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BIOQUMICA SANGUNEA VETERINARIA

INTRODUCCIN
Aplicacin de los anlisis clnicos veterinarios en el diagnstico
rea de Qumica sangunea tiene gran importancia (ofrece informacin
adicional al veterinario para realizar un diagnstico ms preciso) ,
Existe un gran nmero de pruebas bioqumicas especialmente tiles en los
estudios clnicos
El mayor crecimiento y el mayor reto en patologa clnica sern del rea de la
qumica.
Cada ao aumenta el nmero de enzimas mensurables que sabemos se alteran en
las enfermedades que pueden ser aplicados en el diagnstico.
Valores fuera de lo normal de otras enzimas sricas tambin son de valor en el
diagnstico y determinacin del grado de dao en el hgado, pncreas, huesos y
otros rganos y sistemas.
El Na y K sricos, jynto con alteraciones del equilibrio acido-base pueden ser
determinados con precisin y rapidez suficiente para influir en el tratamiento de
un paciente.
DETERMINACIONES BIOQUMICAS
Determinaciones bioqumicas se realizan utilizando suero como principal muestra
Este se hemolisa menos que el plasma
No contiene anticoagulantes los cuales pueden interferir en las determinaciones que se
vayan hacer o pueden extraer el agua de las "clulas sanguneas originando la dilucin
de los constituyentes.
- Sin embargo, el plasma puede ser utilizado en las detenninaciones de urea y glucosa
porque no existe una diferencia muy marcada en la concentracin de estos metabolitos
en los hemates y en el plasma
En nuestro laboratorio se realizan con mayor frecuencia y con nes diagnsticos las
siguientes
detemiinaciones:
Sustratos.
Bilirrubina (total, directa e indirecta), glucosa, protenas (totales, albminas, globulinas,
fbringeno), urea y creatinina.
Lipidos.
Colesterol y triglicridos.
Electrolitos.
Sodio, potasio, cloro, calcio, fsforo, hierro, magnesio.
Actividad enzimtica.
AST (GOT) (Transaminasa-glutmico-oxalactica); Aspartato-amino-transferasa.
ALT (GPT), (Transaminasa-glutmico-pirvica); Alann-amino-transferasa.
LDH Lactato deshidrogenasa.
HBDH (alfa-HBDH isoenzima 1 de la LDH); alfa-hidroxibutirato-deshidrogenasa.
SDH Deshidrogenasa sorbitol.
GLDH Glutamato deshidrogenasa.
AP (FA) Fosfatasa alcalina.
GGT (gama-GT) (gama-glutamil-transpeptidasa); gama-glutamil-transferasa
TR.4NSPORTE D E L A MUESTRA
e El cuidado es importante (debe ser correctamente rotulada y consen'ada para las pruebas
bioqumicas)
Pai-a el transporte )' conser\'acin del suero se debe esperar la retraccin del cogulo
(cairtidad de suero no ser nunca mayor de un 40% del volumen original de sangre) la
muestra debe ser refrigerada a 4C para su transporte
Para el transporte y consen'acin del plasma no hay necesidad de esperar que la sangre se
sedimente, despus de obtenida debe ser refrigerada para su envo al laboratorio
El suero y el plasma no deben ser consers'ados ms de 6 horas en refrigeracin sin ser
separados de los dems componentes sanguneos, porque esto trae como consecuencia
alteracin en los diferentes metabolitos de la sangre a determinar y por lo tanto errores en
los resultados del laboratorio.
Para la conser'acin de la muestra se emplean anticoagtlantes apropiados para algunas
determinaciones, como por ejemplo: se utiliza fluoruro para la glucosa o heparina para la
insulina, etc. ' '
La transferencia de muestras de una persona a otra o de un lugar a otro no debe hacerse
descuidadamente, la obtencin, transporte y anlisis de una muestra de sangre siempre
debe registrarse en forma ocial
El incumplimiento de los procedimientos formales de registro descalifica la muestra para
todo tratamiento ulterior
MAIVEJO D E L A MUESTRA
En el laboratorio dependiendo de la muestra (suero o plasma) s procede de la siguiente manera:
PLASMA
El tubo que contiene sangre ms anticoagulante se debe centrifijgar a 1500 - 2000 r.p.m.
