Cuarto Semestre de Medicina y Enfermera Microbiologa y Parasitologa Bsico Clnica y Cuidado al paciente con procesos infecciosos
CICLO DIAGNOSTICO EN ENFERMEDADES INFECCIOSAS Elaborado por las docentes: Liliana Caldas Arias y Mara Amparo Bravo S.
1. IMPORTANCIA DEL DIAGNOSTICO CLINICO EN LA SOLICITUD DE EXMENES DE LABORATORIO
Es indispensable que el clnico que trata las enfermedades infecciosas conozca adems de la historia del paciente, los signos y sntomas de la enfermedad para que establezca su impresin diagnstica y con base en sta decida cuales exmenes de laboratorio clnico general o exmenes microbiolgicos estn indicados y que muestras deben tomarle al paciente. Cabe anotar que el diagnstico por el laboratorio no reemplaza al diagnstico clnico sino que permite confirmarlo o descartarlo.
Para que el diagnstico por el laboratorio sea acertado es de suma importancia que el clnico conozca el tipo de pruebas de laboratorio que pueden solicitarse a los diferentes especimenes clnicos como tambin la adecuada recoleccin de los mismos y los criterios para interpretar apropiadamente los resultados.
A continuacin se mencionan algunos signos y sntomas de enfermedades infecciosas que orientan el diagnstico clnico, que dan pautas de las muestras a tomar y de los exmenes que se deben solicitar:
Signos y Sntomas Impresin diagnstica Muestra a colectar Exmenes a solicitar Enrojecimiento difuso e hinchazn de gargantas o amgdalas.
Presencia de secreciones serosas o purulentas de herida quirrgica.
Acumulacin de pus en abscesos o cavidades orgnicas que producen a menudo dolor, tumefaccin y aumento de calor en el rea.
Presencia de tos con produccin de esputo.
Disuria, frecuencia y urgencia urinarias Diarrea con pujo y tenesmo Fiebre a menudo en alto grado y en picos, escalofros, rubor (vasodilatacin), aumento de la frecuencia cardiaca.
Por lo anterior las muestras a tomar podran ser una o varias de acuerdo al cuadro clnico general y los exmenes de importancia clnica para identificar el microorganismo causal o agente etiolgico van desde montajes en fresco, tinciones hasta cultivos.
2. SOLICITUD DE EXMENES La solicitud de exmenes debe incluir: a) Datos de identificacin del paciente: Nombres y Apellidos, edad, sexo, servicio, nmero de cama, nmero de historia clnica. b) Impresin diagnstica, incluso en algunos casos el agente etiolgico que se sospecha. c) Los exmenes a solicitar, el sitio anatmico y tcnica utilizada para la recoleccin. d) Nombre de los antimicrobianos si el paciente ya los est recibiendo.
La finalidad del diagnstico microbiolgico es identificar el agente causal de la enfermedad infecciosa y la sensibilidad o resistencia de ste a los diferentes antimicrobianos con el fin de administrar una terapia eficaz.
El diagnstico microbiolgico de la enfermedad infecciosa se orienta segn el sndrome clnico, los datos epidemiolgicos y los posibles patgenos considerados como agentes etiolgicos ya sea bacterias, virus, parsitos u hongos.
3. METODOS DE LABORATORIO Los procedimientos de laboratorio empleados en el diagnstico de enfermedad infecciosa corresponden a dos grandes divisiones: Mtodos Directos y Mtodos Indirectos
METODOS DIRECTOS Incluyen: a) Exmenes en fresco b) Tinciones c) Cultivos Las observaciones microscpicas de las muestras a travs de los exmenes en fresco y las tinciones son las tcnicas mas utilizadas para la deteccin directa de la presencia de agentes etiolgicos y mediante cultivos se realiza su respectiva caracterizacin e identificacin final para algunos casos. Los resultados del estudio por microscopa ptica y de campo claro pueden obtenerse en el termino de una horas.
Los exmenes en fresco mas utilizados son: fresco en solucin salina, fresco en KOH y montaje en tinta china para algunas muestras ms frecuentemente Lquido cefalorraqudeo (L.C.R.)
Las tinciones ms comunes son la tincin de Gram, tincin de Ziehl Neelsen, Wright y Giemsae.
