UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
(Universidad del Per, Decana de Amrica)
FACULTAD DE QUIMICA, INGENIERIA QUIMICA E
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
E.A.P. DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL



CURSO:
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA GENERAL Y APLICADA

PROFESOR:
Mg. Sc. Blga. MIRIAM ESTELA MEMENZA ZEGARRA

ALUMNOS:

CAJACHAHUA VITELLA, DANIEL ALEJANDRO
LEN UGARTE, JAVIER ALEJANDRO
PINILLOS MIANO, RICARDO




AO:

2014
I. COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO
II. DETERMINACION DEL NUMERO DE MICROORGANISMOS

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I. COMPORTAMIENTO CULTURAL DEL CRECIMIENTO MICROBIANO

I. INTRODUCCION
Para el estudio del comportamiento de microrganismos, se debe realizar con cultivos puros es
decir, de una sola especie de microorganismos y esta debe ser incluida en medios solidos o
lquidos estriles que garanticen la pureza del cultivo.
Las muestras que se utilizan generalmente para el estudio de los microorganismos son
generalmente una fuente compleja y presentan una gran variedad, de aqu se toma un inoculo y
se transfiere a un medio estril que generalmente es un lquido bajo condiciones aspticas.
Para conseguir un cultivo puro se requiere de pasajes sucesivos de medios lquidos a solidos o
viceversa hasta lograr UFC (Unidad de formacin de colonias) lo suficientemente aislada que
permitan su pureza.
La pureza de los cultivos permite estudiar sus caractersticas que presenta en los medios
respectivos (Solidos o lquidos).
El objetivo de esta prctica fue poder identificar a que especie corresponda cada cepa
proporcionada, para eso se estudi la morfologa de las colonias formadas. Cada carcter vara
segn las necesidades metablicas y de multiplicacin de las especies o grupos
bacterianos y en parte ayuda a la identificacin.











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II. PROCEDIMIENTO:
Se proporcion cepas puras de Bacterias de manera incgnita (A y B) y tambin cepas de
Hongos (C y D).





Los medios de cultivo fueron:


REPLICACION
LIQUIDO -LIQUIDO
Cepa A
Abrir con cuidado el tubo de ensayo que contiene la cepa( que
anteriormente fue incubada por 24 horas).
Flamear el alambre de nicron
Cuando baje su temperatura, extraer una alicuota del inoculo
Depositar el inoculo en el nuevo tubo de ensayo con caldo
nutritivo
Tapar y dejar en la gradilla el tubo de ensayo que contiene la
cepa.
Rotular e incubar a 30.
REPLICACION DE
LQUIDO-SOLIDO
Cepa B
Se realizo el mismo procedimiento anterior para extraer la
alicuota del incoculo
Se abrio el tubo de ensayo que contenia el agar nutritivo en plano
inclinado y se procedio a inocular sobre la superficie en forma de
zigzag desde abajo para arriba.
Se esteriliz el alambre de nicron, y la boquilla del tubo de ensayo
Se rotulo e incubo a 30
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REPLICACION SOLIDO
-SOLIDO
Cepa C
Abrir con cuidado placa petri en el cual se encuentra el hongo
Esterilizar el alambre de nicron y cuando baje su temperatura,
extraer una pequea muestra.
Depositar el inoculo en el tubo de ensayo con sabouraud en plano
inclinado.
esterilizar la boquilla del tubo de ensayo y tapar con algodon
Rotular e incubar a 30.
REPLICACION DE
LQUIDO-SOLIDO
Cepa D
Se repitio el mismo procedimiento.
Se abrio el tubo de ensayo que contenia agar papa dextros en
plano inclinado y se procedio a inocular sobre la superficie en
forma de zigzag desde abajo para arriba.
Se esteriliz el alambre de nicron, y la boquilla del tubo de ensayo
Se rotulo e incubo a 30
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III. RESULTADOS
ESPECIE DETERMINADA ESPECIE REAL
MUESTRA PROBLEMA A Escherichia coli Escherichia coli
MUESTRA PROBLEMA B Salmonella Bacillus
MUESTRA PROBLEMA C Pseudomonas Pseudomonas
MUESTRA PROBLEMA D Aspergillus Aspergillus

Resultado de la Muestra Problema A
















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Resultado de la Muestra Problema B












Resultado de la Muestra Problema C










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Resultado de la Muestra Problema D
























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IV. DISCUSIN DE RESULTADOS :


Se observ que para cada muestra existe una formacin morfolgica diferente, lo cual
permiti determinar a qu especie pertenecan.
Se determin con exactitud 3 especies de microorganismos, debido a que algunas de sus
caractersticas son marcadas.
La pureza de una cepa es fundamental para poder asi determinar con exactitud la
morfologa ya que este al ser un mtodo no muy objetivo se puede determinar
errneamente un microorganismo.
















