Microbiologia 2

Universidad Nacional de Ingeniera
Facultad de Ingeniera Ambiental

Laboratorio 2: Uso del Microscopio y Coloracin de bacterias 1

I. OBJETIVO

Identificar el GRAM, forma y agrupacin al que pertenecen las muestras que se
analizaran en laboratorio utilizando el microscopio compuesto.

Reconocimiento de las partes del microscopio, as como utilizarlo para
observar muestras con la lente de 10X.

II. FUNDAMENTO TEORICO

COLORACION DE BACTERIAS
Los microorganismos, excepto las algas, son por lo general incoloros y muy ligeramente
refractantes y por lo tanto son ms difciles de ser estudiados tal y como se los encuentra
en la naturaleza. Para poder hacerlos visibles se los colorea o tie previamente antes de
observarlos en el microscopio. La coloracin hace resaltar tambin algunas caractersticas
morfolgicas que de otra manera no son visibles porque las distintas partes de la clula
tienen afinidad por diferentes colorantes. Los colorantes ms comunes son aquellos
derivados de la anilina como la fucsina, el azul de metilo y otros.
La coloracin se usa tambin para diferenciar a los organismos o partes de ellos que de
otra manera son muy semejantes; el proceso se conoce entonces como diferenciacin de
coloracin. La diferenciacin de coloracin se puede hacer utilizando un tinte policromado
en cuyo caso algunos organismos o partes de un organismo retienen un color mientras
que otros retienes otro color. Sin embargo la diferenciacin de bacterias por coloracin
generalmente depende de la habilidad de un organismo o de parte de el de retener un
colorante especifico despus de que haya sido tratado con un agente decolorante. Los
pasos fundamentales para hacer una diferenciacin de bacteria por coloracin son: a)
coloracin, b) decoloracin y c) contracoloracin.
Como ilustracin, se ver en el presente informe en la parte del procedimiento el mtodo
GRAM para la coloracin de bacterias.


Identificacin de Bacterias por Tincin GRAM: Morfologa Bacteriana
Ya hemos visto que la tincin de GRAM aporta dos ideas bsicas para la deficinin "taxonmica"
de las bacterias: el color que adquieren tras la tincin y la forma que presentan las clulas
bacterianas.
En lo relativo a la coloracin, ya hemos explicado anteriormente que hablamos de
microorganismos Gram-positivos cuando aparecen teidos de color azul-violeta y de Gram
negativos cuando se visualizan de color rojo-rosado.
Formas bsicas en que se puede visualizar la morfologa bacteriana en una tincin GRAM:
Cocos
Micrococos, aparecen aislados y dispersos tras la divisin celular. Diplococos, aparecen por pares.
Estreptococoss, tienden a unirse formando cadenas. Estafilococos, aparecen en grupos irregulares,
a veces de gran tamao

forma
esfric
a: se
llama
Coco
Divisin a lo largo del mismo plano,
formando cadenas cortas
Divisin a lo largo
de 2 planos
diferentes:
Ttradas
Divisin a lo largo de 3 planos
2 cocos
juntos:
Diplococos
4 - 20 en cadenas:
Estreptococos
regularmente:
Sarcinas
irregularmente:
Estafilococos
Bacilos
Grandes variaciones morfolgicas: fusiformes, estreptobacilos, cocobacilos

Forma de vara:
se llaman Bacilos
Dos bacilos juntos:
Diplobacilos
Cadenas de bacilos:
Estreptobacilos
Empalizadas, Bacilos
lado con lado o en
figuras en X, V o Y



Espirales

Forma espiral rgida se
llama: Espirilo
Si la espiral es flexible y ondulada se
llama: Espiroqueta
Utilizamos el trmino Pleomorfismo para referirnos a la adopcin de diferentes formas en una
misma especie.





