EXACTITUD Y EFICACIA ENUNAPRUEBAINTERLABORATORIO Julio - Agosto - 2001 Unalm Precision PDF

SILVIA GUTIRREZ FLORES
Exactitud y eficacia en una prueba interlaboratorio ........................................ 159

MARCIAL CUMPA G. JULIO DIAZ Z.
Criopreservacin de semen de gallos reproductores de carne (Cornish)

y criollos utilizando Belstville Poultry semen extender y dimetil sulfoxido.................. 176
CARLOS CADENAS GIRALDO, LEONOR MATTOS CALDERN
Etiologa de la raiz rosada de la cebolla y su control qumico ................................. 189

LUZ EUFEMIA LPEZ REZ, ALBERTO TORRES FLORES
Estudio comparativo del salado en pila seca, hmeda y por deshidratacin

osmtica a vaco de merluza (merluccius gayi peruanus) .......................................... 200
MIGUEL HUAUYA ROJAS, JUAN JUSCAMAITA MORALES,
CONSTANTINO CALDERN MENDOZA
Evaluacin de diazotrofos asociados al cultivo de maz (zea mays l.)

en condiciones de agricultura natural ............................................................ 215
MARCEL MONTALVO, PEDRO CIRIACO
Comportamiento productivo y reproductivo de codornices (Coturnix coturnix

japnica l.) en postura alimentadas con algarrobo (Prosopis pallida)
en la etapa de desarrollo ............................................................................. 231
VCTOR R. MIYASHIRO , HERV J. JGAT Y LUIS E. MORA
Evaluacin estocstica de polticas de explotacin

del agua subterrnea en el Valle de Qubor ................................................... 240
JORGE HUGO VILLACHICA VIVANCO, CARLOS ALBERTO CADENAS GIRALDO
Etiologa de la pudricion negra de la pia y prevencin

por tratamiento qumico............................................................................... 257
ALBERTO TORRES FLORES, JORGE ROMAN LUNA
Diseo de una mquina peladora de ajos (allium sativum)

por va seca................................................................................................ 274
RAPHAEL FLIX VALENCIA CHACN
Anlisis de un diseo de bloques incompletos

con un tratamiento referencial. ................................................................... 290
WALTER E. APAZA, LEONOR MATTOS
Reaccin de cultivares de cebolla a la pudricin del disco basal
causada por fusarium oxysporum f.sp. cepae ................................................ 304
LILIANA ARAGN, LEONOR MATTOS
Identificacin de grupos de anastomosis de aislamientos de Rhizoctonia

solani Kuhn procedentes de las principales zonas algodoneras del Per........... 313
161
EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO
Silvia Gutirrez Flores
RESUMEN
Todo mtodo propuesto debe ser validado y estudiado estadsticamente, para poder
determinar un estndar de referencia para el uso del Control Interno de cada Laboratorio, as
como la manera de determinar el estndar de reproducibilidad del mtodo.
Este estudio nos permite demostrar la validez y fiabilidad del mtodo a travs de los
indicadores de repetibilidad y de reproducibilidad, reconocido por INDECOPI como mtodo de
ensayo oficial para este tipo de producto.
El presente estudio proporcionar un estimado real de los atributos de los mtodos de
ensayo propuestos en la determinacin de la humedad en el alimento precocido instantneo,
Papilla; especialmente las desviaciones referidas a errores sistemticos y aleatorios al aplicar
estos mtodos en la prctica real en un Estudio Colaborativo de Laboratorios.
SUMMARY
All proposed method must be validated and studied statistically, to determine a standard of reference for using of internal control of each Laboratory, as well the way to determine
the standard of method is reproducibility. This study let us demonstrate the validity and reliability
of the methodoly through the indicators of repeatability and reproducibility, recognized by
INDECOPI as an Official Method for this type of product.
The present study will provide real estimation of the attributes of testing methods proposed
in the moisture determination in the precooked instantaneous food called, Papilla; specially the
deviations referred to sistematic and aleatories errors when applying these methods in the real
practice in Laboratories Cooperative Study.
Docente de la Facultad de Economa
162
Anales Cientficos UNALM
1. INTRODUCCION
Los trminos de veracidad y precisin se usan para describir la exactitud de un mtodo de medicin. La veracidad de un mtodo de medicin es de inters cuando es posible
concebir un valor verdadero para la propiedad que est siendo medida; es decir, la capacidad
de generar un resultado correcto. Si bien para algunos mtodos de medicin, el valor verdadero no puede conocerse con exactitud, quiz sea posible tener un valor de referencia aceptado para la propiedad que est siendo medida. La veracidad se expresa generalmente en
funcin del sesgo. El sesgo puede surgir, por ejemplo, en el anlisis qumico si el mtodo de
medicin no logra extraer todo el elemento, o si la presencia de un elemento interfiere en la
determinacin del otro. La necesidad de considerar la precisin (el de repetir un resultado
dado) surge porque los ensayos realizados en materiales probablemente idnticos y en
circunstancias probablemente idnticas, generalmente no producen resultados idnticos (2).
Esto se atribuye a errores aleatorios inevitables e inherentes a cada procedimiento de precisin; los factores que influyen en el resultado de una medicin no pueden ser controlados
completamente, de all que se estimar la precisin a travs de la desviacin estndar de
repetibilidad ( ) y de reproducibilidad ( ) suponiendo un igual nmero de resultados de ensayo
en cada laboratorio (n). En ciertas circunstancias, los datos obtenidos de un experimento
realizado para estimar la precisin tambin son utilizados para estimar la veracidad. (4 )
El presente estudio tiene por objetivo proporcionar un estimado realista de los atributos de los mtodos de ensayo propuestos en la determinacin de la humedad en el
alimento precocido instantneo, Papilla; especialmente las desviaciones referidas a errores sistemticos y aleatorios al aplicar estos mtodos en la prctica real en un Estudio
Colaborativo de Laboratorios. Entonces, se demostrar la validez y la fiabilidad del mtodo
a travs de los indicadores de repetibilidad y de reproducibilidad, reconocido por INDECOPI
como mtodo de ensayo oficial para este tipo de producto.
Se ensayaron muestras de papilla con los Laboratorios participantes (ver tabla 1), para
determinar los siguientes anlisis con los Proyectos de Norma Tcnica (PNT) que a continuacin se detallan:
PNTP 209.264 1999 ALIMENTOS INFANTILES INSTANTNEOS, Papilla, enriquecido lcteo,
determinacin de Humedad, mtodo Gavimtrico.
Todo mtodo propuesto debe ser validado y estudiado estadsticamente, para poder
determinar un estndar de referencia tanto para el uso de un Control Interno de cada Laboratorio, as como la manera de determinar el estndar de reproducibilidad del mtodo.
2. MATERIALES Y METODOS
Los diez laboratorios participantes pertenecientes al comit de Regmenes Especiales sern codificados en el presente trabajo tal como se presenta en la tabla N 1, estos
reportaron 10 resultados de ensayo expresados en % para el anlisis de Humedad en el
producto Papilla perteneciente a un mismo productor.
163
Los resultados fueron determinados 05 cada da, por el mismo analista, con el mismo
equipo y en las condiciones establecidas en los mtodos correspondientes. Este ensayo se realiz con una sola muestra y distribuida a cada laboratorio participante que poda realizar el mtodo.
El muestreo de campo lo realizaron SGS y CENAN en el mes de Octubre del ao 1999,
esta muestra fue homogeneizada y preparada en el rea de Microbiologa de CENAN que fue
el laboratorio organizador y que pertenece al Ministerio de Salud.
La muestra enviada a cada laboratorio fue codificada en forma aleatoria, con dgitos
legibles, para lograr una imparcialidad en las determinaciones. La muestra global para este
estudio fue de 20 Kg. de papilla que se encontraba bajo condiciones controladas. Esta muestra fue obtenida de un lote de 160 TM, bajo el esquema del Proyecto de muestreo (1) La
distribucin de las muestras se realiz durante un mismo da en el laboratorio de CENAN cada
laboratorio recibi dos bolsas de 1kg, tomando las medidas adecuadas para la conservacin y
proteccin de la misma.
Mtodos
A partir de los datos proporcionados por los laboratorios (ver tablas N 1), se deben
estimar los valores de la media general y las desviaciones estndar de repetibilidad y de
reproducibilidad, que son los dos extremos de la precisin, el primero describe la variabilidad
mnima y el segundo la variabilidad mxima en los resultados.
Se asume que, en el diseo y realizacin del experimento de precisin, se han considerado
todos los principios establecidos en la NTP-ISO 5725-1. El mtodo bsico utiliza el mismo
nmero de resultados de ensayo en cada laboratorio, cada uno de los cuales analiza los
mismos niveles de la muestra de ensayo; es decir, un experimento de nivel uniforme balanceado. El mtodo bsico se aplica a procedimientos que han sido normalizados y que son de uso
regular en varios laboratorios .
Para estimar la veracidad y la precisin de un mtodo de medicin, es til asumir que
cada resultado de ensayo, Yijk, es una suma de tres componentes (3):
Yijk = m + Bj + eijk,
Donde:
nij :
Yijk :
m :
B
:
e
de
i
j
:
:
:
es el nmero de resultados de ensayo en la celda para el laboratorio

i en cada nivel j.
es alguno de estos resultados de ensayo (k = 1, 2, ... , nij)
es la media general (esperada).
es la componente de sesgo del laboratorio bajo condiciones de
repetibilidad.
es el error aleatorio que ocurre en cada medicin bajo condiciones
repetibilidad.
es el nmero de laboratorios (i = 1, 2, ... , p).
es el nmero de niveles de ensayo (j = 1, 2, ... , q).
164
El caso ideal es p laboratorios llamados i, cada uno de los cuales ensaya q niveles
llamados j (q lotes de materiales) con n rplicas en cada nivel (cada combinacin ij), que da un
total de pqn resultados de ensayo.
Cuando los datos originales se hallan baseado segn el formato A de la norma NTPISO 5725-2 se hallarn los valores de la media y de la dispersin de las celdas a travs de las
siguientes relaciones (3):
...1
...2
La presencia de valores individuales que parecen ser inconsistentes con todos los dems laboratorios o valores que puedan cambiar los estimados se deber tomar decisiones con
respecto a ellos haciendo uso de los siguientes enfoques (3):
a) Tcnica grfica de consistencia (ver 2.1).
b) Prueba numrica de valores errticos o atpicos (ver 2.2).
Despus de haber realizado estas pruebas se estimarn las estadsticas: desviacin
estndar, lmite y desviacin estndar relativa, de repetibilidad y de reproducibilidad
(ver ecuaciones 6 y 8).
2.1. Tcnica grfica de consistencia
Utiliza dos mediciones llamadas estadsticas h y k de Mandel (3).
- Calcular la estadstica de la consistencia entre laboratorios, h, para cada laboratorio a travs de la siguiente relacin:
=
...3
es el nmero de laboratorios (i =1, 2, ... , p).
es el nmero de niveles de ensayo (j =1, 2, ... , q)
165
Graficar los valores de hij para cada celda, en orden de laboratorios, en grupos para cada nivel.
- Calcular la estadstica de la consistencia dentro del laboratorio, k, calculando primero la
desviacin estndar combinada dentro de cada celda a travs de:
...4
para cada laboratorio y luego calcular:
...5
para cada laboratorio dentro de cada nivel.

Graficar los valores de kij para cada celda, en orden de laboratorios, en grupos para
cada nivel.
El anlisis de los grficos de h y k puede indicar que laboratorios especficos presentan patrones de resultados que son marcadamente diferentes de los otros en el estudio. Estas
estadsticas sern comparadas con valores referenciales de las tablas de Mandel (h y k) para
1% y 5% de significancia. (3).
Al elaborar las grficas de h y k de Mandel, estas pueden indicar la adecuacin de
los datos para su posterior anlisis, la presencia de cualquier posible valor inconsistente o
laboratorio inconsistente; sin embargo, no se debe tomar ninguna decisin definitiva en esta
etapa.
El principio general que subyace detrs de los mtodos descritos asume una sola
poblacin unimodal.
2.2 Tcnica numrica par valores errticos o atpicos
Los valores errticos o atpicos son registros que se encuentran entre los laboratorios
de ensayos originales, o en las tablas derivadas de dichos resultados, y que se desvan demasiado de los registros comparables en la misma tabla y, por lo tanto, son considerados irreconciliables con los otros datos (2 ).
166
La prueba de Cochran es una prueba de las variabilidades dentro del laboratorio y debe
aplicarse primero, despus se debe tomar cualquier accin necesaria, repitiendo las pruebas
si es necesario. La prueba de Grubbs es bsicamente una prueba de variabilidad entre laboratorios y tambin puede ser utilizada cuando la prueba de Cochran ha levantado sospechas con
respecto a si la alta variacin dentro del laboratorio es atribuible slo a uno de los resultados de
ensayo de la celda (3).
La estadstica de la prueba de Cochran, C, es
...6
donde smax es la desviacin estndar mxima del grupo.

a) Si la estadstica de la prueba es menor o igual a su valor crtico de 5%, el tem
probado es aceptado como correcto.
b) Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico de 5% y menor o igual a
su valor crtico 1%, al tem probado se le llama rezagado y es indicado por un solo
asterisco.
c) Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico 1%, al tem probado se
le llama valor estadstico atpico y es indicado por dos asteriscos. ( )
Una observacin atpica
Dado un conjunto de datos xi , para i = 1, 2, ..., p, dispuestos en orden ascendente,
determinar si la observacin ms grande es un valor atpico mediante la estadstica de la
prueba, Gp (3 ):
...7
donde, s se obtiene por:
(
=
...8
167
donde dado un conjunto de datos xi, para i = 1,2 , ... ,p , dispuestos en orden ascendente,
determinar si la observacin ms grande es un valor atpico utilizando la prueba de Grubbs.
Para probar la significacin de la observacin ms pequea, calcular la estadstica de
la prueba por:
=(
...9
a)
Si la estadstica de la prueba es menor o igual a su valor crtico de 5%, el tem

probado es aceptado como correcto.
b)
Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico de 5% y menor o igual

a su valor crtico 1%, al tem probado sea rezagado y es indicado por un solo
asterisco.
c)
Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico 1%, al tem probado se

le llama valor estadstico atpico y es indicado por dos asteriscos.
La prueba de Grubbs est basado en el supuesto de normalidad.

Despus de este anlisis se proceder al clculo de la media general y variancias:
para el nivel j, la media general es:
...10
Se calculan tres varianzas para cada nivel. Estas son la varianza de repetibilidad, la varianza
entre laboratorios y la varianza de reproducibilidad (5).
: es la media aritmtica de
y es el estimado de la variancia de la repetibilidad;
esta media aritmtica es tomada de todos aquellos laboratorios que participan en el experimento de exactitud y que quedan despus de haber excluido los valores atpicos.
...11
168
estimado de la variancia entre laboratorios
...12
donde:
...13
...14
estimado de la variancia de reproducibilidad
=
RSDr
...15
desviacin estndar relativa de repetibilidad

...16
RSDR
desviacin estndar relativa de reproducibilidad

...17
lmite de repetibilidad
lmite de reproducibilidad
169
4. RESULTADO Y DISCUSION
Los 10 laboratorios participantes (codificados como 232, 150, 591, 55, 709, 431, 396,
721, 822 y 258) realizaron 10 determinaciones (nmero de ensayos) para el anlisis de Humedad en el producto Papilla, determinados 05 cada da, por el mismo analista, con el mismo
equipo y en las condiciones establecidas en los mtodos correspondientes. Este ensayo se
realiz con una sola muestra proveniente de un solo lote. Los resultados obtenidos se muestran en la tabla N 1
Tabla N 1: Porcentaje de Humedad en Papillas (g/100g de papilla)
En la tabla N 2 se muestran los promedios y los valores de desviaciones estndar de

cada Laboratorio, necesarios para hallar las estadsticas de h y k de Mandel.
Tabla N 2 de promedios y desviaciones estndar
170
La tabla N 3 muestra los valores de la estadstica de consistencia ENTRE Laboratorios, la

prueba hij de Mandel.
Tabla N 3: Prueba de Mandel (hij)
Tabla N 4 : Estadstica de Mandel, hij
La tabla N 4 muestra los valores crticos de Mandel con un nivel de significacin del 1% y 5%,
donde p es el nmero de laboratorios que participan en el experimento.
171
Grfico N 1: Estadstica de Consistencia ENTRE Laboratorios, hij de Mandel
En el grfico N 1 se muestran los valores obtenidos de la estadstica hij de Mandel

(ver tabla N 3), se observa claramente que el laboratorio 150 obtuvo resultados de ensayo
mucho ms alto que el resto de los laboratorios y el laboratorio 822 obtuvo resultados de
ensayo mucho ms bajo que el resto de los laboratorios, lo que puede corroborarrse con
los valores promedio de la tabla N 2.
Por tanto no se observa ningn valor inconsistente entre los laboratorios ninguno
sobrepasa los valores crticos de Mandel a un nivel de significacin del 1% y 5% (ver tabla N
4), como para ponerlo en observacin. Si esto ocurriera, se debe contactar con el laboratorio para determinar la causa del comportamiento discrepante, quedara eliminado y se procedera con una segunda evaluacin, realizando los mismos pasos pero slo con los laboratorios restantes.
172
Tabla N 5: Prueba de Mandel (kij)
La tabla N 5 muestra los valores de la prueba de consistencia DENTRO de Laboratorios, kij de

Mandel.
Tabla N 6 : Estadstica de Mandel (kij)
La tabla N 6 muestra los valores crticos de Mandel en un nivel de significacin del 1% y 5%,
donde p es el nmero de laboratorios que participan en el experimento y n el nmero de
ensayos.
173
Grfico N 2: Estadstica de Consistencia dentro del Laboratorio, Mandel kij
El grfico N 2 muestra los valores obtenidos de la estadstica kij de Mandel (ver tabla
N 5), la variabilidad ms alta la presentan los laboratorios 55 y 431; sin embargo, estos
resultados de ensayo no parecen tan graves como para requerir una accin especial; es decir,
no se observa ningn valor inconsistente entre los laboratorios, ninguno sobrepasa los valores
crticos de Mandel en un nivel de significacin del 1% y 5% (ver tabla N 6) como para ponerlo
en observacin.
A continuacin se realizar el anlisis de datos rezagados y atpicos, eligiendo el
laboratorio con ms alta desviacin estndar.
La aplicacin de la prueba de Cochran y Grubbs arroj los siguientes resultados:
174
Tabla N 7
Al analizar la variabilidad ms alta mediante la prueba de Cochran (ver tabla N 2), se

determin que era el laboratorio 55, por lo tanto fue considerado un rezagado, ya que el valor
de la prueba de Cochran , C = 0.2359 arroj un valor mayor a su valor crtico a un nivel de
significancia del 5% y menor o igual a su valor crtico del 1% (ver tabla N 7), indicndolo por un
solo asterisco (*) , lo que se corrobora con el grafico de k de Mandel, pero por encontrarse el
valor muy cerca del lmite se tomo la decisin de no eliminarlo del estudio.
Los valores de xp y de x1 son los valores promedios ms alto y ms bajo respectivamente y que corresponde a los laboratorios 150 y 822 respectivamente (ver tabla N2), entonces se determinar si la observacin ms grande es un valor atpico, calculando la estadstica
Gp y G1 para la significancia de la observacin ms pequea.
El valor reportado por el laboratorio 150 podemos decir que es correcto ( no es errtico o
atpico), ya que el valor de la prueba , Gp = 1.222 es menor que su valor crtico de Grubbs con
un nivel de significancia del 5% y al 1% (ver tabla N 7), lo que se corrobora con el grfico de k
de Mandel.
175
El valor reportado por el laboratorio 822 podemos decir que es correcto, ya que el valor
de la prueba , G1 = 1.380 es menor que su valor crtico de Grubbs con un nivel de significancia
del 5% y al 1% (ver tabla N 7), lo que se corrobora con el grfico de k de Mandel.
Se est conforme con los resultados omitidos por los laboratorios. Se proceder entonces a hallar los resultados de la precisin del mtodo segn lo establecido en la norma
ISO5725-2:
Cuadro N 1 : Anlisis de la varianza (ANOVA)
El cuadro N 1 se ha obtenido a partir del modelo general, que por lo descrito en el

resultado y los datos presentados en la tabla N 1 corresponden a un diseo completamente
randomizado con 10 repeticiones para cada laboratorio, (ANOVA balanceado) necesario para
determinar el error estndar obtenido en condiciones de repetibilidad.
El promedio general estimado del porcentaje de humedad en la papilla es de 4.4275%:
m = 4.7275
El error estndar obtenida en condiciones de repetibilidad es de 0.09897% de humedad :
sr = 0.09897
La presicin bajo condiciones de reproducibilidad es de 0.40831% de humedad:
sR = 0.40831
Hallando otros estadsticos:
Lmite de repetibilidad: El valor que se espera que sea menor o igual que la diferencia
absoluta entre dos resultados de ensayo obtenidos en condiciones de repetibilidad con una
probabilidad del 95% es de 0.277% de humedad.
r = 0.27712
Lmite de reproduciibilidad: El valor que se espera que sea menor o igual que la diferencia
absoluta entre dos resultados de ensayo obtenidos en condiciones de reproducibilidad con
una probabilidad del 95% es de 1.143% de humedad.
176
R = 1.14327
La desviaciones estndares relativas de repetibilidad y reproducibilidad son :

RSDr
= 2.09% se considera que proviene de resultados muy homogneos.
RSDR
= 8.64% se considera que proviene de resultados muy homogneos.
5. CONCLUSIONES
1. Se observaron 4 laboratorios con valores promedios bajos, siendo el laboratorio 822 el que
present el valor promedio ms bajo y que mediante la prueba de Grubb's no fue considerado como rezagado.
2. El valor promedio ms alto la present el laboratorio 150 , que por estar cerca del
nivel de significancia del 5% pudo ser considerado como un posible laboratorio sospechoso pero que mediante la prueba de Grubb's no fue considerado rezagado.
3. Se observ una variabilidad alta en el laboratorio 55 pero no fue considerado como inconsistente.
4.
El promedio general estimado, es de 4.7275% de humedad y el error estndar de

repetibilidad no controlada de cada medicin realizada por el experimentador es de
0.09897% de humedad.
5. El error estndar de reproducibilidad no controlado es de 0.408% de humedad. Este

error est influenciado por la variabilidad entre operadores y la variabilidad entre
equipos ( ), el error que ocurre en cada medicin ( ) y otras variaciones.
6. El lmite mximo de diferencia entre dos repeticiones de ensayo es de 0.07228% de
humedad, valor que se espera que sea menor o igual que la diferencia absoluta
entre dos resultados de ensayo obtenidos en condiciones de repetibilidad con una
confiabilidad probabilstica del 95%.
7. El lmite mximo de diferencia entre dos repeticiones de ensayo es de 1.143% de
humedad, valor que se espera que sea menor o igual que la diferencia absoluta entre
dos resultados de ensayo obtenidos en condiciones de reproducibilidad con una
confiabilidad probabilstica del 95%.
177
6. BIBLIOGRAFIA
1. PNTP 209.2261:2000, Alimentos precocidos instantneos. Inspeccin por muestreo.
2. NTP-ISO 5725-2: 1999, Exactitud de resultados y mtodos de medicin - Parte 4: Mtodo
basico para la determinacin de la repetibilidad y reproducibilidad de un mtodo de medicin normalizado.
3. NTP-ISO 5722-1: 1999, Exactitud de resultados y mtodos de medicin - Parte 1: Principios
generales y definiciones.
4. ISO 3535-2: 1993, Statistics - Vocabulary and simbols - Parte 2: Statistical quality control.
5. ISO 3535-2: 1985, Statistics - Vocabulary and simbols - Parte 3: Design of experiments.
178
CRIOPRESERVACION DE SEMEN DE GALLOS REPRODUCTORES DE CARNE

