Agua y pH

Peter J. Kennelly, PhD y Victor W. Rodwell, PhD

O B J E T I V O S
Despus de estudiar
este captulo, usted debe
ser capaz de:
Describir las propiedades del agua que explican su tensin de superfcie,
viscosidad, estado lquido a temperatura ambiente, y poder solvente.
Usar frmulas estructurales para representar varios compuestos orgnicos
que pueden servir como donadores de enlace de hidrgeno o como aceptores
del mismo.
Explicar el papel que desempea la entropa en la orientacin, en un ambiente
acuoso, de las regiones polar y no polar de macromolculas.
Indicar las contribuciones cuantitativas de los puentes de sal, las interacciones
hidrofbicas y las fuerzas de van der Waals a la estabilidad de las macromolculas.
Explicar la relacin del pH con la acidez, alcalinidad y los determinantes
cuantitativos que caracterizan los cidos dbiles y fuertes.
Calcular el cambio de pH que acompaa a la adicin de una cantidad dada
de cido o base a una solucin amortiguada.
Describir qu hacen los amortiguadores, cmo lo hacen, y las condiciones en
las cuales un amortiguador es ms efcaz en condiciones fsiolgicas o en otras
condiciones.
Ilustrar cmo la ecuacin de Henderson-Hasselbalch puede usarse para calcular
el cambio neto de un polielectrlito a un pH dado.
C A P T U L O
7
IMPORTANCIA BIOMDICA
El agua es el componente qumico predominante de los organis-
mos vivos. Sus singulares propiedades fsicas, que incluyen la ca-
pacidad para solvatar una amplia gama de molculas orgnicas
e inorgnicas, se derivan de su estructura bipolar y de su excep-
cional capacidad para formar enlaces de hidrgeno. La manera
en que el agua interacta con una biomolcula solvatada influ-
yesobre la estructura de ambas, tanto de la biomolcula como
del agua. El agua, un excelente nuclefilo, es un reactivo o un
producto en muchas reacciones metablicas. La regulacin del
equilibrio del agua depende de mecanismos hipotalmicos que
controlan la sed, de la hormona antidiurtica (ADH), de la re-
tencin o excrecin de agua por los riones, y de la prdida por
evaporacin. La diabetes inspida nefrognica, que comprende
la incapacidad para concentrar orina o para hacer ajustes a cam-
bios sutiles de la osmolaridad del lquido extracelular, se produ-
ce por falta de capacidad de respuesta de los osmorreceptores de
los tbulos renales a la ADH.
El agua tiene una propensin leve a disociarse hacia iones
hidrxido y protones. La concentracin de protones, o acidez,
de soluciones acuosas por lo general se reporta usando la escala
de pH logartmica. El bicarbonato y otros amortiguadores en cir-
cunstancias normales mantienen el pH del lquido extracelular
entre 7.35 y 7.45. Las alteraciones sospechadas del equilibrio
acidobsico se verifican al medir el pH de la sangre arterial y el
contenido de CO
2
de la sangre venosa. Las causas de acidosis (pH
sanguneo <7.35) son cetosis diabtica y acidosis lctica. La alca-
losis (pH >7.45) puede presentarse despus de vmitos de con-
tenido gstrico cido.
EL AGUA ES UN SOLVENTE
BIOLGICO IDEAL
Las molculas de agua forman dipolos
Una molcula de agua es un tetraedro irregular, un tanto asim-
trico, con oxgeno en su centro (figura 2-1). Los dos hidrgenos
y los electrones no compartidos de los dos orbitales sp
3
-hibrida-
dos restantes ocupan los ngulos del tetraedro. El ngulo de 105
grados entre los hidrgenos difiere un poco del ngulo tetra-
drico ideal, de 109.5 grados. El amoniaco tambin es tetradrico,
con un ngulo de 107 grados entre sus hidrgenos. El tomo de
2
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8 CAPTULO 2 Agua y pH
oxgeno fuertemente electronegativo en el agua empuja los elec-
trones en direccin contraria a los ncleos de hidrgeno, lo que
los deja con una carga positiva parcial, mientras que sus dos pa-
res de electrones no compartidos constituyen una regin de car-
ga negativa local.
Una molcula con carga elctrica distribuida de manera
asimtrica alrededor de su estructura se denomina un dipolo.
La constante dielctrica alta del agua depende de su dipolo
fuerte. Como se describe de manera cuantitativa mediante la ley
de Coulomb, la fuerza de la interaccin F entre partculas que
tienen carga opuesta es inversamente proporcional a la constan-
te dielctrica del medio circundante. La constante dielctrica
para un vaco es la unidad; para el hexano es 1.9; para el etanol,
24.3, y para el agua, 78.5. Por ende, el agua disminuye mucho la
fuerza de atraccin entre especies cargadas y polares en compa-
racin con ambientes libres de agua que tienen constantes di-
elctricas ms bajas. Su fuerte dipolo y constante dielctrica alta
permiten al agua disolver grandes cantidades de compuestos car-
gados, como las sales.
Las molculas de agua forman
enlaces de hidrgeno
Un ncleo de hidrgeno parcialmente desprotegido, unido de
manera covalente a un tomo de oxgeno o de nitrgeno que ex-
trae electrn, puede interactuar con un par de electrones no com-
partidos sobre otro tomo de oxgeno o nitrgeno para formar
un enlace de hidrgeno. Dado que las molculas de agua tienen
estas dos caractersticas, la formacin de enlaces de hidrgeno
favorece la autoasociacin de molculas de agua hacia disposi-
ciones ordenadas (figura 2-2). La formacin de enlaces de hi-
drgeno ejerce una profunda influencia sobre las propiedades
fsicas del agua, lo que explica su viscosidad, tensin superficial
y punto de ebullicin excepcionalmente altos. En promedio,
cada molcula en agua lquida se asocia por medio de enlaces de
hidrgeno con otras 3.5. Estos enlaces son hasta cierto punto
dbiles y transitorios, con una vida media de unos pocos nano-
segundos o menos. La rotura de un enlace de hidrgeno en agua
lquida slo requiere alrededor de 4.5 kcal/mol, menos de 5% de
la energa necesaria para romper un enlace OH covalente.
La formacin de enlaces de hidrgeno permite al agua di-
solver muchas biomolculas orgnicas que contienen grupos
funcionales que pueden participar en la formacin de enlaces de
hidrgeno. Los tomos de oxgeno de aldehdos, cetonas y ami-
das, por ejemplo, proporcionan pares solitarios de electrones
que tienen la capacidad de servir como aceptores de hidrgeno.
Los alcoholes, los cidos carboxlicos y las aminas pueden servir
como aceptores de hidrgeno y como donadores de tomos de
hidrgeno desprotegidos para formacin de enlaces de hidrge-
no (figura 2-3).
LA INTERACCIN CON AGUA
INFLUYE SOBRE LA ESTRUCTURA
