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Explicacin de las prueba bioqumicas realizadas



Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo



MacConkey
Agar

Determinar si
la bacteria
fermenta
Lactosa (solo
crecen Gram
negativas) y
su pH.

Inocular en
forma rayada.

Incubar por
24 horas a
37C.




Ninguno

Presencia de
colonias =
gram
negativo

Colonias
color rojo
fermentacin
de lactosa.

No hubo
crecimiento
(no es gram
negativa)

Colonias
incoloras o no
crece.


Eosyn -
Methilene
Blue Agar

Determinar si
la bacteria
fermenta
Lactosa.
Inocular en
forma rayada.

Incubar por
24 horas a
37C.



Ninguno


Colonias
color rosa o
verde
metlico.


Colonias
incoloras o no
crece.



Agar de
Almidn



Determinar la
presencia de
la enzima
amilasa en la
bacteria.



Inocular en
lnea recta.
Incubar por
48 horas a
37C.



Luego de
incubar se
aadi
solucin de
Lugol a la
placa. (Yodo)




Se observa
halo (zona de
hidrlisis
alrededor de
las colonias).


No se observa
halo; todo el
medio cambia
a color azul
negruzco.

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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo





Tributirin


Determinar la
capacidad de
la bacteria
para
hidrolizar
lpidos por
medio de la
enzima lipasa
o esterasa.


Inocular en
lnea recta
con la anilla.
Incubar por
48 horas a
37C.





Ninguno


Zona clara
(liplisis)
alrededor de
las colonias,
se ve
transparente.

No se observa
halo
alrededor de
las colonias.



Agar
Nutritivo
Placa
TSA

Catalasa
Distinguir si
la bacteria
tiene las
enzimas
catalasa.

Inocular en
lnea recta
(hacer dos
lneas).
Incubar por
24 horas a
37C.

Luego de
incubar se le
aadi
perxido de
hidrogeno.


Produccin
de burbujas
de O
2
.


No hay
produccin de
burbujas.


Agar
Nutritivo
Placa
TSA


Oxidasa
Distinguir si
la bacteria
tiene las
enzimas
oxidasa.
Inocular en
lnea recta
(hacer dos
lneas).
Incubar por
24 horas a
37C.
Luego de
incubar se
aadi el
reactivo
visualizador
P- aminodi-
metilalanina.




Se torna
negro.



No cambia de
color.

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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo



Caldo
Nutritivo





Observar
patrn de
crecimiento.


Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.
Incubar por
24 horas a
37C.



N/A




N/A



N/A


Gelatina
Nutriente


Determinar la
produccin
de la
exoenzima
gelatinasa en
la Bacteria.

Inocular en
estocada.
Incubar por
48 horas a
37C.

Luego de la
incubacin,
colocar el
tubo en la
nevera por 30
minutos.


Se observa
licuefaccin.



Se solidifica.




Simmons
Citrate Agar



Determinar el
uso de citrato
como nica
fuente de
carbono y el
valor de pH.

Inocular en
estocada y
rayar la
pendiente al
mismo
tiempo.
Incubar por
48 horas a
37C.






Ninguno



Se observa
crecimiento y
coloracin
azul.




No se observa
cambio.
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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo



Caldo de
Urea







Determinar si
la bacteria
contiene la
enzima
Ureasa



Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.
Incubar por
48 horas a
37C.



Ninguno



Color rojo
intenso.


No ocurre
cambio; color
rojo o
amarillo.




Rojo Fenol
Carbohidrato
Dextrosa










Observar si la
bacteria lleva
cabo
fermentacin
cida del
carbohidrato
dextrosa y/
la produccin
de gas en el
proceso.



Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.
Incubar por
24 horas a
37C.





Ninguno



Color
amarillo con
o sin
produccin de
gas.





Color rojo
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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo







Rojo Fenol
Carbohidrato
Sacarosa

Observar si la
bacteria lleva
cabo
fermentacin
cida del
carbohidrato
sacarosa y/
la produccin
de gas en el
proceso.



Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.
Incubar por
24 horas a
37C.






Ninguno



Color
amarillo con
o sin
produccin de
gas.





Color rojo




Rojo Fenol
Carbohidrato
Lactosa

Observar si la
bacteria lleva
cabo
fermentacin
cida del
carbohidrato
lactosa y/ la
produccin de
gas en el
proceso.



Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.

Incubar por
24 horas a
37C.






Ninguno




Color
amarillo con
o sin
produccin de
gas.






Color rojo


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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo


Agar de Tres
Azcares y
Hierro (TSIA)



Observar el
patrn de
fermentacin
de la bacteria.

Inocular en
estocada y
rayar la
pendiente.
Incubar por
24 horas a
37C.



Ninguno


Slant rojo y el
fondo
amarillo =
solo ocurri
fermentacin
de glucosa.

Slant y fondo
amarillo =
ocurri
fermentacin
de lactosa y/o
sacarosa.

Slant y fondo
rojo (o no
ocurre algn
cambio) = no
hubo
fermentacin
de
carbohidratos.





N/A
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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo






Sulfide Indol
Motility
Media (SIM)

Determinar si
la bacteria es
mvil, si hay
produccin de
H
2
S a partir
de
aminocidos
azufrados y si
puede
degradar el
Triptfano a
indol a travs
de
triptofanasa.




Inocular en
estocada.
Incubar por
48 horas a
37C.




Para
determinar si
se degrada
triptfano
aadir 10
gotas del
reactivo de
Kovac.


Movilidad
Crecimiento
se esparce
fuera de la
lnea de
inoculacin.
Produccin
de H
2
S
Precipitado
negro.
Produccin
de indol
Formacin de
una capa rojo
cereza.

Movilidad
Crecimiento
se limita a la
lnea de
inoculacin.

Produccin
de H
2
S
No se forma
el precipitado
Produccin
de indol
No se forma
capa.



Caldo
MR-VP

Prueba de
Rojo de
Metilo.
Determinar si
la bacteria
produce
cidos
estables por
fermentacin
de la glucosa.

Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.

Incubar por
48 horas a
37C.




Luego de
incubar aadir
5 gotas de
rojo metilo.





Se torna rojo.




Amarillo.

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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo







Caldo
MR-VP





Prueba de
Voges-
Proskauer
Determinar si
la bacteria
puede
producir
acetilmetil-
carbinol por
fermentacin
de la glucosa





Inocular
usando aguja
de inocular en
anillo.

Incubar por
48 horas a
37C.



Luego de
incubar se
aadieron 10
gotas del
reactivo de
Barrit A y se
agite.
Despus se
aadieron 10
gotas del
reactivo de
Barrit B y
agitando cada
3 o 4 minutos
por 15
minutos.








Se torna rosa
intenso.







No desarrolla
el color rosa
intenso







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Medio de
Cultivo

Prueba y/o
Propsito

Mtodo de
Inocular
e Incubar

Tratamiento

Resultado
Positivo


Resultado
Negativo






Agar de
Nitrato





Prueba de
Reduccin de
Nitrato
Determinar si
la bacteria
puede reducir
nitratos a
nitritos






Inocular en
estocada.

Incubar por
48 horas a
37C.


Luego de
incubar se le
aadieron 5
gotas del
reactivo A
(cido
sulfanlico) y
5 gotas del
reactivo B (
-naftilamina).
En caso de
que la prueba
diera negativa
se le aada
polvo de zinc.




Color rojo
con los
reactivos A y
B.
Incolora al
aadir polvo
de zinc.



Se queda
igual al aadir
los reactivos
A y B. Al
aadir polvo
de zinc se
torna rojo.

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