ROTEIRO: METABOLISMO DE CARBOIDRATOS

1. Faa um esquema geral do metabolismo de carboidratos.

2. Defina gliclise. Qual a funo da gliclise? Em que regio celular
ocorre?
A gliclise uma via central quase universal do catabolismo da glicose.
a via atravs da qual, na maioria das clulas, ocorre o maior fluxo de
carbono.
Na gliclise (do grego glykys, que significa doce, e lysis, que significa
quebra), uma molcula de glicose degradada atravs de uma
sequncia metablica que composta por um conjunto de dez
reaes catalisadas por enzimas livres no citosol, na qual a glicose oxidada
produzindo duas molculas de piruvato, duas molculas de ATP e dois
equivalentes reduzidos de NADH
+
, que sero introduzidos na cadeia
respiratria ou na fermentao.
A gliclise uma das principais rotas para gerao de ATP nas clulas e
est presente em todos os tipos de tecidos. A importncia da gliclise em
nossa economia energtica relacionada com a disponibilidade de glicose no
sangue, assim como com a habilidade da glicose gerar ATP tanto na presena
quanto na ausncia de oxignio. A glicose o principal carboidrato em nossa
dieta e o acar que circula no sangue para assegurar que todas as clulas
tenham suporte energtico contnuo.
Nos organismos aerbios, a gliclise prosseguida pela respirao
celular. Por outro lado, nos organismos anaerbicos (e mesmo aerbios em
certas circunstncias), a gliclise prosseguida por um processo chamado de
fermentao. A gliclise ocorre no hialoplasma, ou seja, fora da mitocndria, e
tem o seu incio a partir da molcula de glicose, sem a participao do
oxignio. No hialoplasma encontram-se uma srie de enzimas responsveis
pelo processo.
No cmputo final do processo, uma molcula de glicose convertida em
duas molculas de piruvato (a via do carbono). Duas molculas de ADP e duas
de Pi so convertidas em duas molculas de ATP (a via dos grupos fosfato).
Quatro eltrons (dois ons hidreto) so transferidos de duas molculas do
gliceraldedo-3-fosfato para duas de NAD+ (a via dos eltrons).
A equao global da gliclise dada por:
Glicose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ -> 2 Piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 H+ + 2
H2O

3. Qual o produto da degradao de glicose e qual o seu destino
metablico?
Duas molculas de piruvato. O destino do piruvato depende do tipo de
clula e das circunstncias metablicas. exceo de interessantes variaes
encontradas entre as bactrias, o piruvato formado pela gliclise pode tomar
trs rotas catablicas alternativas.
Nos organismos aerbicos e em tecidos sob condies aerbicas, a
gliclise constitui apenas o primeiro estgio da degradao completa da
glicose. O piruvato oxidado, com perda do seu grupo carboxila como CO2,
para liberar o grupo acetila da acetil-coenzima A, a qual ento totalmente
oxidada a CO2 pelo ciclo do cido ctrico. Os eltrons originados dessas
oxidaes so passados para o O2 por meio de uma cadeia de transportadores
na mitocndria, formando H2O. A energia liberada nas reaes de
transferncia de eltrons permite a sntese de ATP nas mitocndrias.
A segunda rota para o metabolismo do piruvato a sua reduo a
lactato atravs da chamada via da fermentao do cido lctico. Quando o
tecido muscular esqueltico em contrao vigorosa funciona em condies de
hipxia baixa presso parcial de oxignio -, o NADH no pode ser reoxidado
a NAD+, e este necessrio como receptor de eltrons para que o piruvato
continue a ser oxidado. Nessas condies, o piruvato reduzido a lactato por
recepo dos eltrons do NADH e consequente regenerao do NAD+
necessrio para que o fluxo glicoltico prossiga.
A terceira grande rota do metabolismo do piruvato leva ao etanol. Em
alguns tecidos vegetais e em certos invertebrados, protistas e microrganismos
como a levedura da fabricao da cerveja, o piruvato convertido
anaerobicamente em etanol e CO2, um processo chamado de fermentao
alcolica. O piruvato deve ser convertido em um produto final reduzido para
reoxidar o NADH oxidado pela reao de GAPDH. Em leveduras, o piruvato
descarboxilado para produzir CO2 e acetaldedo, o qual reduzido na
presena de NADH, produzindo NAD+ e etanol.