DE BIOMOLCULAS
Los enlaces covalentes y no covalentes
estabilizan molculas biolgicas
El enlace covalente es la mayor fuerza que mantiene juntas a las
molculas (cuadro 2-1). Las fuerzas no covalentes, aunque son
de menor magnitud, hacen contribuciones importantes a la estruc-
tura, estabilidad y competencia funcional de macromolculas en
2e
H
H
105
2e
FIGURA 21 La molcula de agua tiene geometra tetradrica.
FIGURA 22 Izquierda: asociacin de dos molculas de agua
dipolares mediante un enlace de hidrgeno (lnea punteada).
Derecha: agrupacin de cuatro molculas de agua con enlaces de
hidrgeno. Note que el agua puede servir de manera simultnea como
donador y como aceptor de hidrgeno.
H
H
O O CH
2
CH
3
H
O O CH CH
3
H
H
CH
2
CH
3
H O
R
R
N
II
III
C
R
R
I
2
FIGURA 23 Los grupos polares adicionales participan
en la formacin de enlaces de hidrgeno. Se muestran los enlaces
de hidrgeno formados entre alcohol y agua, entre dos molculas de
etanol, y entre el pptido carbonilo oxgeno y el pptido nitrgeno
hidrgeno de un aminocido adyacente.
O
H H
H
H
O
O
H
O
H H
H
H O
H
O
H
O
H H
H
CUADRO 21 Energas de enlace para tomos
de importancia biolgica
Tipo
de enlace
Energa
(kcal/mol)
Tipo de
enlace
Energa
(kcal/mol)
OO 34 O==O 96
SS 51 CH 99
CN 70 C==S 108
SH 81 OH 110
CC 82 C==C 147
CO 84 C==N 147
NH 94 C==O 164
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CAPTULO 2 Agua y pH 9
las clulas vivas. Estas fuerzas, que pueden ser de atraccin o de
repulsin, comprenden interacciones tanto dentro de la biomo-
lcula como entre la misma y el agua, que es el principal com-
ponente del ambiente circundante.
Las biomolculas se pliegan
para colocar a grupos polares
y cargados sobre sus superficies
Casi todas las biomolculas son anfipticas; esto es, poseen re-
giones con alto contenido de grupos funcionales cargados o po-
lares, as como regiones con carcter hidrofbico. Las protenas
tienden a plegarse con los grupos R de aminocidos con cade-
nas laterales hidrofbicas en el interior. Los aminocidos con
cadenas laterales de aminocidos cargadas o polares (p. ej., argi-
nina, glutamato, serina) por lo general estn presentes sobre la
superficie en contacto con agua. Un modelo similar prevalece en
una bicapa de fosfolpidos, donde los grupos con cabeza cargada
de fosfatidil serina o fosfatidil etanolamina tienen contacto con
agua, mientras que sus cadenas laterales de cido (acilo) graso
hidrofbicas se agrupan juntas y excluyen el agua. Este modelo
maximiza las oportunidades para la formacin de interacciones
de carga-dipolo, dipolo-dipolo, y formacin de enlaces de hi-
drgeno, favorables desde el punto de vista energtico entre gru-
pos polares sobre la biomolcula y el agua. Tambin minimiza
contactos desfavorables desde el punto de vista energtico entre
el agua y grupos hidrofbicos.
Interacciones hidrofbicas
El trmino interaccin hidrofbica (o hidrfoba) alude a la ten-
dencia de compuestos no polares a autoasociarse en un ambiente
acuoso. Tal autoasociacin no est impulsada por atraccin mu-
tua ni por lo que a veces es denominado de manera incorrecta
como enlaces hidrofbicos. La autoasociacin minimiza la dis-
rupcin de interacciones desfavorables desde el punto de vista
energtico entre las molculas de agua circundantes.
Dado que los hidrgenos de grupos no polares como los
grupos metileno de hidrocarburos no forman enlaces de hidr-
geno, afectan la estructura del agua que los rodea. Las molculas
de agua adyacentes a un grupo hidrofbico tienen restriccin en
cuanto al nmero de orientaciones (grados de libertad) que les
permiten participar en el nmero mximo de enlaces de hidr-
geno favorables desde el punto de vista energtico. La formacin
mxima de mltiples enlaces de hidrgeno, que maximiza la en-
talpa, slo puede mantenerse al aumentar el orden de las mo-
lculas de agua adyacentes, con un decremento acompaante de
la entropa.
La segunda ley de la termodinmica establece que la ener-
ga libre ptima de una mezcla de hidrocarburo-agua est en
funcin tanto de la entalpa mxima (por formacin de enlaces
de hidrgeno) como de la entropa mnima (grados mximos de
libertad). De este modo, las molculas no polares tienden a for-
mar gotitas a fin de minimizar el rea de superficie expuesta y
reducir el nmero de molculas de agua cuya libertad de movi-
miento se restringe. De modo similar, en el ambiente acuoso de
la clula viva las porciones hidrofbicas de biopolmeros tienden
a estar sepultadas dentro de la estructura de la molcula o den-
tro de una bicapa lpida, lo que minimiza el contacto con agua.
Interacciones electrostticas
Las interacciones entre grupos cargados ayudan a dar forma a la
estructura biomolecular. Las interacciones electrostticas entre
grupos con carga opuesta dentro de biomolculas o entre las
mismas se denominan puentes de sal, los cuales tienen fuerza
comparable a la de los enlaces de hidrgeno, pero actan en dis-
tancias mayores; por ende, a menudo facilitan el enlace de mo-
lculas y iones cargados a protenas y cidos nucleicos.
Fuerzas de van der Waals
Surgen por atracciones entre dipolos transitorios generados por
el movimiento rpido de electrones de todos los tomos neutros.
Las fuerzas de van der Waals mucho ms dbiles que los enla-
ces de hidrgeno, pero abundantes disminuyen en trminos
de la sexta potencia de la distancia que separa a los tomos (fi-
gura 2-4). De este modo, actan en distancias muy cortas, por lo
general de 2 a 4 .
Fuerzas mltiples estabilizan
biomolculas
La doble hlice de DNA ilustra la contribucin de mltiples
fuerzas a la estructura de biomolculas. Si bien cada cadena de
DNA individual se mantiene junta por medio de enlaces cova-
lentes, las dos hebras de la hlice se mantienen unidas de mane-
ra exclusiva mediante interacciones no covalentes. Estas ltimas
comprenden enlaces de hidrgeno entre bases de nucletido
(formacin de pares de bases de Watson-Crick) e interacciones
de van der Waals entre las bases de purina y pirimidina apiladas.
La doble hlice presenta los grupos fosfato cargados y grupos
hidroxilo polares de los azcares ribosa del esqueleto del DNA a
agua mientras que sepulta dentro las bases nucletido relativa-
mente hidrofbicas. El esqueleto extendido maximiza la distan-
cia entre fosfatos que tienen carga negativa, lo que minimiza
interacciones electrostticas desfavorables.
.50
0.25
0
.25
.50
3.0 4.0 5.0
A
6.0 7.0
R ()
8.0
E
n
e
r
g

