1.

Introduccin

Las enfermedades bacterianas son responsables de graves prdidas econmicas en la
acuicultura El uso indiscriminado de antibiticos para controlar microorganismos patgenos
trae cambios en la microbiota de los sistemas creando resistencia bacteriana a los
antimicrobianos de uso comn incluso afectando a bacterias beneficiosas , por lo tanto se
buscan nuevos mtodos no perjudiciales
Un mtodo alternativo es el uso de cierto tipo de microorganismos llamados probioticos que
restringen el crecimiento de patgenos.


Una posible forma de evaluar la eficacia de un candidato probitico es determinar la
abundancia de bacterias probiticas y patgenas en los intestinos de peces a lo largo del
tiempo. Muchas metodologas para contar las bacterias en el intestino de pescado se han
desarrollado sobre la base de medios de cultivo selectivos presentndose varias fallas
. El uso de tcnicas de biologa molecular es una herramienta para determinar la abundancia
y la eficiencia de las bacterias probiticas
Existentiendo varias tcnicas que pueden caracterizar y cuantificar el ADN extrado de las
comunidades bacterianas. Sin embargo, la hibridacin in situ fluorescente (FISH) es ms eficaz,
ya que permite una cuantificacin directa y precisa de las clulas bacterianas patognicas y
probiticos a nivel de especie o gnero


2. Material y mtodos
Aislamiento de potenciales bacterias probiticas
. Seleccin de potenciales bacterias probiticas por antagonismo in vitro
Diseo Experimental (experimentos in vivo)
La incorporacin de bacterias probiticas candidatos en la alimentacin
Anlisis de bacterias potencialmente patgenas probiticos y putativos de
Hibridacin Fluorescente In Situ (FISH) ( aqu empiezan las diapositivas de fish)


. Resultados

Setenta y nueve aislados bacterianos se obtuvieron a partir de todas las muestras.
Veintitrs fueron aislados del agua, 29 de sedi-mento de la laguna y el 27 en el tracto
intestinal de tilapias.
Slo nueve cepas presentaron resultados positivos en las pruebas in vitro
Dos cepas mostraron mejor rendimiento para inhibir el crecimiento de bacterias
patgenas .). Estas dos cepas se identificaron como Bacillus sp. y Enterococcus sp.
Tanto de las identidades de estas cepas tenan 99% de similitud de 16S rRNA gen
secuencia en comparacin con las bacterias en el GenBank
Se determinar la eficiencia y los cambios que se producen en la comunidad bacteriana
mediante la administracin de bacterias-probitica.
Tcnicas de biologa molecular son herramientas importantes para realizar un
seguimiento ms preciso de las bacterias aadidas y tambin el control de bacterias
patgenas
A travs de la tcnica de FISH, podemos cuantificar y seguir los cambios en el nmero
de los probiticos y los microorganismos patgenos. Por lo tanto, la estructura de co-
munidad microbiana (taxones y nmero de cada taxa de bacterias) nos permite
verificar la eficacia probitica.
A pesar de que los resultados de otros in vitro (Chau et al, 2011;. Shakibazadeh. Et al,
2012;. Sica et al, 2010, 2012;. Usted et al, 2005) e in vivo (. Ravi et al, 2007) mostr el
potencial de los probiticos de bacterias aisladas de los sedimentos del estanque, el
mejor desempeo de Bacillus sp. En este trabajo, puede estar relacionado con el
hecho de que esta cepa ha sido aislada de los intestinos de la tilapia. Probablemente
facilita la incorporacin y la colonizacin de esta cepa cuando se ofreci junto con
alimento comercial.
Aeromonas y P. fluorescens se encuentran normalmente en el intestino de tilapias (He
et al., 2009), siendo la principal va de infeccin en los peces. La poblacin y control de
Aeromonas cl es de suma importancia, ya que algunas especies de este gnero, tales
como A. hydrophila, son altamente patgeno- Del mismo modo, especies de
Pseudomonas son patgenos importantes en el pescado aunque algunas especies se
ensayaron como probitico ,Por lo tanto, estas especies bacterianas debe vigilarse y
controlarse para evitar las infecciones
La accin probitica de especies de Bacillus ha sido ya demostrado en varios estudios
con diferentes especies -acuticos. En estudios con la tilapia, por ejemplo, Bacillus a
aumento la resistencia y la supervivencia cuando se expone a Aeromonas y
Pseudomonas. Presentando una mejor respuesta inmunitaria
En general, el uso de especies de Bacillus como probitico aumenta la resistencia del
animal para enfermedades bacterianas y, en consecuencia, su supervivencia.
En nuestros resultados, se observ la accin eficiente de Bacillus sp. en el control de
las poblaciones de Aeromonas y Pseudomonas en tanto in vitro y en ensayos in vivo. El
intestino de tilapias fue colonizada por Bacillus sp. El nmero de clulas de Bacillus sp.
Fue aumentado, mientras que hubo una reduccin de patgenos putativos en los
juveniles de tilapia. Sin embargo, otras pruebas posteriores se deben realizar para
confirmar la accin probitica de estas cepas, siguiendo las sugerencias de Verschuere
et al. (2000b) para obtener especies probiticas eficientes.
podemos concluir que el fluorescente in situ la tcnica de hibridacin (FISH) es una
excelente herramienta para el monitoreo de probitico potencial, putativo patgeno,
o cualquier otro tipo de bacterias presentes en el contenido estomacal de peces. Esta
tcnica se puede emplear en cualquier re-bsqueda donde es necesaria la visualizacin
directa de las bacterias con el fin de comprender mejor los procesos fisiolgicos y
metablicos.