Las fosfatasas cidas son enzimas ampliamente distribuidas en la naturaleza y tienen la
propiedad de hidrolizar fosfomonosteres a pH 5,0, liberando como productos de la reaccin un alcohol y fosfato inorgnico. Cuando se compara los valores de kcat/Km de las fosfatasas de hgado, de bovino, alpaca y porcino, nos permite sugerir que estas enzimas tienen elevada afinidad por el sustrato p-nitrofenil fosfato. Los productos que se liberan durante la catlisis por fosfatasa cida, muestran que el fenol o el p-nitrofenol se comportan como inhibidores de tipo no competitivo, mientras que el fosfato inorgnico muestra una inhibicin de tipo competitiva. Para evidenciar la probable formacin de un complejo covalente en la secuencia cataltica, se utiliz diversos nuclefilos ms eficientes que el agua, tales como metanol, etanol y glicerol. Las modificaciones que produjeron en los valores Km, Vmax y los productos liberados en la reaccin sugieren la formacin de un complejo enzima-fosfato. El pH afecta los valores de Km y Vmax de las fosfatasas cidas, un anlisis del comportamiento de estas enzimas en un rango de pH comprendido entre 3,8 y 6,8 sugieren que en el sitio activo existe un residuo de aminocido con un valor pKa de 6,0.
Diapo 2 La fosfatasa cida cataliza en medio cido la hidrlisis del -naftil fosfato. La -naftol producida reacciona con una sal de diazonio (Fast Red TR) formando un cromgeno. La actividad cataltica se determina a partir de la velocidad de formacin de dicho cromgeno medido a 405 nm1. El pentanodiol acelera la reaccin al actuar como aceptor del fosfato. El tartrato se utiliza como inhibidor especfico de la denominada fraccin prosttica
Mtodo Espectrofotometra Sustrato: paranitrofenilfosfato Mediante electroforesis se han identificado 5 isoenzimas de la fosfatasa cida. La fosfatasa cida especfica de la prstata es la isoenzima 2, nica presente en el semen al igual que la hallada en el suero de pacientes con carcinoma de prstata. La sntesis de sta isoenzima es andrgeno dependiente. Gracias a esto, la fosfatasa cida es de un valor diagnstico fundamental para el carcinoma metastsico de la prstata
Diapo 3 Se correlaciona clnicamente ya que ayuda al diagnstico del carcinoma prosttico metastatizado y monitorizacin del tratamiento de la osteoporosis Niveles elevados de fosfatasas cidas se encuentra en alteraciones prostticas como hipertrofia, prostatitis o carcinoma, en enfermedades hematolgicas, seas (enfermedad de Paget) o hepticas. Niveles bajos de fosfatasa cida no tiene significado clnico. El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos y de laboratorio El hallazgo de cifras elevadas de fosfatasa acida suele darse como sinnimo de carcinoma de prstata metastatizada (ya que la fosfatasa acida originada en la prstata es vertida en el sano directamente al semen y la orina y no a la sangre), pero tambin los ndulos prostticos malignos, incluso algunos casos de hipertrofia prosttica benigna o de prostatitis, pueden hacerlo aunque con valores ms discretos