a

d
e

i
n
t
e
r
a
c
c
i

n

(
k
c
a
l

m
o
l

1
)
FIGURA 24 La fuerza de las interacciones de van der Waals
vara con la distancia, R, entre especies que interactan. La fuerza
de interaccin entre especies que interactan aumenta con la distancia
decreciente hasta que son separadas por la distancia de contacto de
van der Waals (vase la flecha marcada con A). A continuacin
sobreviene repulsin debida a la interaccin entre los electrones de
cada tomo o molcula. Si bien las interacciones de van der Waals son
en extremo dbiles, el efecto acumulativo es considerable para
macromolculas como DNA y protenas con muchos tomos en
contacto estrecho.
02 Murray_C02.indd 9 11/15/12 12:06 PM
10 CAPTULO 2 Agua y pH
EL AGUA ES UN EXCELENTE
NUCLEFILO
Las reacciones metablicas a menudo comprenden el ataque por
pares solitarios de electrones que residen sobre molculas ricas
en electrones llamadas nuclefilos sobre tomos con pocos elec-
trones llamados electrfilos. Los nuclefilos y electrfilos no ne-
cesariamente poseen una carga negativa o positiva formal. El
agua, cuyos dos pares solitarios de electrones sp
3
tienen una car-
ga negativa parcial (figura 2-1), es un excelente nuclefilo. Otros
nuclefilos de importancia biolgica son los tomos de oxgeno
de fosfatos, alcoholes y cidos carboxlicos; el azufre de tioles; el
nitrgeno de aminas, y el anillo imidazol de la histidina. Los elec-
trfilos comunes son los carbonos carbonilo en amidas, steres,
aldehdos y cetonas, y los tomos de fsforo de fosfosteres.
El ataque nucleoflico por agua en forma tpica origina la
divisin de los enlaces amida, glucsido o ster que mantienen
juntos a los biopolmeros. Este proceso recibe el nombre de hi-
drlisis. A la inversa, cuando unidades de monmeros se unen
para formar biopolmeros como protenas o glucgeno, el agua
es un producto, por ejemplo, durante la formacin de un enlace
peptdico entre dos aminocidos:
Si bien la hidrlisis es una reaccin favorecida desde el pun-
to de vista termodinmico, los enlaces amida y fosfoster de poli-
pptidos y oligonucletidos son estables en el ambiente acuoso de
la clula. Esta conducta al parecer paradjica refleja el heho
deque la termodinmica que rige el equilibrio de una reaccin
no determina el ndice al cual proceder. En las clulas, catal-
ticos protena llamados enzimas aceleran el ndice de reacciones
hidrolticas cuando es necesario. Las proteasas catalizan la hi-
drlisis de protenas hacia los aminocidos que las componen,
mientras que las nucleasas catalizan la hidrlisis de los enlaces
fosfoster en el DNA y el RNA. Se requiere control cuidadoso de
las actividades de estas enzimas para asegurar que slo acten
sobre molculas blanco apropiadas en momentos apropiados.
Muchas reacciones metablicas
comprenden transferencia de grupo
Muchas de las reacciones enzimticas de las cuales dependen la
sntesis y desintegracin de biomolculas comprenden la trans-
ferencia de un grupo qumico G desde un donador D hacia un
aceptor A para formar un complejo de grupo aceptor, AG:

