Los virus constituyen una forma de existencia de la materia viva y son los agentes

infetciososms pequeos que se conocen en la actualidad (de 20 a 300 nm de dime-

tro); contienen como genoma una clase nica de cido nucleico (ADN ARN). Se
planteaque una parcula viral es unaestructura que tiene lacapacidad de transferir el
&ido nucleicode una clula a otra y es considerada como un organelo extracelular.
Los virns son parsitos intracelulares obligados a nivel gentico, por lo que
necesitan de la maquinaria biosinttica de la clula husped para poder sintetizar sus
macromolculas especfim, requehdas para la produccin de la progenie viral.
En este captulo trataremos los aspectos generales de la composicin de estos
organismos y estudiaremos los mecanismos de infeccin y replicacin de varios tipos
de virus, ascomo la participacin de algunos de ellosen la transformacin magnade
determinadas clulas.
Definiciones en virolopa
Existen algunos conceptos importantes que deben tenerse en cuenta para poder
hablar en trminos virolgicos; a continuacin mencionamos los ms frecuentes:
CbpQkle. Constituye la cubierta protenica que envuelve al cido nucleico del
genoma. Las cpsides vacas pueden ser subproductos del ciclo de replicacin de los
virus, con simetra icosadrica.
NudeoeBpside. No es ms que la cpside con el cido nucleico encapsulado.
Unidades esiruehirales. Constituyen los bloques protenicos bsicos de la
envoltura. Suelen ser una acumulacin de ms de un polipptido no idntico.
Capdmema Son las unidades morfolgicas que se observan al microscopio
electrnico sobre la superficie de las partculas virales icosadricas.
Envdtura. Membrana que contiene Upidos y circnnda a determinadas part'cuias
virales. Se adquiere durante la maduracin del virus, por un proceso de gemacin a
travs de una membranacelular. En la superfkie de la envoltura quedan expuestas las
gcoprotenas codicadas por el virus.
V i Es la particda vira1 completa infectante, que en el caso de los virus desnudos
(Adenovirus, Picornavirus, Papovavirus) puede ser idntica a la nucleocpside. Esta
estmctnra, el virin, siwe para trasmitir el cido nucleico viral de una clula a otra.
Virus defectuoso. No es ms que una partcula viral, que est funcionalmente
deficiente en algunos aspectos de la replicacin. El virus defectuoso puede interferir
'
enla replicacin de un virusnormal.
l
Cpside
\ 1 i'""""
En la figura 78.1 se muestran algunos de los componentes estructurales de un
vims maduro (Adenovinis).
1
\
ADN
Fuente: Fields BN et al.: Virologv (Volume
1). 3rd edition. Lippineott-Raven
Publishers, 1996.
Fig. 78.1. Diagrama de la particula de
Adenovirus, donde se muestran las
diferentes componentes de la es-
tructura viral: ADN y cpside; for-
mando parte de esta ltima se cn-
cuentran las hexanas (trimeras de
polipptidos) y las pentonas (cons-
tituidas por una base pentamrica
y una fibra trimriea). Tanto las
hexonas como las pentonas parti-
cipan en la unin del virus a la
clula husped.
Fuente: Firlds BN et al.: Virology (Volume
1). 3rd editian. Lippineott-Raven
Publishers, 1996.
Fig. 78.2. Reconstruccin tridimensional de
partienlas virales can simetra
icosadrica a partir de mierografia
electrnica: a) Rotavirus, virus de
ARN, desnudo; h) Hcrpesvirus,
virus de ADN, envuelto.
Clasificacin de los virus
Se han descrito diferentes propiedades que constituyen las bases para la
clasificacin de los virus. La cantidad de informacin existente para cada categora no
es uniforme en todos los virus. Las principales propiedades descritas, en orden de
importancia,son:
1. Tipo de cido nucleico (ADN 6 ARN); cadena nica o doble; estrategia de
replicacin.
2. Tamao y morfologa, incluyendo el tipo de simetra, el nmero de capsmeros y la
presencia o ausencia de envoltura.
3. Susceptibilidad a agentes qumicos y fsicos, en especial al ter.
4. Presencia de enzimas especificas, en especial ARN y ADN polimerasas, que inter-
vienen en la replicacin del genoma, y la neuramidinasa necesaria para la lihera-
cin de algunas partculas virales (como es el caso del virus de la Influenza).
5. Propiedades inmunolgicas.
6. Mtodos natnrales de trasmisin.
7. Husped, tropismo y tejidos celulares.
8. Anatomopatologa, incluyendo la formacin de cuerpos de inclusin.
9. Sintomatologa (enfermedades generalizadas o localizadas en diferentes rganos
como: SNC, aparatos respiratorios y digestivo, enfermedades de trasmisin sexual
Y otras).
Tipos de simetra de las partculas virales
Los adelantos en las tcnicas de difraccin con rayos X, as como en la microscopia
electrnica, han hecho posible la resolucin de diferencias sutiles en la morfologa
bsica de los vinis. El estudio de la morfologa vira1 al microscopio electrnico se
realiza mediante la tincin negativa.
