TRANSPORTE DE MOLCULAS ENTRE EL NCLEO Y EL CITOSOL.

Existe un trfico bidireccional continuo entre el citosol y el ncleo. La gran cantidad de

proteinas que actan en el ncleo -que incluye las histonas, las DNA y RNA polimerasas, las
protefnas reguladoras de genes y las protenas de procesamiento del RNA-son importadas de
forma selectiva desde el citosol, donde son fabricadas, hasta el compartimiento nuclear. Al
mismo tiempo, los tRNA y los mRNA son sintetizados en el compartimiento nuclear y luego son
exportados al citosol. Al igual que el proceso de importacin, el proceso de exportacin
tambin es selectivo; por ejemplo, los mRNA slo son exportados si han sido modificados de
forma correcta en el ncleo por reacciones de procesamiento de RNA. En algunos casos el
proceso de transporte es complejo. Por ejemplo, las protenas ribosomales son fabricadas en
el citosol e importadas al ncleo, donde se ensamblan con RNA ribosomales recin fabricados
formando particulas. Estas particulas son exportadas de nuevo al citosol donde se ensamblan
formando los ribosomas. Cada uno de estos pasos implica un transporte selectivo a travs de
la envoltura nuclear.

Los complejos de poro nuclear atraviesan la envoltura nuclear.
En todas las clulas eucariotas, la envoltura nuclear est perforada por elaboradas estructuras
conocidas como complejos de poro nuclear (NPC: nuclear pore complexes). En las clulas
animales cada NPC tiene un peso molecular estimado de 125 millones de dalton y est
formado por unas 30 protenas diferentes o nucleoproteinas.
Cada NPC contiene uno o ms pasos acuosos a travs de los cuales pueden difundir
pasivamente pequeas molculas solubles en agua.
Dado que muchas protenas celulares son demasiado grandes para difundir de forma pasiva
travs de los NPC, el compartimiento nuclear y el citosol pueden mantener diferentes
conjuntos de proteinas. Por ejemplo, los ribosomas citoplasmticos maduros tienen un
diametro de unos 30 nm, por lo que no pueden difundir a travs de los NPC de forma que la
sntesis proteica quedar confinada en el citosol. Pero cmo importa el ncleo las grandes
molculas que necesita, como las DNA y las RNA polimerasas cuyas subunidades tienen pesos
moleculares de entre 100.000 y 200.000 dallon? Como explicaremos ms adelante, stas y
muchas otras molculas de protena y de RNA se unen de forma especfica a protenas
receptoras que los transportan activamente travs de los NPC

Las protenas nucleares son dirigidas hacia el ncleo mediante seales de localizacin
nuclear.
Cuando las proteinas son experimentalmente extradas del ncleo y reintroducidas de nuevo
en el citosol, incluso las ms grandes se vuelven a acumular en el ncleo de una forma
eficiente.
Ciertas seales de clasificacin denominadas seales de localizacin nuclear son las
responsables de este proceso de importacin activo al ncleo. En muchas protenas las seales
consisten en una o dos secuencias cortas, ricas en los aminocidos cargados positivamente
lisina y arginina (vase Tabla 12-3, p. 702), con una secuencia precisa diferente de la de otras
protenas nucleares.
La interaccin inicial de una protena nuclear con el complejo de poro nuclear requiere una o
ms protenas citoslicas que se unen a las seales de localizacin nuclear y colaboran
dirigiendo a la pro tena nuclear hacia el complejo de poro, donde parece que se une a las
fibrillas que se proyectan a partir del anillo del complejo. Entonces, la protena nuclear se
desplaza hacia el centro del complejo de poro, donde es activamente transportada a travs de
la envoltura nuclear mediante un proceso que requiere la hidrlisis de ATP (Figura 12-16).El
transporte de macromolculas a travs de los NPC se diferencia del transporte de
troteinas a travs de las membranas de otros orgnulos en que ocurre a travs de un gran
poro acuoso en lugar de a travs de un transportador proteico que atraviesa una o ms
bicapas lipidicas. Por esta razn, a travs de los NPC se pueden transportar las proteinas
nucleares plegadas por completo y las subunidades de los ribosomas son transportadas hacia
fuera del nucleo en forma de partfculas ensambladas. Por el contrario, para poder ser
transportadas a otros orgnulos, las protenas tienen que estar desplegadas en su totalidad.

