El microscopio ptico es un elemento esencial para los estudios generales de histologa puesto

que es el que nos permite observar las diferentes caractersticas morfolgicas de las clulas y los
tejidos. Se basa en el uso de lentes para aumentar los rayos de luz que atraviesan una muestra de
tejido. Su invencin se remonta al siglo XVII. Desde entonces se ha ido perfeccionando hasta llegar
a los moderno microscopios. Durante estos siglos, el mayor avance en cuanto a perfeccin y calidad
se ha producido en su principal elemento, las lentes, las cuales aumentan la imagen de las
secciones de tejido y permiten hacer visibles al ojo humano detalles ntidos que de otra manera sera
imposible observar.
Los microscopios pticos tienen un lmite mximo de resolucin de 0,2 m. El poder de
resolucin es la distancia mnima a la que se pueden discriminar dos puntos. Este lmite viene
determinado por la longitud de onda de la fuente de iluminacin, en este caso la luz visible.
Contiene normalmente dos lentes: el objetivo y el ocular. El primero recoge la luz que atraviesa
la seccin de tejido, mientras que el ocular es el que forma la imagen que observamos. El aumento
total que permite un microscopio ptico se calcula multiplicando la magnificacin que producen el
objetivo por la que producen los oculares. Por ejemplo, si estamos usando un objetivo de 40x
(aumenta 40 veces) y un ocular de 10x (aumenta 10 veces), el resultado final sera de 400x, es decir,
vemos la muestra aumentada 400 veces. Usando microscopios pticos avanzados se consiguen
unos 1000-1500 aumentos (objetivo de 100x ms oculares de 10x o 15x). Algunos microscopios
pticos tienen lentes internas que producen aumentos adicionales que tendremos que tener en
cuenta para calcular la magnificacin de la imagen que se observa. No debemos confundir los
aumentos con el poder de resolucin. Por ms que consigamos aumentar una imagen tomada de un
microscopio, incluso con metodologa digital, no se puede aumentar la resolucin de la imagen.
PARTES del MICROSCOPIO
Un microscopio ptico bsico est formado por las siguientes partes:
Oculares. Son las lentes que forman la imagen que observaremos con nuestros ojos. Todos
los microscopios actuales poseen dos oculares, uno para cada ojo. Por eso a los microscopios
actuales se les llama binoculares. Los primeros microscopios eran monoculares, es decir, posean
una sola lente. Hay que tener en cuenta que en los microscopios ms avanzados tanto el objetivo
como el ocular suelen estar compuestos por varias lentes. En los microscopios ms bsicos al
menos uno de los oculares puede regularse, alejarse o acercarse al objetivo. Esto permite ajustar el
enfoque a las condiciones de visin, dioptras, de cada observador.

Partes de un microscopio simple.
Objetivos. Los objetivos son las lentes que reciben la imagen directamente de la seccin
histolgica y quiz sean los elementos ms importantes del microscopio. Hoy en da los
microscopios pticos poseen un tambor o revlver donde se encuentran varios objetivos. Cada uno
de ellos posee lentes que permiten diferentes aumentos. Las magnificaciones de los objetivos ms
usados suelen ser de 10x, 20x, 40x y 100x. Rotando el revlver se puede seleccionar el objetivo y
por tanto el aumento al que queremos observar la preparacin. Aparte de los aumentos, los objetivos
tienen una serie de caractersticas para mejorar la imagen. As, pueden ser acromticos, de fluorita o
apocromticos, los cuales corrigen alteraciones cromticas, de campo plano que eliminan la
curvatura del campo de observacin, etctera.
Cuando se usan objetivos de 100 aumentos (100x) es necesario emplear un lquido
denominado aceite de inmersin entre el objetivo y la muestra. Esto es debido a que la refraccin de
la luz es alta en el aire y provoca alteraciones en la imagen que se ponen de manifiesto con objetivos
con esta capacidad de aumento. El aceite de inmersin reduce enormente esta refraccin
permitiendo imgenes mucho ms ntidas.

Imgenes resultantes del uso de objetivos con diferentes aumentos (especificados en las imgenes) al observar un epitelio
estratificado plano queratinizado.
Platina. Es la plataforma donde se coloca el portaobjetos con nuestro tejido. Posee un
dispositivo para sujetar al portaobjetos, el cual se puede desplazar en el plano de la
platina, movimiento controlado manualmente.
Condensador. Es un dispositivo que contiene una lente que concentra y focaliza la
luz proveniente de la fuente sobre la seccin de tejido.
Diafragma. Se sita entre la fuente luminosa y el condensador. Permite aumentar el contraste
de la muestra y la profundidad de campo, es decir el espesor de la muestra que est enfocado.
Lmpara luminosa. Es la que proporciona la luz que atraviesa la seccin de tejido. Incialmente
se usaba la luz natural, la cual se poda concentrar en la seccin de tejido mediante espejos
cncavos. Actualmente se usa una lmpara cuyo haz de luz atraviesa, atraviesa el diafragma, el
condensador, la muestra, y tras ello penetra por el objetivo y atraviesa los oculares hasta nuestros
ojos. La intensidad de la fuente luminosa se puede regular mediante un reostato.
Macromtrico y micromtrico. El enfoque de la muestra se consigue variando la distancia de
la muestra a la lente del objetivo. Esta distancia depende de los aumentos que produzca el objetivo,
mayor cuando menores aumentos produzca, y del tipo de objetivo. Esto se controla mediante dos
ruedas denominadas macromtrico y micromtrico, respectivamente. La primera permite
movimientos ascendentes y descendentes amplios de la platina y la segunda ajustes finos.

