Control biolgico de Trichoderma harzianum RIFAI sobre hongos patgenos de frutos postcosecha de Carica papaya procedente de zonas de distribucin del distrito Trujillo (Per) Biological control of Trichoderma harzianum RIFAI on fungal pathogens of fruits postharvest of Carica papaya from distribution areas of District of Trujillo (Peru). Manuel Rodrguez-Lacherre y Roger Veneros-Terrones Departamento Acadmico de Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo. Per.
RESUMEN
Se determinaron los hongos ms frecuentes causantes de enfermedades en frutos de postcosecha de Carica papaya L. papaya amarilla, procedentes de las zonas de distribucin del distrito de Trujillo, utilizando 220 frutos enfermos atacados por hongos, en el perodo comprendido entre Enero a Noviembre de 2011. Se realizaron aislamientos, monocultivos y microcultivos de las especies patgenas en medios de cultivo Agar Sabouraud Dextrosa y Agar Lima Bean para efectuar observaciones macro y microscpicas de las estructuras fngicas, previa coloracin con Azul de Amann. Posteriormente, se investig el efecto antagnico de Trichoderma harzianum Rifai sobre los hongos patgenos de frutos de postcosecha de papaya. Los hongos fitopatgenos determinados fueron: Rhizopus nigricans Ehr., Colletotrichum gloeosporioides (Penz.)Sacc., Alternaria alternata (Fr.)Keissl, Stemphylium lycopersici (Enjoji)W. Yamamoto, Fusarium oxysporum Schlecht., Lasiodiplodia thebromae (Pat.)Griffon & Maubl. Trichoderma harzianum, demostr realizar un efectivo control biolgico sobre los hongos patgenos de frutos de postcosecha de Carica papaya papaya.
The most frequent pathogenic fungi attacking to vegetables post-harvest of Carica papaya L. yellow papaya, determined from zones of distribution of the Trujillo district, Per; between January to November 2011. Samples of the fungi were taken from sick vegetables and cultures were made on Agar Sabouraud Dextrosa and Agar Bean Lima medium. Fixation and mounting were made with Amann blue. Subsequently, it was investigated the antagonistic effect of Trichoderma harzianum on pathogenic fungi of post-harvest "papaya" fruits. Certain phytopathogenic fungi were: Rhizopus nigricans Ehr., Colletotrichum gloeosporioides (Penz.)Sacc., Alternaria alternata (Fr.)Keissl, Stemphylium lycopersici (Enjoji)W. Yamamoto, Fusarium oxysporum Schlecht., Lasiodiplodia thebromae (Pat.)Griffon & Maubl. Trichoderma harzianum, demonstrated to carry out an effective biological control on the fruits of Carica papaya "papaya" post-harvest pathogenic fungi.
El reino de los hongos est constituido por organismos heterotrficos que se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza, caracterizados por su amplio nmero y ubicuidad, participando en la degradacin progresiva de la materia orgnica y produciendo enfermedades en los vegetales, animales y el hombre 1 . En Latinoamrica como en el resto del mundo, existen numerosos hongos que son parsitos obligados o facultativos de las plantas, y constituyen la principal causa de infecciones y enfermedades en ellas 2,3 . En el Per, el panorama es parecido, encontrndose una gran variedad de hongos que atacan a plantas superiores de inters econmico, como Carica papaya L. papaya, planta arbrea, de tallo (estipe) fofo, con ltex lechoso, de gran importancia frutcola y elevada demanda, cuya parte comestible: los frutos las papayas, poseen un ltex con una enzima proteoltica, la papana, que es de uso medicinal como digestivo, en el comercio se utiliza en forma de diversos preparados para ablandar la carne en procesos industriales. Es una Caricaceae propia de clima templado a clido, ampliamente conocida y se cultiva casi en todos los pases de regiones tropicales y subtropicales de Amrica 4 . La principal caracterstica de la parte comestible, los frutos de papaya es su gran valor nutritivo, caracterizndose por un adecuado balance de compuestos orgnicos e inorgnicos. Cien gramos de la parte comestible contiene en promedio 39 Kcal de energa; 88,8% de agua; 8,90 g de carbohidratos; 24,0 mg de Ca; 15,0 mg de P; 10,0 mg Mg; 3,1 mg de Fe; 3,0 mg de Na; 257,0 mg de K; 61,8 mg de vitamina C; 38,0 mg de cido flico; 284,0 U.I. de vitamina A 5 . En nuestro pas, Carica papaya papaya de inters econmico es considerada como importante