Pruebas Rpidas De Laboratorio

En Farmacologa Y Toxicologa.
Ana Mara Restrepo Muoz
Rafael I. Uribe Acevedo
Residentes 1er ao Toxicologa Clnica
Departamento de Farmacologa y Toxicologa
Facultad de Medicina, U. de
Derechos de autor, 2013. Solo para uso educativo, no para uso comercial. Prohibida su distribucin sin autorizacin de la Universidad de Antioquia.
Laboratorio de farmacologa y
toxicologa

Dirigido hacia la identificacin o cuantificacin
de un xenobitico.

Las tcnicas primarias utilizadas son:




Pruebas rpidas
Pruebas espectroqumicas
Inmunoensayos
Tcnicas cromatograficas

Pruebas Rpidas De Laboratorio En Toxicologa Y
Farmacologa
Son los test mas simples.

Consisten en una reaccin rpida de un
xenobitico con un reactivo qumico para
producir un producto generalmente de color.

> frecuente en muestra de orina y o aspirado
gstrico.


Pruebas Rpidas De Laboratorio En Toxicologa Y
Farmacologa
< sensibles y especificidad.

Frecuentemente presentan falsos positivos.

Ocasionalmente falsos negativos.

Rpidas y econmicas

Pruebas Rpidas Organofosforados
En tubo de ensayo servir 1ml de contenido gstrico y
agregar 1 perla de NaOH.

Positivo : Aparicin de color amarillo.

Detecta la presencia del radical paranitrofenol y se
puede acelerar en bao de maria.

No en orina por que su color interfiere.
Pruebas Rpidas Organofosforados
1 ml de contenido gstrico o muestra no biolgica
liquida.

Se le agrega 1 ml de agua.

Solo los organofosforados darn como resultado
una emulsin de color blanco.
Pruebas Rpidas Alcoholes
Los alcoholes son hidrocarburos que contienen un
grupo OH.

El etanol ( C2H5OH )es un liquido transparente
altamente voltil, de olor caracterstico y soluble en
muchos solventes orgnico.

Es el elemento activo de las
bebidas alcohlicas.


Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Reaccin del Dicromato de Potasio






Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de
la escena.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Procedimiento: Agregar 0,5 ml de dicromato de K
a la muestra, calentar en bao mara durante 3
min.


Resultados: Color observado frente al Dicromato
de potasio: verde

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Reaccin de Oxido reduccin alcoholes y aldehidos

Tomar 1 ml de orina + 1 ml de mezcla sulfocromica.

Color verde = Compuesto voltil reductor

Sensibilidad : 50 ppm

No diferencia entre etanol, metanol, acetonas y
aldehdos.
Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Si es Positiva pasa de naranja a Verde

Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Muestras: Orina, contenido estomacal y residuos de la
escena.

Reactivos: Dicromato de potasio (25 g/l) en cido
sulfrico (500 ml/l).






Pruebas Rpidas Alcoholes (Etanol)
Aplicar 50 l se sol. de dicromato de K a una tira de
papel filtro e insertar en el tubo de vidrio que
contiene 1 ml de muestra, cerrarlo y colocarlo en un
bao de agua hirviendo durante 2 minutos.

Si cambia de naranja a verde indica la presencia de
los agentes voltiles reductores como etanol,
acetaldehdo, metanol y paraldehdo.

Sensibilidad: 0,5 g/l.

Pruebas Rpidas Alcoholes (Metanol)
Muestra: 1ml de Sangre total en un tubo de ensayo
con fluoruro de Na.

Agregar 2 ml de Acido tricloroacetico ( TCA) al 5% para precipitar las
protenas.
Filtrar y tomar 1 ml del filtrado.
Agregar 2 gotas de KMnO4, mezclar y esperar 2 minutos.
Agregar la cantidad que tome con la punta de la espatula de bisulfito
de sodio NaHSO3 y mezclar





Pruebas Rpidas Alcoholes (Metanol)
Agregar la cantidad que tome con la punta de la
espatula de acido cromotropico y mezclar

Agregar lentamente y por las paredes del tubo, 20 gotas
de H2SO4 puro

Si es positivo parece un anillo violeta en la interfase
Sensibilidad 10 mg/ 100 ml de sangre

El EDTA o heparina pueden dar falsos positivo
Pruebas Rpida Cianuro

Es una anin monovalente, voltil y se
caracteriza por su olor a almendras amargas.



