Bioindicadores Expo

UNIVERSIDAD NACIONAL SANTIAGO ANTNEZ DE MAYOLO
1

LA LOMBRIZ DE TIERRA
(Eisenia Foetida), COMO
BIOINDICADOR DE LA CALIDAD
DE SUELOS, Y TOXICIDAD
FRENTE A LOS PLAGUICIDAS.

Integrantes:
Flores Cadillo Alex.
Quispe Arenas David.
Sifuentes..Sharon
Mallqui Rosales Bartolome.

Docente:
Dr. Castillo Picn Fernando

Curso:
Bioindicadores
Universidad Nacional Santiago Antnez De Mayolo
FACULTAD DE CIENCIAS DEL AMBIENTE
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE
INGENIERIA AMBIENTAL
Huaraz, 25 deAgosto de 2014

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INTRODUCCIN:
Las lombrices de tierra son un grupo fundamental de la fauna del suelo, ya que
constituyen gran parte de la biomasa animal edfica en varios ecosistemas, tanto en zonas
templadas como tropicales. Asimismo, desempean un papel ecolgico primordial por su
influencia en la descomposicin de la materia orgnica, el desarrollo de la estructura del
suelo y el ciclo de los nutrientes.

Durante su proceso de alimentacin, succionan o chupan la tierra de las galeras que
excavan y digieren de ella las partculas vegetales y animales en descomposicin. De esta
manera, transforman los residuos orgnicos en humus, el cual devuelven al suelo al
expulsarlo por el ano junto con la tierra.

La contaminacin del suelo con compuestos orgnicos, metales pesados, plaguicidas y
lluvia cida puede afectar a las poblaciones de lombrices. Estos contaminantes se
acumulan en sus tejidos y pueden constituir un problema para el gran nmero de animales
que se alimentan de ellas, debido a su potencial de biomagnificacin.


3

1. FORMULACIN DEL PROBLEMA:
En la actualidad se estar usando plaguicidas para el control de las enfermedades, plagas,
vectores, etc. esta situacin obliga a conocer cules son las funciones de las lombrices en
el suelo, y cul es su reaccin frente a los plaguicidas.

Cmo influye la lombriz de tierra en la calidad de los suelos, y cul es la toxicidad de los
plaguicidas?
2. OBJETIVOS:
2.1. Identificar las principales funciones de la lombriz en el suelo.
2.2. Evaluar el comportamiento de las lombrices frente a los plaguicidas.
2.3. Determinar el plaguicida de mayor toxicidad frente a la fauna edfica del suelo.
2.4. Determinar la concentracin letal 50 (CL50) del plaguicida ms toxico.

3. JUSTIFICACIN:
Con el acelerado aumento de la densidad poblacional humana, la agricultura se ha visto
afectado por el uso de plaguicidas con la finalidad de aumentar la produccin,
degradndose as cada vez ms la calidad de un suelo y la perdida de fauna edfica y el
aumento de enfermedades relacionadas al uso de estos.

En la actualidad, la problemtica de la contaminacin del suelo se est incrementando a la
par con el crecimiento del desarrollo industrial y tecnolgico no sustentable. Los
diferentes contaminantes del suelo, han sido reconocidos como peligrosos para la salud
del hombre y la biota, adems, han sido incluidos en la Lista de contaminantes
prioritarios por agencias de control ambiental de todo el mundo, dados los impactos
negativos que pueden generarse incluso cuando stos se encuentren en concentraciones
muy bajas.

La presencia de elevadas concentraciones de estos contaminantes en la atmosfera, as
como la falta de tratamiento de los mismos, traen como consecuencia enfermedades al
ser humano, la falta suelo libre de contaminantes, agricultura baja, prdida de especies,
dao a los ecosistemas, problemticas sociales y un sin fin de efectos negativos.

4. MBITO DE ESTUDIO.
No se dispuso un mbito determinado, pero es necesario mencionar que el suelo para la
prueba fue muestreado del distrito de Shilla, siendo ms especfico de un jardn, el cual en
este estudio le llamamos suelo de jardn.

El mbito de estudio no influye en este estudio ya que lo que se est evaluando son las
lombrices de tierra, y no la calidad de suelo y las caractersticas fisicoqumicas de las
mismas.


