la porcin exocrina est formada
por glndulas acinosas ramificadas, los acinos son serosos; una
caracterstica importante y especfica de los acinos es la pre-
sencia de clulas aplanadas de citoplasma acidfilo tenue al cen-
tro, por lo que se conocen como clulas centroacinosas, stas
corresponden a la parte inicial de uno de los conductos conoci-
do como conducto intercalado, que penetra a la luz de los acinos.
La porcin endocrina est formada por glndulas
cordonales de clulas polidricas acidfilas tenuemente tei-
das, agrupadas y localizadas al azar entre los acinos serosos,
dichos agrupamientos se conocen como islotes pancreticos
endocrinos. Con tcnicas de tincin especiales se pueden dis-
tinguirse diversos tipos celulares, pero con tcnicas de rutina
esto no es factible. El pncreas presenta una cpsula y trabculas
de tejido conjuntivo ordinario laxo areolar que divide al
parnquima en lbulos y lobulillos.
Actividad
En el esquema de un corte histolgico de pncreas identi-
fica los acinos, las clulas centroacinares, los islotes
pancreticos y el estroma.
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HGADO
El hgado es uno de los rganos de mayor importancia en el
diagnstico patolgico, por ello su cabal comprensin es indis-
pensable para cualquier estudiante de medicina veterinaria.
El hgado presenta una cpsula de conjuntivo denso irre-
gular que se denomina cpsula heptica, la cual emite proyec-
ciones al interior del parnquima heptico desde el hilio y divide
el rgano en estructuras denominadas lobulillos hepticos, s-
tos constituyen la unidad morfolgica y funcional del hgado.
En el caso particular del cerdo, en los lobulillos hepticos se
observa con claridad una forma generalmente de hexgono, pero
en otros animales la demarcacin de los lobulillos no es tan
evidente y se ven poligonales; cada lobulillo presenta una es-
tructura circular al centro, que recibe el nombre de vena cen-
tral, la cul est revestida por un epitelio plano simple. Hacia la
vena central concurren, en forma radial, cordones de clulas
denominadas hepatocitos.
Entre dichos componentes hay espacios denominados
sinusoides hepticos, los cuales estn revestidos por un epitelio
plano simple intercalado con clulas alargadas, los ncleos son
igualmente alargados y contienen una gran cantidad de
heterocromatina; estas clulas, llamadas reticuloendoteliales son
las clulas fagocitarias del hgado. Los vrtices de los lobulillos
hepticos reciben el nombre de espacios porta y en ellos se
pueden encontrar las siguientes estructuras: una arteria, una vena
porta, un vaso linftico y un conducto biliar.
La arteria se caracteriza por presentar un corte transversal
en forma circular con una capa de msculo liso gruesa y luz
reducida; la vena porta, en cambio, presenta una luz ovoide y
una capa muscular ms delgada, con una luz de mayor tamao
que la de la arteria; en el conducto biliar se observa un epitelio
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cbico simple; el vaso linftico es difcil de apreciar con clari-
dad pero, cuando se logra, muestra algunas caractersticas simi-
lares a las de las venas, aunque tiene mayor grosor.
Actividad
Estudia en un esquema de hgado: la vena central, los cor-
dones de hepatocitos y los espacios porta.
Identifica en un corte histolgico de hgado las estructuras
antes mencionadas.
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Prctica 16
Aparato urinario
OBJETIVOS
16. Con el microscopio fotnico, identifica las principa-
les caractersticas histolgicas del rin, urter y veji-
ga urinaria.
16.1. Identificar las estructuras presentes en la zona cortical
y medular del rin.
16.2. Identificar la mucosa, submucosa, muscular y serosa
del urter.
16.3. Identificar la mucosa, submucosa, muscular y serosa o
adventicia de la vejiga urinaria.
RIN
El rin presenta una cpsula de conjuntivo denso irregular pero,
a diferencia de otros rganos, no emite trabculas. El parnquima
se divide en dos zonas: cortical y medular. En la zona cortical
se distingue una serie de estructuras circulares llamadas corps-
culos renales, los cuales consisten en una madeja de capilares,
adems de otras estructuras, envuelta por una capa de clulas
planas, llamada cpsula glomerular. En esta zona se puede ob-
servar una serie de conductos con un epitelio cbico simple
que constituyen los tubos contorneados proximales o distales y
tambin pueden apreciarse conductos de mayor dimetro que
tienen un epitelio que va desde cbico hasta cilndrico simple.