La exportacin del ncleo funciona como la importacin, pero en el sentido opuesto.
La exportacin nuclear de grandes molculas, tales como las subunidades ribosomales y las
molculas de RNA, se realiza a travs de los NPC, y tambin depende de un sistema selectivo
de transporte. El sistema de transporte se basa en la presencia de seales de exportacin
nuclear en las molculas a exportar, as( como en la existencia de receptores de exportacin
nuclear complementarios. Estos receptores se unen a las seales de exportacin y a las
protenas del NPC, guiando su carga a travs del NPC hasta el citosol.

La GTPasa Ran impone una direccionalidad en el transporte a travs de los NPC
La importacin de las protenas nucleares a travs de los NPC concentra determinadas
protenas
en el ncleo y aumenta asf el orden en la clula. La cluJa obtiene la energa necesaria
para este proceso a travs de hldrlisis de GTP por la GTPasa monomrica Ran. Ran se
encuentra
tanto en el citosol como en el ncleo, y es necesaria para la importacin y para la exponacin
nuclear.
Como otras GfJ>-asas, la protena Ran es un interruptor molecular que existe en dos estados
conformacionales, dependiendo de sj est u.njda a GDP o a GTP (se describe en el
CapftuJo 3). Dos prorefnas reguladoras especficas de Ran disparan la transformacin entre
estos dos estados: una protelna citoslica activad ora de GTPasa (GAP: GTPase activating
protein), que induce la hidrUsis de GTP convirtiendo Ran-GTP en Ran-GDP. y un factor
nuclear intercambiador de guanina (GEF: guanine exchange factor) que activa el intercambio
de GDP por GTP convirtiendo Ran-GDP en Ran-GTP. Dado que Ran-GAP se localiza en el
citosol y Ran-GEF en el ncleo, el citosol contiene sobre todo Ran-GDP y el ncleo Ran-GTP
(Figura 12-14).
Este gradiente de las dos formas conformacionales de Ran dirige el transporte nuclear
en la direccin apropiada (Figura 12-15). Por ejemplo, la unin de los receptores de
importacin
a las repeticiones FG en la cara citoslica del NPC, se produce tanto cuando el receptor
est unido a su carga como cuando est libre. Los receptores de importacin saltan tle
una repeticin FG a otra. Si alcanzan la cara nuclear del complejo de poro, Ran-GTP se une
~ si llegan cargados con alguna molcula, la unin de Ran-GTP hace que los
receptohnponaci6n
liberen su carga (Figura 12-16). Dado que en el citosol Ran-GDP no se
a lo~ receptores cargados, la descarga nicamente se produce en la cara nuclear de los
1 le t'sta forma, la localizacin nuclear de Ran-GTP da lugar a la direccionalidad.
Una ve~. que se libera la carga en el ncleo, el receptor de importacin vacfo unido a
1 rP es devuelto al cirosol a travs del compleo de poro. All, Ran-GAP acriva a Ran-GTP
hdrolice el Gn) al que est unido, transfom1ndose en Ran-GDP: emonces. el
receplmportacin
est de nuevo l.isto para otro ciclo de imponacin nuclear.
1~1 t'xportacin nuclear se realiza mediante un mecanismo similar, excepto que
GTI' en el ncleo favorece la unin de la carga a los receptores de exportacin en lugar
,ociarlos de ella. Cuando el receptor de exponacin se desplaza a tra\'s del poro hacia
,ol, su Ran-GTP encuentra una Ran-GAP e hidroliza su GTP. Como resultado de ello, el
tor de exportacin libera su carga y la Ran-GDP en el cito~ol. Los receptores de expor\~
lcos son devueltos entonces al ncleo y completan el ciclo (vase la Figura 12-15).