MICROSCOPIO COMPUESTO

Es un microscopio ptico que tiene ms de una lente de
objetivo. Los microscopios compuestos se utilizan
especialmente para examinar objetos transparentes, o
cortados en lminas tan finas que se transparentan. Se
emplea para aumentar o ampliar las imgenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista. El microscopio ptico
comn est conformado por tres sistemas:

El sistema ptico comprende las partes del microscopio permiten un aumento de los
objetos que se pretenden observar mediante filtros llamados "de antigel subsecuente".
El sistema mecnico est constituido por una palanca que sirve para sostener, elevar y
detener los instrumentos a observar.
El sistema de iluminacin comprende un conjunto de instrumentos, dispuestas de tal
manera que producen las ranuras de luz.



A. RECONOCIMIENTO DEL MICROSCOPIO
Parte ptica:
- Ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la
cercana de la pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen
formada por el objetivo.
- Objetivos: 10X, 43X y 97X: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y
producen el aumento de las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan
cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de
dos tipos:
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre
ellos y la preparacin
El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes.
Para observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite
de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la lente frontal
entre en contacto con el aceite de cedro

Parte Mecnica:

- El pie y soporte: Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo
general forma de Y o bien es rectangular.
- La columna o brazo: llamada tambin asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por
su parte inferior mediante una charnela, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar
la captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porcin superior y
por el extremo inferior se adapta al pie.
- El tubo portalente: tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente para evitar los
reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares y en el extremo
inferior el revlver de objetivos. El tubo se encuentra unido a la parte superior de la
columna mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva
mediante los tornillos.
- El tornillo macromtrico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos
movimientos largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.
- El tornillo micromtrico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible que
produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la
preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm., que se
utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
- La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se
va a observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los
rayos luminosos a la preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece


inmvil; en otros casos puede ser giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede
centrarse o producir movimientos circulares.
- Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran
en la platina.
- El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos.
Al girar el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de
trabajo, lo que se nota por el ruido de un pin que lo fija.

Parte de Iluminacin

- Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno
sobrevoltada; en versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un
condensador (una lente convergente) e, idealmente, un diafragma de campo, que permite
controlar el dimetro de la parte de la preparacin que queda iluminada, para evitar que
exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas.

- El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio
y ya alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos.
Suele tener dos caras: una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las
direcciones. La cara cncava se emplea de preferencia con iluminacin artificial, y la plana,
para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no poseen espejos sino una lmpara
que cumple la misma funcin que el espejo.

- Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los
rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo
ngulo que el del campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su
lente superior es generalmente planoconvexa, quedando la cara superior plana en
contacto con la preparacin cuando se usan objetivos de gran abertura (los de mayor
ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene con aceite el
espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del
condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr
aprovechar todo su poder separador

- Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura
para ajustarla a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el
contraste, lo que se hace cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la
resolucin del sistema ptico


B. ENFOQUE
a) Primero buscar el objetivo de menor aumento 10X y colocarlo en el tubo del revlver, el
objetivo har su ruido caracterstico al estar en posicin correcta.
b) Acomode la cara del espejo (plana para la luz natural y cncava para la luz artificial) a fin
de iluminar todo el campo que se observa por el ocular.
c) Prepare el objetivo que va a observar, en nuestro caso es el portaobjetos con muestra de
bacterias.
d) Poner el portaobjetos en la abertura de la platina y centrar el objeto a observar.
e) Mirando por el costado bajar el objetivo utilizando el tornillo micromtrico hasta que este
muy cerca de la lamina.
f) Observar por el ocular del microscopio y levantar el objetivo utilizando el tornillo
macrometrico hasta ver la imagen.
g) Usar el tornillo micromtrico para enfocar con mayor nitidez.
h) Abrir o cerrar el diafragma para mejorar la calidad de imagen.

Recomendaciones para el cuidado del microscopio.
Al sacar el microscopio de su compartimiento para trasladarlo de un lugar a otro,
hgalo cuidadosamente transportndolo con ambas manos; con la mano derecha
tome firmemente el brazo y ponga la mano izquierda debajo de la base. Debe
mantener el microscopio siempre en una posicin vertical.
Coloque el microscopio suavemente sobre la mesa para evitar que se desajuste la
parte ptica. Nunca lo coloque en la orilla de la mesa.