La arquitectura viral puede agruparse en 3 tipos, sobre la base de la conformacin
de las suhunidades motiolgicas:
1. Simetra cbica: Adenovirus, Rotavirus, Herpesvirus (Figs.78.2a y 78.2b).
2. Simetra helicoidal: Ortomixovirus, virus del mosaico del tabaco (Fig. 78.3).
3. Simetra compleja (Poxvirus).
Composici6n qumica de los virus
Las protenas estrncturales delos virns desempean variasfuncionesimportantes,
entre ellas facilitar la transferencia del cido nucleico viral de una clula husped a
otra; sirven, al mismo tiempo, para proteger al genoma viral contra lainactivacin por
las nudeasas; participan en la adhesin de la partcula viral a una clula sensible y
proporcionan la simetra estructural de dicha partcula.
Las protenas, adems, determinan las caractersticas antignicas del virus. La
reaccin inmunitaria de proteccin del husped se dirige contra los determinantes
antignicos de las protenas o las glicoprotenas que se encuentran expuestas sobre la
superficie de la partcula viral. Algunas protenas de superficie tambin manifiestan
actividades especficas, por ejemplo, la hemaglntinina del virus de la Influenza, que
aglutina los eritrocitos.
Existen otros virus que poseen enzimas dentro de los viriones. Las enzimas se
encuentran en cantidades muy pequeas y, probablemente, carecen de importancia
para la estrnctura de las part'culas virales; sin embargo, son indispensables para iniciar
el ciclo de replicacin viral cuando el virin entra en la clula husped, por ejemplo:
la ARN polimerasa que poseen los virus con genoma de ARN de sentido negativo
(Ortomkovirw, Rabdovim),la cual se requiere paracopiarlos primeros ARNm; y la
transwiptasa inversa, enzima de los retrovim que elabora una copia de ADN a partir
del ARN Wal, y constituye una etapa esencial en su replicacin y en la transformacin
de la clula husped.
hcido nudeiw virai
i ?
Los virus contienen una sola clase de cido nucleico, ya sea ADN ARN, que
'b' codifica la informacin+gentica necesaria para la replicacin de ste.
!)
El genoma puede ser de una sola cadena o de doble cadena, circular o lineal,
8 segmentado o no. Las caractersticas principales para la clasificacin de los virns en
S&: .familias se presentan en los cuadros 78.1 y 78.2.
l !
cuadro 78.1. Familias de
Famia viral
virus ARNque contienen los virusaniniales yhumanos
Caractersticas
Togavindae, Elavivnidae (virus del dengue)
Coronaviridae (Comnah), Arteririndae
Orden Mononegavirales: Pamyxovindae,
Rabdovindae, Filovindae (virus Ebula)
Ortom~orindae(virus de la Influenza),
Bmyavidae, Amviridae
Reoviridae (Rotavinis), Birnavindae
--
ARN de simple cadena, positivo, no seg-
menlado,desnudo
ARN de simple cadena, positivo, no seg-
mentado, envuelto
ARN de simple cadena, positivo,no seg-
mentado,envuelto. Transaipan anidada
ARN de simple cadena, negativo, no seg-
menado, ennielto
ARN de simple cadena, negativo, segmen-
tado,ennielto
ARN de doble cadena, positivo, segmentado,
desnudo
ARN de simple cadena,positivo, un paso de
reh.otrdpOn a ADN en su repticaan
Fuente: Fields BN et al.: Virology (Volume
1). 3rd edition. Lippincott-Raven
Publishers, 1996.
Fig. 78.3. Diagrama del virus del mosaico
del tabaco, el cual presenta una
simetra heliddal. Existen 16 lfl
subunidades por vuelta de la hli-
ce y 3 nucletidos del AKN uni-
dos a cada subunidad.
Cuadm (M Familias de virus ADN que contienen los virus animales y humanos
Familia vira1 Caractersticas
Hepadnariridae(vims de la hepatitis B) ADNde doble cadena-simple cadena, envuel-
to-desnudo. Paso de retmtranscripcin en su
rzptiocin
Cimvindae, Parvoriridae (F'arvovirus B19) ADN de simple cadena, desnudo
Papovaviiidae(wuC de ios papilomas), ADN de doble cadena,desnudo
Adenoriridw
Herpesviridae (virns del herpa simple), ADNde doble cadena,envuelto
Poxvindae,iridoriridae
Existen, adems, otros agentes que no estn incluidos en ninguna de las familias
virales conocidas y se denominan agentes subvirales; entre ellos se encuentran los
virus satlites, los virioides y los agentes de las encefalitis espongiformes (priones);
estos ltimos se tratarn ms adelante.
Todaslas f d a s principalesde uinis de ADN, citadas en el cuadro, tienen genomas
que son molculas con conf&racin lineal o circular.
Los ARN virales se encuentran en varias formas. El ARN puede ser una sola
molcula lineal (Pieornavims). Para otros virus (Ortomixovirus), el genoma consiste
en vanos segmentos de ARN. Entre los virus de ARN existen los llamados virus de
ARN de sentido positivo (Picornavirus y Togavirus), los cuales son infectantes. E1
~ -
ARN que se asla de los virus de sentido negativo, como los Rabdovirns y
Ortomixovims, no es infeccioso (ver replicacin).