La intoxicacin es producto de la ingestin de
KCN o NaCN, o de la inhalacin de vapores de
HCN.


Pruebas Rpida Cianuro
Formacin de un complejo azul de ferriferrocianuro
(azul de Prusia) con los iones ferrosos.

Muestras: Contenido estomacal, residuos de la
escena

Reactivos:

Solucin acuosa de hidrxido de sodio

(100 g/l).

Solucin acuosa de sulfato ferroso (100

g/l) recientemente preparada.

Solucin acuosa de cido clorhdrico (100

ml/l
)

Pruebas Rpida Cianuro
Procedimiento:
Diluir 1 ml de la muestra en 2 ml de hidrxido de Na.

Agregar 2 ml de sol. de sulfato ferroso + cido
clorhdrico hasta disolver el precipitado de hidrxido
ferroso.



Positiva: Color Azul, sensibilidad 10 mg/L.

Pruebas Rpida Salicilatos
Grupo de sustancias derivadas del acido saliclico,
con propiedades analgsicas, antipirticas y
antiinflamatorias.


C7H6O3
Pruebas Rpida Salicilatos
Foln-Ciocalteu:
-100 gr de tungstato de Na + 25 gr de molibdato en
800 ml de H2O.
-Agregar 50ml de Ac. fosfrico y 100ml de Ac.
Clorhidrico, dejar en reflujo 10 h.
-Dejar enfriar y agregar 150 Gr de sulfato de litio +
50ml de H2O y 4-6 gotas de bromo y dejar estabilizar
2h.
-Bao de mara 15 , dejar enfriar, filtrar y enrasar con
1 L de H2O
- Mantener a 4C y dura 4 meses.

Pruebas Rpida Salicilatos
Muestras: Orina, contenido estomacal, resto de la
escena.

Agregar la sol. de tricloruro frrico al 5% o el reactvo
de FolnCiocalteu a una alcuota de la muestra.

Positiva: - Azul-violaceo con el Cloruro frrico.
- Azul con el Foln-Ciocalteu

Pruebas Rpida Salicilatos
Muestra : Orina.

En un tubo de ensayo servir 1 ml de orina
Agregar 1 ml del reactivo de trinder y mezclar
Positivo: Aparicin de color violeta.

Las fenotiazinas tambien producen color violeta
pero desaparece inmediatamente
El color debido a los salicilatos desaparece al
adicionarle H2SO4 al 50%

Prueba Rpida Paracetamol
Es un metabolito de la fenacetina, con
propiedades analgsicas.

Fsicamente es un polvo cristalino de color
blanco, inodoro , de sabor amargo.


Prueba Rpida Paracetamol
Reactivos: Cloruro frrico, Folin-Ciocalteu,
Liebermann, Nessler

Liebermann:
-1 gr de nitrito de Na + 10 ml de Ac. Sulfrico se
debe realizar en frio y bajo campana.
Nessler:
-50 gr de cloruro de Hg + 35 gr de ioduro de K en
200 ml de H2O ( En frio )
-50gr de Hidroxido de Na en 50ml de H20 ( En frio )

Prueba Rpida Paracetamol
Muestras: Orina, contenido estomacal, residuos
de la escena.

Agregar la solucin del reactvo a la muestra o a una
solucin etanlica de la muestra.


Positivo si :


Cloruro frrico: azul
Folin-Ciocalteu: azul
Liebermann: violeta
Nessler: marrn (fugaz)
Prueba Rapida Acido Borico
Polvo blanco inodoro o escamas flexibles nacaradas
o translucidas.

Se encuentra como Ac. Borico ( H3BO3 ) o el brax
(tetraborato disodico).

Utilizado como: Insecticida, fungicida, preservante
de madera,
agentes limpiadores y
removedores.
Prueba Rapida Acido Borico
Pesar 50 gramos de la muestra y agregar 5 gotas
de H2SO4 + 5 gotas de metanol y encender una
llama.




Positiva: Coloracin verde en la llama

PRUEBAS RPIDAS.
1. Reactivos.
2. Fenotiazinas.
3. Antidepresivos tricclicos.
4. Betabloqueadores.
5. Cocana.
6. Opio y derivados.
7. Anfetaminas.
8. Marihuana.
9. Paraquat y diaquat.

REACTIVOS
FPN: A 5 ml de solucin acuosa de cloruro frrico (50 g/l)
agregar 45 ml de solucin de cido perclrico (200 g/kg 20%
p/p) y 50 ml de solucin de cido.

