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Introduccin

Las huellas dactilares o digitales son un ID nico para cada ser humano, como las rayas del tigre, no hay dos
tigres con las mismas rayas igual en el caso de las cebras, nunca coinciden dos huellas, ni en los gemelos
idnticos.
Estas se desarrollan en la etapa embrin.
Tiene muchos fines como proteger derechos de autor o en sistemas de seguridad de alta tecnologa. Tambin
se llama DRM, sirven para proteger contenido digital por el "problema" de la copia pirata.
Son como marcas nicas en cada persona es como un comprobante perfecto de quien eres ya que no existe
nadie mas que tenga las mismas huellas, se utilizan para comprobar la identidad de las personas y adems
son importantes para el tacto por ejemplo para los cirujanos son muy necesarias al igual que para todo tipo de
personas que en su trabajonecesite mucho usar las manos para sentir las cosas.


Biometra
Esto se refiere al reconocimiento automtico de una persona utilizando algunas caractersticas fsicas, como
ya lo sabemos las contraseas y las tarjetas ID han sido utilizadas para guardar cosas personales o bien para
controlar el acceso a ciertos lugares, pero estas no son confiables ya que estos sistemas de seguridad son
fcilmente violados con el hecho de divulgar tu contrasea o al extraviar la tarjeta, por eso este mtodo de las
huellas dactilares es muy seguro y confiable.
Estas huellas se adquieren durante el desarrollo del feto entre los 6 o 7 meses, esto no cambia durante la vida
de una persona a excepto a raspaduras, cortadas o quemaduras en las yemas de los dedos.
Por consiguiente que la probabilidad de que se encuentren dos huellas dactilares iguales es 1 en 1000.



Historia
Este sistema de identificacin dactilar lo creo el doctor Federico Olriz Aguilera, en Espaa.
Un huella dactilar son aquellas onditas que se encuentran situadas en las yemas de los dedosy al ponerlas
sobre una superficie plana se quedan marcadas, para esto casi siempre se pone el dedo ndice o el pulgar,
esto sin duda es una caracterstica individual de cada persona que sin duda sirve para identificar a las
personas, todos tenemos crestas diferentes es por eso que es individual e inconfundible.

Sabemos que antes de Juan Vucetich ya se estudiaba sobre las huellas digitales o dactilares, Juan Vucetich
fue la primera persona en hacer las fichas dactilares del mundo con las huellas de 23 procesados, el 1
septiembre de 1891 y este da se conoce como el "da mundial de la dactiloscopia" pasado el tiempo, con la
aprobacin de este mtodo se verifico con otras 645 personas pero estas eran reclusos de la crcel llamada
"plata" en 1894, con el tiempo, viendo que este mtodo era muy til la polica de buenos aires adopto
su sistema.
Hasta el siglo XVII, fue cuando se descubri que nos solo por medio del "Mtodos Brbaros" los cuales son;
tatuajes, amputaciones, cicatrices, servia para identificar a los procesados y criminales en fuga, tambin haba
ms mtodos solo por mencionarlos, son: "Mtodo Antropomtrico" o "Bertillonaje" y del "Retrato Hablado"
todo estos mencionado anteriormente por Bertilln.
Ernesto Abreu Gmez fundo en Mxico el primer archivo dactiloscpico y en el ao de 1914 en la ciudad de
Mrida, Yucatn.
Las crestas papilares son glndulas de secrecin de sudor que se encuentran en la dermis, llamados
glndulas sudoripas.




Ya que el sudor sale, se escurre por todas las crestas y se mezcla con la grasa natural que tiene cada
persona en la piel; lo que por consecuencia que cuando se toca un objeto apto para la retencin de huellas,
las huellas quedan registradas en el. Suele llamarse as "captura en vivo" a la adquisicin de la imagen del
dactilograma natural mediante lectores electrnicos especializados.
La captura en vivo no requiere usar tinta y suele permitir que se realiza un control de calidad automtico. En
Babilonia y Persia esto se usaba como un tipo firma para registrar el trabajo en arcilla, pues esto es
un carcter nico.
El francs Alphonse Bertillon en 1883 propuso algo similar, propuso un mtodo de identificacin de las
personas pero este basado en las medidas de varias partes del cuerpo. Este mtodo fue aceptado por la
polica de Francia y otras partes del mundo, pero este mtodo fracaso ya que se localizaron a dos personas
diferentes que tenan el mismo conjunto de medidas.


Estructura de las huellas dactilares
Crossover.
Core.
Bifurcation.
Ridge ending.
Island.
Delta.
Pore.