La secuencia y composicin de los nucletidos de cada cido nucleico viral son
distintivas. Unade las propiedades para caracterizarlos es su contenido en gnanina -
citofina Actualmente,uno de los mtodos quems se emplean para analizar y comparar
los genomas virales de ADN es el anlisis con endonucleasas de restriccin, que no son
ms que euzimas que segmentan el ADN en secuencias especficas de n&letidos.
Cada genomaproducir un patrn caracterstico de fragmentos de ADN, despus de la
segmentacin con una enzima particular. Las tcnicas dehibridacin moleeular (ADN-
ADN, ADN-ARN, ARN-ARN) permiten estudiar la transcripcin del genoma viral
dentro de la clula infectada, lo mismo que comparar la relacin que guardan entre s
diferentes virus; esto ltimo tambin se puede realizar mediante la tcnica de
secuenciacin de cidos uucleicos, la cual constituye una herrramienta muy til en la
epidemiologa molecular, pues nos permite conocer los cambios en la secuencia
uucleotdica entre los diferentes aislamientos de un mismo virus.
Mltiples v i ~ s contienen envolturas de Ipidos como parte de su estmctura, por
ejemplo, los Herpesvirus. El Ipido se adquiere cuando la nucleocpside vira1
experimenta una gemacin a travs dela membrana celular durantela maduracin. La
gemacin ocurre solamente en los sitios de la clula husped, en los cuales se han
insertado Las protenas virales especficas en la membrana de dicha clula.
La composicin especfica fosfolipdica de la cubierta de un virin se determina
por el tipo particular de la membrana celular que participa en el proceso de gemacin;
por ejemplo, los Herpesvirus geman a travs de la membrana nuclear de la clula
husped, y la composicin defosfolpidos de los virus purificados revelan los Ipidos
de la membrana nuclear.
Los vims que contienen Ipidos (vims envueltos) son sensibles al tratamiento Con
ter y otros solventes orgnicos, por lo que la prdida de los Ipidos va a resultar en la
prdida de la infecciosidad viral.
Las cubiertas virales contienen glicoprotenas. En contraste con los Ipidos de las
membranasvirales, quesederivan dela clula hu&ped,las glimpmtenas de lacubierta
estn coditicadas por el virus.
Las glicoprotenas son las que fijan la partcula v i d aunaclula blanco (o diana)
por la interaccin con un receptor celular. Ellas son, adems, angenos virales
importantes y pueden constituir el blanco de los anticuerpos neutralizanles, como es el
w o de la hemaglutinina y la neuraminidasa del virus de la Influenza.
Multiplicaan de los v h s
Los efectos patognicos de las enfermedades causadas por virus resultan de la
interrelaciu de muchos factores:
1. Efectos txicos de los productos genticos virales en el metabolismo de las clulas
infectadas.
2. Reacciones del husped a las clulas infectadas que expresan los genes virales.
3. Medicaciones de la expresin gentica del husped por interacciones estructura-
les o funcionales con el material gentico.
Para que un virus se multiplique,tiene queinfectar primeramente a ma clula. El
rango de hospedero define tanto el tipo de tejido celular, como la especie animal que
el virus puede infectar y en la cual ste se puede multiplicar, por lo que el rango de
hospedero de los diferentes virus vara considerablemente.
Susceptibilidad
Es la capacidad que tiene una clula o un animal de ser infectado, aunque la
infeccin puede no ser suficiente para causar una enfermedad clnica demostrable.
La infeccin de una clula susceptible no asegura qne ocurra la multiplicacin
viral y puede ser productiva, restrictiva, abortiva o latente.
La infeccin productiva tiene lugar en las clulas permisivas y se caracteriza por
la produccin de una progenie viral infecciosa. La infeccin abortiva puede ocurrir
porque las clulas son susceptibles, pera nopermisivas, oporquesean virus defefavos.
Cuando la clula es permisiva, de manera transitoria, se denomina infeccin restrictiva,
mientras que la latente es aqulla donde hay persistencia del genoma vi d, perono de
, lapart'daviralinfeeciocaenlasclulastransitoriamentenopermisivas,sindesmiccin
de la clula infectada.
, )
',
Eventos priaupalea de la multiplica~i611 virai
Constituye la unin especfica de una protena viral (antirreceptor) a un
constituyente de la superficie celular (receptor). El ejemplo clsico de antirreceptor es
la hemaglutinina del virus de la Influenza. Los v i m complejos pueden tener ms de
unaespeciede molcula antirreceptora, distribuida en la superficie vi d; y la molcula
wrreceptora puede tener, a su vez, ms de un dominio,^ cada dominio puede reaccionar
con diferentes receptores. Para la adhesin se requiere una elevada concentracin de
iones. Los receptores celulares estn constituidos principalmente por glicoprotenas.
La penetracin es un pasu dependiente de energa. sta ocurre casi instan-
tneamente despuk de la adhesin e incluye 1 de 3 mecanismos:
l. l'raslucdcin del viruscompletu a travs de la membrana plasmtica.
2. Endocitosis, con fonnachin de vesculas ciiopla~mtic;a.
3 . Fusin de la envoltura vira1 ron la n~emhrma celular.
Es el trmino aplicado a los eventos que tienen lugar despus de la penetracin.