(CORNISH) Y CRIOLLOS UTILIZANDO BELSTVILLE POULTRY SEMEN
EXTENDER Y DIMETIL SULFOXIDO
Marcial Cumpa G.1 Julio Diaz Z. 2
RESUMEN
El presente trabajo de investigacin tiene como objetivo el estudio de la
criopreservacin de semen de gallos reproductores Cornish y Criollos utilizando el
crioprotector Dimetil sulfxido y el dilutor Belstville Poultry Semen Extender. Se trabaj
con 3 gallos por cada genotipo obtenindose semen de consistencia cremosa y de color
blanco perlado similar para todas las eyaculaciones. Los valores promedio del volumen
seminal entre Cornish y Criollo no difirieron estadsticamente, 0.190 0.05 y 0.194
0.03 ml. respectivamente. En cambio, las concentraciones seminales fueron
significativamente diferentes, 2.908 x 10 9 0.19 y 1.370 x 10 9 0.09 espermatozoides/
ml. respectivamente.
Con relacin a motilidad espermtica del semen fresco, los valores fueron de
73.00 2.23 y 74.7 1.89 % para Cornish y Criollos. En motilidad espermtica del
semen descongelado no se hallaron diferencias significativas entre los dos genotipos
evaluados: 22.70 3.80 y 25.00 5.20 % respectivamente.
La fertilidad promedio utilizando semen criopreservado fue 26.18%, con un
rango de 11.11 a 50.0 %, mientras que con semen fresco diluido fue 67.97% en un
rango de 46.15 a 84.62 %. El costo de produccin por pollo nacido fue
significativamente mayor utilizando semen criopreservado en comparacin con el
semen fresco diluido.
Profesor Principal del Departamento de Produccin Animal Facultad de Zootecnia UNALM
Ing. Zootecnista. Magister Scientiae en Produccin Animal UNALM
CRIOPRESERVACION DE SEMEN DE GALLOS REPRODUCTORES DE CARNE (CORNISH)

Y CRIOLLOS UTILIZANDO BELSTVILLE POULTRY SEMEN
179
SUMMARY
The objective of the present research was to evaluate cryopreservation of Cornish and
Creole rooster semen using cryoprotectant Dimethylsulfoxide and Belstville Poultry Semen
Extender dilutor. Three roosters were used to represent each genotype to obtain a white pearl
semen with cream consistency similar for all the eyaculations. The average values of the seminal
volumes were 0.190 0.05 and 0.194 0.03 ml without statistical differences. The seminal
concentrations were significantly different between these genotypes 2.908 x 10 9 0.19 and
1.370 x 10 9 0.09 spermatozoa / ml for both Cornish and Creole races respectively.
In relation to the spermatic motility of fresh semen, it was 73.00 2.23 and 74.70
1.89% for both Cornish and Creole respectively. In spermatic motility of thawned semen there
was no difference between Cornish and Creole, these values were 22.70 3.80 and 25.00
5.20 % respectively.
The fertility found by using cryopreservated semen was 26.18%, varying between
11.11 to 50 % while with the diluted fresh semen was 67.97%, varying from 46.15 to 84.62%.
Higher cost of production per baby chicken was found with cryopreservated than diluted
fresh semen.
INTRODUCCION
La criopreservacin del semen, mantenimiento de la viabilidad despus de la congelacin y descongelamiento y su potencial
almacenaje indefinido en nitrgeno lquido,
en aves ha sido estudiado en diversos pases
con resultados muy variables; sin embargo,
an no se han realizado trabajos para evaluar
su impacto en la industria avcola nacional.
Es importante que en nuestro pas se
realicen investigaciones encaminadas a mejorar la supervivencia de los esperma-tozoides
de las aves luego del proceso de congelacin
del semen, que permita utilizar machos de
alto valor gentico tanto en reproductores de
carne, usados en la industria avcola, como en
gallos criollos de gran aceptacin en las zonas rurales del pas. Asimismo, es necesario
conocer el potencial de algunas aves como
las criollas para soportar el proceso de la
criopreservacin y poder as, mantener un pool
de genomas, evitando su prdida, potencialmente importante.
La investigacin desarrollada tuvo como objetivos:

-
Determinar las caractersticas macroscpicas y microscpicas de gallos de razas Cornish y Criollos.
Evaluar las respuestas a la congelacin

del semen utilizando el dilutor Belstville
Poultry Semen Extender (BPSE) y el
crioprotector Dimetil sulfxido (DMSO ).
REVISION DE LITERATURA
El semen de buena calidad en gallos tiene un color blanquecino opaco y viscoso, mientras que las tonalidades grisceas
del eyaculado indican una escasa concentracin espermtica (12). El semen de gallos es de color blanco cremoso con volmenes que varan entre 0.2 - 0.5 ml por coleccin (4).
La concentracin y calidad del esperma de gallo vara con la edad, raza y entre
180
los animales (2, 11). En relacin a la concentracin espermtica en gallos, diversos autores han reportado valores entre 2 a 3.4 millones de espermatozoides por milmetro cbico (3, 9 y 15). La motilidad espermtica
hallada con semen diluido en solucin de cloruro de sodio al 1 % reporta valores entre 75
a 80% (4); mientras en semen diluido en solucin de citrato de sodio al 2.9 % se obtiene 76.5 % (3).
Con relacin a las condiciones ptimas para el almacenamiento de semen de
gallos a corto plazo; el dilutor debe tener un
pH de 6.8 a 7.1, una osmolaridad de 395 a
411 mOsm, a 5 C por 48 horas y con una
dosis de inseminacin artificial de 150 a 200
millones de espermatozoides. La inseminacin se realiza una vez por semana para
alcanzar un mnimo de 90 % de fertilidad (4).
El dilutor Beltsville Poultry Semen Extender
(BPSE) utilizado con semen fresco, dio una
fertilidad de 83.7%, mientras que con el dilutor
Lake, 88.7% (18).
La criopreservacin tiene por finalidad mantener la viabilidad espermtica durante un ciclo de congelamiento, descongela-miento y el almacenamiento potencial indefinido en nitrgeno lquido (8). Durante este
proceso las clulas sufren estrs (6) y en
muchos de los ciclos de la criopreservacin
una parte importante de las clulas son destruidas daadas.
La criopreservacin del semen de aves
domsticas resulta en un decremento en la
fertilidad cuando es comparado con el semen
fresco y con el semen refrigerado (1, 11).
La tasa de cambio de la temperatura
es crtica en todo el proceso para una ptima
supervivencia de las clulas espermticas y
requieren que la medida de congelamiento sea
pareja con una apropiada proporcin de
descongelamiento, esto es debido a que la
magnitud de cristales lquidos (hielo) formados disueltos, sealan los volmenes de

acumulacin de solutos (desbalance osmtico) que a su turno sealan las medidas de
encogimiento o hinchamiento, a menos que
un cambio ultrarpido de temperatura evite la
formacin de inestables cambios estructurales de cristales de agua. La temperatura a
los cuales los cristales de hielo son formados es dictado por la concentracin de solutos:
altas concentraciones de solutos permite
enfriamiento a bajas temperaturas antes de
la formacin de cristales. Por lo tanto, una
parte importante del procedimiento es el cambio de temperatura para controlar el tamao
y la localizacin de los cristales de hielo en
formacin. Pueden formarse grandes o pequeos cristales de hielo, que pueden causar
nuevamente dao a los organelos dentro del
espermatozoide. Si los cristales son formados fuera del espermatozoide, la concentracin de la solucin externa se incrementar
y el agua saldr fuera de ellos incrementando
la concentracin interna por lo tanto, la probabilidad de la formacin de cristales de hielo interno es de sta manera disminuida. As,
el xito en el ciclo de la crioproteccin y
descongelamiento dependen de la interaccin
de los cambios y concentracin del crio-protector; la tasa de enfriamiento para congelar
la suspensin espermtica y la proporcin de
calentamiento para retornar la suspensin
espermtica a su estado lquido (6).
Cualquier distribucin desbalanceada
de molculas del soluto, fuerzan a compensar
el flujo de solventes (agua) dentro o fuera para
eliminar las diferencias de concentracin de
soluto (5). Cuando hay un exceso de soluto
en el exterior del esperma, los solventes
intracelulares (agua) pueden rpidamente
moverse hacia la membrana plasmtica (20).
Los cambios en el volumen celular
por efecto de la temperatura del esperma de
toros ocurre de forma anloga con el semen

de gallos, durante el proceso de la

criopreservacin. Estos cambios se dan en
las siguientes fases:
a.
b.
c.
Fase de Dilucin y Enfriamiento: Adicin

del dilutor al semen y enfriamiento desde la temperatura corporal hasta el pun
to de congelacin del agua, el cual es
necesario para proveer una concentracin deseable en volmenes menores a
0.1 ml y para proporcionar nutrientes para
los espermatozoides, ningn efecto sobre la concentracin de los espermatozoides es notado en este punto debido a que
las propiedades del diluente es la de un balance osmtico en el interior de las clulas.
Fase de Adicin de glicerol y Empaquetamiento: Adicionando el crioprotector,
glicerol DMSO (de 1 a 2M 10 - 20 %
peso/vol) resulta en un transitorio desbalance osmtico por lo cual los espermatozoides se encogen (debido a que el
movimiento del agua hacia fuera no es
tan rpido como el glicerol se puede
mover hacia adentro) pero luego retorna
a su volumen original, cuando el glicerol
se ha introducido dentro del espermatozoide. La suspensin espermtica es en
tonces empaquetada para su procesamiento.
Fase de Congelamiento: El enfriamiento
hasta el punto de congelacin (ocurre entre 5 y 7 C, como respuesta a las propiedades ligantes de la mezcla completa de crioprotector: sales; agua), desencadenando la cristalizacin del agua del
solvente que se encuentra rodeando a
los espermatozoides. La cristalizacin
es una fase de separacin del solvente
puro de la solucin causando un incremento de 10 veces la concentracin de
cada soluto en la solucin remanente.
Esto lleva al esperma en suspensin dentro de un cctel de lquido salado ms el
181
crioprotector, bajo un severo desbalance

osmtico.
d.
Fase de Almacenamiento: Como resultado el volumen espermtico es reducido en 20 a 40 % de su estado osmtico

original y es en ese estado que el esperma permanece durante el congelamiento.
e.
Fase de Descongelamiento e Inseminacin: Durante el proceso de descongelamiento al derretirse el hielo por el calentamiento, retornando todo el agua a
su estado lquido, as como la concentracin de sales retornan a sus valores
osmticos. El agua entonces penetra al
espermatozoide para diluir los solutos
intracelulares hasta restaurar su volmen.
En este punto del ciclo de la criopreservacin el esperma tiene igual concen
tracin de sales (0.15M) y el crioprotector (1 2 M) dentro y fuera (8).
Utilizando Dimetil sulfoxido (DMSO) y glicerol en semen congelado de aves domsticas se obtuvieron fertilidades de 55 y 60%,
respectivamente (7).
En la criopreservacin de semen de
gallos utilizando un diluyente y un crioprotector como glicerol y DMSO se encontr que
la refrigeracin afecta la capacidad fertilizante del semen de aves cuando se almacena
por ms de 24 horas a 5 C (1).
En un estudio de criopreservacin de
esperma de gallos utilizando metil celulosa y
el Minessota Avian Extender como dilutor se
obtuv una fertilidad mayor a 75 % comparado con el semen cripreservado sin adicionar
la metil celulosa (12 60 % de fertilidad).
Concluyendo que la metil celulosa reduce el
efecto contraceptivo del glicerol cuando se
insemina con esperma fresco, pero no se
mantiene la capacidad fertilizante del esperma congelado cuando es utilizado en combinacin con 3 y 4 % de glicerol (13).
182
MATERIALES Y METODOS
El presente estudio se realiz en el
Laboratorio de Reproduccin Animal y en la
Unidad Experimental de Avicultura de la Facultad de Zootecnia de la Universidad Nacional Agraria La Molina.
Se emplearon 3 gallos reproductores
de carne (Cornish) y 3 gallos Criollos de ascendencia New Hampshire. Los machos esTabla 1.
tuvieron alojados en corrales individuales sobre piso de concreto con cama de viruta. Tambin se utilizaron 24 gallinas adultas de segunda campaa alojadas en jaulas.
Se utilizaron el dilutor Belstville
Poultry Semen Extender (BPSE) modificado,
pH 7.4 y Osmolalidad de 330 mOsm y el
crioprotector Dimetil Sulfxido (DMSO). La
composicin del BPSE se muestra en la siguiente tabla:
Dilutor Beltsville Poultry Semen Extender (BPSE) modificado
Ingredientes
Difosfato de potasio 3 H2 O
gramos por litro

12.70
Glutamato de Potasio
8.67
Fructosa (anhidra)
5.00
Acetato de sodio 3 H2 O
4.30
TES N-TRIS (Hidroximetil metil-2-Acido aminoetano sulfrico)
1.95
Citrato de potasio
0.64
Monofosfato de potasio o fosfato monopotsico
0.65
Cloruro de Potasio 6 H2 O
0.34
El protocolo de criopreservacin utilizado fue el siguiente:

a. Coleccin del semen en un tubo y mantenimiento a 25 C.
b. Dilucin del semen con BPSE, mantenido a 25 C, hasta que la concentracin final del
esperma iguale a 1 x 109 espermatozoides/ml.
c. Mezclado del semen removiendo lentamente con una pipeta de vidrio.
d. Almacenamiento del semen diluido a 5 C por 2 horas.
e. Despus de las 2 horas adicin del DMSO lentamente a una concentracin de 4 %
DMSO (vol / vol).
f. Mezclado del semen diluido con el DMSO lentamente con una pipeta.
g. Reposo del semen con DMSO para su estabilizacin y equilibrio por un perodo adicional
de 2 h a 5 C.
h. Transferido el semen a las pajillas plsticas (0.5 y 0.25 ml de capacidad) y sellado con
alcohol polivinilco.
i. Enfriamiento a un ritmo de 1 C/min. Hasta que la temperatura baje a 20 C.
j. Colocacin sobre vapor de nitrgeno lquido hasta que la temperatura del semen baje a
80 C.
k. Inmediatamente sumergido las canastillas con las pajuelas dentro del nitrgeno lquido y
almacenar a 196 C.

El semen diluido con el Belstville

Poultry Semen Extender (16) se mantuvo en
refrigeracin por 2 horas, luego se adicion
DMSO como crioprotector, dejado reposar en
refrigeracin a 5C por 2:15, el descenso
gradual de la temperatura fue realizado utilizando vapor de nitrgeno lquido emanado por
la vlvula de escape de la planta productora
de nitrgeno lquido Sulzer, hasta llegar a
196 C siguiendo el procedimiento efectuado
por Sexton (16). El descongelamiento de la
pajilla se realiz siguiendo la metodologa efectuada por Van Voorst y Leenstra (19).
En relacin a la metodologa de la
coleccin de los gallos, a partir de la quinta
semana a todos los machos que respondieron positivamente y presentaron caractersticas seminales ptimas, se le colect el semen 2 veces por semana para su evaluacin.
Para el adiestramiento de los gallos,
luego de cuatro das de acostumbramiento en
los corrales individuales, a partir del quinto da
se empez a dar ligeros masajes en la cabeza,
dorso y cloaca. A partir de la tercera semana y
en forma interdiaria se prosigui con los masajes hasta conseguir la eyaculacin y el semen
limpio.
183
La coleccin de semen se realiz

en las maanas, aplicando masajes dorsales
dirigidos desde la mitad posterior hacia la regin de la cola con la otra mano una presin
suave con movimientos similares desde la regin del hueso plvico hacia el rea de la cloaca. Una vez estimulado se aplic una ligera
presin sobre la regin de la cloaca con los
dedos ndice y pulgar de ambas manos, el
eyaculado fue colectado sobre una bolsa de
plstico con un cartn interior para darle rigidez colocado sobre la mesa teniendo cuidado
de cambiarlo cada vez que se ensuciaba con
heces y despus de cada coleccin.
Para la evaluacin seminal, se realizaron las evaluaciones macroscpicas:
volmen, color y viscosidad; as como las microscpicas: motilidad y concentracin
espermtica. El color se evalu sobre la superficie plstica de recepcin del semen, el
aspecto y viscosidad con ayuda de una pipeta
Pasteur, luego el semen fue absorbido con una
jeringa de tuberculina graduada para evaluar
su volmen. La motilidad se determin empleando un microscopio sobre un porta-objeto, colocndose 1 gota de agua destilada y
agregndose 1 gota de semen puro y asignndole un puntaje de 0 a 80 %.
Los datos porcentuales de motilidad fueron transformados a valores de arco seno.

Se utiliz el siguiente modelo Jerrquico para el anlisis de variancia de la concentracin
seminal, motilidad y volumen:
Yijk
= + E i + P (E)j(i) + e(P/E)k (ij)
Donde:
Yijk
= Valor correspondiente a la observacin microscpica ijk
= Media poblacional
Ei
= Efecto de la i-sima edad
P (E)j(i),
= Efecto del j-simo gallo dentro de la i-sima edad
e(P/E)k (ij)
= Error experimental.
Para el anlisis del efecto del semen fresco y el criopreservado sobre la fertilidad se utiliz la
prueba estadstica del Ji-Cuadrado.
X 2 = S (O i - ei )2 / ei
Para las comparaciones de promedios se realiz la prueba de la Menor diferencia significativa (DLS).
184
RESULTADOS Y DISCUSION
En el Cuadro 1 se muestran la consistencia, color y volumen del semen de
los gallos Cornish y Criollos, aprecindose una consistencia cremosa y un color
blanco perlado, los cuales fueron similares para todas las evaluaciones realizadas.
Debido a que los gallos fueron colectados
con frecuencias regulares (2 por semana),
se obtuvieron muestras limpias sin contaminantes, estando el color relacionado a
la concentracin esper-mtica lo cual coincide con lo reportado por Prez y Prez
(1985) y Hafez (1989), quienes indican que
el semen de gallos de buena calidad tienen un color blanco cremoso, mientras que
las tonalidades grisaceas del eyaculado
indican una escasa concentracin
espermtica.
De igual manera, los valores promedio del volumen seminal no muestran
diferencias estadsticas entre razas, pero
s existe una mayor diferencia entre los
gallos dentro de cada raza, sta diferencia se debe bsicamente al comportamiento individual de los gallos y su respuesta al masaje para coleccin. Por
tanto, los valores promedio de los volmenes variaron entre 0.105 a 0.340 ml.,
los cuales estn dentro de los rangos reportados por Hafez (1989); Hijar (1994) y
Cumpa (1995).
Los valores de la concentracin
seminal se encuentran en el Cuadro 1
habindose encontrado diferencias estadsticas significativas entre las razas, pudindose

deber a la diferencias de edad que se ha tenido en las dos razas estudiadas.
Asimismo, la diferencia observada en concentracin espermtica entre los
gallos de cada raza se debe principalmente al comportamiento individual, coincidente con lo expresado por Lake (1985) y
Bonnadona (1989), quienes sealan que la
concentracin espermtica vara con la
edad, raza y entre los animales.
Se ha encontrado una mayor concentracin seminal en los gallos
reproductores de carne que en los gallos criollos, con valores dentro de lo reportado por
Bonnadona (1989); Hijar (1994); Rezende et
al. (1989); Hafez (1989) y Cumpa (1995),
quienes hallaron valores entre 2 a 3.4 millones de espermatozoides / mm 3.
Los valores promedio de motilidad
espermtica del semen diluido con BPSE
(Belstville Poultry Semen Extender), se presenta en el Cuadro 2. Los valores promedio fluctan entre 68 y 77% de motilidad
considerado ptimo para su utilizacin
como semen fresco diluido ya que Perez y
Perez (1985), Hafez (1989) y Cumpa (1995)
reportan valores mayores al 60%.
Al anlisis de variancia no se observaron diferencias entre los grupos raciales, lo que nos indicara que la motilidad
no es un factor dependiente de la raza.