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En la regin medular no hay corpsculos renales y en su
lugar se observa una serie de conductos generales paralelos con
un epitelio que vara de cbico simple a plano simple, estos
conductos representan la porcin delgada y gruesa del asa de la
nefrona (la cual se encuentra entre el tubo contorneado proximal
y el distal) as como cortes de tubos colectores.
Actividad
Estudia un corte histolgico de rin para identificar las
estructuras presentes en la zona cortical y la zona medular.
Identifica, en un corte de rin, la cpsula, los corpsculos
renales, los tubos contorneados, los tubos colectores y las
asas de la nefrona.
URTER
Es un rgano tubular que admite la misma descripcin
histolgica que la vejiga, excepto por dos pequeas diferen-
cias: en el urter la luz es menor y de forma estrellada, el grosor
es considerablemente menor y el nmero de estratos del epite-
lio de revestimiento es tambin menor que en la vejiga. En los
cortes histolgicos la ltima capa puede ser serosa o adventi-
cia, esto depende del sitio donde se haga el corte y la especie
animal de que se trate; en general, si los cortes provienen de los
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dos tercios inferiores (o ms cercanos a la vejiga), se observa
una serosa; y si proviene del tercio ms cercano a los riones, se
observa una adventicia; sin embargo, en los carnvoros predo-
mina la serosa en cualquier nivel del corte, mientras que en los
equinos los cortes histolgicos generalmente no incluyen la
serosa (por estar situados ms retroperitonealmente); en las es-
pecies domsticas restantes, el tejido adiposo separa amplia-
mente la muscular del rgano de la serosa, por lo que durante la
toma de la muestra suele desprenderse con suma facilidad y no
se observa en el corte histolgico.
Hay que destacar dos diferencias
importantes entre las especies: en los
equinos existen glndulas tubulo-
alveolares compuestas, de naturaleza
mucosa, en la submucosa de los
urteres, por lo que su orina tiene una
consistencia peculiar; por otro lado, en
los felinos suele no existir la capa
longitudinal interna en la muscular del
rgano.
Actividad
Estudia el corte histolgico de un urter e identifica al
microscopio las estructuras histolgicas carctersticas de
este rgano y elabora un esquema.
VEJIGA
La vejiga es un rgano tubular con las siguientes estructuras: epi-
telio de la mucosa de tipo transicional; lmina propia, como la
de cualquier rgano tubular; carece de muscular de la mucosa.
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La muscular de la mucosa en los animales domsticos est con-
formada por fibras musculares lisas aisladas y es sumamente
delgada, por lo que no constituye una verdadera capa
histolgica; el gato carece por completo de estas fibras muscu-
lares lisas. Podra considerarse como submucosa el tejido
conjuntivo un poco ms laxo que se encuentra hacia las cerca-
nas de la capa muscular del rgano. La muscular del rgano
consta de tres capas, dos longitudinales, una externa y otra in-
terna, y una media circular. La capa serosa en ocasiones se ob-
serva cuando el corte es de perro, gato o cerdo, especies cuya
vejiga est recubierta totalmente por el peritoneo; en equinos,
sobre la superficie dorsal y la mitad de la cara ventral y en los
rumiantes se extiende ms
caudalmente que en los equinos,
por ello, el nivel en el que se
haga el corte histolgico depen-
der de la especie; cuando no
se observa la serosa, se encuen-
tra la adventicia.
Actividad
Estudia un corte histolgico transversal de vejiga, identifi-
ca las estructuras del rgano y elabora un esquema.
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Prctica 17
rganos endocrinos
OBJETIVOS
17. Con el microscopio fotnico, identificar las principa-
les caractersticas histolgicas de las glndulas
endocrinas: hipfisis, tiroides, paratiroides y glndula
adrenal.
17.1. Identificar las estructuras caractersticas de la glndula
pituitaria.
17.2. Identificar las caractersticas histolgicas de la gln-
dula tiroidea: folculos, coloide de tiroglobulinas y
clulas parafoliculares.
17.3. Identificar las principales caractersticas histolgicas
de la glndula paratiroides: clulas principales y en su
caso clulas oxfilas.
