NATURALES Y DEL AMBIENTE REA DE INGENIERA AGRCOLA Y DE RECURSOS HDRICOS LABORATORIO DE BIOLOGA VEGETAL Y ECOLOGA Cdigo 73010M NORMAS SOBRE EL TRABA!O EN EL LABORATORIO 1. Las prcticas se han seleccionado con la finalidad de complementar los temas estudiados en la parte terica, adems con la finalidad de crear hbitos de trabajo en el laboratorio que conduzcan a procesos experimentales de buena calidad. 2. Los estudiantes deben de leer y entender el protocolo de cada prctica antes de ingresar al laboratorio, con el objeto de !omprender qu" #a hacer, cmo lo #a hacer, por qu" lo #a hacer y qu" espera obtener. Lizbeth Correa Melo. M. Sc $. %l estudiante ser responsable del material y equipo que emplee y en el caso de que, dentro de un grupo, no se pueda determinar indi#idualmente a los responsables del da&o, todo el grupo se considerar responsable asumiendo su costo. '. %s de anotar que en toda prctica existe una mayor o menor posibilidad de no llegar a los resultados esperados. %l objeto principal de una prctica no es determinar con precisin absoluta cierta propiedad de un sistema, sino el adquirir un conocimiento slido sobre el procedimiento de trabajo por seguir, en la determinacin y en el anlisis de resultados. %sto no autoriza al estudiante para trabajar descuidadamente ni con inexactitud, puesto que slo la continua ejecucin de prcticas, con la mayor exactitud posible, le dar una experiencia aceptable. (. )e consideran faltas de "tica imperdonables, que sern sancionadas en todos los casos el in#entar, sustraer, copiar y rendir informes sobre datos que no han sido tomados personalmente como resultado de una experiencia pre#ia. )iempre que sea necesario rendir informes basados en datos no determinados personalmente por el estudiante, "ste estar obligado a citar la fuente de procedencia de estos datos y el autor de ellos. *. + todo alumno se le exige, mientras est" en la prctica de laboratorio, portar blusa blanca adecuada para tales fines. ,. +l terminar una prctica, el laboratorio debe quedar en el mismo estado de orden y aseo que ten-a antes de comenzar la prctica. .. Los estudiantes debern seguir ciertas normas de comportamiento, como no fumar, no comer, no hacer regueros, salpicaduras de reacti#os/ ni perturbar el orden y silencio que requiere el trabajo. 0. 1ebe ser puntual, al inicio de la practica, de ello depender su "xito en el laboratorio. LABORATORIO " 1 USO Y MANE!O DEL MICROSCO#IO OB!ETIVO 1. 1isponer correctamente el microscopio para las obser#aciones 2. 2dentificar fcilmente las partes de un microscopio compuesto $. 3anejar adecuadamente la t"cnica de preparar y obser#ar diferentes materiales, as- como el ajuste y enfoque correctos de sus imgenes. 2 Lizbeth Correa Melo. M. Sc
FUNDAMENTO DE LA #RACTICA %l microscopio es un instrumento ptico que permite obser#ar seres o estructuras que no se pueden percibir a simple #ista. 4ay di#ersas clases de microscopio, como el microscopio simple o lupa, el microscopio compuesto, el microscopio de luz ultra#ioleta, el microscopio electrnico, el microscopio de contraste de fases, el microscopio de polarizacin y otros %l microscopio compuesto es el principal instrumento de todos los utilizados en el estudio de los organismos #i#ientes. 5iene dos sistemas de lentes objeti#o y ocular. 6ara el m"dico es un instrumento fundamental, ya que permite estudiar los cambios celulares que la enfermedad produce y contribuye as- en forma fundamental al diagnstico cl-nico. MATERIALES Y REACTIVOS 3icroscopio ' !ubre y ' portaobjetos Letra $ 7min8scula9 recortada de papel peridico 6apel milimetrado, 1 cm 2