4. Descreva todas as reaes da gliclise.
A fase preparatria da gliclise requer o investimento de duas molculas
de ATP e resulta na clivagem da cadeia da hexose em duas trioses fosfato.
Nessa reao, a glicose convertida em piruvato (reao exergnica, G<0). A
reao descrita por:

glicose + 2NAD -> 2 piruvato + 2NADH + 2H+

1) Fosforilao da glicose: a glicose ativada para as reaes subsequentes
pela sua fosforilao em C-6 para liberar a glicose-6-fosfato (o doador de
fosfato o ATP).
2) Converso da glicose-6-fosfato em frutose-6-fosdato: a D-glicose-6-fosfato,
que uma aldose, convertida em D-frutose-6-fosfato, uma cetose.
3) Fosforilao da frutose-6-fosfato em frutose-1,6-bifosfato: essa cetose
novamente fosforilada pelo ATP, dessa vez em C-1, para liberar D-frutose-1,6-
bifosfato.
4) Clivagem da frutose-1,6-bifosfato: a molcula de frutose-1,6-bisfosfato
quebrada para liberar duas trioses fosfato diferentes, a diihidroxiacetona
fosfato, que uma cetose, e o gliceraldedo-3-fosfato, que uma aldose.
5) Interconveno das trioses fosfato: apenas uma das trioses fosfato formada
pela aldolase o glicealdedo-3-fosfato pode ser diretamente degradada nos
passos subsequentes da gliclise. O outro produto, a diidroxicetona fosfato,
rpida e reversivelmente convertido em gliceraldedo-3-fosfato pela quinta
enzima da sequncia glicoltica. Por isso, C-1, C-2 e C-3 da glicose inicial
agora tornam-se indistinguveis de C-6, C-5, e C-4, respectivamente. Ou seja,
como a diidroxiacetona fosfato foi isomerizada em uma segunda molcula,
agora temos duas molculas do gliceraldedo-3-fosfato.
A fase de pagamento da gliclise inclui os passos de fosforilao
conservadores da energia, nos quais parte da energia livre contida na molcula
da glicose conservada na forma de ATP. A converso das duas molculas
obtidas na etapa anterior em piruvato acompanhada pela formao de quatro
molculas de ATP, formadas a partir de ADP. Ou seja, o rendimento lquido de
ATP por molcula de glicose degradada dois, j que duas molculas de ATP
foram consumidas na etapa anterior. A reao (endergnica) dada por:

2ADP + 2Pi -> 2ATP + 2H2O

6) Oxidao do gliceraldedo-3-fosfato em 1,3-bifosfoglicerato: o gliceraldedo-
3-fosfato desidrogenado em um anidrido de cido carboxlico com o cido
fosfrico. Esse tipo de anidrido, chamado um acil-fosfato, tem uma energia livre
padro de hidrlise muito alta. A maior parte da energia livre de oxidao do
gripo aldedo do gliceraldedo-3-fosfato conservada pela formao do grupo
acil-fosfato em C-1 do 1,3-bifosfoglicerato.
7) Transferncia do fosfato do 1,3-bifosfoglicerato para ADP: o grupo fosfato de
alta energia do grupo carboxila do 1,3-bifosfoglicerato transferido para o ADP,
formando ATP e 3-fosfoglicerato.
8) Converso do 3-fosfoglicerato em 2-fosfoglicerato: uma enzima, juntamente
com o on Mg2+, catalisa a transferncia reversvel do grupo fosforil entre C-2 e
C-2 do glicerato.
9) Desidratao do 2-fosfoglicerato para fosfoenol-piruvato: ocorre a remoo
reversvel de uma molcula de gua do 2-fosfoglicerato para liberar
fosfoenolpiruvato.
10) Transferncia do grupo fosforil do fosfoenolpiruvato para ADP: a ao
conjunta da enzima com K+ e/ou Mg2+ ou Mn2+ transfere o grupo fosforil do
fosfoenol piruvato para o ADP. A reao da piruvato quinase essencialmente
irreversvel sob condies intracelulares e um importante stio de regulao.

