Universidade Federal de Ouro Preto

Escola de Farmcia
Disciplina: Estgio I Sade Pblica FAR 601
Docente: Dr. ngela Leo Andrade







RELATRIO DE AULAS PRTICAS I ESPECTOFOTOMETRIA




Gssica Couto Schaun
Jennifer Rezende




Ouro Preto Minas Gerais
Abril de 2014
1. INTRODUO
Os espectrofotmetros so equipamentos que medem a potncia das
energias radiantes envolvidas nas interaes dessas energias com os diversos
materiais. Atravs desses equipamentos possvel se medir a transmitncia e
a absorbncia de solues aquosas e dessa forma se encontrar as
concentraes das espcies absorventes em soluo a partir da construo de
curvas analticas. Os experimentos prticos realizados utilizando a tcnica da
espectrofotometria permitem determinar tambm o comprimento de onda onde
h maior absoro de luz por uma espcie e outras propriedades de uma
soluo aquosa, como a absortividade molar.


2. OBJETIVO
Utilizar espectrometria de absoro molecular para determinar comprimento
de onda de absoro mxima e calcular propriedades, como a absortividade
molar e a concentrao de diferentes solues aquosas a partir da construo
de curvas analticas.


3. PROCEDIMENTOS

3.1. Prtica 1: Varredura de curvas de absoro/transmitncia no
uv-visvel
O espectrofotmetro UV/Vis foi zerado para absorbncia com uma
cubeta de 1,0 cm de caminho tico contendo gua destilada. A partir de
soluo padro de KMnO4, preparou-se solues com diluies nas razes de:
1/0,5; 1/0,25; 1/0,10; 1/0,05; 1/0,025. Fez-se a varredura em absorbncia entre
os comprimentos de onda de 200 a 700 nm com intervalos de 20 nm com a
melhor soluo preparada, ou seja, aquela que se apresentou transmitncia
entre 5 e 95% para todos os comprimentos de onda avaliados. Observou-se
em que foi encontrada a maior absorbncia (max) e refez-se as varreduras
em intervalos de 2 nm na faixa que compreenda 20 nm anteriores e 20 nm
posteriores ao max.

3.2. Prtica 2: Determinao espectrofotomtrica de KMnO4 e
K2Cr2O7
Aps o espectrofotmetro UV/Vis ser ligado e estabilizado, calibrou-o
para 0% e 100% de transmitncia utilizando uma cubeta de 1,0 cm de caminho
tico contendo gua destilada para os comprimentos de onda de mxima
absoro (max) encontrados na prtica anterior (KMnO4 e K2Cr2O7). A partir
das solues padro disponibilizadas, preparou-se cinco solues padro nas
seguintes faixas de concentrao: KMnO4 1,010-4 a 1,010-5 mol/L;
K2Cr2O7 1,710-4 a 1,710-5 mol/L. Fez-se as leituras das absorbncias das
solues padro e da amostra no comprimento de onda adequado. Observou-
se se a faixa de absoro de luz das solues mais e menos concentradas
dessas substncias apresentavam transmitncia entre 20% e 80%.

3.3. Prtica 3: Determinao espectrofotomtrica de cido
acetilsaliclico
a) Construo da curva analtica
Para a construo da curva analtica, preparou-se solues padro com
concentraes entre 10 e 100 mg/L a partir de uma soluo padro de 1000
mg/L, minimizando os volumes, sempre que possvel. Adicionou-se aos bales
volumtricos quantidade de uma soluo de NaOH para que a concentrao
final de NaOH fosse igual a 2,510-3 mol/L, com mnima diluio da soluo.
Completaram-se os volumes dos bales com soluo tamponada de Fe3+.
Aps preparar o espectrofotmetro UV/Vis, conforme aulas anteriores
obtiveram-se as absorbncias de cada soluo padro em 530 nm utilizando a
soluo tamponada de Fe3+ como branco.