Primera persona en crear el sistema de huellas digitales
Juan Vucetich fue quien creo el mejor sistema de identificacin de huellas digitales, las huellas fueron
descubiertas hace siglos pero no estn registradas ya era sabido que no haba dos personas con las mismas
onditas en las yemas de los dedos.
El estudio que el izo tomando en cuenta lo ideado por Francis Galton y esto lo llev a poder confirmar que
los dibujos papilares podan ser clasificados por grupos. Mientras el se encargaba de dirigir la Oficina de
Identificacin Antropomtrica, Vucetich guardo una gran cantidad de impresiones digitales, lo que por
consiguiente, en 1891, en la formacin de un servicio de identificacin por medio de las impresiones digitales.
Y al nuevo mtodo de reconocimiento lo titulo "Icnofalangometra" o "Mtodo Galtoneano" a este mtodo lo
componan 101 tipos de huellas digitales que el mismo clasifico sobre la incompleta taxonoma de Galto.
Pasado el tiempo el mtodo de Vucetich comenz a utilizarse oficialmente para la individualizacin de las
personas, con el registro de 23 procesados.




Como distinguir tu dactilograma
Poniendo mucha atencin a esto, encontramos que el dactilograma, que se refiere al conjunto de lneas y
espacios se puede distinguir en la mayora de los casos 3 regiones denominadas basilar, nuclear y central.

Vucetich defini 4 tipos patrones fundamentales:? ARCO: todo dactilograma carente de delta.? PRESILLA
INTERNA: todo dactilograma que presente uno ms deltas a la derecha del observado? PRESILLA
EXTERNA: todo dactilograma que presente uno ms deltas a la izquierda del observador.? VERTICILO:
todo dactilograma que presente dos ms deltas opuestos.
Las huellas dactilares son caractersticas propias de las personas de tal forma que es posible identificarlas por
sus huellas dactilares debido a que estas son irrepetibles e inconfundibles.
Por ms de un siglo las huellas dactilares ha sido uno de los mtodos ms eficaz y utilizado para la
identificacin de las personas de los sistemas biomtricos han estado disponibles por estos ltimos aos.
Como ya lo dijo el seor Rosset y Lago "identidad es el conjunto de caractersticas y particularidades de
origen congnito o adquirido que hacen que una persona o cosa sea ella misma, con prescindencia de toda
otra de la misma especie"
Esa es la explicacin breve del porque es mejor que otros mtodos para establecer la identidades de los
criminales. Puesto que otras partes del cuerpo cambian, las huellas no.
Alrededor de 1870 un antropolo francs ideo un sistema para medir y registrar las dimensiones de ciertas
partes huesudas del cuerpo. Estas medidas, se integraron a una formula que se aplicara a una persona y que
no cambiaria en su vida de adulto.
El sistema de Bertillon, despus de su invento llamado "ALphonse Bertillon", fue aceptada por 30 aos.
Las huellas digitales en Babilonia se utilizaban para transaccin de negocios.
En China antigua, estas huellas del dedo pulgar fueron encontradas en los cellos de arcilla.
Experimento
Materiales.
Una hoja de papel.
Una hoja de plstico fuerte (por ejemplo, de un forro de un libro o de las que se usan para encuadernar).
Polvos de talco.
Un lapicero.
Tijeras.
Crema de manos.
Objetivos.
El propsito de este experimento es reconocer por donde estuvieron las personas, saber que cosas tocaron
pero sobre todo saber quien fue ya que las huellas dactilares son originales de cada quien, es
una estructura que se encuentra en la yema de los dedos formada por las crestas papilares que son glndulas
de secrecin de sudor situadas en la dermis, de otro propsito es saber como se pueden detectar sin
necesidad de algn aparato muy costoso o de la tecnologa que sirven para detectar las huellas y registrar de
quien son, es muy fcil y sencillo y nada costoso porque son cosas que ya las tenemos en casa.
Preparacin del revelador
Uno de los mtodos ms utilizados para revelar huellas dactilares es espolvorear la superficie en que se
encuentra la huella con carbn activo muy finamente pulverizado. En casa no solemos tener carbn activo,
pero podemos llegar a conseguir una sustancia que lo sustituya: vamos a trabajar con polvo de grafito. Lo ms
importante es que quede dividido muy finamente.
Para empezar a prepararlo vamos a frotar con la mina de un lpiz sobre una superficie metlica lisa. Por
ejemplo, sobre la cara interna de unas tijeras. Frota hasta conseguir una pequea cantidad de polvo negro.
Procedimiento.
En primer lugar necesitamos tener alguna huella que revelar. Para conseguirlas ntate crema de manos en los
dedos y despus marca tu huella sobre un papel o sobre una superficie de plstico.
Para revelarlas, si la superficie es clara o transparente espolvorea el polvo de grafito negro por encima. Si la
superficie es oscura, espolvorea unos pocos polvos de talco.
Con mucho cuidado vuelca los polvos sobrantes y golpea con los dedos, con suavidad el papel o el plstico
para que la vibracin haga caer el polvo sobrante.
Observa la huella que ha quedado marcada. Puedes utilizar una lupa para verla con ms detalle. Puedes,
tambin, buscar huellas en otras superficies.
Resultados.
Primeramente coloque los dedos llenos de crema en el papel, despus a unos les coloque polvo negro de
grafito y a otros talco finalmente quite el exceso de talco y de grafito y pude ver mis huellas dactilares, a
simple vista se alcanzaba a ver solo unas onditas pero al verlos a travs de la lupa se vea ms
detalladamente, entonces conoc mis crestas papilares las cuales son nicas e irrepetibles, caractersticas de
cada persona, algo que es inconfundible.
Costos.
Una hoja de papel..$1
Polvo de talco.$ 20
Un lapicero$2.50
Una hoja de plstico fuerte$ (se tiene en casa)
Tijeras.$ (se tiene en casa)
Crema de manos$20