DG + A AG + D
Por ejemplo, la hidrlisis y la fosforlisis de glucgeno compren-
den la transferencia de grupos glucosilo a agua o a ortofosfato. La
constante de equilibrio para la hidrlisis de enlaces covalentes
favorece fuertemente la formacin de productos de divisin. Por
el contrario, en muchos casos las reacciones de transferencia de
grupo de las cuales depende la biosntesis de macromolculas
comprenden la formacin no favorecida termodinmicamente
de enlaces covalentes. Los catalticos de enzimas desempean
un papel crucial en la superacin de estas barreras en virtud de
su capacidad para enlazar directamente entre s dos reacciones
que en circunstancias normales estn separadas. Al unir una re-
accin de transferencia de grupo energticamente desfavorable
con una reaccin termodinmicamente favorable, como la hi-
drlisis de ATP, puede generarse una nueva reaccin acoplada
cuya carga general neta en energa libre favorece la sntesis de
biopolmero.
Dado el carcter nucleoflico del agua y su alta concentra-
cin en las clulas, por qu los biopolmeros como las protenas
y el DNA son relativamente estables?, adems, de qu modo la
sntesis de biopolmeros puede ocurrir en un ambiente acuoso,
en apariencia prohidroltico? Las propiedades de las enzimas
son fundamentales para ambas preguntas. En ausencia de cat-
lisis enzimtica, incluso las reacciones muy favorecidas desde el
punto de vista termodinmico no necesariamente tienen lugar
con rapidez. El control preciso y diferencial de la actividad en-
zimtica, as como el secuestro de enzimas en organelos especfi-
cos, determinan en qu condiciones fisiolgicas un biopolmero
dado se sintetizar o degradar. Los biopolmeros recin sinteti-
zados no se hidrolizan de inmediato, ya que los sitios activos de
enzimas biosintticas secuestran sustratos en un ambiente del
cual es factible excluir al agua.
Las molculas de agua muestran
una tendencia leve pero importante
a disociarse
La capacidad del agua para ionizarse, si bien es leve, tiene impor-
tancia fundamental para la vida. Dado que el agua tiene la capa-
cidad de actuar como un cido y como una base, su ionizacin
puede representarse como una transferencia de protn intermo-
lecular que forma un ion hidronio (H
3
O
+
) y un ion hidrxido
(OH

):
H O H O H O OH
2 2
+ +
+
3

El protn transferido en realidad se relaciona con una agrupa-

cin de molculas de agua. Los protones existen en solucin no
slo como H
3
O
+
, sino tambin como multmeros tipo H
5
O
2
+
y
H
7
O
3
+
. Sin embargo, el protn se representa de manera sistem-
tica como H
+
, aun cuando de hecho est muy hidratado.
Dado que los iones hidronio e hidrxido se recombinan de
manera continua para formar molculas de agua, es imposible
declarar que un hidrgeno u oxgeno individual est presente
como un ion o formando parte de una molcula de agua. En un
instante es un ion, pero al siguiente forma parte de una molcula
de agua; de modo que no se consideran iones o molculas indi-
viduales. En lugar de eso, se hace referencia a la probabilidad de
que en cualquier instante en el tiempo un hidrgeno estar
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CAPTULO 2 Agua y pH 11
presente como ion o como parte de una molcula de agua. Dado
que 1 g de agua contiene 3.46 10
22
molculas, la ionizacin del
agua puede describirse de manera estadstica. Declarar que la
probabilidad de que un hidrgeno exista como un ion es de 0.01
significa que, en cualquier momento dado en el tiempo, un to-
mo de hidrgeno tiene 1 probabilidad en 100 de ser un ion pero
99 probabilidades en 100 de formar parte de una molcula de
agua. La probabilidad real de que un tomo de hidrgeno en agua
pura exista como un ion hidrgeno es de alrededor de 1.8 10
9
.
De este modo, la probabilidad de que forme parte de una mo-
lcula de agua es de casi la unidad. Dicho de otra manera, por
cada ion hidrgeno y cada ion hidrxido en agua pura, hay
1.8mil millones o 1.8 10
9
molculas de agua. Sin embargo, los
iones hidrgeno y los iones hidrxido contribuyen de manera
importante a las propiedades del agua.
Para la disociacin del agua,
K =
+
H OH
H O
2