cultivo frutcola; toda la produccin de esta Caricaceae se destina al mercado nacional, razn por la que se encuentran durante todo el ao. Realmente es un cultivo que crece con mucho xito. Los frutos de papaya son de gran importancia en el desarrollo econmico y social de la agricultura a nivel mundial, y sobre todo, en la alimentacin de nuestro pas; es por ello, que revierte su importancia en el estudio de los hongos que le producen deterioro. A pesar de la existencia de sistemas de proteccin naturales, la conservacin de las partes comestibles es limitada; asimismo, las causas de la alteracin son variadas. Adems, de los deterioros enzimticos y desintegraciones, los hongos desempean un papel fundamental como causantes de podredumbres 6 . Las prdidas de los frutos de Carica papaya papaya, debidas a las enfermedades de postcosecha, generalmente son directas; porque, disminuyen la calidad y cantidad de las hojas afectadas. Por otro lado, uno de los efectos ms importantes de los ataques de hongos sobre la parte comestible es la induccin a la micotoxicosis; es decir, enfermedades de animales y del hombre ocasionadas por el consumo de alimentos invadidos por hongos que producen sustancias txicas denominadas micotoxinas. La ingestin de alimentos que contienen micotoxinas, pueden producir efectos graves, tanto en el hombre como animales. Estas sustancias pueden ocasionar enfermedades graves a nivel heptico, renal, del aparato circulatorio y de los rganos hematopoyticos, aun cuando sean ingeridos en dosis pequeas 7 . Durante varios aos se han empleado fungicidas sintticos para controlar patgenos postcosecha; sin embargo, en diversos estudios se ha demostrado que estos compuestos han causado resistencia en microorganismos, incluyendo a los hongos y representan un potencial riesgo para la seguridad del medio ambiente y la salud humana. En la bsqueda de alternativas naturales para el control de pudriciones postcosecha se ha valorado el empleo de extractos vegetales, antagonismo microbiano (control biolgico) y el quitosano 8 . El control biolgico con microorganismos antagonistas comenz a ser investigado de forma constante a partir de los aos 80 8 . Trichoderma harzianum Rifai se ha utilizado en el control de hongos como Botrytis cinerea en uvas postcosecha, controlando parcialmente la enfermedad in situ. Tambin se ha usado contra Botrytis cinerea y Penicilliun expansum en manzanas, protegiendo durante dos meses al fruto in situ 9 . Los mecanismos de biocontrol atribuidos a Trichoderma spp., son: micoparasitismo, competencia por los nutrientes y antibiosis, siendo el micoparasitismo el principal mecanismo de accin de este hongo. Este biocontrolador cubre al hongo, ataca y penetra en sus clulas, causndole un dao extensivo alterando y degradando la pared celular, causa retraccin de la membrana plasmtica y desorganizacin del citoplasma 9 . En nuestro medio, no se ha reportado trabajo alguno sobre el control biolgico de Trichoderma harzianum sobre los hongos productores de enfermedades de postcosecha en frutos de Carica papaya papaya, en el distrito de Trujillo. Asimismo, teniendo en cuenta el peligro potencial que representa para la salud pblica la accin de estos hongos, como causantes de dao y productores de micotoxinas en la parte comestible; es por ello, que se ha credo conveniente realizar el presente trabajo. La finalidad de la presente investigacin fue determinar el efecto antagnico de Trichoderma harzianum sobre los hongos que causan las enfermedades de postcosecha en frutos de Carica papaya papaya de inters econmico y de gran demanda por la poblacin del distrito de Trujillo. Asimismo, implementar una metodologa que permita la fcil determinacin de los hongos causantes de enfermedades de postcosecha en los frutos de inters econmico de Carica papaya papaya. Relacionar la presencia de estos hongos causantes de enfermedades de postcosecha en frutos de papaya con los factores climticos existentes por la presencia del Proyecto Especial CHAVIMOCHIC; de tal forma, que se tomen las medidas preventivas para evitar su infeccin. De igual manera, aplicar el control biolgico, como uno de los ms adecuados por ser inocuo a los seres humanos, y no dejar efecto residual en el fruto como los fungicidas o agroqumicos en general.