4

5. MARCO TERICO.

5.1. Antecedentes:
En la bibliografa existente hay muchas pruebas realizadas con las lombrices, pero este
estudio o investigacin se ha basado en el siguiente libro MTODOS ECO
TOXICOLGICOS PARA LA EVALUACIN DE SUELOS, de ello empleamos los
procedimientos, y la metodologa en general.

5.2. Marco terico conceptual:
5.2.1. Lombriz de tierra (Eiseniafoetida):
Lombriz extraordinariamente prolifera, muy vivaz, trabajadora, resistente al
estrs, tal vez como ninguna otra, y que se ha logrado hacer trabajar en
densidades de 50.000 a 60.000 lombrices por metro cuadrado, cifra que
ninguna lombriz salvaje est en condiciones de resistir. Vive en cautiverio sin
moverse de su lecho, madura sexualmente entre el segundo y tercer mes de
vida, depositando cada 7 a 10 das una cpsula con un contenido promedio de
10 huevos, pudiendo llegar a 20, los que despus de 14 a 21 das de
incubacin eclosionan, originando lombrices en condiciones de moverse y
nutrirse de inmediato.
Los excrementos de la lombriz contienen:
5 veces ms nitrgeno
7 veces ms fsforo
5 veces ms potasio
2 veces ms calcio

5.2.2. Influencia de la lombriz en la calidad de los suelos:
Las lombrices de tierra desempean un importante papel en la ecologa del
suelo. Mientras excavan para hacer sus tneles, ingieren partculas de suelo y
digieren cualquier resto orgnico. Con ello remueven, airean y enriquecen el
suelo, contribuyendo a que se mantenga frtil al hacer ascender fsforo y
potasio del subsuelo y al expulsar sus propios desechos nitrogenados.

Debido a su respiracin por intercambio de gases a travs de la piel, poseen
una piel que es muy delgada y que debe permanecer hmeda, lo que impone
limitaciones. No pueden vivir en la superficie expuestas a condiciones clidas o
secas durante mucho tiempo porque su piel se secara. Tampoco pueden ser
muy gruesas, porque cuanto ms grueso es su cuerpo, ms lejos estn los
rganos de la piel; esto determina su forma alargada y delgada. Respiran
perfectamente bajo el agua.


5
Las lombrices de tierra son tambin una fuente de alimento para muchos
animales y constituyen el principal alimento de los topos y las musaraas.
Rehyen la luz del da, pero con frecuencia salen a la superficie durante la
noche para alimentarse y expulsar su detritus.

5.2.2.1. Propiedades fsicas del suelo

El efecto de las lombrices sobre la estructura del suelo resulta de la accin
neta de su alimentacin y la actividad de las madrigueras. Ellas ingieren
partculas del suelo y materia orgnica, la mezcla de los desechos de estas
dos fracciones constituyen las excretas o lo que se llama coprolitos. Una
vez expulsado el suelo en forma de coprolitos puede ser erosionado
debido al impacto de la lluvia o puede formar agregados slidos estables a
travs de una variedad de mecanismos de estabilizacin.

Las lombrices generalmente promueven la aireacin y porosidad a travs
de la formacin de madrigueras y al incrementar la proporcin de grandes
agregados en el suelo, y sus efectos son especialmente importantes en
suelos con estructura pobre. Al aumentar la tasa de infiltracin de agua,
las lombrices pueden reducir la perdida de suelo. Estas tambin pueden
incrementar la erosin al remover la cobertura protectora de los residuos
de la superficie, incrementan el sellado de la capa superficial y
depositando excretas o coprolitos en la superficie, los cuales pueden ser
arrastrados durante lluvias fuertes. Algunas especies tropicales
disminuyen la infiltracin al producir coprolitos que pueden compactar el
suelo. A pesar de todo esto, comnmente a las lombrices siempre se les
ha reconocido como mejoradoras de la estructura del suelo.
Plaguicidas:
Concentracion letal 50:
5.3. Definicin de trminos:

6. HIPTESIS:
La lombriz de tierra influye de manera directa en la calidad de los suelos, aumentando y/o
manteniendo la humedad, la porosidad, estructura y la cantidad de materia orgnica.
Frente a los pesticidas e insecticidas acta de la siguiente manera primero disminuye la
densidad poblacional por intoxicacin, segundo la migracin a otras reas donde no haya
presencia de compuestos txicos.

