IDENTIFICACIN DE Drosophila Melanogaster Y PREPARACIN DE CULTIVO
ADECUADO PARA SU DESARROLLO Y SUPERVIVENCIA
Drosophila melanogaster IDENTIFICATION AND PREPARATION OF CROP SUITABLE FOR DEVELOPMENT AND SURVIVAL Isabel Cristina Flrez Snchez; Ana Mara Herrera Ramrez; Ubielly Norea Moreno Biologa, universidad del Quindo Armenia Quindo Colombia.
RESUMEN
Drosophila melanogaster, perteneciente a la familia Drosophilidae, recibe su nombre debido a que se alimenta de frutas en proceso de fermentacin tales como manzanas, bananos, etc. D. melanogaster tiene una metamorfosis completa. Su ciclo biolgico, desde la fecundacin hasta llegar a adulto, pasa por los estados de huevo-larva-pupa-imago, en un lapso de tiempo relativamente corto. Existen diferencias notables entre ambos sexos (Masculino y Femenino). En el siguiente informe de laboratorio se llevaran a cabo una serie de procedimientos mediante los cuales se prepararon cuatro medios de cultivo (Bsico, Banano, Naranja, Guayaba) como hbitat para la Drosophila melanogaster. A cada medio se le introdujo un macho y una hembra, y se determin despus de un lapso de tiempo cual medio de cultivo era el ms apto en cuanto a la supervivencia y la reproduccin, posteriormente, se realiz el conteo de la progenie, es decir la cantidad de individuos presentes de cada sexo en los diferentes cultivos. De lo cual obtuvo, que solo se produjo reproduccin en los medios de cultivo Basico y de Banano, con un gran nmero de descendientes cada uno. Todo esto se realiz con el objetivo de conocer y preparar medios de cultivos eficientes para la reproduccin de la Drosophila melanogaster, y conocer las diferencias morfolgicas entre ambos sexos, lo cual es de gran importancia para entender algunos aspectos genticos ya que es la especie reina en el campo de la gentica.
ABSTRACT Drosophila melanogaster, belonging to the family Drosophilidae, named because they feed on fermenting fruit such as apples, bananas, etc. D. melanogaster has complete metamorphosis. Its life cycle, from conception into adulthood, passing through the stages of egg-larva-pupa-imago in a relatively short period of time. There are notable differences between the sexes (Male and Female). The following laboratory report was carried out a series of procedures by which four culture media (Basic, Banana, Orange, and Guava) as habitat for Drosophila melanogaster were prepared. Each medium contained a male and a female, and after a period of time determined which culture medium was the most suitable in terms of survival and reproduction, then counting the progeny was performed, ie how many individuals each sex. This was achieved to obtain, was that there was only reproduction in agar culture media and banana, with a large number of offspring each. All this was done in order to know and prepare efficient means for the reproduction of Drosophila melanogaster cultures, and learn the morphological differences between the sexes, which is of great importance to understand some genetic aspects as it is the kind queen the field of genetics. Keywords: Drosophila melanogaster, Culture Media, Play, Sex.
1. INTRODUCCION La Drosophila melanogaster, tambin llamada mosca del vinagre o mosca de la fruta, es una especie de dptero braqucero de la familia Drosophilidae. Su nombre significa amante del rocio este debido a que se alimenta de frutas en proceso de fermentacin como manzanas, bananos, uvas, entre otros. Es una especie que se utiliza frecuentemente en experimentacin gentica, ya que tiene un nmero de cromosomas de 4 pares y un ciclo de vida corto, que dura de 15-21 das y aproximadamente el 61% de los genes de algunas enfermedades humanas que se conocen tienen una similitud identificable en el genoma de las moscas de la fruta, y el 50% de las secuencias protenicas de la mosca tiene anlogos en los mamferos. (Curtis, H.et al. 2008). Para propsitos de investigacin gentica, esta es muy til ya que se reproducen rpidamente, presenta distincin clara entre cada una de sus fases de desarrollo, gran cantidad de descendientes, su mantenimiento requiere poco espacio y es de costo reducido. De tal manera que esta mosca es un material ideal para poder experimentar, ya que presenta diferentes etapas de desarrollo (huevo, tres estadios larvales, pupa e imago) las cuales pueden ser expuestas a distintos tratamientos experimentales por parte de investigadores de modo que se pueden estudiar muchas generaciones en un corto espacio de tiempo, y ya se conoce el mapa completo de su genoma. El objetivo de la prctica fue realizar diferentes cultivos que fueran aptos para supervivencia y desarrollo de la Drosophila melanogaster y analizar cul es el ms adecuado para esta. E identificar ambos sexos de acuerdo a sus caractersticas morfolgicas. 