En este proceso es donde ocurre la prdida de la cubierta para los vims envueltos y la
liberacin de la nucleocpside en el citoplasma (por ejemplo, Picornavirus,
Ortomixovirus, Paramixovirus) o en el ncleo (Herpesvirns, Adenovinis).
Los principales eventos que deben ocurrir para que se lleve a cabo la multiplica-
cin vira1 son:
1. Codificacin y organizacin de los genes virales.
2. Expresin y replicacin de los genomas virales.
3. Ensamblaje y maduracin de la progenie viral.
Los genes virales se codifican en genomas de ARN ADN. Estos genomas pueden
ser de simple o de doble cadena. Adems, ellos pueden ser monopartite (todos los
genes del virus estn contenidos en un solo cromosoma) o multipartite (los genes
virales estn distribuidos entre diferentes cromosomas que, juntos, constituyen el
genoma viral).
Entre los virus de ARN, slo los miembros dela familia Reovirus contienen genoma
dedoble cadena y son, adems,multiparte, pues contienen de 10 a 12 segmentos. El
resto de los virus es de simple cadena.
Entre los virus de ADN, con excepcin de los Parvovirus, todos son de doble
cadena y contienen genoma monopartite.
Virus de ARNpositivo que codifican para un solo ARNgenmico. Los virus de
ARN positivos, por convencin, son aquellos cuyos genomas sirven como ARNm
(Fig. 78.4). Despus de la entrada a la clula, sus ARN genmicos se unen a los
ribosomas y sus dominios codficantes son traducidos en su integridad. El producto de
la traduccin es una poliprotena, la cual es escindida posteriormente. Estos ARN
genmicossirven comomoldes parala sntesis de ARN de cadena negativa. La cadena
de ARN negativa, a su vez, sirve de molde para otras cadenas positivas de ARN. La
progenie de ARN positivo va a servir como ARNm que codifica para la sntesis de la
poliprotena, para producir ms cadenas de ARN negativo o para constituir pariculas
de progenie viral.
ARN parental
cadena positiva -b Poliprotena codificada por el genoma completo
ARN
Cadena negativa
Cadena positiva 1
+
Progenie vira1
Vnis de ARNde cadena positiva para uno o mFARNs ~ubgen~cos. Estos vims
se diferencian de los anteriores en que slo uno (el extremo 5 ') del ARN genmico
est disponible para la traduccin en el primer paso de la sntesis de protenas.
El centro de la repiicacin de los vims ARNde cadena positiva es la capacidad del
ARN genmico, de servir como ARNm despus de la infeccin. Esto provoca que las
enzimas responsables de la replicacin del genoma sean sintetizadas despus de la
infeccin y no necesitan ser portadas por el virin, por lo que este ARN es infeccioso.
Por otro lado, pmducto de que todos los genomas de ARN positivos son monopartitos,
y por ello tienen todos sus genes contenidos en un solo cromosoma. los productos
iniciales de la traduccin son una sola poliprotena que posteriormente debe ser
escindida, para constituir las protenas del virin.
Retrovirus. Constituyen el tercer grupo de los vims de ARN de cadena simple.
Caractersticamente, los genomas son monopartitos, pero diploides, y las 2 cadenas
idnticas estn unidas parcialmente por puentes de hidrgeno a otra macromolcula
o pares de base, de un modo no conocido an. La funcin del ARN genmico es servir
como molde para la sntesis del ADN viral. El virin contiene, adems del genoma,
una ADN polimerasa dependiente del ARN, denominada transcriptasa inversa (Ti) y
una mezcla de ARN de transferencia del husped, de los cuales uno funciona como
cebador.
En la figura 78.5 se muestran los procesos esenciales del ciclo repmductivo, que
son los siguientes:
1. Unin del complejo ARNt- Ti al ARN genmico.
2. Sntesis de una copia de ADN complementaria al ARN.
3. Digestin del ARN genmica pornncleasas que atacan slo al ARN en los hbridos
ADN-ARN.
4. Sntesis de la cadena complementaria del ADN viral.
Este ADN de doble cadena es transportado al ncleo de la clula huspeddonde se
integra. La expresin de losgenes virales puede no ocurrir inmediatamente. Todos los
r e t r h w contienen sitios cis~acti para los factores celulares de transactivacin. Adems,
la expresin de los genes de los Retrolirus puede estar influida por citoquinas y por
protenas expresadas por otros virus.
Wmde ARNnegativosnosepen&dos. Las virus con este tipode ARN contienen
un genoma con polaridad anlimensajera y por lo tanto no son infecciosos. Producto de
que sus genomas deben ser transcritos a ARNm, y la clula carece de las enzimas
apropiadas, todos los ARN negativos portan dentro del virin una transcriptasa. La
transcripcin del genoma es el primer evento despus de la entrada del virus a la clula.
El proceso produce mltiples ARNm funcionales (Fig. 78.6).
Fig 78.4. Esquema de la replieacin de los
virus de ARN positivos.
Fig. 78.5. Eventos en la replicacin de las
1
Reiravirus.
