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Receptores Receptores
y
Transduccin de seales
Sistemas y niveles de regulacin
biolgica
E
v
o
l
u
c
i

n
Fisiologa regional
Fisiologa sistmica
Fisiologa celular y tisular
Mensajero autocrino
Mensajero paracrino
Mensajero endocrino
E
Homeostasis nuclear
Mensajero intracrino
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La comunicacin clula-clula por
seales extracelulares involucra seis
pasos
Sntesis de la molcula de sealizacin
por la clula sealizadora
Liberacin de la molcula de sealizacin
por la clula sealizadora
Transporte de la seal a la clula blanco
Deteccinde la seal por un receptor Deteccin de la seal por un receptor
especfico
Remocin de la seal, terminando as la
respuesta celular
Las molculas de sealizacin
funcionan a distintas distancias
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TRANSDUCCION DE SEALES
(Cell Signaling- Signal transduction):
TRANS (al otro lado) - DUCTO (que lleva)
Son los eventos moleculares de transferencia
de informacin vectorial que ocurren dentro
de las clulas o entre ellas y que relacionan de las clulas o entre ellas y que relacionan
los cambios externos con las
correspondientes respuestas internas.
Objetivos de la transduccin de
seales
Comunicar una seal del mundo exterior Comunicar una seal del mundo exterior
al mundo interior de una clula
(extraorganismo)
Comunicar una clula con otra clula
(intraorganismo)
Amplificar y decodificar la seal
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Tipos de seales
transduccionales
1 mensajeros
Seal
2 mensajeros
3 mensajeros
Recepcin
Transduccin
Amplificacin
Respuesta(s)
SIGNALOSOMA
Cada tipo celular expresa un repertorio nico de genes
que codifican para componentes transduccionales.
En las etapas finales del desarrollo, las clulas
expresan un fenotipo particular y este proceso de
diferenciacin celular incluye la expresin de un set
distintivo de componentes transduccionales que
t l f i ti l controla sus funciones particulares.
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Un remodelado anormal de los sealosomas origina
defectos en la transduccin de seales que tiene como
consecuencia la gnesis de enfermedades.
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Alfabetos
Son agrupacin de smbolos con
un orden determinado.
Se utiliza en el lenguaje escrito y
sirve para comunicarse.
Primeros mensajeros Primeros mensajeros
Son los caracteres de un alfabeto biolgico de
comunicacin entre clulas para regular una p g
determinada funcin o proceso
La comunicacin mediante primeros mensajeros
Es un proceso indispensable en los seres
pluricelulares debido a su especializacin pluricelulares debido a su especializacin
celular
Esencial para la regulacin de la homeostasis
(mantencin del medio interno)
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Primeros mensajeros
Hormonales (polipptidos, esteroides)
Fsicos (radiaciones, presin, etc)
Metablicos (glucosa, lpidos, H
+
, etc)
Protenas (ECM, receptores de otras
clulas, etc)
Factores de crecimiento
Neurotransmisores
Papel de los primeros
mensajeros
Regulan el funcionamiento bsico y
l d l l l normal de las clulas
Metabolismo bsico (regulacin de las
vas bioqumicas)
Respuesta celular (transcripcin gnica)
Proliferacincelular (ciclo celular) Proliferacin celular (ciclo celular)
Movimiento celular (matriz extracelular)
Crecimiento celular (organognesis)
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Homeostasis energtica
Molculas que transportan energa
Entre clulas (glucosa y cidos grasos)
Dentro de la clula (ATP, NADH/NADPH)
Regulacin de la energa
Catecolaminas: movilizacin urgente de energa
Glucagn: movilizacin de energa
Insulina: almacenar energa Insulina: almacenar energa
Un ejemplo concreto:
Emisor Receptor
Clulas con
receptores Insulina
Clulas pancreticas
DECODIFICACION
CODIFICACION

Glucosa
sangre
Respuesta
Ingreso
glucosa
DECODIFICACION
Insulina
GLUT-4
Emisor Receptor
Mensaje
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Cmo se reconocen y decodifican
estos mensajes?
Mecanismo de Accin
Receptores de Superficie
Los receptores para las hormonas
proteicas peptdicas catecolaminas y proteicas, peptdicas, catecolaminas y
eicosanoides estn localizados en la
membrana plasmtica.