Cuadro 1.
185
Valores promedio de las caractersticas macroscpicas y concentracin del

semen de gallos
1
Valores promedios de 10 evaluaciones
a,b Promedios con letras diferentes dentro de columnas muestran diferencias estadsticamente
significativas
186
Cuadro 2. Valores promedio de la motilidad del semen fresco diluido

y descongelado de los gallos 1
1
a,b
Valores promedios de 10 evaluaciones

Promedios con letras diferentes dentro de columnas muestran diferencias
estadsticamente significativas.
Letras diferentes dentro de la fila muestran diferencias estadsticamente significativas

Analizados los valores promedio del porcentaje de motilidad del semen congelado, se
encontr que no hubieron diferencias estadsticas significativas en el grado de motlidad
espermtica en cuanto a la edad y raza. La
diferencia se observa en el grupo de los individuos dentro de cada raza, entonces el efecto
individual a la congelacin depende del comportamiento fisiolgico en el proceso de la produccin espermtica de espermatozoides de calidad capaces de soportar el estrs de la
criopreservacin.
Se observaron diferencias altamente
significativas entre la motilidad del semen
fresco diluido en comparacin con el semen descongelado, coincidente con los
reportes de Lake (1985) y Bellagamba et
al. (1993).
Los resultados de la incubacin, nmero de huevos incubados y el nmero de huevos frtiles, utilizando el semen fresco diluido como el criopreservado, se muestra en el
Cuadro 3.
A la prueba de Chi cuadrado, se observan diferencias en fertilidad entre el semen
diluido fresco y el congelado. El efecto puede
deberse a que los espermatozoides mantienen su condicin fecundante y que al someterlo a la criopreservacin se afecta esta capacidad y la motilidad.
La fertilidad obtenida con semen fresco
con BPSE es de 67.97%, siendo inferior a
187
lo reportado por Studen y Rajamahendran

(1995) que obtuvieron 83.7%, utilizando el
mismo diluyente. Este menor valor obtenido
pudo deberse a que en la presente investigacin se utilizaron gallinas de segunda
campaa de postura que tienen menor capacidad de almacenamiento de esperma ya
que no se aprecian huevos frtiles con ms
de 3 das post inseminacin y una baja calidad folicular, tal como lo indican Lake, 1975
y Pierson et al. (1988).
La fertilidad obtenida al utilizar el BPSE
como diluyente y el DMSO como crioprotector
fue de 26.18 % en promedio con un rango de
11.11 a 50 %. Estos resultados son inferiores
a lo obtenido por Sexton (1980a),
Hammerstedt y Graham (1992) y Van Voorst
y Leenstra (1995) que obtuvieron fertilidades
entre 47 a 69% utilizando el mismo dilutor y
crioprotector.
El resultado obtenido puede deberse
a que el dilutor (BPSE) utilizado fue modificado en un ingrediente, al ser reemplazado
el Citrato de Potasio por Citrato de Sodio y
tal como lo seala Sexton (1980b) la fertilidad disminuye cuando se omite una sal
neutra al incrementarse la citotoxicidad del
DMSO hacia los espermatozoides, habiendo sido reportado 42% de fertilidad ante
dicha omisin.
El costo de produccin por pollo nacido
fue seis veces mayor utilizando semen
criopreservado en comparacin con el diluido.
188
Cuadro 4. Costo de produccin de pollos BB utilizando semen

fresco diluido y semen criopreservado diluido.
Precio de nitrgeno lquido comercial S/. 10.03
CONCLUSIONES
1.
2.
El dilutor Beltsville Poultry Semen

Extender tuvo mejores resultados en inseminacin de gallinas con semen fresco en comparacin con el semen congelado.
La motilidad del semen descongelado fue significativamente menor (23.83
3.08%) en comparacin con el semen fresco (73.83 . 1.40%).
3.
Los mejores resultados de fertilidad

se obtuvieron con semen fresco diluido que con el semen criopreservado.
4.
La natalidad lograda con el uso de

semen fresco diluido fue de 62.97%,
mientras que utilizando semen
criopreservado slamente se logr
21.18%.

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191
ETIOLOGA DE LA RAIZ ROSADA DE LA CEBOLLA Y SU CONTROL QUMICO
Carlos Cadenas Giraldo (1)
Leonor Mattos Caldern (2)
RESUMEN
En el presente trabajo de investigacin se aisl el agente causal de la Raz Rosada

(RR) de la cebolla, identificndose como Phoma terrestris. Asimismo se evalu el efecto de
28 fungicidas comerciales sobre el crecimiento del micelio del hongo en estudio en una
prueba in vitro, considerndose productos de contacto, sistmicos y compuestos, de los
cuales, Antracol, Manzeb, Ridomil, Fusan, Patafol-plus, Fitoraz, Homai y Rhizolex-T inhibieron
en un 100 % el desarrollo del micelio. Estos fungicidas fueron seleccionados para evaluar su
efectividad como preventivos de la RR, utilizados como desinfestantes de semillas, se encontr que todos fueron eficientes excepto Folicur y Tilt los cuales inhibieron la germinacin
de semillas.
SUMMARY
The pathogen, which causes Onion Pink Root Disease (PR), was isolated and
identified as Phoma terrestris. Likewise, the effect of 280 fungicides against the fungus
micelial growing were evaluated in vitro Antracol, Manzeb, Ridomil, Fusan, Patafol-plus,
Fitoraz, Homai and Rhizolex-T showed 100 % of micelial inhibition. The fungicides were
selected to evaluate their effect to prevent PR used as seed disinfectants. It was found that
all of them showed a good effect to prevent PR, except Folicur and Tilt, which inhibited
seed germination.
(1) Docente Auxiliar del Departamento de Entomologa y Fitopatologa de la Universidad Nacional

Agraria La Molina.
(2) Docente Principal del Departamento de Entomologa y Fitopatologa de la Universidad Nacional
Agraria La Molina.
192
INTRODUCCION:
La cebolla (Allium cepa L.) es susceptible al ataque de varios patgenos de raz,
de bulbos y de hojas, y entre los que afectan
a nivel de races se encuentra Phoma
terrestris Hansen (=Pyrenochaeta terrestris
(Hansen) Gorenz, Walker and Larson). Este
hongo causa la enfermedad conocida como
Raz Rosada (RR), que ocasiona serios
daos en el sistema radicular, retarda considerablemente el crecimiento, pudiendo producir muerte de plntulas. La raz afectada
se vuelve flcida, necrtica y con una tpica
coloracin rosada.
La RR fue reportada por primera vez
en Texas en 1917 por Taubenhaus & Johnson
(11) y en el Per fue reportada por primera
vez por Valdivia (12) en el ao de 1974, en las
localidades de Tingo Chico y Sachaca en
Arequipa, y La Molina en Lima. Posteriormente, Higa (6) en 1975 lo reporta tambin en
Chincha (Ica).
Hansen (4) describi al agente causal como Phoma terrestris, hongo que presenta picnidias subglobosas, ostioladas y
papiladas, de color marrn oscuro a negro,
carbonosas, de 170 a 350 m de dimetro,
se presentan solitarias o agregadas. Las
conidias son abundantes, hialinas, ovoidesoblongas, bigutuladas, de 4.5 - 5.5 x 1.8 - 2.3
m, ssiles, salen a travs de rupturas de la
pared de la picnidia y raramente como cirrus
a travs del ostiolo.
Gorenz et al. (3) encontraron que la
picnidia presentaba setas, especialmente en
la zona del ostiolo, y renombraron al hongo
como Pyrenochaeta terrestris. Punithalingam
& Hollyday (9) describen a Pyrenochaeta
terrestris, como causante de la RR de la cebolla, caracterizndolo por presentar picnidias
generalmente solitarias en las races,
inmersas al inicio y despus errumpentes, de
forma globosa, ms de 400 de largo. La

pared de la picnidia est formada por muchas
clulas, siendo muy densas y pigmentadas
en la parte externa, y ms ralas en la pared
interna. La pared de la cavidad picnidial est
revestida de clulas pseudoparnquimticas.
Las clulas conidiognicas son enteroblsticas, fialdicas, hialinas, simples y obpiriformes,
La conidias son fialosporas, unicelulares, ovoides a alantoides, extremos redondeados,
bigutuladas, de 4 - 7 x 1.5 - 2 .
Sutton (10) considera que el gnero
Pyrenochaeta se diferencia de Phoma en que
el primero presenta las clulas conidiognicas
en conidioforos largos, septados y ramificados, mientras que, en el segundo las clulas conidiognicas son simples y globosas a
piriformes. Las caractersticas de los conodioforos que describen tanto Hansen (4) como
Punithalingam & Hollyday (13), coinciden con
lo descrito para el gnero Phoma.
Se han realizado estudios de control
de la RR de la cebolla mediante el proceso
de solarizacin. Katan et al. (7) sometieron a
solarizacin suelos infestados con P. terrestris en dos regiones de Israel, una calurosa y
otra fra, mediante el uso de una cubierta de
polietileno transparente y sometindola al proceso durante 60 das. En ambos experimentos, se redujo en un 73 a 100 % la incidencia
y la severidad de l RR durante los siete primeros meses de crecimiento vegetativo. Estos mismos investigadores utilizaron el
fungicida Pentacloronitrobenceno, aplicndolo
por rociamiento al suelo a un promedio de 3
Kg/ha, el cual no control la enfermedad.
Hartz et al. (5) compararon los
efectos de la solarizacin y del fumigante
metam-sodio sobre la incidencia de la RR en
el cultivar Granex 429 de cebolla. Cubrieron
el suelo hmedo con polietileno transparente
de 40 m y lo expusieron al sol por un periodo
de 62 das. A otras parcelas, usando la
tcnica del rociado, aplicaron metam-sodio a

razn de 356 Kg de i.a./ha y fueron cubiertas
con plstico negro de polietileno por unos 30
das. En ambos casos, antes del transplante,
obtuvieron una considerable disminucin de
la RR.
La RR causa graves prdidas, especialmente en la etapa de almacigado, motivo
por el cual se plante la realizacin del presente trabajo de investigacin con lo siguientes objetivos: Estudiar las caractersticas
morfolgicas del agente causal de la RR y
determinar el efecto de diversos fungicidas
para el control del hongo en mencin.
MATERIALES Y METODOS:
El presente trabajo de investigacin
se llev cabo en el Laboratorio e Invernadero
del Departamento de Fitopatologa de la
UNALM.
1. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DEL
PATOGENO:
El aislamiento se realiz de cebollas del
cultivar Red Star, procedentes de campos comerciales de Arequipa, las cuales
mostraban sintomatologa de RR.
Las races de lavaron en agua corriente,
se sumergieron en una solucin de
hipoclorito de sodio al 0.1 % durante 5
minutos, se enjuagaron con agua destilada estril y se dejaron secar en la cmara de siembra. Luego se cortaron las
races afectadas en pequeas porciones
las cuales se sembraron en placas petri
conteniendo medio nutritivo Papa-Dextrosa-Agar (PDA) y Corn Meal Agar (CMA).
Las placas sembradas se incubaron a 25
C por siete das, y luego de obtenido el
cultivo puro se procedi a la identifica-
193
cin en base a las claves de Barnett &

Hunter (1) y la de Sutton (10); y la descripcin de Punithalingam & Hollyday (9),
considerando las caractersticas culturales de la colonia y las caractersticas
microscpicas.
2. PRUEBA DE PATOGENICIDAD:
La prueba de patogenicidad se realiz
sobre el cultivar Red Star, considerado
de baja resistencia por Higa (6) y cultivar
a partir del cual se aisl el hongo.
El hongo se cultivo en placas petri conteniendo PDA y luego se inocularon en
suelo previamente esterilizado con
bromuro de metilo a razn de una placa
petri por cada cuatro kilogramos de suelo. El suelo inoculado se dej incubar por
quince das, luego se distribuyeron en
macetas de un kilogramo cada una donde se sembr a razn de treinta semillas
por maceta. Se efectuaron riegos
interdiarios.
A los treinta das de la siembra se extrajeron las plntulas y se observ si presentaban sntomas de RR, y de las races afectadas se procedi a reaislar el
hongo tal como se indic en el aislamiento.
3. PRUEBAS DE FUNGICIDAS in vitro:

Se evaluaron diversos fungicidas disponibles y de diversas formulaciones, considerndose productos de contacto,
sistmicos y compuestos.
Se utiliz la metodologa del alimento
envenenado, esto es, al PDA licuado se
aadi cada fungicida, por separado, a la
dosis comercial recomendada, se
homogeniz la mezcla y se plaque. Una
194
vez solidificado el medio se sembr una

rodaja de 0.8 cm del hongo crecido en
PDA al centro de cada placa petri. Las
Placas sembradas se incubaron a 25
C por durante siete das y diariamente
se midi el dimetro de crecimiento.
Los fungicidas utilizados figuran en el
cuadro 1, los cuales se evaluaron con el
Diseo Completo al Azar (DCA), con 31
tratamientos y con cuatro repeticiones por
tratamiento.
c. Preparacin de las semillas:

Las semillas de cebolla de la variedad
Americana 1 se desinfestaron con los
fungicidas seleccionados en la prueba
in vitro a la dosis comercial recomendada. Las semillas del testigo no fueron tratadas con fungicida alguno.
d. Inoculacin:
La inoculacin del sustrato se realiz
agregando 10 cc. de licuado por cada
kilogramo de suelo estril, el cual se
distribuy en bolsas plsticas transparentes de 50 x70 cm y se dejaron
incubar a la sombra por un periodo de
30 das con la finalidad de que el hongo se establezca en el sustrato.
4. PRUEBA DE FUNGICIDAS EN INVERNADERO:

Se realiz despus de seleccionar los
fungicidas en la prueba in vitro. Para esto
se procedi dela siguiente manera:
e. Siembra:
a. Preparacin del sustrato:
El suelo inoculado e incubado se distribuy en macetas de un kilogramo
y se sembraron las semillas
desinfestadas. Se emple el Diseo
Completo al Azar con quince tratamientos (semillas desinfectadas) y
un testigo (semillas sin desinfectar),
con cuatro repeticiones cada uno. En
cada repeticin se sembraron aproximadamente 50 semillas.
El sustrato, suelo arena (1:1), fue

esterilizado con bromuro de metilo.
Luego de quince das de ventilado se
humedeci a capacidad de campo
para la inoculacin.
b. Preparacin del inculo:
El hongo, P. terrestris, se sembr en
placas petri con PDA y de all se
sembr en medio lquido Caldo de
Papa-Dextrosa-Oxitetraciclina
(PDO) previamente esterilizado.
Despus de 30 das de incubacin
a 25 C, se licu a baja velocidad
para fragmentar el micelio y homogenizar la mezcla.
f.
Evaluaciones:
Las evaluaciones de realizaron a los
treinta das, midindose los siguientes parmetros: altura de plantas,
longitud de races, porcentaje de RR
y peso de races.
195
CUADRO 1: FUNGICIDAS UTILIZADOS EN LA PRUEBA IN VITRO

PARA EL CONTROL DE P. terrestris
TRATAMIE
NOMBRE C OMERC IAL
NOMBRE TC NIC O
C ONC . EMPLEAD A
p.p.m.
TIPO
(1)
T1
ANTRAC OL PM 70
Propi leno bi sdi ti ocarbamato de zi nc
2500
T1
MANZEB PM
Maneb + i n zi nc (Mancozeb)
2000
T3
C UPRAVIT OB21 PM85
Oxi cloruro de cobre
2000
T4
C APTAN PM 80
Phtali mi das (C aptan)
2000
T5
RONILAN PM 50
Vi nclozoli n
2000
T6
ROVRAL PM 50
Iprodi ona
2000
T7
SUMISC LEX PM 52
Proci mi doma
2000
T8
TERRAC LOR PM 75
Pentacloroni trobenceno
6000
T9
BRAVO L 500
C lorotaloni l
2000
T10
RHIZOLEX PM 50
Tolclofos
6000
T11
ALIETTE PM
Foseti l alumi ni o
1000
T12
BLAS-S C E 20
Blasti ci cli na
1000
T13
KASUMIN LS 20
Kasugami ci na
1000
T14
RID OMIL PM
Metalaxi l
5000
T15
BENLATE PM 50
Benomyl
1000
T16
TEC TO PM 60
Thi abendazol
1000
T17
AC ROBAT PM
D i methomorph
2000
T18
BAYLETON PM 25
Tri ami defon
1000
T19
FOLIC UR EW 250
Tebuconazol
1000
T20
TILT C E 250
Propi conazol
1000
T21
FUJI-ONE C E 40
Isoproti olan
1000
T22
MONC UT PM
Flutolani l
1000
T23
FUSAN
Imazali l
1000
T24
PATAFOL-PLUS
Ofurace 6 % + Mancozeb 64 %
2000
CO
T25
FITORAZ
C i moxani l 6 % + Propi neb 70 %
2000
CO
T26
HOMAI WP
Meti l ti ofanato 50 % + Thi ram 30 %
1000
CO
T27
RHIZOLEX-T
Tolclofos 30 % + Thi ram 30 %
6000
CO
T28
TRIMILTOX-FORTE
Mancozeb 20 % + C arbonato,
Oxi cloruro o Sulfato de cobre 21 %
2000
CO
Te
(*)
TESTIGO
C : Fungicida de contacto
S : Fungicida sistmico
CO: Fungicida compuesto
196
RESULTADOS:
1. AISLAMIENTO E IDENTIFICACION
DEL PATOGENO:
El hongo aislado en PDA present
abundante micelio, algo compacto, de
color blanco-rosado a fucsia, con zonas
negruzcas. El fondo de placa fue de color negro rodeado de tonalidades fucsias.
El hongo creci sobre toda la superficie
de la placa petri en 25 das, y a partir de
los 30 das se observ, especialmente en
las zonas ms viejas, la aparicin de pequeas masas estromticas conteniendo picnidias. La formacin de picnidias
fue escasa.
Al microscopio se observ hifas
septadas, ms o menos delgadas, de
color amarillento a marrn claro;
picnidias globosas, de 220 a 300 m
de dimetro, con ostiolo pequeo rodeado, algunas veces, con setas, paredes de color marrn oscuro a
negruzcas; abundantes conidias
unicelulares hialinas, ovaladas a elpticas, de 5.3 x 1.95 m embebidas en
muclago, saliendo a travs de las rupturas de las paredes de las picnidias.
Las picnidias interiormente presenta
paredes claras y clulas conidiognicas

insconspicuas.
2. PRUEBA DE PATOGENICIDAD:
Las plantas de cebolla despus de
treinta das de sembradas en el suelo
inoculado, mostraron las races con la
tpica coloracin rosada y distorsin en
el crecimiento, especialmente en la zona
cercana al cuello de planta. Al efectuar
el reaislamiento en PDA desarroll el
hongo inoculado, P. terrestris.
3. PRUEBAS DE FUNGICIDAS in vitro:

En el cuadro 2 se observan los valores del crecimiento final de las colonias en los diferentes tratamientos a
los siete das de la siembra. El respectivo anlisis de variancia indica que
no existen diferencias significativas
entre las repeticiones dentro de cada
tratamiento.
De acuerdo a esto, se seleccionaron
los siguientes fungicidas: Antracol,
Manzeb, Ridomil, Benlate, Tecto, Acrobat,
Folicur, Tilt, Fusan, Patafol-Plus, Fitoraz,
Homai, Rhizolex-T.
CUADRO 2:
CRECIMIENTO MICELIAL DE P. terrestris EN LA PRUEBA

DEL ALIMENTO ENVENENADO IN VITRO.
N U MER O
TR ATAMIEN TO
D IAMETR O
(C M.)
Te
TESTIGO
4.11
T1
ANTRAC OL
0.00
T2
MANZEB
0.00
T3
C UPRAVIT
1.70
T5
RONILAN
1.75
T6
ROVRAL
2.21
T7
SUMISC LEX
1.46
T8
TERRAC LOR
2.33
T9
BRAVO
1.55
T10
RHIZOLEX
2.58
T11
ALIETTE
3.88
T12
BLAS-S
1.53
T13
KASUMIN
3.08
T14
RID OMIL
0.00
T15
BENLATE
0.00
T16
TEC TO
0.00
T17
AC ROBAT
0.00
T18
BAYLETON
1.75
T19
FOLIC UR
0.00
T20
TILT
0.00
T21
FUJI-ONE
2.17
T22
MONC UT
3.60
T23
FUSAN
100
T24
PATAFOL-PLUS
0.00
T25
FITORAZ
0.00
T26
HOMAI
0.00
T27
RHIZOLEX-T
0.00
T28
TRIMILTOX-F
1.16
197
198
1.
PRUEBA DE FUNGICIDAS
EN INVERNADERO:
se presentan los valores de cada uno de los

parmetros evaluados en la prueba in vivo de
fungicidas. El Anlisis de Variancia de cada
uno de los parmetros nos indican que existen diferencias significativas entre los tratamientos, mas no dentro de cada tratamiento.
Durante esta prueba se descart

Folicur y Tilt por inhibir completamente la
germinacin de las semillas. En el cuadro 3
CUADRO 3: VALORES DE ALTURA DE PLANTA (cm), LONGITUD DE RACES

(cm), PORCENTAJE DE RAZ ROSADA Y PESO DE 10 RACES (Kg.)
DE CEBOLLA EN LA PRUEBA DE FUNGICIDAS EN INVERNADERO.
N
TRATAMIENTO
ALTURA
(cm)
LONG. RAIZ
(cm)
RAIZ ROSADA
(%)
PESO RAIZ
(g)
Te
TESTIGO
17.65
24.06
21.00
0.20
T1
ANTRACOL
21.10
35.14
0.00
0.60
T2
MANZEB
19.30
33.74
0.00
0.65
T3
ACROBAT
14.80
20.37
0.00
0.35
T4
RIDOMIL
0.50
27.50
0.00
0.45
T5
BENLATE
16.05
24.45
0.00
0.50
T6
TECTO
9.70
10.57
1.50
0.90
T7
FUSAN
6.90
11.33
0.00
0.20
T8
PATAFOL-PLUS
19.95
0.35
0.00
0.30
T9
FITORAZ
16.50
21.77
0.00
0.35
T10
HOMAI
18.90
32.85
0.30
0.90
T11
RHIZOLEX-T
20.50
38.45
0.00
0.70
DISCUSIONES:
Las caractersticas culturales y microscpicas del hongo aislado coinciden con
lo reportado por algunos autores como
Barnett &Hunter (1) y Sutton (10) para el gnero Phoma; y con lo reportado por
Punithalingam & Hollyday (9) para
Pyrenochaeta terrestris. Cuando Hansen describi al agente causal de la RR lo denomin
Phoma terrestris; ms adelante Gorenz et al.
(3) volvieron a describirlo y lo denominaron
Pyrenochaeta terrestris, debido a la presencia de setas alrededor del ostiolo de la
picnidia. Sin embargo Sutton (10) deferencia

a los gneros Phoma y Pyrenochaeta, en base
a las caractersticas de las clulas
conidiognicas; el primero las presenta muy
pequeas e insconspicuas, mientras que en
Pyrenochaeta las clulas conidiognicas son
septadas, ramificadas y alargadas. La presencia de setas alrededor del ostiolo es una
caracterstica secundaria. El hongo aislado
en la presente investigacin presento clulas conidiognicas simples, insconspicuas,
por tal motivo, el agente causal de la RR de
la cebolla en el Per pertenece al gnero
Phoma.
La prueba de patogenicidad permiti

confirmar que el causante de la RR de la cebolla es Phoma terrestris, que al ser inoculado reprodujo los sntomas observados inicialmente; y las caractersticas culturales y microscpicas del hongo en estudio coincidieron con las reportadas para P. terrestris.
Los fungicidas de contacto que
inhibieron completamente el desarrollo de P.
terrestris en la prueba in vitro fueron los
ditiocarbamatos: Manzeb y Antracol; los cuales actuaron bsicamente inactivando el proceso de respiracin tanto en la fase de la
gliclisis, as como, en el ciclo de Krebs
(Cremlyn, (2); Mont, (8)). Debido al modo de
accin, los fungicidas de este grupo son frecuentemente recomendados para prevenir la
infeccin de varias especies de hongos pertenecientes las clases Oomycetos,
Ascomycetos,
Basidiomycetos
y
Deuteromycetos. P. terretris pertenece a la
Clase Deuteromycetes, por lo tanto, era de
esperarse que presente sensibilidad a este
grupo de fungicidas.
Los fungicidas sistmicos que inhibieron completamente el desarrollo del hongo en la prueba in vitro fueron Ridomil
(metalaxil), que acta interfiriendo la sntesis
del ARN ribosomal; Benlate (benomil) y Tecto
(thiabendazol), que interfieren en el proceso
de la divisin celular en la etapa de profase;
tambin inhibe el proceso de oxidacin de la
glucosa y el acetato; Folicur (tebuconazol),
Tilt (propiconazol) y Fusan (imazalil), que
actan inhibiendo la sntesis del ergosterol,
sustancia que est presente en las paredes
celulares de muchos grupos de hongos y en
algunas algas, pero no se encuentra en las
plantas (2,8).
Ridomil es un fungicida sistmico que
normalmente est recomendado slo para prevenir y curar infecciones causadas por hongos de la clase Oomycetes, considerndose
199
que no tiene ningn efecto sobre Ascomycetos, Basidiomycetos y Deuteromycetos.