Antes de usar el microscopio observe si todas sus partes se encuentran limpias y
en buen estado. Cualquier dao debe ser informado de inmediato al asistente.
Limpie suavemente la parte ptica con el papel de seda especial (papel de lente).
Nunca los limpie con el pauelo o con los dedos, ya que podra rayar los lentes.
Esto lo har antes y despus de sus observaciones.
Mientras no est observando una preparacin mantenga apagada la fuente
luminosa.
Cuide que sus objetivos no se humedezcan cuando se observan preparaciones
liquidas.
Coloque el objetivo de menor aumento en su sitio cuando vaya a guardar el
microscopio.

III. INSTRUMENTOS Y EQUIPOS UTILIZADOS
Instrumentos:
Tubo de prueba
Placas petri con muestra de cultivo de agar nutritivo y caldo nutritivo
rejilla.
Mechero.
Inoculador
Portaobjetos
Sustancias:
Agua destilada.
Cristal de Violeta.
Lugol.
Alcohol Acetona.
Safranina.

Equipos:
Microscopio compuesto.
Luz incorporada por una lmpara enfocada en el espejo del microscopio compuesto.



IV. PROCEDIMIENTO

El mtodo de tincin:
Al utilizar la tincin de Gram se deben seguir los siguientes pasos:
Se realiz la preparacin del frotis:
Pasar el portaobjetos por la llama del mechero, con el objetivo de esterilizarla,
adems el portaobjetos debe estar perfectamente limpio y desengrasado.
Esterilizar el inoculado flameando en la llama del mechero, esperar que se enfre y
sacar una gota suero para posteriormente aadir una pequea cantidad de cultivo
que se extender de forma que quede fina y homognea. Dejar que la muestra
llegue a temperatura de ambiente.
Cuando la muestra est seca, se procede a fijarla mediante el flameado (se pas la
muestra tres veces por la llama del mechero, sin que la muestre est en contacto
directo con la llama).
Se aplic sobre el portaobjetos el primer colorante que correspondi a cristal violeta
por 1 minuto, luego se lava durante dos segundos con agua destilada para eliminar el
exceso de colorante.
Aadimos el mordiente lugol, que actu fijando el colorante anterior a las bacterias,
aplicndose durante 1 minuto, Se vuelve a eliminar el exceso mediante el lavado con
agua destilada durante dos segundos.
Decoloramos con alcohol acetona unos 20 segundos y nuevamente lavar con agua
destilada durante 2 segundos.
Cubrir la muestra con el segundo colorante, safranina (colorante de contraste) durante
un minuto y luego lavar con agua destilada durante 2 segundos para dejar secar a
temperatura ambiente.
Se observo la muestra en el microscopio con el objetivo de inmersin, usando aceite
de cedro.



El mtodo de Observacin con microscopio:
a) Primero buscar el objetivo de menor aumento 10X y colocarlo en el tubo del revlver, el
objetivo har su ruido caracterstico al estar en posicin correcta.
b) Acomode la cara del espejo (plana para la luz natural y cncava para la luz artificial) a fin
de iluminar todo el campo que se observa por el ocular.
c) Prepare el objetivo que va a observar, en nuestro caso es l portaobjetos con muestra de
bacterias.
d) Poner el portaobjetos en la abertura de la platina y centrar el objeto a observar.
e) Mirando por el costado bajar el objetivo utilizando el tornillo micromtrico hasta que este
muy cerca de la lamina.
f) Observar por el ocular del microscopio y levantar el objetivo utilizando el tornillo
macrometrico hasta ver la imagen.
g) Usar el tornillo micromtrico para enfocar con mayor nitidez.
h) Abrir o cerrar el diafragma para mejorar la calidad de imagen.
V. RESULTADOS Y/O OBSERVACIONES
DIA JUEVES 7 DE ABRIL Hora: 5:30 pm