La unin del ligando a su receptor
i i i i d t ll inicia una serie de eventos que llevan a
la generacin de los segundos
mensajeros dentro de la clula.
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Interaccin 1 mensajero-receptor:
evento determinante de una respuesta
biolgica
M + R M:::R
N y tipos de
enlaces qumicos
Afinidad
Alta
Baja
Nmero o densidad
Tipo de receptores
Cantidad de mensaje
(concentracin)
Tipos de uniones
Situacin real (unin total)
L*+ R + X L*:::R + L*..X
Unin inespecfica: exceso L
L L L*+ R + X+ L L:::R + L*..X
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Ecuacin de Scatchard
Linearizacin de una curva de
saturacin
B/F
B/F = A- m B
A
m
n
A: intercepto eje Y
Pendiente = m = Ka
Kd: constante disociacin: 1/Ka 1/m
Si B/F = 0 n : nmero de receptores
B
Transduccin de seales
Es un proceso dinmico en la que hay
mecanismos de encendido (ON) para que la
informacin fluye ro debajo de la va en respuesta
al estmulo externo (flechas verdes) y tambin
aquellos opuestos (mecanismos de apagado o
OFF) que permiten desconectar el sistema de
transduccin una vez que el estmulo externo ha transduccin una vez que el estmulo externo ha
cesado su accin (flechas rojas).
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Mecanismos de transferencia de informacin
Cambio en el estado de actividad de un componente
t ll bi l ti id d d l upstream lleva a un cambio en la actividad del
componente down-stream .
Cambio es generalmente vectorial
Cambio puede conducir ya sea a activacin o
inhibicin. Esta es una interaccin especifica. (ej.
fosforilacin de un blanco puede aumentar o reducir
su actividad)
Vas versus redes ( networks )
Las vas generalmente involucra una cascada de
reacciones simples que conducen al flujo de reacciones simples que conducen al flujo de
informacin.
Ejemplos de vas
1) Vas asociadas a protenas G
2) Va RTKRasMAPK
3) Va receptor citokinaJAK-Stat
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Seal: NE, LH
Va transduccional lineal
Receptor: beta1-AR, LHR
Efector
Adenilato ciclasa
cAMP
ATP
2 mensajero
Protena Kinasa A
Transductor
G
s
heterotrimrica
cAMP
a
g
b
Protenas fosforiladas
Cambio en actividad de enzimas,
canales, factores de transcripcin
+
Metabolismo glucosa
Contractilidad cardiaca
Expresin gnica
Vas versus Networks
Networks se originan de las interacciones
d d t d l l donde un componente de una va regula la
actividadde una segunda va.
Un ejemplo de un network:
Interacciones entre vas RTKRasMAPK y RTK-PLC-PKC
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RTK
SOS
Ras
Consecuencia Consecuencia del networking: un loop de del networking: un loop de
retroalimentacin retroalimentacin que que tiene tiene biestabilidad biestabilidad
DAG
Ca
2+
c-Raf
MEK-1,2
Grb2
PLC-
PKC
AA
IP
3
GAP
MAPK-1,2
Estimulacin proliferacin
AA
cPLA
2
Activacin
persistente
Bhalla & Iyengar (1999)
Science 283:381
Tipos de receptores de membrana
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Evolutionary origins of the human plasma membrane
signaling receptor families
1. Deben imitar la accin biolgica del 1 mensajero
2. Son compuestos qumicos de masa molecular pequea que
difunden al interior de la clula transportando informacin
Los 6 criterios para ser un 2 mensajero: Los 6 criterios para ser un 2 mensajero:
difunden al interior de la clula, transportando informacin.
3. Sus concentraciones intracelulares se modifican espacial y
temporalmente.
4. Son generados enzimticamente o liberados desde
reservorios intracelulares especficos
5. Son efmeros es decir tienen una vida media muy corta pues
id t d d d i t i ti son rpidamente degradados por sistemas enzimticos o
almacenados en reservorios intracelulares especficos.
6. Son reconocidos por dominios especficos en efectores
proteicos, regulando actividad biolgica de enzimas,
canales, transportadores, factores de transcripcin, etc.
