Microbiologa: clase cuatro.

Agentes fsico:
- Calor: hmedo (vapor, autoclave) y seco( estufa)
- Radiaciones: desecacin.
- Filtracin.
Algunos conceptos bsicos.
1. Esterilizacin: eliminacin o muerte de todos los microorganismos que
contiene un objeto os sustancia.

2. Bactericida: agentes que destruyen y matan a las bacterias.


3. Bacteriosttico: agentes que inhiben el crecimiento de las bacterias.

4. Desinfectante: organismo que elimina la carga microbiana total en
superficies inanimadas tales como mesadas de trabajo.


5. Antisptico: agente que controla y reduce la presencia de microorganismos
preferentemente patgenos sobre piel y mucosas.

6. Desinfectante: elimina la carga sobre. criterio de muerte para un
microorganismo. Perdida irreversible de su capacidad de reproduccin.
Esterilizacin.
Criterio de muerte para un microorganismo. Prdida irreversible de su capacidad
de
Mecanismo de accin:
Desnaturalizacin de protenas y destruccin de cidos nucleicos. Preg examen.
Mtodos:

- Vapor saturado a presiones mayores que la atmosfrica.
- Tindalizacin.
- Pausterizacin.
- UHT
Pausterizacin:
- O es un proceso de esterilizacin.
- Solo destruye patgenos y reduce flora de deterioro.
- Usos: leche, lcteos, jugos de fruta.
LHT: low temperature holding: 30 minutos a 62.8 c.
HTST: high to short time: 15 segundos a 71.6 C.
UHT: ultra high: 150 c por Segundo.
Tindalizacin:
- 100 c 30 minutos = 3 das seguidos.
- Proceso discontinuo con periodos de incubacin intercalados.
- Usos: esterilizacin de productos de baja resistencia trmica, cuando no
existe otra opcin.
Vapores saturado a presiones mayores que la atmosfrica:
- Condiciones: vapor saturado a temperaturas mayores de 100 C:
precaucin, por la eliminacin total del aire.
- Equipo: autoclave.
- Alcance: se puede conseguir la esterilizacin.
- Usos: esterilizacin de materiales y productos termoestables (salvo
productos oleosos y polvos) descontaminacin de deshechos biolgicos.
Esquema bsico de la autoclave:
- Debe tener agua para que genere vapor.
- Ver que la manguera de gas no est siendo aplastada.
Autoclave: condiciones.
- 121 c por quince minutos con cargas iniciales bajas.
- 121 c por treinta minutos con cargas iniciales altas.
- Todo depende de la cantidad que quieres esterilizar.
- Los guantes de ltex son autoclavables, algunas autoclaves vienen con
ciclo de ltex.



Indicadores: para ver si funciono el mtodo.
- Fsicos: temperatura y/o presin.
- Qumicos.
- Indicador biolgico: geo bacillus stearotermophilus.
- Tamao del inoculo: 104 esporas.
- Telas si: guardapolvo, y tambin algunos plsticos que sean autoclavables,
aunque despus de sacarlos hay que envolverlos.
- Al estudiar estos mtodos repasar que se puede meter y que no.
- Geo bacillus stearotermophilus: compruebo, haciendo un cultivo y si esto no
sale, entonces esta todo joya.
- Lo ms preciso es un control.
Grafico: perfil de temperatura de un proceso de esterilizacin por calor hmedo.






Cabinas de flujo laminar vertical: muy cara, ms que la horizontal. Grafico.





- Protege la muestra, el operador y al medio ambiente.
Esterilizacin por radiaciones.
- Ionizantes
- No ionizantes.

Actividad antimicrobiana.
- gama.
- Rayos X.
- Ultravioletas.
Radiaciones ionizantes:
- Gamma.
- Catdicos (electrones acelerados)
- Beta.
- Caractersticas:
Gran poder de penetracin,
Ionizan tomos y molculas.
No requiere altas temperaturas.
Alta energa.
Baja longitud de onda.
- Mecanismos de accin: formacin de radicales libres. Y adems, produce
dao irreversible al ADN y ARN.
Grafico de resistencia:
- Priones.
- Deinococcus radioduran.
- Enterococcus faecium
- Esporas bacterianas.
- Virus
- Hongos
- Bacterias en general
Desventajas:
- Equipo especial.
- Personal entrenado.
- No todos los materiales resisten al tratamiento.
- Reacciones no deseadas en alimentos.
Radiaciones no ionizantes.
Caractersticas:
- Baja energa.
- Sin poder ionizante.
- Sin poder penetrante: mxima eficiencia biocida a 260nm.
Mecanismo de accin:
- Sitio blanco ADN.
- Formacin de dmeros de timina.
Usos:
- Desinfeccin de superficies.
- Desinfeccin de aire y agua: no se utiliza para esterilizar, si no para:
Esterilizacin por radiaciones:
- Afecta a nivel DNA, grupos amino, produciendo un dao irreversible
Calor seco.
Mecanismo de accin:
- Por proceso de oxidacin.
- Controles de procesos de esterilizacin: Indicadores fsicos, qumicos y
biolgicos (bacillus)
Aire caliente:
- Horno elctrico.
- Consigue esterilizacin en 170 c en una hora o en 160c pero en dos
horas.
Usos:
- Esterilizacin de materiales al calor.
- Polvos.
- Sustancia no miscibles en agua (siliconas, vaselina, lquidos)
Incineracin: destruccin de material contaminado.
Flameado: desinfeccin.





