Taller sobre institucionalidad para el desarrollo, regulacin y

Comercializacin de bioinsumos en Argentina.

31 de julio, 1 y 2 de agosto de 2013, Buenos Aires, Argentina

El uso de microorganismos como biofertilizantes

Estado del arte, desarrollo de productos, beneficios para el agro.

Luis Gabriel WALL

LBMIBS Departmento de Ciencia y Tecnologa,
Universidad Nacional de Quilmes,
CONICET

La microbiologa del suelo y el cambio de escenario de

1978 (PGPR) a 1985 (Los Invisibles)
La anomala del recuento en placa
PLACA

DIRECTO

VEMOS MANEJAMOS

vs

1% de lo que existe
http://microbiologiaybioanalismo.blogspot.com.ar

www.microbiological-garden.net

Cultivables (1%)
BACTERIAS
No Cultivables (99%)

BIOFERTILIZANTES

?
hay que considerarlo

En 1 gramo de suelo viven 10 MIL MILLONES de

microorganismos
En 1 gramo de suelo hay 1 MILLN de funciones diferentes

eso es lo que hace funcionar los suelos

esa es la esencia de la BIOLOGIA del SUELO
en esa realidad insertamos los Biofertilizantes

Los BIOFERTILIZANTES se definen

como
preparaciones
a
base
de
microorganismos vivos que (directa o
indirectamente) aumentan o promueven el
desarrollo de las plantas, en forma relativa
a un control sin inocular.

_ +

+
_

Los BIOFERTILIZANTES se basan en

asociativos

microorganismos cultivables que pueden

asociarse con las races de las plantas en
un gradiente de proximidad e interaccin
que pueden clasificarse de este modo:
i)
ii)

simbiticos

iii)
iv)

Microorganismos que viven en el suelo cercano a la

raz, que utilizan exudados radiculares (Rizosfera)
Microorganismos que colonizan la superficie de la
raz (Rizoplano)
Microorganismos que colonizan el tejido radicular
habitando espacios intercelulares (Endfitos)
Microorganismos que viven dentro de las clulas
vegetales en estructuras radiculares particulares
como ndulos (Simbiontes)

BIOFERTILIZANTES
Qu hay de nuevo?
En el ltimo documento consenso sobre Biofertilzantes de la
OECD (1995) , 48 de las 51 pginas del mismo se refieren a
simbiosis, describiendo ejemplos de rizobios, Frankia y
micorrizas. Las 3 pginas restantes se refieren a micoorganismos
de vida libre PGPR como futuros biofertilizantes
Bsqueda de artculos en AGRICOLA (USDA -NAL) por keyword
Rhizobium
Bradyrhizobium
Mycorrhiza
Rhizobia
Frankia
PGPR
Biofertilizer
PGPB

9951
2543
1708
1639
723
219
94
28

simbioticos

BIOFERTILIZANTES
Micro-simbiontes:
(intracelulares)
Rhizobacterias fijadoras de N2
Simbiosis Rizobio-Leguminosa
Simbiosis Frankia-Plantas actinorhizas
Hongos formadores de Micorrizas
Micorrizas Arbusculares (AMF)
Ectomicorrizas Fungi (EMF)

Gray and Smith, Soil Biology Biochem (2005) 37, 395

Simbosis Rizobio Leguminosa

NOVEDAD

Fertilizacin N
LCO Nod Factors
N2

BACTERIA + SEALES

simbiotico

BIOFERTILIZANTES

Flavonoides / Isoflavonoides
Schultze and Kondorosi, Annual Review of Genetics, (1998) Vol. 32: 33-57

Simbiosis

BIOFERTILIZANTES
Rizobio Leguminosa
Frankia planta actinorhiza
Infeccin
Intercelular

Nodulacin espontnea

(Madsen et al 2010, Nature communications)

NUEVO ESCENARIO
para
BIOFERTILIZANTES

simbiosis

BIOFERTILIZANTES
Simbiosis Planta Hongo micorrcico (HMA)
Fertilizacin en N, P, y otros nutrientes, AGUA
LCO de HMA
Denari et al, 2011, Patent US