MATERIAL Y MTODOS
Material biolgico. Se concurri a las zonas de distribucin de los frutos de postcosecha de Carica papaya L. papaya amarilla ubicadas en los sectores Norte: mercado La Hermelinda y Sur: mercado el Indoamericano (Sto. Dominguito) del distrito de Trujillo, Provincia de Trujillo, en el perodo comprendido entre Enero a Noviembre del 2011, para obtener las muestras que fueron transportadas al laboratorio de Fitopatologa. Asimismo, se adquiri la cepa de Trichoderma harzianum Rifai procedente del Servicio Nacional de Sanidad Agrcola (SENASA-Per). Toma de la muestra Se llev a cabo el muestreo aleatorio, recolectando aquellos frutos de postcosecha que muestren sntomas y signos de enfermedad fngica, como: necrosis, pudricin, presencia de esporas, micelio, etc. Las muestras fueron transportadas en cajas de cartn, previamente acondicionadas con papel y algodn, al Laboratorio de Fitopatologa, Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional de Trujillo, para su anlisis correspondiente. Procesamiento Utilizando estereoscopio y microscopio compuesto, se procedi a examinar las muestras por extraccin directa de las estructuras fngicas presentes o realizando cortes histolgicos de las partes lesionadas, buscando fructificaciones fngicas. Las estructuras fngicas encontradas se sembraron en medios de cultivo contenidos en placas Petri y tubos de ensayo, y fueron incubadas a temperatura ambiente. Posteriormente, se realizaron los monocultivos de cada una de las especies que iban creciendo, y luego, a partir de ellos se llev a cabo los microcultivos correspondientes para su determinacin final. Anlisis 10
Se utiliz como medio de cultivo a Agar Sabouraud Dextrosa (DSA) y Lima Bean Agar al 3 % (ABL). Se tom nota de las caractersticas que mostraban las lesiones causadas por los hongos y las que presentaban stos, tanto en la macrocolonia, monocultivo y microcultivo; es decir, color, aspecto de la colonia, textura, crecimiento vegetativo y elementos de reproduccin. Determinacin de las especies Se llev a cabo, teniendo en cuenta las caractersticas de las macrocolonias y los microcultivos de los hongos hallados, confrontndolas con las claves taxonmicas existentes para este tipo de hongos fitopatgenos, como las de Agrios (2) , Fraire-Cordero et al. (8) , Barnett & Hunter (11) , Gilman (12) , y otros. Prueba de antagonismo o cultivos duales 13
Las pruebas de enfrentamiento se realizaron empleando la tcnica de cultivo dual en placas Petri de 4.5 cm de radio, conteniendo 20 ml de Agar Sabouraud Dextrosa (ASD) pH 5.5. Se coloc en un extremo de la placa Petri un disco de agar de 4 mm de dimetro con micelio del fitopatgeno y en el extremo opuesto otro disco de 4 mm con micelio del antagonista a 5 cm aproximadamente entre ellos. Se sembr en placas separadas, un disco de agar (inculo) con los hongos del antagonista y de los patgenos, los cuales correspondieron a los controles; posteriormente, los cultivos se incubaron a 251 C, 12 h continuas en luz, seguido de 12 h de oscuridad durante 10 das, hacindose mediciones cada 24 h del crecimiento radial del micelio de la colonia de los hongos. El antagonismo de T. harzianum se comprob estudiando