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Rev Cubana Aliment Nutr 1999;13(2):123-8

CeaIra e |avesI|at|aaes e faerla 8a|ar
8aaI|aa e Caaa
00NP08|0|0 8|000|N|0k Y fVkl0k0|0 0f lk 0kl|0k0 P801f|0k
0f lk 8|0Nk8k k010180I|0k 0f +04-) 87/)415
hem/s/te Jese/s Me///s 0esrsJe.
1
Ms//s MsJs/sss 0e/stsss ls//s/ss.
2
4ss/ 4/ms/s/ss 4/tse
3
, //sst/,
hs/sssJst sts//e
3
8f80Nf
Se estudiaron la composicin bioqumica y las caractersticas del perfil aminoacdico de la
microalga Chlorella vulgaris, cultivada en rgimen autotrfico, y se evalu adems la
calidad de su protena mediante mtodos qumicos. Los resultados evidenciaron que la
biomasa de esta especie microalgal, dado su elevado contenido de protena bruta y verda-
dera, superior al 40 y 30 %, respectivamente, unido a una composicin balanceada y
niveles aceptables de cidos nucleicos, constituye una fuente alternativa de posible utiliza-
cin como suplemento nutricional. El patrn de aminocidos mostr una distribucin bien
equilibrada, que incluy todos los aminocidos esenciales, en tanto la fuente proteica pre-
sent un cmputo corregido de 0,64, donde incidieron la digestibilidad de la biomasa, con
un valor de 75,9 %, y el contenido relativamente bajo de aminocidos sulfurados.
Descriptores DeCS: CHLORELLA/qumica; BIOMASA; SUPLEMENTOS DIETETI-
COS.
1
L|teat|aa ea B|aalm|ta. Asp|raaIe a |avesI|aar.
2
L|teat|aa ea alm|ta. |avesI|aara Areaa.
3
L|teat|aa ea alm|ta. Asp|raaIe a |avesI|aar.
Las microalgas representan una fuen-
te protenica con posibles aplicaciones en
la nutricin humana y como complemento
de piensos animales, debido bsicamente
a sus elevados contenidos proteicos, po-
tenciados por el hecho de poseer un buen
balance de aminocidos y bajos valores de
cidos nucleicos en comparacin con otras
fuentes de protena unicelular.
1
Aunque las investigaciones sobre la uti-
lizacin de las microalgas en la alimenta-
cin parecen ser un tema relativamente
reciente, en realidad su consumo por los
habitantes de determinadas zonas data de
tiempos inmemoriales;
2
sin embargo, los
primeros ensayos con Chlorella en la dieta
humana fueron realizados en la dcada de
los 60, unido a la ejecucin de estudios
124
adicionales demostrativos de que
Scenedesmus era una excelente fuente de
protenas para el hombre. Estas evidencias
motivaron a los nutricionistas a continuar
investigando las posibilidades de empleo
de la biomasa obtenida a partir de cultivos
masivos de microalgas en la formulacin
de tabletas, extractos, hidrolizados y otros
productos dietticos.
3
Al tomar en consideracin el inters
actual en nuestro pas por el desarrollo de
nuevos suplementos nutricionales y la ex-
periencia del Centro de Investigaciones de
Energa Solar en el cultivo intensivo de
diferentes especies de microalgas, se deci-
di estudiar en el presente trabajo la com-
posicin bioqumica general y las caracte-
rsticas del perfil aminoacdico de la pro-
tena de Chlorella vulgaris, cultivada en
rgimen autotrfico, y evaluar preliminar-
mente su calidad mediante mtodos qu-
micos.
Nf10008
Obtencin y tratamiento de la biomasa.
La biomasa de Chlorella vulgaris se obtu-
vo a partir de un cultivo autotrfico
monoalgal, desarrollado a cielo abierto en
una instalacin experimental, tipo pelcula
descendente de 500 m
2
, en el Centro de
Investigaciones de Energa Solar. La cre-
ma obtenida despus de la centrifugacin
de la suspensin algal fue sometida a un
proceso de despigmentacin con etanol,
luego de lo cual se procedi a la disrupcin
celular de la crema resultante en un moli-
no de bolas (Dynomill KDL), con un tiem-
po de retencin de 3 min.