:ecorte de un figura o foto de re#ista ;otero o <rasco La#ador #ARTE E%#ERIMENTAL 1. 6+:5%) 1%L 32!:=)!=62= !=36>%)5= +l estudiar el diagrama tenga en cuenta que su microscopio puede ser distinto al que se muestra. L&' (&)*$' 'o+ $'$+,i&-.$+*$ -&' .i'.&'/ Lo,&-0,$-&' &+*$' d$ 1'&) $- &(&)&*o. :ealice una consulta bibliogrfica sobre el uso y manejo de cada una de las partes del microscopio ptico. 3 Lizbeth Correa Melo. M. Sc #&)*$' .$,2+i,&'/ La 3&'$ tiene forma de >, sir#e para darle estabilidad al instrumento. %l 3)&4o sir#e para transportarlo y soportar algunas piezas como el *o)+i--o .&,)o.5*)i,o 7para enfoque aproximado9 y el *o)+i--o .i,)o.5*)i,o 7para enfoque de precisin9. + #eces estos tornillos estn acoplados en uno solo. La (-&*i+& es una placa metlica con una perforacin central sobre ella se coloca la preparacin que se #a a obser#ar. ;eneralmente posee un par de pinzas para sostener la lmina y un sistema mecnico denominado ,&))o, para mo#er la preparacin de derecha a izquierda y de adelante hacia atrs. + #eces posee dos escalas que permiten fijar una determinada estructura en la preparacin obser#ada. %l *13o (*i,o tiene como funcin soportar los oculares. %l )$6o-6$) o (o)*& o37$*i6o se encuentra en la parte inferior del tubo ptico y en el se encuentran los objeti#os. %l ,o+d$+'&dor se encuentra debajo de la platina y su funcin es la de soportar las lentes que recogen los rayos luminosos. E'($7o tiene dos caras una plana y otra cnca#a. La segunda se usa solo cuando el microscopio no tiene condensador. 4 Lizbeth Correa Melo. M. Sc #&)*$' (*i,&'. E- o37$*i6o es el lente mas importante del microscopio la que controla el aumento posible y la claridad de la imagen. 5odos los objeti#os se acoplan a los microscopios mediante roscas estndar y pueden ser cambiadas de un microscopio a otro independientemente de su marca. Los aumentos mas utilizados son (?,1@?,2@?,'@? y 1@@?. )i examinamos un objeti#o obser#amos que hay cifras grabadas por ejemplo '@? A @,,@1*@A @,1, en donde '@? es el aumento del objeti#o y @,,@ es la abertura num"rica, es decir la medida del tama&o del cono de luz que el objeti#o puede admitir, 1*@ es la longitud en mm del tubo ocular que debe ser utilizado con ese objeti#o, @,1, es el espesor del cubre objeto7en mm9 que debe utilizarse con ese objeti#o. E- o,1-&) se compone de dos lentes. La lente inferior recoge la imagen del objeti#o, la reduce y la reforma dentro del ocular a ni#el del limitador del campo #isual. La lente superior forma una imagen #irtual aumentada para ser #ista. %l aumento de los oculares oscila normalmente entre ?( y ?1(. %l ,o+d$+'&do) es la lente que ilumina la lente del objeti#o, su abertura num"rica debe ser suficientemente alta para suministrar el cono de luz requerido. %n la parte inferior del condensador hay una abertura regulable, o diafragmaBiris controlado por una palanca lateral. 4ay tambi"n un anillo para alojar filtros coloreados o de luz natural. 2. 6reparacin de materiales los materiales ha estudiar, se colocan en una lmina de #idrio llamada portaobjetos o lmina. ;eneralmente, se cubre el material que se encuentra sobre el portaobjetos con un #idrio muy delgado de forma circular o cuadrada, llamado laminilla o cubre objetos. 5anto el porta como el cubre objetos deben de estar pticamente limpios. 5ome un cuadrito de papel peridico que contenga la letra $, colquelo sobre el portaobjetos en el centro, con el lado de abajo de la letra e hacia arriba. 6onga una gota de agua sobre el papel. 5 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 1espu"s de esperar unos segundos hasta que el agua haya empapado el papel, coloque la laminilla sobre la preparacin, si quedan algunas burbujas de aire se presiona ligeramente la laminilla con un lpiz hasta que desaparezcan. $. %nfoque del microscopio coloque la preparacin anterior sobre la platina en tal forma que el cuadrito de papel quede encima de la abertura y luego fije la lamina mediante las pinzas que hay en la platina. 