Sin embargo, en la presente investigacin
observamos que s fue txico al Deuteromyceto P. terrestris, esto se podra explicar en
base al lugar de accin del producto, que es
el de inhibir el acido ribonucleico ribosomal.
El resultado obtenido indica que an falta investigar ms acerca del efecto del Ridomil
sobre muchas especies de hongos fitopatgenos diferentes de la clase Oomycetes.
Los fungicidas Benlate y Tecto, perteneciente al grupo de los Benzimidazoles; y
Folicur, Tilt y Fusan, perteneciente a los
Triazoles; son considerados de amplio espectro sobre varias especies de hongos de las
clases Ascomycetos y Deuteromycetos, por
lo tanto se esperaba que inhibieran completamente el desarrollo del micelio de P. terretris.
Los fungicidas, de contacto y/o sistmicos. actan afectando diversos procesos
metablicos, como es la sntesis de protenas, la respiracin celular y la sntesis del
ergosterol. Desde que los fungicidas compuestos estn conformados por la mezcla de
uno de contacto con uno sistmico, entonces se puede explicar el modo de accin de
este grupo de productos que inhibieron completamente el desarrollo de P. terrestris.
La Prueba de Significacin de Duncan
nos indica que de todos los fungicidas evaluados en la prueba in vitro, el Aliette (fosetil
aluminio) tuvo un comportamiento similar al
testigo, seguido por el Moncut (flutalonil) y
Kasumin (kasugamicina). Los dems
fungicidas tampoco lograron inhibir completamente el crecimiento del hongo, lo cual nos
indica que no seran muy efectivos en un programa de manejo de la enfermedad, porque
una vez que pase el periodo de carencia, el
hongo podra desarrollar rpidamente y causar graves daos. Por este motivo los
fungicidas aliette, moncut, kasumin, rhizloex,
200
rovral, terraclor, fuji-one, cupravit, ronilan,

bayleton, captan, bravo, blas-s, sumisclex y
trimiltox-forte no fueron seleccionados para la
prueba de fungicidas en invernadero. Solamente
se seleccionaron todos aquellos fungicidas
que inhibieron completamente el crecimiento
del hongo.
Los fungicidas Folicur y Tilt tuvieron un
efecto inhibitorio en la germinacin de semilla de cebolla, sto puede deberse a que al
ser ambos sistmicos de formulacin lquida
tienen un alto poder de penetracin, embebiendo las semillas y translocndose hasta el
embrin, all posiblemente causaron quemaduras. Muchos pesticidas, entre ellos algunos
fungicidas, tienen la propiedad de quemar el
tejido tierno, especialmente si se aplica a una
dosis ms alta de la recomendada. En este
caso, el embrin es un tejido bastante tierno,
y los dos fungicidas mencionados son utilizados siempre en muy bajas dosis (0.5 - 0.75
por mil) y nunca se han recomendado en la
desinfeccin ni desinfestacin de semillas.
El resto de fungicidas actuaron adecuadamente, pues previnieron la RR en las
plntulas de cebolla. Todos estos fungicidas
son del tipo polvo mojable, los cuales al
diluirse con la humedad del suelo formaron
una cubierta protectora alrededor de las semillas y las plntulas en germinacin.
Las pruebas de Significacin Duncan
para los parmetros altura de plantas y longitud de races nos indican que los fungicidas
Antracol, Rhizolex-T, Pomarsol, Manzeb,
Homai y Patafol-plus, son los que permitieron un mayor desarrollo de hojas y races.
Acrobat, Lonacol, Tecto y Fusan, inhibieron
el crecimiento del follaje y races, ya que los
resultados son estadsticamente menores que
en el testigo. En el caso de Ridomil y Benlate,
el cremiento de follaje y races es
estadsticamente similar al testigo sin aplicacin.
En lo referente a la proteccin que ejercieron en prevenir la RR, la Prueba de Significacin de Duncan indica que todos los
fungicidas empleados son estadsticamente
efectivos en la prevencin de esta enfermedad, aunque segn los promedios, en el caso
de Tecto y Lonacol se apreci un pequeo
porcentaje de RR.
CONCLUSIONES:
Las conclusiones segn los resultado
obtenidos en la presente investigacin son:
1.- El hongo aislado de races de cebolla cultivar Red Star con RR fue
Phoma terrestris Hansen.
2.- Los fungicidas que inhibieron completamente el desarrollo de P.
terrestris y redujeron considerable
mente la incidencia de la RR fue
ron: Antracol, Acrobat, Ridomil,
Benlate, Tecto, Fusan, Patafol-plus,
Fitoraz, Homai y Rhizolex-T, a la
dosis comerciales recomendadas.
LITERATURA CITADA:
1. BARNETT,
H.L.
AND
B.B.
HUNTER.1986. Illustrated genera of
imperfecti fungi. Third edition. Burgess
Publishing Company. pp 166, 167.
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Limusa. Mexico. D.F. Mexico. 356 pp.
3. GORENZ, A.M., J.C. WALKER AND R.H.
LARSON. 1948. Morphology and taxonomy of the onion pink root fungus. Phytopathology 38:831-840.
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Pink-Root disease of onions. Phytopathology 19:691-704.
Universitario de la Universidad Nacional

Agraria LA Molina. Lima. Per. 287 pp.
5. HARTZ, T.K., C.R. BOGLE, D.A.

BENDER AND F.A. AVILA. 1989. Control of pink root disease in onion using
soalrization and fumigation. J. Amer. Soc.
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9. PUNITHALINGAM, E. AND P.
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6. HIGA, C. 1975. Etiologa de la raz rosada

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JC., Walker & Larson) y comportamiento
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UNALM. Lima. Per. 54 pp.
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Commonwealth Mycological Institute.
Kew, Surrey. England. 696 pp.
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Investigacin Agropecuaria. Arequipa.
16 pp.
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de enfermedades de plantas. Centro Pre-
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12. VALDIVIA, G. 1974. Podredumbre rosada (Pyrenochaeta terrestris) de la cebolla en el Per. Fitopatologa 9: 78.
13. WLAKER, J.C. AND R.H. LARSON.
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control. Agricultural Handbook N 208.
U.S. Dept. of Agricultural. Wisconsin. pp
12, 13.
202
ESTUDIO COMPARATIVO DEL SALADO EN PILA SECA, HMEDA Y POR DESHIDRATACIN

OSMTICA A VACO DE MERLUZA (Merluccius gayi peruanus)
Luz Eufemia Lpez Rez1 Alberto Torres Flores 2
RESUMEN
Se estudiaron comparativamente tres procedimientos de salado de merluza (Merluccius
gayi peruanus) en pila seca (PS), pila hmeda (PH) y deshidratacin osmtica a vaco
(DOV). En las muestras saladas se determin la evolucin de las siguientes variables: contenido de sal, contenido de agua, recuento de microorganismos aerobios viables, estafilococos,
mohos y actividad de agua (aw). Las pruebas del estudio cintico se realizaron a nivel laboratorio, usando solucin saturada de cloruro de sodio como agente osmtico en la DOV y sal
en contacto con la merluza en los tratamientos de PS y PH. Se hall a las 2 h de tratamiento
que la velocidad de impregnacin de slidos por el tejido es mejor cuando se aplic DOV
comparada con los procedimientos tradicionales de salado en PS y PH que presentan valores muy cercanos, determinndose que los valores de aw dedescienden proporcionalmente
a los de impregnacin desde 0,99 en muestra fresca a 0,835 en el salado por DOV, a 0,925
en PS y 0,928 en PH. Se encontr que la poblacin de microorganismos decae rpidamente en
las muestras tratadas con DOV, al hallarse una poblacin inicial de 6,8x107 ufc/g de muestras de
filetes hasta un recuento total de 1,9x105 ufc en filetes salados con DOV durante 4 h; obtenindose
una poblacin de 2,8x105 en PS y de 2,5x105 ufc/g al cabo de las 31 h en PH. En lo referente a
las condiciones de laboratorio evaluadas se determin que no existe diferencia significativa de
peso, aw y poblacin de microorganismos entre los tratamientos de PS y PH; sin embargo si
hay diferencia de los tratamientos de salado tradicionales al compararlos con el DOV. Las muestras tratadas con DOV presentan un olor sui generis, color blanquecino uniforme, apariencia
buena, textura firme y mejor aceptabilidad que la correspondiente a PS y PH, por lo que se
considera que la DOV presenta ventajas comparada con el salado en PS o en PH.
ABSTRACT
Three salted procedures were studied comparatively of hake fillets (Merluccius gayi
peruanus): in Dry pile (PS), Humid pile (PH) and Vacuum Osmotic Dehydration (DOV). In the
1
2
Alumna de Post Grado dela especialidad de Tecnologa de Alimentos

Magister de la Facultad de Industrias Alimentarias - Patrocinador de Tesis
ESTUDIOCOMPARATIVODELSALADOENPILASECA, HMEDAYPOR DESHIDRATACIN

203
salted samples the evolution of the following variable were determined: salt and water content,
recount of viable aerobic microorganisms, estafilococcus, molds and water activity (aw). Tests
of the kinetic study were carried out at laboratory level, using saturated sodium chloride solution
as osmotic agent for the DOV and salt in contact with the hake in the PS and PH treatments.
After two hours of treatment, the speed of solids impregnation was better in the DOV treatment
(0,087) compared with the traditional procedures of having salted in PS (0,070) and PH (0,071)
which have similar values. Therefore it was determined that the aw decrese proportionally to
those of impregnation from 0,99 in fresh sample, at 0,835 in the salted one for DOV, at 0,925
in Dry Pile and 0,928 in Humid Pile. In fact, it was found that the population of microorganisms
decrese quickly in the samples tried with DOV, being initially a population of 6,8x107 ufc/g of
samples of fillets until to total recount of 1,9x105 ufc in salted fillets with DOV during 4 hours;
while a population of 2,8x105 was obtained in PS and 2,5x105 ufc/g after 31 hours in PH.
Regarding the laboratory conditions it was determined that it doesnt exist significant difference
of gain or lost, aw and population of microorganisms between the treatments of PS and PH;
however there is significative difference from the traditional salted treatments when compared
with the DOV. The samples tried with DOV showed a sui generis scent, whitish uniform color,
good appearance, firm texture and better acceptability that the corresponding to PS and PH.
Therefore the DOV treatment presents more advantages when compared with the common
salted procedures in PS and in PH.
I.
INTRODUCCIN
El Colegio de Ingenieros del Per en

1995 considerando la informacin de la Sociedad Nacional de Pesquera report que
la captura de recursos demersales por la
flota arrastrera industrial costera y de altura tena un potencial estimado anual de
100 a 180 mil toneladas mtricas, incidiendo en que los altos volmenes de captura
podran reducir los elevados ndices de desnutricin de la poblacin y se deba favorecer, el diseo de productos utilizando
materias primas no tradicionales como la
merluza (Merluccius gayi peruanus) , caracterizada por ser una especie magra de
pulpa blanca.
Se propone la aplicacin del salado
como un proceso de conservacin que prolongue el perodo de comercializacin a condiciones de almacenamiento de menor costo
que los mtodos de refrigeracin o congelacin, explicados por el ITP (1998), el cual reporta que los productos salados son los ms
difundidos internacionalmente, por la tendencia a promover la inversin en productos destinados para consumo humano directo, considerando como desventajas en su elaboracin el tiempo prolongado de impregnacin
de slidos en el tejido, la manipulacin y
conservacin inapropiadas de la materia prima y la aplicacin de tcnicas tradicionales
no mejoradas ni optimizadas, por considerarlas sencillas.
La importancia de este estudio se
resume en el menor tiempo de exposicin de la materia prima al agente
oxidante por la aplicacin de la deshidratacin osmtica a vaco (DOV), la obtencin de un producto de consumo humano
directo de mejor calidad sensorial con
mayor impregnacin de slidos, la aplicacin de una alternativa tecnolgica de
salado con la consiguiente elaboracin de
productos similares a los tradicionales,
pero sin los inconvenientes sanitarios que
provocan la desconfianza del consumidor
(Guarda, 1989).
204
Hartal (1967) estudi la deshidratacin osmtica utilizando el cloruro de sodio, Karel

(1973) report trabajos realizados en alimentos
de baja humedad y humedad intermedia; Mc
Keon(1986)yPavasovicetal.(1986)dieronorientaciones sobre productos deshidratados
osmticamente, Le Maguer y Biswal (1988) analizaron la transferencia de masa en procesos
osmticos al igual que Marcotte (1988), Le
Maguer (1988) seal algunas tendencias en el
desarrollo de estos tratamientos. Sin embargo
es muy poco lo estudiado sobre productos
hidrobiolgicos, en los que se incluye las investigaciones de Guarda (1989) en Espaa que trabaj con trucha. No se ha encontrado en la literatura especializada peruana trabajos de
investigacin referidos al salado de merluza aplicando condiciones de vaco.
Los objetivos del trabajo fueron determinar en los tres tipos de salado: la evolucin
del contenido de slidos, el contenido de agua,
la actividad de agua, variaciones de la carga
microbiana y la aceptabilidad de los productos.
II.
MATERIALES Y MTODOS
Las pruebas se realizaron en los laboratorios de la Facultad de Oceanografa, Pesquera y Ciencias Alimentarias de la Universidad Nacional Federico Villarreal.
2.1. Materiales
La materia prima fue merluza adquirida en el terminal pesquero de Villa Mara del
Triunfo y la sal fue de Qumica del Pacfico.
2.2. Anlisis
Para la composicin proximal se determinaron: Protena (mtodo AOAC de la
10 edicin (1965) citado por Hart y Fisher
(1984)), humedad (mtodo 18.006 del AOAC
citado por Hart y Fisher, 1984), grasa (Hart y
Fisher, 1984; Kirk et al., 1996), cenizas (Hart
y Fisher, 1984), cloruros (Kirk et al., 1996),

actividad de agua (Hart y Fisher,1984).
Para la determinacin de microorganismos aerobios viables, estafilococos y hongos se tomaron como referencia los mtodos
de la ICMSF (1993).
En la seleccin de la materia prima
se aplic la escala de valoracin por puntos
de H. Wittfogel modificada y adaptada para
la merluza (Jimnez et al., 1978).
En la evaluacin sensorial se emplearon pruebas afectivas para mejorar los
productos (IFT, 1981). Se utiliz una escala
hednica verbal de cinco puntos para determinar la intensidad de agrado de las muestras tratadas en PS, PH y DOV (Anzalda,
1994). Participaron como jueces estudiantes
universitarios, conocedores de las caractersticas de los productos salados y a las muestras se les asign aleatoriamente un cdigo
para evitar algn efecto sobre los jueces.
2.3. Diseo experimental
Para comparar el efecto de los tratamientos de salado se aplic un diseo de bloque completo al azar (DBCA) en el tiempo transcurrido. Las corridas se realizaron por triplicado
por cada tipo de salado. Se evaluaron el contenido de slidos, humedad, actividad de agua y
poblacin de microorganismos en perodos de
una hora. Las unidades experimentales fueron
trozos de filetes de merluza que se evaluaron
en fresco y al cabo de cada perodo establecido, hasta observar que la variable en medicin
no fluctuase.
2.4. Procedimiento experimental
El flujo de operaciones para los tratamientos en estudio se puede ver en la Fig.
1. En el salado de PS se colocaron los filetes
de pescado en capas alternadas con sal y se

Figura 1.
Flujo de operaciones para los tratamientos de salado
205
206
drenaron los lquidos exudados de las muestras. En el salado de PH a diferencia del

anterior no se drenaron los fluidos. En la
DOV se us como agente osmtico una
solucin saturada de cloruro de sodio. Las
muestras se retiraron de cada tratamiento
de salado, se les elimin el exceso de sal,
se les escurri y sec superficialmente con
papel absorbente (Rahman y Lamb, 1990).
Luego se pesaron los trozos de filetes salados, se picaron y homogeneizaron realizndose las determinaciones de humedad,
actividad de agua, microorganismos
aerobios viables, estafilococos, hongos y
cloruros.
La DOV se realiz sumergiendo las
muestras de pescado colocadas en una canastilla en salmuera preparada con 7,2 kg
de sal/20 l de agua, en relacin de 1 a 5
(Contreras y Smyrl, 1981), aplicando vaco
de 130 mb por 5 min. Considerando el contacto de la fase slida con la fase lquida
como un factor importante para el xito del
desarrollo de la operacin, por lo cual los
productos que tienden a flotar en la solucin concentrada debido a la diferencia de
densidades, los filetes deben mantenerse
sumergidos para lograr la interrelacin slido-lquido asegurando en todo momento la
deshidratacin (Raoult-Wack,1991).
Se tom muestras por triplicado a
intervalos de 1 hora de los 3 tipos de salado propuestos, considerando: peso inicial
de la muestra, peso de la misma muestra
al tiempo de salado transcurrido, el contenido de agua inicial de la muestra, el contenido de agua de la muestra al tiempo de
salado transcurrido, actividad de agua inicial, actividad de agua de la muestra tratada al tiempo transcurrido, contenido de slidos inicial y contenido de slidos de la
muestra al tiempo de salado transcurrido.
Para los clculos se emplearon los procedimientos aplicados por Fito et al. (1992),
Fito et al. (1993) Dvila et al. (1993),

Pensabn (1993) y Dvila (1999), correspondientes al procedimiento de la determinacin cintica de incremento de la variable en estudio de la muestra a lo largo
del tratamiento.
III.
RESULTADOS Y DISCUSIN
3.1 Evolucin de la humedad
En la Figura 2 se presenta la evolucin de la fraccin de agua en las muestras

tratadas, hallndose que a condiciones de
vaco se produce un mayor retiro de agua
en las muestras analizadas, que concuerda con lo reportado por Mata (1991) y Fito
et al. (1992). Se observa que la velocidad
de prdida de agua en el tejido es mayor
que la de ingreso de slidos, producindose una disminucin de peso en las muestras, resultados coincidentes a los de Vial
et al. (1990). La deshidratacin de la clula es ocasionada por la sal que penetra a
travs de la membrana celular, alterando
las propiedades coloidales de las protenas y cambiando la relacin agua-protena
(Fennema, 1993). Adems en las primeras horas de salado se observ la mayor
prdida de agua como lo indican Shi y Fito
(1993) y Palou et al. (1993). Se observa
asimismo que el agua fue el componente
que en mayor cantidad se transporta desde la parte interna del filete hacia los alrededores, coincidiendo con los reportes de
Bolin et al. (1983). En un balance neto de
transferencia, las muestras presentaron en
todos los casos una prdida de peso en
el equilibrio, comportamiento similar al de
los experimentos de Beristain et al. (1990).
Se evalu tambin el efecto de los
3 tipos de salado (PS, PH y DOV) sobre
las fracciones de agua, hallndose que hay
diferencia en la cantidad de prdida de agua
eliminada de las muestras durante los tra-

tamientos de salado y segn el tiempo que

permanezcan en la solucin osmtica; diferencia ocasionada porque el gas que ocupaba parcialmente la estructurada porosa
es sustituido por la solucin osmtica cuando las fuerzas capilares intervienen (Barat
et al., 1998). Al aplicar la prueba de significacin de Duncan se determin que la
prdida del contenido de agua de las muestras vara con el tipo de salado, diferencindose el de DOV de los tradicionales
en PS y PH debido a que la aplicacin de
vaco favorece la sustitucin del gas que
ocupaba parcialmente al tejido por la solucin osmtica que altera el estado de las
protenas.
3.2 Evolucin de los slidos
La penetracin de la sal depende de
la condicin en que se encuentre el pescado. Si est en rigor mortis demorar ms
que en aquellos que se encuentren en las
primeras etapas de la autlisis. El proceso
aqu es afectado por el cambio de estructuras tisulares y viscosidad del fluido del
Figura 2.
207
tejido. Una buena preservacin depende del

tiempo tomado para que la concentracin
de la sal dentro del pescado llegue al mnimo requerido para obtener la autlisis y el
crecimiento de la microflora. Luego un buen
salado depende bsicamente de la velocidad de penetracin de la sal o el tiempo
requerido para que su concentracin se
incremente en el fluido del pescado y concuerda con lo indicado por Soudan citado
por Isidro, 1988. Mata (1991) y Fito et
al.(1992), quienes al trabajar con anillos de
manzana con DOV hallaron que el vaco
acelera el ingreso de slidos solubles, comportamiento similar al determinado en nuestro caso. En la Figura 3 se presenta la
evolucin de los slidos totales en la operacin de salado de merluza, en la que las
mejores condiciones de transferencia se llevaron a cabo a vaco, coincidente a lo publicado por Dvila et al. (1993) y a los estudios de Lenart y Flink (1984) en papas a
las que se aplic concentracin osmtica,
determinndose que el tubrculo gana rpidamente slidos cuando los tiempos son
pequeos como en este caso.
Evolucin de las fracciones de agua en muestras deshidratadas de

merluza durante el salado
208
Bolin et al. (1983) sealan que no

hay una abundante migracin de soluto hacia las clulas durante el salado sino que simplemente permanecen los slidos entre los
espacios intercelulares, remarcando el hecho
de ganancia de solutos, por lo cual es conveniente incidir en que cuando las dos soluciones acuosas (fluidos del pescado y la
salmuera) se ponen en contacto, las sustancias disueltas y el solvente se difunden
en direcciones opuestas, resultando que la
concentracin de la solucin se iguala en
toda la zona, lo que se evidencia en las correlaciones de Ms y Mw en los tres tipos de
salado, determinndose por consiguiente
que la variacin de slidos (Ms) en las tres
tcnicas de salado difieren significativamente. Las pruebas de significacin de
Duncan indicaron que las fracciones de slidos durante la DOV no fueron iguales a
las correspondientes en el mismo tiempo a
los tratamientos de PS y PH, y la variabilidad en la impregnacin de slidos difiere de
la obtenida con PH. Es probable que en este
caso el mecanismo dependa del gradiente
de presin denominado Mecanismo
Hidrodinmico (HDM), que incluye los efectos capilares y que est afectado por la estructura (Barat et al.,1998).
3.3
Evolucin de la actividad de agua
En la Figura 4 se observa que el vaco disminuy ms los valores de aw en pescado tratado con DOV al compararlos con los
salados en PS y PH; destacndose una importante cada de aw en la DOV a las 2 h de
tratamiento con un valor de 0,835, en comparacin con el 0,925 de PS y 0,93 de PH. Estos valores hacen suponer que el descenso
de la aw fue el resultado de los transportes
mayoritarios de agua (que desminuye) y de
solutos (que aumentan).
Este comportamiento puede postular la presencia de un mecanismo donde se
describa la transferencia de fluidos, entre