Enzima del virin
transcriptasa inversa Va al ncleo
ARN parental , - + ADN lineal - ADN integrado al
ADN husped
ARNm
6
T
Protenas 4 - Progenie de ARN
Progenie viral
Enzimas
Virin
ARN (-) parental segmentado
-b ARN (+) m ---b Prptenas
segmentado
t i +-/
progenie
Fig. 78.6. Esquema de la replieaein de las
virus ARN negativos.
4 4
Progenie viral
La replicacin comienza bajo la direccin de las protenas virales recin
sintetizadas; una cadena positiva larga es sintetizada y sirve como molde para la
sntesis de ARNs genmicos de cadena negativa. En estos virus el ARN funciona
alternando, como molde para la transcripcin y la replicacin, por ejemplo:
Paramixovirus,Filovipus,Rabdovinis.E&n,adems,vinisdeARN decadenanegativa
segmentados, entre ellos Ortomixovirus y Arenavim.
En el cuadro 78.3 se muestran los tipos de virus de ADN y sus miembros.
Ciiadm 783. Virus de ADNy sus miembms
Tipos de virus Miembros
Vims de ADN de doble cadena Papovavirus, Adenovi~s,Herpesvirus
que se replican en el ndeo
Virns de ADN dedoble cadena Poxvirus
quese replican enel citoplasma
Vi m de ADN de simple cadena Parvovinis
La forma ms comn de replicacin de los Wus de ADN es la primera; por eso slo
deseribiwnos sta.
Los genomas de los Papovavirns, Adenovirns y Herpesvirus son transcntos y
replicados en el ncleo, por eUo ualan las emimas hansciipcionaies para la generacin
de ARNm. Las ADNs de los Wus son infecciosos. El programa de transcripcin consiste,
al menos, en 2 ciclos de transcripcin para los Papovavirus, y 3 para los Herpesvirus y
Adenovim.
Existen 2 sitios cis-acti dentro del dominio de los genes virales. Un sitio hace
posible la unin de los factores celulares transcripcionales y la iniciacin de la
transcripcin. El segundo sitio hace pasible la interaccin deesos genes con las protenas
regulatonas virales, las cuales regulan las transcripciones positiva y negativa. En el
caso de algunos Herpesvhs, una protena del virin, introducida en la clula durante
la infeccin, puede traqactivar el primer grnpo de genes virales a ser expresados.
Los Papovavirns codifican una protena que se une al origen de la sntesis del
ADN viral, estimula el complejo de polimerasas celulares a replicar el ADN viral, y
a 6 como helicasa. Los Adenouiniscodifican una ADNpolimerw,pero dependen de
laclula husped para todas las otras funciones involncradas en la sntesis de su ADN.
Los Herpesvim codifican numerosas protenas que tienen que ver con la va dela
sntesis de ADN. stas incluyen 7 protenas que son necesarias y suficientes para la
sntesis de ADN dependiente del origen viral (Fig. 78.7).
ADN - ARNm , Protenas
parental
I \\
1.
ARNms Protenas
Progenie
viral
ENSAMBLAJE, MADURACIN Y EGRESO DEL VTRUS DE LA CLULA INTECTADA
Los virns utilizan 3 estrategias fundamentales para su ensamblaje, maduracin y
salida de la clula infectada.
La primera, ejemplificada por los Picornavirus, Reovirus, Papovavirus y
Adenovirns, entre otros, incluye el ensamblaje y maduracin iutracelular; ste puede
realizarse en el ncleo (Adenovirus, Papovavirns) o en el citoplasma (Picornavirus,
Reovirus) de la clula infectada.
Como regla, todos los vim desnudos quese ensamblan y adquieren su infectividad
dentro dela clula, dependen en gran medida deladesintegracin de la clula infectada
para su liberacin; en este paso participan las protenas estructurales del virin.
La segunda estrategia es empleada por los virus envueltos. ejemplificados por
todos los virns de ARN de cadena negativa, los Togavirus y los Retrovirns. Para este
grupo, el ltimo paso de ensamblaje viral se encuentra ligado al egreso de stos de la
clulainfectada AlgunasdelasprotenasviralesxeumentraninSertadasenlamembrana
plasmtica de la clula husped; las nucleocpsides virales se unen a zonas especficas
dela membrana celular,donde seencuentran ancladas dichas protenas; en este pmceso
el nuevo vinn es transportado o "gema" al ambiente extracelular; en algunos casos
ocurren clivajes o rearreglos de algunas delas protenas de superficie del virin durante
N
este proceso, impartindole al nuevo vinn formado, la capacidad de infectar clulas.
!
Estos tipos de virus pueden ser citolticos o no.
Fig. 78.7. Eventos en la replicacin del
Herpesvirus, un virus ADN.
La tercera estrategia es ejemplificada por los Herpesvirus, los cuales ensamblan
sus nucleocpsides en el ncleo de la clulainfectada. Contranoa otros vim envueltos,
la adquisicin dela envoltura viral y la maduracin ocurren en la lmina interna de la
membrana nuclear. Los Herpesvirus son citolticos e invariablemente destruyen las
clulas en las que ellos se multiplican. Como el resto de los virus envueltos, los
Herpesvims imparten a la clula infectada nuevas especficidades antignicas, debido
a la insercin de glicoprotenas virales en la superficie celular.