GRUPO

N 1

AMBIENTE CARACTERES DE LA
COLONIA
FORMA AGRUPACION GRAM

LAB
MICRO
Tamao=1mm
Borde: ondulado
Forma: Plano
Caractersticas pticas:
Traslucida
Pigmentacin: Crema

Cocos

Estafilococos

POSITIVO

Huella
Tamao=4mm
Borde: ondulado
Forma: Plana
Opaco Pigmentacin:
Crema

Cocos

Estafilococos

POSITIVO



GRUPO

N 2
COLONIA

LAB
MICRO
Tamao=9mm
Borde: ondulado
Forma: Plano
Traslucida
Pigmentacin: Crema

cocos

Estreptococos

POSITIVO

LAB
MICRO
Tamao=5mm
Borde: ondulado
Forma: Plana
Translucida
Pigmentacin: Crema

cocos

Estreptococos

POSITIVO

GRUPO

N 3

COLONIA

BAO
Tamao=2 mm
Borde: ondulado
Forma: Plano
Opaca
Pigmentacin: Blanca

Cocos

Estafilococos

POSITIVO

BAO
Tamao=1 mm
Borde: ondulado
Forma: Plano
Opaco
Pigmentacin: Naranja

Cocos

Estafilococos

POSITIVO



GRUPO

N 4

COLONIA

HUELLA
Tamao=8 mm
Borde: ondulado
Forma: Plano
Caractersticas
pticas: Opaca
Pigmentacin: Blanca

Cocos

Estafilococos

POSITIVO

PELO
Tamao=5mm
Borde: LISO
Forma: PLANO
Caractersticas
pticas: Opaco
Pigmentacin:
Amarillo

Cocos

Estafilococos

POSITIVO

DIA MARTES 12 DE ABRIL Hora: 11:30 am

GRUPO

N 3
COLONIA

Bao
Tamao=5mm
Borde: ondulado
Forma: Bacilos
Caractersticas
pticas: Opaco
Pigmentacin:
Crema

bacilos

Estroptobacilos

POSITIVO

LAB
MICRO
Tamao=5mm
Borde: ondulado
Forma: Plana
Caractersticas
pticas: Opaca
Pigmentacin:
Naranja

Bacilos

Estreptobacilos

POSITIVO



GRUPO

N 4

COLONIA

HUELLA
Tamao=5mm
Borde: ondulatorio
Forma: coco
Opaco
Pigmentacin: Amarillo

cocos

Estroptococos

POSITIVO

BAO
Tamao=8mm
Borde: ondulatorio
Forma: Plana
Opaca
Pigmentacin: Blanca

cocos

Estroptococos

POSITIVO

Observaciones

- De las muestras analizadas en el microscopio que fueron expuestas al bao de
hombres, en 3 se encontraron cocos y en unas sola bacilos, pero adems cabe
resaltar que el Gram de todas la muestras del bao fueron positivas.

- En las 2 muestras expuestas a la huella digital, se encontr la presencia de cocos
de Gram positivo.

- De las muestras expuestas al ambiente del laboratorio de microbiologa, en 3 de
estas se obtuvieron cocos y solo en una se encontr bacilos.

- En todas las muestras la agrupacin fue o de estreptococos o de estreptobacilos,
cabe agregar que el Gram en todas las muestras resulto ser positivo.



VI. CONCLUSIONES

El mtodo Gram para coloracin de bacterias es muy til y permite identificar las
caractersticas de las bacterias con la utilizacin del microscopio

Se logro identificar la forma, agrupacin y tipo de gram al que pertenece cada
muestra, utilizando el microscopio y la coloracin de bacterias; pues las bacterias
gram positivas se tien de color azul oscuro o violeta mientras que las gram
negativas se tien de un color rosado tenue, esto debido a la diferencia en su
pared celular.