Recorrido de la luz desde la fuente, a travs de los diferentes lentes de un microscopio bsico, hasta el observador.
MODIFICACIONES
Contraste de fase. Esta modificiacin del microscopio de campo claro necesita de objetivos
especiales y se basa en ligero retraso que sufre la luz cuando pasa por unas estructuras tisulares en
funcin de la densidad. De esta manera se consiguen diferentes luminosidades para distintas
estructuras tisulares. Se emplea para ver muestras sin teir o acuosas, as como clulas vivas, por
ejemplo en tejidos celulares.
Campo oscuro. La observacin en campo oscuro es un buen sustituto del contraste de fase
para observar especmenes sin teir o medios acuosos. Consiste en la incorporacin de un objeto
opaco bajo el condensador, entre la fuente luminosa y la seccin de tejido. Este objeto slo deja
pasar la luz ms lateral que incidir sobre la muestra de forma oblicua y slo aquella luz que sea
reflejada por la muestra llegar a los objetivos. All donde no haya tejido aparecer obscuro y
distintas densidades o propiedades del tejido reflejarn diferente cantidad de luz.
Contraste de interferencia y Nomarsky. Este tipo de microscopa aparece slo en los
microscopios ms avanzados y suponen tener objetivos especiales. Estos mtodos dan a los tejidos
un aspecto tridimensional, es decir, aumentan la profundidad de campo (espesor de tejido que est
simultnemente enfocado, es decir, que se ve ntidamente). Se basa en el uso de filtros que
polarizan la luz, lo cual consiste en dejar pasar slo a las que vibran en un determinado plano.
Posteriormente pasan por un prisma que reagrupa esta luz en elementos separados por una
distancia que es similar al poder de resolucin del objetivo que se est usando. Existe un prisma
para cada objetivo. Entonces la luz pasa por el muestra y las diferencias de densidad del tejido,
como los bordes de las clulas o densidades del interior celular o matriz extracelular, provocarn
alteraciones en la luz que se dirige hacia los objetivos, los cuales transformarn esas diferencias
en cambios en la luminosidad. Todava existe una lenteadicional entre el objetivo y los oculares que
permiten modular la luminosidad an ms.
FLUORESCENCIA
El microscopio de fluorescencia se usa para observar sustancias fluorescentes
denominadas fluorforos. Una molcula fluorescente es aquella que es capaz de captar radiacin
electromagntica con una longitud de onda determinada y emitir otra radiacin electromagntica con
otra longitud de onda diferente,normalemente dentro del espectro de la luz visible. Los fluorforos se
utilizan como marcadores para la deteccin de otras molculas tisulares, normalmente mediante la
tcnica de inmunofluorescencia. Los usados en microscopa absorven en el rango de la luz
ultravioleta, normalmente producida por una lmpara de mercurio, y emiten en el rango de la luz
visible. Para seleccionar el rango de longitud de onda con que sern iluminados se utilizan filtros
especficoslocalizados entre la fuente y la muestra que slo dejan pasar un determinado rango de
frecuencias. Con un tambor de filtros se consigue iluminar la muestra con diferentes rangos de
ondas electromagnticas y por tanto activar selectivamente a diferentes fluorforos.
La microscopa de fluorescencia nos permite usar ms de un fluorforo para detectar varias
molculas tisulares de forma simultnea siempre que el espectro de emisin de estos fluorforos no
se solape, puesto que entonces sera imposible discriminarlos.

Imgenes de fluorescencia. A la izquierda, inmunocitoqumica para el neuroppido Y en cerebro de rata, utilizando el fluorforo
Texas-Red. A la derecha, motoneuronas en cerebro de lamprea marcadas con el trazador neuronal fluorescena que es en s
mismo un fluorforo. Cada uno de los fluorforos se ha estimulado con frecuencias diferentes y lo que se observa es la emisin
en el espectro de la luz visible de cada uno de ellos, rojo y verde, respectivamente.
Una aplicacin ms avanzada de la fluorescencia se da en los microscopios confocales, los
cuales permiteneliminar la luz difusa procedente de fluorforos que estn en el tejido fuera del plano
de enfoque. Esta luz difusa, que aparece en los microscopios de fluorescencia convencionales,
provoca una difuminacin y prdida de nitidez de la imagen. Por tanto, con el microscopio confocal
se consiguen imgenes mucho ms ntidas y mediante la digitalizacin y solapamiento de planos de
foco sucesivos se pueden conseguir imgenes tridimensionales.

Teora del funcionamiento del microscopio

El microscopio se utiliza para examinar objetos muy pequeos
situados a muy corta distancia de la lente objetivo.
Pulsa aqu para ver una descripcin de sus partes
Pulsa para ver tomas de un telescopio conectado a un monitor
Est formado por dos lentes convergentes:
lente objetivo, situada muy cerca del objeto.
lente ocular, al otro extremo del tubo, est situadams cerca del ojo y hace la
funcin de lupa sobre la imagen que produce la lente objetivo.
La lente objetivo es muy convergente (f=2 cm la de la siguiente figura) y el
objeto debe colocarse ms all de su punto focal, pero cerca de l.

El ocular se coloca de manera que la imagen formada por la lente objetivo (flecha
amarilla) caiga sobre el punto focal de ella, F
2
. En la figura est un poco ms
cerca de la lente.
Cuando una imagen se forma en el foco, F
2
, la luz emerge del ocular en forma de
un haz de rayos paralelos y forma la imagen en el infinito, pero el ojo, sin
esfuerzo de acomodacin, la concentra en la retina.
El ocular logra que veamos la imagen del objetivo con un ngulo aparente mayor
que si el objeto estuviera en el punto prximo del ojo.
La lente objetivo produce una imagen mayor, real e invertida, y la lente ocular,
actuando sobre ella, la hace ms grande pero la deja invertida y virtual.
La imagen que da el microscopio es mayor, virtual e invertida.
La imagen final despus de pasar por el ojo se forma en la retina.
La distancia entre el punto focal imagen del objetivo y el punto focal objeto del
ocular se llama longitud del tubo, L. En los microscopios tiene un valor fijo: 16
cm.