17.4. Identificar las caractersticas histolgicas de las tres
zonas de la corteza adrenal (zona glomerular, fascicular
y reticular) y los caracteres propios de la mdula
adrenal.
HIPFISIS O PITUITARIA
Es la glndula endocrina por excelencia, se sita en el piso del
diencfalo.
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En los cortes histolgicos se distinguen dos porciones: la
adenohipfisis y la neurohipfisis. La segunda libera hormonas
producidas en el hipotlamo.
Adenohipfisis
La adenohipfisis es una glndula endocrina, cordonal en su
mayor parte, aunque pueden observarse en ciertas reas algu-
nos folculos. Existen dos grandes grupos celulares: el de clu-
las con una gran afinidad tintorial denominadas cromfilas, y el
de aquellas que no tienen esta afinidad, denominadas
cromfobas; estas ltimas son clulas grandes con poco cito-
plasma y muy dbilmente teidas.
Las clulas cromfilas pueden ser: basfilas o acidfilas,
dependiendo de si presentan granulaciones citoplasmticas con
afinidad a colorantes bsicos o a cidos, respectivamente; entre
las clulas se observan abundantes capilares sanguneos.
La adenohipfisis suele dividirse en varias porciones: pars
distalis (parte distal), pars tuberalis (parte tuberal o infundibular) y
pars intermedia; la primera es la ms grande e importante y su
descripcin histolgica se ajusta a la
que se ha mencionado anteriormen-
te; en la pars intermedia y la pars
tuberalis predominan clulas
cromfilas basfilas; en la primera
pueden existir, adems, algunos
folculos con secrecin en el interior.
Neurohipfisis
La neurohipfisis est formada por una gran cantidad de fibras
nerviosas (axones), de neuronas cuyos cuerpos se sitan en el
hipotlamo (por lo que no se aprecian al corte histolgico), estas
fibras estn rodeadas de clulas de la neuroglia denominadas
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pituicitos, que son clulas pequeas y de ncleo denso, tam-
bin pueden observarse vasos sanguneos y capilares. En las fi-
bras existe un material oscuro que se tie intensamente, llamado
corpsculo de almacenamiento, o sus-
tancia neurosecretora acumulada, segn la
Nmina Histolgica, y corresponde a
la congregacin de hormonas y otras
estructuras en este sitio, antes de su li-
beracin.
Actividad
En un corte histolgico de la hipfisis identifica: la
adenohipfisis, la neurohipfisis, las clulas basfilas y
acidfilas en la adenohipfisis, as como fibras nerviosas,
pituicitos y sustancia neurosecretora acumulada en la
neurohipfisis.
Haz un esquema de lo observado.
TIROIDES
Es una glndula endocrina folicular. El estroma consiste en una
cpsula de conjuntivo denso irregular que emite trabculas al
interior del rgano. El parnquima est formado de multitud de
folculos tiroideos, cada uno puede presentar clulas aplanadas,
cbicas o cilndricas, dependiendo de la actividad secretoria.
La secrecin se almacena en el interior de los folculos, en el
corte histolgico tiene una apariencia de sustancia homognea
a la que se denomina coloide tiroideo.
En la tiroides existe un grupo de clulas dbilmente tei-
das (con citoplasma claro) llamadas clulas C o parafoliculares;
estas clulas producen la hormona calcitonina y suelen
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localizarse entre los folculos tiroideos (en el intersticio que los
separa), pero pueden observarse tambin entre las clulas
foliculares de cada folculo. Estas clulas se distinguen por ser
ms grandes, esfricas y con ncleo central igualmente esfrico.
Actividad
En un corte histolgico de glndula tiroidea, identifica las
siguientes estructuras: folculos tiroideos, coloide de
tiroglobulina y clulas parafoliculares.
Elabora un esquema de tiroides y seala las estructuras antes
mencionadas.
PARATIROIDES
Las glndulas paratiroides son cuatro, en los mamferos doms-
ticos estn distribuidas en dos pares: el primero suele estar
incluido en el parnquima de las glndulas tiroides (par de
paratiroides internas), mientras que el segundo par se localiza a
una distancia variable y externamente a la glndula tiroides (par
de paratiroides externas).