Interaecin virus-clula
El estudio dela interaccin virus-clula comenz con el crecimiento delos virus
en cultivos celulares, que constituyen una de las formas clsicas de detectar la
replicacin viral en las clulas mediante cambios en la estructura celular o efecto
citopatognico. Algunos de los ms comunes son: redondeamiento celular y
desprendimiento de la superficie a la que se encuentran adheridas las clulas, lisis
celular, formacin de sincitios y de cuerpos de inclusin.
La infeccin de una clula por virus puede llevar a alguna de las muchas posibles
vas:
1. Puede ocurrir una infeccin no productiva, en la cual la replicacin viral es hlo-
queada, y la clula husped puede o no sobrevivir; despus de una infeccin no
productiva, el genoma virai puede perderse de la clula husped. Alternativamen-
te, la informacin gentica viral puede integrarse al ADN de la clula o puede
persistir en forma de episoma en las clulas sobrevivientes. Si las propiedades de
crecimiento de las clulas se alteran, esto pudiera constituir un proceso de transfor-
macin oncognica. Por otro lado, el virus puede mantenerse con expresin de
pocos genes virales, dando como resultado una infeccin latente.
2. Una infeccin virai productiva, que puede resultar en la muerte y lisis celular.
3. La clula puede sobrevivir y continuar produciendo virus a bajo nivel, dando
como resultado una infeccin crnica.
Gentica viral
Algunos virus tienen una alta proporcin de mntantes, al ser pasados en el
laboratorio en ausencia de ningn mutgeno conocido. Estas mutaciones espontneas
se acumulan en el genoma de los virus e introducen la variacin fenotpica que est
sujeta a presiones de seleccin durante la evolucin de un virus. La cuanta de
mutaciones espontneas puede ser tan bajacomo 10" a lo-" por nucIeiidoincorporado
en los genomas de ADN. En los genomas de ARN, la magnitud de las mutaciones es
mucho ms elevada en el orden de lo-' a 10-4por nucletido incorporado. Estas
diferencias se deben a que la replicacin de los genomas de ARN presenta menor
fidelidad que la de los ADN.
Las tcnicas de biologa molecular han permitido el examen ms directo de las
mutaciones espontneas. Por otro lado, ellas tambin permiten introducir easi cualquier
tipo de mutacin en muchos virus.
El primer paso parala mutacin es clonar la secuencia de inters como una molcula
de ADN recombinante; seguidamente, la secuencia clonada se somete a mutagnesis
in vitro. El paso siguiente es introducir la secuenciamutada dentro del genoma viral,
lo cual permite determinar los fenotipos de las mntantes virales. Todo ello es el
Fundamento parala obtencin de vacunas recombinante (un ejemplo es la produccin
de la vacuna cubana contra el virus de la hepatitis B).
Tipos de mutaciones
Existen distintos tipos de mutaciones: mutaciones nulas, donde se inactiva
completamente la funcin de un gen; mutaciones sensibles a la temperatura; mutaciones
sensibles al fro; mutaciones por alteracin de la morfologa de placa; mutaciones de
rango de hospedero; mutaciones que producen mutantes resistentes a drogas y
mutaciones de resistencia de escape a anticuerpos.
Interaccin virus-virus y virus-husped que afecta el fenotipo
Las interacciones entre diferentes virus en infecciones mixtas constituyen el
fundamento para Los anlisis genticos de recombinacin y complementacin. stos
incluyen la mezcla fenotpica, la interferencia, y los defectos entre virus, as como la
integracin y la persistencia entre los virus y la clula husped.
Mezcla fenotipica
Se refiere al proceso mediante el cual una progenie viral mixta contiene protenas
estructurales (cpside o envoltura), derivadas de ambos Wus parentales. Esta mezcla
de genomas y protenas estrncturales resulta en partculas virales, en las cuales las
propiedades fenotpicas del virin no reflejan el potencial fenotpico del geuoma
completo. No obstante, en infeccin subsecuente, la expresin del genoma resulta en
una progenie con genotipo y fenotipo congruentes. Por ello,la mezcla fenotpica es un
fenmeno transitono. Esto ha sido observado en los Enterovirus.
Interferencia
En losvirus animales se han detectado muchos tipos de interferencia; la de ms
inters es la intererencia homloga, la cual ocurre dentro de la clula y es exhibida
slo contra virus homlogos o estrechamente relacionados. Un ejemplo de ello es lo
que ocurre en vims que han sido pasados por el laboratorio de forma seriada y a alta
multiplkidadEn estasituacin, el total de p~' cul as virales permanece relativamente
constante, pero el cultivo de virus infeccioso decae con el incremento del nmero de
pases, lo que parece deberse a que existe una interferencia con el crecimiento de la
porcin infecciosa de la poblacin viral. El examen de las poblaciones de virus
hterferentes ha puesto de manifiesto que una elevada proporcin de los genomas
virales contiene deleciones. Se ha propuesto que las mutantes de delecin interfieren
con el crecimiento del virus completo, ya que compiten de manera efectiva con el
aparato de replicacin.