ADN en Medicina Legal:
Problema 1: Tcnica de hibridacin de Southern
El anlisis de la "huella dactilar de ADN" se basa en la tcnica de transferencia e
hibridacin de Southern. En sta:
Gua
La huella dactilar de ADN, tambin conocida como anlisis del perfil de ADN, se
basa en el uso de la tcnica de transferencia e hibridacin de Southern para
analizar regiones polimrficas del ADN humano. Los polimorfismos se explican
con mayor detalle en el problema n 5. Las etapas experimentales empleadas en
un laboratorio de medicina legal o forense para el anlisis del perfil de ADN son
las siguientes:

1. Extraccin del ADN
Se puede extraer ADN de casi cualquier tejido humano. Las
posibles fuentes de ADN en la escena de un delito incluyen
sangre, semen, tejido de una vctima muerta, clulas del
folculo capilar y saliva. El ADN extrado de las pruebas del
delito ("indicios" o "vestigios" biolgicos) se compara con el
extrado de muestras de referencia, obtenidas de personas
conocidas, habitualmente de la sangre.

2. Digestin del ADN con una endonucleasa de
restriccin
El ADN extrado de la muestra se trata con una
endonucleasa de restriccin, que es una enzima que corta el
ADN dicatenario en donde tenga una seuencia
caracterstica. La enzima que se usa ms frecuentemente
para el anlisis legal es HaeIII, que corta el ADN en la
secuencia 5'-GGCC-3'.

3. Electroforesis en gel de agarosa
Tras la digestin del ADN, los fragmentos de ADN
resultantes se separan segn su tamao mediante
electroforesis en geles de agarosa. Durante la electroforesis,
las molculas de ADN, que poseen carga negativa, migran
hacia el electrodo positivo. Al avanzar las molculas de ADN,
su velocidad de migracin se ve reducida por la matriz del
gel de agarosa. Las molculas menores se mueven ms
deprisa a travs de los poros del gel que las de mayor
tamao. Como resultado, se produce una separacin
continua de los fragmentos de ADN de acuerdo con su
tamao, de modo que los fragmentos ms pequeos
avanzan la mayor distancia con referencia al origen o punto
de aplicain de la muestra.

4. Preparacin de un ensayo de Southern ("Southern
blot")
Tras la electroforesis, las molculas de ADN separadas se
desnaturalizan mientras permanecen en el gel de agarosa,
impregnando ste con una disolucin alcalina. Tras la
neutralizacin de sta, el DNA monocatenario resultante se
transfiere a la superficie de una membrana de nailon,
realizando as una copia o "calco" (la traduccin ms literal
del ingls blot, conservando este sentido, es "secante"). Este
proceso de desnaturalizacin y transferencia se conoce
como mtodo de Southern en recuerdo de quien lo invent,
Edward Southern. Al igual que la aplicacin de un secante a
un papel con la tinta hmeda transfiere una rplica de la
imagen del papel al secante, el "calco" del ADN en el gel a la
membrana de nailon conserva la distribucin espacial de los
fragmentos de ADN conseguida en el gel como resultado de
la electroforesis.

5. Hibridacin con sonda radiactiva
Una sonda de locus nico es una molcula pequea de ADN
o ARN capaz de hibridar (es decir, de formar un dplex ADN-
ADN o ADN-ARN) con el ADN de un fragmento de
restriccin concreto en el ensayo de Southern. La formacin
de la molcula dicatenaria (dplex) depende del
emparejamiento de bases complementarias entre las
secuencias de la sonda y del ADN presente en el "calco".
Las sondas de locus nico se marcan habitualmente con un
istopo radiactivo para facilitar su deteccin, y se eligen para
que detecten un locus gentico polimrfico en un solo
cromosoma humano. El ensayo de Southern resultante de la
etapa 4 se incuba en una disolucin que contiene una sonda
radiactiva de locus nico, bajo condiciones de temeratura y
concentracin de sales que favorezcan la hibridacin. Tras
producirse sta, se lava el exceso de sonda no unido, de
modo que la nica radiactividad que quede en la membrana
de nailon sea la asociada al ADN del locus diana.

6. Deteccin de los RFLPs mediante autorradiografa
Las posiciones de hibridacin de la sonda radiactiva sobre la
membrana del ensayo de Southern se detectan mediante
autorradiografa. En esta tcnica, la membrana de nailon se
coloca, una vez lavada, junto a una pelcula de rayos X
dentro de una caja que las asle de la luz. La pelcula registra
las posiciones donde hay desintegracin radiactiva. Tras su
exposicin y el revelado fotogrfico, el registro resultante de
la hibridacin de Southern se conoce como autorradiografa (
abreviado coloquialmente en ingls a "autorad").