Forrest: Mezclar 25 ml de solucin acuosa de dicromato de
potasio (2 g/l), 25 ml de solucin de cido sulfrico (300 ml/l),
25 ml de solucin de cido perclrico (200 g/kg) y 25 ml de
solucin de cido ntrico (500 ml/L).

Nessler: Disolver 50 g de cloruro mercrico y 35 g de ioduro de
potasio en 200 ml de agua, realizar en fro. Disolver 50 g de
hidrxido de sodio en 50 ml de agua, realizar en fro.

REACTIVOS

Reactivo de hipobromito de sodio: Disolver 0,5
ml de bromo elemental cuidadosamente y
enfriando en 5 ml de solucin de hidrxido de
sodio (400 g/l).

Tiocianato de cobalto
Disolver 6 g de nitrato de cobalto y 18 g de
tiocianato de potasio en 100 ml de agua.


REACTIVOS
Liebermann
1 g de nitrito de sodio y 10 ml de cido sulfrico

Mandelin
Disolver 0,5 g de vanadato de amonio en 100 ml cido
sulfrico concentrado (d = 1,86).

Marquis
Mezclar 1 ml de solucin de formaldehdo con 9 ml de
cido sulfrico concentrado.

REACTIVOS
Ninhidrina
Adicionar 0,5 g de ninhidrina a 10 ml de cido clorhdrico y
diluir a 100 ml con acetona.

Simn
Solucin acuosa de carbonato sdico al 20%.
Solucin etanlica de acetaldehdo al 50%.
Solucin acuosa de nitroprusiato de sodio al 1%.

Duquenois
Disolver 2 g de vainillina y 0,3 ml de acetaldehdo en 100 ml de
etanol. Guardar en frasco oscuro.


FENOTIAZINAS
En un tubo de ensayo servir 1 ml de orina.
Agregar lentamente 1 ml de reactivo FPN
ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS

ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS
Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena.
Reactivos FPN; Mandeln; Marquis; Forrest; cido sulfrico;
Lieberman
Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra,
calentar en bao mara durante 3 min.

ANTIDEPRESIVOS TRICCLICOS
Desipramina
El reactivo de Forrest
Imipramina


BETABLOQUEADORESS
ATENOLOL

Muestras: orina, contenido estomacal, resto de la escena.
Reactivos: Liebermann y Nessler
Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en
bao mara durante
3 min.
Resultados: Color observado frente al reactivo de Liebermann:
negro
Nessler: amarillomarrn (ligero)

ALCALOIDES
Son sustancias txicas extradas de las plantas, qumicamente
pueden definirse como sustancias vegetales con nitrgeno
bsico.

PRUEBA DE TANRED
A la sustancia a estudiar, aada 3 gotas de agua si la sustancia
es en polvo.
Agitar y aadir 2 gotas de reactivo tanred.
Un precipitado amarillo lechoso, indica prueba positiva para
alcaloides
COCANA
Metil benzoilecgonina
La cocana es un alcaloide
obtenido de Erythroxylon coca y
otras especies de Erythroxylon, o
por la sntesis de ecgonina.

Los metabolitos principales son la
benzolilecgonina, ecgonina y
metil ester ecgonina.
COCANA
Prueba de Scott Tiocinata de Cobalto

Se adicionan 5 gotas de Tiocianato de Cobalto a la
sustancia sospechosa . Si se torna AZUL
TURQUESA, indica resultado parcialmente positivo.

A la sustancia AZUL se le adiciona una gota de
acido clorhdrico concentrado (HCL), en presencia
de cocana el color azul cambia a ROSADO.

COCANA

A esta solucin ROSA se le adicionan 5 gotas de
Cloroformo, el color AZUL debe reaparecer
nuevamente en la capa lquida inferior para
indicar la presencia de cocana.

El trmino opio se utiliza
para denominar el extracto
obtenido de la planta
papaver somniferum

Opiaceo sustancias
derivadas del opio. (morfina,
codena)

Opioides sustancias que
actan en los receptores
opioides. Se dividen en
sintticos y semisintticos.

OPIOIDES
Naturales: Morfina, codena.

Semisintticos: herona, hidromorfona,
dihidrocodena, naloxona.

Sintticos: meperidina, metadona, fentanilo,
tramadol, remifentanilo.
OPIO Y DERIVADOS
PRUEBA DE MARQUIS


En una placa para prueba a la gota se adiciona una mnima cantidad
de la sustancia sospechosa.