El poder amplificador del microscopio (M) es el producto de la amplificacin
lateral del objetivo por la amplificacin angular del ocular:
El aumento lateral de la lente objetivo es:

tg
i
=y / f
1
=- y' / L
Aumento lateral= = y' / y = -L / f
1

El ocular acta como lupa y da una amplificacin angular expresda por la
frmula:
(ver demostracin de la amplificacin de una lupa):
El ngulo mximo con que el ojo ve el objeto sin usar lentes es el que logra
cuando el objeto est situado en el punto prximo del ojo. En esta posicin se
forma imagen ms grande en la retina.
El punto prximo en un ojo normal est a 25 cm por lo que la expresin anterior
queda:
M
o
=x
p
/f
2
=0,25 / f
2
=Potencia del ocular / 4

Como se defini el poder amplificador del microscopio por el producto de la
amplificacin lateral del objetivo por la amplificacin angular del ocular,
tenemos:
M=B M=(L / f
1
) (x
p
/ f
2
)

Las casas comerciales facilitan con los microscopios unas tablas en las que se
indican los aumentos logrados con diferentes objetivos. Son del tipo siguiente:
Objetivo
(distancia
focal
en mm)
Aumento
Objetivo
(para L=16 cm)
Aumento total Distancia
de
trabajo
(mm)
Ocular
x5
Ocular
x10
Ocular
x15
50 3,2 16 32 48 30
25 6,4 32 64 96 14
16 10 50 100 150 8
8 20 100 200 300 2
4 40 200 400 600 0,5
2 80 400 800 1200 0,2
El aumento del objetivo se calcula dividiendo 16 entre la distancia focal en cm
(B=y'/y=-L / f
1
).
El aumento total es el producto de los aumentos ocular y objetivo.
La distancia de trabajo es la distancia existente entre la lente frontal del objetivo
y el objeto enfocado. Es siempre menor que la distancia focal del objetivo.
Cuanto mayor es el aumento del objetivo ms cerca est del objeto y menor es la
lente por lo que llega menos luz al ojo. A mayor aumento menos luminosidad.
Descripcin y partes del microscopio

Poder separador.
La luz visible tiene una longitud de onda comprendida entre los 400 y los 700
manometros (nm). Esta caracterstica supone una limitacin al poder separador
(distancia a la que dos puntos se ven separados). Piensa que la materia, tus
manos, por ejemplo, estn formadas por tomos, pero tu las ves como un todo
continuo.
Cuando se ilumina un objeto, los puntos de su superficie reflejan las ondas
luminosas. Dos puntos prximos de la superficie se vern como distintos si la
distancia que los separa es grande comparada con la longitud de onda que
reciben.
Si la distancia que los separa es inferior a la longitud de onda que los ilumina
aparecern a nuestra vista como dos puntos unidos. De nada sirve entonces
aumentar el poder amplificador del microscopio. Lo que lograramos es aumentar
de tamao aparente esa mancha difusa procedente de la unin de los dos puntos,
pero sin conseguir verlos separados.

La teora de la difraccin de la luz nos ensea que la imagen que da un punto
luminoso no es un punto sino una mancha circular brillante rodeada de anillos
concntricos ms apagados.
El dimetro de la mancha depender de la longitud de onda con que se ilumine.
Si las manchas imagen de dos puntos prximos se producen superpuestas las
veremos como un nico punto. Slo las distinguiremos como separadas cuando
no se superpongan o se superpongan poco (menos de la mitad de su radio). Estos
criterios fueron establecidos por Lord Raileigh.
Se define el poder separador de una lente o en general de un instrumento ptico
como su capacidad para separar ntidamente las imgenes de dos puntos
prximos. Si "d" es la distancia mnima a que pueden estar separados dos puntos
para que sus imgenes se vean como separadas.


La claridad de la imagen crece con el ngulo "" . Este ngulo es el de
semiabertura del objetivo:

Existen tres maneras de aumentar el poder separador de un objetivo (disminuir la
distancia a la que dos puntos prximos aparecen separados) :
Aumentando el ndice de refraccin del espacio objeto. Para el aire n=1,
pero en los microscopios de inmersin, que introducen el objetivo en una
gota de lquido que cubre el cubreobjetos puede lograrse, con aceite de
cedro, un n=1,515 y con monobromonaftaleno n=1,66.
Usando lentes frontales planas que dan un ngulo "" mayor. Se pueden
alcanzar valores de sen =0,95. El lmite de la A.N es de 1,4.
Disminuyendo la longitud de onda de la luz empleada. La luz
ultravioleta =200 nm es invisible al ojo y es absorbida por el vidrio pero
estas dificultades pueden resolverse. Se pueden usar lentes de fluorita o
cuarzo fundido. La imagen debe recogerse sobre placa fotogrfica o una
pantalla sensible a esa luz. Se debe enfocar primero usando luz visible y
luego iluminar con luz ultravioleta.

Apertura numrica (A.N.)
El producto, n sen , que aparece en la expresin del poder separador, se llama
apertura numrica (A.N.) de un objetivo y constituye una las caractersticas ms
importantes de la lente. Los fabricantes marcan el nmero de la apertura
numrica en la montura del objetivo junto con el aumento.

La calidad de un objetivo es tanto mayor cuanto ms elevada es su apertura
numrica.
El aumento total ms idneo debe estar comprendido entre 500 (A.N.) y 1000
(A.N.) veces la apertura numrica del objetivo. Oculares de gran potencia
favorecen el aumento pero disminuyen la luminosidad, nitidez y las dimensiones
del campo visual. Por eso es aconsejable situar el aumento total entre 500 y 1000
veces el valor de A.N.
Esta regla est basada en las relaciones entre los poderes separadores del ojo y
del microscopio.
Ejemplo
Segn la regla anterior, para un objetivo de aumento x40 y A.N. 0,65 debemos
usar un ocular que logre valores comprendidos entre los siguientes aumentos
500 0,65=325 aumentos
1000 0,65=650 aumentos
Para lograr valores comprendidos entre 325 y 650 aumentos con un objetivo de
x40 debemos emplear oculares de x10 y x15
As empleando del de x10 el aumento total ser 10x40=400 aumentos
Empleando el de x15 el aumento ser de 600.
Un ocular x20 producir imgenes de mayor aumento (800) pero sern poco
ntidas.