las variables, Radio de Crecimiento Antagonista (RCA), Radio de Crecimiento Patgeno (RCP), Micoparasitismo (MICMO) y Porcentaje de Inhibicin del Crecimiento Radial (PICR). La competencia por nutrientes y espacio se valor comparando la velocidad del crecimiento, para esto, se midieron los radios de crecimiento de cada uno de los patgenos (RCP) y del antagonista (RCA). Conjuntamente, se evalu el porcentaje de inhibicin de crecimiento radial (PICR), empleando la frmula de Ezziyyani (14), PICR = (R1 R2)/R1 x 100, donde R1 es el radio del patgeno testigo y R2 es el radio del patgeno en enfrentamiento. Para indicar el micoparasitismo (MICMO) como posible mecanismo de accin de T. harzianum, se realizaron observaciones macroscpicas de los cultivos duales, tomndose como ndice de micoparasitismo, la invasin del antagonista sobre la superficie del micelio patgeno, tenindose en cuenta la escala de la Tabla 1 creada por Elas y Arcos (1984) citada por Ezziyyani (14) . Para investigar el micoparasitismo, luego que T. harzianum alcanz a invadir al hongo postcosecha, se tom una porcin del hongo con parte de medio de cultivo en la franja de unin, donde se analizaron las interacciones de las hifas antagonistas con las del patgeno, ya sea por enrollamiento o por penetracin, colocando en un portaobjetos con una gota de azul de Amann y con la ayuda de un microscopio compuesto a 100x, se observ el mecanismo de accin del biocontrolador. Diseo experimental 15 : Se llev a cabo un diseo completamente al azar, con 7 tratamientos y 6 repeticiones por tratamiento, incluyendo a un testigo. Cada repeticin representaba una placa Petri.
Tabla 1. Escala creada por Elas y Arcos (1984) citada en Ezziyyani (2004) para evaluacin de la capacidad antagnica, de acuerdo a la medida de la invasin de la superficie, colonizacin y esporulacin del antagonista sobre cada uno de los hongos fitopatgenos.
Grado Capacidad antagnica 0 Ninguna invasin de la superficie de la colonia del hongo patgeno. 1 Invasin de de la superficie de la colonia del hongo patgeno. 2 Invasin de de la superficie de la colonia hongo patgeno. 3 Invasin total de la superficie de la colonia del hongo patgeno. 4 Invasin total de la superficie de la colonia del hongo patgeno esporulacin sobre ella. RESULTADOS
De los 220 frutos de postcosecha recolectadas con biodeterioro en las dos zonas de distribucin del distrito de Trujillo, y sometidas al anlisis fitopatolgico, se aislaron 6 especies fngicas causantes de enfermedades de postcosecha en frutos almacenados, con diferentes grados de abundancia; como se observa en la Tabla 2. Al analizar la frecuencia de aislamiento de las especies determinadas en los frutos postcosecha de Carica papaya L. papaya amarilla, se hall que Rhizopus nigricans, Colletotrichum gloeosporioides, Alternaria alternata, fueron los hongos ms frecuentes con 40.91, 24.18 y 15.45% respectivamente; en cambio, Lasiodiplodia theobromae fue el menos frecuente con 3.27%; como se aprecia en la Tabla 2.
Tabla 2: Frecuencia de aislamiento de los hongos causantes de enfermedades en frutos de postcosecha de Carica papaya L. papaya
Fuente: Datos obtenidos en trabajo de laboratorio y en gabinete.