Para su conservacin, la biomasa fue
secada por aspersin en un secador spray
(Niro Atomyzer) y el polvo de color verde
claro qued almacenado en recipientes pls-
ticos hasta su utilizacin.
Caracterizacin bioqumica de la
biomasa de Chlorella vulgaris. Para el
anlisis bioqumico de la biomasa se to-
maron muestras, las que fueron caracteri-
zadas en relacin con: prdidas por dese-
cacin, nitrgeno total, protena bruta
(micro-Kjeldahl, empleando 6,25 como
factor de conversin para la estimacin del
contenido proteico), fibra cruda y cenizas,
segn los procederes de la Association of
Official Analytical Chemists (AOAC).
4
Las protenas verdaderas se cuantifi-
caron por el mtodo de Lowry y otros
5
y
los carbohidratos por el de fenol-sulfri-
co, segn Dubois y otros.
6
El contenido de
lpidos en la biomasa se evalu como acon-
seja Kocher,
7
luego de extraer los compues-
tos de bajo peso molecular con cido
perclrico 0,2 N en bao de hielo.
Los cidos nucleicos totales fueron de-
terminados espectrofotomtricamente en la
regin ultravioleta mediante el mtodo de
Rut,
8
previa extraccin con cido perclrico
0,5 M. Todos los anlisis se realizaron por
triplicado.
Composicin aminoacdica. La com-
posicin de aminocidos se precis en un
analizador automtico (Alpha Plus, mode-
lo 4151, LKB), despus de la hidrlisis de
las muestras con HC1 5,7 N a 110 C du-
rante 24 h.
9
La cuantificacin de triptfano
se hizo mediante espectrofotometra UV de
la cuarta derivada, segn Fletouris y otros.
10
Evaluacin de la calidad proteica. La
digestibilidad de la protena microalgal fue
evaluada mediante la simulacin in vitro del
sistema enzimtico tripsina-quimotripsina-
-peptidasa, a partir de los valores de pH de
las suspensiones proteicas, registrados
exactamente a los 10 min de iniciada la
digestin enzimtica, segn Hsu y
otros.
11
El cmputo qumico se obtuvo de com-
parar el perfil de aminocidos esenciales
de la protena microalgal, corregido en
funcin de su digestibilidad (PDCAAS),
con los requerimientos de aminocidos
esenciales (mg/g de protena bruta) esta-
blecidos por FAO/OMS para edades fluc-
125
tuantes entre 2-5 aos. La seleccin de este
patrn de demandas se justifica por pre-
sentar las mayores exigencias, con excep-
cin de menores de 2 aos.
12
El ndice modificado de aminocidos
esenciales (MEAA) se calcul mediante el
procedimiento descrito por Oser,
13
segn
las modificaciones de Mitchell.
14
8f80l1k008
En la tabla 1 se muestran los compo-
nentes principales de la biomasa de Chlorella
vulgaris, tratada previamente con etanol,
cuyo contenido proteico result superior al
40 y 30 % en trminos de protenas bruta y
verdadera, respectivamente, seguidas
cuantitativamente por los carbohidratos.
Tambin se seala la presencia de cenizas,
fibra cruda y cidos nucleicos como elemen-
tos minoritarios (22,79 %), as como con-
centraciones de lpidos inferiores al 1 %.
La digestibilidad in vitro de la biomasa
de Chlorella vulgaris tuvo un valor prome-
TABLA 1. lemses/t/es //ee/m/ts /7/ Js /s //emsss Js l//e/s//s
re/s//s
CampaaeaIes ParteaIaje
Per|as par esetat|aa 7,18
h|Iraeaa IaIa| 7,13
PraIelaa araIa 44,5
PraIelaa veraera 32,25
Caraa||raIas 1,
||ara traa 8,2
Llp|as ,29
Cea|tas 8,9
At|as aat|e|tas IaIa|es 5,9
dio de 75,9 %, relativamente inferior al
alcanzado por la casena (93,4 %).
La tabla 2 registra la composicin
aminoacdica de Chlorella vulgaris en com-
paracin con la protena de referencia de la
Organizacin de las Naciones Unidas para
la Agricultura y Alimentacin (FAO)
15
y otras
protenas de microalgas y alimentos conven-
cionales.