b) Determinao de AAS numa amostra de comprimido
Determinou-se a massa de um comprimido do medicamento contendo
AAS a ser analisado e, em seguida, triturou-o em almofariz. Obteve-se uma
massa da amostra triturada correspondente a cerca de 100 mg do princpio
ativo, transferiu-o q para um erlenmeyer de 125 mL com o auxlio de cerca de 5
mL de gua destilada. Adicionou-se soluo resultante 5 mL de NaOH 1
mol/L e aquea a mistura at fervura para a dissoluo do material. Aps o
resfriamento dessa soluo, transferiu-a para um balo volumtrico de 100 mL
e completou-se o volume com gua destilada. Pipetou-se 5 mL dessa soluo
para um balo de 100 mL e completou-se o volume com soluo tamponada de
Fe3+. Mediu-se a absorbncia da soluo resultante no espectrofotmetro
UV/Vis, em 530 nm, utilizando a soluo tamponada de Fe3+ como branco.

b.1) Preparao da soluo tamponada de Fe3+ (0,02 mol/L)
Pesou-se 0,02 mol de ferro a partir de um sal de Fe3+. Dissolveu-se
essa massa em gua destilada e transferiu a soluo resultante para um balo
de 1000 mL. Com auxlio de provetas, transferiu-se 250 mL de soluo de KCl
0,20 mol/L e 162 mL de soluo de HCl 0,20 mol/L para o balo volumtrico.
Completou-se o volume do balo com gua destilada e homogeneizou-o.

b.2) Preparao da soluo aquosa de KCl (0,20 mol/L)
Transferiu-se 0,20 mol de cloreto de potssio para um balo de 1000 mL
e completou-se o volume com gua destilada.

b.3) Preparao da soluo aquosa de HCl (0,20 mol/L)
Transferiu-se 0,20 mol de cido clordrico concentrado (36,46 g/mol, teor
37 % m/m, e d = 1,18 g.cm-3) para um balo de 1000 mL contendo cerca de
50% de gua destilada. Completou-se o volume do balo com gua destilada e
homogeneze a soluo final.

3.4. Prtica 4: Determinao simultnea de misturas binrias por
espectrometria no uv/vis KMno4 e K2Cr2O7
O espectrofotmetro UV/Vis foi calibrado em 0% e 100% de transmitncia
utilizando uma cubeta de 1,0 cm de caminho tico e gua destilada nos
comprimentos de onda de mxima absoro (max) do KMnO4 e do K2Cr2O7,
conforme valores encontrados em aula prtica anterior.
A partir das solues padro disponibilizada, preparou-se cinco solues
padro para cada analito nas seguintes faixas de concentrao: KMnO4
0,00008 a 0,0004 mol/L; K2Cr2O7 0,0004 a 0,0017 mol/L. Fez-se as leituras
das absorbncias das solues padro e da amostra nos comprimentos de
onda escolhidos.

4. RESUTADOS E DISSCUSSO

4.1. Prtica 1: Varredura de curvas de absoro/transmitncia no
uv-visvel
Soluo aquosa analisada: KMnO4
Comprimento de onda de mxima absoro: 524 nm
Tipos de transies ocorrendo na absoro de luz:

A luz incidida e absorvida pelo KMnO4 faz seus eltrons sofrerem
diferentes transies eletrnicas. O tipo de transio que ir ocorrer depende
da fonte de energia utilizada. As transies eletrnicas que necessitam de
eltrons nos orbitais n * e *, ocorrem no seguinte intervalo de :
200 < < 700 nm.