ECTO
Cultivable
Especfica
rboles

ENDO
Menos especfica
Muchas plantas
Cultivo in vitro (ROC)

MyC LCO Estimula la

simbiosis MA y la formacin
de races laterales

Futuros Nuevos Inculos (?)

asociativo

BIOFERTILIZANTES
Vida Libre / No-simbioticos
(extracelular)

PROMOTORES DE CRECIMIENTO
Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR)
(Kloepper and Schroth, 1978)

Plant Growth Promoting Bacteria (PGPB)

Biocontrol-PGPB
(Bashan and Holguin, 1998)

Plant Stress Homeotasis-Regulating Bacteria (PSHB)

(Cassan et al 2009)
Gray and Smith, Soil Biology Biochem (2005) 37, 395

asociativO

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Plant Growth Promoting Bacteria (PGPB)
Efectos DIRECTOS
sobre la planta por diferentes mecanismos
(Kloepper and Schroth, 1978; Glick et al 2000, Lugtenberg and Kamilova 2009,
Bashan and Bashan 2010, Verma et al 2010, Richardson and Simpson 2011)

Plant Stress Homeostasis-Regulating Bacteria

(PSHB)
Efectos DIRECTOS / INDIRECTOS
sobre la planta por diferentes mecanismos
(Cassan et al 2009, Bashan and Bashan 2010)

Gneros: Azospirillum, Bacillus, Pseudomonas, Enterobacter, Erwinia, Caulobacter,

Serratia, Arthrobacter, Micrococcus, Flavobacterium, Chromobacterum, Agrobacterium,
Hyphomycrobium, Gluconacetobacter, Herbaspirillum, Actinobacter, Pantoea

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fijacin de N2 por PGPR
N2 + 8 H+ + 8 e 2 NH3 + H2 / GS-GOGAT
(Crecimiento en medio sin N / ARA / nif)
15N

dilucin isotpica
15N ensayos de enriquecimiento de atmsfera
2
Mutantes Glutamina Sintetasa (GS) son mejores PGPR
que las cepas parentales. (Van Domelen et al 2009)
NOTA: Los resultados son variables y a veces contradictorios que
apoyan o rechazan la hiptesis de la fijacin de N2 como el factor
principal de promocin de crecimiento de las plantas inoculadas

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Disponibilidad de Fsforo mediada por PGPB

Rhichardson and Simpson (2011) Plant Physiol 156, 989)

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Disponibilidad de Fsforo mediada por PGPB
MINERALIZACIN de P orgnico
Fosfatasas
Fitasas
Fosfolipasas
Las bacterias son piezas claves en esta transformacin
es parte del proceso de transformacin de la materia orgnica?
existe competencia entre las plantas y las bacterias por el P?

Actividades Enzimticas in vitro

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Disponibilidad de Fsforo mediada por PGPB
SOLUBILIZADORAS de FSFORO
Habilidad de los cultivos para solubilizar el P inorgnico por acidificacin del
medio debido a la liberacin de cidos orgnicos

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Estmulo del desarrollo radicular junto con el
estmulo en la absorcin de agua y minerales

_
Photo: B. Glick

General improvement of root growth,

including root hairs is the most
common phenotypical effect of
inoculation with PGPB.
It is likely that water and mineral
uptake is improved in inoculated
roots but the mechanism is not
completely clear. Change in hormone
balance, enhancement of proton
efflux
activity
extrusion,
and
modification in a wide range of
related enzimatic activities would be
part of the mechansims. Most data is
descriptive.

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas
AUXINAS (IAA, IBA, )

Algunas bacterias producen grandes

cantidades de AIA in vitro, y a esto se le
atribuyen los efectos de promocin de
desarrollo en las plantas.
SIN EMBARGO la producin in planta
an no a sido demostrada.
No existen mutantes AIA de las
bacterias, pero mutantes atenuados en
la produccin de AIA son inefectivos
como PGPR, comparados con la cepa
parental. La aplicacin exgena de AIA
mimetiza el efecto de las PGPR.