16
El patrn de aminocidos evidenci
en general una distribucin bien equilibrada,
con un ndice de aminocidos esenciales de
82,13 y un valor del PDCAAS de 0,64.
TABLA 2. lemses/t/es sm/sest/J/ts //1 / Js /s s/ets/ss Js l//e/s//s re/s//s ss temss/st/es tes s/ sst/es /40 , s/ets/sss Js
m/t/es/ss , s//msstes tesrsst/ess/ss
l. re/s//s PaIraa |AD StsssJssmes Paeva eaIera Tr|a
||e 4,82 4, 3, 5,8 3,8
Lea 1,78 7, 7,3 9, ,4
Lys 7,7 5,5 5, ,7 2,7
NeI 1,55 3,5 (NeI-Cysl 1,5 3, 1,
P|e ,2 , (P|e-Tyrl 4,8 5,3 4,
T|r 5, 4, 5,1 5,3 2,9
Va| 7,8 5, , 7,2 4,3
Trp 1,1 1, 1,7
Tyr 3,2 3,2 4,3 3,2
A|a 7,18 9, 3,4
Ar 7,97 7,1 ,4 4,3
Asp 1,39 8,4 1,7 5,
Cys ,5 , 2,1 2,1
|a 11, 1,7 12,3 27,7
|y 5,5 7,1 3,8 3,8
P|s 2,4 2,1 2, 2,1
Pra 3,88 3,9 4,3 1,1
8er 3,5 3,8 7,7 4,8
126
0|8008|0
Las concentraciones de protenas bru-
ta y verdadera detectadas en nuestro estu-
dio revelaron una calidad razonablemente
buena en contraste con otras fuentes
protenicas reconocidas; asimismo, los
carbohidratos presentes (16,00 %) suelen
formar parte del material de reserva y
desempean una importante funcin en
la digestibilidad de la biomasa total de
microalgas.
Los niveles de lpidos, inferiores al
1 %, son una consecuencia lgica de la ex-
traccin de muchos de los compuestos
lipoflicos de la biomasa con etanol. Este
tratamiento se realiz para atenuar la co-
loracin verde intensa de la biomasa, con
la consiguiente mejora de las propiedades
organolpticas e incremento de la
aceptabilidad.
Las cenizas representaron una fraccin
considerable del peso seco, que result
comparable con los valores informados para
otras especies dulceacucolas y por debajo
de los existentes en las especies marinas.
16
Los cidos nucleicos devienen el ni-
co componente intrnseco de relevancia
toxicolgica y una de las mayores limita-
ciones para el uso de este tipo de biomasa,
al constituir una fuente no despreciable de
purinas, que en su metabolismo producen
cido rico.
17
Las altas concentraciones de
cidos nucleicos son tpicas de todas las
protenas unicelulares; en Chlorella
vulgaris, el contenido total de stos (RNA
+ DNA) present un valor de 5,69 %,
comprendido en el intervalo notificado para
las algas unicelulares e inferior al de bac-
terias y levaduras.
El contenido de 8,20 % de fibra cru-
da refleja la fraccin de materiales deriva-
dos de la pared celular. Las protenas
microalgales (a excepcin de las cia-
nobacterias) brindan pobres resultados si
se utilizan como clulas intactas en la ali-
mentacin de animales monogstricos y
seres humanos, por lo cual se desarrollan
diferentes mtodos mecnicos, enzimticos
y qumicos para degradar las clulas y au-
mentar as la disponibilidad nutritiva de
estas protenas.
En nuestro estudio, la digestibilidad in
vitro present un valor de 75,9 %, que
cumple con las especificaciones de cali-
dad establecidas por el Ministerio de Sa-
lud Pblica para las tabletas de Spirulina.
18
La composicin aminoacdica de
Chlorella vulgaris fue comparable con la
protena de referencia de la FAO, excepto
por los bajos contenidos de los aminocidos
sulfurados (Met + Cys), fenmeno muy
comn en otros microorganismos. En cam-
bio, present niveles de lisina superiores
al patrn FAO y similares al huevo entero;
aminocido este que es el limitante en
muchos cereales, por lo que tal microalga
constituye una fuente apropiada para me-
jorar la calidad de dichos alimentos, en
funcin de su composicin de aminocidos.