Profundidad de foco o Poder penetrante.
Existen dos poderes de resolucin del microscopio uno en el plano horizontal del
enfoque que se estudia como Poder separador y otro en el plano vertical que se
estudia como Profundidad de foco o Poder penetrante.
El poder penetrante expresa la cualidad de un objetivo de poder presentar
perfectamente detalladas los diversos planos de una preparacin sin variar la
posicin de enfoque. Depende del diseo del objetivo.
El Poder penetrante (Profundidad de foco) es inversamente proporcional al
cuadrado de la apertura numrica (A.N.)
Cuanta mayor sea la Profundidad de foco, tanto menor ser el Poder
separador.
Si quieres conocer algunas notas histricas sobre el descubrimiento del
microscopio pulsa aqu.Conoces el vidrio Jena? Y la ptica Carl Zeiss?
Si te interesa conocer mas a fondo los microscopios puedes consultar estas
publicaciones de Investigacin y ciencia
LA MICROSCOPA:
HERRAMIENTA PARA ESTUDIAR CLULAS Y TEJIDOS

CAPTULO 3
LA IMAGEN. SISTEMAS PTICOS.
3.1.-La imagen. Consideraciones
3.2.-Sistemas pticos
3.3.-Fundamento de la microscopa
3.3.1.-Trans-iluminacin
3.3.2.-Epi-iluminacin

3.4.-Aumento y resolucin
Los trminos aumento y resolucin deben ser bien conocidos por todo usuario del microscopio. El
mecanismo mediante el cual se produce este fenmeno ha sido estudiado por siglos y se explica mediante
leyes de la fsica. Considerar nicamente el aumento no es suficiente para sacar el mejor partido del
microscopio, pues otro factor, la resolucin, determina lo que se ver.

3.4.1.-Aumento
El poder de aumento de una lente est determinado por el grado de curvatura de su superficie y la
distancia focal. En las lentes convexas mientras mayor sea la curvatura, menor ser la distancia focal y
mayor ser el aumento. Se ha enunciado anteriormente que el microscopio compuesto aumenta en dos
etapas y puesto que una sola lente no es suficiente se deben colocar varias lentes una detrs de la otra,
potenciando de esta manera el poder de aumento. El primer juego de lentes, cercano al objeto en estudio,
se denomina objetivo y el segundo juego, cercano al ojo del observador se denomina ocular (11). Cada
sistema de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, as
que 10x significa que la imagen est aumentada 10 veces.
Para conocer en el microscopio compuesto el aumento definitivo de una imagen se aplica la siguiente
frmula:
AUMENTO TOTAL: Aumento del objetivo x Aumento del ocular

Aunque esta frmula bsica permite obtener el aumento total de una imagen, con las tcnicas de
fotografa clsica o fotografa digital y el uso de software de procesamiento de imgenes es posible lograr
un aumento suplementario. Para obtener el aumento definitivo habra que considerar los factores de
ampliacin que se realizan en la pantalla del computador (para luego imprimirla) o al copiar la foto a papel
mediante la tcnica de fotografa clsica.
El poder de aumento de un sistema ptico tiene sus lmites y el aumentar las imgenes acarrea prdida de
informacin o detalles del objeto estudiado. Esto puede ser resuelto mediante otro principio: La resolucin.
Con el microscopio compuesto clsico es posible alcanzar un aumento mximo de 1000x. Esta limitacin
ha sido resuelta empleando un haz de electrones en lugar de un rayo de luz visible, y se abri as una
nueva era con la microscopa electrnica aplicada al estudio morfolgico.

3.4.2.-Resolucin
Es la capacidad que tiene un sistema ptico de aislar dos puntos que se encuentran muy prximos entre
s, de manera que se puedan ver individualizados uno del otro (14). La riqueza de detalles que puede ser
observada al microscopio depende de la habilidad de este para hacer que los puntos del objeto que estn
muy cercanos aparezcan en la imagen como puntos separados. Mientras ms corta sea la distancia entre
esos puntos del objeto, ms finos sern los detalles. La distancia entre esos dos puntos se conoce como
Lmite de Resolucin, el cual es tambin referido como el Poder de Resolucin y puede ser utilizada como
un indicador del rendimiento del microscopio. Esto se puede comparar vagamente con algunos aspectos
de la informtica, el tamao del pixel por ejemplo; mientras ms pequeo sea el tamao, mayor ser la
cantidad de detalles de la imagen digital.

Lmites de Resolucin aproximados de algunos sistemas pticos:
Ojo humano: 0,2 mm.
Microscopio Fotnico: 0,2 m.
Microscopio electrnico: 0,2 nm.

3.4.3.-Factores que determinan el poder de resolucin
Al observar pequeos objetos al microscopio, la luz incidente proveniente de ellos es desviada de su
trayectoria inicial y mientras ms pequeos sean, mayor ser la desviacin. Las lentes del objetivo deben
recolectar como sea posible la mayor cantidad de rayos desviados para formar una imagen ntida; a ms
rayos capturados, mayor resolucin (fig.3-3).

Figura 3-3.-Esquema que muestra un objeto (1) que es atravesado por un haz de rayos luminosos (2) los
cuales son captados por el objetivo (3). Al formarse el cono de luz proveniente del objeto se determina un
ngulo, tambin llamado de apertura, donde a representa la mitad del mismo. Tomado de Kapitza H G. Microscopy from the
very begining (13).