Se reconoci adecuadamente las partes del microscopio y pudo utilizarse para la
observacin y reconocimiento de las bacterias en cada muestra analizada.

VII. RECOMENDACIONES

Para realizar una buena desinfeccin del inoculador se le debe calentar con el
mechero hasta que est cerca al rojo vivo, de manera que los microorganismos
mueran al no soportar tan altas temperaturas.
Tener especial cuidado al momento de esterilizar el inoculador, ya que una mala
esterilizacin no garantiza que solo la muestra de la colonia est presente en el la
observacin con microscopio.
Al momento de secar el portaobjetos con el mechero, no flamear directamente
solo mantenerlo cerca a la llama pero no llegar a cruzarla.
Para observar en el microscopio es muy necesario utilizar la gota de aceite para
poder visualizar la actividad microbiana con mayor resolucin y poder apreciar
mejor sus caractersticas.
Nunca los limpiar con el pauelo o con los dedos la lente del microscopio, ya que podra
rayar los lentes.
Mientras no est observando nada en el microscopio, mantenga apagada la fuente
luminosa para ahorrar energa.



VIII. BIBLIOGRAFIA

www.wikipedia.org/wiki/Microscopio_compuesto
www.monografias.com/trabajos12/micros/micros.shtml
www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm
http://bc.inter.edu/facultad/amlugo/biol2013/tincion%20bacte.htm
http://www.elergonomista.com/microbiologia/11s01.htm

IX. CUESTIONARIO
1.- Establecer la diferencia entre poder de resolucin y apertura numrica.
El poder resolutivo es la capacidad que tiene un microscopio de percibir por separado dos
puntos pequeos, adyacentes y cercanos. Vale decir, es la capacidad para percibir detalles. El
poder resolutivo aumenta a medida que disminuye la distancia que separa dichos puntos. Es
decir, si dos puntos distan 1cm uno del otro y yo los veo como un solo punto borroso tendr
menor poder resolutivo que alguien que los distingue por separado o que distingue
perfectamente puntos que distan de 0,5cm entre s.
La apertura numrica de un sistema ptico es un nmero adimensional que caracteriza el
rango de ngulos para los cuales el sistema acepta luz. La apertura numrica brinda una
indicacin de la capacidad de coleccin de luz y poder de resolucin a una distancia fija de un
objetivo .La apertura numrica es importante porque indica el poder de resolucin de una
lente. Una lente con una apertura numrica grande ser capaz de visualizar ms detalles que
una lente con una apertura numrica ms baja no podr. Adems, las lentes con aperturas
numricas grandes aceptan ms luz y dan una imagen ms brillante.
La diferencia es que el poder de resolucin la capacidad de percibir por separados 2 puntos
pequeos muy prximos mientras que la apertura numrica es un nmero que indica la
cantidad de luz y la resolucin a una distancia fija de un objeto.



2.- Hacer una tabla en relacin a enfermedades microbianas transmitidas por el aire, agua y
alimento.

ENFERMEDADES MICROBIANAS
VIA DE TRANSMICION ENFERMEDAD INFORMACION DE LA ENFERMEDAD
Alimento SALMONELOSIS La salmonelosis humana es una enfermedad
infectocontagiosa producida por
enterobacterias del gnero Salmonella. La
principal manifestacin es la gastroenteritis
aguda una de las intoxicaciones alimentarias
ms comunes causadas por agua y alimentos
contaminado, especialmente carnes.[
Alimentos y Agua HEPATITIS A La hepatitis A es una enfermedad infecciosa
producida por el virus de la hepatitis A
caracterizada por una inflamacin aguda del
hgado en la mayora de los casos. La hepatitis A
no puede ser crnica y no causa dao
permanente sobre el hgado. Seguida de una
infeccin, el sistema inmune produce
anticuerpos en contra del virus de la hepatitis A
y le confiere inmunidad al sujeto contra futuras
infecciones. La transmisin ocurre por agua
contaminada o alimentos contaminados
Alimentos y Agua COLERA El Clera es una enfermedad aguda, diarreica,
provocada por la bacteria Vibrio cholerae, la
cual se manifiesta como una infeccin intestinal.
Agua y alimentos TIFOIDEA La fiebre tifoidea o fiebre entrica es una
enfermedad infecciosa Su reservorio es el
humano, y el mecanismo de contagio es fecal-
oral, a travs de agua y de alimentos
contaminados con deyecciones.
Agua AMEBAIASIS La amebiasis o amibiasis es una enfermedad
parasitaria intestinal de tipo alimenticia
producida por la infeccin de la ameba
Entamoeba histolytica, protozoo rizpodo muy
extendido en climas clidos y tropicales. El
parsito se adquiere por lo general en su forma
qustica a travs de la ingestin oral de
alimentos o lquidos contaminados. Cuando
invade el intestino, puede producir disentera,
aunque tambin puede extenderse a otros
rganos.