Estas glndulas presentan una cpsula de tejido conjuntivo
denso irregular (en paratiroides externas), o bien, en el caso de
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las paratiroides internas, capas de conjuntivo laxo areolar del
estroma tiroideo. El parnquima corresponde a una glndula
endocrina cordonal. En todas las especies se observan las clu-
las principales; morfolgicamente, en las clulas principales se
puede distinguir entre claras y oscuras, las primeras son clulas
pequeas con ncleos vesiculares grandes y citoplasma que se
tie dbilmente, carente de granulaciones; las segundas son
clulas con ncleos ms pequeos, con la importante caracte-
rstica de presentar finos grnulos citoplasmticos que corres-
ponden a la secrecin hormonal.
En la mayora de los animales domsticos estas clulas es-
tn distribuidas al azar, slo en los ovinos y caprinos las clulas
principales claras se localizan en la periferia y las oscuras hacia
el centro.
En los primates, equinos y bo-
vinos se descubre adems otro tipo
de clulas, grandes con citoplasma
acidfilo y ncleo pequeo y oscu-
ro, stas se conocen como clulas
oxfilas y suelen estar en pequeos
grupos dispuestos al azar.
Actividad
Estudia un corte histolgico de glndula paratiroides para
identificar las clulas principales claras, oscuras y, en su
caso, las oxfilas, as como la estructura cordonal de la gln-
dula y los diferentes tipos celulares existentes en ella.
Haz un esquema de lo observado.
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GLNDULAS ADRENALES
Son glndulas pares. Su estroma est compuesto de una cpsula
de conjuntivo denso irregular que emite pequeas trabculas
apenas perceptibles. El parnquima se divide en una corteza y
una mdula. Cualquiera de estas dos porciones corresponde a
una glndula endocrina cordonal.
En la corteza se distinguen tres zonas, que de afuera hacia
adentro son: glomerular, fascicular y reticular.
La zona glomerular est formada por clulas cilndricas o
polidricas con citoplasma tenuemente acidfilo; en ciertas es-
pecies (hombre y equinos) estas clulas presentan grnulos
basfilos, sus ncleos son pequeos y oscuros y se agrupan en
cordones que adquieren la forma de pequeos arcos (glomrulos)
adyacentes a la cpsula.
La zona fascicular (o fasciculada) est compuesta de clu-
las cbicas o polidricas, cuyo citoplasma es dbilmente
acidfilo y contiene mltiples vesculas de lpidos que por los
procedimientos rutinarios no se observan, los cuales le dan una
apariencia espumosa; por esta razn se les denomina
espongiocitos. Las clulas se agrupan en cordones paralelos entre
s, dispuestos radialmente en relacin con la porcin medular
del rgano.
La zona reticular est formada por cordones celulares que
se unen (o anastomosan) formando pequeas redes (de ah el
nombre de esta parte de la corteza), las clulas son polidricas
con ncleo esfrico e hipercromtico (en ocasiones se obser-
van picnticos), su citoplasma tiene un menor nmero de ves-
culas lipdicas.
En la porcin medular se observan clulas que forman cor-
dones en diversas direcciones, se pueden distinguir porque son
clulas ms grandes que en la zona reticular, adems de tener
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ncleos voluminosos y dbilmente teidos. Hay tambin clu-
las ganglionares (cuerpos de neuronas simpticas). En ambos
tipos celulares los nuclolos se advierten con facilidad.
Las clulas de la mdula adrenal producen dos tipos de
catecolaminas: la adrenalina y la noradrenalina (o epinefrina y
norepinefrina, respectivamente); las clulas se especializan en
la produccin nicamente de uno de estos dos compuestos (hor-
monas) y estn distribuidas al azar en el parnquima medular,
sin embargo, en los rumiantes las clulas que producen epinefrina
se distribuyen especialmente en la periferia de la mdula y las
que producen noradrenalina, hacia el centro.
Actividad
En un corte histolgico de gln-
dula adrenal identifica la zona
glomerular, fascicular y reticular
de la corteza, as como las clu-
las glandulares y ganglionares
de la mdula.
En un corte histolgico de gln-
dula adrenal identifica las prin-
cipales estructuras presentes en
corteza y mdula.
Elabora un esquema.