la parte extracelular y la fase lquida externa, porque a medida que aumenta la presin externa se va produciendo una
desaireacin del gas ocluido dentro de la
estructura porosa de la parte muscular,
como consecuencia de la existencia de una
diferencia de presiones, por las fuerzas capilares y cambios de presin llegando el gas
a ser comprimido o expandido de modo que
la solucin salina va ocupando los espacios
vacos que van quedando exentos de gas, y
a la vez por un mecanismo osmtico va perdiendo agua, lo que influye tambin en la
disminucin de la actividad de agua y sta
es ms rpida a menor presin de trabajo.
La disponibilidad de agua decae por la penetracin de solutos con efecto deshidratante a travs de la membrana celular,
ocasionando la desnaturalizacin de las
protenas y la contraccin del tejido
(Fennema, 1993). Al empezar el salado en
el pescado la parte hidratada de los tejidos
que contiene casi 20% de materia
nitrogenada es isotnica con una solucin
de una concentracin de sal de 0,9 a 1%
(Isidro, 1988), por lo cual no se produce un
intercambio de componentes; sin embargo
al aplicar el vaco se acelera el desalojo de
los gases ocluidos en las clulas. El ANOVA
de las variaciones de actividad de agua durante los tres tipos de salado determina que
existe diferencia significativa entre los tratamientos de salado y el tiempo que las
muestras son tratadas, como se haba reportado en el anlisis previo. El descenso
ms rpido de actividad de agua, se produce en el salado por DOV; debido a la mayor
velocidad de impregnacin de slidos y a la
reduccin brusca de la cantidad de agua
inicial, que concuerda con los resultados
de Dalla et al.(1982). Al aplicar, el mtodo
de Duncan se obtuvo una diferencia altamente significativa del tratamiento DOV al
compararlo con los de PS y PH, en los que
no se aprecia ningn efecto sobre el sala-

do, presentndose un comportamiento similar de los componentes mayoritarios segn

lo reportado por Contreras y Smyrl (1981).
En la formacin del complejo sal-protena se
fija el agua y se reduce su disponibilidad
(Fennema, 1993). La actividad de agua de las
muestras frescas vari de 0,993 a 0,996 descendiendo de 0,9 a 0,89 en las tratadas por
tcnicas tradicionales (PS, PH) durante 5 h y
0,815 en la obtenida por DOV a las 4 h, depresin que concuerda con la tendencia reportada por Dvila et al.(1993). Por esto la
actividad de agua (aw) puede considerarse
como una propiedad importante que explica
el por qu de la inhibicin microbiana en el
tratamiento por DOV frente a las tcnicas de
PS y PH.
3.4
Evolucin de la carga microbiana
En la Figura 5 se presenta la concentracin de microorganismos aerobios viables, de estafilococos y hongos en funcin

al tiempo de salado en los 3 tratamientos.
Se observ que salando el filete a condiciones de vaco se inhibi con mayor intensidad el crecimiento de microorganismos, lo
cual contribuy a mejorar la calidad del pro-
209
ducto final. Se aprecia que las cadas ms

bruscas en la concentracin microbiana se
producen en la etapa inicial de la operacin del salado y cuando el tiempo de tratamiento aumenta, las pendientes de las
curvas tienden a ser menos pronunciadas.
As mismo en la materia prima se obtuvo
un recuento de microorga-nismos aerobios
viables de 6,8x10 6 ufc/g que durante el
salado por PS y PH se redujo en un 99 %
al cabo de 31 h de proceso; y se obtuvo un
descenso de la poblacin del 99,9% en
21 h al aplicar DOV. Un indicador muy importante para la carne de pescado es el
estafilococo, empleando como indicador el
Staphylococus aureus, cuya poblacin puede verse en la Figura 6 en la que se relaciona su evolucin en muestras de pescado con las tres tcnicas de salado. En el
salado por DOV se evidencia que los niveles de estafilococos se deprimen por efecto del vaco. Por ejemplo a las 21 h la carga fue de 2,2 x 10 4 ufc/g con PS o PH,
mientras que usando DOV la carga fue de
2,2 x 103 ufc/g. Se hall una reduccin de
esta poblacin en valores promedio de
91,76% en PS y PH a las 31 h, y en DOV
de 98,7% a las 21 h.
FIGURA 4. EVOLUCION DE LA ACTIVIDAD DE AGUA DEL SALADO EN FILETES

DE MERLUZA
210
FIGURA 5
FIGURA 5. EVOLUCION DE MICROORGANISMOS

AEROBIOS VIABLES EN FUNCIN AL TIEMPO
DURANTE EL SALADO DE MERLUZA
FIGURA 6
FIGURA 6. EVOLUCIN DE ESTAFILOCOCOS

EN FUNCIN AL TIEMPO DURANTE EL SALADO
DE MERLUZA

En la Figura 7 se observa la evolucin de hongos en muestras saladas, la inhibicin del desarrollo de microorganismos
por tratamiento a vaco es mayor que en los
otros mtodos. Se hall una reduccin de
carga microbiana del 83,95% en PS,
85,19% en PH y del 98,64% aplicando
DOV a las 21 h. En las muestrastratadas
con PS y PH la reduccin del contenido de
hongos es de 87,65 y 85,19% respectivamente, mientras que en los de aplicacin con
DOV la reduccin de esta poblacin es
87,65% a las 31 h, siendo necesario destacar que porcentualmente la inhibicin o destruccin de los hongos es representativa partiendo de la concentracin inicial (8,1x102 ufc/
g). Sin embargo en proporcin a la concentracin inicial de aerobios viables (6,8x107 ufc/
g) slo representan el 0,001% en productos
en fresco y por efecto del salado llegando a
constituir a las 21 h de tratamiento en PS y
PH slo el 0,0004 %, y en los tratados con
DOV el 0,4782 %, por lo cual se considera
que el efecto de este ltimo tratamiento es
ms severo para la reduccin de la carga
microbiana; an cuando la poblacin de hongos es poco significativa en las muestras evaluadas. En el caso de estafilococos se observa que la concentracin inicial (de 1,6x105
FIGURA
7.
211
a 1,7x105 ufc/g) decae en un 86,25 % en

PS, 87,06 % en PH y 98,7 % en DOV a las
21 h; llegando los tratamientos de PS y PH a
las 31 h a reducciones del 91,8 %); por lo
cual puede sealarse que el tratamiento de
vaco es de mayor efectividad que las tcnicas tradicionales al inhibir el aumento de la
poblacin en menos tiempo, afirmacin que
coincide con los reportes de Nickerson y
Sinskey (1978) al sealar que el efecto de la
sal aadida a las muestras limita, en cierto
modo el crecimiento de los grmenes al disminuir la actividad de agua, existiendo todo
un gradiente de actividades de agua a las que
los microorganismos pueden o no crecer. Considerando que los alimentos que causan intoxicacin estafiloccica presentan recuentos a partir de 50x106 ufc /g (Nickerson y
Sinskey,1978) en ninguno de los tratamientos efectuados (PS, PH y DOV) se hallaron
valores cercanos al mismo. En el recuento
de aerobios viables se determin en PS y PH
una reduccin de la concentracin microbiana
de un 52,9 % a las 21 h, mientras que en
DOV se llega al 99,9%. Slo a las 31 h se
llega en PS a disminuir la poblacin en 99,6%
y en PH el 99,6%. En nuestro caso la demora en la impregnacin de los filetes al aplicar PS y PH permite el mayor desarrollo de
EVOLUCION DE LOS HONGOS EN FUNCIN AL TIEMPO DURANTE

EL SALADO DE MERLUZA
212
aerobios viables y hongos comparado al de

DOV. Se hall por lo tanto una diferencia altamente significativa entre las tcnicas de salado propuestas y que el tiempo de salado tambin afecta a la reduccin de la carga
microbiana en las muestras analizadas. Los
resultados de los anlisis realizados en las
muestras elaboradas por PS, PH y DOV son
satisfactorios, porque en todas las muestras
se verifican niveles bajos de contaminacin
microbiolgica. El proceso de salado lleva a
una deshidratacin del producto que influye en
la inhibicin o muerte de algunos microorganismos indeseables que no son viables por debajo de ciertos niveles de aw (Barraud, 1978,
citado por Silla y Flores, 1982).
Al observar las Figuras 5, 6, y 7 es
posible identificar una zona en la cual los
microorganismos interaccionan con su entorno de mayor concentracin de sal y sufren
una reduccin drstica de su poblacin, probablemente ocasionada por su incapacidad
a adaptarse a condiciones de vida en las que
se ha reducido la disponibilidad de agua, y al
aumento de la presin osmtica en las paredes y membranas celulares, considerndose
como un perodo de velocidad constante, en
el que la muerte de los microorganismos es
dependiente de la velocidad de prdida de
agua de las clulas microbianas y de la transferencia de solutos a su superficie, provocando la desestabilizacin de la conformacin
celular e implicando su destruccin cuando
no se adaptan al medio fuertemente salino, o
su inhibicin cuando son halotolerantes. A
continuacin, de esta zona se observa que
la carga microbiana tiende a mantenerse constante, probablemente porque los microorganismos sobrevivientes son mayoritariamente halfilos o se han adaptado al medio salino por su halotolerancia, y no afecta a su
desarrollo la presencia de otros tipos de
microorganismos, pudiendo pensarse en que
el medio selectivo generado por la impregnacin de la sal en el alimento evita la altera-
cin del alimento por agentes microbianos no

halfilos.
Se destaca el mayor efecto letal en
aerobios viables que en hongos, por lo cual
se sugiere que existe un comportamiento
anlogo entre los aerobios viables,
estafilococos y hongos en los tres tipos de
salado. Se observa que en la DOV y la PH
los estafilococos a las mismas condiciones
de inmersin en medios fuertemente salados, tienen como nico factor diferencial de
tratamiento el vaco. Se podra sugerir que la
poblacin de microorganismos halfilos y
halotolerantes son sensibles y por lo tanto
pueden destruirse aplicando condiciones de
vaco, afirmacin que se verifica al comparar
las relaciones de las velocidades de destruccin del microorganismo durante la razn constante en los tres tipos de salado. De este comportamiento
se
desprende
que
microorganismos como el Staphylococus
aureus son sensibles a la aplicacin de presiones de vaco, por lo cual sera conveniente
realizar pruebas confirmativas de esta hiptesis, dilucidando si estamos destruyendo al microorganismo y su probable habilidad para producir toxinas. A presin atmosfrica en medios fuertemente salados, en los que los fenmenos fsicos (la solucin salina, las muestras saladas o el contacto de los cristales de
sal con las muestras a salar) interactan, se
halla que el tratamiento en PH es ms efectivo para destruir a los estafilococos, duplicando su velocidad de destruccin en la razn
constante, confirmndose estos resultados
con lo reportado por SERCOTEC (1991).
La aplicacin del salado con DOV
permite que la concentracin de hongos y
aerobios viables se reduzca aproximadamente en cinco veces la velocidad determinada
para los salados en PS y PH, probablemente
porque el vaco permite que el aire ocluido en
las clulas y espacios intersticiales sea reemplazado por la solucin osmtica, permi-

tiendo una mayor rea de intercambio de

soluto y agua del medio deshidratante (solucin osmtica) y del medio a deshidratar
(muestra cargada con microorganismos).
En el caso de estafilococos la DOV
permite quintuplicar su destruccin comparada a la accin en PS, probablemente por
la menor rea de contacto entre la sal en
cristales y la carga microbiana, sin embargo
para PH la superficie de contacto es mayor
entre el soluto de la solucin osmtica y la
concentracin de microorganismos, por lo cual
la DOV casi duplica su accin letal.
Al comparar los tratamientos de PH y
PS se determina que el comportamiento en la
destruccin de los hongos es similar al de
aerobios viables, sin embargo para los
estafilococos el salado en PH casi se triplica
(2,6), como consecuencia de la mejor
interaccin entre el soluto y las paredes celulares. Podra considerarse que los cristales de
sales por difusin interaccionaran en el agua
disponible en las muestras. Simultneamente
se considera que los componentes proteicos
cambian su conformacin, formando estructuras ms rgidas que formarn canales por los
cuales por capilaridad ingresar la solucin
salina al medio a deshidratar.
3.5 Evaluacin sensorial
Considerando que los jueces eran estudiantes del rea de alimentos que tenan
conocimientos tericos y prcticos sobre la
realizacin de pruebas sensoriales y las caractersticas de los productos salados, se
modific el nmero mnimo de jueces sugerido por el IFT de 24 a 17. Para verificar los
resultados de las pruebas sensoriales, se
realizaron tres corridas experimentales con
los jueces seleccionados.
Se evalu el efecto de los tratamientos (PS, PH y DOV) y la participacin de los
213
jueces. Se determin que existen evidencias

estadsticas para sealar que por lo menos
una de las tcnicas de salado tiene un efecto
altamente significativo en el grado de satisfaccin del producto salado y se determin
que no hay diferencias entre las opiniones de
los jueces. Al aplicar la prueba de significacin de Duncan se hall que el pescado salado con DOV fue el de mayor agrado por los
catadores. Mediante las pruebas, se determin que no hay diferencias significativas
(p 0,01) entre las muestras elaboradas
por PS y PH, pero s con la de DOV, por lo
cual se seleccion este ltimo, que produce
una textura ms firme que el de las otras tcnicas y con mejor tonalidad.
El efecto blanqueante se debe a la
desnaturalizacin de la fraccin proteica de
la mioglobina, por accin de la alta concentracin de soluto, liberndose el grupo heme
al medio (Whitaker y Tannebaum, 1977, citados por Cabrera et al., 1991).
IV.
CONCLUSIONES
La fraccin de agua de las muestras

durante el salado en PS y PH decay paulatinamente de 0,75 a 0,6 al cabo de las 7 horas, pero al aplicarse vaco en esta operacin
se lleg al mismo contenido de humedad en
las dos primeras horas con un ahorro de tiempo del 71%.
Las muestras tratadas por DOV presentaron una mayor velocidad de impregnacin de la sal (0,09 en 2 horas) en el tejido
muscular. En el mismo perodo en las muestras de salado tradicionales de PS y PH se
hall una variacin menor del contenido de
slidos (0,07 en PS y 0,071 en PH).
En el salado con DOV la inhibicin
del recuento de aerobios viables es pronunciada dentro de las cinco primeras horas, de
7,83 ufc/g a 4,45 u.f.c./g. En comparacin a
214
las reducciones de 7,6 u.f.c./g por las tcnicas de PS y PH en el mismo perodo, probablemente por la reduccin de la disponibilidad de agua en las muestras saladas. El tratamiento de DOV incide durante el perodo
de razn constante en la velocidad de destruccin de hongos (0,3183), quintuplicando
su efecto comparado al de PS (0,065) y al de
PH (0,0693). Probablemente por efecto del
vaco se quintuplica la velocidad de destruccin de estafilococos en PS (0,0281) y se
duplica la de PH (0,0732).
Al evaluar las muestras saladas con
PS y PH aplicando la escala hednica en sus
caractersticas de color y textura se hall que
tienen menor aceptacin que aquellas en las
que se aplic DOV, en las que se obtiene
mayor blancura y dureza a las tres horas de
tratamiento. Sin encostramiento superficial.
V.
BIBLIOGRAFA
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la Prctica. Editorial Acribia. Zaragoza. 198 p.
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217
EVALUACION DE DIAZOTROFOS ASOCIADOS AL CULTIVO DE MAIZ (Zea mays L.)

EN CONDICIONES DE AGRICULTURA NATURAL .
Miguel Huauya Rojas1 , Juan Juscamaita Morales2 ,
Constantino Caldern Mendoza 3
RESUMEN
En el trabajo se prueba la interaccin entre las bacterias libres fijadoras de nitrgeno,
se determina su capacidad de accin a diferentes estados de crecimiento, evaluando la potencialidad de fijacin.
Los resultados mostraron una variacin estacional referido a la poblacin de las bacterias rizosfricas fijadoras de nitrgeno. En el estado de floracin se obtuvo la mayor poblacin
endorizosfrica de Azospirillum spp. , en el siguiente estado, llenado de granos, ocurri un
aumento de la poblacin rizosfrica tanto de Azospirillum spp. como de Azotobacter spp. pero
no se super a la poblacin del Azospirillum spp. de la Endorizsfera.
De manera similar, la relacin Endorizsfera/Rizsfera (E/R - Azospirillum spp) y Rizsfera/
Suelo (R/S - Azotobacter spp) mostr una variacin estacional. As, en el estado de floracin se
obtuvo el mayor valor de la relacin Endorizsfera/Rizsfera (E/R: 418,42) mientras que en el de
llenado de granos se obtuvo la mayor relacin Rizsfera/Suelo (R/S : 282,14). Estos resultados nos
indican una influencia selectiva del sistema radicular del maz por el Azospirillum spp.
ABSTRACT
In this work, the interaction among the nitrogen-fixing free bacteria is tested, determining their action capacity to different growth stages of maize and evaluating their fixing potentiality.
The results showed a seasonal variation referred to nitrogen fixed rizhosphera bacteria populations. In the flowering stage, there were a higher endorhizospheric population of
1
2
3
Bilogo, Universidad Nacional Agraria La Molina.

Bilogo, Profesor Auxiliar. Facultad de Ciencias - UNALM.
Ing. Agrnomo, Profesor Principal. Facultad de Agronoma- UNALM.
218
Azospirillum spp., in the next stage called the grain filling, there was an increase of the
rhizospheric population, both Azospirillum spp and Azotobacter spp, but these populations did not increase the populations of in the endorhizosphera.
Similarly, the rate of endorhizosphera / rhizosphera (E/R - Azospirillum spp) and
Rizosphere / Soil (R/S - Azotobacter spp) showed a seasonal variation. Thus, in the flowering
stage there was a higher value of the endorhizosphera / rhizosphera rate (E/R: 418, 42) while
in the grain filling, there was a value of rizosphere / soil (R/S: 282,14) rate. These results
show a selective influence of the radicular system of maize by Azospirillum spp.
I.
INTRODUCCION
En las reas campesinas de la sierra peruana, se practica una agricultura con

bajos insumos, bajo el criterio de agricultura
natural, y con rendimientos, ciertamente adecuados y sostenibles. Esto llama la atencin
sobre los elementos que sostienen la fertilidad de los suelos manteniendo a travs de
los aos una produccin sostenida.
De acuerdo a las investigaciones realizadas, la actividad de las bacterias rizosfricas fijadoras de nitrgeno tienen un rol
en el mantenimiento de la fertilidad de aquellos nichos maiceros.
El monocultivo tradicional del maz
en la comunidad de Oyolo - Ayacucho, sin el
empleo de fertilizantes sintticos, ofrece las
condiciones adecuadas para tratar de entender algunos aspectos sobre la actividad de
estas bacterias, en relacin con el ciclo de
desarrollo del maz.
Bajo las condiciones mencionadas,
se plante la hiptesis que estos microorganismos estn presentes en el suelo donde
se cultiva el maz, par lo cual el objetivo de la
investigacin fue contribuir con el conocimiento de las bacterias rizosfricas fijadoras de
nitrgeno (Azospirillium spp, Azotobacter spp)
que ocurren en condiciones de agricultura
natural.
II.
2.1 La Rizsfera
La rizsfera es un volumen de suelo

muy limitado, inmediato a la raz, en el que la
poblacin de microorganismos est condicionado tanto cuantitativa como cualitativamente
por la presencia de las races de las plantas.
Es una zona de actividad biolgica intensa,
con una transferencia importante de agua y
nutrientes ( 18 ).
La Rizsfera puede ser dividida en
tres reas (8):
1. La Rizsfera, en sentido estricto (rizsfera
externa), comprende la regin del suelo
alrededor de las races de las plantas y
las poblaciones de los microorganismos
habitndolas.
2. El Rizoplano ( o superficie radicular) formado por la superficie radicular y los
microorganismos viviendo en l.
3.
La Endorizsfera ( o rizsfera interna)

formado por la corteza radical de la raz
invadido y colonizado por microorganismos saprfitos del suelo (infeccin del
hospedero no patognica).
En algn grado estas tres reas deberan estar relacionados como un simple

ambiente microbiano sin lmites pronunciados

y/o diferenciados entre ellos (8).
Por su parte, el Coeficiente R/S
(Rizsfera / Suelo) indica la relacin existente entre la cantidad de microorganismos
por unidad de peso de suelo de rizsfera y
la cantidad de microorganismos por unidad
de peso de suelo sin influencia de la raz.
Adicionalmente, algunos investigadores reportan a nivel de la rizsfera una poblacin
mucho mayor de las Bacterias Libres
Fijadoras de Nitrgeno (BLFN) con respecto
al suelo libre de la influencia de races (
24,25).
Los factores que determinan una
mayor poblacin de las bacterias fijadoras
de nitrgeno o diaztrofos a nivel de la
rizsfera son: la exfoliacin de las clulas
de la raz, exudados de las races, concentracin de O2, humedad del suelo, poca del
ao, edad y especie de la planta (21).
2.2 Establecimiento de la asociacin gramnea - diaztrofos.
El establecimiento de esta asociacin implica una interaccin mutua entre estos dos componentes. Esta interaccin toma
lugar en la rizsfera o dentro del tejido
radicular; pero ninguna estructura especializada comparable a los ndulos de las leguminosas inducidas por el Rhizobium son formadas. Por lo tanto, esta asociacin puede
ser descrita como una mera colonizacin de
la rizsfera, rizoplano, y/o la endorizsfera.
Esta colonizacin es el resultado de una
seleccin de los microorganismos mejor
adaptados al nicho ecolgico formado por el
ambiente radicular (16).
Azotobacter paspali es una interesante rizobacteria promotora del crecimiento
vegetal por que presenta casi una completa
especificidad planta hospedero con un
219
ecotipo de csped, Paspalum notatum cv

