REPORTE DE LABORATORIO

OBJETIVO: Conocer las tcnicas de estriado para realizar siembra as como la

preparacin de la olla de presin para esterilizacin y medios de cultivo.

INTRODUCCION.
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseado diversos
mtodos que permiten cultivarlos bajo condicione artificiales, en los que es
posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de
microorganismo. Una de las tcnicas ms usadas en el laboratorio de
microbiologa consiste en transferir una muestra microbiolgica de un
ambiente determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener
cultivos microbianos. Estos medios de cultivo deben de comprender ciertas
caracterizas para que se pueda dar un crecimiento adecuado para su estudio
y estas caracterteristicas son las siguientes:
Temperatura
Oxigenacin
Acidez
Alcalinidad
Nutrientes
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos
similares en composicin a los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por
eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de
carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. La aplicacin de
estos procedimientos ha permitido propagar a los microorganismos en
cultivos mixtos, as como su aislamiento y la obtencin de cultivos puros,
facilitando de este modo, el estudio, caracterizacin, aplicacin ycontrol de
los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de
microorganismo y propsito especfico del estudio es por ello que existen
diversos mtodos de siembra como:

TECNICAS DE ESTRIADO
Siembra en Medio lquido:
Tcnica de dilucin lmite o diluciones en serie: si el microorganismo que se
busca en un cultivo mixto se encuentra en mayor cantidad que cualquiera de
los otros microorganismos, es posible obtenerlo en cultivo puro mediante
una serie de diluciones en tubo, del medio de cultivo apropiado. Cuando la
muestra est muy diluida contendr solamente la bacteria que buscamos. Es
recomendable confirmar mediante el procedimiento de la siembra en placa
la pureza del cultivo que se aisl de la manera descrita Se introduce el asa de
siembra en el tubo con cultivo crecido y se toma un inculo que se lleva al
tubo estril con medio lquido (agitndola en el seno del medio), tomando las
precauciones mencionadas anteriormente.

Siembra en Medio slido:
Tcnica de siembra por estras en placa: con un asa de platino se pasa una
porcin de la muestra a la superficie de un medio de cultivo hecho a base de
agar y se siembra en el medio por estras.
Tcnica de siembra por difusin en placa (distribucin del inoculo de manera
homognea por toda la placa -al azar-) se usa una varilla de cristal estril para
esparcir la muestra. Esta operacin hace posible adelgazar la muestra de tal
manera que en la superficie del agar queden las bacterias separadas unas de
otras.
Tcnica de vertido en placa (tambin distribucin de manera homognea): el
medio (agar) se mantiene en estado lquido para permitir que el inoculo se
distribuya adecuadamente en el medio. Una vez sembrado el medio se pone
en cajas Petri, se deja solidificar y despus se incuba. Como algunos
microorganismos quedan atrapados entre el agar, se observarn colonias
tanto en la superficie como entre el medio cuando ste solidifica.
INICIO
INICIO
Limpiar la mesa con
alcohol etlico de
manera correcta
Preprar auto clave
para esterelizar las
cajas petri

Realizar clculos para
preparar los medios de
cultivo ( agar )
Preparar el medio de cultivo
(agar) disolver en un matraz

Llenar el volumen
deseado con una probeta
Preparar las cajas petri
para la esterilizacin con
papel de estrasa, etiquetar
y sellar las cajas.
Sacar placas de la olla de
presin con cuidado y
poner cerca del mechero
para evitar
contaminacion
vaciar el agar cerca del
mechero y semitar la caja
(flamear tapa)
Calentar al rojo vivo el aza
para esterilizacin de la
misma
Enfriar el aza en la caja y
tomar muestra para cultivo
Realizar el mismo proceso
con las 5 cajas realizar
diferentes tcnicas de
estriado
Tapar las cajas con las
muestra y colocar en
la incubadora 35 1
C por 24hrs
Checar las muestras,
realizar notas y
verificar si hay
colonias
fin
Una ves preparadas la cajas
poner en la olla de presin
y esterilizar (15 minutos)