2. METODOLOGA En esta prctica de laboratorio, medios de cultivo e identificacin de Drosophila sp, se realizaron cuatro medios de cultivo (Bsico, Banana, Naranja, Guayaba). Para la preparacin del medio de cultivo bsico, se utiliz Agar (5 g), levadura (), Harina (), Azcar () y 4 frascos pequeos de vidrio. Tambin algodn, gaza y cinta de enmascarar. Despus de que se tuvieron las cantidades listas de los ingredientes, se mezclaron en una olla, posteriormente se agreg agua destilada (ml), se mezcl, y se llev a calentar a una estufa, despus de hervir, se baj el fuego y se sigui revolviendo para que no se secara. Luego, se adiciono Acido Propinico (ml) y se prosigui a servir en cada frasco, hasta que llenara 2 cm de alto del mismo. Ms tarde, cuando el medio bsico se solidifico, se agregaron las Drosophila sp, un macho y una hembra al interior del frasco, y se cubri con un tapn de gaza y algodn, finalmente se sell con cinta. Por otra parte, para la preparacin de los medios de cultivo de banano, naranja, y guayaba, se licuo 30 g de cada fruta con 150 ml de Agua destilada. Despus de que se licuo cada fruta, en un frasco diferente se disolvi 150 ml de agua con 5 g de agar. Luego, esto se mezcl con la fruta y se llev a hervir durante 10 minutos, cuando la temperatura llego a 65-70C aproximadamente se adicionaron 1.62 ml de cido Propinico y 0.625 ml de micosatin, y se homogenizo todo. Luego, se llev a calentar de nuevo, y se sirvi en un frasco perteneciente a cada grupo, cuando el medio bsico se solidifico, se agregaron las Drosophila sp, un macho y una hembra al interior del frasco, y se cubri con un tapn de gaza y algodn, finalmente se sell con cinta. Despus de realizados los medios de cultivo y de tener cada uno su par de Drosophila sp (macho y hembra), se dej pasar el tiempo suficiente para que estos lograran sobrevivir y lograran cruzarse, luego que se obtuvo la reproduccin, y naci la progenie, se prosigui a contar cuantos individuos eran machos y cuantos hembras, los cuales fueron dormidos para hacer esto posible y se llevaron a un estereoscopio, donde se tuvieron en cuenta las caractersticas morfolgicas entre ambos sexos para realizar un conteo exitoso.
3. RESULTADOS Y DISCUSIN
MEDIO TIEMPO DE DESARROLLO BASICO 14 das BANANO 11 dias NARANJA 16 dias GUAYABA 0 dias/ 0 individuos
Se obtuvo para el medio bsico 64 machos y 45 hembras para un total de 109 moscas y para el banano se obtuvo resultados de ana lo cual indico claramente una mayor productividad para el cultivo hecho de maz, esto poda deberse a que segn la literatura consultada, se observa que las diferencias en contenidos nutricionales entre el banano y el maz son evidentes: en protenas es de 1.1 a 9.1%,respectivamente; en carbohidratos es de 25.2 a 71.9%; y en lpidos es de 0.2 a 3.7%,sin mencionar las vitaminas y minerales presentes en el maz. (Balbn Et al. 2000) sin embargo en tiempo de desarrollo el medio de banano tuvo una leve ventaja sobre este ya que en este se observ desarrollo a los 11 dias de realizada la prctica y el maz tuvo un tiempo de desarrollo de 14 dias esto debido a que existen diversos factores que pueden afectar la productividad y desarrollo de las D. melanogaster como lo son la exposicin continua a temperaturas superiores a 30C que pueden provocar la esterilizacin y muerte de las moscas, adems de producir efectos sobre el fenotipo, o variaciones en la penetracin o expresividad de determinados genes. As mismo, las temperaturas inferiores a 20C hacen decrecer la viabilidad de las moscas y prolongan el ciclo biolgico. (Guerrero. A. 2003). Por otro lado en los cultivos de guayaba y naranja tambin se observ la presencia y desarrollo de las Drosophilas, pero en menor cantidad y con un tiempo de desarrollo ms prolongado que en los medios de banano y bsico, esto debido a que aunque estos tambin presentan carbohidratos no llenan por completo los requerimientos nutricionales de las D Melanogaster. La viabilidad y el tiempo de desarrollo de huevo a adulto son dos componentes importantes del desarrollo en Drosophila, y estos se pueden relacionar con fenmenos tales como la facilitacin larval, o con conceptos de micro nichos y microambientes (Castro y Mensua, 1985); es por esto que el medio de cultivo como reserva de los requerimientos nutricionales necesarios para el desarrollo de los individuos y la temperatura como agente limitante de las velocidades enzimticas, forman parte esencial del crecimiento de D. melanogaster. Midiendo la viabilidad en trminos de la productividad y el tiempo de desarrollo de huevo a adulto.
4. CONCLUSIONES
Se determin que el medio bsico y el de banano fueron los ms productivos en el desarrollo y crecimiento de las drosophilas, adems factores como la temperatura y el medio adecuado pueden favorecer o no el adecuado y rpido desarrollo de los individuos. La relacin existente entre la temperatura y la concentracin de nutrientes en el medio puede afectar la reaccin enzimtica ya que si la temperatura es demasiado elevada se pueden desnaturalizar las protenas, pero si esta es adecuada las reacciones enzimticas pueden ser ms veloces y as se puede alcanzar una mayor productividad en un tiempo mas corto.
5. BIBLIOGRAFA
Balbn. A. Et al. 2000. Acta Biolgica Colombiana Vol.5. Universidad Nacional De Colombia. Santa Fe De Bogot Meja .L. Et al. 1997 Caractersticas Y Ciclo De Vida De La Mosca De La Fruta Drosophila Melanogaster. Laboratorio De Gentica. Klug, W. Cummings, M. 1999. Conceptos De Gentica. 5ta Ed. Editorial PrenticeHall.