Batatais, una gramnea subtropical
tetraploide. Esta asociacin es tan especfica que la bacteria no se asocia con el csped diploide Paspalum notatum cv
Pensacola. La promocin del crecimiento por
parte del A. Paspali incluye la fijacin del
nitrgeno (7).
Los diaztrofos (Azospirillum spp.,
Azotobacter spp.) presentan varias propiedades las cuales promueven su mejor
competitividad en la rizsfera endorizsfera.
Entre estas cualidades se tienen:
Quimiotaxis: Las cepas de Azospirillum
exhiben quimiotaxis positiva in vitro con
hacia varios atractantes, incluyendo azcares, aminocidos, cidos orgnicos, compuestos aromticos as como hacia exudados y muclagos de las races (16).
Las races de las plantas C4 (maz,
sorgo, etc) son colonizados preferentemente
por Azospirillum lipoferum, mientras que las
races de las plantas C3 (trigo, arroz, avena,
etc) son colonizados principalmente por
Azospirillum brasilense (20)
Adems de su quimotaxis hacia
sustratos orgnicos, Azospirillum spp. es una
bacteria microaeroflica y es atrado hacia un
gradiente de O2. Esta propiedad puede ayudar en la colonizacin radicular debido a que
las races activas de las plantas crean una
reducida presin de oxgeno por el consumo
del mismo (16).
Colonizacin de la rizsfera rizoplano: El enlace de Azospirillum en las
races del trigo es principalmente dependiente
de 2 factores: i) la existencia de un flagelo
polar, el cual permite a la bacteria adsorverse
a las races y ii) la produccin de exopolisacridos (EPS), el cual permite a la bacte-
220
ria adherirse fuertemente a la superficie

radicular (6).
La especificidad de la asociacin
diaztrofos (microorganismos fijadores de nitrgeno) con las gramneas ha sido atribuida
a la presencia de protenas de tipo lectinas
en la superficie radicular de las gramneas (11).
La interaccin entre Azospirillum y las
lectinas puede contribuir a la adhesin de la
bacteria a la superficie radicular y establecer
una asociacin fijadora de nitrgeno de eficiencia incrementada en el hospedero.
Presumi-blemente, la elevada capacidad
fijadora de la bacteria esta apoyada en un
incremento en el suministro de carbn y
energa desde la planta hospedera(11).
La colonizacin interna de las races
por el Azospirillum spp requiere que estos
microorganismos sinteticen enzimas para
degradar los componentes de la pared celular.
Cepas de Azospirillum irakense presentan actividad celuloltica y pectinoltica,
por el cual pueden degradar celulosa y
pectinas, componentes primarios de la pared celular y lamina media en los vegetales. No obstante la produccin y actividad
de estas enzimas debe ser fuertemente regulada para una penetracin localizada sin
la destruccin del tejido vegetal alrededor
del sitio de infeccin (1).
Se ha sugerido que la entrada inicial de
diaztrofos a la estela del maz ocurre en las
regiones apicales de las races, donde no hay
apreciable engrosamiento de las paredes de la
endodermis o de la Banda de Caspary, o donde
la estela no se ha diferenciado como tal (12).
Formacin de estructura tipo quiste: Los
Azospirillum tienen la capacidad para diferen-
ciacin en formas no mvil, altamente

refractil, formas C encapsuladas conteniendo abundante grnulos de poli - b hydroxibutirato por lo que muestran un incremento en la resistencia a la desecacin y a
la irradiacin ultravioleta, por lo cual son considerados verdaderos quistes, por tanto poder sobrevivir bajo condiciones fsico - qumicas desfavorables (3).
El alginato es importante para la formacin de la estructura tipo quiste en
Azotobacter vinelandii como una cubierta protectora de material polisacrido. Tal cubierta
protege a las clulas de la desecacin y
estrs mecnico (17).
Lugar de realizacin del trabajo de
investigacin.
El presente estudio se llev a cabo
en la comunidad de Oyolopampa, Distrito
de Oyolo, Provincia del Paucar del SaraSara, Departamento de Ayacucho ubicado
en las coordenadas: 15 10 45" latitud Sur
y 73 11 28" longitud Oeste (9).
La comunidad maicera ubicada a
2800 m.s.n.m bajo un sistema de andenera.
La zona se caracteriza por tener una T(C)
media mxima: 11.3 C y media mnima:
7.1 (C), mientras que tiene una precipitacin media mxima: 666.9 mm y una media mnima: 226.5 mm (14).
Anlisis del Suelo
Antes de la siembra se tomaron
muetras compuestas de suelo y se analizaron en el Laboratorio de Anlisis de Suelos UNALM

De los datos mostrados, se aprecia

que las caractersticas internas del suelo ofrece las condiciones adecuadas para el cultivo
del maz a excepcin del contenido de materia orgnica y por ende del nitrgeno total, el
cual tiene un nivel bajo (9).
Caractersticas del Cultivo
El campo en estudio comprendi el
rea determinada por un anden de 450 m2 en
el cual el monocultivo del maz presenta las
siguientes caractersticas (9):
Fecha de siembra: Setiembre
Sistema de siembra: uso de yunta, las semillas se distribuyen en lneas con 2 - 3 granos por golpe, por cada 7 lneas de maz se
siembra una lnea de habas.Tambin se siembra habas en los mrgenes del anden.
Riego: empleo de sistema de riego y agua
de lluvias.
Abonamiento del cultivo: recae en el uso
de abonos orgnicos (estircol de vacunos,
ovinos, llamas y rastrojos del cultivo).
221
Semilla de maz amilceo: natural del lugar.

Variedad: diverso, con predominio de las variedades amilceos de color(amarillo, plomizo). Sevilla (comunicacin personal) al examinar granos del maz de la zona de investigacin determin que pertenecan a la raza
San Gernimo - Huancavelicano.
Plagas - Enfermedades: referidas al ataque
del grano por el gusano (Heliothis zea Baldie),
y la ocurrencia del carbn del maz (Ustilago
maydis D.C. Cda). Bajo las condiciones de
cultivo de la zona no llegan a generalizarse
estas plagas y enfermedades.
Cosecha del maz: La cosecha se recoge
entre la tercera semana de junio y la segunda semana de julio.
Frecuencia de muestreo.
Se realiz 4 muestreos en distintas
etapas del ciclo vegetativo del maz:
Primer muestreo: Emergencia (Octubre )
Segundo muestreo: Floracin (Enero )
222
Tercer muestreo: Llenado de granos (Abril )

Cuarto muestreo: Madurez fisiolgica (Junio)
Parmetros a Evaluar
Poblacin de Azospirillum spp en la

endorizsferayenelsuelorizosfricodelmaz.
Poblacin de Azotobacter spp en el suelo rizosfrico del maz y suelo libre de

vegetacin.
Determinacin de los coeficientes

endorizsfera/suelo rizosfrico (Azospirillum spp), suelo rizosfrico/suelo sin
vegetacin (Azotobacter spp).
Parmetros biomtricos del maz (altura,

peso fresco y peso seco de la parte area)
Estimacin del rendimiento del cultivo.
Toma de muestras.
Por cada muestreo se procedi a
escoger 4 plantas representativas de maz,
en los cuales se midi y determin la altura,
peso fresco y peso seco respectivamente.
De cada planta se procedi a extraer
con una lampa la parte superior del sistema
radicular con el suelo rizosfrico adherido a
ella. Las muestras fueron colocadas en bolsas de polietileno previamente desinfectadas.
tril (ClNa 0,85%) con lo que se obtuvo la

dilucin 10-1. Luego de una agitacin manual
por 5 minutos se transfiri 1 ml de esta primera dilucin a otro tubo con 9 ml de solucin
salina para obtener la dilucin 10-2 y as sucesivamente hasta la dilucin 10-7. De cada dilucin se tom una alcuota de 1 ml para colocarlos en tubos de ensayo conteniendo 9 ml
de medio de cultivo selectivo para Azotobacter
(5 tubos por dilucin) y luego de 24 horas de
incubacin a 28 oC se realizaron las lecturas.
De acuerdo al viraje del medio de cultivo de un
color azul verdoso (pH 7,0) hacia un amarillo
la lectura se consider positiva (9,24).
Deteccin y cuantificacin de Azospirillum
spp.
Para el caso de las races se procedi
a realizar un molido de ellas, posteriormente, las
races y el suelo rizosfrico, fueron transferidas
a frascos erlenmeyer conteniendo 27 ml de solucin salina estril, obtenindose la dilucin 101
. (9,10), procedindose de manera similar a lo
realizado con Azotobacter, teniendo en cuenta
que se trabajar hasta la dilucin 10-8.
De acuerdo al viraje del medio selectivo para Azospirillum de un color verde (pH
6,5) hacia amarillo, as como la formacin de
un velo blanquecino debajo de la superficie
del medio de cultivo la lectura se consider
positiva (9,10).
Se procedi a tomar una muestra

compuesta de races finas y suelo rizosfrico
a partir de las 4 plantas tomadas por muestreo. Para el caso de Azotobacter spp se pes
1 gramo de suelo rizosfrico y suelo sin vegetacin, mientras que para Azospirillum spp
se pes 3 gramos de races finas y suelo
rizosfrico respectivamente (9).
Al final del periodo de incubacin (15

das) el nmero de tubos mostrando lectura positiva y las diluciones a las cuales se presentaron nos determina el Nmero Caracterstico el
cual consta de 3 dgitos y,mediante la ayuda
de las tablas de Cochran (5), se obtuvo el Nmero Ms Probable (NMP) de estas bacterias,
ya sea por gramo de suelo seco (Azotobacter)
o por gramo de races secas (Azospirillum).
Deteccin y cuantificacin
de Azotobacter spp.
Medios de Cultivo.
Las muestras fueron transferidas,

bajo condiciones aspticas, a tubos de ensayo conteniendo 9 ml de solucin salina es-
Para el desarrollo de Azospirillum spp.

y Azotobacter spp. se utiliz medios de cultivo selectivo carentes de nitrgeno (9,10, 24).

223
VARIACIN POBLACIONAL DE LOS DIAZOTROFOS.
En los cuadros 1 y 2 se presentan los valores de la poblacin de Azospirillum spp y
Azotobacter spp obtenidos por el mtodo del Nmero Ms Probable (5).
Cuadro 1. Poblacin de Azospirillum spp durante el desarrollo del maz (Zea mays L)
224
Cuadro 2. Poblacin de Azotobacter spp durante el desarrollo del maz (Zea mays L)
De las figuras 1 y 2 se aprecia una mayor poblacin de Azospirillum spp. localizada

a nivel de la endorizsfera del maz, especialmente durante el estado de floracin del cultivo.
Figura 1. Variacin Poblacional de Azospirillum spp durante el desarrollo

del maz (Zea mays L)

225
Figura 2. Variacin Poblacional de Azotobacter spp durante el desarollo

Se ha determinado que en el maz,
la mxima actividad de la nitrogenasa ocurre
durante el periodo de floracin, obteniendo un
segundo punto de incremento de la actividad
de la nitrogenasa durante el estado de llenado de granos(23)
De forma paralela, durante el periodo
comprendido entre el aporque y la floracin
de maz, ocurre el ritmo ms acelerado de
absorcin y acumulacin de elementos minerales entre ellos el nitrgeno, acumulndose el 45% del N total (15).
De esta manera, se puede inferir una
asociacin y/o relacin entre el mayor requerimiento de nitrgeno por parte de la planta y la
mayor poblacin de Azospirillum spp. a nivel
de la endorizsfera durante la floracin del maz.
Para comprender por que se obtiene

la mayor poblacin de Azospirillum spp durante el ciclo de vida del maz se tiene que
referir a las caractersticas de la planta. Varios estudios han establecido que existe un
tipo de especificidad entre el maz y el
Azospirillum spp.
Gran parte de la materia seca del
maz (90%) proviene de la fijacin del CO2 por
el proceso de la fotosntesis. El maz es una
planta con metabolismo C4, que presenta una
alta eficiencia en la utilizacin de la luz y el
CO2. (21) indican una tasa fotosinttica de 20 40 umol m-2 s-1 para el maz(C4) y de 10 - 20
umol m-2 s-1 para la soya (C3). De las tasas
menncionadas se obtiene una produccin de
materia seca (tha-1ao-1) de 39 17 y 22
0,3 para el maz y la soya respectivamente.
226
De estos datos se infiere que el maz

en virtud de su metabolismo C4 formar una
buena cantidad de fotosintatos, de donde
parte puede ser derivada para los requerimientos de fuentes de carbono y energa por parte
de las bacterias libres fijadoras de nitrgeno ,
en particular del Azospirillum.
Se considera al xilema como el principal sitio de fijacin de nitrgeno en la asociacin maz Azospirillum.(2).
Las bajas presiones parciales de oxgeno requeridos para la actividad de la
nitrogenasa y la presencia de malato en el
xilema constituiran factores que favoreceran
el establecimiento del Azospirillum spp en este
nivel y a partir de la actividad fijadora de nitrgeno y/o la produccin de sustancias
reguladoras del crecimiento (13) contribuira al
adecuado desarrollo del hospedero. Esta contribucin sera ms acentuada durante el
estado de floracin donde se obtiene la mayor densidad poblacional de Azospirillum spp.

En la figura 3 se tiene la actividad
secuencial de las bacterias libres fijadoras
de nitrgeno (BLFN2) estudiadas, de este
modo al momento de la floracin se obtiene
una mayor poblacin en la endorizsfera, pero
en el siguiente estado, llenado de granos,
ocurre la mayor poblacin rizosfrica tanto de
Azospirillium spp como de Azotobacter spp
aunque estas no superan, incluso en conjunto, a la poblacin de Azospirillium spp localizadas a nivel de la endorizsfera.
Analizando la actividad secuencial de
Azospirillum (figura 3), podemos inferir que estamos frente a dos grupos funcionales de
Azospirillum que se establecen en diferentes
microhbitats,unoubicadoaniveldelaendorizsfera del maz mientras que el otro grupo esta localizado a nivel del suelo rizosfrico del maz.
Figura 3. Variacin Poblacional del Azospirillum spp y Azotobacter spp durante

el desarrollo del maz (Zea mays L).

Resulta interesante apreciar que la dinmica poblacional tanto de Azospirilum spp

como Azotobacter spp. a nivel de la rizsfera
(suelo rizosferico) presenta un comportamiento
similar a lo largo del desarrollo del maz. Esta
actividad nos puede indicar que el desarrollo de
estas bacterias esta regulado por los mismos
y/o similares factores que acontecen a nivel de
la rizsfera, de este modo un cambio, tanto a
nivel del hospedero como en el medio que le
rodea repercutir de manera similar a estos
microorganismos rizosfricos (figura 3).
Al trmino del ciclo de desarrollo del
maz se aprecia que la tendencia de las bacterias libres fijadoras de nitrgeno tanto a nivel de la endorizsfera como en el suelo
rizosferico es retornar al valor poblacional inicial, el cual representara la poblacin estable de estas bacterias.
Se ha determinado una relacin directa en las variaciones poblacionales de los
diaztrofos con el contenido de humedad tanto
en la rizsfera de Sycios bareroa como en
los suelos libres de vegetacin (25).
En nuestro caso la variacin poblacional de Azotobacter spp en el suelo estara
directamente relacionado con el manejo del
agua de riego que se realiza en la zona en
estudio. Por ello se encuentra la mayor poblacin de Azotobacter spp en el suelo no
227
rizosfrico durante el estado de floracin (fig.

3), toda vez que para este periodo el suelo,
debido a la mayor frecuencia de riego, presenta adecuadas condiciones de humedad.
Este comportamiento a su vez repercute en
obtener un R/S menor a 1.
Finalmente, al comparar las variaciones poblacionales de Azotobacter spp en el
suelo como de Azotobacter spp y Azospirillum
spp. localizado a nivel del suelo rizosfrico,
se aprecia que en el primer caso las variaciones son ms bruscas, en cambio a nivel del
suelo rizosfrico las variaciones que ocurren
son de una manera gradual, de este modo
podemos inferir que las poblaciones de las
bacterias libres fijadoras de nitrgeno localizadas a nivel de la rizsfera del maz establecen un tipo de microhbitat especial en la que
de algn modo no estn expuestos a las variaciones ambientales del medio como la que
tiene el Azotobacter spp localizado en el suelo, este microhbitad correspondera a la
rizsfera propiamente dicha.
DETERMINACIN DE LAS RELACIONES
E/R R/S.
En el cuadro 3 se presentan los valores obtenidosaldeterminarloscoeficientesEndorizfera/
Rizsfera (E/R - Azospirillum spp) y Rizsfera/
Suelo (R/S Azotobacter spp) durante el ciclo de desarrollo del maz. (Zea mays L)
Cuadro 3: Determinacin de la relacin E/R y R/S durante el ciclo de desarrollo

228
En la figura 4 se aprecia que la influencia ejercida por el sistema radicular del

maz sobre las BLFN2 vara con el periodo
vegetativo del maz, de este modo al momento de la floracin se obtiene para Azospirillum
spp la mayor relacin E/R (Endorizsfera/

Rizsfera) de 480 para luego caer bruscamente, pero a la vez ocurre un incremento en
la relacin R/S (Rizsfera/Suelo) para
Azotobacter spp.
Figura 4. Variacin E/R (Azospirillum spp) R/S (Azotobacter spp) durante

el desarrollo del maz (Zea mays L).

No obstante la variacin de la relacin R/S del Azotobacter spp. ms recae

en la variacin de la poblacin de esta bacteria en el suelo libre de la influencia
radicular donde esta expuesta a las variaciones del medio (humedad, temperatura)
mientras que a nivel del suelo rizosfrico
la variacin poblacional del Azotobacter spp.
es gradual.
De manera similar el aporte de estas
bacterias al adecuado desarrollo del maz se
realizar de manera secuencial, en el periodo de floracin ocurre mayor aporte de
Azospirillum spp y en el siguiente estado,
Cuadro 4:
229
llenado de granos, el aporte del Azotobacter

spp. sera ms sustancial.
Es probable que la actividad de
Azospirillum spp, Azotobacter spp este complementada con la ocurrencia de otros procesos biolgicos los que de una manera conjunta contribuyan al desarrollo del maz. Al
respecto, (4) determin la presencia de
micorrizas en la rizsfera del maz en la misma zona de estudio.
En el cuadro 4 se muestran los valores
de los parmetros de crecimiento del maz de la
parte area determinados en cada muestreo.
Parmetros del crecimiento del maz (Zea mays L)

ESTADIO
PESO FRESCO gr
(*) X 4 PLANTAS
PESO SECO gr (*)

X 4 PLANTAS
ALTURA cm
X 4 PLANTAS
PLANTULA
8.75
0.525
10.25
FLORACION
559.75
66.75
153
LLEN.GRANO
1273.63
213
152.67
MAD.FISIOLOG.
776.77
307.67
176
(*) Peso total de la parte area

ESTIMACIN DEL RENDIMIENTO
Se realiz con las muestras obtenidas en el 4to muestreo (Junio) el cual equivale
al periodo de madurez fisiolgica del maz y
en la que se ha acumulado el 92% de la materia seca del maz (15).
Se estim la densidad de plantas en
el rea con la delimitacin de una seccin de
1,2 x 2,20 m en los cuales se contabiliz en
promedio 14 plantas, el cual corresponde a
una densidad de 53000 plantas ha-1.
En base al rea que ocupa 1 planta y a la biomasa obtenida de granos secos
(promedio de 4 plantas) se infiri un rendimiento en granos de 7.4 t ha-1

La obtencin del rendimiento reportado (7.4 ton ha -1) debemos tomarlo con precaucin por haber sido obtenido a partir de
un rea(1.2m x 2.2m) representativa en la
zona en estudio, el cual mediante la
extrapolacin por medio de la regla simple de
tres expres el valor obtenido en ton ha-1, por
lo que es probable la sobreestimacin del valor
indicado. De este modo es factible asumir una
reduccin mayor del 50% en los rendimientos reportados, an as se obtendran rendimientos adecuados, tomando como referencia que el rendimiento promedio nacional del
230
maz amilceo de grano seco es alrededor

de 1 ton ha-1 (19)
Con respecto al rendimiento obtenido cabe mencionar que (4) infiri un rendimiento de 6,39 ton ha -1 para la misma zona
(Oyolo - Ayacuho) haciendo la observacin
que en dicho periodo hubo dificultades con
respecto al manejo del riego durante el periodo vegetativo del cultivo.
Se puede deducir que al trmino de
cada campaa, descontando el consumo realizado por el ganado, queda una buena cantidad
de rastrojo (follaje + races) el cual junto a los
residuos provenientes de campaas anteriores
constituye un buen sustrato, tanto para las propiedades fsicas del suelo como en el
favorecimiento de la actividad microbiana en el.
La obtencin de rendimientos adecuados para la zona en estudio, nos refiere
que en aquella zona se ha establecido a lo
largo de los aos un delicado y frgil equilibrio en el sistema planta - suelo - micro-organismos, el cual aunado a un adecuado manejo del cultivo contribuyen a la obtencin de
rendimientos adecuados.
CONCLUSIONES
1. Con los medios y mtodos utilizados se
ha establecido la presencia de
Azospirillum spp y Azotobacter spp. tanto en la endorizsfera como en el suelo
rizosfrico del maz (Zea mays L.)
2. Tambin se ha determinado la presencia
de Azotobacter spp a nivel del suelo libre
de la influencia radicular del maz (Zea
mays L)
3. Se estableci una variacin estacional de
las bacterias rizosfricas fijadoras de nitrgeno acorde con el estado fisiolgico
del maz, de este modo, a nivel de la floracin se obtiene la mayor poblacin de