Aire POLIOMIELITIS La poliomielitis es una enfermedad contagiosa,
tambin llamada parlisis infantil, afecta
principalmente al sistema nervioso. La
enfermedad la produce el virus poliovirus. Se
dispersa de persona a persona a travs de
secreciones respiratorias o por la ruta fecal oral
Aire TUBERCULOSIS La tuberculosis es una enfermedad infecciosa,
causada por diversas especies del gnero
Mycobacterium, todas ellas pertenecientes al
Complejo Mycobacterium tuberculosis La TBC
es posiblemente la enfermedad infecciosa ms
prevalente en el mundo.
Aire RESFRIADO
COMUN
El resfriado comn, catarro o resfro es una
enfermedad infecciosa viral leve del sistema
respiratorio superior que afecta a personas de
todas las edades, altamente contagiosa,
causada fundamentalmente por rinovirus y
coronavirus
Aire LEGIANELOSIS La Legionella o Legionela, es una bacteria Gram
negativa con forma de bacilo. Viven en aguas
estancadas con un amplio rango de
temperatura.

3.- Qu diferencias qumicas existe entre las paredes celulares de las bacterias gran?
Las bacterias Gram positivas son aquellas que se tien de azul oscuro o violeta, esta
caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la pared celular. La pared celular
compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano, que rodea a la anterior. La pared celular se
une a la membrana citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico. La capa de
peptidoglicano confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la responsable de retener el
tinte durante la tincin de Gram. A diferencia de las Gram-negativas, las Gram-positivas no
presentan una segunda membrana lipdica externa a la pared celular y esta pared es mucho
ms gruesa.
Las bacterias Gram negativas son aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta
por la tincin de Gram, y lo hacen de un color rosado tenue. Esta caracterstica est
ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular. Las bacterias Gram-negativas
presentan dos membranas lipdicas entre las que se localiza una fina pared celular de
peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan slo una membrana
lipdica y la pared de peptiglicano es mucho ms gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el
colorante durante la tincin de Gram.


4.- Afecta la edad de cultivo a la reaccin de GRAM?
Definitivamente la edad del cultivo afecta, pues mientras ms tiempo tenga el cultivo tanto
mayor ser el numero de colonias y el tamao de de estas. Adems al tenr el cultivo mas
tiempo, la permeabilidad de la pared celular incrementa; por ejemplo, para cultivos gram
positivos que sean viejos, que esten muertos o tengan problemas en la pared celular, al
realizar la reaccin Gram se obtiene un falso Gram negativo, pues por el problema de la pared
celular reacciona como Gram negativo.
Las clulas envejecidas, o crecidas en condiciones que impiden la sntesis de mucopptido
pueden verse de color rojo. La intensidad de la decoloracin con alcohol suele ser el problema
ms comn en la reaccin Gram.