Se vierten 2 gotas de reactivo de marqus.

La aparicin de un color violeta oscuro indica resultado preliminar
positivo para opio y sus derivados.

Si aparece virando amarillo- naranja marrn, es positivo para
anfetaminas, SI es negro son anfetaminas con anillo sustitudo.(MDMA y
anlogos)

MORFINA, CODENA Y HERONA
Se vierte pequea cantidad de la sustancia en una
placa para prueba de gota.
Se aade 1 gota de reactivo cido ntrico.
Positiva para morfina= un color naranja que vira
rapidamente a rojo y luego lentamente amarillo.
Positiva para codena: un color naranja que vira
lentamente a amarillo.
Positiva para herona: un color amarillo que vira
lentamente a verde claro

CODENA, METADONA, MORFINA
Muestras: orina, contenido estomacal, restos de la escena.
Reactivos
Liebermann
Mandelin
Marquis
Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra,
calentar en bao mara durante 3 min.
Resultados: Colores observados frente a los reactivos de
Liebermann: negro
Mandelin: verde
Marquis: violeta

ANFETAMINAS
La anfetamina es un lquido incoloro, de olor
dbil y sabor acre, se volatiliza lentamente a
temperatura ambiente. Poco soluble en agua
destilada, soluble en alcohol y ter, fcilmente
soluble en cidos minerales diluidos.




ANFETAMINAS
Reaccin de Liebermann
Muestras: orina, contenido estomacal y
residuos de la escena, polvos.
Resultado: La aparicin de un color rojo-
naranja indica presencia de anfetaminas

ANFETAMINAS

Reaccin de Marquis
Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de
la escena, polvos.
Procedimiento: colocar una pequea cantidad de la
muestra (1 a 2 mg de polvo o una o dos gotas si se
trata de un lquido) en una placa y agregar el reactivo
de Marqus gota a gota y no ms de tres gotas.
Resultados: La aparicin de un color anaranjado que
cambia al pardo indica la presencia de
anfetamina como de metanfetamina.
Sensibilidad: 1 mg.

ANFETAMINAS
Reaccin con ninhidrina
Muestras: orina, contenido estomacal y
residuos de la escena, polvos
Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra,
calentar en bao mara durante 3 min.
Resultados: La aparicin de un color rosado-
anaranjado luego de calentar indica la
presencia de anfetaminas.

ANFETAMINAS

Reactivo de Simn.
Colocar una pequea cantidad de la muestra (1 a
2 mg de polvo o una o dos gotas si se trata de un
lquido) sobre una placa de toque y agregar
reactivo.
Resultados: Produce un color azul la
metanfetamina y otras aminas secundarias. La
anfetamina y otras aminas primarias producen un
color rosado que cambia lentamente a rojo
cereza.

MARIHUANA
La marihuana es extrada de la planta cannabis
sativa.

La principal sustancia psicoactiva del cannabis es
el tetrahidrocannabinol (THC), adems, la planta
contiene en total cerca de 60 cannabinoides
(entre stos: cannabinol, cannabigerol,
cannabicromeno, cannabiciclol), que se presenta
en muchas variedades, siendo la mas activa la 9-
THC

MARIHUANA
Tambin se puede mezclar en la comida o beber como
t.

La marihuana comn contiene en promedio 5 % de THC

La sin-semilla (botones y flores de la planta hembra)
contiene en promedio 12 % de THC(- 1 % al 27%)

El hachs ( resina gomosa de las flores de las plantas
hembras) 10 % de THC
MARIHUANA
Prueba de Duquenois Levine:

2ml de Vainillina (0,4g en 20 ml de etanol al 95%)
0,5 ml de acetoaldehdo
2 ml de cido clorhdrico concentrado, si es positiva forma
un color verde azul o violeta.
se agita y se agrega 2 ml de cloroformo

Resultado: el color violeta se extrae y pasa a la fase
orgnica.
Cabe mencionar que el cannabidiol no da esta reaccin.


PARAQUAT Y DIQUAT
Prueba de ditionito
Disolver 100 mg de ditionito de sodio en 10ml de
NaOH (hidroxido de sodio )
En un tubo de ensayo adicionar 5ml de orina.
Agregar 1 ml de la solucin de ditionito, y teniendo
un tubo de control negativo, observar:
AZUL: Paraquat
Verde: diquat