Azospirillum spp en la endorizsfera
mientras que la mayor poblacin de
Azotobacter spp en la rizsfera se dio en
el estado de llenado de granos.
4. Se determin los coeficientes Endorizsfera/Rizsfera (E/R - Azospirillum
spp) y Rizsfera/Suelo (R/S Azotobacter spp) en el que se obtuvo el
mayor valor E/R en el estado de floracin: 418.42 mientras que en el llenado
de granos se obtuvo la mayor relacin R/
S: 282.14; estos valores nos indican la
influencia selectiva y secuencial del sistema radicular del maz con respecto a
estas bacterias.
5. Bajo las condiciones de cultivo del maz
(adicin de estircol y rastrojos) que se
practica en la zona en estudio se ha inferido un rendimiento de maz en grano
seco de 7.4 t ha 1.
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233
COMPORTAMIENTO PRODUCTIVO Y REPRODUCTIVO DE CODORNICES (Coturnix

coturnix japnica L.) EN POSTURA ALIMENTADAS CON ALGARROBO
(Prosopis pallida) EN LA ETAPA DE DESARROLLO
Marcel Montalvo1
Pedro Ciriaco2
RESUMEN
Se estudi el efecto de diferentes proporciones (0, 5, 10 y 15%) de algarrobo molida y
tamizada en dietas de desarrollo (0 6 semanas) de codornices japnicas, no encontrndose
diferencias significativas para el peso corporal, ganancia de peso, consumo de alimento,
conversin alimenticia, mortalidad, pero la dieta con 15% de algarrobo proporcion un menor
costo de desarrollo. Luego se estudi el efecto que podra causar las dietas de crecimiento con
algarrobo en la fase productiva y reproductiva de las aves, durante tres meses de evaluacin.
No se encontraron diferencias significativas para el consumo de alimento, porcentaje de postura, masa de huevo, conversin alimenticia, fertilidad, incubabilidad y natalidad. Los resultados
indicaron que el nivel de 15% de algarrobo en las dietas de desarrollo no afect el comportamiento productivo y reproductivo de las codornices.
SUMMARY
The effect of different levels (0, 5, 10 and 15%) of ground sifted carob bean was
studied in japanese quail growing diets (0 6 week). There were not significant differences
in body weight, gain weight, feed consumption, feed conversin, mortality, but the diet
with 15% of carob bean gave a lower cost of growth. Then, the effect of the growing diets
with carob bean that could produce, in the productive and reproductive phase was studied
during three months. There were not significant differences in feed consumption, laying
percentage, egg mass, feed conversion, fertility, hatchery and birth weight. The results
indicated that the 15% level of carob bean did not affect the japanese quail productive and
reproductive behavior.
1
Ingeniero Zootecnista. Prctica Privada.
Profesor Auxiliar. Departamento de Produccin Animal, Facultad de Zootecnia (UNALM)
234
INTRODUCCIN
Los insumos tradicionales para la
elaboracin de las dietas para aves, tienen la
tendencia a elevar sus precios constantemente, debido a que la mayora se importa y
la procedencia nacional es insuficiente. Una
de las fuentes alternativas que podran
disminuir los costos de produccin, es la vaina
de algarrobo. Se han realizado estudios sobre
el uso del algarrobo molido y tamizado en
dietas para pollos, gallinas, cerdos y patos,
obtenindose buenos resultados hasta ciertas
proporciones, pero no hay ningn estudio en
dietas para codornices.
El objetivo del presente trabajo fue
evaluar el algarrobo molido y tamizado en
dietas de desarrollo para codornices japonicas a travs de la ganancia de peso, consumo
de alimento, conversin alimenticia, porcentaje de mortalidad y costo de produccin del
desarrollo, adems de observar si la utilizacin
de algarrobo en la etapa de desarrollo podra
causar efectos posteriores durante la postura
y reproduccin, midiendo el porcentaje de
postura, masa de huevo, consumo de alimento, conversin alimenticia, fertilidad, incubabilidad y natalidad.
produccin al cuarto ao, en cosechas de

dos veces al ao, entre Enero a Marzo y de
Junio a Julio y su produccin puede alcanzar
hasta 180 Kg por rbol (Ferreira, 1987).
Recientes anlisis del valor nutritivo
del algarrobo han proporcionado los
siguientes datos: 13.13% de humedad,
9.65% de protena total, 0.33% de grasa total, 17.17% de fibra cruda, 3.50% de ceniza,
58.47% extracto libre de nitrgeno (ELN),
con una energa bruta de 333 Kcal/100 g,
0.45% de calcio y 0.62% de fsforo
disponible (Melgarejo, 1996). El algarrobo
presenta taninos en la cscara en cantidades
pequeas que disminuye a medida que
madura la vaina (Gmez y Albuquerque,
1987).
La utilizacin del algarrobo en la alimentacin avcola, ha tenido diferentes respuestas, los pollos de carne pueden aceptar
hasta un 10% como mximo en las diferentes etapas de desarrollo (Reynoso, 1992),
mientras que los patos criollos lo han utilizado hasta un 20% en toda la etapa de engorde
(Melgarejo, 1996). En la alimentacin de gallinas ponedoras se ha utilizado hasta un 15%
sustituyendo en un 90% al subproducto de
trigo (Pimentel, 1991).
El algarrobo es una planta arbrea
y rstica (resistente a sequa y altas tempera-turas) que se desarrolla en zonas ridas
y semiridas del per (Weberbauer, 1945).
Se desarrolla muy bien en zonas con 252 a
200 mm de lluvia por ao, humedad relativa
de 50% y temperatura de 23 a 27C, suelos
pobres en materia orgnica, pedregosos,
arenosos y llanos con pH 7, siendo en el
Per las zonas mas productoras: Ica, La
Libertad, Lambayeque, Piura, Tumbes, Lima,
Arequipa, Cajamarca y Amazonas (Castro,
1982). Su fruto es una vaina indehiscente,
polisperma y larga, inicindose su
Las codornices nacen con un peso

promedio de 7.5 g (Prez y Prez, 1974, Agreda, 1978 y Bissoni, 1993). A los cuatro das
de edad pueden duplicar ste peso inicial,
mientras que a los 28 das pueden haber aumentado hasta 10 veces (Ariki, 1997). El peso
corporal que logran alcanzar a los 45 das de
edad es de 120 g las hembras y 100 g los
machos. La diferencia en los pesos es debido al gran desarrollo ovrico que logran las
hembras al momento de postura (Lucotte,
1990).
El consumo acumulado del alimento
durante la etapa de desarrollo de la codorniz
COMPORTAMIENTO PRODUCTIVO YREPRODUCTIVO DE CODORNICES (CoturnixcoturnixjapnicaL.)

EN POSTURA ALIMENTADAS CON ALGARROBO (Prosopis pallida) EN LA ETAPA DE DESARROLLO
es variable entre los 500 g hasta 700 g

(Prez y Prez, 1974; Agreda, 1978;
Lucotte, 1990 y Bissoni, 1993). Sin embargo no hay muchos reportes indicando la conversin alimenticia, teniendo un ndice de
5.66 en el desarrollo de las codornices hasta los 42 das de edad. Para el porcentaje
de mortalidad, la variacin se halla entre 6 y
10% (Lucotte, 1990 y Ciriaco, 1996). Durante la etapa de postura, el consumo de alimento por ave por da, se halla en un rango
de 20 25 g (Prez y Prez, 1974; Lucotte,
1990 y Rodrgez Da Silva, 1992). Para la produccin de huevos es necesario una longitud del da de 16 horas donde pueden alcanzar porcentaje de postura superiores al 80%
(Ciriaco, 1996), es decir aproximadamente
300 huevos por ave por ao; pero el rango
de postura es entre 260 a 290 huevos/ave/
ao (Bissoni, 1993). Prez y Prez (1974)
indica que el peso del huevo vara entre 9 a
12 g segn la edad, alimentacin, condiciones climticas, etc., siendo el huevo del
8 al 10% del peso corporal de la hembra
(Ariki, 1997). En cuanto a la conversin alimenticia, Alquati (1980) indica que la codorniz produce 1 kg de huevo por 2.6 kg
de alimento, cuando se encuentran en plena produccin.
Las codornices alcanza la madurez
sexual entre los 40 y 42 das (Ariki, 1997;
Bissoni, 1993), sin embargo en nuestras
condiciones de Costa Central, Ciriaco (1996)
report que la codorniz inicia la puesta a los
45 das de edad. La codorniz puede empadrarse desde las seis semanas de edad,
a partir del cual, se obtendr un adecuado
nivel de fertilidad e incubabilidad de los huevos (Prez y Prez, 1974), siendo la relacin macho:hembra de 1:3 (Rodrguez Da
Silva, 1992). Cumpa (1995) encontr
incubabilidades de 80 a 90%, procedentes
de aves con alto porcentaje de fertilidad, por
235
otro lado, Lucotte (1990) manifiesta que una

eclosin del 80% puede considerarse muy
buena, mientras que Bissoni (1993) reporta
porcentajes de eclosin de 60 a 70%.
El presente estudio se realizo en la
Unidad Experimental de Avicultura de la Universidad Nacional Agraria La Molina con una
duracin de 15 semanas (seis en desarrollo
y nueve en postura). Para la etapa de desarrollo se utilizaron 1,800 cotupollos de la variedad japnica de un da de edad con un peso
promedio de 7.88 g proveniente de la misma
Unidad, los cuales fueron distribuidos al azar
en doce lotes equipados con comederos,
bebederos y campanas criadoras elctricas,
con 150 cotupollos en cada uno. Para la etapa de postura se eligieron al azar doce aves
(nueve hembras y tres machos), de cada lote
evaluado, resultando un total de 144 aves, los
cuales se distribuyeron en jaulas de estructura metlica y piso de alambre galvanizado
de 0.7 m2 de rea y 0.25 m de altura, equipado con comederos y bebederos lineales.
El alimento para las dos etapas fue
elaborada siguiendo las recomendaciones del
National Research Council (NRC, 1994), siendo suministrados las dietas y el agua ad
libitum. Se utilizaron cuatro dietas en la etapa de desarrollo, siendo una de control sin
algarrobo y tres con diferentes proporciones
de algarrobo (5, 10 y 15%). Para la etapa de
postura se utiliz un solo tipo de dieta, sin la
inclusin de algarrobo, con el objeto de evaluar si la utilizacin de algarrobo en la etapa
de desarrollo podra causar efectos en la etapa de productiva y reproductiva. Las dietas
se hallan indicadas en el Cuadro 1. Asimismo el anlisis proximal de las dietas experimentales se muestran en el Cuadro 2.
236
CUADRO 1: Dietas Experimentales de desarrollo

y postura Valor Nutritivo calculado
Porcentanje de algarrobo en la dieta
Ingredientes
Postura
10
15
Algarrobo moli do y tami zado
0.00
5.00
10.00
15.00
0.00
Maz amari llo
58.00
55.22
54.89
51.89
69.32
Subproducto de tri go
8.04
6.99
1.91
0.00
0.00
Torta de soya (45%)
18.00
16.84
17.23
17.15
9.30
Hari na de pescado (65%)
15.00
15.00
15.00
15.00
15.00
C arbonato de calci o
0.53
0.53
0.53
0.53
8.06
Sal comn
0.10
0.10
0.10
0.10
0.10
Premezcla de vi tami nas y

mi croelementos mi nerales*
0.20
0.20
0.20
0.20
0.20
C loruro de coli na [60%]
0.07
0.07
0.07
0.07
0.06
Promotor de creci mi ento
0.06
0.06
0.06
0.06
0.06
100.00
100.00
100.00
100.00
100.00
Total
N utrientes (% )
Energa Metaboli zable (Kcal/Kg.)
Valor N utritivo C alculado
2,934
2,906
2,924
2,900
2,980
Protena cruda
24.34
24.00
24.00
24.00
20.00
Meti oni na
0.55
0.53
0.52
0.51
0.49
Li si na
1.49
1.44
1.42
1.39
1.19
Meti oni na + C i sti na
0.88
0.85
0.83
0.80
0.75
Fi bra C ruda
3.71
4.13
4.19
4.57
2.26
C alci o
0.83
0.83
0.82
0.82
3.00
Fsforo di sponi ble
0.49
0.48
0.47
0.46
0.50
S odi o
0.20
0.20
0.20
0.20
3.00
* Aporte por Kg. de premezcla: Vitamina A (UI) 9,000,000, Vitamina D3 (UI) 2,000,000, Vitamina E
(UI) 10,000, Vitamina K3 (g) 3.00, Vitamina B2 (g) 4.00, Niacina (g) 30.00, Vitamina B12 (mg)
12.00, Acido folico (g) 0.55, Biotina (mg) 100.00, Manganeso (g) 65.00, zinc (g) 45.00, Hierro (g)
80.00, Cobre (g) 8.00, Yodo (g) 1.00, Silenito de sodio (g) 0.15.

237
CUADRO 2: Anlisis proximal de las dietas experimentales (%)

Postura
0
10
15
Humedad
10.64
10.54
10.40
10.38
10.48
Protena cruda
21.72
20.35
21.86
20.85
17.38
Extracto etereo
3.97
4.03
3.80
4.00
4.37
Fi bra cruda
2.67
2.87
2.40
3.83
2.00
C eni zas
8.00
7.55
7.85
7.65
11.30
53.00
54.16
52.69
53.29
54.47
Extracto li bre de ni trgeno
lidad, incubabilidad y natalidad como parmetros reproductivos.
Para la etapa de crecimiento se utilizaron 450 aves por tratamiento con 3 repeticiones.
Para el anlisis estadstico del experimento, se utiliz el Diseo completo al azar

y para la comparacin de promedios de tratamientos, la prueba de Tukey (Calzada, 1980).
Los controles de ganancia de peso,

consumo de alimento, conversin alimenticia,
mortalidad, se efectuaron semanalmente hasta la sexta semana del perodo experimental.
Al final se determin el costo de produccin
por codorniz levantada. Para la etapa de postura los controles realizados fueron: consumo de alimento, porcentaje de postura, masa
de huevo y conversin alimenticia como
parmetros productivos y porcentaje de ferti-
El comportamiento productivo de las
codornices en crecimiento (0 6 semanas)
alimentadas con diferentes proporciones de
algarrobo molido y tamizado en la dieta se
presenta en el Cuadro 3.
CUADRO 3: Comportamiento Productivo de la Codorniz en crecimiento

(0 6 semanas) alimentadas con algarrobo.
10
15
Peso corporal al naci mi ento (g)
7.65a
7.88a
7.83a
8.18a
Peso corporal a los 42 das (g)
124.92a
126.05a
125.01a
121.90a
Gananci a de peso (g)
117.27a
118.17a
117.18a
113.71a
C onsumo de ali mento acumulado (g)
551.53a
534.82a
563.80a
544.84a
C onsumo de protena (g)
119.79a
108.83a
123.25a
113.60a
4.80a
8.67a
9.33a
C onversi n ali menti ci a acumulada
4.70
Mortali dad acumulada (%)
6.44a
4.53
6.67a
4.81
238
Se puede apreciar que no existen

diferencias significativas para ninguno de los
parmetros evaluados y que al inicio del experimento se tuvo aves de pesos homogneos. Los resultados en peso corporal y ganancia de peso son mejores a los resultados
obtenidos por Agreda (1978), quien utiliz
insumos tradicionales en la elaboracin de
las dietas. Asimismo, el consumo de alimento acumulado son menores a los reportados
por Prez y Prez (1974), Agreda (1978) y
Bissoni (1993). Pero se asemeja a lo reportado por Lucotte (1990) bajo condiciones de un
buen manejo en instalaciones. La conversin
alimenticia es menor a lo encontrado por Agreda (1978). Por otro lado la mortalidad resulto
en menor porcentaje a lo indicado por Lucotte
(1990), pero coincide con el resultado obtenido por Ciriaco (1996) en condiciones de crianza con campanas elctricas en la etapa de
inicio.
Estos resultados permiten deducir la
tolerancia que tiene la codorniz al uso del algarrobo en su dieta, a pesar de que estas
dietas mostraron ligeramente menor contenido de energa, protena y aminocidos cal-
culados que el control y en general menores

niveles de protena cruda al anlisis proximal
que los requerimientos indicados en el NRC
(1994); siendo el consumo de protenas menor para una inclusin mayor de algarrobo en
la dieta, la cual no influy para determinar un
mayor consumo total de alimento. Esto puede explicarse por el alto contenido de harina
de pescado en todas las dietas, que suplementaria adecuadamente los aminocidos
esenciales requeridos por la codorniz para un
adecuado desarrollo. Por otro lado los niveles
de fibra son ascendentes de acuerdo al contenido de algarrobo de los tratamientos y coinciden con la secuencia de mortalidades, a pesar de que no hay diferencias significativas,
los niveles altos de fibra en la etapa de desarrollo de las codornices pueden causar un efecto negativo (Prez y Prez, 1974).
En el Cuadro 4 se puede apreciar el
costo de produccin en la etapa de crecimiento (hasta las seis semanas de edad) por codorniz para cada tratamiento, el cual se calcul en base al costo de cotupollos, alimentacin, electricidad, agua, mano de obra y
depreciacin de instalaciones y equipos.
CUADRO 4: Costo de Produccin por codorniz alimentada con Algarrobo

Items
0
N de aves
Costo/ave (S/.)
450
5
450
10
450
15
450
1.00
1.50
1.50
1.50
Costo alimento (S/.)
322.64
288.36
279.80
245.18
Otros costos (S/.)2
135.00
135.00
135.00
135.00
N de aves logradas
421
420
411
408
Costo de produccin/ave (S/.)
2.16
2.08
2.10
2.03
1. Costos referidos al ao 2001

2. Incluye costo de calefaccin, cama, mano de obra, electricidad y depreciacin de instalaciones y
equipos.

El menor costo de produccin se

obtuvo en la dieta de 15% de algarrobo, siguiendo el de 5%, 10% y el control. Estos
resultados pudieron ser mejores, debido al
menor costo de las dietas con mayor proporcin de algarrobo, pero fueron influenciados
239
por el alto porcentaje de mortalidad ocurrida,

sobre todo en las dietas de menor costo.
Los efectos de la utilizacin del algarrobo en la etapa de crecimiento sobre la
postura se indican en el Cuadro 5.
CUADRO 5: Efecto de la alimentacin con algarrobo en la etapa

de desarrollo sobre la etapa de postura en codornices
Tratamientos
Parmetro
Consumo total de alimento (kg)

N de huevos producidos
Masa de huevo total (Kg)
Conversin alimenticia acumulada
0%
5%
56.70
56.70
1299
1257
10%
56.70
1353
15%
56.70
1194
12.99a
12.57a
13.53a
11.94a
4.36a
4.51a
4.19a
4.74a
72a
75a
70a
4.80a
Postura (%)
Fertilidad (%)
97a
4.53a
4.81a
Incubabilidad (%)
87a
86a
86a
70a
920a
836a
Natalidad (%)
N de cotupollos
73
948a
En el Cuadro 5 se puede apreciar

que el consumo de alimento fue constante
para todos los tratamientos con 25 g por
ave por da debido al manejo en el suministro de alimento para evitar desperdicio.
El rendimiento productivo y reproductivo de la codorniz no fue afectado por la
utilizacin del algarrobo en la alimentacin en
desarrollo. La masa de huevo no fue afectada,
deducindose que el tracto reproductivo de la
codorniz, alimentada con algarrobo se desarroll normalmente. Los porcentajes de postura obtenidas fueron ptimas y mejores a los
reportados por Lucotte (1990) a pesar de que
el anlisis proximal de la dieta de postura
76
955a
68
84a
mostr un contenido de protena inferior a la

recomendada por el NRC (1994). As mismo
el algarrobo no afect la ovognesis ni
espermatognesis por lo que el porcentaje
de fertilidad no fue afectado. Los porcentajes
de incubabilidad y natalidad fueron superiores
a los reportados por Lucotte (1990) y Cumpa
(1995), a pesar de que utilizaron insumos tradicionales en sus investigaciones.
CONCLUSIONES
Bajo las condiciones en las que se
realiz el presente trabajo de investigacin
se puede concluir lo siguiente:
240
1. El uso de algarrobo molido y tamizado

en dietas de desarrollo de codornices no
afect los parmetros productivos adems
no influy sobre ninguno de los
parmetros evaluados en la etapa de postura y reproduccin.
2. El menor costo de produccin en el desarrollo se obtuvo con la dieta de mas
alta proporcin de algarrobo.
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242
EVALUACIN ESTOCSTICA DE POLTICAS DE EXPLOTACIN

DEL AGUA SUBTERRNEA EN EL VALLE DE QUBOR
Vctor R. Miyashiro1 , Herv J. Jgat2 y Luis E. Mora3
RESUMEN
El Valle de Qubor se localiza en la parte central de Estado Lara - Venezuela, al sudoeste
de la ciudad de Barquisimeto. Tiene un rea de 970 Km2 aproximadamente y es rodeado por
montaas y colinas bajas, con terrazas planas y llanuras aluviales que forman el suelo del valle.
La fuente principal de agua para las actividades agrcolas, es el acufero de Qubor. Este acufero
es confinado originalmente en la parte sur y centro del valle y libre en la parte norte. Desde 1960,
la explotacin indiscriminada del agua subterrnea ha producido una disminucin continua de la
superficie piezomtrica. En este trabajo, la simulacin estocstica de los niveles de agua es
usada para evaluar el comportamiento del acufero para las d iferentes estrategias de explotacin.
En primer lugar, se realiza un anlisis geoestadstico de la capacidad especfica de 36 pozos a lo
largo del valle y se lleva a cabo simulaciones condicionales de este parmetro sobre una malla
rectangular por todo el acufero. Las capacidades especficas simuladas se transforman en
transmisividades del acufero a travs de una relacin lineal. Finalmente, un modelo de elemento
finito en estado permanente es utilizado para simular el flujo de agua subterrnea para cada uno
de los mil campos de transmisividad previamente obtenidos. Los mapas de niveles de agua para
una probabilidad de la ocurrencia dada, y de probabilidad de la ocurrencia para un nivel piezmetrico
dado son construidos. Finalmente, estos mapas se usan para elaborar una zonificacin del
acufero con base a la explotacin del agua subterrnea real y potencial del acufero.
SUMMARY
The Qubor Valley is located in the central part of Lara State - Venezuela, southwest of
the city of Barquisimeto. It has an area of approximately 970 km2 and is surrounded by mountains
and low hills, with smooth terraces and alluvial plains forming the valley floor. The main source of
1
Profesor auxiliar, UNALM. Universidad Nacional Agraria La Molina. Facultad de Ciencias. Departamento de Fsica y Meteorologa. Especialidad de Ingeniera Ambiental. Apartado 456. Lima 12.
Per. email: vmk@lamolina.edu.pe
Profesor ordinario, CIDIAT, Centro Interamericano de Desarrollo e Investigacin Ambiental y Territorial. Apartado 219. Mrida 5101.Venezuela. email: herve@cidiat.ing.ula.ve
Profesor ordinario, CIDIAT, Centro Interamericano de Desarrollo e Investigacin Ambiental y Territorial. Apartado 219. Mrida 5101. Venezuela. email: mluis@ cidiat.ing.ula.ve

243
water for agricultural activities is the Qubor aquifer. This aquifer was originally confined in the southern and central part of the valley and unconfined in the northern part. Since 1960, the indiscriminate
exploitation of groundwater has produced a continuous decrease of the piezometric surface. In this
paper, stochastic simulation of the water levels is used to assess the behavior of the aquifer for
different exploitation strategies. First, a geostatistical analysis of the specific capacity of 36 wells
throughout the valley is performed and conditional simulations of this parameter are carried out on a
rectangular mesh all over the aquifer. The simulated specific capacities are transformed in aquifer
transmissivities through a linear relationship. Finally, a finite element steady state model is used to
simulate the groundwater flow for each of the thousand transmissivity fields previously obtained.
Maps of water levels for a given occurrence probability, and of occurrence probability for a given
piezometric level are built. Finally, these maps are used to elaborate a zoning of the aquifer
on the basis of actual groundwater exploitation and of aquifer potentiality.
INTRODUCCION
Los modelos de simulacin numrica han llegado a ser una herramienta esencial
para explorar sistemas hidrogeolgicos, evaluar y predecir los impactos de una explotacin
prolongada del agua subterrnea. Pero, el modelo seleccionado lleva asociado una cierta
incertidumbre sobre la veracidad de la representacin del acufero. Adems, errores posibles
en la observacin de datos contribuyen con una incertidumbre en los parmetros del modelo.
Como consecuencia, se debe esperar tambin incertidumbre en los valores predichos por el
modelo.
La geoestadstica proporciona no slo la estimacin espacial de los parmetros
sino tambin una medida de la incertidumbre de dicha estimacin. Su aplicacin en el
estudio de las aguas subterrneas, permite medir el error de estimacin el cual trata de
minimizar, de forma tal que la determinacin de las recursos aprovechables posea una
precisin aceptable.
El Valle de Qubor es una zona altamente agrcola, para cuyo desarrollo ha sido necesario la explotacin del agua subterrnea con fines de riego. A causa de esa explotacin, a
partir de los aos 60, el Valle ha experimentado un deterioro en la cantidad y calidad del agua
subterrnea.
En el presente estudio, la aplicacin de una metodologa de simulacin estocstica,
con base en un modelo de simulacin de aguas subterrneas y de tcnicas geoestadsticas,
permite evaluar polticas de explotacin del acufero.
DESCRIPCIN DEL VALLE DE QUIBOR