5.- Hacer una lista de bacterias GRAM POSITIVO y GRAM NEGATIVO con las enfermedades
que producen.
GRAM POSITIVO
Enfermedad Bacteria
Dermatitis
gangrenosa
Staphylococus spp. Es un habitante normal del tracto
intestinal y de la piel, pero ocasionalmente formas virulentas
pueden producir enfermedad en aves susceptibles.
Pueden ocasionar problemas vasculares, necrosis de dedos,
dermatitis gangrenosa y pododermatitis. Otras veces dan
lugar a mortalidad embrionaria, septicemia, artritis, etc.
Amigdalitis Streptococcus pyogenes. Origina sntomas respiratorios:
dificultad al respirar, cambios en el canto, etc. El cuadro
clnico que aparece es similar al producido por el acaro de los
sacos areos.
Tetanos Clostridium tetani: Es de forma bacilar, una bacteria
anaerbica que se tie Gram positivo en cultivos frescos,
pero en cultivos establecidos, se tie Gram negativo.
Posee un flagelo y desarrolla endospora terminal.
Sensible al oxigeno pero resistente al calor.
Es el causante principal de la enfermedad del ttanos.
Neumonia Streptococcus pneumoniae es la principal causa de
neumona adquirida en la comunidad
Gonorrea
Neisseria gonorrhoeae es el causal de una de las ETS
(Enfermedades de Transmisin Sexual) ms difundidas: la
gonorrea.



GRAM NEGATIVO
Enfermedad Bacteria
Peste bubnica Yersinia: este gnero comprende tres especies, Yersinia pestis,
agente causal de la antigua y temida enfermedad, la peste bubnica;
Yersinia pseudotuberculosis, agente causal de una enfermedad
parecida a la tuberculosis que afecta los ndulos linfticos de
animales y muy raramente en los humanos; Yersinia enterocolitica,
agente causal de una infeccin intestinal y ocasionalmente tambin
de infecciones sistmicas en los humanos y otros animales.
Disentera Bacilar Shigella dysenteriae es normalmente patgena para los humanos y
causa una gastroenteritis bastante grave que suele denominarse
disentera bacilar. Se transmite por los alimentos y por el agua y
puede invadir las clulas del epitelio intestinal. Cuando se ha
establecido produce una endotoxina y una neurotoxina que causan
efectos enterotxicos.
Tifus Epidemico Rickettsias: son clulas cocoides o bacilares, son parsitos
intracelulares estrictos. Son los agentes etiolgicos de enfermedades
como el tifus epidmico, por ejemplo Rickettsia prowazekii y
Ricketssia typhi. Otras son causantes de las fiebres de las Montaas
Rocosas y las fiebres Q. Dentro de este gnero se encuentra la
especie Coxiella burnetii que es el agente etiolgico de la fiebre Q.
DIARREAS
EPIDEMICAS
Escherichia coli: son habitantes universales del tracto intestinal de
los humanos y de los animales homeotermos, puede desempear
una funcin nutricional en el tracto intestinal mediante la sntesis de
vitaminas, especialmente de vitamina K. Las cepas silvestres de E.
coli casi nunca muestran requerimientos de ningn factor nutritivo y
pueden crecer a partir de una gran variedad de fuentes de carbono y
energa, como azcares, aminocidos, cidos orgnicos, etc. Existen
cepas patgenas, algunas pueden causar diarreas infantiles, que
alcanzan proporciones epidmicas en guarderas o en
departamentos de obstetricia.
COLERA Vibrio cholerae es una bacteria Gram negativa con forma de bastn
(un bacilo) curvo que provoca el clera en humanos.
LEGIANELOSIS La Legionella o Legionela, es una bacteria Gram negativa con forma
de bacilo. Viven en aguas estancadas con un amplio rango de
temperatura. Su crecimiento se ve favorecido por la presencia de
materia orgnica. La especie Legionella pneumophila produce la
enfermedad del legionario o Legionelosis. La infeccin por Legionella
puede presentarse como neumona tpica o como una enfermedad
febril sin focalizacin pulmonar denominada Fiebre de Pontiac.

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