[ ]
donde los corchetes representan concentraciones molares (es-
trictamente hablando, actividades molares) y K es la constante
de disociacin. Puesto que un mol de agua pesa 18 g, 1 litro (L)
(1 000 g) de agua contiene 1 000 18 = 55.56 mol. As, el agua
pura es 55.56 molar. Dado que la probabilidad de que un hidr-
geno en agua pura exista como un ion hidrgeno es de 1.8 10
9
,
la concentracin molar de iones H
+
(o de iones OH

) en agua
pura es el producto de la probabilidad, 1.8 10
9
, veces la con-
centracin molar de agua, 55.56 mol/L. El resultado es 1.0 10
7

mol/L.
Ahora es posible calcular K para el agua pura:
K = =
= =
+
H OH
H O
10 10
55.56
2
7 7

[ ]

[ ]

0 018 10 1
14
. ..8 10
16

mol/L
La concentracin molar del agua, 55.56 mol/L, es demasiado
grande como para que la disociacin la afecte de manera signifi-
cativa, de modo que se considera que, en esencia, es constante.
As, esta constante puede incorporarse en la constante de diso-
ciacin K para proporcionar una nueva y til constante K
w
(W,
de water, agua) llamada el producto ion para el agua. La rela-
cin entre K
w
y K se muestra a continuacin:
H OH
H O
mol/L
H O H OH
+
2
w 2
+
K
K K
=

[ ]
=
= ( )[ ] =

1 8 10
16
.

=
( )( )
= (

mol/L mol/L
mol/L
1 8 10 55 56
1 00 10
16
14
. .
. )
2
Note que las dimensiones de K son mol por litro y las de K
w
son
mol
2
por L
2
. Como su nombre lo sugiere, el producto ion K
w
es
igual desde el punto de vista numrico al producto de las con-
centraciones molares de H
+
y OH
-
:
K
w
H OH =
+

A 25C, K
w
= (10
7
)
2
, o 10
14
(mol/L)
2
; a temperaturas por debajo
de 25C, K
w
es un poco menor de 10
14
, en tanto que a tempera-
turas superiores a 25C es un poco mayor de 10
14
. Dentro de las
limitaciones declaradas del efecto de la temperatura, K
w
es igual
a 10
14
(mol/L)
2
para todas las soluciones acuosas, incluso solu-
ciones de cidos o bases. Se usa K
w
para calcular el pH de so-
luciones cidas y bsicas.
EL pH ES EL LOGARITMO
NEGATIVO DE LA CONCENTRACIN
DE ION HIDRGENO
El trmino pH fue introducido en 1909 por Srensen, quien lo
defini como el logaritmo negativo de la concentracin de ion
hidrgeno:
pH H =
+
log

Esta definicin, si bien no es rigurosa, es suficiente para muchos

propsitos bioqumicos; a fin de calcular el pH de una solucin:
1. Se calcula la concentracin de ion hidrgeno [H
+
].
2. Se calcula el logaritmo base 10 de [H
+
].
3. El pH es el negativo del valor que se encuentra en el paso 2.
Por ejemplo, para agua pura a 25C,
pH H = = = =
+
log log .

( ) 10 7 7 0
7
Este valor tambin se conoce como la potencia (power [ingls],
puissant [francs], o potennz [alemn]) del exponente, de ah el
uso de p.
Los valores de pH bajos corresponden a concentraciones
altas de H
+
, y los valores de pH altos corresponden a concentra-
ciones bajas de H
+
.
Los cidos son donadores de protones y las bases son acep-
tores de protones. Los cidos fuertes (p. ej., HCl, H
2
SO
4
) se
diso cian por completo hacia aniones y protones, incluso en so-
luciones fuertemente acdicas (pH bajo); por su parte, los cidos
dbiles se disocian slo en parte en soluciones acdicas. De
modo similar, las bases fuertes (p. ej., KOH, NaOH) no as las
bases dbiles (p. ej., Ca[OH]
2
) estn por completo disociadas
a pH alto. Muchas sustancias bioqumicas son cidos dbiles.
Las excepciones son los intermediarios fosforilados, cuyo grupo
fosforilo contiene dos protones disociables, el primero de los
cuales es fuertemente acdico. Los ejemplos que siguen ilustran
cmo calcular el pH de soluciones cidas y bsicas.
Ejemplo 1: Cul es el pH de una solucin cuya concentra-
cin de ion hidrgeno es de 3.2 10
4
mol/L?
pH H =
=
=
+
log
log .
log . log

( )
( ) ( )

3 2 10
3 2 10
4
4

3.5
= +
=
0 5 4 0 . .
Ejemplo 2: Cul es el pH de una solucin cuya concentra-
cin de ion hidrxido es de 4.0 10
4
mol/L? Primero se define
una cantidad pOH que es igual a log [OH

] y que puede deri-

varse a partir de la definicin de K
w
:
K
w
H OH = =
+

10
14
Por ende,
log log log H OH
+
+ =

10
14
o bien
pH pOH + = 14
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12 CAPTULO 2 Agua y pH
Para resolver el problema mediante este mtodo:
OH
pOH OH

=
=
=
=

( )
( )
4 0 10
4 0 10
4 0
4
4
.
log
log .
log . lo og
. .
.
10
0 60 4 0
3 4
4
= +
=
( )
Ahora:
pH pOH = =
=
14 14 3 4
10 6
.
.
Los ejemplos anteriores ilustran de que modo la escala
de pH logartmica facilita la emisin de reporte y la compa-
racin de concentraciones de ion hidrgeno que difieren por
rdenes de magnitud de otra, esto es, 0.00032 M (pH 3.5) y
0.000000000025 M (pH 10.6).
Ejemplo 3: Cules son los valores de pH de a) 2.0 10
2

mol/L KOH y de b) 2.0 10
6
mol/L KOH? El OH

surge a partir
de dos fuentes: KOH y agua. Dado que el pH est determinado
por el [H
+
] total (y el pOH por el [OH

