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Investigadores:
“Procesos
esarrollar procesos de saneamiento ambiental que contribuyan en la disminución de
Biológicos y
la contaminación química o biológica de agua, suelo y aire, utilizando
Biotecnología” microorganismos con capacidad de degradación o capacidad de atenuación, para
contribuir en el control del medio ambiente y mejorar la calidad de vida de las
poblaciones humanas.
CELULA CELULA
MICROORGANISMOS
ANIMAL VEGETAL
ADITIVOS
PROTEINA SECTOR
AMBIENTE MICROBIANA
ALIMENTARIO
ENZIMAS
BIOTECNOLOGIA
ENZIMAS AMINOACIDOS
FARMACOLOGIA DIAGNOSTICO
INDUSTRIALES
SECTOR
VITAMINAS
EPIDEMIOLOGIA
QUIMICO MEDICINA
HORMONAS
COMBUSTIBLES Y
TRATAMIENTO
ENFERMEDAD
ALIMENTACION
MICROORGANISMOS
AGRICULTURA
ENERGIA Y
MEDIO BIOTECNOLOGIA
AMBIENTE
BIOTECNOLOGIA
MICROBIANA
TRATAMIENTO
GENERACION DE
DE RESIDUOS.
TECNOLOGIAS
CONTROL DE
LIMPIAS
POLUCION
SUSTENTABLES
PRESION
SOCIAL
BIOTECNOLOGIA
AMBIENTAL
SALUD LEGISLACION
OCUPACIONAL AMBIENTAL
APLICACIÓN A PROBLEMAS
BIODIVERSIDAD
ELIMINACION DE CONTAMINANTES.
TECNOLOGIAS LIMPIAS
BIORREMEDIACIÓN
Bajo costo
Tecnología emergente
Efectiva
Ofrece:
Segura para el medio ambiente
Nuevas alternativas para eliminar residuos peligrosos del
medio ambiente.
AGUA
AIRE
SUELO
CONTAMINACION
ADICION DE CUALQUIER
SUSTANCIA AL MEDIO
AMBIENTE, EN
CANTIDADES TALES QUE
CAUSE EFECTOS
ADVERSOS EN HOMBRE,
ANIMALES, VEGETALES Y
MATERIALES Y QUE
SOBREPASEN NIVELES
DE LA NATURALEZA.
COMUNIDAD
INDUSTRIAS
ALIMENTOS Y BEBIDAS
CONTAMINACION
FINCAS AGUA SUELO AIRE MICROBIOLOGIA
AMBIENTAL
ACCION
INDUSTRIA DE ALIMENTOS Y BEBIDAS
DECRETO 1594/84
AGUA RESIDUAL
Tratamiento Tratamiento
primario secundario
SISTEMA PRIMARIO
Efluente Primario
1 2 3 4
Tubo de Tubo de
entrada salida
Homogenizador
ETAPAS DEL PROCESO
4 4 4 4
5 5 5 5
6 6 6 6
7 7 7 7
8 8 8 8
9 9 9 9
10 10 10 10
11 11 11 11
12 12 12 12
13 13 13 13
14 14 14 14
15 15 15 15
ESQUEMA DE DISTRIBUCION DE LAS MUESTRAS OBTENIDAS
SEGMENTO 1 SEGMENTO 2
Segmento
S
Denominacion de la
S1A1,1 A
submuestra del segmento
Duplicado de la submuestra
1 del segmento
Numero asignado a cada una
1 de las cepas aisladas
Tinción de Gram.
16 duplicados de submuestra
16 centrifugados
32 tubos cónicos de 10ml
16 sin centrifugar
Esquema de siembra para aislamiento y conteo de bacterias mesofilas
aeróbicas y bacterias aeróbicas proteolíticas a partir de la muestra
directa y diluida en los medios Calcio Caseinato y Nutritivo.