4aga rotar el re#l#er, ponga el objeti#o de 1@x en posicin, y al mismo tiempo que obser#a el microscopio lateralmente haga descender el tubo, usando el tornillo macrom"trico hasta que el objeti#o de 1@x 7menor aumento9 a un par de mil-metros de la laminilla o hasta que lo impida el tope que tienen algunos microscopios. Cunca haga bajar el tubo del microscopio sin obser#ar su descenso. )i lo hace corre el riesgo de romper el objeti#o, la laminilla y la lmina destruyendo una preparacin que quizs sea irremplazable y a su #ez causar da&os gra#es al objeti#o. %ste en uno de los peores errores que usted puede cometer al manejar el microscopio. %s importante tener en cuenta que siempre que se haga una obser#acin al microscopio debe usarse en primer lugar el objeti#o de menor aumento. )eg8n el microscopio puede ser el de 'x o 1@x. 1e#uel#a lentamente el tubo del microscopio con el tornillo macrom"trico mientras obser#a por el ocular hasta #isualizar la imagen. +clrela con el tornillo microm"trico hasta obtener la mejor imagen posible. H&g& -o' &71'*$' +$,$'&)io' ,o+ $- di&8)&g.& 9 $- ,o+d$+'&do) (&)& o3*$+$) 1+& i-1.i+&,i+ &d$,1&d&. :esponda DEu" posicin tiene la imagen con respecto a la que se #e desde afueraF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGG 3ue#a la lamina hacia delante. D%n qu" direccin se mue#e la imagenF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGG 3ue#a la lmina hacia la derecha. D%n qu" direccin se mue#e ahora la imagenF 6 Lizbeth Correa Melo. M. Sc GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGG )in cambiar la posicin del tubo, cambie el objeti#o de 1@x por el de '@x 7 '(x9 haciendo rotar el re#l#er y enfoque cuidadosamente utilizando el tornillo microm"trico. 4a cambiado la imagen con respecto a la obser#ada a menor aumento D6or qu"F GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGG D%s el campo de obser#acin mayor o menorF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGG %s la iluminacin ms o menos brillante que con el objeti#o de menor aumento D6or qu"F GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG :ealice un grfico de su imagen, bajo los $ aumentos usados indicando el objeti#o utilizado 7$x, 1@ y '@?9 :etire la preparacin cuidadosamente de la platina y cons"r#ela para obser#aciones posteriores, si ad#ierte que comienza a secarse a&ada un poco de agua en la siguiente forma con un gotero deposite una gota de agua en el borde de la laminilla 7C= 1%H% L%I+C5+:)%9 el agua penetra en la preparacin por capilaridad. '. 3edida microscpica la unidad de longitud ms frecuentemente usada en microscopio es la micra, cuyo s-mbolo es la letra griega JmuK 79 y equi#ale a una mil"sima de mil-metro. 7 Lizbeth Correa Melo. M. Sc %n los laboratorios de in#estigacin se utiliza un instrumento, el micrmetro o ret-culo microm"trico, para determinar las medidas microscpicas. )i no se dispone de un micrmetro es posible estimar el tama&o de los objetos microscpicos en obser#acin si se conoce el dimetro del campo/ #eamos cmo a. !oloque un pedazo de papel milimetrado sobre el portaobjeto de tal manera que al enfocar al microscopio pueda obser#arlo. 3ida entonces el dimetro del campo correspondiente al objeti#o de menor aumento contando el n8mero de cuadr-culas obser#adas. D!unto mide el dimetro del campo del objeti#o de menor aumentoF %n mil-metros GGGGGGGGGGGGGGG %n micras GGGGGGGGGGGGGGG b. !on el dato anterior es posible determinar el dimetro del campo correspondiente al objeti#o de mayor aumento/ basta di#idir el dimetro encontrado por la razn entre las magnificaciones del objeti#o de mayor aumento y de menor aumento. 6or ejemplo, si el aumento del objeti#o de mayor significacin es de '(x y el otro es de 1(x la razn mencionada ser '(A1( L $/ ahora si el campo correspondiente al objeti#o de menor aumento es de 1.(@@. el dimetro de campo para mayor aumento es 1.