A partir de las observaciones precedentes, nace la definicin de apertura numrica (AN), cifra a considerar
para determinar el rendimiento de una lente objetivo (13):

AN = n x sen a

Donde a = la mitad del ngulo de apertura del objetivo.
n = el ndice de refraccin del medio que se encuentra entre el objeto y el objetivo.
(Para el aire n = 1 y para el vidrio o aceite n = 1.51)

Otra manera de incrementar la resolucin es creando, del lado de la fuente luminosa, un cono amplio con
un ngulo mayor. Para ello se emplea otro juego de lentes denominado condensador el cual posee la
misma apertura numrica que el objetivo (fig. 3-4).


Figura 3-4.-El objeto (1) es iluminado con un rayo de luz (2) que formar un cono luminoso frente al
objetivo. Se coloc otra lente (4) que recoge y condensa la luz antes que ilumine al objeto. Tomado de Kapitza H G.
Microscopy from the very begining (13)

Para aumentar an ms la resolucin, adems de agregar un condensador, otra posibilidad es colocar
algn lquido entre la lmina cubreobjeto y el objetivo. Se ha obtenido buenos resultados con ciertos
aceites (aceite de cedro) cuyo ndice de refraccin es igual al del vidrio cubreobjeto, eliminando toda
reflexin de los rayos luminosos (fig. 3-5).
.
Figura 3-5.-A la izquierda el espacio entre el cubreobjeto (5) y el objetivo (3) es ocupado por el aire; a la
derecha el espacio es ocupado por un lquido de inmersin (6). Aprciese que el cono de luz y el ngulo a
son mayores con inmersin. Modificado de de Kapitza H G. Microscopy from the very begining (13).


El poder de resolucin de un microscopio compuesto de campo claro puede ser calculado de manera
razonable mediante la frmula (13):


Donde delta= resolucin expresada en micrmetros.
lambda = longitud de onda de la luz empleada.
Como la ANobj y la ANcond son iguales, se resume 2AN.
De los anteriores planteamientos se deduce que el poder de resolucin de un sistema ptico, en trminos
generales depende principalmente de:
Apertura numrica del objetivo y condensador: La relacin apertura/resolucin es directamente
proporcional; a mayor apertura, mayor resolucin.
Longitud de onda de la radiacin electromagntica utilizada: La relacin longitud de onda/resolucin es
inversamente proporcional; a menor longitud de onda, mayor resolucin.



Microscopio electrnico de transmisin

microscope image by Goran Bogicevic from Fotolia.com
Los microscopios electrnicos son instrumentos que utilizan electrones de alta energa
para examinar los objetos que estn ms all del alcance del ojo humano. Un
microscopio electrnico puede obtener la topografa de un objeto, que es las
caractersticas de la superficie, determinar su morfologa o la forma y el tamao,
determinar la composicin del objeto y, finalmente, le muestra al cientfico cmo estn
dispuestos los tomos en un objeto. Este microscopio funciona como un microscopio
de luz, pero en lugar de esta, se utiliza un haz de electrones. Dicho haz de electrones
acelerados se centra en la muestra utilizando un can de electrones que es alimentado
por varios millones de voltios. La muestra a observar es encuentra en una cmara de
vaco. Los electrones bombardean y pasan a travs de la imagen, donde son capturados
por un imn de electrones que curva la luz para producir una foto o imagen en una
pantalla. El rebote de los electrones fuera de la muestra produce reacciones. Las
diversas reacciones son capturadas y transformadas en una imagen por el microscopio.
Este es el ms poderoso de todos los microscopios electrnicos. Puede magnificar algo
un milln de veces.
El microscopio petrogrfico, microscopio polarizador o de luz polarizada es
unmicroscopio ptico al que se le han aadido dos polarizadores (uno entre el condensador y
la muestra y el otro entre la muestra y el observador). El material que se usa para los
polarizadores son prismas de Nicol o prismas de Glan-Thompson(ambos de calcita), que
dejan pasar nicamente la luz que vibra en un nico plano (luz polarizada). Esta luz produce
en el campo del microscopio claridad u oscuridad, segn que los dos ncoles estn paralelos o
cruzados.
Algunos compuestos inorgnicos responden al efecto de la luz, stos tienen un alto grado de
orientacin molecular (sustancias anistropas), que hace que la luz que los atraviesa pueda
hacerlo en determinados planos vibratorios atmicos.
El prisma de Nicol permite el paso de luz en un solo plano, as la calcita gira la posicin de
polarizacin, facilitando la identificacin de sustancias que extinguen la luz. Al fenmeno de
extincin de luz causado por estos planos atmicos y orientaciones moleculares se
llama birrefringencia.
Este tipo de microscopio se usa para poder identificar sustancias cristalinas (minerales) o
fibrosas (como el citoesqueleto), sustancia amiloide, asbesto, colgeno, cristales de
uratos, queratina, slice, polen, etc.
Algunos tejidos vivos pueden ser observados bajo microscopa ptica de luz polarizada debido
a la birrefrigencia provocada por la orientacin de sus fibroinas,
1
tales como
laactina o miosina. Algunos animales tales como los Anisakis pueden observarse mediante
esta tcnica.

