PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATLICA DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS


LABORATORIO # 2

DATOS INFORMATIVOS
ASIGNATURA: BIOQUMICA
NIVEL: 6
NOMBRES: DANIEL BOLAOS
JUAN FRANCISCO RODAS

TITULO DE LA PRCTICA: EXTRACCION E HIDROLISIS DE ALMIDONES

FECHA DE REALIZACION DE LA PRCTICA: 11 DE FEBRERO DE 2014


1. Objetivos

Extraer glucgeno de una muestra de hgado de pollo.
Hidrolizar el glucgeno y almidn a sus principales formas es decir sus
monosacridos constituyentes.

2. Resumen


3. Introduccin

El glucgeno posee una estructura ramificada con cadenas lineales de restos consecutivos
de glucosa, unidos por enlaces (1 -4), y por enlaces (1-6) en los puntos de ramificacin.
El resultado es una estructura en abanico con un extremo reductor y muchos no
reductores. La hidrlisis de estos enlaces glucosdicos puede ser catalizada por cidos
minerales o enzimas. En la hidrlisis cida los enlaces se rompen al azar, conformacin
intermediaria de todos los posibles oligosacridos y la conversin final de stos en glucosa.
La hidrlisis de los enlaces glucosdicos del glucgeno puede ser tambin llevada a cabo
por la enzima -amilasa, que cataliza la hidrlisis especfica de los enlaces (1-4) (no son
afectados los enlaces (1-6). Los productos finales de la hidrlisis enzimtica del glucgeno
son glucosa, maltosa e isomaltosa.

El almidn es el carbohidrato de reserva ms abundante en los tejidos vegetales. Se
encuentra en grandes cantidades en los tubrculos y semillas de cereales y leguminosas,
de donde puede obtenerse fcilmente en forma de grnulos caractersticos por su frmula
y tamao.
El almidn es un polisacrido que contiene alrededor de un 20% de una fraccin insoluble
y un 80% de una fraccin soluble denominada amilopecticina. Ambas fracciones estn
constituidas por unidades de -D-Glucosa pero difieren en el tamao y configuracin
molecular.
Todos los polisacridos son hidrolizados en sus constituyentes monosacridos por la
accin de cidos diluidos, por tanto se obtendr la D-Glucosa como producto final.
Parte experimental
Materiales:
Tubo de ensayo
Mechero
Centrifuga
Vasos de precipitacin.

Reactivos:
Reactivo de Benedict,
KOH al 30%
Na2SO4 al 15%
H2SO4 5N,2N,0,4M
Fenolftalena
Solucin de almidn 1%
Solucin de yodo
Etanol absoluto
Agua destilada
Pesar aproximadamente 0,5g
de higado de pollo y colocar
en un tubo de ensayo de
13mL.
Aadir 2mL de KOH al 30%, y
calentar en bao mara el
tubo por 30 minutos.
Centrifugar 5 minutos , para
eliminar los restos de tejido
no digerido.
Agregar 0,2mL de Na2SO4 al
15% y 4mL de alcohol etlico.
Dejar en reposo el tubo por
15-20 minutos para provocar
precipitacin de glucgeno.
Centrifugar glucgeno ,
desechar el lquido y retener
el precipitado color marrn-
blanco.
Lavar el precipitado 3 veces
con 1mL de etanol y una
cuarta vez con 1 mL de HCl
0m1N (desechar el lquido).
Poner 1mL de agua destilada
y pasar el contenido en un
tubo ms grande.

Procedimiento
Extraccin de glucgeno de una muestra heptica













Hidrlisis cida del sedimento del tubo




Aadir 1mL de
HCl 5N al
contenido del
tubo grande del
paso anterior,
calentar 45
minutos en bao
mara tapando
el tubo
Retirar el tubo
del bao dajar
enfriar y aadir,
aadir 1mL de
NaOH 5N
Adicionar 3mL
del reactivo de
Benedict y
calentar en bao
mara durante 8
minutos , un
precipitado rojo
indica prueba
positiva.
Colocar 20mL de solucin de
almidn al 1% en un tubo de
ensayo y agregar 0,5mL de
HCL colocar en bao mara
Colocar 0,5 mL de lasolucin
de yodo y 0,5 mL de almidn
hidrolizando y comprobar
que la prueba de yodo sea
negativa. Repetir el proceso
cada 15 minutos.
Cuando la prueba sea
negativa(coloracin
amarilla), poner 0,5 mL de
almidn hidrolizado , con 1
mL de NAOH 0,4M y 2,5 mL
de bnedict
Realizar lo mismo en un tubo
con almidn 1% sin
hidrolizar
Colocar los tubos 8 min por
agua hirviendo y observar el
precipitado rojo.



Hidrlisis cida del almidn







Cuestionario


Realice representaciones esquemticas para: amilosa, amilopectina,
glucgeno y celulosa








Glucgeno




Haga un cuadro con los resultados de la prueba del yodo a diferentes
tiempos y anote el tiempo que tard la prueba de Benedict en dar positiva.










Segn los resultados del cuadro anterior, cunto tiempo tard la solucin
de almidn en hidrolizarse?















Qu tipo de enlaces es capaz de romper el HCI? Por qu?


El HCl puede romper enlaces glucosdicos, por esa razn se lo emplea en hidrlisis. Debido a que
rompe enlaces al azar, con formacin intermediaria de todos los posibles oligosacridos y la
conversin final de stos en glucosa.
Esa es la razn principal por lo que se emplea un cido fuerte previamente calentado.


Consulte el proceso de fabricacin del papel celofn

El celofn se fabrica a partir de la disolucin de fibras de caa, algodn o madera. De esta
disolucin se obtienen una solucin viscosa, la cual pasa por un proceso de extrusin y
posteriormente es baada por un cido que la convierte en celulosa. El celofn pasa a travs de
una ranura mientras que el rayn pasa por un orificio.

Bibliografa
Qumica de Alimentos: Manual de laboratorio tomado de:
http://books.google.com.ec/books?id=8VpJ8foyDiIC&pg=PA7&lpg=PA7&dq=extraccion+e+
hidrolisis+del+GLUCOGENO&source=bl&ots=q0zHpW9j_f&sig=GGEK5SnvlohSLrE1vfbf_VT5
IRs&hl=es&sa=X&ei=-
KECU_PUE8_gsATWzoCoBQ&ved=0CEEQ6AEwBA#v=onepage&q=extraccion%20e%20hidr
olisis%20del%20GLUCOGENO&f=false

Hidrlisis de Disacridos y/o Polisacrios (3BD), tomado de: http://quimica-
csfisicas.blogspot.com/2012/05/hidrolisis-de-disacaridos-o.html
Quiminet.com, Papel celofn, Tomado de: http://www.quiminet.com/articulos/que-es-el-
celofan-y-como-es-su-proceso-de-fabricacion-2684185.htm