(@@A$ L (@@ micras. %ntonces, Dcuntas micras mide el dimetro del campo del objeti#o de mayor aumentoF c. :etire el papel milimetrado y reemplcelo con la preparacin que contiene la letra $. D!ul es la altura de dicha letraF %n mil-metros GGGGGGGGGGGGGGG %n micras GGGGGGGGGGGGG d. 5al como se indico en la parte 1, monte ahora un pedazo de un grabado de una re#ista, tal grabado consiste en una multitud de puntos dispuestos de tal forma que la densidad del grabado depende del tama&o y n8mero de puntos en las distintas reas. Las distancias entre los puntos dependen del clich" o de la maquina impresora. D!untos puntos puede #er en el campo del objeti#o de menor aumento, y en el de mayor aumentoF GGGGGGGGGGGG, GGGGGGGGGGGGGG !on el ejercicio anterior se proporciona un ejemplo del poder de resolucin. +s-, con el ojo desnudo solo podemos #er las #ariadas densidades del grabado, mientras que con el microscopio nos es posible distinguir puntos. Lo anterior significa que se han resuelto los puntos. 8 Lizbeth Correa Melo. M. Sc (. !ada dibujo tomado de algo que se obser#a al microscopio debe lle#ar el respecti#o aumento o #eces que fue ampliado. %sto se determina por la siguiente frmula + L 5ama&o del dibujo hecho 5ama&o real del objeto %l aumento se expresa en ?/ el tama&o del dibujo se determina midiendo el dimetro de dicho dibujo y el tama&o real del objeto se hace con base en el tama&o de su imagen con respecto al dimetro del campo. %jemplo el aumento de un dibujo de un objeto hecho con un dimetro de * cm, cuya imagen mide la mitad de un campo microscpico de 1@x de dimetro de 1.2@@ micras. + L 5ama&o del dibujo 5ama&o del objeto 5ama&o del dibujo real * cms L *@.@@@ micras 5ama&o real del objeto L 1imetro del campo de 1@x 2 L 1.2@@ micras L *@@ micras 2 + L *@.@@@ micras L 1@@x *@@ micras !alcule el aumento del dibujo realizado por usted de la letra $ bajo el menor objeti#o 9 Lizbeth Correa Melo. M. Sc CONCLUSIONES DEL LABORATORIO "1 BIBLIOGRAFA 10 Lizbeth Correa Melo. M. Sc LABORATORIO " : MORFOLOGA CELULAR OB!ETIVO 1. :econocer algunas caracter-sticas morfolgicas generales de las c"lulas representati#as como los son c"lulas de la mucosa oral, c"lulas de epidermis de cebolla, c"lulas de elodea, algas y protozoarios.
FUNDAMENTO DE LA #RACTICA %s posible estudiar los aspectos morfolgicos celulares ms aparentes con el microscopio de luz. )in embargo, los detalles estructurales son muchas #eces obser#ables solamente a gran resolucin y requieren m"todos especiales como el uso de microscopio electrnico. 5ambi"n es importante anotar que, las estructuras celulares presentan en general muy poco contraste entre si y es necesario hacerlas resaltar selecti#amente, bien mediante la reaccin qu-mica con tinciones especificas que destaquen la reaccin qu-mica con elementos celulares o aumenten espec-ficamente la densidad ptica de los mismos o bien mediante ciertas t"cnicas de sombreado que permitan apreciar los relie#es de la superficie que se obser#en. MATERIALES Y REACTIVOS !ebolla cabezona 3icroscopio 4ojas de elodea +zul de metileno +gua estancada o de un florero Lugol Le#adura Haja lengua !ubre y portaobjetos #ARTE E%#ERIMENTAL a. estudio de las c"lulas epiteliales de la mucosa oral La ca#idad oral se encuentra re#estida por una membrana celular de capas m8ltiples. %s fcil desprender las c"lulas ms superficiales de dicha membrana sin causar demasiado traumatismo a la misma y estudiar sus caracter-sticas generales. 11 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 6reparacin con un baja lengua efect8e un raspado de la mejilla interna y colquelo sobre un portaobjetos tratando que el material quede bien extendido. +gr"guele una gota de azul de metileno, deseche el exceso y obser#e la preparacin al microscopio utilizando objeti#os 1@x y '@x 1ibuje esquemticamente lo obser#ado, indique con nombres las estructuras obser#adas y el aumento de cada esquema. 1escriba lo obser#ado. :elacione la forma con la funcin. GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG b. !"lulas de epidermis de cebolla Las cebollas parecen materiales muertos cuando usted las compra en el mercado. %n realidad son bulbos formados por c"lulas #i#as de las cuales pueden crecer ra-ces y hojas cuando las cebollas se plantan o se almacenan en sitio h8medo. !orte un bulbo de cebolla en cuatro partes. )e obser#a que cada parte se separa por si sola en capas llamadas catfilos. 