UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE

MXICO

Facultad de Qumica
Laboratorio de Equilibrio y Cintica




Conocimiento de tcnicas analticas. Parte 1:
Fundamentos de espectofotometra




Nombre de los integrantes del equipo:
lvarez Ortega Norma Itzel
Corona Prez Paulina

Nmero de equipo: 2



OBJETIVO GENERAL.
Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra para la determinacin
de concentraciones en soluciones.
OBJETIVOS PARTICULARES.
a) Conocer los fundamentos de la espectrofotometra y las variables
involcradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger.
b) Seleccionar la longitud de onda apropiada para las mediciones de
absorbancia.
c) Construir una curva patrn de soluciones de yodo (serie tipo).
PROBLEMA.
A partir del espectro de absorcin de una solucin acuosa de yoduro de potasio
seleccionar la longitud de onda apropiada para determinar el coeficiente de
absortividad molar de soluciones acuosas de yoduro de potasio por medio de una
curva patrn.
Introduccin
La espectroscopia UV-Visible estudia el fenmeno de adsorcin de la radiacin
UV-Visible de molculas orgnicas e inorgnicas.
La regin visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380-780
nm .

La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible por molculas orgnicas e
inorgnicas, generalmente se produce por la excitacin de los electrones de
enlace, por lo tanto, la longitud de onda de los mximos de absorcin se puede
relacionar con los enlaces de las especies absorbentes.
Los mtodos espectroscpicos se basan en la capacitacin de las sustancias de
absorber (o emitir) radiacin electromagntica. stos se pueden emplear para
determinar la concentracin de un reactivo o producto durante una reaccin.

El aparato detecta la cantidad de luz transmitida o absorbida a travs de la
solucin en la celda y la compara con la que se transmite o absorbe a travs de
una solucin de referencia denominada blanco. La lectura en la escala ya est
convertida en absorbancia.
La transmitancia de la muestra se define como la relacin de la radiacin
transmitida y la incidente (T=I/I0). La disminucin de la intensidad de la radiacin
depende de la concentracin del absorbente y de la longitud del camino recorrido
por el haz. Estas relaciones se recogen en la Ley de Lambert-Beer-Bourger:
A= -log T
A=log (I/I0)=(xb)xc
Absorbancia= (xb)xc
Que establece una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin, donde:
.- es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorcin molar,
absortividad molar o coeficiente de extincin (

). Es la caracterstica de
una sustancia que nos dice cuanta luz absorbe a una longitud de onda
determinada.
b.- es el paso ptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm).
c.- es la concentracin de la especie de la cual estamos midiendo la absorbancia
(M).
La ecuacin mencionada es el fundamento de la espectrofotometra. La ley
Lambert-Beer-Bourger se cumple para una radiacin monocromtica que
atraviesa una disolucin diluida (< 0.01 M), cuando la especie absorbente no
participa en un equilibrio que dependa de su concentracin.
INSTRUMENTACIN:
Todo espectrofotmetro cuenta con los siguientes elementos.

Fuente de luz selector de longitud de onda (monocromador) celda
detector escala de medida.
Fuente de luz: un filamento de tungsteno que funciona mediante una fuente
de alimentacin estabilizada proporcionando una radiacin de intensidad
constante el tiempo suficiente para asegurar una buena reproductibilidad de
las lecturas de absorbancia.
Selector de longitud de onda: se trata de una sencilla red de difraccin, que
permite separar la longitud de onda. Tras seleccionar la longitud de onda la
radiacin pasa a travs de un controlador de luz, que consiste en una
abertura en forma de V que se introduce o saca del haz para controlar la
intensidad de luz que incide en la fotocelda.
Celda: que contiene a la solucin generalmente hecha de un material
transparente que no absorbe la luz. Su longitud y capacidad vara segn el
equipo y diseo. Las hay de paredes cilndricas o planas.
Detector : a este llega la radiacin tras pasar por un filtro y por la muestra.
Se trata de una fototubo de medida. Se basa en el efecto fotoelctrico de
los metales que al irradiarlos generan electrones.
Escala de medida: la seal elctrica del detector una vez amplificada se
registra bien en una escala analgica o en una pantalla digital que
proporcionan los valores de Transmitancia y/o Ansorbancia.
PROPUESTA DEL DISEO EXPERIMENTAL.
1.-Espectro de absorcin
Variables independientes: la concentracin de la disolucin y la longitud de onda.
Variables dependientes: absorbancia.
Llenar hasta de su capacidad dos celdas, una con agua destilada y otra con
disolucin de yodo. Encender el espectrofotmetro, longitud de onda de 380nm.
ntroducir la celda con el blanco y esperar que se ponga en ceros la absorbancia y
aumentar 10nm.
2.-Curva patrn.
Variables independientes: la concentracin de la disolucin y la longitud de onda.
Variables dependientes: absorbancia.
Preparar soluciones de distinta concentracin de yodo. Introducir la celda con el
blanco y calibrar. Tomar lectura de absorbancia de las soluciones a diferentes
concentraciones.
METODOLOGA EMPLEADA
Calibracin del espectrofotmetro y barrido del espectro de absorcin.