7. Reensayar el resultado del Southern con sondas
adicionales
En un anlisis legal de DNA se suelen caracterizar
polimorfismos de ADN en varios cromosomas diferentes.
Tras el revelado de una autorradiografa para la primera
sonda, se puede lavar la radiactividad con una disolucin a
elevada temperatura, que deja el ADN en su sitio, e
hibridarlo con una segunda sonda radiactiva que se una a un
locus diferente. Se repiten as las etapas 5-7, detectando
cada vez un locus diferente. El grupo de autorradiografas de
una misma transferencia de Southern se conoce como un
"perfil de ADN".

La Huella gentica
Los recientes avances en Biologa, especialmente en el conocimiento de la estructura y funciones
del ADN han producido una verdadera revolucin en las tcnicas de identificacin individual por lo
que la Medicina Legal y la Antropologa Forense pueden hoy disponer de unas poderosas
herramientas de trabajo que permiten resolver con mucha seguridad algunos de los complicados
problemas que se nos plantean.
La propiedad del polimorfismo del ADN ha permitido adems, su aplicacin en muchos campos de
la investigacin cientfica que vamos a revisar brevemente.
Cada clula de nuestro organismo posee 46 cromosomas (23 pares) formados por ADN (cido
desoxirribonucleico) que contienen en sus complejas estructuras el Cdigo gentico. Este ADN
est formado por nucletidos dispuestos en una doble cadena helicoidal y compuestos a su vez
por un azcar, pentosa (desoxirribosa), un grupo fosfato y una base nitrogenada. Estos azcares y
fosfatos son iguales, mientras que las bases son diferentes, lo que permite distinguir cuatro tipos
de nucletidos cuyas bases les dan nombre: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Las
bases se unen unas con otras de una manera especial, las A con las T, y las G con las C (A-T, G-
C) por medio de puentes de Hidrgeno, dos y tres respectivamente.
La mitad del ADN del genoma humano es no codificante
y de ste, la mitad es repetitivo (aprox. un 25 % del ADN total). A su vez, la mitad de ste, lo
forman secuencias repetidas de dos clases: SINES o elementos dispersos cortos de 500 bp y
LINES o elementos dispersos largos, de ms de 500 bp.
La otra mitad es el ADN repetido en tandem, parte del cual son los llamados satlites (I, II, III y IV)
y los minisatlites, formados por escasos bp, que son los que tienen ms capacidad
individualizadora. Las unidades en tandem son de 15 a 20 bases que se pueden repetir de 200 a
1.400 veces.
Jeffreys y col. (Nature, 314, 1985) sealan que el genoma humano contiene muchas regiones
minisatlites dispersas en tandem, muy polimrficas debido a la variacin allica que se produce
al repetirse. Precisamente ste es el motivo de que las pruebas basadas en la repeticin de los
tandem de una secuencia permitan detectar muchos loci muy variables simultneamente lo que
proporciona as una huella gentica especficamente individual muy til en el anlisis de
materiales diversos.
Las molculas de ADN que constituyen los cromosomas son de gran longitud midindose en
Kilobases (Kb). Cada Kb equivale a 1.000 pares de bases (bp). Para darnos idea de esta longitud
sealaremos que el cromosoma X mide 150.000 Kb y el Cdigo gentico una longitud de 3.000
millones de bases.
Los anlisis de ADN se basan en la propiedad que tienen sus cadenas de ser rotas por mtodos
fsicos o qumicos a nivel de las uniones de Hidrgeno, obtenindose as segmentos de ADN de
cadena simple con capacidad para ser duplicados formndose ADN de doble cadena. Para
analizar el polimorfismo del ADN usamos las llamadas sondas o segmentos de ADN marcados
con algn elemento radiactivo (P32), enzimas u otros, consiguiendo que se unan stos con el ADN
complementario (hibridacin).
Al cortar el ADN por los lugares adecuados, podemos detectar diferencias en la longitud de los
fragmentos (RFLP, Restriction Fragment Length Polymorphism) y polimorfismos VNTR (Variable
Number of Tandem Repeats).
Las sondas utilizadas pueden ser multilocus con las que se consigue el llamado "DNA fingerprint"
al unirse la sonda a muchos loci. Y pueden ser monolocus o unilocus que detectan loci VNTR
individuales muy polimorfos.