7. METODOLOGA:
7.1. PRUEBA CON SUELO DE JARDN Y SUELO ARTIFICIAL (COMPOST):
7.1.1. Fundamento:

6
Este bioensayo es una prueba aguda, con exposicin de 14 das, en la cual se
mide la mortalidad a travs de diversos compuestos de plaguicida. El cual el
ultimo dia se contabilizara la cantidad de lombrices para responder a lo
siguiente Qu % de lombrices murieron en cada uno de los frascos?, con la
respuesta a esta interrogante se determinara cul de los plaguicidas es ms
toxico para las lombrices.

7.1.2. Frascos:
7.1.2.1. Control positivo:
Cuatro frascos con suelo de jardn,esto debe de ser muestreado por
recomendacin el mismo dia del inicio de la prueba.
Cada frasco contendr de 1 a 2Kg de suelo de jardn.
7.1.2.2. Control negativo:
Un frasco que contendr compost 1 a 2Kg, debemos tratar de que
este compost no tenga sustancias toxicas.
7.1.3. Procedimientos:
7.1.3.1. Preparacin de los organismos:
La prueba de mortalidad tiene una duracin de 14 das. Antes de iniciar las
pruebas, las lombrices deben vaciar sus intestinos, para lo cual se
depositan en cajas de Petri sobre papel filtro humedecido con agua
desionizada durante 1 hora. Finalmente, son lavadas, secadas y pesadas.
7.1.3.2. Desarrollo de la prueba:
En los frascos de vidrio (cuatro frascos) se depositan de 1 a 2Kg de suelo
problema con una humedad del 45 %. El suelo control y las rplicas deben
mantenerse en las mismas condiciones de humedad y pH. Posteriormente
se depositan 10 lombrices por recipiente, y estos se cubren con la tela
sinttica. La tela evita la prdida de humedad, pero permite que exista
circulacin de aire dentro de los recipientes.

Luego de haber preparado los cinco recipientes se procede a disponer los
nutrientes, para la realizacin de las pruebas, tener en cuenta que luego
de echa los plaguicidas ya no se alimentan a las lombrices.
7.1.3.3. Procedimiento de los plaguicidas:
Una vez transcurrido las 24 horas (tiempo recomendable para la
adaptacin de las lombrices al suelo), se procede a echar el plaguicida a
los recipientes de vidrio (una plaguicida por vidrio).
7.1.3.4. Resumen de las condiciones recomendadas para la prueba aguda con
lombriz detierra:


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Duracin del bioensayo 14 das
Temperatura 22 2 C
Humedad del suelo 45 %
Contenedores de prueba Recipientes de vidrio
Cantidad de compost 1 a 2 Kg
Cantidad total de suelo requerida 4 a 10Kg
Cantidad de suelo requerida por
rplica
1 a 2Kg
Especie de prueba Eiseniafoetida
Edad del organismo al inicio de la
prueba
Ms de 2 meses
Nmero de organismos por rplica 10
Nmero de rplicas 4
Rgimen Sin alimento
Respuesta a medir Supervivencia
Control negativo Compost
Control positivo Suelo de jardn

8. MATERIALES:
Lombriz de tierra:
Compost.
Suelo de jardn.
Plaguicidas:
Coraza (Cymoxanil + Mancozeb): fungicida polvo mojable.

8

Prethor (Clorpirifos + Aditivos): insecticida agrcola.

Beta Baytroide (Beta Cyfluthrina): insecticida agrcola.

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Botrimex (Carbendazim + Aditivos): fungicida agrcola.

Contenedores de prueba: material hecho de vidrio, con una altura de 30cm, largo
de 30cm y ancho de 5cm. Ver la imagen.

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9. PROCEDIMIENTOS:(Cuevas Diaz 2012)
En esta seccin se muestra la preparacin del suelo, compost, y la forma de arreglar la
humedad del suelo.

9.1. Humedad del suelo.
Se corrige la humedad del suelo as como del compost, a una humedad en donde la
lombriz de tierra (Eiseniafoetida) se desarrolle sin problema algn. Mediante la
bibliografa est determinada que la humedad debe de ser al 45%.

La manera de determinar la humedad son muchas, pero en esta ocasin vamos a
aplicar el mtodo que consta de: rociar agua sobre la muestra de suelo, luego
remover; seguimos esta paso hasta que el suelo presente lo siguiente, no debe de
compactarse cuando presionamos con las manos (es decir no debe formar terrones,
de ser de estructura suelta).