Los cultivos para bacterias que se realizan en medios artificiales a partir de los especimenes clnicos permiten su crecimiento e identificacin al igual que realizar la susceptibilidad ante diferentes antimicrobianos. En trminos generales los cultivos que se realizan segn sospecha diagnostica y etiolgica son: Cultivo para bacterias aerobias (Cultivo para grmenes comunes) Cultivo para bacterias anaerobias Cultivo para micobacterias Cultivo para hongos
METODOS INDIRECTOS Los mtodos indirectos permiten establecer el serodiagnstico de las enfermedades infecciosas y se basa en la bsqueda de anticuerpos en el paciente que tiene el proceso infeccioso; esto se logra mediante diferentes tcnicas de laboratorio como por ejemplo aglutinacin con ltex, pruebas de floculacin, prueba ELISA, Inmuno- Fluorescencia Indirecta (IFI) entre otras, el fundamento para estas pruebas se basa en la reaccin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac) con un marcador para hacer visible la reaccin. Algunas de las pruebas mencionadas tambin se utilizan para deteccin directa de algunos microorganismos a partir de cultivos.
4. ADECUADA RECOLECCION DE MUESTRAS CLINICAS La recoleccin apropiada de una muestra clnica para su estudio microbiolgico es un aspecto de mxima importancia para la confirmacin final de que un microorganismo es o no el responsable de un proceso infeccioso.
Existen varias pautas generales sobre la seleccin, coleccin y transporte de un espcimen clnico que deben conocerse y ponerse en prctica en la actividad diaria por todos los trabajadores de la salud: a) Las muestras deben obtenerse antes de la administracin de antibiticos. b) La muestra clnica debe ser representativa del sitio de la infeccin y debe recogerse con un mnimo de contaminacin a partir de tejidos organos o secreciones adyacentes. Ej. En caso de sinusitis lo conveniente es realizar un Aspirado de senos paranasales en lugar de un hisopado de fosas nasales. Aspirados de tejidos blandos en lugar de hisopado de lceras o fstulas. Los hisopos son menos convenientes para la recuperacin de la mayora de microorganismos en las muestras y por eso se prefieres los aspirados mediante el uso de agujas. En algunos casos slo es permitido minimizar en la medida de lo posible la contaminacin con flora normal adyacente o colonizante de piel o mucosas y entonces esta situacin debe tenerse en cuenta a la hora de interpretar los resultados. c) Debe establecerse el momento ptimo para la coleccin de la muestra con el objeto de obtener mayores posibilidades de recuperar los microorganismos causales ej. los periodos agudos de la enfermedad, picos febriles o durante escalofros. d) Debe obtenerse una cantidad suficiente de muestra para efectuar las tinciones y /o cultivos solicitados, si se prev escasa cantidad de espcimen a obtener se debe aspirar con solucin salina fisiolgica estril no bacteriosttica o realizarse biopsia con tcnica asptica. e) Para la coleccin de los especimenes debe aplicarse la tcnica asptica, utilizar equipos y recipientes secos y estriles. f) Una vez obtenido la muestra clnica debe llevarse o enviarse rpidamente al laboratorio y tambin deben ser procesadas a la menor brevedad posible con el fin de evitar la perdida de los patgenos lbiles y/o el sobrecrecimiento de de flora colonizante. En caso de demora algunas muestras pueden conservarse en refrigeracin por un periodo corto de tiempo. g) La solicitud de exmenes debe estar debidamente diligenciada con los datos completos de identificacin del paciente y claramente establecido los exmenes requeridos as como la(s) impresin(es) diagnstica(s) y los antimicrobianos que el paciente est recibiendo.
Es responsabilidad del mdico informar al laboratorio los casos en que se sospeche microorganismos de difcil crecimiento o que requieran medios de cultivo especiales como tambin infecciones por micobacterias u hongos.
A continuacin se indicarn algunos ejemplos de las tcnicas empleadas para la coleccin de algunas muestras clnicas.
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCIONES EN EL TRACTO RESPIRATORIO Muestras de nasofaringe Escobillaje nasofaringeo Lavado nasofaringeo Aspirado de senos paranasales Timpanocentesis Muestras de la faringe Hisopado faringeo Muestras de Esputo Esputo espontneo o inducido Aspirado translaringeo Muestras obtenidas por broncoscopio Lavado broncoalveolar Cepillado bronquial
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCIONES EN CAVIDADES, DE PIEL O TEJIDOS BLANDOS Muestras tomadas por aspirados mediante aguja y jeringa Tejidos tomados mediante Biopsia
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCIONES GASTROINTESTINALES Jugo gstrico mediante sonda naso-gstrica Biopsia gstrica Biopsia intestinal Heces por evacuacin natural Heces o moco por hisopado rectal
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCIONES DEL TRACTO GENITAL Secreciones o flujos del canal endocervical o fondo de saco vaginal: escobillaje mediante especulo. lceras genitales mediante aspirados, raspados en el centro de las lesiones o presionando las lceras hasta obtener linfa. Vesiculas: Aspirado liquido vesicular Verrugas: Biopsia
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCION URINARIA Orina por miccin espontnea o chorro medio, por puncin suprapbica o mediante sonda vesical.