5ome uno de estos catfilos con la superficie cnca#a hacia usted y rmpala, entonces #era que se desprende con facilidad una capa muy delgada y transparente que es la epidermis. 1. 5ome un fragmento de epidermis y colquelo en un portaobjetos con una gota de agua de modo que la superficie que estaba en contacto con el catfilo quede hacia arriba. !oloque sobre "l un cubreobjetos. 1ibuje bajo el campo de obser#acin de '@x 12 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 2. +hora saque la preparacin del microscopio y coloque una gota de lugol en el borde del cubreobjeto para que la solucin penetre por difusin. %xtraiga el l-quido sobrenadante con papel toalla. 1ibuje bajo el campo de obser#acin de '@x identificando las estructuras celulares obser#adas DEu" forman tienen estas c"lulasF D6osee adaptaciones relacionadas con su funcinF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG !on el objeti#o de '@ o 1@@ x, Dcul es el color y la forma del n8cleo despu"s de la adicin del lugolF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG D!ul es la estructura celular que se obser#a dentro del n8cleoF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG $. 5ome un poco de le#adura y colquelo sobre el portaobjetos, agr"guele una gota de agua y c8bralo con el cubreobjetos. =bser#e primero con el objeti#o de menor aumento y luego con el de mayor aumento. DEu" aspectos tienen las c"lulas de le#adura y qu" estructuras logra #isualizar en ellasF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 13 Lizbeth Correa Melo. M. Sc '. 5ome la preparacin anterior y agregue una gota de Lugol sin le#antar el cubreobjetos, deje que difunda el colorante y luego obser#e usando diferentes objeti#os. 1ibuje bajo el aumento de '@? y se&ale las estructuras obser#adas. DEu" estructuras puede obser#ar mejor con o sin lugolF %n general DEu" diferencias encuentran entre las c"lulas te&idas y las que no lo estnF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG !ompare las c"lulas anteriormente obser#adas, D%n qu" se asemejanF D%n qu" se diferencianF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG c. 6rotozoarios y algas Las algas y los protozoarios son organismos unicelulares de mayor tama&o que las bacterias. Las primeras son consideradas como #egetales y los segundos como animales. !uando las algas alcanzan determinado tama&o se reproducen por di#isin celular/ las dos c"lulas hijas pueden separarse o permanecer en cadenas formando filamentos o masas den forma de colonias. !oloque una gota de culti#o de microorganismos sobre el portaobjetos, coloque una laminillas y obs"r#ela al microscopio. DEu" diferencias encuentran entre las algas y el protozoario que esta obser#andoF 7+pyese en re#isin bibliogrfica9 14 Lizbeth Correa Melo. M. Sc GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 1ibuje por lo menos tres ejemplares de cada uno e identif-quelos con una gu-a de protozoarios y algas 7lle#e la gu-a a la prctica9. Llene el siguiente cuadro 15 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 16 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 17 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 18 Lizbeth Correa Melo. M. Sc CONCLUSIONES DEL LABORATORIO ": BIBLIOGRAFA 19 Lizbeth Correa Melo. M. Sc LABORATORIO " 3 DIVISI;N CELULAR< MITOSIS =HM%52I=) 1. =bser#ar e interpretar figuras de distintas fases de la mitosis en c"lulas #egetales. 2. 6reparar placas te&idas para obser#ar las fases de la mitosis $. 1eterminar los -ndices de fase mittico. <>C1+3%C5= %l proceso de reproduccin celular conocido con el nombre de mitosis, puede ser estudiado eligiendo un material constituido por c"lulas que se hallen en continua di#isin. %sta condicin la re8nen los meristemos terminales o primarios, tales como los que se encuentran en el pice de las ra-ces. >n bulbo de cebolla cuya base se mantenga en contacto con el agua durante ' ( d-as, proporciona abundante cantidad de raicillas j#enes, muy apropiadas para la obtencin de muestras destinadas a obser#ar figuras de mitosis. 3+5%:2+L%) N :%+!52I=) 3icroscopio 6orta y cubreBobjetos Iidrio de reloj 6inzas finas !uchilla de afeitar 5iras de papel de filtro =rce-na ac"tica clorh-drica 6inzas de madera 3echero un bulbo de cebolla
