AISLAMIENTO DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS EN SUPERFICIES VIVAS DE VENDEDORAS

DEL MERCADO EL PALOMAR

I. RESUMEN
el presente trabajo se realiz en los meses de mayo junio del 2014 tomndose muestras de
diferentes vendedoras del mercado el palomar en Arequipa. Donde se obtuvieron muestras
de vendedoras de vegetales, carnes y de comidas los cuales se sometieron a un lavado de
mano en caldo peptona donde se guardaron las bacterias, para el aislamiento y comprobacin
se cultiv en agar staphylococcus para luego realizar las pruebas de catalasa y coagulasa.
Los resultados obtenidos de las pruebas de catalasa y coagulasa nos indic que en las muestras
obtenidas de las vendedoras del palomar no presentaban Sthaphylococcus aureus, pero se
encontr Staphylococcus epidermidis.
Staphylococcus epidermidis al pertenecer a la flora bacteriana normal que se encuentra
presente en la piel y no poseer toxinas que d como resultado patologas en las personas no se
consideran peligrosas para la salud.
Por lo tanto nuestros resultados nos dieron como conclusin que las vendedoras participantes
en el muestreo al no presentar Staphylococcus aureus se puede decir que tienen condiciones
higinicas en el momento de la manipulacin de los alimentos.













II. INTRODUCCIN
Los riesgos de enfermedades transmitidas por alimentos dependen de la preparacin,
manipulacin y almacenamiento de estos, de la calidad de las materias primas, de los hbitos
alimentarios y de la produccin animal intensiva con concentrados contaminados
(6)
. Las cuales
constituyen un problema importante de salud pblica. En los pases industrializados, como los
Estados Unidos, se estima que cada ao ocurren 76 millones de casos de enfermedades
transmitidas por alimentos, 325.000 hospitalizaciones y 5.000 muertes
(5)
.
La venta de alimentos en la va pblica es un fenmeno de gran importancia sanitaria,
econmica y sociocultural, principalmente en las zonas urbanas de las ciudades de frica, Asia,
Amrica Latina y el Caribe. Esta actividad constituye un medio importante para obtener
ingresos, ya que los alimentos de venta ambulatoria son de bajo costo, siendo objeto de un
amplio consumo y, a menudo, representan una parte importante de la ingesta diaria de
alimentos de nios y adultos. No obstante, las caractersticas culturales y limitadas condiciones
de higiene generan factores de riesgo potencial para la salud
(1-4)
.
En el Per, las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA) representaron hasta 1990 el
35% del total de enfermedades transmisibles notificadas; debido a la presencia del brote de
clera, en 1991, el porcentaje de ETA se increment a 56%
(7)
.
Considerando el porcentaje de enfermedades transmitidas por alimentos (ETA) que tienen
relacin con las inadecuadas formas de manipulacin y preparacin de los alimentos, hacen
que sean susceptibles a la contaminacin cruzada por Staphylococcus aureus y facilitan su
multiplicacin y la produccin de toxinas. Frecuentemente la preparacin de estos se realiza
con anticipacin, exponindolos a tiempos prolongados y a temperaturas que favorecen el
crecimiento del microorganismo
(10)
.
III. OBJETIVOS

