ANTICUERPOS MONOCLONALES (MCAs) Y POLICLONALES.

Anticuerpos monoclonales
Se trata de anticuerpos que se enlazan a un solo determinante antignico. Si separamos una clula
que fabricase un nico anticuerpo especfico que proliferara en un cultivo, la progenie o clon sera
una fuente de grandes cantidades de anticuerpos idnticos contra un nico determinante
antignico y en este caso habriamos conseguido un anticuerpo monoclonal. Pero
desgraciadamente, las clulas que secretan anticuerpos no pueden mantenerse en un medio de
cultivo.
Anticuerpos policlonales
Son mezcla de anticuerpos que van dirigidos a diferentes determinantes antignicos. En las
tcnicas inmunohistoqumicas, para la localizacin celular o tisular de antgenos, se emplean
anticuerpos desarrollados frente a diferentes determinantes antignicos de un mismo antgeno.
Estos anticuerpos son producidos en diferentes especies animales (conejo, cabra, cerdo, etc.) por
inmunizacin activa con antgenos altamente purificados. De dichos animales se puede utilizar el
suero total o la fraccin inmunoglobulnica o el componente inmunoglobulnico especfico o
incluso los fragmentos Fab y (Fab)
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con lo que se elimina la posibilidad de unin especfica e
inespecfica de los anticuerpos.
Produccin de anticuerpos policlonales.
Para producir un anticuerpo, en primer lugar es necesario purificar el antgeno. La fuente de tales
antgenos (suero, orina, tejido, microorganismo, etc.) es sometida a un procesamiento que puede
incluir una combinacin de tcnicas tales como fraccionamiento, precipitacin, centrifugacin,
dilisis, cromatografa y electroforesis, con el objeto de obtener un antgeno altamente purificado.
En ocasiones en que el antgeno purificado es de bajo peso molecular(<10.000) se hace necesario
conjugarlo a protenas transportadoras. Por ejemplo, seroalbmina o tiroglobulina de bovino,
hemocianina de lapa u otra protena de alto peso molecular para hacerlos inmunognico.
La eleccin de los animales para la inmunizacin depender entre otros factores del antgeno
usando, cantidad de anticuerpo que se desea producir, disponibilidad de animales y preferencias
personales. Los conejos son los ms utilizados, pero la cabra oveja, pavos, rata y ratn pueden ser
buenas alternativas. No existe un esquema rgido de inmunizacin. Se han descrito una amplia
variedad de ellos y en la prctica la eleccin estar en relacin a factores dependientes del
antgeno (exogenicidad, cantidad, tamao molecular, complejidad qumica, etc.), del husped
(constitucin gentica) y modo de administracin del antgeno.
En trminos generales el modelo de mayor uso consiste en inmunizar dos o ms animales por
antgeno. El antgeno es emulsionado con coadyuvante completo de Freund (CFA) y se inyecta
intradrmico o subcutneo en diferentes sitios a lo largo y en ambos lados del cordn espinal. A
las 4-8 semanas se vuelve a inmunizar esta vez con antgeno emulsionado con coadyuvante
incompleto de Freund (IFA) y posteriormente se aplica una reestimulacin mensual con antgeno,
slo o con hidrxido de aluminio. El primer sangrado se hace una semana posterior a la segunda
reestimulacin, seguido de un segundo sangrado una semana ms tarde; esto se repite despus
de cada estimulacin.
El suero obtenido es probado para detectar la presencia de anticuerpo especfico por mtodos de:
Inmunodifusin, Radioinmunoensayo, Inmunoflurescencia, Inmuno-Dot, Iminoperoxidasa.
Generalmente el suero producido se utiliza directamente, sin embargo, hay que considerar que
adems de anticuerpo especfico, el suero entero contiene otros componentes tales como
enzimas, electrolitos, anticuerpos no especficos y protenas.