9.2. Llenado del frasco:
Luego de haber corregido la humedad procedemos a llenarlos al frasco de vidrio.

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Finalmente tenemos listo los frascos: denominados de la siguiente manera.
Frasco control: este contiene compost, y durante la prueba se aadira agua
destilada.
Muestra 1: contiene suelo de jardin, y durante la prueba se aadira Botrimex.
Muestra 2: contiene suelo de jardin, y durante la prueba se aadira Beta-
baytroide.
Muestra 3:contiene suelo de jardin, y durante la prueba se aadira Prethor.
Muestra 4: contiene suelo de jardin, y durante la prueba se aadira Coraza.

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9.3. Preparacin de lombrices y llenado de los frascos.
Procedemos a preparar las lombrices de tierra, para poder aadirlos a los frascos. Para
ello procedemos de la siguiente manera.
Obtencin de las lombrices: el docente de la asignatura fue quien nos
don las lombrices.
Lavado de lombrices: se lavaron las lombrices, esto para poder descartar
presencia de compuestos txicos que posiblemente presentaran en el
lugar de origen.

Una vez lavadas son llevadas a un recipiente que tenga papel secante,
esto para poder quitarles la humedad, en este mismo frasco se hace
reposar por 2 horas, esto para que la lombriz pueda eliminar sus
desechos y as puedan entrar a los frascos, sin ninguna presencia de
desechos que alteren los resultados de las pruebas.

Seleccin de lombrices:

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Luego de este tiempo, se procede a seleccionar los ms grandes y aquellos
que no presenten lesiones. Esta investigacin centrara en analizar 10
lombrices por cada frasco, en consecuencia usaremos 50 lombrices e total.
Lombrices en los frascos de anlisis:
Una vez seleccionados y contabilizados para cada frasco, el suelo de cada
frasco es vaciado a un recipiente en donde realizaremos la mezcla con las
lombrices.

Uso del papel secante:
Se procede a cubrir la superficie del suelo en cada frasco, esto para evitar
la fuga de las lombrices, as como la perdida de humedad del suelo.


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9.4. Preparacin de los plaguicidas:
La preparacin se dio mediante las caractersticas de cada plaguicida, as como la
informacin proporcionada por la persona quien nos obsequi los plaguicidas. Los
cuales son:
Botrimex 4cucharadas.
Beta-baytroide 2 cucharadas.
Prethor 5cucharadas.
Coraza 10 cucharadas.
Las dosis mencionadas arriba son para 20L de agua, y esto generalmente se usa
aproximadamente en un rea de 100m^2. Para los clculos y dosificacin se us la
siguientes igualdades: 1cucharada=5ml (para lquidos), 10cucharadas=20g (para
polvo). Con esto procedemos a los clculos:

9.5. Clculos:
9.5.1. Calculo base:
Si para 100m^2 se usa 20L, cuanto se usara para un rea de 30*5cm^2?

La cantidad que se debe aadir (de solucin de plaguicida) a cada frasco es:


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Entonces de cada solucin de plaguicida solo se aadi 3ml a cada frasco.
Para mayor facilidad de preparacin y pesado de los plaguicidas, se procedi a
preparar 100ml de solucin de cada plaguicida.

De los 100ml preparados de cada solucin de plaguicida, solo se tomara 3ml
para luego aadirlo a los frascos.

9.5.2. Botrimex: se 4cucharadas en 20L, para una rea de 100m^2.

Se tom 0.1ml de Botrimex, esto se pas en la fiola, esta fiola se enraso en
100ml (luego agitamos para la solucin uniforme), de esta solucin solo 3ml se
aadi a cada frasco.

9.5.3. Beta-baytroide: se 2 cucharadas en 20L, para una rea de 100m^2.


16

Se tom 0.05ml de Beta-baytroide, esto se pas en la fiola, esta fiola se enraso
en 100ml (luego agitamos para la solucin uniforme), de esta solucin solo
3ml se aadi a cada frasco.

9.5.4. Prethor: se 5 cucharadas en 20L, para una rea de 100m^2.

Se tom 0.125ml de Prethor, esto se pas en la fiola, esta fiola se enraso en
100ml (luego agitamos para la solucin uniforme), de esta solucin solo 3ml se
aadi a cada frasco.

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9.5.5. Coraza: se 10 cucharadas en 20L, para una rea de 100m^2.