3.1 Objetivo General
Aislar Staphylococcus aureus en superficies vivas

3.2 Objetivos especficos
Realizar el cultivo en agar staphylococcus
comprobar las colonias de los cultivos.




IV. REVISIN BIBLIOGRFICA
Las colonias de S. aureus son circulares, suaves, hmedas, convexas, con un dimetro entre 2-3
mm, gris oscuro o negras brillantes, frecuentemente con un borde coloreado (blanco plido)
rodeadas de una zona opaca y una zona clara que se extiende alrededor del medio, tienen
consistencia cremosa a gomosa, cuando se tocan con el filamento. A veces, se pueden
encontrar cepas no lipolticas de apariencia similar pero sin zonas opacas y claras alrededor de
la colonia. En alimentos congelados que han sido almacenados por largos perodos de tiempo
las colonias sospechosas presentan una coloracin negra menos intensa que las tpicas,
pueden ser rugosas y de textura seca, los Staphylococcus segn su forma de divisin y
agrupacin, se integran en dos familias (Micrococcaceae y Deicrococcaceae) y otros gneros
con personalidad propia como el gnero Streptococcus. La familia Micrococcaceae que tiene
inters mdico, incluye aquellos que se agrupan de forma irregular o en ttradas y est
constituida por los gneros Staphylococcus, Micrococcus, Planococcus y Stomatococcus.
CONCEPTO Y CLASIFICACION
Los Staphylococcus son cocos gram positivos de 0.5-1 um de dimetro, inmviles, aerobios y
anaerobios facultativos, caracterizados en que se agrupan de forma irregular en racimos,
producen catalasa y descomponen los azucares por fermentacin. Son bacterias poco
exigentes, que se cultivan fcilmente en medios comunes y presentan cierta resistencia a los
agentes externos, por cuyo motivo se pueden encontrar en la naturaleza, especialmente en el
medio ambiente que rodea al hombre, formando parte de la flora normal de la piel y mucosas
e interviniendo en diversos procesos patgenos, sobre todo en infecciones supuradas e
intoxicaciones alimentarias.
CLASIFICACIN
Se pueden distinguir las siguientes especies:
S. aureus, prototipo de los estafilococos patgenos. Es el agente causal de la mayora
de las infecciones; se caracteriza por producir coagulasa o fermentar el manitol,
elaborar diversas toxinas, en especial la toxina A, y sintetizar en su mayora un
pigmento amarillo dorado, no difusible, que colorea a las colonias.
S. epidermidis y S. saprophyticus, prototipos de los estafilococos oportunistas. Son
grmenes comensales de la piel o libres en el medio ambiente, que en ocasiones
pueden intervenir en procesos patgenos. Se caracterizan por no producir coagulasa ni
toxina A, no fermentan el manitol y elaboran en su mayora un pigmento blanco
aporcelanado.
La importancia de los estafilococos deriva en su aumento progresivo de resistencia a
los antibiticos, sobre todo en el medio hospitalario, que junto con su resistencia a los
agentes externos les permite difundir y producir infecciones y brotes epidmicos
(infecciones hospitalarias), que plantean serios problemas epidemiolgicos y
teraputicos.

V. MARCO TEORICO

5.1 STAPHYLOCOCCUS AUREUS
La estructura antignica de S. aureus es compleja y mal conocida. En la pared celular se han
demostrado cerca de 30 antgenos siendo los ms importantes:
Polisacarido A, constituido por cidos teicoicos, polmeros de fosfato de ribitol, que estn
unidos al peptidoglicano por enlaces covalentes. Son antignicos e inducen la aparicin de
anticuerpos, y se ha demostrado un aumento de anticuerpos antirrubitol en los casos de
endocarditis estafiloccica.
Protena A, se encuentra en la pared celular y puede liberarse en el medio. Presenta la
propiedad de unirse a la extremidad Fe de las IgG normales y a la extremidad F(ab)2 de las IgG
especficas, as como de activar el complemento.
Existen, adems, en la pared celular un nmero indeterminado de protenas responsables de la
tipo especificidad. Tambin se han aislado cierto nmero de cepas mucoides capsuladas,
especialmente en los animales, cuya composicin e importancia no se conocen. Adems de sus
antgenos tipoespecificos se ha podido subdividir en tipos siguiendo dos criterios: a) En
serotipos, mediante el empleo de sueros tipoespecificos, y se ha clasificado en 18 serotipos. b)
En fagotitos o lisotipos, por el estudios de la sensibilidad de la cepa frente a un grupo de fagos
seleccionados. Se conocen ms de 100 fagotipos que por necesidades prcticas se han reunido
en 4 grupos y un grupo no clasificado.
VI. MATERIALES Y MTODOS
6.1 Materiales
6.1.1 Material biolgico
Muestras de manipuladores de alimentos
6.1.2 Materiales de laboratorio
sangre
Agua oxigenada
Incubadora, regulada a una temperatura de 37C
Placas de Petri con agar Staphylococcus
Gradillas para tubos de ensayo
Varillas de vidrio, estriles
Lminas porta objeto
Tubos de ensayo para la prueba de la coagulasa
micropipetas
Equipos de uso comn en el laboratorio (asa de siembra, mechero, etc)