6+:5% %?6%:23%C5+L >nos cinco d-as antes de realizar la prctica, se colocar un bulbo de cebolla tapando la boca de un frasco, que se llena hasta que el agua toca la base de la cebolla. )e logra as- el desarrollo de numerosas raicillas j#enes, cuando "stas tengan una longitud de $ cent-metros es el momento adecuado para hacer la preparacin. 1. !ortar con unas tijeras finas o cuchilla de afeitar, los ( 8ltimos mil-metros de las raicillas, depositndolas en un #idrio de reloj. 2. 6ara colorear las ra-ces, cubrir la muestra con orce-na ac"tica clorh-drica. +proximadamente unos 2 cm $ de orce-na. $. 1ejar que actu" el colorante durante 1@ minutos. '. 5omar el #idrio de reloj por los bordes, ayudndonos de una pinza de madera y calentarlo sua#emente a la llama del mechero, e#itando la ebullicin y esperar hasta que se emitan #apores tenues. 1eje enfriar (. :epita el paso ' por dos y tres #eces *. !on las pinzas finas tomar con cuidado una ra-z y colocarla sobre un portaobjetos, cortar los 8ltimos 2 $ mil-metros y desechar el resto. ,. !olocar el cubreBobjetos y encima una almohadilla hecha con papel toalla sobre la que se ejerce presin con el dedo pulgar, primero sua#e, despu"s ms intensa, para aplastar la muestra, t"cnica conocida como squash .. +spirar con el papel de filtro o toalla de papel el exceso de colorante. 20 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 0. =bser#ar al microscopio primero a menor aumento y luego con aumentos mayores, recorriendo di#ersos campos para descubrir en las c"lulas obser#adas las distintas fases de la mitosis. =H)%:I+!2OC +L 32!:=)!=62= La preparacin presenta el aspecto de una dispersin de c"lulas por todo el campo que abarca el microscopio. )e obser#arn c"lulas en distintas fases o estados de di#isin celular. !on esta t"cnica de tincin se #en los cromosomas impregnados por la orce-na en color morado. %l aspecto reticulado, as- como el mayor tama&o de algunos n8cleos, corresponde a las c"lulas que se encontraban en los procesos iniciales de la di#isin. :%)>L5+1=) 1. 1etermine el -ndice mittico 7239 C8mero de c"lulas en mitosis A n8mero de c"lulas totales, contando por lo menos $@@ c"lulas. 6ara esto mue#a #arias #eces el campo microscpico y cuente en cada ocasin el n8mero de c"lulas en interfase y en mitosis hasta completar el n8mero indicado. )imultneamente determine los -ndices de fase A n8mero de c"lulas totales 2. !ompare sus datos con los de los compa&eros, hay relacin entre los -ndicesF $. :ealice esquemas de cada fase preferiblemente en el mayor aumento 7en 1@@ recuerde usar aceite de inmersin y limpiar luego el lente9. '. DEu" tipo de colorante es la orce-naF (. D!ul es su efecto sobre el meristemo de cebolla y no otro tejido #egetalF *. DEu" es meristemoF ,. DLa mitosis en c"lulas #egetales es igual a la presentada en c"lulas animalesFD!ules son las diferencias, si las hayF CONCLUSIONES DEL LABORATORIO "3 21 Lizbeth Correa Melo. M. Sc BIBLIOGRAFA LABORATORIO " ESTRUCTURA DE RA=> TALLO Y HO!A 22 Lizbeth Correa Melo. M. Sc OB!ETIVOS 1. :econocer los diferentes tallos en plantas monocotiledneas y dicotiledneas. 2. %stablecer la diferencia anatmica en plantas monocotiledneas y dicotiledneas $. 1eterminar y aprender los sistemas radicales ms importantes, tambi"n la morfolog-a externa y anatom-a de la ra-z, en plantas monocotiledneas y dicotiledneas FUNDAMENTO +l hacer un estudio morfolgico de las plantas, encontramos que los tallos se diferencian notoriamente no solo en su forma y tama&o, sino tambi"n en su anatom-a. !omo resultado de lo anterior, los tallos de las plantas se di#iden en le&osos y herbceos. Los primeros presentan un gran rango en tama&o y dimetro, mientras que los segundos se caracterizan por presentar tejidos blandos y corteza generalmente #erde. +dems de estas dos grandes di#isiones de los tallos, existen modificaciones de ellos tales como rizomas, tub"rculos, bulbos, etc., los cuales se caracterizan por presentar abundantes tejidos de almacenamiento. 