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Prctica 18
Aparato reproductor
masculino
OBJETIVOS
18. Con el microscopio fotnico, identificar las principa-
les caractersticas histolgicas de los rganos del apa-
rato reproductor masculino: testculo, epiddimo,
conducto deferente y prstata.
18.1. Identificar los tbulos seminferos, las clulas de sos-
tn (o de Sertoli), clulas de la cadena espermtica y
clulas intersticiales (o de Leydig) del testculo.
18.2. Identificar el epitelio de revestimiento, la lmina pro-
pia, las capas muscular y adventicia del epiddimo.
18.3. Identificar la mucosa, submucosa, muscular y adventi-
cia del conducto deferente.
18.4. Identificar el epitelio glandular, la cpsula y las
trabculas de la prstata.
TESTCULOS
Los testculos son las gnadas masculinas. Se consideran gln-
dulas anficrinas pues tienen una secrecin exocrina, que corres-
ponde a las clulas germinales o espermatozoides, y secretan
endocrina (produccin de hormonas esteroides).
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Cada testculo est envuelto por una cpsula de conjuntivo
denso irregular llamada tnica albugnea, esta cpsula est cu-
bierta por un mesotelio (llamado tnica vaginal).
La cpsula (tnica albugnea) emite trabculas al interior
del parnquima y lo divide en pequeos compartimientos lla-
mados lobulillos testiculares, cada lobulillo est constituido por
un nmero variable de estructuras llamadas tbulos seminferos
que presentan en su interior diversos estratos de clulas que
reciben el nombre de epitelio germinativo, este epitelio contie-
ne diferentes estadios celulares de la maduracin espermtica
como son: espermatogonias, espermatocitos (primarios y se-
cundarios), espermtides y espermatozoides; estos ltimos se
reconocen en la porcin adyacente a la luz de los tbulos, pre-
sentan flagelos que se delinean tenuemente y que en conjunto
dan una apariencia que se denomina penachos de
espermatozoides. En la porcin basal se distinguen las clulas
de sostn que se caracterizan por un ncleo esfrico y basal con
nuclolo prominente, su forma ce-
lular es piramidal, pero general-
mente no se aprecia con claridad,
ya que su citoplasma da cabida a
los otros tipos celulares ya men-
cionados.
Entre los tbulos seminferos
se encuentran las clulas intersticia-
les o endocrinocitos intersticiales
testiculares, que se caracterizan
por tener forma polidrica, cito-
plasma espumoso acidfilo y n-
cleo esfrico y grande (estas
clulas son particularmente abun-
dantes en bovinos y cerdos).
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Actividad
Estudia en un corte histolgico de testculo los tbulos
seminferos, clulas de la cadena espermtica, clulas de
sostn y clulas intersticiales y seala las estructuras pro-
pias de este rgano.
EPIDDIMO
El epiddimo es uno de los conductos genitales del aparato
reproductor masculino. Aqu se almacenan y terminan de ma-
durar los espermatozoides. Es un tubo delgado de gran longi-
tud, con numerosos plegamientos sobre s mismo; al microscopio
fotnico se observa una serie de estructuras circulares o
poligonales que en realidad forman parte del mismo tubo que
pasa multitud de veces a travs de la superficie de corte, por lo
que da la apariencia de que son varios tubos.
El epitelio de revestimiento es seudoestratificado cilndri-
co con estereocilios; descansa sobre una capa de conjuntivo
laxo areolar muy vascularizada, que corresponde a la lmina
propia; despus tiene una capa de clulas musculares lisas en
direccin circular; la ltima capa es la adventicia de conjuntivo
ordinario laxo areolar, que lo relaciona con los numerosos do-
bleces del mismo rgano. En la luz
se aprecian los espermatozoides en
nmero variable, segn el grado de
actividad sexual del animal antes de
tomar la muestra de este rgano.
Actividad
En un corte histolgico de epiddimo identifica las dife-
rentes capas histolgicas y elabora un esquema.
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CONDUCTO DEFERENTE
Es un rgano tubular que corresponde a una prolongacin mo-
dificada del epiddimo. Una de sus caractersticas distintivas es
que presenta una luz estrecha de forma estrellada y una pared
extremadamente engrosada, la forma de la luz se debe a la con-
traccin de la musculatura lisa del rgano despus de la muerte
del animal.