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas
GIBERELINAS

A1

Algunas PGPR producen Ags in vitro

y tambin ha sido demostrado in
planta (por complementacin de
mutantes de arroz deficientes en
citoquininas al ser inoculados con
estas PGPRs)
PGPR productoras de AG estimulan
el podergemrinativo.
Los resultados In vitro apoyan la
hiptesis que los efectos PGPR
seran una combinacin de
produccin de AG y de
desconjugacin de los steres PGPB

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas
CITOQUININAS

(Zeatin)

Las citoquininas representadas por kinetina,

zeatina, y 6-benzilaminopurina ocurren in
planta, mientras que las citoquininas se
producen en medios definidos.
NO est an claro el rol de las citoquininas en
el desarrollo de las pantas, PERO, las bacteras
productoras de citoquininas in vitro estimulan la
nodulacion en leguminosas inoculadas con
rizobios. Ms an, algunas leguminosas
modelo como Aeschinomene tienen una
nodulacin independiente de factores Nod
(Giraud et al, 2007), probablemente mediada
por la citoquinina rizobiana . Esta rea necesita
mayor atencin.

associative

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas
Una actvidad promotora del crecimiento
vegetal estara mediada por NO en A.
brasilense Sp245 induciendo cambios
morfologicos en races de tomate,
independientemente de la capacidad
completa de las bacterias de sintetizar
AIA. NO es como un elemento intermedio
en la sntesis de AIA en la obtencin de
las condiciones de vida para migrar a
Venezuela

asociatioe

BIOFERTILIZERS
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Voltiles
Oxido Nitrico (NO)

An NO dependent promoting activity in A.

brasilense Sp245 induces morphological
changes in tomato roots regardless of the
full bacterial capacity for IAA synthesis.
NO is as an intermediary in IAA-induced
root development (Correa-Aragunde et
al., 2004, 2006)

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Voltiles

2,3-butanediol

Algunas rhizobacterias, como cepas de B.

subtilis, B. amyloliquefaciens, y Enterobacter
cloacae, promueven el desarrollo vegetal por
la liberacin de voltiles como 2,3-butandiol y
acetoina.
Mutantes de B. amyloliquefaciens IN937a
y B. subtilis GB03, bolqueados en la sntesis
de estos compuestos , fueron inactivos en la
promocin de desarrollo de plantas

acetoin

associative

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas / Precursores

ETILENO

El etileno juega un importante rol en la

ruptura de la dormancia de semillas
Su mayor efecto es sobre senesencia
en plantas
La insercin del gen de la ACCdeaminasa en Azospirillum aument
el desarrollo de la planta

ACC

associative

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas / Precursores
ETILENO / ACC Deaminasa
Plant
PGPB
ACC
ETHYLENE

Glick, 2007

STRESS
RESPONSE

ACC
ACC
Deaminase
NH4 +-Ketobutirate

associative

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)
Fitohormonas
(producida in vitro, no demostrado in planta)
POLYAMINES

La aplicacin de cadaverina
mitiga el estrs osmtico e arroz
(CADAVERINE)

Asociativo + simbtico

BIOFERTILIZANTES
Bacterias Helper (simbionte+helper+planta)
Actinomicetes rizosfricos : Streptomyces, Actinoplanes, Micromonospora
Plants: Discaria, Alfalfa, Lotus, Soybean

Sym

Help

Sym+Help NEG
Sym

Solans M, 2007
Solans et al, 2009

Help

Sym+Help NEG

NEGRO (N < 1ppm)

GRIS (inhibicin por N 100ppm)

asociativoe

BIOFERTILIZANTES
PROMOTORES DE CRECIMIENTO (PGPR)

Fitohormonas
Efecto sobre
arquitectura de raz y
su desarrollo

(reducido)
Estrs
Ambiental
Hiptesis aditiva

Aumento de la
toma de agua y
nutrientes

Disponibilidad
de Fsforo

Fijacin de N2

Mecanismos
de controles
mltples

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

PLANTA

PGPR

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

PGPR

PLANTA

Microorganismo(s) 2-n

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

PGPR

PLANTA

Microorganismos 2-n

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

PGPR

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

MICROBIAL
PGPR
COMMUNITY
STRUCTURE

asociativo

BIOFERTILIZANTES
PGPR en el ambiente rizosfrico

MICROBIAL
COMMUNITY
STRUCTURE
PGPR

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