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5 Preparaciones temporales y preparaciones fijas

PREPARACION DEL MATERIAL A ER O!ER"ADO EN #N MICROCOPIO
Existen dos tipos de preparaciones microscpicas, stas corresponden a las
preparaciones permanentes y a las preparaciones temporales. Ambas deben ser
lo ms delgadas posible para dejar pasar la luz a travs de l y as lograr una
buena observacin
Preparaciones temporales
Los preparados temporales se realizan generalmente con agua
destilada, glicerina o simplemente agua corriente un medio li!uido", la
utilidad es simple observar alguna estructura u organismo #in vivo#, por
ejemplo para observar los protozoos !ue $abitan en cuerpos de agua
dulce se utiliza estos preparados% solo se toma una gota de agua de
ese cuerpo de agua, se la coloca entre porta y cubreobjeto y se la mira
al microscopio, tienen una duracin limitada.
Las preparaciones temporales corresponden a cortes &rescos del material a
observar, los !ue se realizan en el momento y tienen una corta duracin. 'na vez
realizados los cortes, se coloca una gota de agua en un portaobjetos, y en ella se
ubica un trozo del material a observar, el !ue debe !uedar completamente cubierto
por el agua. (obre esta preparacin se coloca cuidadosamente un cubreobjeto,
evitando la &ormacin de burbujas !ue inter&ieren en la observacin microscpica.
)inalmente, se elimina exceso de agua, y la preparacin puede te*irse para ser
observada.
Preparaciones fijas
Los preparados de&initivos re!uieren de un medio de montaje, como
alguna resina, !ue se endurezca, por ejemplo utilizar +oyer" !ue
depende del tipo de preparado !ue ests realizando y del organismos
con el !ue ests trabajando. (e utilizan para observar en detalle
estructuras !ue de otro modo no pueden ser vistas puede ser por!ue
re!uieren de inmersin" o por!ue se re!uiere de tinciones o cortes
muy &inos. ,ambin se utilizan para albergar organismos en
colecciones permanentes.
Las preparaciones permanentes son a!uellas !ue se $an sometido a un proceso
largo de preparacin, el !ue permite !ue se mantengan en buenas condiciones
para su observacin por periodos prolongados de tiempo. La preparacin de
estas muestras incluye etapas de &ijacin del material, des$idratacin, inclusin en
para&ina, corte de la muestra en capas muy &inas con un micrtomo, colocacin de
estas capas !ue contienen la muestra en un portaobjetos, disolucin de la
para&ina, tincin de la muestra para contrastar las di&erentes estructuras celulares
y colocacin de un cubre objetos para proteger la preparacin.
Existen numerosas tinciones !ue se utilizan en microscopa y permiten una mejor
observacin de las estructuras celulares al contrastar en &orma selectiva molculas
determinadas. -eneralmente se usan di&erentes colorantes, algunos ejemplos de
ellos son el lugol !ue ti*e los granos de almidn de color azul.morado, la
&loroglucina !ue ti*e de rojo violeta las paredes celulares ligni&icadas, el azul de
metileno !ue ti*e el protoplasma y las paredes celulares celulsicas, etc.
La fijaci$n es un mtodo !ue se utiliza para preservar la mor&ologa y la
composicin !umica de las clulas !ue componen una preparacin microscpica.
/onsiste en agregar agentes &ijadores a la muestra como acetona, &ormalde$do o
glutaralde$do, los cuales mantienen las interacciones entre las molculas
protenas, cidos nucleicos, etc." y permiten !ue las preparaciones duren en buen
estado durante meses o a*os.
'no de los mtodos ms utilizados para realizar preparaciones permanentes
consiste en &ijar el material de inters en una solucin )AA &ormalde$do.alco$ol.
cido actico", concentracin entre 01 y 2113" y &inalmente embeberlo en
para&ina para obtener blo!ues !ue puedan ser cortados en secciones muy &inas
utilizando un micrmetro.
Estas secciones !ue contienen material &ijado y desecado se colocan
cuidadosamente en un portaobjetos, y se disuelve la para&ina con un solvente
orgnico como xilol. 'na vez $ec$o esto, la muestra se ti*e para contrarrestar las
distintas estructuras celulares y se protege con un cubreobjeto montado sobre una
sustancia sellante.