Se tom 0.05ml de Beta-baytroide, esto se pas en la fiola, esta fiola se enraso
en 100ml (luego agitamos para la solucin uniforme), de esta solucin solo
3ml se aadi a cada frasco.

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9.6. Preparacin de las soluciones:
9.6.1. Enrasado de fiolas:
Una vez calculados la cantidad de plaguicida necesaria para cada fiola, se
procedi a prepararlos:

9.6.2. Agitado y mezclado de las soluciones:
Antes de enrasar se procedi a mezclar el agua y el plaguicida para el
mezclado uniforme (principalmente en caso de la Coraza), luego se enraso y se
agito. Entonces disponemos los 3ml en un vaso de precipitado.
Esto con la finalidad de uniformizar las soluciones:


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9.6.3. Disposicin de las soluciones a los frascos:
Luego de haber preparado las soluciones: se aade a cada frasco, con un
equipo, de la siguiente manera.


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10. RESULTADOS:
En todos los cuadros mencionados, se establece el orden de:
Control: muestra que no contiene ningn contaminante.
Contenedor 1: Botrimex
Contenedor 2: Beta-baytroide
Contenedor 3: Beta-baytroide
Contenedor 4:Coraza.

10.1. Primer anlisis: (Cuevas Diaz 2012)
PRUEBA 1 LOMBRICES
CONTENEDOR CONCENTRACION INICIAL FINAL
Control 0 10 10
1 1 10 10
2 1 10 10
3 1 10 10
4 1 10 10

No encontrndose resultados en la siguiente prueba se procedi a preparar una
solucin con una concentracin de 15 veces el volumen o peso empleado en el primer
anlisis. Pero en la misma cantidad de agua que es de 100ml.

10.2. Segundo anlisis:(Cuevas Diaz 2012)
PRUEBA 1 LOMBRICES
Control 0 20 20
1 15 20 16
2 15 20 20
3 15 20 4
4 15 20 12
En este segundo anlisis se determin que la plaguicida ms toxica es la que est
presente en el contenedor 3.

10.3. Tercer anlisis:(Cuevas Diaz 2012)
PRUEBA 1 LOMBRICES
Control 0 20 20
1 2 20 18
2 4 20 15

21
3 8 20 11
4 12 20 5
Se registr y comprob que la densidad poblacional de las lombrices disminuye a
medida que vamos aumentando la concentracin del contaminante.

10.4. Aplicacin del mtodo Spearman-Karber para calcular la concentracin letal
media (CL50), para este clculo procedemos a trabajar con los datos del tercer
anlisis.(Cuevas Diaz 2012)
Una vez determinado el plaguicida ms toxico, procedemos a calcular su CL50,
tomando en cuenta que el factor de conversin de unidades de concentracin es
0.125.
CALCULOS
CONTENEDOR
CONTROL 1 2 3 4
CONCENTRACION 0 0.25 0.5 1 1.5
LOGARITMO NATURAL
DE LA CONCENTRACION
0 -1.386 -0.693 0.000 0.405
NUMERO DE
LOMBRICES
20 20 20 20 20
NUMERO DE MUERTES 0 2 5 9 15
PROBABILIDAD DE
MUERTE
0 0.1 0.25 0.45 0.75

Luego se establecen intervalos de los logaritmos de las concentraciones y se calcul la
frecuencia relativa de las muertes por la diferencia de probabilidad en dichos casos.
Probabilidad muerte (p muerte).

1
INTERVALO DEL
LOGARITMO NATURAL DE
LA CONCENTRACION
0-0.693 0.693-1.386 1.386-2.097 2.097-2.485

2 FRECUENCIA RELATIVA 2 3 4 6

3
PROMEDIO POR
INTERVALO
-0.693 -1.040 -0.347 0.203
promedio
(u)

2X3 -1.386 -3.119 -1.386 1.216 -1.169

SE SABE QUE USAND ESTE
METODO CL50=E^U
CL50=e^u CL50=e^6.109 0.313


22
Grfico de la concentracin, con respecto a la probabilidad de muerte.
CONCENTRACION
PROBABILIDAD
DE MUERTE
0 0
0.25 0.1
0.5 0.25
1 0.45
1.5 0.75

11. Conclusiones y recomendaciones.
12. Bibliografa.

0
0.5
1
0 0.5 1 1.5 2
P
O
R
C
E
N
T
A
J
E

D
E

M
O
R
T
A
L
U
I
D
A
D

CONCENTRACION
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