5. Quais as coenzimas reduzidas produzidas? Qual o seu destino
metablico?
O FAD e o NADH. Ciclo de Krebs e, posteriormente, cadeia respiratria.

6. Qual o efeito de ATP e ADP sobre a gliclise e qual o mecanismo de
regulao?
O fluxo de glicose atravs da via glicoltica regulado para manter
constante a concentrao de ATP (bem como fluxos adequados de
suprimentos dos intermedirios glicolticos que possuem destinos
biossintticos). Para esse fim, os necessrios ajustes na velocidade da gliclise
so conseguidos pela regulao de duas enzimas alostricas dessa via. Por
exemplo, quando h uma grande quantidade de ATP na clula, no h mais
necessidade de realizar gliclise. As enzimas alostricas so controladas por
essa quantidade de ATP, e ento, param de catabolizar as reaes glicolticas.

7. Quais so as enzimas alostricas?
A fosfofrutoquinase-1, piruvato quinase, hexoquinase e sua isoenzima
(no fgado). Elas so controladas (moduladas), segundo a segundo, pelas
flutuaes na concentrao de certos metablitos-chave que refletem o
equilbrio celular entre a produo e o consumo de ATP.

8. Como produzido ATP pela gliclise? Qual a finalidade da produo de
ATP citoplasmtica?
O ATP produzido atravs da quebra de uma molcula de glicose. Na
fase de pagamento do processo, duas molculas de fosfato se ligam a duas
molculas de ADP, formando duas molculas de ATP. O ATP citoplasmtico
produzido com a finalidade de fornecer energia para que a clula possa realizar
os mais diversos tipos de trabalho biolgico.

9. Como produzido lactato e em que condies metablicas?
Quando os tecidos animais no podem ser supridos com oxignio
suficiente para suportar a oxidao aerbica do piruvato e no NADH produzidos
pela gliclise, o NAD+ regenerado a partir do NADH pela reduo do piruvato
a lactato. Outros tecidos e tipos celulares tambm produzem lactato da glicose,
mesmo sob condies aerbicas.
A reduo do piruvato catalisada pela lactato desidrogenase, que
forma o ismero L do cido lctico (lactato em pH 7). O equilbrio global dessa
reao favorece fortemente a formao de lactato, como fica evidenciado pela
variao de energia livre padro acentuadamente grande e negativa.

10. Defina fermentao alcolica. Em que regio celular ocorre? Quais
organismos so capazes de realizar esse processo?
A levedura e outros microrganismos fermentam a glicose em etanol e
CO2, e no em lactato. A glicose convertida em piruvato pela gliclise, e o
piruvato convertido em etanol e CO2 em um processo de dois passos. Esse
processo chamado de fermentao alcolica.
No primeiro passo, o piruvato sofre a descarboxilao em uma reao
irreversvel catalisada pela piruvato descarboxilase. Essa reao uma
descarboxilao simples e no envolve a oxidao do piruvato. A piruvato
descarboxilase requer Mg2+ e tem uma coenzima firmemente ligada, a tiamina
pirofosfato.
No segundo passo, por ao da lcool desidrogenase, o acetaldedo
reduzido a etanol, com o NADH derivado da atividade da gliceraldedo-3-
fosdato desidrogenase fornecendo o poder redutor.
Portanto, ao invs de lactato, os produtos finais da fermentao alcolica
so o etanol e o CO2. A equao geral da fermentao alcolica :

glicose + 2ADP + 2Pi -> 2etanol + 2CO2 + 2ATP + 2H2O.

11. Em que condies metablicas ocorre a fermentao alcolica?
Condies metablicas sem oxignio suficiente (hipxica ou anaerbia).

12. Defina fermentao lctica. Em que regio celular ocorre? Quais
organismos so capazes de realizar esse processo?
a produo de lactato (cido lctico) a partir de um conjunto de
reaes de metabolismo de glicose. Ocorre no citoplasma em tecidos de
organismos de animais e particularmente e microrganismos, fungos e
leveduras.