Tiene un epitelio seudoestratificado cilndrico con
estereocilios que se sustenta en una lmina propia escasa (la
mucosa es sumamente delgada y en el corte transversal se ob-
serva una luz estrellada), no se distingue muscular de la muco-
sa, ni una demarcacin con la submucosa (a esta nica capa de
tejido conjuntivo laxo algunos autores la denominan lmina
propia submucosa).
La capa muscular del rgano est muy engrosada, se consi-
dera dispuesta en tres capas: longitudinal, intermedia en espiral
o circular (es la capa mas gruesa de las tres) y longitudinal; por
ltimo, se observa una adventicia tpica que puede presentar
tejido adiposo. En la luz se descubren algunos espermatozoides,
sin embargo, no es un rgano especializado en su almacena-
miento, slo en su transporte.
Actividad
Estudia en un corte histolgico
transversal del conducto deferen-
te: la mucosa, submucosa, capas
muscular y adventicia.
Elabora un esquema del conducto
deferente identificando las estruc-
turas anteriormente sealadas.
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PRSTATA
Es una glndula exocrina, anexa al aparato reproductor mascu-
lino; est presente en todas las especies domsticas.
Histolgicamente es una glndula tubuloalveolar
ramificada. Tiene una cpsula de conjuntivo denso irregular que
enva septos o trabculas al interior del parnquima y que la
dividen en lbulos; estas porciones del estroma estn entremez-
cladas con fibras musculares lisas que al contraerse durante la
eyaculacin favorecen la expulsin de la secrecin glandular.
El epitelio glandular es cilndrico simple, las clulas se ca-
racterizan por tener grnulos intensamente acidfilos en la por-
cin apical de su citoplasma. Son porciones secretoras los
alvolos y las glndulas tubulares revestidas por el mismo tipo
de epitelio.
Macroscpicamente se distinguen dos porciones: el cuer-
po de la prstata y la porcin diseminada. La descripcin
histolgica que se ha dado corresponde al cuerpo prosttico,
ya que la porcin diseminada tiene una cpsula de conjuntivo
laxo, adems de que el epitelio glandular se contina con un
epitelio modificado o de transicin al desembocar en la uretra.
En equinos y carnvoros est desarrollado el cuerpo prosttico,
mientras que en el resto de las especies domsticas lo est la
porcin diseminada.
Actividad
En un corte histolgico de prs-
tata, identifica su cpsula, los
alvolos y el epitelio secretor y
sus principales elementos
histolgicos.
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Prctica 19
Aparato reproductor
femenino
OBJETIVOS
19. Con el uso del microscopio fotnico, identificar las
principales caractersticas histolgicas de los rganos
del aparato reproductor femenino.
19.1. Identificar las estructuras histolgicas presentes en la
zona cortical y medular del ovario.
19.2. Identificar las estructuras histolgicas presentes en el
endometrio, miometrio y perimetrio del tero.
OVARIO
Los ovarios son glndulas anficrinas que producen clulas
germinales (vulos), adems de las hormonas. Se distinguen de
otros rganos parenquimatosos porque en lugar de estar
recubiertos por una cpsula, presentan un epitelio de revesti-
miento cbico simple (un mesotelio cuboideo caracterstico del
ovario) denominado antiguamente epitelio germinativo pues se crea
errneamente que originaba las clulas germinales.
El parnquima se divide en dos porciones: la corteza y la
mdula. La zona cortical tiene diversas estructuras funcionales
como son los folculos en diversos grados de maduracin,
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el cuerpo hemorrgico, el cuerpo lteo (o amarillo), los cuer-
pos blancos (o corpus albicans) y los folculos atrsicos. En la zona
medular hay vasos sanguneos y linfticos, y nervios unidos por
tejido conjuntivo.
Los folculos ovricos pueden ser primordiales, primarios,
secundarios, terciarios y maduros.