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Clasificacin de 2 mensajeros
1. Mensajeros hidroflicos
Son solubles en agua
Residen en el citosol
Interaccionan con sus efectores en este compartimento p
Ejemplos: cAMP, cGMP, IP3 y calcio
2. Mensajeros hidrofbicos
Se encuentran o generan en membranas biolgicas
(plasmtica, ncleo, etc)
Difunden en la membrana para acceder a sus protenas
efectoras de membrana y regulan su actividad.
Ejemplos: diacilglicerol, PIP2, PIP3
3. Mensajeros gaseosos
NO y CO
2 mensajeros
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Cmo actan estos 2M
hidrofbicos o hidroflicos?
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G-Protein Coupled Receptor p p
(GPCR)
Receptores acoplados a protena G
Sistema receptor de membrana Sistema receptor de membrana
Receptor - Transductor - Amplificador
Reconoce seal Reconoce seal
externa externa
Decodifica seal Decodifica seal Genera 2 mensajero Genera 2 mensajero
Multiplica seal Multiplica seal
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Receptores de membrana acoplados a
protena G (GPCR)
GPCRs
Son protenas integrales de membrana que tienen:
7 dominios hidrofbicos = 7 hlices transmembrana
Funciones: reconocer seales externas y tranducir
desde afuera hacia adentro
Activan protenas G heterotrimricas, las que
activan o inhiben un efector: ej. adenilil ciclasa, activan o inhiben un efector: ej. adenilil ciclasa,
fosfolipasas o canales onicos
20
GPCRs
Son el blanco del 50% de los actuales frmacos.
Regulan virtualmente todos los procesos fisiolgicos
conocidos en los mamferos.
Son la 4 superfamilia en el genoma humano con ms de
1.000 genes.
Son activados por hormonas, quimioquinas,
neurotransmisores, ones, odorantes, palatantes,
fotones de luz.
Modificaciones post-transduccionales
Glicosilacin Glicosilacin
Contribuye a estabilidad, afinidad por ligando y
transduccin.
Palmitoilacin
Forma 4 loop intracelular
Modula internalizacin, desensibilizacin
Contribuye a acoplamiento de ERK a algunos
receptores
Fosforilacin
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Receptores de membrana de 7
hlices ms importantes
Estructura de los GPCRs:
7 HELICES
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Nomenclatura en la estructura
del GPCRs
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CR: chimeric receptors
Principales dominios funcionales
en la estructura del GPCRs
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GPCRs
Sitios para acoplamiento y activacin de protena G estn
principalmente en el 3 loop intracelular, pero tambin en el 2
loop y dominio COOH-terminal p y
* * *
Transicin de estado inactivo a uno activo: reorganizacin de las
hlices TM3 y TM6
Promiscuidad en acoplamiento a protena G
Caractersticas estructurales
generales
Un segmento amino terminal extracelular (7-595 aa)
Ncleo del receptor : 7 segmentos de transmembrana
(20-27 aa) (20-27 aa)
3 loops extracelulares (5-230 aa)
3 loops intracelulares (5-230 aa)
Segmento COOH terminal intracelular (12-359 aa)
4 loop intracelular es palmitoilado en Cys.
Existe una pequea correlacin entre el tamao del
segmento N terminal y el tamao del ligando
Segmento amino terminal (glicosilacin y unin del
ligando)
Segmento carboxilo terminal (palmitoilacin y
fosforilacin, permitiendo la desensibilizacin e
internalizacin del receptor)
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Los TM varan en longitud y pueden extender ms all de la
bicapa lipdica
Los extremos son irregulares y dinmicos
TMs 1, 4 y 7 son ms hidrofbicos que TMs 2,3,5 y 6,
conteniendo residuos aminoacdicos neutros y/o inicos
TM 1 4 7 ti l id hid fli (S A ) TMs 1,4 y 7 tienen slo un residuo hidroflico (Ser o Asn)
Residuos de prolina ayudan a torcer el ncleo de la hlice en
26 y modificar la estructura global de la protena.
Algunos TMs estn inclinadas en la membrana
TMs 3,5 y 6 protruyen ms que los otros sobre la membrana
hacia el extracelular
TMs a menudo contienen residuos de Cys y algunos estn TMs a menudo contienen residuos de Cys y algunos estn
formando puentes GSSG.