[El microscopio electrnico de barrido (SEM) es un instrumento capaz de ofrecer un variado
rango de informaciones procedentes de la superficie de la muestra. Su funcionamiento se
basa en barrer un haz de electrones sobre un rea del tamao que deseemos (aumentos)
mientras en un monitor se visualiza la informacin que hayamos seleccionado en funcin de
los detectores que hayan disponibles.]
ndice
[ocultar]
1
o 1.1 Manfred von Ardenne
2 Funcionamiento
3 Utilizacin
4 3D en SEM
5 Vase tambin
o 5.1 Fabricantes
o 5.2 Imgenes
6 Referencias y notas de pie
7 Enlaces externos
[editar]
Los primeros instrumentos desarrollados para este propsito fueron los microscopios pticos.
Estos instrumentos consistieron, a lo largo de los aos, entre una simple lupa hasta
un microscopio compuesto. Sin embargo, an en el mejor instrumento ptico, la resolucin
est limitada a la longitud de onda de la luz que se utilice, que en este caso es la luz violeta,
cuya longitud de onda es de aproximadamente 400 nanmetros, separacin mxima entre
detalles que puede observarse de esta manera. En trminos de amplificacin, esto quiere
decir que no podemos amplificar ms de 1000 veces.
Una salida inmediata a ste lmite de resolucin, fue utilizar alguna radiacin de longitud de
onda ms corta que la de la luz violeta. Los candidatos inmediatos son los rayos X, que se
caracterizan por una longitud de onda del orden de 0,15 nanmetros; desafortunadamente
stos tienen la gran desventaja de ser absorbidos rpidamente por las lentes de vidrio, y de no
poder ser desviados por las lentes magnticas (adems de las precauciones que debera
tener el operador).
Otra posibilidad que se contempl fue la de aprovechar el comportamiento ondulatorio de
los electrones acelerados por alguna diferencia de potencial. Sea el caso, por ejemplo, de
electrones acelerados en un campo de 100000 voltios que presentan comportamiento
ondulatorio con una longitud de onda de 0,0037 nm (3,7 picmetros), lo que en principio
permitira tener un aparato que resolviera detalles del mismo orden. Esto, en principio, sera
suficiente para resolver detalles atmicos, puesto que los tomos en un slido estn
separados en un orden de 0,2 nm. Sin embargo, en la prctica, los detalles inherentes a la
tcnica de observacin o los defectos en el maquinado de las piezas polares
producenaberraciones.


Microscopio compuesto

Objetivos de un microscopio moderno.
Un microscopio compuesto tiene ms de una lente objetiva. Los microscopios compuestos
se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan
finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico comn est conformado por tres
sistemas:
El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y
detener los instrumentos a observar.
El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestos de tal
manera que producen las ranuras de luz.
El sistema ptico comprende las partes del microscopio que permiten un aumento de los
objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".
ndice
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1 Parte mecnica del microscopio
2 Sistema ptico
3 Sistema de iluminacin
4 Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio
5 Campo del microscopio
6 Tipos de microscopios
o 6.1 El microscopio electrnico
6.1.1 Invencin del microscopio electrnico
6.1.2 Funcionamiento del microscopio electrnico
6.1.3 Tipos de microscopios electrnicos
6.1.4 Microscopio electrnico de barrido
o 6.2 Microscopio quirrgico
7 Medicin a travs del microscopio
8 Mantenimiento del microscopio
9 Conclusiones
10 Vase tambin
Parte mecnica del microscopio[editar]

Esquema de un micoscopio ptico.
La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el
carro y el tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin;
adems, permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.
El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo
general forma de Y o bien es rectangular.
La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base
por su parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar
la captacin de luz cuando se utilizan losespejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y
por el extremo inferior se adapta al pie.
El tubo: tiene forma cilndrica . El tubo se encuentra en la parte superior de la columna
mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante
los tornillos.
El tornillo macromtrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el
tubo del microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de
cremallera. Estos movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.
El tornillo micromtrico o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi
imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y
ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm,
que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que
se va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los
rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece
inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede
centrarse o producir movimientos circulares.
Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se
encuentran en la platina.
El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los
objetivos. Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posicin de trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.
Sistema ptico[editar]
Es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo
componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la
muestra que el ocular luego ampla.
El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la
cercana de la pieza con el ojodel observador. Tiene como funcin aumentar la imagen
formada por el objetivo. Los oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van
desde 5X hasta 20X. Existen oculares especiales de potencias mayores a 20X y otros que
poseen una escala micromtrica; estos ltimos tienen la finalidad de medir el tamao del
objeto observado.
Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el
aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la
preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos:
objetivos secos y objetivos de inmersin.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos
y la preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el
aumento que producen, la abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un
objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y 160/0,17, significa que el objetivo es
planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65, calculada para una
longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y
el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente
utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.
El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para
observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro
entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con
el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno
o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.
Sistema de iluminacin[editar]
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la
preparacin u objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada.
Comprende los siguientes elementos:
Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de
tungsteno sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita
un condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que
permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada, para
evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas.
El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio
y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos.
Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las
direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la
plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino
una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.
Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los
rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo
ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su
lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en
contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor
ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene con aceite el
espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del
condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr
aprovechar todo su poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente
sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos
de poca potencia.
Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura
para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el
contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la
resolucin del sistema ptico.
Trayectoria del rayo de luz a travs del microscopio[editar]
El haz luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a travs del diafragma al
condensador. Gracias al sistema de lentes que posee el condensador, la luz es concentrada
sobre la preparacin a observar. El haz de luz penetra en el objetivo y sigue por el tubo hasta
llegar al ocular, donde es captado por el ojo del observador.
Propiedades del microscopio
Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden
verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia
es menor a una dcima de milmetro. En el microscopio viene limitado por la longitud de
onda de la radiacin empleada; en el microscopio ptico, el poder separador mximo
conseguido es de 0,2 dcimas de micrmetro (la mitad de la longitud de onda de la luz
azul), y en el microscopio electrnico, el poder separador llega hasta 10 .
Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto
a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las
aberraciones de las lentes utilizadas.
Ampliacin del microscopio. En trminos generales se define como la relacin entre el
dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que
si el microscopio aumenta 100 dimetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100
veces mayor linealmente que el tamao real del objeto (la superficie de la imagen ser
100
2
, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que est proporcionando un
microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular
empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo de 45X y un ocular de 10X, la
ampliacin con que estamos viendo la muestra ser: 45X x 10X = 450X, lo cual quiere
decir que la imagen del objeto est ampliada 450 veces, tambin expresado como 450
dimetros.
Campo del microscopio[editar]