durante 10-15 minutos para separar las clulas del plasma
El plasma se puede ejrtraer entonces empleando una pipeta Pasteur o un cuenta gotas, y se
traiisfere a un tubo de almacenamiento ~^ " ^
Se debe tener mucho cuidado para no alterar la capa celular podran alterar las
determinaciones bioqumicas
SUERO
El tubo que contiene sangre sin anticoagulante se debe centrifuga]- a 1500 r.p.m. durante
10 minutos
Luego con una pipeta Pasteur se debe separar el suero o sobrenadante y transferir a un
tubo de almacenamiento para la realizacin de las diferentes pruebas
La separacin del suero del cogulo es generalmente mucho mas sencilla, el suero se
puede verter o aspirai' fcilmente con pipeta y transferir a un tubo para almacenamiento
CONSERVACION D E L A MUESTRA
El suero o plasma, pueden conservarse a temperatura ambiente (20-30C) durante un da
sin que se deterioren, refrigerada (4C) durante 4 das; cogelado (-15 -20C) durante
^-ina semana o indefinidamente
Partculannente, debe evitarse hacer congelaciones y descongelaciones repetidas pai'a que
las enzimas no pierdan su actividad inicial
La concentracin de glucosa disminuye por el ayuno o por el ejercicio prolongado, por
el exceso de insulina ya sea por un insulinoma o por dosis altas de insulina como terapia;
en toxemia, inanicin y lesiones hepticas; tambin disminuye en hipoadrenocorticalismo
debido a una reduccin en la secrecin de las glndulas adrenales o a una produccin
reducida de ACTH
Material de investigacin: sangre total plasma o suero.
Las concentraciones de glucosa en sangre total dependen del hematocrito, en la
proporcin aproximada del 20% de este, que condiciona tambin los valores en plasma y
suero
La hemolisis no tiene influencia en la medicin de la glucosa
En sangre total, a temperatura ambiente, disminuye la glucosa en cerca de un 10% por
hora
En plasma o suero no hay gluclisis apreciable
Con iahibidores de la gluclisis (fluoruro sdico) se hnpide este fenmeno, en sangre
total, durante 24 horas
Valoracin.
Los anlisis de glucosa en sangre se realizan ante todo por:
Sospecha de alteraciones en el metabolismo de los glcidos
Vigilancia de pacientes diabticos
Confirmar las liipoglucemias de los recin nacidos (especialmente lechones)
Causa de hipo-e hiperglucemias ,r , \ ^
Hiperglucemias
Diabetes mellitus (rai-a en rumiantes)
Pancreatitis
*Sndrome de Cushiiig
Estrs
Aplicacin de glucocorticoides, ACTH,
Xilazina, etc. .
Hipoglucemias
Aplicacin excesiva de insulina
Malabsorci n-mal adi gesti n
Eclampsia
***Acetonem!a (cetosis)
Iiisulinota r erd;-^ \^dxiu Li/^i^c
* Sntomas producidos por un exceso de cortisol de la corteza adrenal ejm: secrecin excesiva de
ACTH (nipfisis), por falta del factor liberador de corticotropina del liipotlamo o algn tumor.
T-sznz- de la corteza adrenal. Por yatrogenia (administracin prolongada o excesiva de
;/_:j;omcoides)
" Sndrome que presenta convulsiones y como, se produce poco despus del paito en las
he~ oras jvenes
Acumulo de cuerpos cetnicos en sangre y tejidos (acetona, Ac acetoactico y Ac Bhiiroxibutrico)
COLESTEROL TOTAL
1.- hipoteroidismo
2. -Diabetes mellitus - n-.^^-u^^L- c( co'^-'^-'f;
3 . -Pancreatitis e-j,H.i (rot(& p.tc^ c^^c<. i-
4. - Enfermedad heptica oul^ucJo'.v ^-^"^iC^^
a.- Enfennedad hepatocelular.
r.- Obstraccin biliar.
: . - Erfermedad Renal.
,,-1? a.-nefrosis c -^Kv-^^an^rtio'- S.