Con respecto al estudio de la competencia por nutrientes y espacio segn la comparacin del RCA y el RCP, al hacer la comparacin diaria del radio del crecimiento antagonista (RCA), con el radio de crecimiento patgeno (RCP) de cada cultivo dual, se determin la competencia por nutrientes y espacio, donde se encontr, que T. harzianum se desarroll a una velocidad superior a la de los hongos patgenos, observndose que los aislamientos del antagonista tuvieron un crecimiento promedio de 6.29 cm al dcimo da en enfrentamiento; mientras, que los patgenos mostraron un crecimiento limitado en cultivo dual, con un promedio de 2.75 cm al dcimo da. A. alternata, St. lycopersici y L. theobromae, fueron los hongos que resistieron mejor la accin antagnica de T. harzianum, con crecimientos promedio de 3.32, 3.13 y 3.25 cm respectivamente; en cambio, F. oxysporum mostr una gran susceptibilidad a la accin antagnica de T. harzianum con un crecimiento micelial promedio de 1.92 cm, como se observa en Tabla 3; Fig. 1.
Tabla 3. Promedios del crecimiento micelial (cm) en la prueba de antagonismo
Fuente: Datos obtenidos en trabajo de laboratorio y en gabinete.
Hongo fitopatgeno Promedio crecimiento micelial Hongo antagonista Promedio crecimiento micelial L. theobromae R. nigricans 3.25 2.24 T. harzianum T. harzianum 5.78 6.82 C. gloeosporiodes 2.68 T. harzianum 6.38 A. alternata 3.32 T. harzianum 5.76 St. lycopersici F. oxysporum 3.13 1.92 T. harzianum T. harzianum 5.90 7.14
Fig. 1. Comparacin de promedios del crecimiento micelial del hongo antagonista y de los hongos fitopatgenos.
La inhibicin del crecimiento de los hongos fitopatgenos de frutos postcosecha de Carica papaya papaya amarilla, se observ en todos los tratamientos al cuarto da (96 horas), aun cuando el antagonista se encontraba distante del patgeno. As mismo, en cuanto a la capacidad antagnica de T. harzianum sobre los hongos fitopatgenos fue en promedio de grado 2 (segn escala de Elas y Arcos (1984) citada en Ezziyyani (14) . Despus de las observaciones realizadas al microscopio, se determin que el mecanismo de accin de T. harzianum como biocontrolador sobre los hongos postcosecha aislados e identificados en frutos postcosecha de papaya amarilla fue el de micoparasitismo. Las hifas de T. harzianum cubrieron a las hifas del hongo a controlar, degradando el micelio del hongo controlado.
DISCUSIN
Segn las observaciones realizadas, las manifestaciones de enfermedades causadas por hongos en los frutos de postcosecha almacenadas de Carica papaya L. papaya amarilla en estudio, fueron evidentes. Esto se debera a que despus de la cosecha, la fruta es muy susceptible a los daos fsicos y al deterioro en general por lo que su manejo tiene que ser muy cuidadoso, y a que el medio ambiente donde se almacenan las plantas de postcosecha contiene un alto porcentaje de humedad, ptimo para el desarrollo de estos hongos patgenos; concordando, con lo que sostiene al respecto Alexopoulos & Mims 1 . Rhizopus nigricans, se encontr con una mayor frecuencia de aislamiento; porque, es un hongo que se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, en frutos que han sido cosechados y es importante slo durante el almacenamiento, transporte y venta en el mercado de estos productos; concordando, con lo que seala Agrios 2 , quien afirma que R. nigricans es un parsito dbil de rganos almacenados, cuyas hifas del micelio que desarrolla secretan enzimas pectinolticas que degradan y disuelven las sustancias pcticas de la lmina media de las clulas ocasiona la pudricin blanda de muchos frutos carnosos. Con respecto a la antracnosis, causada por Colletotrichum gloeosporioides, afecta el fruto despus de cosechado, provocando manchas grandes de color marrn oscuro y la pudricin de la pulpa. Las lesiones son usualmente restringidas a la superficie del fruto y no causan pudricin extensiva del tejido del parnquima. El hongo es favorecido por condiciones de alta humedad ambiental y temperatura