n * ocorre no

= 526 nm
* ocorre no

= 320 nm

Tabela 1: Varredura de absoro entre os comprimentos de onda de 200 a 700 nm.
(nm) T (%) A N de onda (cm -1) Frequncia (s-1)
200 0,9 2,221 5,00E-10 0,01500
220 0,7 2,096 4,55E-10 0,01364
240 1,0 1,986 4,17E-10 0,01250
260 1,0 2,096 3,85E-10 0,01154
280 1,2 1,878 3,57E-10 0,01071
300 22,5 0,661 3,33E-10 0,01000
320 21,0 0,674 3,13E-10 0,00938
340 27,6 0,559 2,94E-10 0,00882
360 37,1 0,434 2,78E-10 0,00833
380 64,3 0,193 2,63E-10 0,00789
400 88,5 0,054 2,50E-10 0,00750
420 95,2 0,020 2,38E-10 0,00714
440 89,3 0,051 2,27E-10 0,00682
460 71,8 0,145 2,17E-10 0,00652
480 43,4 0,364 2,08E-10 0,00625
500 20,2 0,694 2,00E-10 0,00600
502 17,7 0,752 1,99E-10 0,00598
504 16,9 0,771 1,98E-10 0,00595
506 16,7 0,778 1,98E-10 0,00593
508 16,9 0,771 1,97E-10 0,00591
510 17,0 0,769 1,96E-10 0,00588
512 16,5 0,782 1,95E-10 0,00586
514 15,4 0,812 1,95E-10 0,00584
516 13,6 0,866 1,94E-10 0,00581
518 11,8 0,928 1,93E-10 0,00579
520 10,4 0,981 1,92E-10 0,00577
522 9,6 1,020 1,92E-10 0,00575
524 9,4 1,027 1,91E-10 0,00573
526 9,9 1,003 1,90E-10 0,00570
528 11,0 0,960 1,89E-10 0,00568
530 12,2 0,903 1,89E-10 0,00566
532 13,1 0,883 1,88E-10 0,00564
534 13,4 0,875 1,87E-10 0,00562
536 12,9 0,892 1,87E-10 0,00560
538 11,9 0,925 1,86E-10 0,00558
540 10,9 0,961 1,85E-10 0,00556
560 26,4 0,579 1,79E-10 0,00536
580 57,1 0,245 1,72E-10 0,00517
600 80,3 0,095 1,67E-10 0,00500
620 84,2 0,075 1,61E-10 0,00484
640 86,8 0,062 1,56E-10 0,00469
660 90,1 0,046 1,52E-10 0,00455
680 93,7 0,029 1,47E-10 0,00441
700 96,6 0,016 1,43E-10 0,00429


Figura 1. Grfico de absorbncia x comprimento de onda, em nm da soluo de KMnO4.

Figura 2. Grfico de transmitncia x comprimento de onda, em nm da soluo de KMnO4.
0.000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
0 200 400 600 800
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Comprimento de onda (nm)
Absorbncia Comprimento de Ondas
Series1
-20.0
0.0
20.0
40.0
60.0
80.0
100.0
120.0
0 200 400 600 800
T
r
a
n
s
m
i
t

n
c
i
a

(
%
)

Comprimento de onda (nm)
Transmitncia Comprimento de Onda
Series1

Figura 3. Grfico de absorbncia x nmero de onde, nm da soluo de KMnO4.

Figura 4. Grfico de absorbncia x frequncia, em s
-1
da soluo de KMnO4.


0.000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
0 1E-10 2E-10 3E-10 4E-10 5E-10 6E-10
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Nmero de Onda (cm-1)
Absorbncia x Nmero de Onda
0.000
0.500
1.000
1.500
2.000
2.500
0 0.005 0.01 0.015 0.02
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Frequncia (s
-1
)
Absorbncia x Frequncia
Absorbncia x Frequncia
4.2. Prtica 2: Determinao espectrofotomtrica de KMnO4 e
K2Cr2O7
Tabela 2. Diluies da soluo estoque
Soluo estoque 0,02000 mol\L
Soluo intermediaria 0,0002 mol\L Diluio em 100 vezes.
Soluo 1 0,0001 mol\L Diluio em 2 vezes.
Soluo 2 0,000075 mol\L Diluio em 3 vezes. (2,66x)
Soluo 3 0,00005 mol\L Diluio em 4 vezes.
Soluo 4 0,00003 mol\L Diluio em 5 vezes. (6,66x)
Soluo 5 0,00001 mol\L Diluio em 20 vezes.


Figura 5. Grfico de curva analtica: absorbncia x concentrao molar do KMnO4 em
soluo aquosa. Comprimento de onda de mxima absoro de 524 nm.


O ponto do grfico referente a concentrao de 0,000075 mol\L foi
retirado do grfico devido a sua discrepncia da reta.
Absortividade molar:
De acordo com o grfico, o valor de y corresponde ao valor da
absorbncia, portanto, y=ax + b = .C.l, onde x e C se anulam por ambos
corresponderem a concentrao. Logo, .l= a+ b, onde b tende a zero, pois a
reta no passa pelo eixo y do grfico.
y = 3546.1x - 0.0108
R = 0.9518
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0 0.000010.000020.000030.000040.000050.000060.000070.00008
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao mg/L
Absorbncia do KMnO
4
em Soluo Aquosa
Series1
Linear (Series1)
Amostra: absorbncia (A) de 0,136.
Logo, A = .l , onde segundo a equao da reta, A assume valor de 3546.