Paramecium aurelia. Microscopio ptico. El mejor conocido de los ciliados. Las burbujas que se ven
son vacuolas. Todo el cuerpo est cubierto de cilios, que se ven borrosos debido a sus rpidos movimientos.
Se denomina campo del microscopio al crculo visible que se observa a travs del
microscopio. Tambin podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a travs
del microscopio.
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es
inversamente proporcional al aumento del microscopio. Para medir el dimetro del campo del
microscopio con cualquiera de los objetivos se utiliza el micrmetro, al que se har referencia
en el siguiente punto.
Tipos de microscopios[editar]
Existen diversas clases de microscopios, segn la naturaleza de los sistemas de luz, y otros
accesorios utilizados para obtener las imgenes.
El microscopio compuesto u ptico utiliza lentes para ampliar las imgenes de los objetos
observados. El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a la longitud de
onda de la luz visible que impone limitaciones. El microscopio ptico puede ser monocular, y
consta de un solo tubo. La observacin en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular
cuando posee dos tubos. La observacin se hace con los dos ojos. Esto presenta ventajas
tales como mejor percepcin de la imagen, ms cmoda la observacin y se perciben con
mayor nitidez los detalles.
El Microscopio invertido el sistema ptico de este tipo de microscopio est en posicin al
revs comparado con un microscopio ptico convencional. La fuente de luz y el condensador
estn dispuestos sobre la plataforma apuntando hacia abajo; y los objetivos y la torrecilla
estn debajo de la plataforma apuntando hacia arriba. Las nicas partes que estn en una
disposicin normal son el tubo binocular o trinocular, as mismo la muestra que es colocada
sobre la plataforma o platina mecnica. Presenta la ventaja de poder observar cultivos enteros
o grandes muestras bajo estados ms naturales y con menores condiciones de estres.
El Microscopio estereoscpico: es un tipo de microscopio hace posible la visin
tridimensional de los objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para cada
aumento. Este microscopio ofrece ventajas para observaciones que requieren pequeos
aumentos. El ptimo de visin estereoscpica se encuentra entre 2 y 40X o aumento total del
microscopio.
Microscopio de campo oscuro. Este microscopio est provisto de un condensador
paraboloide, que hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo, sino
que iluminan oblicuamente la preparacin. Los objetos aparecen como puntos luminosos
sobre un fondo oscuro.
Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de los
rayos de luz, los cuales producen contrastes notables en la preparacin.
Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas
sustancias de emitir luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energticas. El
tratamiento del material biolgico con flurocromos facilita la observacin al microscopio.
El microscopio electrnico[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico
Invencin del microscopio electrnico[editar]
En 1932, Bruche y Johnsson construyen el primer microscopio electrnico a base de lentes
electrostticas. Ese mismo ao Knoll y Ruska dan a conocer los primeros resultados obtenidos
con un microscopio electrnico Siemens, construido con lentes magnticas. As nace el
microscopio electrnico. Para 1936 ya se ha perfeccionado y se fabrican microscopios
electrnicos que superan en resolucin al microscopio ptico.
Estos logros no slo representan un avance en el campo de la electrnica, sino tambin en el
campo de la Biologa, pues son muchas las estructuras biolgicas que se han descubierto y
que revelan detalles inusitados, al observarlas al microscopio electrnico.
Funcionamiento del microscopio electrnico[editar]
El microscopio electrnico utiliza un flujo de electrones en lugar de luz. Consta
fundamentalmente de un tubo de rayos catdicos, en el cual debe mantenerse el vacio. El
ctodo est constituido por un filamento de tungsteno, que al calentarse elctricamente emite
los electrones, los cuales son atrados hacia el nodo por una diferencia de potencial de
50.000 a 100.000 voltios. La lente del condensador enfoca este haz y lo dirige hacia el objeto
que se observa, cuya preparacin exige tcnicas especiales. Los electrones chocan contra la
preparacin, sobre la cual se desvan de manera desigual.
Se acostumbra a utilizar el trmino microoscopicos para las fotografas tomadas a travs del
microscopio ptico y micrografa o electromicrografa para las que se toman en el microscopio
electrnico.
Los aumentos mximos conseguidos en el microscopio electrnico son del orden de
2.000.000X mediante el acoplamiento al microscopio electrnico de un amplificador de imagen
y una cmara de televisin. En resumen, el microscopio electrnico consta esencialmente de:
Un filamento de tungsteno (ctodo) que emite electrones.
Condensador o lente electromagntica, que concentra el haz de electrones.
Objetivo o lente electromagntica, que ampla el cono de proyeccin del haz de luz.
Ocular o lente electromagntica, que aumenta la imagen.
Proyector o lente proyectora, que ampla la imagen.
Pantalla fluorescente, que recoge la imagen para hacerla visible al ojo humano.
Tipos de microscopios electrnicos[editar]
Existen varios tipos de microscopios electrnicos, que cada da se perfeccionan ms.
El microscopio electrnico de transmisin que utiliza un haz de electrones acelerados por un
alto voltaje (cien mil voltios). Este haz ilumina una seccin muy fina de la muestra, sean
tejidos, clulas u otro material.
El microscopio electrnico de barrido se utiliza para el estudio de la morfologa y la topografa
de los elementos. Estos instrumentos utilizan voltajes cercanos a los 20.000 voltios. Las lentes
magnticas utilizan un haz muy fino de electrones para penetrar repetidamente la muestra, y
se produce una imagen ampliada de la superficie observada en la pantalla de un monitor. El
microscopio electrnico mixto tiene propiedades comunes con el de transmisin y con el de
barrido y resulta muy til para ciertas investigaciones. Hay otros microscopios analticos que
detectan seales caractersticas de los elementos que constituyen la muestra.