6.2 Metodologa

6.2.1 Obtencin de la muestra
Se tomaron muestras de las manos de manipuladores de alimentos con o sin
guantes que estn en contacto con los alimentos destinados al consumo
directo. Para esto se aplic la tcnica de lavado de manos en caldo peptona,
que se hecho sobre las manos del operario de alimento. Luego el caldo de
peptona fue guardado en bolsas con cierre hermtico para su transporte y
fueron llevados al laboratorio para su evaluacin correspondiente, luego
fueron refrigerados para su conservacin.
6.2.2 Aislamiento en medios selectivos
Luego de haber llevado las bolsas con el caldo de peptona al laboratorio se
procedi al sembrado utilizando el mtodo de siembra con cayado en agar
staphyllococcus , se sac 1/10 de mililitro y fue esparcido por la superficie del
agar. Se realizaron 3 cultivos de cada bolsa, luego se procedi a incubar por 24
horas.
6.2.3 Prueba de la catalasa

Con un asa de siembra, se tom una colonia sospechosa del medio Agar
staphyllococcus despus de su incubacin, y se coloc sobre un portaobjetos,
adicionando una o dos gotas de perxido de hidrgeno al 30% y se luego se
mesclo.
6.2.4 Prueba de la coagulasa
Se aadi 0,5 ml de plasma con 1 ml de suero fisiolgico al 0.9% luego se
aadi las colonias sospechosas y se incubo a 37C por 4-6 horas. Se examin
los tubos inclinndolos suavemente para observar la formacin de un cogulo
firme para determinar el grado de positividad de la prueba.

VII. RESULTADOS

Cultivo en agar staphyllococcus
En el cultivo se encontraron presencia de colonias de coloraciones amarillas y blancas



Foto N1: preparacin de los cultivos













Foto N2: cultivos realizados de los vendedores de alimentos












1
2
3
V. vegetales
V. carnes
V. comida
Pruebas de comprobacin:
o Catalasa: las colonias obtenidas se sometieron a la prueba dando como resultado
(+).
Foto N3: prueba de catalasa positiva










o Coagulasa: la prueba dio como resultado negativo.
Foto N4: preparacin de la prueba de coagulasa












1
2
4 3
Foto N5: coagulasa negativa








Foto N : tincin gram de las colonias obtenidas

















V. carnes
V. comida
V. verduras
VIII. DISCUSIN
La venta de productos alimenticios como carne fresca, vegetales o comidas preparadas en
mercados tienen una gran aceptacin por el pblico en general por lo tanto los productos
comestibles as como las personas que lo manipulan deben tener un control higinico para
prevenir patologas producidas por bacterias.
El estudio realizado en las vendedoras del mercado el palomar se bas en la presencia de
una bacteria que se encuentra en la piel y que produce una serie de citotoxinas como
hemolisina- , hemolisina- , hemolisina- , hemolisina-P-V. asi como otras enterotoxinas que
tienen como consecuencia una serie de patologas como infecciones cutneas y de las
mucosas, abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o neumona,
enfermedades gstricas etc.
La ausencia de S. aureus en los resultados obtenidos nos indica una adecuado control higinico
al momento de manipular los alimentos, por el contrario la presencia de S. epidermidis no
presenta gran importancia por ser parte de la flora bacteriana de la piel y no poseer las toxinas
presentes en S. aureus.
IX. CONCLUSIONES
la ausencia de S. aureus en los cultivos realizados nos lleva a concluir que las vendedoras del
mercado el palomar cumplen con las normas higinicas que deben mantener al manipular
los productos alimenticios que son puestos a la venta.






X. BIBLIOGRAFA

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Venta Callejera. Volumen 17/18. Roma; 1996.
2. Organizacin Panamericana de Salud/Organizacin Mundial de la Salud. Evaluacin del
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Amrica Latina. Gua Tcnica para el estudio; 1994.
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7. Evaluacin de riesgo microbiolgico en superficies inertes y vivas de manipuladores en
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8. Gua tcnica sobre criterios y procedimientos para el examen microbiolgico de
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