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RECOMENDACIONES:


Una de las condiciones funamentales para llevar acabo la determinacin de
los microorganismos es la pureza de la cepa que se va a incocular, por lo
cual para poder garantizar un estudio morofologico preciso se requiere que
se garantize las condiciones aspticas de todos los instrumentos que se
usaran en el proceso
Para ver poder determinar bien la morfologa de las colonias se debe contar
con una adecuada luz, para lo cual este conteo y clasificacin se debe hacer
siempre cerca de la ventana o de un foco.

















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CUESTIONARIO
1. Cul es la razn de utilizar cultivos puros para el estudio morfolgico?

Se denomina cultivo puro al que contiene solo un tipo de microorganismos. Los cultivos
puros se inician a partir de colonias aisladas, de manera que todos los individuos tengan la
misma composicin gentica.

La finalidad del estudio morfolgico es poder identificar frente a qu tipo de
microorganismo nos encontramos mediante la forma y densidad de sus colonias,
por eso si es que en la muestra existe ms de un tipo de microorganismo, el M.O
no deseado competir por espacio y nutrientes, lo que alterara el resultado de la
posterior lectura morfolgica.
Tambin, en el peor de los casos el microorganismo no deseado puede llegar a
inhibir el crecimiento y la replicacin del M.O que deseamos caracterizar
2. La morfologa de los microorganismos varia con el medio de cultivo. Por qu?
El tipo de medio de cultivo puede facilitar o limitar en cierto grado la estructura de la
colonia,
Medio Slido
El tipo de crecimiento que se observa en este tipo de medios son en colonias, y sus
caractersticas varan con respecto a su especie. Tambin en este medio los desechos del
microorganismo no precipitan se encuentran alrededor de este, otro factor es que al ser
un medio slido, la cantidad de nutrientes es limitada ya que poseen solo lo que hay a su
alrededor.
Medio Lquido
Si la bacteria crece en un medio lquido, en la mayora de los casos las clulas que se
producen en cada divisin continan su vida independientemente formndose una
suspensin de clulas libres.

3. Cul es el fundamento de la cromo gnesis?

La cromo gnesis tambin llamado pigmentacin de colonias bacterianas, es una de las
caractersticas ms notables de los cultivos. En algunas especies el pigmento producido es
retenido dentro de las clulas y su masa celular se colorea; en otras especies, por el
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contrario, el pigmento es expulsado al medio de cultivo. Estos pigmentos pueden ser
solubles o insolubles en agua, y no son producidos en todos los medios de cultivo ni bajo
todas las condiciones ambientales (Grimot&Grimont, 1984; Harwood, 1989).


Factores que influyen en la pigmentacin:
Condiciones de crecimiento, ciertos pigmentos se observan mejor en cultivos
slidos.
Presencia o ausencia de fuentes nitrogenadas o de carbono ((Torres & Bonilla,
1999; Toro et al., 2001, Gmez-Marn & Naranjo-Fernndez, 2003).
Las funciones especficas de la mayora de los pigmentos en los cultivos bacterianos no
estn determinadas. En general, son metabolitos secundarios sin funcin biolgica
definida en el crecimiento celular, a los cuales se les han atribuido diversas funciones,
como ser amortiguadores redox o generar/neutralizar radicales libres txicos de oxgeno,
razones que podran explicar la actividad antibitica encontrada en algunos de estos
compuestos, relacionando la habilidad de producirlos con la supervivencia del organismo
y con el incremento in vivo de la virulencia de algunos microorganismos (Kerr, 2000).
4. Cul es el fundamento de la fluorescencia en los microorganismos?