,. ,. b.- nefritis
ft f-'.-' t-.^,o^J^^ 6.- Hipoadrenocorticismo.
a.- Administracin de corticosteroides o
ACTH. /l/ y ' - " ' Mi^Uiil^ue'y, ho /y pJ-diZv A At6A'>'^
7.-Gestacin. '^^(o-u^-^ U'^'^k^/i^^h'c-'^
Disminuido.
- EErertiroidismo: en ocasiones. .
1 - E'ie^i bajas en grasas saturadas.
E L E C T R O L I T O S /
Muchas e importantes funciones del organismo dependen del contenido en electrolitos
celulares e intersticiales
De ellos, el sodio (Na), potasio (K), calcio (Ca), fsforo (P), cloro (Cl), magnesio (Mg) e
hierro (Fe) en sangre, juegan un papel importante en el diagnstico de laboratorio.
Mientras Na y K solamente pueden determinarse por fotometra de llama o
potenciometra directa, con lo que su anlisis queda reser\'ado al "gran laboratorio"
Lo que tambin reza para la determinacin de electrolitos en general por
espectrofotometra de absorcin atmica, la valoracin de Ca, P (total, inorgnico y
fosfolpidos), Mg y Fe puede hacerse mediante fotocolorimetra, con kits comerciales.
CALCIO
Con la mayora de los test disponibles solamente, se"~valora el calcio total en suero
sanguneo - _ . " /
Su forma biolgicamente activa, la fraccin ionizada o calcio inico, solamente puede
eiirse con aparatos muy caros (electrodos selectivos de iones)
Ac-jalmente existen kits comerciales que nos permite

IV.- Distribucin de enzimas en los tejidos.
Enzima Fuentes principales
Enzimas de alta especificidad
Transaminasa glutmica pirvica Hgado (aniniales pequeos)
Arginasa Hgado
Sorbitol deshidrogenasa Hgado (caballo), rion
Aldolasa Msculo
Omitina carbamil transferasa Hgado
Lipasa. Pncreas, rtiucosa intestinal

Enzimas de especificad moderada
Transaminasa glutmica oxaloactica
Creatin fosfoquinasa
Deshidrogenada isocitrica
Hgado, corazn, msculo esqueltico.
Msculo esqueltico, corazn, cerebro.
Hgado, corazn.
Enzimas de baja especificidad
Deshidrogenada lctica.
Fosfatasa alcalina.
Todos los tejidos.
Hgado, hueso, mucosa intestinal, placenta, rion.
i'
V.- Localizacin intracelular,
A.- Importancia.
1. Las enzimas solubles del citoplasma (hialoplasma o sobrenadante) se libera mas
probablemente por aumento en la permeabilidad de la membrana, que las enzimas
mitocondriales, las cuales pueden sugerir procesos inflamatorios reversibles.
2. En los procesos necrticos, la destruccin de grandes cantidades de clulas producir la
aparicin de enzimas mitocondriales, mi ero somticas y nucleares. ,
B.- Localizacin de las enzimas en las estructuras intracelulares. ci^'\vut'^^'
1.- Las enzimas se encuentran principalmente en el sobrenadante o citoplasma son:
z..- Transaminasa glutmica pirvica.
'\).- Deshidrogenada lctica,
'c- Aldolasa.
2.- Las enzimas que se encuentran principalmente en las mitocondrias son:
a. - Transaminasa glutmica oxaloactica: se encuentra en el citoplasma y en las mitocondrias
en
formas diferentes.
b. - Deshidrogenasa glutmica.
c - Transferasa omitina carbamil.
d. - Arginasa.
e. - Fosfatasa acida.
3.- Las enzimas que se encuentran principalmente en los microsomas son:
a. -Colinesterasa. ^ <i\<^^o Arsuiar Y T^'-'-'^""'
b. - Fosfatasa alcalina
^1.- Eliminacin de las enzimas de la circulacin.
A.- La variacin en los ritmos de depuracin tiene una gran importancia en el uso de las
pruebas enzimticas para el diagnstico, ya que debe considerarse el factor tiempo en la
evaluacin del proceso patolgico.
1.- Despus del dao heptico, la arginasa disminuye ms rpidamente del suero que la
transaminasa. Cuando los niveles de arginasa y transaniinasa se mantienen elevados, la necrosis
heptica contina. Cuando las clulas hepticas se encuentran en reparacin, se debe apreciar
una declinacin rpida de los niveles de arginasa, seguida de una declinacin ms gradual en la
actividad de la transaminasa.