Los virus defectivos tienen genomas que carecen de funcin adecuada en uno o
ms de los genes esenciales, requeridos para la replicacin viral antnnma. Los virus
Mecanismos de la t ransfomci 6n celular por virus
Los virus tumorales median cambios en el comportamiento de la clula, con ayuda
de un volumen limitado de informacin gentica. El proceso se efecta por 2 patrones
generales:
1. El virus tumoral introduce un gen transformador nuevo a la clula.
2. El virus induce o altera la expresin de un gen celular preexistente. En uno u otro
caso, el resultado es que la clula pierde el control de la regulacin normal de los
procesos de crecimiento.
La induccin de la transformacin oncognica es el resultado de la funcin de 2
tipos diferentes de genes celulares y sus productos: oncogenes y genes supresores de
tumor. Los oncogenes codifican componentes de seal de transduccin celular y su
activacin provoca una seal de crecimiento; ste es el proceso que ocurre en el caso
de los Retrovinis. En contraste, los genes supresores de hunor codifican para reguladores
negativos del crecimiento celular, particularmente del ciclo celular, y su inactivacin
elimina los controles de atenuacin. Las actividades oncognicas ms frecuentes de
los virus tumorales de ADN funcionan mediante los genes supresores tumorales.
La activacin de los oncogenes celulares puede ocurrir por las diferentes formas
de los eventos de mutagnesis, incluyendo, adems de la intervencin viral, mutaciones
previrales, traslocacin cromosmica y amplificacin. Mediante las tcnicas de
transfeccin de ADN se han identificado numerosos genes que pueden conferir
propiedades oncognicas a las clulas receptoras. Algunos de stos, estrechamente
ligados a los oncogenes, han sido identificados en los Retrovirns. No obstante, la
funcin normal de todos estos genes est relacionada con el control del crecimiento
celular, lo que proporciona una evidencia de su potencial oncognico.
La inactivacin gentica de los genes supresores de tumores desempea una funcin
determinante en la aparicin del cncer humano. La inacvaciu inducida por virus y
otros mecanismos en los supresores tumorales tiene el mismo efecto neto, como ha sido
comprobado en carcinomas cervicales; por ello, el estudio de los eventos que siguen a
la inactivacin por protenas virales, ha sido y continuar siendo un reto importante
para el estudio del cncer humano.
Los virus que inducen tumores pueden ser de ADN (como los Poliomavirus,
Herpesvirus y PVH) o de ARN (como los Retrovirus). La replicacin de los Retrovirus
oncoguicos no es citocida y por ello la transformacin oncognica puede ocurrir
coexistiendo con la produccin de una progenie viral infecciosa; sin embargo, la
produccin de partculas infecciosas no es un requisito de oncognesis. En el caso de
los virus tumorales ADN, la sntesis de la progenie infecciosa s est ligada a la muerte
celular y, por tanto, la transformacin oncognica slo puede ocurrir si el ciclo de vida
del virus resulta abortado.
Los priones son partculas protenicas pequeas que carecen de cidos nucleicos
detectables, pero son trasmisibles entre las especies seleccionadas, donde inducen una
enfermedad neurolgica fatal, las encefalitis espongiformes. Las fracciones
microsomales de material de cerebro infectado con priones contienen numerosos
microsomas, en los cuales -cuando son sometidos a protelisis limitada- se observan
pariculas de 11 nm de dimetro y 165 nm delongitud,lisas, y deforma esfrica. Estas
esferas estn compuestas principalmente de una protena designada como la isoforma
scrapiede la protena prin, o PrP' . Un proceso postranscripcional, no esclarecido
an, genera PrP" aparr de la isoforma normal de la protena PrF. Ambas isofonnas
son codificadas por una copia sencilla de un gen cromosomal del husped.
La multiplicacin e infedividad del prin incluye la conversin postranscripcional
de molfulai dePrlr a molculm de PrPr ; se presume que estas ltimas se combinan
con las molculas codificadas por las protenas del husped, PrP', y producen un
incremento de nuevas molculas PrP'.
Se ha demostrado que los priones son los causantes de diversas afecciones, entre
las que pueden mencionarse las encefalitis espongiformes bovina y felina, y el scrapie
de las ovejas; tambin estn asociados a infecciones humanas como el agente Kuru,
enfermedad de Creuizfelt-Jacob, el sndrome de Gerstmam-Strussler-Seheinker, y en
el insomnio f a mi l i fatal. La trasmisin de estas enfermedades incluye el consumo de
alimentos que contengan tejidos infectados; la enfermedad de KUN se piensa que es el
resultado del consumo de tejido cerebral durante rituales de canibalismo.
Los priones resisten la inactivacin por nucleasas, luz ultravioleta, tratamientos
con psoralenos, cationes divalentes, hidroxilamina, formaldehdo, altas tempetaturas
o proteasas. Su infectividad puede verse disminuida si se les somete a la accin
prolongada con proteasas o por el tratamiento con nrea, ebullicin con detergentes,
lcalis (pH> 10) y autoclave a 132 "C por ms de 2 h, entre otros.
Es frecuente que se hagan distinciones entre los vim que infectan clulas eucariotas
y los que infectan clulas procariotas; entre estos ltimos se encuentran los fagos o
hacterifagos. Gran parte dela comprensin del mecanismo deinfeccin delos virus y
muchos de los conceptos fundamentales de la biologa molecular, han surgido de la
investigacin de los fagos.