3546 = . 1 cm
= 3546 L.mol
-1
.cm
-1


Concentrao do analito na soluo da amostra em mg/L e em mol/L:
A = . C. l
0.136 = 3546 x 1 x C
C = 3,8356 x10
-5
mol.L
-1


C=m/MM
3,8356 x10
-5
mol.L
-1 =
m/158,04g.mol
-1
m=6,0618x10^-3g/L; 6.0618 mg/L

As transies mais energticas so as do K
2
Cr
2
O
7
, pois o comprimento
de onda menor do que o KMnO
4
. As transies eletrnicas do KMnO
4

necessitam de menor energia porque a presena de ligaes conjugadas no
composto promovem o abaixamento do nvel de energia dos orbitais entre n e
*.

4.3. Prtica 3: Determinao espectrofotomtrica de cido
acetilsaliclico
Clculos de diluio da soluo padro:
Concentrao de 10 mg/L

Concentrao de 20 mg/L

Concentrao de 50 mg/L

Concentrao de 75 mg/L

Concentrao de 100 mg/L

Clculos para a determinao do volume de NaOH utilizado:
Para as diluies com Concentrao de 10 mg/L e Concentrao de 50 mg/L

de NaOH
Para as diluies com Concentrao de 20 mg/L e Concentrao de 100 mg/L

de NaOH
Para a diluio com Concentrao de 75 mg/L

de NaOH
Tabela 3 Volume de soluo padro, do hidrxido de sdio e o volume total.
Amostras Vol. da soluo
padro (mL)
Vol, de NaOH
(mL)
Vol. total
1 1 2,5 100
2 1 1,25 50
3 5 2,5 100
4 15 5 200
5 5 1,25 50

Construo da curva analtica:
Tabela 4: Valores da absorbncia do cido acetilsaliclico em relao concentrao.
Amostra Concentrao
(mg/L)
Absorbncia
1 10 0,024
2 20 0,051
3 50 0,169
4 75 0,224
5 100 0,420
AMOSTRA - 0,424

Figura 6. Grfico de curva analtica: absorbncia x concentrao molar do cido
acetilsaliclico.

Atravs da curva analtica linear, a concentrao de AAS na soluo mais
diluda da amostra, em mg/L;
y= 0,0037x + 0,0172
0,424 = 0,0037x + 0,0172
x= 0,4028/0,0037
x= 108,86 mg/L
Em 100 mL (correspondente a aliquota de 5mL) : 10,88 mg
10, 88 mg ------ 5 mL
x --------- 100 mL
x = 217,6 mg

A concentrao de AAs na poro do medicamento analisada, em mg/g;
217,6 mg -------- 0,1160 g 1875, 86 mg/g --------- 1g
x ------------- 1g x ------------0,5715 g
x= 1875, 86 mg/g x=1072,0 mg

A concentrao de AAS no comprimido, em % m/m;
y = 0.0037x - 0.0172
R = 0.9956
0.0000
0.0200
0.0400
0.0600
0.0800
0.1000
0.1200
0.1400
0.1600
0.1800
0.0 10.0 20.0 30.0 40.0 50.0 60.0
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao mg/L
Curva Analtica
Absorbncia
Linear (Absorbncia)
% = (1072,0 / 500 mg) x 100
% = 214,4 %

Fatores que podem ter influenciado no resultado:
* Utilizao de reagentes que no se encontravam em estado alterado.
* Erros na diluio
* Erro na preparao da soluo de Fe
+3


4.4. Prtica 4: Determinao simultnea de misturas binrias por
espectrometria no uv/vis kMnO4 e K2Cr2O7
Tabela 5: Leituras das absorbncias das solues de KMnO4 nos comprimentos de
onda de 360 nm e 524 nm.
Concentrao 360 nm 524 nm
0,00017 0,61 0,033
0,00034 1,046 0,038
0,00051 1,508 0,04
0,00068 2,096 0,047
AMOSTRA 0,77 0,266


y = 971.71x + 0.0269
R = 0.994
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
0 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao mg/L
Absorbncia do KMnO
4
- 360nm
Series1
Linear (Series1)
Linear (Series1)
Figura 7: Grfico de curva analtica: concentrao molar x absorbncia do KMnO4 no
comprimento de onda 360 nm.