] total), ambas fuentes

deben considerarse. En el primer caso, a), la contribucin del
agua al [OH

] total es insignificante; es imposible decir lo mis-

mo para el segundo caso, b):
Concentracin (mol/L)
(a) (b)
Molaridad de KOH 2.0 10
2
2.0 10
6
[OH

] proveniente de KOH 2.0 10

2
2.0 10
6
[OH

] proveniente de agua 1.0 10

7
1.0 10
7
[OH

] total 2.00001 10
2
2.1 10
6
Una vez que se ha llegado a una decisin acerca de la importan-
cia de la contribucin por el agua, es factible calcular el pH como
se mencion.
Los ejemplos anteriores suponen que la base fuerte KOH
est por completo disociada en solucin y que, entonces, la con-
centracin de iones OH

fue igual a la del KOH ms la presente

al principio en el agua. Esta suposicin es vlida para soluciones
diluidas de bases o cidos fuertes, no as para bases o cidos d-
biles. Dado que los electrlitos dbiles slo se disocian un poco
en solucin, es necesario usar la constante de disociacin para
calcular la concentracin de [H
+
] (o de [OH

]) producida por
una molaridad dada de un cido (o base) dbil antes de calcular
el [H
+
] total (o el [OH

] total) y despus el pH.

Los grupos funcionales que son cidos
dbiles tienen gran importancia
fisiolgica
Muchas sustancias bioqumicas poseen grupos funcionales que
son cidos o bases dbiles. Los grupos carboxilo, los grupos ami-
no y los steres fosfato, cuya segunda disociacin cae dentro del
rango fisiolgico, estn presentes en protenas y cidos nucleicos,
en casi todas las coenzimas y en casi todos los metabolitos inter-
mediarios. De este modo, el conocimiento de la disociacin de
cidos y bases dbiles es bsico para entender la influencia del
pH intracelular sobre la estructura y la actividad biolgica. Las
separaciones basadas en carga, como la electroforesis y la cro-
matografa de intercambio inico, tambin se entienden mejor
en trminos de la conducta de disociacin de grupos funcio-
nales.
La especie protonada (p. ej., HA o RNH
3
+
) recibe la deno-
minacin de cido, en tanto que la especie no protonada (p. ej.,
A

o RNH
2
) es su base conjugada. De modo similar, puede
hacerse referencia a una base (p. ej., A

o RNH
2
) y su cido
conjugado (p. ej., HA o RNH
3
+
). Los cidos dbiles represen-
tativos (columna izquierda), sus bases conjugadas (al centro) y
valores de pK
a
(columna derecha) incluyen los siguientes:
R CH COOH R CH p
R CH R CH p
H CO

2 3
2 2
2 2
2
4 5
9 10
COO
NH NH
K
K
a
a
=
=
+
3 3 3
2 4 4
2
6 4
7 2
HCO p
H PO HPO p

K
K
a
a
=
=
.
.
Las fuerzas relativas de cidos y bases dbiles se expresan en fun-
cin de sus constantes de disociacin. A continuacin se mues-
tran las expresiones para la constante de disociacin (K
a
) para
dos cidos dbiles representativos, RCOOH y RNH
3
+
.
R COOH R COO H
R COO H
R COOH
R R H
a

3 2
+
+ +
+
=
+
K

[ ]
+
K
a
R H
R
=
+
+

2
3
[ ]

Dado que los valores numricos de K

a
para cidos dbiles son n-
meros exponenciales negativos, K
a
se expresa como pK
a
, donde
p
a a
K K = log
Note que pK
a
se relaciona con K
a
como el pH se relaciona con
[H
+
]. Mientras ms fuerte es el cido, ms bajo es el valor de
pK
a
.
La pK
a
se usa para expresar las fuerzas relativas tanto de ci-
dos como de bases. Para cualquier cido dbil, su conjugado es
una base fuerte; de modo similar, el conjugado de una base fuer-
te es un cido dbil. Las fuerzas relativas de bases se expresan
en trminos de la pK
a
de sus cidos conjugados. Para compues-
tos poliprticos que contienen ms de un protn disociable, se
asigna un nmero subndice a cada disociacin, comenzando a
partir de la unidad en orden decreciente de acidez relativa. Para
una disociacin del tipo
R NH R NH H
3 2

+ +
+
la pK
a
es el pH al cual la concentracin del cido RNH
3
+
es
igual a la de la base RNH
2
.
A partir de las ecuaciones anteriores que relacionan la K
a

con el [H
+
] y con las concentraciones de cido no disociado y su
base conjugadas, cuando
R COO R COOH

[ ]
02 Murray_C02.indd 12 11/15/12 12:06 PM
CAPTULO 2 Agua y pH 13
o cuando
R NH R NH
2 3
[ ]