comprendida entre 22 y 32C, concordando con lo que afirman al respecto Agrios 1 y Llcer et al 6 . As mismo, Alternaria alternata encontrado como hongo de almacn, causa una mancha oscura, circular a oval y luego las lesiones son usualmente restringidas a la superficie del fruto y no causan pudricin extensiva del tejido del parnquima, siendo su presencia favorecida por la alta humedad ambiental y baja temperatura; coincidiendo, con lo sealado por Agrios 1 , quien adems afirma que Alternaria alternata produce una toxina llamada tentoxina, que no es especfica de su hospedante. Con respecto a Stemphylium lycopersici, causante de manchas pequeas, circulares caf oscuras en el fruto postcosecha, que despus se extienden y desarrollan mrgenes caf rojizos a prpura, se observ que su presencia en almacenamiento era favorecida por una alta humedad ambiental; coincidiendo, con lo sealado por Mont 16 . En lo referente a F. oxysporum hallado como productor de pudricin del fruto que se mantiene almacenado causando lesiones pequeas que despus son cubiertas por un micelio compacto blanco-rosado, es reportado como patgeno de frutos postcosecha; coincidiendo con Deacon 17 , quien seala que la contaminacin por Fusarium se produce en el campo antes o durante la cosecha, aun cuando la infeccin pueda desarrollarse durante el almacenamiento de los frutos. As mismo, Lasiodiplodia theobromae es un hongo que produce una pudricin de la superficie y base de los frutos. Es una enfermedad menor pero puede ser importante durante ciertas condiciones. Los sntomas tienen como caracterstica formar en los frutos chancros negros coriceos con pudriciones blandas. La carne del fruto afectada toma un color azulado en las reas acuosas infectadas y se forman bolsas de aire que se llenan del micelio gris, en condiciones ambientales de baja temperatura y alta humedad; coincidiendo al respecto, con Pariona et al. 18 , quin afirma que una de las razones por la que generalmente se infecta el fruto, es la cantidad de humedad y los nutrientes presentes en ella, necesarios para su desarrollo. Cabe sealar, que la infeccin a los frutos de postcosecha era frecuentemente a travs de lesiones de los tejidos protectores naturales; como por ejemplo, la cutcula del exocarpo, facilitando la penetracin del hongo hacia el interior de los mismos, favoreciendo su alteracin en mayor o menor profundidad, siendo los causantes de dichas lesiones, la accin en campo, los insectos, cortes, golpes y en general cualquier agente traumatizante; como lo que afirma Mller 7 . Al respecto Deacon 17 , refiere que la causa alterante ya puede existir en la planta antes de su recoleccin, a pesar de no manifestarse ms que durante su almacenamiento. En cuanto a la Prueba in vitro del efecto antagnico, los resultados obtenidos demostraron que, debido a la rapidez del crecimiento de T. harzianum y la capacidad de reducir el crecimiento de los hongos fitopatgenos en frutos postcosecha de papaya, este hongo es un efectivo controlador biolgico. La inhibicin del crecimiento de los hongos fitopatgenos de frutos postcosecha de Carica papaya por el hongo antagonista T. harzianum, aun estando a distancia del patgeno, est mediada por diversos mecanismos, destacndose la produccin de compuestos inhibitorios al medio, antibiosis por produccin de metabolitos voltiles y no voltiles entre los cuales se encuentran, pirones, isocianatos, ppticos, y trichocinas 13 ; adems, la produccin de enzimas extracelulares difundibles tales como peptinasas, cutinasas, glucanasas, y quitinasas e inactivacin de las misma hacia el patgeno, tal como lo sugieren Durn et al. 19 . Al respecto, Mont 16 , refiere que T. harzianum tiene una alta capacidad de competencia por el substrato; como consecuencia de ello, el organismo afectado tiende a entrar en un estado de latencia, que podra ser por deficiencia de nutrientes o la presencia de cierto nivel de sustancias inhibitorias, lo cual impide que siga creciendo; coincidiendo, con