B- No se debe mucho sobre el destino de las enzimas.
1. Un mecanismo posible es la inactivacin intravascular por medio de la inliibicin de
molculas pequeas, de lo cual hay evidencia.
a. La protena sale del torrente sanguneo, no simplemente inactivada, ya que los tejidos tienen
mecanismos estructurales para la degradacin de las protenas.
2. Es posible que el sistema reticuloendotelial participe en la eliminacin enzimtica.
3. Solo pequeas cantidades de enzimas sricas se eliminan a travs de la orina, excepto en la
enfermedad renal.
a. La pjncipal excepcin es la amilasa, la cual se filtra fcilmente en los riones por su peso
molecular relativainente bajo.
4. La excrecin por la bilis es un factor mnimo para la mayora de las enznas.
5. Es probable que las enznas sricas encuentren su va en el intestino delgado, donde pueden
ser digeridas, y los aminocidos que la constituyen regresen a la reserva de aminocidos.
VIL-Isoenzimas.
"Cualquiera de las diversas formas de una enzima que catalizan la misma reaccin, pero
difieren en cuanto a su velocidad de reaccin, su inhibicin ante diferentes sustancias, su
mmovilidad, electroforticq y sus propiedades inmunolgicas. Muchas enzimas, sobre todo la
,fosfatasa alcalina, lactato deshidrogenasa y creatin cinasa poseen isoenzimas de gran
importancia clnica''
A.- Muchas enzimas existen en una variedad de formas moleculares; se conoce como
isoenzimas que muestran una especificidad de sustrato similar pero diferente en sus
propiedades fsicas y qumicas.
B.- La sepai-acin por electroforesis es el mtodo que se usa generalmente con fines clnicos.
C- La determinacin de isoenzimas permite el reconocimiento mas preciso del tejido de origen
que cuando solo se hacen determinaciones de la actividad enzimtica total en suero.
Para,estudios clnicos, la sepai-acin de isoenzimas y su reconocimiento que se solicitan con
mayor frecuencia son:
1. -Deshidrogenasa lctica.
2. - Folfatasa alcalina.
3. - Creatin fosfoquinasa.
D.- Fuentes de las fracciones de las isoenzimas.
1.- Deshidrogenasa lctica: la mayora de las especies animales.
a.- DHL-1, DHL-2: Corazn, eritrocitos, rin, cerebro.
b.- DHL- 3: pulmn, pncreas, suprarrenales, bazo, t i m o , tiroides, ganglios linfticos,
leucocitos,
c - DHL- 4 , DHL- 5 : msculo esqueltico, hgado.
2. - Fosfatasa alcalina: hgado, hueso, intestino.
3. - C r e a t in fosfoquinasa: miocardio, msculo esqueltico, cerebro.
A p a r e c e n modificaciones de l a a c t i v i d a d en s u e r o sanguneo c o n
m o t i v o de los siguientes
procesos patolgicos.
1.- Transtornos de la permeabihdad de la membrana celular (aumento de las enzimas
citoplasmticas) o necrosis celular (aumento de las enzimas mitocondriales). Ejm:
hepatitis, intoxicaciones, distrofia muscular.
2. - Incremento en la formacin de enzimas. Ejm: aumento de FA en la hiperplasia de
osteoblastos.
3. - Disminucin en la formacin de enzimas. Ejm: Cada de la CHE srica en la cirrosis
heptica.
4. - Dificultad en la eliminacin de las enzimas excretoras. Ejm: aumento de la F A
srica en las retenciones biliares, o de la amilasa en la obstruccin del conducto
pancretico.
N o m e n c l a t u r a a b r e v i a d a de l a s enzimas.

International Union o f Biochemistry
Tambin se encuentra en la hteratur^ las siglas ya abandonadas A S A T y A L A T .
Valoracin.
En los anlisis de actividad enzimtica, un aumento sobre los valores fisiolgicos
significa siempre una lesin celular considerable.
Como ninguna de las enzimas intracelulares son realmente rgano especficas (y en
absoluto especficas de una enfermedad determinada), se necesita siempre, para el
diagnstico de laboratorio, establecer una "muestra enzimtica".

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