APLICACIONES
Los exmenes tradicionales de manchas de sangre en los Laboratorios de Medicina Legal, o
los de manchas de semen, races de pelos o cabellos, tratan de determinar el sistema ABO,
Hemoglobina (Hb), Peptidasa, Fosfoglucomutasa, Rh, Anhidrasa carbnica, ADA, AK, Fosfatasa
cida eritroctica y otros ms. Pero tienen la limitacin de que los materiales analizados han de ser
recientes. Al mes, estos productos han sufrido una a veces insalvable degradacin. Otras muestras
como las de semen que contienen enzimas proteolticas, o bien debido a la actividad bacteriana,
pueden producir mltiples errores.
En cambio el ADN puede servir como huella gentica y ser analizado en muestras de gran
antigedad como veremos ms adelante.
De manchas de sangre y semen de 3 a 5 aos de antigedad es perfectamente posible obtener
ADN suficiente para aislar huellas genticas capaces de determinar la identificacin individual.
La violacin ha sido uno de los delitos ms frecuentes en todos los tiempos, una forma de
agresin sexual en la guerra y en la paz. Castigada por los Cdigos penales antiguos y modernos,
ha planteado con frecuencia tremendas dudas a la Justicia sobre el hecho de si hubo o no hubo
consentimiento por parte de la vctima, adems de averiguar quin fu realmente el agresor. Los
exmenes externos permitieron casi siempre comprobar la existencia de rotura del himen en las
vrgenes, el estado de las carnculas mirtiformes, con la excepcin de los llamados "hmenes
complacientes" cuya notable elasticidad permite la "inmisio penis" sin producir lesin visible. La
presencia de semen en la cavidad vaginal, las lesiones del cuerpo de la vctima y el caso extremo
pero no infrecuente de la muerte violenta de sta tras la violacin o precediendo a sta,
complicaron ms las situaciones.
Hasta hace pocos aos se determinaba el HLA, antgeno que est presente en todas las clulas
del organismo y que constituye una huella notable, con la probabilidad de 1/40.000 de que dos
personas no emparentadas presenten el mismo resultado.
Pero el HLA tiene el inconveniente de ser sumamente frgil, pudiendo destruirse en cuestin de
horas, lo que a menudo sucede en los casos de violacin hasta que la vctima es examinada.
El estudio del ADN por medio de "sondas", permite interrogar al Cdigo gentico de las
secreciones del delincuente y recibir una respuesta muy precisa.
JEFFREYS, GILL y WERRETT (Nature, 316, 1985) realizando investigaciones detalladas en el
Home Office Forensic Service, llegaron a este descubrimiento. En el semen del violador como en el
de toda clula de cualquier persona, est contenida su huella gentica, una huella tan precisa o
ms que la huella dactilar tradicional que permite llegar a la identificacin individual con gran
exactitud y precisin.
La probabilidad de que haya dos huellas iguales es de 1/6.300.000.000. Por eso se dice con razn
huella gentica como se dice huella dactilar a los dibujos de las yemas de los dedos que tambin
son especficas de cada persona.
Hay otras huellas especficas en el organismo humano que permiten al Antroplogo Forense
llegar a la identificacin del cuerpo o fragmentos de l, por ejemplo, los senos frontales (su forma,
tamao y disposicin), las Lneas de Harris o lneas de detencin del crecimiento de los huesos
largos, en especial de las tibias; la estructura, forma, tamao, nmero y disposicin de los dientes,
la frmula dentaria (la cavidad bucal ha sido llamada por eso la "caja negra" de nuestro cuerpo
comparndola a la que llevan los aviones y que permite averiguar la causa de los desastres
areos), el HLA, el grupo sanguneo, etc.
Pero la huella gentica procedente del alfabeto gentico permite estudiar desde este punto de
vista tejidos orgnicos como la raz de los pelos, los leucocitos de la sangre, los espermatozoides,
la piel, el lquido amnitico o cualquier clula humana y encontrar en el ncleo de la misma el
patrn gentico que caracteriza a cada individuo.
El investigador estudia la muestra tomada de la vagina de la mujer violada y el semen del
sospechoso, los compara y dictamina si se trata de la misma persona, realizando para ello la
hibridacin del material sospechoso y del testigo, marcando la localizacin de los minisatlites y
viendo si se corresponden unos con otros.
Cinco mm3 de sangre o semen bastan para identificar a un culpable. El examen de Laboratorio
permitir ver en el ADN extrado varias decenas de bandas parecidas a los cdigos de barras
utilizados en los productos comerciales, de diverso espesor y longitud nunca iguales en dos
personas, que proceden a partes iguales del padre y de la madre del sujeto analizado.
La investigacin de la paternidad despus de violacin o incesto puede ser establecida por la
determinacin de grupos eritrocticos, grupos HLA y enzimas eritrocticos, efectuados en clulas de
lquido amnitico o de vellosidades coriales. MANGIN y col. (J.Med.Leg.Droit Mdicale, 34, 1991)
estudiaron 10 casos de aborto consecutivo a agresin sexual (violacin e incesto). En todos los
casos pudieron determinar la huella gentica del feto y comparando con la huella gentica de la
madre, se pudo determinar el alelo transmitido por el padre al feto. Posteriormente se practic la
bsqueda de este alelo en el material gentico del sospechoso. Esto fu posible en 8 de los 10
casos. En un caso el sospechoso fu descartado. En el dcimo caso no se pudo hacer la
comparacin por no hallarse al agresor.
Hay dificultades en los casos de los fetos macerados. Es fcil en los casos de preez reciente
cuando se puede disponer de tejidos trofoblsticos. La degradacin del ADN fetal en fetos
macerados ha hecho a veces imposible el anlisis. Sin embargo en algunos casos an es posible
obtener buen material para el anlisis, del vrtice del pulmn y del encfalo por ser zonas ms
protegidas por las estructuras seas.
El ADN es muy til para la determinacin de la paternidad. Sabiendo que en cualquier persona la
mitad del genoma procede del padre y la otra mitad de la madre, en el supuesto de que haya dos
individuos sospechosos de ser el padre de una criatura, bastar comparar las bandas halladas en
las huellas genticas del hijo, de la madre y de los sospechosos. Las bandas correspondientes a la
madre se eliminan y quedan las del verdadero padre. Se comparan stas con las del sospechoso o
sospechosos y aparecer con claridad si es alguno de ellos por la coincidencia visible que se
produce en el espesor y situacin de estas bandas. La probabilidad de error ser de una entre un
milln en los exmenes con sonda multilocus y si se hace con sonda monolocus repitiendo dos
o tres veces se alcanza la misma probabilidad.
Debido a que en ocasiones la muestra que hay que analizar viene alterada o es escasa, el mtodo
de sondas RFLP no basta para llegar a resultados valorables. KARY MULLIS ide otra tcnica