MUESTRAS PARA DETECTAR INFECCIONES EN SANGRE Hemocultivos mediante venopuncin Catteres endovasculares 5. PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS
Una vez se toma la muestra se enva al laboratorio y all se procesa de acuerdo a lo solicitado por el mdico, se le da un registro interno y se procede a cultivar y a realizar los frotis para las respectivas tinciones. A continuacin se dar una breve explicacin de la utilidad microbiolgica de las tinciones. Tincin de Gram: Permite la observacin de bacterias y caracterizarlas segn su forma (bacilos, cocos y cocobacilos) y su tincin Gram positivas(se ven azules) o Gram negativas (se ven rosadas) yen algunos casos indica su agrupacin (en racimo=Estafilococos, en cadena= Estreptococos) Tincin de Ziehl Neelsen: Tie y permite observar B.A.A.R (Bacilos cido Alcohol Resistentes) con modificaciones se pueden observar algunos parsitos y otras bacterias como por ejemplo Nocardia sp. Tincin de Wright: Permite diferenciar los leucocitos en PMN y MN en cualquier muestra y la observacin de algunos hongos. Tincin de Giemsae: su funcin bsica es permitir la visualizacin de los leucocitos y detectar la presencia de algunos hongos y parsitos intracelulares y/o extracelulares.
Por otra parte las inoculaciones para cumplir con los cultivos se hacen en diferentes medios de cultivo es decir agares (medios de cultivo slidos) o caldos (medios de cultivo lquidos) de acuerdo a lo solicitado as: Cultivo para bacterias aerobias o cultivo para grmenes comunes: Se utiliza agar sangre y caldo tioglicolato. Cultivo para anaerobios: Se utiliza agar sangre anaerobio o agar FEA (Fenil Etil Alcohol) Cultivo para Micobacterias: Agar Ogawa Kudoh entre otros medios de cultivo. Cultivo para Hongos: Agar Saboreaud y agar Mycosel. Hemocultivo: Se inocula la sangre en caldo Infusin Cerebro Corazn al cual se le ha adicionado un anticoagulante, hay hemocultivos para bacterias anaerobias, para hongos y micobacterias, para estos ltimos tres casos se debe hacer la solicitud de manera explicita ya que los mtodos de procesamiento van a variar. Corpcultivo: Se cultiva las heces en caldo selenito, agua peptonada, agar Hektoen, agar XLD (Xilosa, Lisina Desoxicolato) y MacConkey Urocultivo: La muestra de orina se cultiva en agar Cled con una tcnica de inoculacin que permite realizar recuentos de las colonias bacterianas.
6. REPORTE E INTERPRETACION DE RESULTADOS Reportar significa dar a conocer con precisin mediante un texto escrito y en trminos tcnicos el resultado que se obtuvo despus de realizar un procedimiento microbiolgico a una muestra. Es responsabilidad del microbilogo la emisin oportuna y el contenido de los reportes. Por otra parte la interpretacin de los resultados es competencia del mdico pero cabe aclarar que de manera general se puede decir que interpretacin es el resultado de la accin de interpretar. Es fundamental partir de la idea de que no puede haber interpretacin sin sujeto que realiza la accin de interpretar: el "intrprete", para este caso el mdico. Interpretar es el hecho de que un contenido material (resultado de laboratorio), ya dado e independiente del intrprete (mdico), es comprendido y expresado o traducido a una nueva forma de expresin del mismo contenido, considerando que la interpretacin debe ser fiel de alguna manera al contenido original del objeto interpretado. Por la razn expuesta para realizar una buena interpretacin de los resultados el clnico debe tener en cuenta varios aspectos como son: Agente etiolgico aislado, si es patgeno o forma parte de la flora normal y para ello debe correlacionar el resultado con el tipo de muestra que se proces y principalmente la tcnica con que se coleccion dicho espcimen, esto le permitir diferenciar un proceso de colonizacin de un proceso de infeccin e instaurar la terapia adecuada o modificarla si es el caso. Aspectos clnicos Aspectos epidemiolgicos Factores predisponentes Estado inmunolgico del paciente Edad del paciente Enfermedades de base Estado fisiolgico Ej. Embarazo
GUIA BIBLIOGRAFICA
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