Medio Calcio caseinato y Nutritivo
Muestra Diluida
Muestra Directa
5λ
20λ 10λ
15λ
DILUCIONES, CONTEO E IDENTIFICACION
Diluciones seriadas - Siembras
Muestras
Bacterias Formación de obtenidas del Recuento por Reporte de
proteolíticas halos medio calcio UFC/ml resultados
Conteo caseinato
poblacional
Bacterias Crecimiento Muestras Recuento por Reporte de
totales bacteriano obtenidas del UFC/ml resultados
agar nutritivo
Integrada por
Realizada en
Muestras Muestras no
centrifugadas centrifugadas
15%
11%
50%
14%
10%
Ensayo en
Permitió Permitió
112000 111000
110000
108000
106000 104500
104125 104000
104000 102500
101905 102250
101800
102000
100000
98000
96000
S1A/S1B S2A/S2B S3A/S3B S4A/S4B
Conclusiones
Segmento 1: diferencia entre submuestras (1A, 1B).
Segmento 2, 3 y 4: similitud entre submuestras.
CONTEO DE BACTERIAS MESOFILAS
Media expresada en UFC/ml del comportamiento poblacional de bacterias mesófilas
aeróbicas en los diferentes segmentos de la piscina de homogenización
108000
106750
107000
106000
105000 104312
104000
102952
103000
102000
102000
101000
100000
99000
S1 S2 S3 S4
Conclusiones:
Segmento 1: alta carga bacteriana
Segmento 4: baja carga bacteriana
PISCINA DE HOMOGENIZACION
1 2 3 4
Tubo de Tubo de
entrada salida
Homogenizador
Resultados del conteo total en UFC/ml de bacterias mesófilas aeróbicas totales obtenidos en los diferentes segmentos de la piscina de homogenización de Maltería
Tropical S.A de Cartagena.
Segmentos Resultados del Submuestras Resultados del Duplicado de Resultados Medidas estadísticas
promedio de las promedio de los submuestras por submuestras
muestras por duplicados de las
segmentos submuestras
1A2 100000 CV 5%
1B2 110000
2A2 105000 CV 2%
2B2 102000
3B2 102560
4B2 101000
30000
25000 24000
21000
19385
20000 17625 18000 17775
16550
14000
15000
10000
5000
0
S1A/S1B S2A/S2B S3A/S3B S4A/S4B
Conclusiones:
Segmento 1, 2, 3 y 4 similitud entre las submuestras
CONTEO DE BACTERIAS PROTEOLITICAS
Media expresada en UFC/ml del comportamiento poblacional de bacterias aeróbicas
proteolíticas en los diferentes segmentos de la piscina de homogenización
25000
21637
19500
20000 17967
15812
15000
10000
5000
0
S1 S2 S3 S4
Conclusiones:
Segmento 2 y3: alta carga bacteriana
Segmento 1: baja carga bacteriana
PISCINA DE HOMOGENIZACION
1 2 3 4
Homogenizador
Resultados del conteo total en UFC/ml de bacterias proteolíticas aeróbicas totales obtenidos en los diferentes segmentos de la piscina de homogenización de Maltería Tropical S.A de
Cartagena.
Resultados del
Resultados del
promedio de los Duplicado de Medidas estadísticas por
Segmentos promedio de las Submuestras Resultados
duplicados de submuestras submuestras
muestras por segmento
submuestras
1B2 18500
2B2 25000
3B2 23000
4B2 20000
80000
BT
60000
BP
40000
19500 21637
15812 17967
20000
0
S1BT/S1BP S2BT/S2BP S3BT/S3BP S4BT/S4BP
Conclusión
Desplazamiento de las bacterias proteolíticas
por parte de las bacterias mesófilas.
COMPORTAMIENTO PORCENTUAL DE BACTERIAS
PROTEOLITICAS TOTALES CON RESPECTO A LAS
BACTERIAS MESOFILAS AEROBICAS TOTALES AISLADAS
EN LA PISCINA DE HOMOGENIZACION.
18%
BP
BT
82%
Resultado de la identificación bioquímica por medio del sistema ID BBL CRYSTAL E/NF
Conclusión general:
Segmento 1: mayor diversidad de géneros y especies.
Segmento 3: menor diversidad de géneros y especies.
Comparación de submuestras A y B: persistencia de un genero bacteriano
PRUEBA DE OXIDASA
29%
71%
Resultados de las medidas de halos de cada una de las colonias aisladas en las que se evidenciaron proteolisis
Conclusion general:
Mayor proteolisis a las 72 horas: Stenotrophomona
Mayor proteolisis a las 24 horas: Aeromona
Menor proteolisis a las 72 horas: Pseudomona y Shiguella
Menor proteolisis a las 24 horas:Shiguella y Klebsiella
MEDICION DE HALOS PROTEOLITICOS
Características generales de las cepas aisladas e identificadas en la piscina de homogenización de la empresa Malhería Tropical S.A de Cartagena.