6or lo general, la ra-z es la parte de la planta que crece dentro del suelo, sin embargo algunas orqu-deas y Hromeliceas, etc., presentan ra-ces a"reas. %ntonces es clara que la situacin con respecto al suelo no siempre pude utilizarse para identificar ra-ces, por lo que es necesario determinar y utilizar la estructura interna y externa. Las ra-ces pueden ser primarias, secundarias o ad#enticias en cuanto a su origen, pi#otantes o fasciculadas por su morfolog-a. La ra-z de las monocotiledneas presenta slo crecimiento primario 7xilema y floema primario9, mientras que el grupo de las dicotiledneas y gimnospermas en las primeras etapas de su ciclo presentan crecimiento primario y en edad ms a#anzada muestran un crecimiento secundario que les da bsicamente un aumento en dimetro. 23 Lizbeth Correa Melo. M. Sc MATERIALES - 3icroscopio compuesto, microscopio estereoscpico. - %lodea - 6lanta de rbano, ma-z, fr-jol, escoba - 5allos de #erdolaga, zapallo, flor amarillo, mango, sorgo, cordia, )an Moaqu-n, gitana - :a-ces de zapallo, tradescandia - <luoroglucina. - Pcido clorh-drico concentrado. 24 Lizbeth Correa Melo. M. Sc - +gua destilada. - 6lacas porta y cubreobjetos #ARTE E%#ERIMENTAL I ESTRUCTURA DE LA RA= 1/ Si'*$.&' R&di,&-$' +. %n una planta de escoba 7)ida sp9 estudie su sistema radical. Cote que presenta una ra-z principal, la cual es continuacin del tallo. + partir de la ra-z principal 7pi#otante9, se deri#an las ra-ces secundarias. H. 5ome una planta de ma-z o pasto y realice el mismo estudio como en el caso +. %l sistema radical del ma-z se denomina fibroso. :/ Mo)8o-og0& E?*$)+& d$ -& R&04 Hajo el microscopio estereoscpico examine una plntula de rbano 7:aphanus sati#us9. :etirando tan solo la tapa de la caja de petri, ya que los pelos rad-culares son muy sensibles a la sequedad. 1etermine - !ofia la parte ms apical de la ra-z. - 3eristema +pical protegido por la cofia - Qona de alargamiento - Qona de los pelos radicales 25 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 4aga dibujos de lo obser#ado 3/ A+&*o.0& d$ -& R&04 +. 5ome una ra-z de zapallo, colquela y realice #arios cortes longitudinales. 5-&alos con fluoroglucina y al microscopio determine cofia o piloriza, meristema apical. H. !recimiento 6rimario de 1icotiledneas. :ealice #arios cortes trans#ersales en la zona ms jo#en de ra-z de fr-jol 76haseolus #ulgaris9, t-&alos con fluoroglucina, mas 4!l concentrado y determine disposicin radial del xilema, regin del cambium, floema, endodermis y periciclo. !. !recimiento )ecundario de 1icotiledneas. %n cortes trans#ersales de ra-z de fr-jol o escoba en la regin ms #ieja, t-&alos con fluoroglucina ms 4!l concentrado, obser#e m"dula, xilema secundario, regin del cambium #ascular, floema secundario, etc. 1. :a-ces )ecundarias. %n cortes trans#ersales de ra-z de tradescandia y otra planta realice cortes trans#ersales. !olor"elos con fluoroglucina ms 4!l concentrado, obser#e formacin de las ra-ces secundarias. 4aga dibujos %. !recimiento 6rimario en 3onocotiledneas. :ealice cortes trans#ersales de tradescandia o ma-z, color"elos con fluoroglucina ms 4!l concentrado y obser#e xilema y floema primarios, periciclo, endodermis, bandas de caspary de color rojo. 4aga dibujos. II ESTRUCTURA DEL TALLO 1/ #&)*$' d$- T&--o R 3orfolog-a %xterna %n tallos de mango 73angifera indica9, zapallo 7!uc8rbita pepo9 y otros indicados por el profesor. 1etermine a. 4ojas. b. Nemas terminales y axilares. c. Cudos y entrenudos d. !icatrices. 4uellas dejadas en los nudos por hojas y frutos. 