13. Descreva a oxidao do piruvato. Em que regio celular ocorre? Qual
o produto?
A oxidao do piruvato chamada de descarboxilao oxidativa. um
processo irreversvel de oxidao que ocorre na mitocndria no qual o grupo
carboxila removido do piruvato na forma de uma molcula de CO2 e os dois
carbonos remanescentes tornam-se o grupo acetil do acetil-CoA.
O NADH formado nessa reao cede um on hidreto (H-) com seus dois
eltrons para a cadeia respiratria, que transporta esse eltrons at o oxignio
ou, nos microrganismos anaerbicos, para um receptor alternativo de eltrons,
como, por exemplo, o sulfato ou o nitrato. Essa transferncia de NADH para o
oxignio gera 2,5 molculas de ATP por par de eltrons transportados.
Nas clulas eucariticas, o processo ocorre na mitocndria, e, nas
procariticas, no citosol.

14. Quais as caractersticas da enzima piruvato desidrogenase?
A piruvato desidrogenase o primeiro componente do complexo
enzimtico piruvato desidrogenase, que formado por trs enzimas (piruvato
desidrogenase, diidrolopoil transacetilase e diidrolipoil desidrogenase) e cinco
coenzimas (TPP, CoA, FAD, NAD+ e cido liplico). Ela executa duas reaes,
a descarboxilao do piruvato e a acetilao redutiva do cido lipico. Esse
complexo tambm responsvel pela formao de acetil-CoA a partir do
piruvato.

15. Qual o destino do produto gerado?
O acetil-CoA entra no ciclo de Krebs e o NADH entra na cadeia
respiratria.

16. Defina ciclo de Krebs. Quais os seus reagentes e os seus produtos?
O ciclo de Krebs corresponde a uma srie de reaes qumicas que
ocorrem na vida da clula e seu metabolismo. Descoberto por Hans Adolf
Krebs, o ciclo executado na matriz da mitocndria dos eucariontes e
no citoplasma dos procariontes. Trata-se de uma parte do metabolismo dos
organismos aerbicos (utilizando oxignio da respirao celular).
O ciclo de Krebs uma rota anfiblica, ou seja, possui reaes
catablicas e anablicas, com a finalidade de oxidar a acetil-CoA.
O ciclo inicia-se quando o piruvato transformado em acetil-CoA, que
reage com o oxaloacetato, formando citrato. O citrato d origem ao -
cetoglutarato com liberalo de NADH2 e de CO2. O -cetoglutarato d origem
a outros compostos de quatro carbonos com formao de GTP, FADH2, NADH
oxaloacetato. Aps o ciclo de Krebs, ocorre outro processo
denominado fosforilao oxidativa.
A equao geral do Ciclo de Krebs resume todo o processo:

Acetil-SCoA + OA + GDP + Pi + 3 NAD+ + FAD ->
OA + 2CO2 + GTP + 3NADH + FADH2 + HSCoA

17. Descreva todas as reaes do ciclo.
1) Formao do citrato: ocorre a condensao do aceti-CoA com o
oxaloacetato para formar citrato. O carbono metila do grupo acetil reunido ao
grupo carbonila C-2 do oxaloacetato.
2) Formao do isocitrato via cis-aconitato: ocorre a transformao reversvel
do citrato em isocitrato, por meio da formao intermediria do cis-aconitato.
3) Oxidao do isocitrato -cetoglutarato: o isocitrato descarboxilado para
formar o -cetoglutarato.
4) Oxidao do -cetoglutarato a succinil-CoA e CO2: o passo seguinte outra
descarboxilao oxidativa. O acetoglutarato convertido em succinil-CoA e
CO2.
5) Converso do succinil-CoA em succinato: ocorre o rompimento da ligao tio
ster do succinil-CoA. A energia liberada nesse rompimento empregada para
dirigir a sntese de uma ligao anidrido fosfrico no ATP ou no GTP, formando
o succinato.
6) Oxidao do succinato a fumarato: o succinato oxidado pela flavo-protena
succinato desidrogenase.
7) Hidratao do fumarato para produzir malato: ocorre a hidratao reversvel
do fumarato em L-malato pela enzima fumarase.
8) Oxidao do malato a oxaloacetato: a L-malato desidrogenase, ligada ao
NAD, catalisa a oxidao do L-malato em oxaloacetato.