Encender el espectrofotnmetro.
Esperar 15 minutos.
Calibracin: oprimir la tecla MODE, hasta que la luz roja se
encuentre en A.
Seleccionar la longitud de onda girando la perilla.
Introducir la celda con el blanco en la porta-celda, oprime la
tecla (0A/100 %T) y esperar a que se ponga en ceros la
absorbancia.
Tomar la lectura de absorbancia de la solucion propuesta a una
longitud de onda baja ( nm) , utilizar como blanco agua
destilada.
Curva patrn.


DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS.

Evento
(nm)
Absorbancia
1 380 0.071
2 390 0.034
3 400 0.077
4 410 0.021
5 420 0.050
6 430 0.031
7 440 0.012
8 450 0.012
9 460 0.012
10 470 0.011
11 480 -0.009
Tabla 1. Absorbancia de la solucin de
I2 a diferentes longitudes de onda.




Preparar soluciones de distinta contentracion a partir de la solucion de
referencia I2-KI (0.0002M-0.2M)
Selecionar una longitud de onda adecuada para hacer las lecturas de
Absorbancia para las soluciones de la serie tipo.
Introducir la celda con el blanco (agua destilada), con un volumen por
arriba de la mitad; nunca llena, en la porta-celda, oprimir la tecla
(0A/100 %T y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia.
Tomar la lectura de absorbancia de las soluciones propuestas para la
serie tipo, a la longitud de onda seleccionada ( nm) .(Tabla 2)
-0.05
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
380 390 400 410 420 430 440 450 460 470 480
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

( nm)
Curva espectral
Mezcla I
2
(0.002M)/(ml) H
2
O (ml) I
2
mol/L Abs
1 10 0

1.082
2 8 2

0.809
3 6 4

0.631
4 4 6

0.446
5 2 8

0.213
Tabla 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2.


( )( )
( )



( )( )
( )

( )( )
( )

( )( )
( )

( )( )
( )

0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
0 0.0005 0.001 0.0015 0.002 0.0025
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin
Curva patrn
Abs
y = 525.25x + 0.0059
R = 0.9944
ANLISIS DE RESULTADOS

Se utilizaron intervalos de 10 nm dentro del espectro electromagntico del visible
(380 nm a 780 nm), para localizar la longitud de onda adecuada para leer nuestra
solucin de yodo, la longitud de onda apropiada fue de 440 nm, ya que apartir de
ste valor se observaron lecturas constantes.
Una vez encontrado la longitud de onda adecuada, se procedi a la realizacin de
la curva patrn, cabe destacar que se deba alternar nuestro blanco (agua
destilada) con nuestras soluciones, ya que el espectrofotmetro funciona
detectando la luz absorbida y/o emitida de nuestra solucin de yodo dispuesta en
la celda y la compara con la que se transmite o absorbe a travs de nuestra
solucin de referencia o blanco.
Nuestro mximo de absobancia se localiza en 400 nm, sto se relaciona con los
enlaces de las especies absorbentes. Podemos aseverar que se observ que la
absorbancia aumentaba proporcionalmente conforme el aumento de la
concentracin.

Si lo deseamos, en base a nuestra ecuacin de la recta correspondiente a nuestra
curva patrn, podramos despejar y as calcular la concentracin de nuestras
soluciones de yodo:





Despejando:


( )



1) A qu longitud de onda se localiza el mximo de absorbancia de la
solucin de yodo 2X10
-4
M?
400 nanmetros

2) Qu longitud de onda empleaste para construir la curva patrn y por qu?
440 nanmetros, porque a partir de ese valor la absorbancia se mantena
constante.

3) Qu representa la pendiente de la grfica de la curva patrn?
Al producto de la longitud del paso ptico (b) y el coeficiente de absortividad
molar ().

4) Qu relacin presenta la absorbancia con la concentracin en la curva
patrn?
La absorbancia y la concentracin son directamente proporcionales, es decir, a
mayor concentracin, mayor absorbancia.

y = 525.25x + 0.0059

Dnde:
Y= Absorbancia
X= Concentracin de yodo
Pendiente= 525.25


CONCLUSIONES

La espectofotometra son todos los mtodos cuantitativos de anlisis que
nos ayudan a conocer concentraciones de las sustancias, mediante la
medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema
qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin.

La ley de Lambert-Beer establece que la absorbancia es igual al producto
de la longitud del paso ptico (b), el coeficiente de absortividad molar () y
la concentracin molar de la disolucin (c).
La absorbancia y la concentracin son directamente proporcionales, es
decir, a mayor concentracin, mayor absorbancia.
La longitud de onda a la que se debe leer una disolucin, es a la cual
despus de un intervalo permanece constante.



APLICACIONES

La espectrofotometra se usa para diversas aplicaciones, como:
Anlisis cuantitativo y cualitativo de soluciones desconocidas en un
laboratorio de investigacin.
Estandarizacin de colores de diversos materiales, como plsticos y
pinturas.
Deteccin de niveles de contaminacin en aire y agua.
Determinacin de trazas de impurezas en alimentos y en reactivos.

BIBLIOGRAFA
Atkins. Qumica Fsica 6a edicin. Ediciones Omega, S. A. Barcelona 1999

Levine, Ira. Fisicoqumica. Volumen I. 5 edicin. Mc Graw Hill. Espaa. 2004.

Maron, Samuel. Fundamentos de Fisicoqumica 1 edicin. Limusa. Mxico