los resultados obtenidos en el presente trabajo, como lo demuestra la notable accin inhibitoria que ejerce T. harzianum sobre Fusarium oxysporum y Rhizopus nigricans. Ordoez 20 , seala que T. harzianum produce sustancias como Trichodermina, dermina, sesquiterpeno, suzukacilia, alamethicina, rochotoxina y acetaldehdo, todas con propiedades antifngicas y antibacteriales; as como, las enzimas -1-3 glucanasas, quitinasas y celulasa, las cuales facilitan la habilidad del antagonista para atacar un amplio rango de fitopatgenos, ejerciendo su efecto sobre las paredes celulares. Asimismo, Ezziyani 14 , refiere que T. harzianum presenta una gran adaptabilidad a diferentes temperaturas del medio ambiente, pudiendo crecer y reproducirse normalmente hasta los 35C, a este nivel estas enzimas juegan un importante papel en el micoparasitismo. T. harzianum mostr una alta capacidad para parasitar a Fusarium oxysporum y Rhizopus nigricans; adems, presenta una alta actividad competitiva frente al fitopatgeno, al impedirle su crecimiento en el mismo substrato. Al respecto, Mont 16 , menciona que el xito de los antagonistas en la planta tambin puede ser gobernada por su capacidad de colonizar y utilizar los substratos en la superficie de la planta, permitiendo que compita efectivamente con los fitopatgenos. Al respecto, se debe tener en cuenta que el micoparasitismo es un proceso complejo de quimiotropismo cuya accin antifngica especfica es desconocida; sin embargo, se ha propuesto una serie de etapas por la que T. harzianum lleva el antagonismo, las cuales son: (a)reconocimiento, (b) penetracin de la hifa, (c) invasin y secrecin de enzimas hidrolticas, como lo sostienen Vzquez-Garcidueas et al 21 ; siendo ste ltimo el de mayor inters, ya que no se ha determinado con exactitud el mecanismo mediante el cual se controla la expresin de cada una de las enzimas involucradas; as como, su orden. Durante la etapa de reconocimiento, se lleva a cabo un proceso de quimiotropismo, el cual es mediado por el reconocimiento de lectinas, que se encuentran incorporadas en el hongo fitopatgeno, y cuando el micoparsito reconoce al hongo, las hifas de T. harzianum lo atrapan y lo rodean formando estructuras apresoras, como lo sostienen Hernndez- Lauzardo et al 22 . As mismo, en cuanto a la penetracin de la hifa, sta se realiza mediante la degradacin de la pared celular del hongo fitopatgeno, por medio de la secrecin de enzimas que actan sinrgicamente y a las que se les denomina en conjunto como las enzimas degradadoras de pared celular, conformado por -1,3-glucanasas, quitinasas y proteasas, las cuales se inducen por la presencia de las paredes celulares de hongos fitopatgenos, como lo afirma Ordoez 20 . Hernndez-Lauzardo et al 22 al respecto sealan, que en el micoparasitismo, la formacin y secrecin de estas enzimas es el paso fundamental para la destruccin del hongo fitopatgeno, y que el mecanismo de accin del hongo antagonista, que en ste caso es T. harzianum, puede ser variable y depende del hongo a controlar y del aislamiento; as como, de la especie de Trichoderma utilizada.
CONCLUSIONES
Los hongos causantes de enfermedades de post cosecha en frutos de Carica papaya papaya fueron: Rhizopus nigricans Ehr., Colletotrichum gloeosporioides (Penz.)Sacc., Alternaria alternata (Fr.)Keissl, Stemphylium lycopersici (Enjoji)W. Yamamoto, Fusarium oxysporum Schlecht., Lasiodiplodia thebromae (Pat.)Griffon & Maubl. Rhizopus nigricans present la mayor frecuencia de aislamiento (40.91%); en cambio, Lasiodiplodia theobromae present la menor frecuencia de aislamiento (3.27%). Trichoderma harzianum demostr, en cultivos duales, ser un efectivo controlador biolgico de hongos patgenos de frutos postcosecha de Carica papaya, inhibiendo el crecimiento del fitopatgeno mediante su capacidad antagnica. Trichoderma harzianum llev a cabo el micoparasitismo como mecanismo de accin antagnica.
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