=
+
entonces
K
a
H =
+

De este modo, cuando las especies asociada (protonada) y diso-

ciada (base conjugada) estn presentes a iguales concentraciones,
la concentracin de ion hidrgeno [H
+
] prevaleciente es igual
desde el punto de vista numrico a la constante de disociacin,
K
a
. Si se toman los logaritmos de ambos lados de la ecuacin
anterior y se multiplican por 1, las expresiones quedan como
sigue:
K
K
a
a
H
H
=
=
+
+

log log
Dado que log K
a
se define como pK
a
y log [H
+
] define al
pH, la ecuacin puede reescribirse como
p pH
a
K =
esto es, la pK
a
de un grupo cido es el pH al cual las especies
protonada y no protonada estn presentes a concentraciones
iguales. La pK
a
para un cido puede determinarse al aadir 0.5
equivalente de lcali por equivalente de cido. El pH resultante
ser igual a la pK
a
del cido.
La ecuacin de Henderson-Hasselbalch
describe el comportamiento
de cidos dbiles y amortiguadores
La ecuacin de Henderson-Hasselbalch se deduce a continuacin.
Un cido dbil, HA, se ioniza como sigue:
HA H A
+
+

La constante de equilibrio para esta disociacin es

K
a
H A
HA
=

[ ]
+
La multiplicacin cruzada da
H A HA
a
+

= [ ] K
Se dividen ambos lados por [A

]:
H
HA
A
a
+

[ ]

K
Se toma el logaritmo de ambos lados:
log log
log log
H
HA
A
HA
A
a
a
+

1
]
[ ]

1
]

_
,

[ ]

1
]

K
K
Se multiplica todo por 1:

[ ]

log log log H

HA
A
a
= K
Se sustituye el pH y la pK
a
para log [H
+
] y log K
a
, respectiva-
mente; entonces:
pH p
HA
A
a
=

K
[ ]

log
La inversin del ltimo trmino elimina el signo de menos
y da la ecuacin de Henderson-Hasselbalch:
pH =pK + log
a
A

HA
[ ]
La ecuacin de Henderson-Hasselbalch tiene gran valor pre-
dictivo en equilibrios protnicos. Por ejemplo,
1. Cuando exactamente la mitad de un cido est neutra-
lizada, [A

] = [HA]. En estas condiciones,

pH pK
A
HA
pK pK
a a a
+ + log log

1
]
] [
+
1
1
0

_
,

Por ende, cuando la mitad de un cido est neutralizada,

pH = pK
a
.
2. Cuando la proporcin [A

]/HA] = 100:1,
pH p
A
HA
pH pK p
a
a a
+ =
=
K
K
log
log

] [
= + + (100/1) 2
3. Cuando la proporcin [A

]/HA] = 1:10,
pH pK p
a a
+ = ) ( K = + log (1/10) 1
Si la ecuacin se evala a proporciones de [A

]/[HA] que
varan desde 10
3
hasta 10
3
y se grafican los valores de pH calcu-
lados, el grfico resultante describe la curva de titulacin para
un cido dbil (figura 2-5).
Las soluciones de cidos dbiles
y sus sales amortiguan cambios del pH
Las soluciones de cidos o bases dbiles y sus conjugados mues-
tran amortiguacin, la capacidad para resistir a un cambio del
pH despus de la adicin de un cido o una base fuerte. Dado
que muchas reacciones metablicas se acompaan de liberacin
o captacin de protones, casi todas las reacciones intracelulares
estn amortiguadas. El metabolismo oxidativo produce CO
2
, el
anhdrido del cido carbnico, que de no amortiguarse produci-
ra acidosis grave. El mantenimiento de un pH constante com-
prende amortiguacin mediante fosfato, bicarbonato y protenas,
que aceptan o liberan protones para resistir a un cambio del
pH.En experimentos donde se usan extractos de tejido o enzi-
mas, el pH constante se mantiene por medio de la adicin de
amor tiguadores como MES (cido [2-N-morfolino]-etanosulf-
nico, pK
a
6.1), ortofosfato inorgnico (pK
a2
7.2), HEPES (ci-
doN-hidroxietilpiperazina-N'-2-etanosulfnico, pK
a
6.8) o Tris
(tris[hidroximetil]aminometano, pK
a
8.3). El valor de pK
a
res-
pecto al pH deseado es el principal determinante de cul amor-
tiguador se selecciona.
La amortiguacin se observa al usar un medidor de pH mien-
tras se titula un cido o una base dbil (figura 2-5). Tambin es
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14 CAPTULO 2 Agua y pH
factible calcular la desviacin de pH que acompaa a la adicin
de cido o base a una solucin amortiguada. En el ejemplo, la
solucin amortiguada (un cido dbil, pK
a
= 5.0, y su base con-
jugada) se encuentra, al inicio, en uno de cuatro valores de pH;
se calcula el cambio de pH producido cuando se aaden 0.1 mEq
de KOH a 1 mEq de cada solucin:
pH inicial 5.00 5.37 5.60 5.86
[A