Los folculos primordiales tienen un ovocito interior y es-
tn envueltos por clulas foliculares planas; los folculos prima-
rios se diferencian de los anteriores en que las clulas foliculares
(aquellas que rodean al ovocito) se transforman en cbicas y se
multiplican por mitosis; los folculos secundarios, adems, pre-
sentan la zona pelcida (engrosamiento que delimita al ovocito)
y las tecas (organizacin de tejido conjuntivo ms externo del
folculo); los folculos terciarios se caracterizan por tener un
espacio (antro folicular) lleno de un lquido homogneo, en
cuanto a su apariencia histolgica, (lquido folicular), este l-
quido se sita entre las clulas que rodean el cmulo ovgero,
que es el conjunto de clulas foliculares que rodean la zona
pelcida del ovocito (granulosa interna) y el conjunto de las
clulas adyacentes a las tecas (granulosa externa); los folculos
maduros tienen grandes dimensiones y pueden abarcar parte
de la zona medular y protruir la superficie externa del ovario.
Los folculos atrsicos se caracterizan por la presencia de
clulas que han muerto (con ncleos intensamente basfilos, o
bien, fragmentados o inexistentes).
El cuerpo lteo presenta clulas polidricas, cuyo citoplas-
ma es espumoso porque contiene vesculas con lpidos; los n-
cleos son esfricos y se observan abundantes capilares entre las
clulas glandulares.
El cuerpo blanco est formado por tejido conjuntivo ordi-
nario que sustituye a un cuerpo amarillo, queda enmarcado por
la abundancia de fibras colgenas y clulas.
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El ovario de la yegua se distingue de otras especies porque
en la zona cortical se localizan los vasos y nervios; y en la zona
medular, los folculos y dems estructuras funcionales. Asimis-
mo, presenta una regin en su superficie, la fosa de ovulacin,
la cual se distingue por tener una depresin y al igual que el
resto de la superficie ovrica est
recubierta por una serosa. Esta porcin
es el nico sitio por donde la especie
expulsa el vulo.
Actividad
En un esquema de ovario identifica
las diferentes estructuras histol-
gicas de la zona medular y cortical.
En una preparacin histolgica de
ovario identifica las diversas estructuras de la corteza y
mdula ovrica.
TERO
Es un rgano tubular con tres porciones: cuernos, cuerpo y cuello
o crvix (en el laboratorio slo se cuenta con laminillas de cuer-
po de tero).
Los cuernos y el cuerpo tienen la misma estructura
histolgica; estn constituidos por una capa mucosa, una mus-
cular y una serosa; estas tres capas histolgicas suelen denomi-
narse endometrio, miometrio y perimetrio, respectivamente.
El endometrio presenta un epitelio de revestimiento ciln-
drico simple, debajo de l hay tejido conjuntivo laxo, que
corresponde a la lmina propia; en este sitio se localizan
las glndulas tubulares llamadas glndulas endometriales
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productoras de embriotrofo o leche uterina; no existe mus-
cular de la mucosa ni submucosa, por lo que podemos hablar de
una sola capa de tejido conjuntivo (lmina propia-submucosa).
En los rumiantes se observan elevaciones endometriales llama-
das carnculas, en las cuales no existen glndulas endometriales.
El miometrio consta de dos capas de
msculo liso, la capa adyacente al
endometrio, que es circular y se llama es-
trato submucoso, y la capa intermedia, que
se caracteriza por tener vasos sanguneos
de gran calibre, por lo que se llama estrato
vascular; y una tercera capa de fibras
longitudinales que se denomina estrato
subseroso. La disposicin de miometrio es
caracterstica de este rgano.
El perimetrio es una serosa tpica.
Actividad
En un corte histolgico transversal de
tero identifica sus tres capas
histolgicas: endometrio, miometrio
y perimetrio, as como las estructuras
distintivas de cada una.
Elabora un esquema del tero y seala en ste las estructu-
ras histolgicas propias del mismo rgano tubular.
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Prctica 20
Sistema integumentario:
piel y glndula mamaria
OBJETIVOS
20. Con el uso del microscopio fotnico, identificar las
principales caractersticas histolgicas de la piel y la
glndula mamaria.
20.1. Identificar las estructuras histolgicas presentes en la
epidermis y dermis de la piel.
20.2. Identificar las caractersticas histolgicas de la gln-
dula mamaria en produccin: alvolos mamarios,
tbulos secretores, conductos; o bien, sus caractersti-
cas en reposo.
PIEL
La piel est constituida por dos capas histolgicas: la epidermis
y la dermis.