En la literatura existen referencias so-
bre las propiedades hipocolesterolmicas de
la microalga Chlorella vulgaris. Se ha de-
mostrado que la relacin Lys/Arg influye
significativamente sobre el metabolismo del
colesterol en las ratas: una relacin Lys/Arg
de 1,0 se asocia a una disminucin de los
niveles de colesterol en suero, hgado y aor-
ta y a un incremento de la conversin
oxidativa del colesterol en cidos biliares,
en comparacin con un valor de 2,0.
19
Mien-
tras menor sea esta relacin, mayor ser la
reduccin de la concentracin de colesterol
plasmtico. La protena de Chlorella vulgaris
present una relacin Lys/Arg de 0,97; ele-
mento que conjuntamente con otros factores
podra explicar sus acciones moduladoras
sobre el metabolismo del colesterol.
La determinacin del ndice modifi-
cado de aminocidos esenciales (MEAA)
127
es un procedimiento que brinda resultados
muy prximos a los valores obtenidos en
los ensayos biolgicos de alimentacin. El
ndice en Chlorella vulgaris (82,13), aun-
que fue inferior al de la casena (92,24), no
mostr diferencias significativas con respecto
al de la microalga marina Dunaliella
tertiolecta (81,00) y la cianobacteria
Spirulina (85,22) y present un valor supe-
rior al de Scenedesmus (70,72).
16
La razn de eficiencia proteica (PER)
ha sido reconocida tradicionalmente como
el mtodo preferencial de evaluacin de la
calidad proteica, sin embargo, sobreestima
el valor de ciertas protenas animales, a la
vez que subvalora a las vegetales. En este
sentido, la Regional Federation of Food and
Drug Administration (FDA) recomend la
sustitucin de la razn de eficiencia proteica
y la introduccin, con propsitos regu-
latorios, del cmputo de aminocidos co-
rregido en funcin de la digestibilidad
proteica (PDCAAS) para la evaluacin
nutricional de productos destinados al con-
sumo humano.
20
El PDCAAS de la biomasa autrotrfica
de Chlorella vulgaris tuvo un valor de 0,64,
en el cual incidieron fundamentalmente la
digestibilidad de la fuente proteica y el
dficit de los aminocidos sulfurados (pri-
mer limitante). Es oportuno sealar que la
aplicacin de este mtodo para la evalua-
cin de la calidad proteica de las microalgas
resulta novedosa y que no existe en la bi-
bliografa consultada referencia alguna so-
bre su uso con anterioridad. Hasta el pre-
sente, la mayor parte de las evaluaciones
realizadas emplean la razn de eficiencia
proteica en experimentos de alimentacin
a corto plazo en ratas recin destetadas.
1
Los resultados del presente trabajo sugie-
ren la utilizacin de la biomasa autotrfica de
Chlorella vulgaris como materia prima en la
formulacin de suplementos dietticos y pre-
parados bioestimulantes, en virtud de su com-
posicin bioqumica y calidad proteica.
80NNk8Y
The biochemical composition and the characteristics of amino acid profile of microalgae Chlorella vulgaris,
cultured under autotrophic conditions, were studied and, additionally, protein quality of these microalgae was
assessed by chemical methods. The results revealed that this microalga biomass, given its high gross and real
protein content over 40 % and 30 % respectively, together with balanced composition, acceptable levels of nuclear
acids, constitutes an alternative source that may be used as nutritional supplement. The amino acid distribution
pattern was well?balanced including all essential amino acids whereas protein source showed a corrected index of
0.64 due to the effects of the biomass digestibility value of 75.9 % and the relatively low sulfided amino acids.
Subject headings: CHLORELLA/chemistry; BIOMASS; DIETARY SUPPLEMENTS.
8fIf8f0|k8 8|8l|008kI|0k8
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Lic. Humberto Joaqun Marris Quevedo. Agramonte No. 58 entre Veteranos y Correoso, El Cristo, Santiago de
Cuba, CP 94310, Cuba.