]
inicial
0.50 0.70 0.80 0.88
[HA]
inicial
0.50 0.30 0.20 0.12
([A

]/[HA])
inicial
1.00 2.33 4.00 7.33
La adicin de 0.1 mEq de KOH produce
[A

]
fnal
0.60 0.80 0.90 0.98
[HA]
fnal
0.40 0.20 0.10 0.02
([A

]/[HA])
fnal
1.50 4.00 9.00 49.0
log ([A

]/[HA])
fnal
0.18 0.60 0.95 1.69
pH fnal 5.18 5.60 5.95 6.69
pH 0.18 0.60 0.95 1.69
Note que el cambio de pH por mEq de OH

aadido depende
del pH inicial. La solucin se resiste a cambios del pH con mayor
eficacia a valores de pH cercanos a la pK
a
. Una solucin de un
cido dbil y su base conjugada amortigua de manera ms efi-
caz en el rango de pH de pK
a
1.0 unidades de pH.
La figura 2-5 tambin ilustra la carga neta en una molcula
del cido como una funcin del pH. Una carga fraccionaria de
0.5 no significa que una molcula individual porta una carga
fraccionaria sino que la probabilidad es de 0.5 de que una mo-
lcula dada tenga una carga negativa de unidad en cualquier
momento dado en el tiempo. La consideracin de la carga neta
sobre macromolculas como una funcin del pH proporciona la
base para tcnicas de separacin, como la cromatografa de in-
tercambio de ion y la electroforesis.
La fuerza del cido depende
de la estructura molecular
Muchos cidos de inters biolgico poseen ms de un grupo que
se disocia. La presencia de carga negativa adyacente obstaculiza
la liberacin de un protn desde un grupo cercano, lo que au-
menta su pK
a
. Esto queda de manifiesto a partir de los valores de
pK
a
para los tres grupos que se pueden disociar de cido fosfri-
co y cido ctrico (cuadro 2-2). El efecto de la carga adyacente
disminuye con la distancia. La segunda pK
a
para el cido succ-
nico, que tiene dos grupos metileno entre sus grupos carboxilo,
es de 5.6, mientras que la segunda pK
a
para el cido glutrico,
que tiene un grupo metileno adicional, es de 5.4.
Los valores de pK
a
dependen
de las propiedades
del medio
La pK
a
de un grupo funcional tambin est profundamente in-
fluida por el medio circundante. El medio puede aumentar o
disminuir la pK
a
dependiendo de si el cido no disociado o su
base conjugada es la especie cargada. El efecto de la constante
dielctrica sobre la pK
a
se observa al aadir etanol al agua. La
pK
a
de un cido carboxlico aumenta, mientras que la de una
amina disminuye porque el etanol aminora la capacidad del agua
para solvatar una especie cargada. De este modo, los valores pK
a

de grupos que se estn disociando en los interiores de protenas,
estn muy afectados por su ambiente local, lo que incluye la pre-
sencia o ausencia de agua.
CUADRO 22 Fuerzas relativas de cidos
seleccionados de importancia biolgica
1
cidos monoprticos
Frmico pK 3.75
Lctico pK 3.86
Actico pK 4.76
Ion amonio pK 9.25
cidos diprticos
Carbnico pK
1
6.37
pK
2
10.25
Succnico pK
1
4.21
pK
2
5.64
Glutrico pK
1
4.34
pK
2
5.41
cidos triprticos
Fosfrico pK
1
2.15
pK
2
6.82
pK
3
12.38
Ctrico pK
1
3.08
pK
2
4.74
pK
3
5.40
1
Nota: los valores tabulados son los valores de pK
a
(log de la constante de
disociacin) de cidos monoprticos, diprticos y triprticos seleccionados.
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
2 3 4 5 6 7
pH
8
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
m
E
q

d
e

l
c
a
l
i

a

a
d
i
d
o
s

p
o
r

m
E
q

d
e

c
i
d
o
C
a
r
g
a

n
e
t
a
FIGURA 25 Curvas de titulacin para un cido del tipo HA.
El punto grueso, en el centro de la curva, indica la pK
a
de 5.0.
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CAPTULO 2 Agua y pH 15
RESUMEN
El agua forma agrupaciones enlazadas por hidrgeno consigo
misma y con otros donadores o aceptores de protones. Los enlaces
de hidrgeno explican la tensin superficial, viscosidad, estado
lquido a temperatura ambiente y el poder solvente del agua.
Los compuestos que contienen O o N pueden servir como
donadores o aceptores de enlaces de hidrgeno.
Las macromolculas intercambian enlaces de hidrgeno de
superficie interna por enlaces de hidrgeno con agua. Las fuerzas
entrpicas dictan que las macromolculas exponen regiones
polares a una interfaz acuosa y sepultan regiones no polares.
Los puentes de sal, las interacciones hidrofbicas y las fuerzas
de van der Waals participan en el mantenimiento de la estructura
molecular.
El pH es el logaritmo negativo de [H
+
]. Un pH bajo caracteriza a
una solucin cida, mientras que un pH alto denota una solucin
bsica.
La fuerza de cidos dbiles se expresa mediante la pK
a
, el
logaritmo negativo de la constante de disociacin de cido. Los
cidos fuertes tienen valores de pK
a
bajos, en tanto que los
dbiles muestran valores de pK
a
altos.
Los amortiguadores resisten a un cambio del pH cuando se
producen o consumen protones. La capacidad amortiguadora
mxima ocurre 1 unidad de pH a uno u otro lado de la pK
a
.
Los amortiguadores fisiolgicos son bicarbonato, ortofosfato
y protenas.
REFERENCIAS
Reese KM: Whence came the symbol pH. Chem & Eng News
2004;82:64.
Segel IM: Biochemical Calculations. Wiley, 1968.
Skinner JL: Following the motions of water molecules in aqueous
solutions. Science 2010;328:985.
Stillinger FH: Water revisited. Science 1980;209:451.
Suresh SJ, Naik VM: Hydrogen bond thermodynamic properties
of water from dielectric constant data. J Chem Phys
2000;113:9727.
Wiggins PM: Role of water in some biological processes. Microbiol
Rev 1990;54:432.
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