Con estos poderosos instrumentos, que utilizan el flujo de electrones y las radiaciones
electromagnticas as como la aplicacin de tcnicas histoqumicas y bioqumicas, adems del
empleo de marcadores radiactivos, se han logrado grandes avances en la biologa celular.
Microscopio electrnico de barrido[editar]
Artculo principal: Microscopio electrnico de barrido
El microscopio electrnico de barrido est situado a la izquierda del operador, y las imgenes
computarizadas de la muestra se ven en la pantalla de la derecha. Aunque un microscopio
electrnico de transmisin puede resolver objetos ms pequeos que uno de barrido, este
ltimo genera imgenes ms tiles para conocer la estructura tridimensional de objetos
minsculos.
Microscopio quirrgico[editar]
El empleo de microscopios quirrgicos ha permitido que los cirujanos lleven a cabo
intervenciones que parecan imposibles, como la reimplantacin de un miembro y la ciruga de
los ojos y odos. Estos microscopios son en especial tiles cuando es necesario realinear para
unir o reparar fibras nerviosas y vasos sanguneos individuales. Se usa para operaciones de
dificultad.
Medicin a travs del microscopio[editar]
Muchas veces interesa al observador conocer el tamao real de los objetos o
microorganismos que est observando a travs del microscopio. Para estas mediciones
pueden utilizarse varios mtodos.
Mtodo de los micrmetros. Se utiliza para esto un micrmetro de platina o de objetivo, que
consiste en un portaobjetos en cuyo centro se halla una escala graduada (de 2 mm de
longitud), con separaciones, entre cada divisin, de una centsima de milmetro.
Adems se utiliza un micrmetro ocular que lleva una escala graduada en dcimas de
milmetros. Se coloca el micrmetro objetivo sobre la platina y se enfoca el microscopio hasta
que las lneas de la escala graduada aparezcan ntidas. Luego se hace superponer la escala
del ocular y se toma como referencia las primeras divisiones en que una lnea del micrmetro
objetivo y una lnea del micrmetro ocular coincidan o se superpongan exactamente.
Luego, por simple regla de tres, se calcula el valor en mieras de cada divisin ocular. Veamos
un ejemplo. Si 9 divisiones del micrmetro objetivo (0,09 mm) equivalen a 30 divisiones del
micrmetro ocular, cada divisin del ocular equivaldr a: 0,09 mm/30 = 0,003 mm = 3 m
Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada divisin del micrmetro
ocular equivale a 3 m. Una vez obtenido este dato para cada objetivo en la forma que hemos
expuesto, teniendo el microscopio ocular podran hacerse todas las mediciones que se
deseen. Para medir, por ejemplo, un Paramecium de una preparacin, procedemos as:
haremos coincidir los extremos del microorganismo con las divisiones del micrmetro ocular.
Si la longitud del organismo es de 75 divisiones del micrmetro ocular, y cada divisin equivale
a 3 m, la longitud del Paramecium ser 75x3= 225 m. Tambin se pueden efectuar
mediciones en el microscopio con cmara clara y utilizando una regla. En realidad, estas
medidas no son tan exactas como cuando se utilizan micrmetros por errores que se
introducen superponiendo imgenes.
Mantenimiento del microscopio[editar]
El microscopio debe estar protegido del polvo, humedad y otros agentes que pudieran daarlo.
Mientras no est en uso debe guardarse en un estuche o gabinete, o bien cubrirlo con una
bolsa plstica o campana de vidrio.
Las partes mecnicas deben limpiarse con un pao suave; en algunos casos, ste se puede
humedecer con xilol para disolver ciertas manchas de grasa, aceite de cedro, parafina, etc.
Que hayan cado sobre las citadas partes.
La limpieza de las partes pticas requiere precauciones especiales. Para ello debe emplearse
papel de ptico que expiden las casas distribuidoras de material de laboratorio fotografa o
utilizar un pao de algodn. Para el polvillo se puede utilizar un perilla con pincel de pelo de
camello. Nunca deben tocarse las lentes del ocular, objetivo y condensador con los dedos; las
huellas digitales perjudican la visibilidad, y cuando se secan resulta trabajoso eliminarlas.
Para una buena limpieza de las lentes puede humedecerse el papel de ptica, envolviendo un
palillo con algo de punta con una solucin de ter/alcohol (70-30 %) y luego pasarlo por la
superficie cuantas veces sea necesario. La limpieza de la ptica ha de realizarse en espiral,
desde el centro hacia el exterior. El aceite de cedro que queda sobre la lente frontal del
objetivo de inmersin debe quitarse inmediatamente despus de finalizada la observacin.
Para ello se puede pasar el papel de ptica impregnado con una gota de xilol. En caso de
estar seco debe ponerse la zona a remojo con la solucin sealada.
Para guardarlo se acostumbra colocar el objetivo de menor aumento sobre la platina y bajado
hasta el tope; el condensador debe estar en su posicin ms baja, para evitar que tropiece con
alguno de los objetivos. Gurdese en lugares secos, para evitar que la humedad favorezca la
formacin de hongos. Ciertos cidos y otras sustancias qumicas que producen emanaciones
fuertes, deben mantenerse alejados del microscopio.
Conclusiones[editar]
Dos lentes convexas bastan para construir un microscopio. Cada lente hace converger los
rayos luminosos que la atraviesan. Una de ellas, llamada objetivo, se sita cerca del objeto
que se quiere estudiar. El objetivo forma una imagen real aumentada e invertida. Se dice que
la imagen es real porque los rayos luminosos pasan realmente por el lugar de la imagen. La
imagen es observada por la segunda lente, llamada ocular, que acta sencillamente como una
lupa. El ocular est situado de modo que no forma una segunda imagen real, sino que hace
divergir los rayos luminosos, que al entrar en el ojo del observador parecen proceder de una
gran imagen invertida situada ms all del objetivo. Como los rayos luminosos no pasan
realmente por ese lugar, se dice que la imagen es virtual...
Vase tambin[editar]
Un microscopio estereoscpico o microscopio estreo tiene dos oculares, de manera
que utilizas los dos ojos a la vez. Esto ayuda a que el objeto que ests mirando se vea
ms tridimensional. Los microscopios estereoscpicos se utilizan en muchos campos,
como la salud, la investigacin mdica, la biologa, los servicios pblicos, la
enseanza, los joyeros, los coleccionistas, los arquelogos y el trabajo policial.