18. Quais as enzimas alostricas e seus moduladores?
So quatro os pontos reguladores do ciclo de Krebs: complexo piruvato
desidrogenase, isocitrato desidrogenase, complexo -cetoglutarato
desidrogenase (oxoglutarato desidrogenase) e citrato sintase. Os pontos
reguladores fazem com que as reaes fiquem irreversveis, ou seja, o ciclo de
Krebs ocorre somente em um sentido.
O ciclo de Krebs controlado fundamentalmente pela disponibilidade de
substratos, inibio pelos produtos e por outros intermedirios do ciclo. A
piruvato desidrogenase inibida pelos prprios produtos, acetil-CoA e NADH.
J a citrato sintase inibida pelo prprio produto, citrato. Tambm pode ser
inibida por NADH e succinil-CoA (sinalizam a abundncia de intermedirios
do ciclo de Krebs). As duas ltimas enzimas, isocitrato desidrogenase e a-
cetoglutarato desidrogenase, tal como a citrato sintase, so inibidas por NADH
e succinil-CoA. A isocitrato desidrogenase tambm inibida por ATP, e
estimulada por ADP. Todas as desidrogenases mencionadas so estimuladas
pelo on clcio.
Assim, o fluxo de metablitos atravs do ciclo do cido ctrico est sob
regulao estrita, porm no complexa. Trs fatores governam a velocidade do
fluxo atravs do ciclo: disponibilidade de substratos, inibio por acmulos de
produtos e inibio alostrica retroativas das primeiras enzimas da via pelos
ltimos intermedirios.

19. O ciclo de Krebs afeta o consumo de oxignio pela clula?
Sim. Como o oxignio tem um alto potencial de oxirreduo, ele o
aceptor de eltrons escolhido para receber eltrons do NADH do ciclo de
Krebs. A grande diferena de potencial entre as duas substncias ocasiona
uma grande produo de energia. Sem oxignio, o NADH reoxidado. O
rendimento, porm, passa de 38 para 2 ATP, e portanto, muito menos
eficiente. Por isso a preferncia pelo ciclo de Krebs.

20. Em que regio celular ocorre o ciclo de Krebs?
Nos eucariotos fotossintticos, quando em ambiente escuro, a
mitocndria o principal local de produo de ATP, enquanto que, sob a luz do
dia, os cloroplastos produzem a maior quantidade de ATP. A maioria dos
procariotos contm as enzimas do ciclo do cido ctrico em seu citosol e sua
membrana plasmtica desempenha um papel anlogo quele da membrana
mitocondrial interna na sntese de ATP.

21. Quais coenzimas reduzidas so produzidas? Qual o destino
metablico destas?
O NADH e o FADH2. Essas coenzimas, durante as transformaes
qumicas do ciclo de Krebs, servem para conservar a energia oriunda da
oxidao do acetil-CoA. Ao final do ciclo de Krebs, essas coenzimas so
utilizadas na cadeia respiratria (etapa da fosforilao oxidativa).

22. Defina fase aerbia e fase anaerbia do metabolismo de carboidratos.
O metabolismo aerbico dos carboidratos a queima da glicose na
presena de oxignio, produzindo CO2 e H2O e bastante energia em forma de
ATP segundo a reao:

C6H12O6 + 6O2 -> 6CO2 + 6H2O + 38ATP

O metabolismo anaerbico dos carboidratos a queima da glicose na
ausncia de oxignio, produzindo cido lctico e pouca energia em forma de
ATP segundo a reao:

C6H12O6 -> cido Lctico + 2ATP

23. Qual o balano energtico de cada uma dessas fases?
A fase anaerbia produz 2 ATP, enquanto que a aerbia produz 38.