26 Lizbeth Correa Melo. M. Sc :/ A+&*o.0& d$- T&--o A Di,o*i-$d+$&' 1. !recimiento 6rimario. :ealice cortes trans#ersales y longitudinales de #erdolaga 76ortulaca sp.9 o gitana 7!oleu sp.9 en las partes ms j#enes/ t-&alos con fluoroglucina y obser#e al microscopio. 1etermine haces #asculares, regin del cambio #ascular, xilema y floema primarios, m"dula, etc. 2. !recimiento )ecundario. - 4aga cortes trans#ersales y longitudinales de las especies anteriores, de las partes adultas, y t-&alos con tionina o fluoroglucina ms 4!l concentrado. %ncuentre alguna diferencia con los cortes hechos en las partes j#enes. - 4aga cortes trans#ersales y longitudinales de san joaqu-n o cordia y t-&alos con fluoroglucina ms 4!l concentrado. 1etermine al microscopio xilema primario, floema y xilema secundario, radios #asculares, m"dula, regin del cambium #ascular, etc. B Mo+o,o*i-$d+$&' %n cortes trans#ersales y longitudinales de sorgo 7)orghum #ulgare9 o un pasto, t-&alos con fluoroglucina ms 4!l concentrado. 1etermine epidermis, corteza, haces #asculares, xilema, floema, fibras, etc. %stablezca la diferencia anatmica entre las mono y dicotiledneas. III CLORO#LASTOS EN ELODEA 1esprenda una hoja de elodea, colquela sobre el porta objetos y c8brala con el cubreobjetos, obser#e al microscopio empezando siempre por el menor aumento. %squemticamente lo obser#ado, indicando las posibles estructuras con su nombre. 2ndique en cada esquema el aumento. =bser#e las diferentes c"lulas las del borde, las cercanas a la ner#adura, las del limbo. DIar-an en algo ms, fuera de la formaF. =bser#e los cloroplastos, describa su forma y coloracin. D%s constante el n8mero de cloroplastos por c"lulaF D!mo estn distribuidosF %xplique. D)e presentan algunas otras estructurasF GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG 27 Lizbeth Correa Melo. M. Sc GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG GGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGGG %squematice lo obser#ado y se&ale las estructuras obser#adas. #REGUNTAS 1. !ompare las estructuras del pice del tallo y del pice de la ra-z. D%n qu" son similaresF D!ules son sus diferenciasF 2. 1escr-banse las funciones ms importantes de la ra-z. $. Cmbrese los cationes y aniones que principalmente son absorbidos por la ra-z. '. DEu" es el pericicloF D+ qu" da origen el pericicloF (. Las ra-ces son en algunos casos rganos de almacenamiento de las plantas Cmbrese esos casos y el tipo de tejido en el cual almacena la ra-z. *. D!ules son las funciones de la ra-zF ,. %xplique la relacin del crecimiento secundario en los tallos con los usos econmicos de la madera y sus productos. .. 1escriba bre#emente como crecen los tallos en longitud y grosor. 0. %numere la distincin entre el cambium #ascular y cambium suberoso desde el punto de #ista de posicin y funciones. 1@. 1iga que es un rizoma, tub"rculo, cormo y bulbo. 28 Lizbeth Correa Melo. M. Sc 29 Lizbeth Correa Melo. M. Sc CONCLUSIONES DEL LABORATORIO " 30 Lizbeth Correa Melo. M. Sc BIBLIOGRAFA BIBLIOGRAFA +L3+CQ+, S. 10... Bo*2+i,& Ag)0,o-& %dit. 2nst. Muan de !astellanos 31 Lizbeth Correa Melo. M. Sc !+)5:= <%:C+C1=, ITL%Q 3+:2+ !+5+L2C+. ;=CQPL%Q 2IPC. :=C1UC <%:C+C1=. M&+1&- D$ #)&,*i,&' Y T&--$)$' E+ Bio-og0& G$+$)&-/ 1epartamento 1e Hiolog-a. <acultad 1e !iencias. >ni#ersidad 1el Ialle 2@@2 1V+Q. <., 100@. Bo*2+i,& G$+$)&-/ G10& d$ L&3o)&*o)io. >ni#ersidad del Ialle, 1epartamento de Hiolog-a. <>LL%:, 4.M., Q.H. !+:=54%:), S.S. 6+NC%, 3.W. H+LH+!4, 10,'. Bo*2+i,&. %ditorial 2nteramericana. ;O3%Q =. 4>3H%:5=, ;+LPC :=H%:5=, 4%:%12+ <+H2=. C1)'o d$ Bio-og0& @6$g$*&-> A+i.&- 9 H1.&+&A/ %ditorial Corma. 10*' M%C)%C, S. 10... Bo*2+i,& 2 edicin 3c;raX 4ill. :+3=), M. 10.,. Bo*2+i,& 9 Fi'io-og0& V$g$*&-/ M&+1&- d$ L&3o)&*o)io. >ni#ersidad del Ialle. <acultad de !iencias. 5=::%) !%L2C+. H:+C1 L2Q%54. %:+Q= 3OC2!+. #)&,*i,&' D$ L&3o)&*o)io D$ Mi,)o3io-og0&. 1epartamento 1e Hiolog-a. <acultad 1e !iencias. >ni#ersidad 1el Ialle 2@@2 httpAAXXX.arraYis.esAZefluendoAbioquimica.html . 32