llamada PCR o Reaccin en cadena de la polimerasa, por medio de la cual, con muy escasa
cantidad de ADN se logran excelentes resultados. Consiste en amplificar segmentos de ADN por
sntesis enzimtica de secuencias especficas de ADN, utilizando el fragmento Klenow de la ADN-
polimerasa. Se perfecciona posteriormente el mtodo utilizando la Taq-polimerasa obtenida a
partir de una bacteria termfila.
El PCR es tan sumamente sensible que permite analizar incluso muestras degradadas. Esta
tcnica presenta muchas posibilidades en Criminalstica y Ciencias antropolgicas en general.
VERBOVAYA e IVANOV (1991) aislaron ADN de manchas frescas de sangre, sometindolo a
examen rutinario: digestin con endonucleasas de restriccin particulares, fraccionndolo luego por
agarosa-gel-electroforesis. Visualizaron con rayos ultravioleta tiendo con Bromuro de etidio (EtBr)
el gel. As aparece un patrn de banda especfico para el sexo, que depende slo de la enzima de
restriccin utilizada. La tcnica es excelente para la determinacin del sexo en el ADN en casos
criminales. Tambin se puede realizar la determinacin del sexo utilizando la reaccin PCR.
EL ADN Y LA HUELLA GENETICA EN OTRO TEJIDOS
En los estudios del ADN en diferentes tejidos se ha podido observar que el procedente del msculo
cardiaco, bazo y hueso es el menos degradado, mientras que el que procede el hgado es el que
ms fcilmente se degrada.
No existe una correlacin estricta entre el estado de degradacin del ADN y la data de la muerte.
Se ha encontrado ADN de elevado peso molecular en la pulpa dentaria en casos en los cuales las
condiciones en que qued el cadver fueron muy adversas.
S. PBO (Nature, 314, 1985) estudi 23 momias egipcias obteniendo de ellas ADN. En uno de
los casos se trataba de un nio en el que el ADN pudo ser clonizado molecularmente en un vector
plsmido. En este clonus encontr dos elementos de la familia Alu de la secuencia humana
repetitiva de ADN. Este anlisis demostr que muestras de ADN de momias (3,4 Kb) pueden ser
clonizadas y que los fragmentos de ADN parece que contienen muy pocas o ningunas
modificaciones postmortem.
Las muestras estudiadas variaron desde las procedentes de la VI Dinasta (-2370 -2160 a.C.) hasta
las de los tiempos romanos tardos. Previamente rehidrataba las muestras de tejido momificado
(revitalizacin) y haca cortes microscpicos tindolos con los mtodos clsicos y con Bromuro de
etidio que permite detectar pequeas cantidades de ADN.
Hall ncleos en clulas de cartlagos de la oreja (en una cabeza de mujer del Museo egipcio de
Berln) y de epidermis y tejido subcutneo de la cabeza de un hombre del Museo Viktoria de
Uppsala. Si bien existan pirimidinas modificadas en el segundo caso, lo que haca imposible su
clonizacin, en cambio en un nio de un ao momificado, procedente del Museo egipcio de Berln,
estaban excelentemente conservados los ncleos. La prueba del C14 en este caso di una
antigedad de 2430+120.
La conservacin histolgica de los tejidos momificados fu mucho mejor en los tejidos superficiales
y partes perifricas del cuerpo que en las ms profundas, observacin que tambin hicieron
DANSELS y col. (1970) y CRADEL y col. (1981), debido probablemente a la imbibicin con natrn
y la consiguiente deshidratacin.
Los trabajos de todos estos autores han demostrado que el ADN puede ser estable durante largos
periodos de tiempo (miles de aos) al menos en ciertos restos humanos y en condiciones
especiales de momificacin.
De gran valor antropolgico es el estudio del ADN en huesos y dientes antiguos. Las enormes
posibilidades que brinda para la investigacin de estos restos son evidentes.
As HAGELBERG y col. estudiando huesos muy antiguos de 300 a 5.000 aos encontraron an
ADN estable en ellos (Ancient bone DNA amplified, Nature 342, 1989).
LEE y col. (Genetic markers in human bone, J.For.Sc.36, 1991) aislaron ADN de muestras de tejido
seo humano esponjoso y compacto. Fueron utilizadas para visualizarlo, tcnicas como la
espectrofotofluorometra y las tinciones con Bromuro de etidio en minigeles, as como para estimar
la cantidad y el grado de degradacin del ADN. El extenso polimorfismo detectado por este tipo de
anlisis de ADN est en relacin con el nmero variable de tandems de repeticin (VNTR) dentro
de las secuencias de ADN repetitivo en el genoma humano (HUANG y col. Advances in Forensic
Sc. 3 vol. Chicago 1990).
LEE y col. (J.For.Sc.36:320, 1991) para obtener ADN de huesos toman muestras de 10 a 20 mg de
hueso esponjoso y 75 a 100 mg de hueso compacto. Las diversas etapas de tratamiento de estos
materiales pueden resumirse as:
1. Inmersin y agitacin en agua destilada fra (15 min).
2. Pase por etanol (15 min).
3. Pase por ter etlico (15 min).
4. Secado de la muestra.
5. Inmersin en N lquido por 15-30 segundos para congelarla.
6. Reduccin a fino polvo.
7. Extraccin del ADN de este polvillo utilizando el mtodo que se emplea para las manchas de
sangre que es el siguiente:
8. Incubacin durante una noche a 37C con 400 L Extraction Buffer (10 mM Tris, 10 mM EDTA) y
100 mM (ClNa) pH 8, conteniendo 2% SDS (Sodium dodecyl sulfato) y 4.1 sigma unidades de
Proteinasa K seguido por lo menos de dos extracciones con ClH (pH 8), fenol y formol equilibrados
conteniendo alcohol isoamlico (24:1 v/v).
9. El ADN se precipita con etanol 100 %, se lava con etanol 70 % y se redisuelve en TE (10 mM
Tris y 1 mM Na2 EDTA, pH 7.8) buffer.
El ADN fu obtenido de 10 a 20 veces en mayor cantidad en tejido esponjoso que en compacto.
Por lo menos se necesitan 50 mg o ms de hueso compacto para obtener ADN. Con menos no se
consiguieron resultados.
La aplicacin de esta tcnica al estudio del diente ha dado excelentes resultados debido a la
sorprendente estabilidad del ADN contenido en la cavidad pulpar. La razn es que en ella el ADN
est protegido, de manera que la contaminacin y la accin bacteriana son mnimas o nulas.
SCHWARZ (1991) someti a dientes extrados a diversas condiciones ambientales: varios pH (3, 7,
10), temperaturas diversas (4C, 25C, 37C, incineracin), humedad (20%, 66%, 98%), varios
tipos de suelos (arena, piso del jardn y otros), agua de mar, dientes enterrados y tiempo diverso
(una semana a seis meses). Adems examin dientes extrados haca 16 a 19 aos conservados a
la temperatura de la habitacin.
Aisl el ADN de las muestras en gel con objeto de determinar la concentracin e integridad del
ADN. Observ que la pulpa dentaria es un material muy rico en ADN. Realiz el tipo de anlisis de
ADN que hemos llamado RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism). La incineracin
produjo la completa prdida de HMW y un ADN de bajo peso molecular. Pero en la mayora de los
casos obtuvo suficiente ADN para hacer un anlisis de RFLP, obteniendo de 15 a 20 microgramos
de HMWDNA de la pulpa dentaria.