Los fagos estn constituidos por un cido nucleico, rodeado por una cubierta de
protena. Excepcionalmente, algunos fagos tambin contienen Ipidos. Muchos fagos
contienen ADN de doble cadena, otros poseen ARN monocatenario y algunos, ADN de
cadena simple. Muchos fagos contienen estructuras especializadas, que se adhieren a
receptores de la superficie celular e inyectan el cido nucleico hacia la clula hospedera
(Fig. 78.8).
Los fagos, sobre la base de su propagacin, pueden dividirse en:
1. I:ago\ lticns. Producen niimeruvw copi~s de cllot iiiism~~s ! . al hairrlodc\lm!.cn la
c6ltil~ hu6sprd (un ejemplo di, este tipo es el f;igu 'T-liso de I;scl~rrirhiu coli).
2. Fagos moderados. Tienen la propiedad de entrar a un estado no Ec o de profago,
en el que la replicacin de su cido nucleico est ligada a la replicacin del ADN de
Placa de la base
la clula husped. Las bacterias que portan estos fagos se denominan lisognicas,
debido a que una determinada seal fisiolgica puede desencadenar un ciclo Itico
del virus y cansar la muerte de la clula hospedera, as como la liberacin de
~ i ~ . 78.8. ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ t ~ ~ i i > , , del
numerosas copias delfago (un ejemplo defago moderado es elfago h de ESchenchia fago T4 donde pueden apreciarse
col1l.
sus estructuras fundamentales: ea.
beqa, cuello, vaina y placa de la
base.
El ADN de doble cadena de numerosos fagos titicos es lineal, y la primera etapa en
su replicacin consiste en la formacin de un ADN circular. Este proceso depende de la
existencia de extremos cohesivos, con secuencias complementarias de bases
nitrogenadas, que se unen por una ligasa y se forma el enlace fosfodister 3 - 5 ,
originndose un ADN circular, el cual puede replicarse de manera semejante a otros
ADN circulares. La escisin del ADN circular produce de nuevo ADN Lineal, que se
empaquefa dentro de la envoltura protenica y as se origina la progenie de nuevos
fagos. A la recombinacin gentica de las bacterias mediada por fagos se le denomina
transdnccin, y puede ser generalizada o especializada.
Resumen
Los virus son los agentes infdosos ms pequeos que se conocen en la
setualidad. F d n constituidas por una sola elase de dado nndeico, ADN 6 ARN;
nna eabierta pmte(nica, que se denomina &@de y por fuera de la misma una
membrana lipdica o envoltnra.
Los virus son parsitos intracelnlares obligados, ya que requieren de la
maquinaria gentica de la elnla husped para poder sintetizar pus macmmoLculas
@cas, requeridas para la pmduecin de la progenie viral.
Existen una serie de propiedades Ww, qumicas y biolgicas que son las que
permiten clasicar a los viras en familias.
Los principales tipos de simera de las parti'& virales son la cbica, la
helicoidal y la compleja Todos las virns estao eompuestm por protenas, cuya
hincin principal es facilitar la transferencia del dcido nudeico Wal de una clula
husped a otra; ellas pueden ser estrncturales y no estruetnralea; otro de los
componentes es el dcido nndeico viral, el cual eodiea la iniormacin gentica
necesaria para la replicacin del viras; las Ipidos, as como los carbohidratos
viralfs, forman parte de la envoltura de esios agentes.
Los viras 5610 se replican en las elulas vivas; los eventos esenciales son la
adhesin, la penetracin y prdida de la cubierta, la mulplieaciu virsl, el
ensamhwe y la maduraau viral, y la beraein de estos de la &da husped.
Todas estm eventos van a variar entre las diferentes familias virales. Entre las
viras ARN existen los de polaridad positiva y los de polaridad negativa, ayas
estrategias de replicacin son distintas.
En el hnbped Meetado los virns pueden comportarse de diferentes formas;
generalmente causan una infeeein aguda, pero tambin pueden establecer una
inieeein persistente por largo tiempo,la cuai, a su vez, puede ser latente o crnica.
nimhin existen las Meccioues lenias, que son producidas por priones.
En ocasiones, los virns pueden pmdudr nna transiormacin oucognica de la
clula husped. La induccin de esta transformacin se debe a la accin de algunos
virus sobre los oucogenes y geues supmr es de tumor.
Ejercicios
1. Qu son los virus? ~Cal es su composicin?
2. ~Cales son los tipos de simetraviral? Cite ejemplos de cada uno.
3. Cules son las funciones de las protenas virales? Mencione algn ejemplo.
4. Explique las diferencias entre la infeccin productiva, la abortiva y la latente.
5. Mencione las caractersticas que diferencian a los virus con genoma ARN positivo
de los ARN nepativo.
-
6. Cuntos tipos de mutaciones virales existen? Nmbrelas.
7. Mencione los diferentes tipos de interaccin virus-virus y virus-clula. Explique
una de ellas.
8. Qu funcin pueden tener los virus en la transformacin oncognica? Mencione
3 virus oncognicos.
9. Explique qu es un prin y mencione ejemplos de enfermedades producidas por
estos agentes.
10. Qu esun fago? Cmo se clasifican?