Grafico de resistencia al calor de microorganismos.
- Priones.
- Endoesporas.
- Mycobacteria
- Virus sin envoltura lipdica.
- Hongos
- Bacterias.
- Virus con envoltura lipdica
Esterilizacin por filtracin:
- La esterilizacin por filtracin se logra por el paso de un lquido o gas a
travs de un material capaz de retener microorganismos presentes.
Filtros de profundidad.
Elaborados por materiales fibrosos dispuestos al azar.
Filtros de superficie:
Filtros elaborados de acetato de celulosa o nitrato de celulosa y contiene poros de
tamao regular.
Filtracin de aire:
Muy caro.
Filtros HEPA:
Remocin de hasta 99.7% de partculas mayores de 0.3 micrones
de dimetro.
Se usan cabinas de flujo laminar.
- Control: remocin mnima de 99.7% de partculas generadas mediante
ensayo dop en caliente con dimetro de 0.3
- Uso: cornea placentas: bancos de tejidos.
- Se usan para: lograr ambientes con nmeros de partculas controladas:
flujo laminares, rea de trabajo.
- Todos los rganos se procesan en campanas de flujo laminar.



Proceso de esterilizacin:
Agente Condiciones Usos
Calor hmedo 121 c 15 minutos Material termoestable,
penetrable por vapor.
Calor seco 160c 2 horas
180c 1 hora
Material termoestable, no
penetrable por vapor.
Radiaciones ionizantes 25 kg y 45 kg Material termosensible,
resistente al tratamiento
Filtracin 0.22 micras de poro Material filtrable.

Control de esterilizacin:
Controles del proceso: indicadores: fsicos qumicos biolgicos.
- Fsico: ejemplo, temperatura y presin.
- qumico: cambio de color.
- Biolgico: microorganismo resistente.
Agentes qumico de esterilizacin y control de crecimiento.
- Antispticos: alcoholes, iodo, organismos mercuriales, colorante. Se
aplican en piel y superficies biolgicas.
- Desinfectantes: igual al anterior, solo aplicado en materiales no vivos.
Componentes clorados, aldehdos, oxido de estileno, compuestos fenolicos.
Alcoholes:
- Lesionan la membrana celular del microorganismo y desnaturaliza las
protenas.
- Desorganiza la estructura fosfolipdica de la membrana.
- No destruyen esporas y tienen accin germicida lenta. Los alcoholes de
cadena corta tiene un efecto nocivo mayor que los de cadena larga. Se
utilizan concentraciones del 50 al 70%.
- Los ms usados son el etanol e isoplopilico.
Iodo:
- No se usa mucho por las alergias.
- Es un agente oxidante que modifica grupos funcionales de protenas y
cidos nucleicos, inactiva protenas y enzima por oxidacin de los grupos
sh o S-S, pudiendo atacar tambin grupos aminos ndoles, etc.
- Se usa como desinfectante de la piel (tintura de iodo: yodo molecular 2% y
yoduro de sodio 2% de alcohol) aunque es irritante.
- Es efectivo contra esporas en concentraciones de 1600 ppm de iodo libre.
Perxido de hidrogeno.
- Antisptico dbil, con capacidad oxidante y formadora de radicales libres.
- Actualmente gaseoso se usa como desinfectante de superficies o
descontaminante de gabinetes biolgicos debido a que no posee las
propiedades toxicas y cancergenas del oxido de etileno y formaldehido.
rgano mercuriales:
- No le dio bola.
- Estos tipos de componentes se combinan con los grupos sh de las
protenas inactivando enzimas.
- Dentro de los mercuriales organizo esta el metafem y el mertiolate.
Colorantes:
- Derivados de trifenilmetano (violeta de genciana verde de malaquita)
bloquean conversin del acido VDP- acetilnuramico en UDP. Acetilmuranil
.pptido.
- Bloquean conversin a nivel de sntesis de pared. Ver a qu se debe esto.
Cloro y sus derivados:
El cloro e hipocloritos son desinfectantes que actan sobre protenas y cidos
nucleicos de microorganismos. Oxidan grupos sh y atacan grupos aminos,
ndoles e hidroxifenol de tirosina.
La actividad se debe al acido hipocloroso y al CL2 que se forma cuando el
hipoclorito es diluido en agua.
El producto activo sobre bacterias, esporas y dems, es efectivo en un amplio
rango de temperatura.






Desinfectantes:
- Aldehdos:

Agentes aniquilantes que actan sobre protenas que provocan
modificacin irreversible de enzimas e inhibicin de actividad en Z.
Destruyen esporas, son desinfectantes y esterilizantes.
El formaldehido como gas se usa para descontaminar edificios y
se obtiene por calentamiento.

- xido de etileno:

Por medio de gas, esterilizacin gaseosa.
Agente aniquilantes que se une a compuesto con hidrogeniones
lbiles como los que tiene grupos carboxilos, aminos, etc.
Se usa generalmente en industria farmacutica.
Sirve para esterilizar materiales termosensible como descartables y
plsticos, equipos poselectrnicos.
Muy peligroso.
Hipoclorito no es un antisptico.
Buscar HEPA.