OTRAS APLICACIONES
Adems de las propias de la Criminalstica que hemos ido citando como es el examen de indicios
hallados en el lugar del crimen (semen, manchas de sangre, cabellos en la mano de la vctima,
fragmentos de la piel del agresor bajo las uas por araazos de defensa de la vctima, etc.), en los
que la huella gentica puede conducir a la identificacin del agresor o bien a descartar a un
acusado inocente, el estudio del ADN es muy til en Arqueologa y Paleopatologa. Materiales
humanos antiguos han demostrado su valor diagnstico para estudios diacrnicos en genes
polimorfos de poblaciones neolticas y paleolticas, as como el del estudio del ADN contenido en
virus de aquellos tiempos.
Se ha empleado para determinar la procedencia y descendencia de los antiguos pobladores del
Valle del Nilo, as como las relaciones entre las familias faranicas y las diversas dinastas.
El polimorfismo del ADN ha revolucionado el anlisis gentico humano, no slo en el campo del
diagnstico de la identidad individual sino en el origen de las enfermedades del pasado y la
evolucin de las mismas a travs del tiempo.
En Antropologa est permitiendo estudiar el pedigree de determinados grupos de poblacin, as
como distinguir las uniones entre consanguneos, la endogamia, etc.
En el campo de la Evolucin de las especies tiene un enorme inters y a medida que se avance en
su conocimiento, la huella gentica nos permitir llegar a saber quines fueron los antepasados
directos o indirectos de una especie dada, as como la relacin entre las diversas especies y su
posicin filogentica.
El quagga es un miembro ya extinguido de la familia del caballo. HOGUCHI y col. (Nature, 312,
1984) examinaron msculos desecados de una pieza de Museo perteneciente a un quagga,
especie de cebra (Equus quagga) extinguido en 1883. De estos msculos obtuvieron ADN de bajo
peso molecular. La muestra corresponda a un ejemplar muerto haca 140 aos que se encontraba
conservado en el Museo de Historia Natural de Mainz (Alemania). En la comparacin con el ADN
obtenido de una cebra actual (Equus zebra) se obtuvo la misma seal de hibridacin.
En Antropologa Forense es un mtodo prometedor si funciona sobre todo el tipo de anlisis PCR
sobre ADN obtenido en huesos. Un caso frecuente que se presenta es el de determinar si un
fragmento de hueso o un hueso (supuesta reliquia de un santo por ejemplo) pertenece realmente a
ese santo cuyos restos en su mayor parte se encuentran bien identificados y documentados en un
sarcfago de un monasterio. La comparacin del ADN en ambos restos puede confirmar o por el
contrario descartar que se trate de la misma persona.
De la misma forma se pueden estudiar restos dispersos de cadveres en una gran catstrofe y
saber si pertenecen a la misma persona o a personas distintas.