La epidermis est formada por un epitelio estratificado pla-
no queratinizado que se caracteriza por tener cinco estratos; el
ms profundo (capa basal o germinativa) se distingue fcilmen-
te, pues las clulas estn cercanas entre s, delimitando clara-
mente el inicio del epitelio. La capa ms externa (estrato crneo)
presenta un grosor variable, dependiendo del sitio de donde se
haya tomado la muestra.
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La dermis es una capa histolgica que tiene dos zonas, una
adyacente al epitelio, llamada zona papilar de tejido conjuntivo
laxo areolar, y otra por debajo de la anterior, de conjuntivo
denso irregular, denominada zona reticular. El rea papilar se
denomina as porque se pliega con la base del epitelio, forman-
do las papilas drmicas; en el rea reticular se localizan las gln-
dulas sudorpara y sebcea y los folculos pilosos.
Las glndulas sebceas son alveolares simples o ramificadas,
su descripcin fue detallada en la prctica correspondiente al
epitelio glandular.
Las glndulas sudorparas son tubulares simples, en los
primates predominan las glndulas merocrinas, que se caracte-
rizan por presentar un epitelio cbico simple; este tipo de gln-
dulas sudorparas slo existe en los cojinetes plantares de algunos
animales domsticos. Las glndulas apocrinas tienen un epite-
lio cilndrico simple, con vesculas citoplasmticas apicales que
forman parte de la secrecin glandular, este tipo de glndulas
sudorparas es predominante en los animales domsticos (salvo
en el gato en el que se localizan nicamente en regiones especi-
ficas de su cuerpo). Las clulas mioepiteliales rodean el
adenmero de ambos tipos de glndulas.
Los folculos pilosos dan origen a
los pelos; son estructuras formadas por
agrupaciones de clulas poligonales de
las que surge la queratina que constitu-
ye el pelo.
Por debajo del rea reticular hay
una capa de tejido laxo areolar que sue-
le tener tejido adiposo (panculo adi-
poso), esta capa se conoce como
hipodermis; en forma estricta no se con-
sidera parte constitutiva de la piel.
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Actividad
En un esquema de corte de piel identifica la epidermis, la
dermis, las glndulas sudorparas y sebceas y los folculos
pilosos.
En un corte histolgico de piel identifica las estructuras
descritas en el texto.
GLNDULA MAMARIA
La glndula mamaria es una glndula exocrina, considerada
como un tipo de glndula sudorpara modificada, encargada de
la produccin lctea de los mamferos. Presenta una cpsula de
conjuntivo denso irregular que enva trabculas al interior del
parnquima, las cuales lo dividen en lbulos y lobulillos. Cada
lobulillo est formado por un conjunto de adenmeros que
histolgicamente son glndulas tubuloalveolares compuestas.
La glndula mamaria puede encontrarse en dos estados
funcionales: en produccin lctea o en estado de reposo.
Cuando la glndula est en produccin se observan clara-
mente los alvolos mamarios y los tbulos secretorios; estas
estructuras tienen un epitelio cilndrico simple; en el polo apical
presentan vesculas secretorias que for-
man una parte del citoplasma celular, y
que al desprenderse contribuyen a la se-
crecin de leche (particularmente los
lpidos); si se observa al microscopio,
sta tiene un aspecto grumoso y se lo-
caliza en el interior de los alvolos
mamarios; los conductos varan de c-
bico simple (los de menor calibre) a ci-
lndrico simple (los de mayor calibre).
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Los adenmeros estn rodeados
por clulas mioepiteliales (clulas alar-
gadas con citoplasma acidfilo) que fa-
vorecen la expulsin de la leche
conocida como eyeccin lctea.
Cuando la glndula mamaria est
inactiva los adenmeros son reempla-
zados por abundante tejido conjuntivo
laxo areolar y tejido adiposo, y nica-
mente permanecen en el sistema de
conductos.
Actividad
En un esquema de un corte de glndula mamaria en pro-
duccin y en reposo, identifica los adenmeros y la secre-
cin; y en ambos, identifica el sistema de conductos.
En un corte histolgico de glndula mamaria identifica las
caractersticas histolgicas, segn se trate de glndula en
reposo o en produccin.
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGA TISULAR
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Se termin en agosto de 2008, en la Secretara de Comunicacin
de la FMVZ-UNAM.
La produccin digital de esta obra consta de 400 CDS.
Ciudad Universitaria, Mxico 04510, DF; tel: 5622.5909