Género y especie Segmento Características Características macroscópicas en medio Diámetro de halos de Oxidasa Características
microscópicas calcio caseinato proteolisis 72 horas generales
Stenotropomona maltophilia S1A1 S1A2 Bacilo Gram Colonias amarillas, pequeñas y medianas 13.5 mm Negativa Especie ubicua
negativo con fuerte olor amoniacal importante patógeno
que produce
infecciones
nosocomiales
Pseudomonas S1A1 S2A1 S3A1 S3B2 Bacilo Gram Colonias redondas, pequeñas de color 8.0 mm Positiva Ampliamente
Aeuginosa negativo crema, mucoides y con olor frutal distribuida en la
naturaleza, suelo,
agua, desempeñando
un papel importante de
materia orgánica.
Aeromona hydrophilla S1A1 S1B1 S2A1 S2B1 Bacilo Gram Colonias pequeñas redondas bien 10.0 mm Positiva Viven el libertad en
negativo definidas, grisáceas agua dulce, salada,
estancada y en el
suelo.
Klebsiella pneumoniae S2A1 S2B1 S4B1 Cocobacilo Gram Colonias blanco grisáceas 9.5 mm Negativa Se encuentra difundida
negativo en la naturaleza, suelo
agua y vegetales.
Enterobacter cancerogenus S3A1 S4A1 Cocobacilo Gram Colonias pequeñas amarillas 10.0 mm Negativa Ampliamente
negativo distribuida en la
naturaleza y aguas
contaminadas
Sphingomona paucimobilis S4A2 S4B2 Coco Gram Colonias pequeñas, anaranjadas 10.0 mm Negativa Ampliamente
negativo distribuida en la
naturaleza, suelo y
agua.
Shigella sp. S1A1 S3A2 S4B2 Cocobacilo Gram Colonias pequeñas, blancas 8.0 mm Negativa Aguas contaminadas y
negativo son metabolitamente
activas
DIFERENCIA EN LA DISTRIBUCION DE LA FLORA BACTERIANA
PRESENTE EN LA PISCINA DE HOMOGENIZACION
SEGMENTO 1 SEGMENTO 2, 3 Y 4
SEGMENTO 4
1 2 3 4
Bacterias proteolíticas
18%
Bacterias mesófilas
82%
A MAYOR TIEMPO DE INCUBACION, MAYOR ES LA
ACTIVIDAD PROTEOLITICA
Prolongar el tiempo de homogenización del agua antes de llevarla a
posteriores tratamientos con el fin de que las bacterias aeróbicas
proteolíticas alcancen un punto mas alto de proteólisis.
En estudios microbiológicos posteriores, tener en cuenta el protocolo de
medición de halos en el medio calcio-caseinato.
Purificar las colonias en sus respectivos medios selectivos, para
garantizar una optima identificación bioquímica.
Tomar por triplicado la recolección de muestra para disminuir la
variación entre las mismas.
Limpiar el homogenizador y las paredes de la piscina de homogenización.
Tomar muestras periódicas y sembrarlas en el laboratorio para confirmar
que la población bacteriana no esta ejerciendo impacto ambiental
significativo en el agua de desecho.
Integrar mas estudiantes a trabajos de investigación para desarrollar
conjuntamente.
Estudio del potencial de degradabilidad de cada una de las
especies identificadas en la piscina de homogenización de
Maltería Tropical S.A.
Papel fisiológico de las especies encontradas en el proceso de
proteólisis llevado a cabo en la piscina de homogenización.
Relación ecológica a nivel de microorganismos en el entorno
salino presentado por la bahía.
Contraste entre bacterias lipolíticas y sacar líticas presentes en
la piscina de homogenización.
Comprobación de características metabólicas adicionales en las
bacterias aeróbicas proteolíticas identificadas sembrando en
medio selectivo para bacterias lipolíticas y sacar líticas.
Caracterización genotípica de las diferentes especies aisladas en
la piscina de homogenización de Maltería Tropical S.A.
CON
PERSEVERANCIA
TRANSFORMARAS
TUS NOCHES
EN DIAS
GERMAN, HELIDA E
IVONNE