PORVENIR DE LA HUELLA GENETICA
Se ha dicho que la huella gentica puede llegar a substituir a la huella dactilar. Esta idea es
errnea. Cada una tiene sus aplicaciones especficas. Y si bien el estudio de la huella gentica ha
sido un avance revolucionario en determinados casos como es el estudio del semen o la sangre
para identificar a la persona a quien pertenece, no tiene nada que ver con el hallazgo de huellas
dactilares sobre la superficie de un arma u otro objeto donde el criminal haya puesto sus manos.
Es como si quisiramos comparar un plato con un paraguas. Se trata de dos mtodos diferentes,
complementarios en muchos casos para la investigacin forense.
WERRETT menciona el caso de dos mujeres violadas y asesinadas en una poblacin. Un joven
fu acusado de ser el culpable de ambas violaciones. Se compar su huella gentica con el ADN
del semen hallado en el cuerpo de ambas mujeres que era de una misma persona. Result que el
joven tena una huella gentica diferente a la del semen del culpable y fu exculpado, al menos de
las violaciones. Se propuso entonces el estudio de la huella gentica de todos los hombres de la
regin, en total 3.300. Dice WERRRETT que an estn realizando estos anlisis cada uno de los
cuales dura por lo menos dos semanas.
Aqu se plantea el problema de la voluntariedad como ocurre con la prueba de la alcoholemia. La
ley no puede obligar a nadie a dejarse practicar esta prueba. El hecho de negarse sin embargo,
puede hacer sospechoso a un individuo. Si el violador est entre los 3.300 varones examinados,
ser perfectamente detectado por medio del estudio de la huella gentica sin duda alguna.
PROBLEMAS BIOETICOS Y LEGALES
La legitimidad de estos exmenes no est totalmente admitida, porque la Ley suele ir por detrs de
las nuevas tcnicas de investigacin. Por eso este tipo de exmenes plantea problemas de tipo
mdico-legal (el sospechoso puede negarse a ser examinado en su intimidad) y la Ley no puede
violentar los derechos humanos. Y si se demuestra que ha sido as y la prueba ha sido obtenida en
forma "irregular", no servir como tal prueba ante un Tribunal.
Las tcnicas del estudio del ADN han producido ya mltiples situaciones-problema, creando fuertes
controversias, especialmente en Estados Unidos, donde se ha llegado a proponer que en el
documento de identificacin personal, se incluya un microchip con la huella gentica del
propietario.
Al menos si esto no se ha generalizado, s se han hecho Bancos de Datos y Ficheros de los
violadores "habituales" con sus huellas genticas, ya que suelen ser siempre reincidentes.
Estos registros permiten recurrir a la comparacin inmediata con la huella del semen hallado en la
vagina de una vctima y confirmar o descartar que hay un culpable conocido.
Estos Bancos de Datos de huellas genticas permiten tambin hacer comparaciones con casos
de violacin ocurridos fuera del pas, ya que hoy da con los medios de comunicacin rpidos, el
criminal puede desplazarse al extranjero para cometer sus delitos.
Con objeto de llegar a una standarizacin de los mtodos de estudio del ADN, se cre en 1989 en
Estados Unidos y Canad el grupo TWGDAM (Technical Work Group for DNA Analysis Methods) y
en Europa en 1988, el grupo EDNAP (European DNA Profiling Group). Ambos promueven
reuniones peridicas e intercambios de tcnicas, estudios y resultados de sus experiencias.
Es indudable como hemos visto el valor de la huella gentica en Medicina Legal y Antropologa,
extensivo a muchas Ciencias ms y a muchos campos de aplicacin, pero no hay que olvidar que
como todo lo que atae a la intimidad de la persona humana puede entraar serios problemas
ticos y legales que hay que tener siempre presentes.