Figura 8: Grfico de curva analtica: concentrao molar x absorbncia do KMnO4 no
comprimento de onda 524 nm.



Tabela 6: Leituras das absorbncias das solues de KCr2O7 nos comprimentos de onda de
360 nm e 524 nm.
Concentrao 360 nm 524 nm
0,00008 0,097 0,198
0,00012 0,141 0,281
0,00020 0,237 0,518
0,00040 0,41 0,943
AMOSTRA 0,697 0,285

y = 2341.4x + 0.0167
R = 0.9955
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
0 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao mg/L
Absorbncia KMnO
4
- 524nm
Series2
Linear (Series2)

Figura 9: Grfico de curva analtica: concentrao molar x absorbncia do K2Cr2O7 no
comprimento de onda 360 nm.


Figura 10: Grfico de curva analtica: concentrao molar x absorbncia do K2Cr2O7 no
comprimento de onda 524 nm.


Clculo das concentraes de cada analito presente na soluo da
amostra utilizando as equaes abaixo.
C
1
={ (2)2 .A1 (2)1 . A2} / {[(1)1 . (2)2] [(2)1 . (1)2]}
C
2
={(1)1 .A2 (1)2 . A1} / {[(1)1 . (2)2] [(2)1 . (1)2]}
y = 971.71x + 0.0269
R = 0.994
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

Concentrao mg/L
Absorbncia do K
2
Cr
2
O
7
- 360 nm
Series1
Linear (Series1)
y = 25.882x + 0.0285
R = 0.9584
0
0.005
0.01
0.015
0.02
0.025
0.03
0.035
0.04
0.045
0.05
0 0.0002 0.0004 0.0006 0.0008
A
b
s
o
r
b

n
c
i
a

CConcentrao mg/L
Absorbncia do K
2
Cr
2
O
7
- 524 nm
Series2
Linear (Series2)

Analito Absortividade molar KMnO4
(2)
Absortividade molar K2CrO7
(1)
1 = 360 nm 1265,1 L. mol
-1
.cm
-1
3125,2 L. mol
-1
.cm
-1

2 = 524 nm 2524,6 L. mol
-1
.cm
-1
18,985 L. mol
-1
.cm
-1


Concentrao do K2Cr2O7
C1= (2524,6 x 0,77) (1265,1 x 0,266)/ (3125,2 x 2524,6) (1265,1 x 18,985)
C1= 2,04 x 10
-4
mol.L
-1

Concentrao do KMnO4
C2= (3125,2 x 0,266) (18,985 x 0,77)/ (3125,2 x 2524,6) (1265,1 x 18,985)
C2= 1,03 x 10
-4
mol.L
-1


5. CONCLUSO
Neste trabalho realizaram-se quatro experincias. Na primeira prtica testou
a habilidade de construir grficos de absorbncia e transmitncia em relao a
concentrao, comprimento de onde, frequncia e numero de ondas. Na
segunda discutiu-se construo de uma curva analtica espectrofotomtrica a
partir de concentraes conhecidas Na terceira, determinou-se a concentrao
de acetil saliclico a partir do mtodo espectrofotomtrico. Na quarta,
determinou-se simultaneamente a concentrao de dicromato de potssio e do
permanganato de potssio.
Todos os experimentos foram realizados com xito e com eles foi possvel a
elucidao do mtodos espectroscpicos e pode-se observar suas vrias
aplicabilidades.




REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
Coutrim, M. X; Aulas tericas da disciplina QUI 346 Qumica Analtica
Instrumental. Departamento de Qumica- UFOP. 2013.
Departamento de Qumica- UFOP. Roteiro de aulas prticas da disciplina QUI
346 Qumica Analtica Instrumental. 2/2011.
SKOOG, D.A.; HOLLER, F.J.; NIEMAN, T.A. Princpios de Anlise
Instrumental, Bookman, 6 ed., Porto Alegre, 2009.