El Valle de Qubor se encuentra ubicado en la parte central del Estado Lara, hacia el
sudoeste de la ciudad de Barquisimeto. Sus coordenadas geogrficas varan entre 095000 y
l00500 de latitud Norte y 693000 y 694500 de longitud Oeste. La superficie total del
Valle de Qubor se estime en 970 Km2. En la Figura 1, se muestra la ubicacin del rea de
estudio.
244
La regin posee caractersticas de un valle intramontano con una zona baja y plana,
rodeada de cerros altos y abruptos con escasa vegetacin xerfila, conocida como Valle de
Qubor, que se encuentra comprendida entre los 600 y 800 msnm. La zona montaosa y el
basamento del relleno fluvio-lacustre estn formados por rocas cretceas y terciarias. La
precipitacin promedio anual vara entre 400 y 500 mm, la temperatura media anual oscila
entre 21C y 28C y la evaporacin media anual vara entre 1700 mm y 3200 mm. El valle
presenta tres grandes quebradas que drenan de sur a norte desembocando en la quebrada
Las Races, afluente del ro Tocuyo.
El acufero, con una extensin de aproximadamente 240 km2, es la fuente principal
de agua para las actividades agrcolas (Torres, 1993). El acufero posee un espesor que vara
de 120 m en el lado norte a 230 m en el lmite sur y un espesor saturado que vara entre 90
y 110 m de norte a sur. En la parte norte, la profundidad del agua subterrnea flucta de 20 m
a 86 m y haca el sur vara de 80 m a 135 m. La explotacin indiscriminada del agua ha
producido un descenso de los niveles, que alcanz los 95 m en la parte del sur durante 19631987 (Alvarado, 1989). El agua subterrnea presenta un deterioro significativo de su calidad
con una conductividad elctrica promedio sobre los 1350 mmhos, comparado con los 500
mmhos en 1963 (Mora, 1996).
Figura 1. Ubicacin de la zona de estudio

245
246
ANALISIS ESTRUCTURAL Y ESTIMACIN DEL VARIOGRAMA

El variograma es considerado como una funcin modificada de la covarianza o funcin
de autocorrelacin de la teora de las funciones aleatorias.
La estimacin del variograma se realiza con base en los datos y la estructura del
fenmeno a partir de la ecuacin siguiente:
(1)
donde es el variograma experimental, Z(xi) son los valores observados en los puntos xi, en los
que se dispone de datos tanto en xi como en xi + h, N(h) es el nmero de pares de puntos
separados por una distancia h.
Con frecuencia el variograma es discontinuo en el origen, con un salto finito denominado efecto de pepita puro. Si Z es estacionaria el variograma puede estabilizarse y alcanzar un
valor lmite constante llamado meseta. La distancia a la cual el variograma se estabiliza se
denomina alcance o rango y denota la zona de influencia en la cual la correlacin es nula.
Los modelos tericos son funciones que cumplen con ciertas condiciones y son usados en el ajuste de los variogramas. El modelo esfrico es uno de los ms empleado en la
prctica, su ecuacin est dada por :
(2)
Sus caractersticas son el alcance a y la meseta S mientras que la pendiente en el

origen es igual a 1,5 S/a y la distancia integral viene dada por :
(3)
Este modelo se caracteriza porque alcanza la meseta a una distancia finita (h = a). Es
indicativo de fenmenos continuos (o con un conjunto a lo sumo numerable de discontinuidades),
aunque no derivables.

247
SIMULACIN CONDICIONAL POR EL MTODO DE LAS BANDAS ROTANTES

El mtodo de las bandas rotantes fue desarrollado por Matheron (1973) citado por
Samper y Carrera (1990). El mtodo se basa en generar simulaciones a lo largo de una serie
de lneas en el espacio en vez de simular la funcin aleatoria bidimensional o tridmensional.
Luego, a cada punto en el espacio se le asigna la suma ponderada de los valores simulados en
cada una de las lneas.
En un sistema de coordenadas X-Y se generan una serie de lneas i cuyo azimut i es
una variable aleatoria uniformemente distribuida entre 0 y 2. Cada lnea i genera una funcin
aleatoria unidimensional de media nula y covarianza C1(hi), donde hi es la coordenada a lo largo
de la lnea i. Si N es un punto de la regin donde se desea simular Z(x), N se proyecta sobre las
lneas y se le asigna un valor Zi(hNi) correspondiente a la contribucin de la lnea i, donde hNi es
la proyeccin de N sobre la lnea i, ui es el vector unitario a lo largo de la direccin i, con lo que
hNi = xN . ui donde (.) es un producto escalar. Si L es el nmero total de lneas, el valor simulado
en el punto N viene dado por
(4)
donde Zi y ZS, tienen media nula.

como:
Journel y Huijbregts (1979), obtienen C1(h) en el caso tridimemional a partir de C(h)
(5)
donde h es un escalar. Para el caso bidimensional la relacin es ms complicada (Samper y

Carrera, 1990).
(6)
ya que C1(h) no es una funcin explcita de C(h) como en el caso tridimensional.

Las condiciones expresadas en las ecuaciones (5) y (6) son obtenidas cuando el
nmero de lneas L tiende a infinito y su orientacin i es aleatoria con distribucin uniforme.
Journel y Huijbregts (1979) demuestran que dichas relaciones son vlidas an cuando las
lneas se distribuyen uniformemente con orientaciones qi no aleatorias, en donde la covarianza
de los valores simulados converge ms rpidamente hacia la covarianza deseada C(h) por lo
que esta disposicin de las lneas es preferible.
248
MODELAJE DEL FLUJO DE AGUA SUBTERRNEA POR ELEMENTOS FINITOS

La ecuacin de continuidad para el flujo de agua subterrnea en un acufero confinado,
anisotrpico, tridimensional, en rgimen permanente puede ser expresado como:
(7)
donde h representa la carga hidrulica total y K la conductividad hidrulica.

Despus de discretizar la ecuacin diferencial del flujo correspondiente al rgimen
permanente se obtiene:
Ah=b
(8)
donde h es el vector de los niveles piezomtricos en los N nodos de la malla de elementos

finitos, b es el vector trmino independiente que engloba las fuentes y sumideros as como las
condiciones de frontera y A es una matriz simtrica (N x N) de conductancias entre los nodos
que dependen de la geometra y de las conductividades hidrulicas o transmisividades. En el
caso del flujo horizontal, los valores de la matriz A son funciones lineales de las transmisividades
de los elementos.
Entonces si las transmisividades constituyen un proceso estocstico, el sistema lineal de ecuaciones se convierte en un sistema lineal de ecuaciones estocsticas y los niveles
pasan a ser variables aleatorias. Una forma de resolver este sistema de ecuaciones estocsticas
consiste en desarrollar la variable dependiente h en series de perturbaciones de los parmetros
(transmisividades) respecto a los valores esperados. Este desarrollo en serie se utiliza posteriormente para deducir los momentos estadsticos (normalmente los dos primeros) de h en
funcin de los momentos de los parmetros.
METODOLOGA
La metodologa utilizada considera las siguientes etapas:
1.
Realizar el anlisis estructural de los parmetros hidrogeolgicos.
2.
Construir un modelo numrico que permita calcular los niveles conocidas las
transmisividades, bajo condiciones de flujo permanente.
3.
Realizar la simulacin condicional mediante el mtodo de las bandas rotantes.
4.
Efectuar la simulacin estocstica mediante el modelo numrico construido.

249
APLICACIN AL VALLE DE QUBOR

En la figura 2, se presenta la ubicacin de los 36 pozos utilizados en el anlisis
siguiente.
Figura 2. Ubicacin de los pozos seleccionados en el Valle de Qubor
250
Anlisis estructural.
Se dispone de datos de capacidad especfica en 36 pozos de los cuales slo 12
poseen valores de transmisividad. Con el objeto de determinar valores adicionales se realiz
una regresin de la transmisividad (T) con la capacidad especfica (CE), de la forma:
T = aCE
(9)
donde T se expresa en m2/d y CE en m3/d/m.

El valor obtenido para a fue 5,0878. El coeficiente de correlacin r2 fue de 0,751 y el
error cuadrtico medio 2, fue de 0,617.
Los resultados de la prueba de normalidad Smirnov-Kolmogorov para la CE y la variable
transformada (logaritmo de CE) muestran que siguen una distribucin normal, obtenindose un
valor observado mximo de 0,216 y 0,117201 respectivamente, ambos muy cercanos al valor
crtico establecido de 0,226. La conclusin de la prueba fue de aceptacin del ajuste.
Los resultados obtenidos muestran que el logaritmo de CE posee un mejor comportamiento que CE. Dado que ambos tienden a distribuirse normalmente, es ms conveniente
trabajar con el logaritmo de la variable debido a su estabilidad (Neuman, 1982 citado por Samper
y Carrera, 1990). La ecuacin (9) fue utilizada para aumentar la base de datos de transmisividades
durante la simulacin condicional.
En la Figura 3, se muestra el ajuste del variograma a un modelo esfrico obtenido
mediante el programa VARIOWIN (Pannatier, 1993). Respecto al variograma experimental se
debe destacar que el efecto de pepita puro de 0,195 implica una variabilidad errtica, tal vez
como consecuencia de la medicin de los datos. La meseta indica que el variograma alcanza su valor lmite constante a 1,3 lo que coincide con la varianza del logaritmo de CE. Por
ltimo, el alcance de 3456 m indica la zona de influencia ms all de la cual la correlacin es
nula.
Simulacin condicional.
Durante el desarrollo de esta etapa, se utilizo el programa COSIM (Rusell, 1984),
basado en la mtodo de las bandas rotantes, el cual genera simulaciones no condicionales
y condicionales. El programa fue modificado por Mora (1996) para que slo generar simulaciones condicionales. En el caso del variograma obtenido se asume una distancia de 500 m
como tamao de malla promedio. La Figura 4, muestra los valores promedio de 100, 500,
1000 simulaciones de T. En ella se observa que las 100 simulaciones presentan un comportamiento ms errtico; sin embargo, las 500 simulaciones reproducen las tendencias observadas en las 1000 simulaciones, presentando variaciones promedio menos errticas que las
100 simulaciones.

251
Figura 3. Variograma del logaritmo de CE ajustado a un modelo esfrico
Modelaje del acufero del Valle de Qubor.

La simulacin del acufero se efectu utilizando el programa Micro-FEM v 2.0 (Hemker
y Van Elburg, 1987) el cual est diseado para simular acuferos monocapas o multicapas
en rgimen permanente, haciendo uso del mtodo de elementos finitos. El acufero fue
discretizado en 684 elementos triangulares y 380 nodos. Los pozos han sido ubicados aproximndolos a los nodos ms cercanos, de acuerdo a sus coordenadas. Las dimensiones de la
malla corresponden a la utilizada en la simulacin condicional. Para la calibracin inicial, la
transmisividad considerada fue el promedio de los valores determinado por las 1000 simulaciones. Los niveles corresponden al perodo de Agosto a Octubre de 1995. La descarga
producida por los 36 pozos asciende a 71.504,64 m3/d. Como recarga se considero la hallada por Torres (1993) que fue de 61.500 m3/d. Los sectores sur y sudeste se han considerado
como zona de recarga.
252
Figura 4. Mapas de valores promedio de simulaciones de la transmisividad

en el Valle de Qubor

253
El proceso de calibracin ha consistido en estimar la recarga manteniendo los valores

de transmisividad. La recarga inicial fue sucesivamente modificada, buscndose un mejor balance hdrico y que reprodujera lo ms fielmente posible los estados del acufero. La recarga
determinada fue de 71.505 m3/d, igual a la descarga segn condicin de rgimen permanente.
Simulacin estocstica del acufero del Valle de Qubor.
Los valores de transmisividad asumidos fueron los determinados por las 1000 simulaciones, que introducidos al modelo de simulacin numrica, produjeron 1000 posibles realizaciones de los niveles del agua subterrnea para el acufero del Valle de Qubor en rgimen
permanente y manteniendo la explotacin actual.
Probabilidad de encontrar un nivel determinado en un punto de muestreo.
En la Figura 5, se presenta el mapa de isoprobabilidades para un nivel piezomtrico
promedio superior a 576 m. En l, se observa qu la zona central del acufero, en donde se
ubican la mayor densidad de pozos presenta las probabilidades ms bajas de encontrar
valores superiores a 576 m; por el contrario, las zonas circundantes a la misma contienen
las probabilidades ms altas debido a la escasa cantidad de pozos de explotacin.
Determinacin de niveles para una probabilidad dada.

La Figura 6 muestra los niveles del agua subterrnea para una probabilidad de ocurrencia de 90%. Se puede observar que los niveles se encuentran comprendidos entre las cotas
530 y 690 msnm.
254
Figura 5. Mapa de isoprobabilidades de encontrar un nivel superior a 576 m

255
Figura 6. Curvas de contorno del agua subterrnea para una probabilidad de 90%
En la Figura 7, se muestra el mapa de curvas de igual valor del error de estimacin

para los niveles piezomtricos del acufero del Valle de Qubor. El mapa de errores de estimacin indica una elevada incertidumbre (13,34 m) en el sector Sudeste con una gran reduccin
de los errores (1,06 m) haca el centro del acufero, debido a que es la zona donde se
concentra la mayor densidad de los pozos de explotacin. El valor medio del error de estimacin es de 3,34 m.
256
Figura 7. Mapa de errores de estimacin de los niveles piezomtricos
Zonificacin
La figura 8, presenta la zonificacin del acufero para definir el uso potencial de agua
subterrnea en el valle de Qubor, considera la probabilidad de encontrar un nivel superior a 576
m y su explotacin actual. La zonificacin obtenida es:
- Zona I: disponibilidad moderada y explotacin intensiva
- Zona II: disponibilidad moderada y explotacin semi-intensiva
- Zona III: disponibilidad alta y explotacin no intensiva.
El estudio ha permitido comprobar que las zonas de explotacin intensiva generalmente corresponden a zonas con problemas de salinidad, descritas por Alvarado en 1989.

Figura 8. Zonificacin final del acufero del Valle de Qubor
257
258
CONCLUSIONES
1. El uso de probabilidades de encontrar un valor determinado de una variable puede convertirse en un instrumento que ayude a reforzar la toma de decisiones con respecto a los fines
de gestin que se desee realizar en el manejo del recurso. Los mapas producidos mediante esta metodologa pueden aportar nuevos criterios de evaluacin del impacto producido
por una explotacin intensiva de un recurso, como es el caso del agua subterrnea, y se
pueden aplicar a otros recursos naturales. El mapa de errores de estimacin se puede
utilizar para minimizar el grado de incertidumbre y ser un instrumento que complemente la
informacin proporcionada por los mapas anteriormente descritos.
2. Los mtodos geoestadsticos no se deben considerar como sustituto del estudio cualitativo, sino como una herramienta complementaria, que debe controlar los resultados del
primero y permitir cuantificar y proporcionar informacin que puede escapar del alcance del
estudio cualitativo. As, las tcnicas geoestadsticas utilizadas en la evaluacin de la poltica de explotacin del acufero del Valle de Qubor complementan y refuerzan estudios
anteriormente realizados. La solucin de los problemas que plantea la explotacin intensiva del acufero del Valle de Qubor no es ni fcil ni inmediata por sus implicaciones tcnicas, econmicas, sociales y polticas. En su estudio se plantea un gran reto, en cuanto a
la necesidad de implementar modelos de simulacin de estos procesos, y en cuanto a la
formulacin de las alternativas posibles para su solucin.
BIBLIOGRAFIA
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Ambiente y de los Recursos Naturales Renovables. Caracas.
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Torres. G. A. 1993. Evaluacin de los recursos de agua subterrnea en el Valle de Qubor,

Estado Lara. Tesis M. Sc. Mrida: CIDIAT.
259
ETIOLOGA DE LA PUDRICION NEGRA DE LA PIA Y PREVENCION

POR TRATAMIENTO QUIMICO1
2
Jorge Hugo Villachica Vivanco , Carlos Alberto Cadenas Giraldo3
ABSTRACT
Villachica, J.H. and C.A. Cadenas. 2001. Etiology of Pinneaple Black Rot and Prevention by
Chemical Treatment.
Fungi Thielaviopsis paradoxa (Of Seynes) Hohrel, causing Black Rot of Pineapple (Ananas
comosus L. Merr), was isolated and identified. Diverse contact and systemic fungicides were
evaluated to determine their effectiveness in the prevention of the disease. Thirteen fungicides
were used those which were evaluated in vitro by the poisoned food technique, being used two
concentrations for each product. Of the test in vitro nine fungicides were selected for the postharvest chemical treatment test, which were: captan, benomyl, chlorothalonil, thiophanatometil,
triadimefon, prochloraz, triflumizol, bromuconazol and difenoconazol. The selected fungicides
were those that inhibited in 100% the growth of the mycelium and those that statistically,
according to Duncan Test had turned out to be similar to these. For the test of chemical
treatment of the fruits the fungi was inoculated in the recently cut peduncle of the harvested
fruits. The inoculated fruits were disinfected by immersion in diverse solutions of the fungicides
used, being carried out in total four treatments for each fungicide: two concetrations for each
one and two different times from the inoculation: immediately after and at the three hours of
having inoculated. The fungicides that in the two used doses prevented in the fruits 100% the
infection of T. paradoxa at the two times of immersion were: benomyl, triadimefon, prochloraz,
triflumizol, bromuconazol, difenoconazol.
1
Parte de la Tesis para optar el ttulo de Ing. Agrnomo de H. Villachica, realizado en el laboratorio
del rea de Fitopatologa del Dpto. de Entomologa y Fitopatologa de la Universidad Nacional
Agraria La Molina, y en el Fundo de Agrcola Italia S. A. C. en San Ramn.
Egresado de la Facultad de Agronoma de la Universidad Nacional Agraria y Gerente General de

Agrcola Italia.
Docente del Dpto. Acadmico de Entomologa y Fitopatologa de la Universidad Nacional Agraria

La Molina.
260
RESUMEN
Se aisl e identific el hongo Thielaviopsis paradoxa (De Seynes) Hohrel, causante de
la Pudricin Negra de la Pia (Ananas comosus L. Merr), y se evaluaron diversos fungicidas de
contacto y sistmicos para determinar su efectividad en la prevencin de la Enfermedad. Se
emplearon trece fungicidas los cuales fueron evaluados in vitro mediante la tcnica del alimento envenenado, emplendose dos concentraciones para cada producto. De la prueba in vitro
se seleccionaron nueve fungicidas para la prueba de tratamiento qumico post-cosecha, los
cuales fueron: captam, benomilo, clorotalonil, tiofanatometil, triadimefon, procloraz, triflumizol,
bromuconazol y difenoconazol. Los fungicidas seleccionados fueron aquellos que inhibieron en
un 100 % el crecimiento del micelio y aquellos que estadsticamente, segn Prueba de Duncan,
haban resultado ser iguales a stos. Para la prueba de tratamiento qumico de los frutos se
inocul el hongo en el pednculo recin cortado de los frutos cosechados. Los frutos inoculados fueron tratados por inmersin en diversas soluciones de los fungicidas empleados, realizndose en total cuatro tratamientos por cada fungicida: dos dosis por cada uno y dos tiempos
diferentes desde la inoculacin: inmediatamente despus y a las tres horas de inoculados. Los
fungicidas que en la dos dosis empleadas previnieron en un 100 % la infeccin de T. paradoxa
en los frutos a los dos tiempos de inmersin fueron: benomilo, triadimefon, procloraz, triflumizol,
bromuconazol, difenoconazol.
La pia (Ananas comosus L. Merr)

variedad Cayena Lisa es un cultivo que ao
tras ao adquiere mayor importancia para la
Selva Peruana por su rentabilidad y a su demanda en el mercado internacional. La rentabilidad del cultivo se ve disminuida por diversos problemas fitosanitarios, una de las
ms importante la Pudricin Negra de la
Pia (PNP) causada por Ceratocystis
paradoxa (Dade) Moreau cuyo estado
conidial es Thielaviopsis paradoxa (de
Seynes) Hohnel.
los frutos, puede producir la prdida de toda

la cosecha. Dickson, citado por Py et al.
(17), reporta por primera vez a C. paradoxa
en 1931, sealando que dicho hongo haba
causado pudricin con prdidas considerables
de diversas frutas en Australia durante al menos 20 aos, y que el mismo tipo de pudricin
haba sido observado en otros pases productores de pia. Segn Ploetz et al (16), Ellis (5)
y Morgan & Jones (14), el hongo Thielaviopsis
paradoxa (de Seyn) Hohn es la forma
anamrfica del patgeno que causa la PNP.
En el Per se han observado frutas con sntomas similares a los producidos por T. paradoxa.
Py et al (17) considera que T.

paradoxa puede llegar a producir grandes
prdidas econmicas ya que afecta a toda la
planta, a los hijuelos usados como semilla, a
las hojas y principalmente al fruto donde produce deterioro de la pulpa hacindolo no apto
para el consumo humano ni para la industria;
menciona adems que entre todos los problemas postcosecha Thielaviopsis es el que
puede llegar a causar mayores prdidas econmicas y en algunos casos, si no se tratan
Py et al., (17) reporta que los primeros estudios para el control qumico de la
PNP en frutos fueron desarrollados por
Dickson a partir de 1930, trat frutos con cido benzoico en cristales al 3% diluido en
alcohol al 30% (22). Figueroa et al.() aaden que el cido benzoico se puede mezclar con talco u otro material inerte (80%).
Frossard (8) recomend el uso de la salicilanilida en la dcada de los sesentas pero
actualmente su produccin esta restringi-
INTRODUCCION

da. Frossard (4,5), recomienda el uso de

thiabendazol, triadimefon e imazalil; y
Maldonado (11,12) aade que se puede usar
el propiconazol y el benomyl. Cabot et al (3)
coinciden en el uso del triadimefon y el
imazalil. Cho et al., (4), realizaron ensayos
inoculando los frutos, concluyendo que los
mejores productos para prevenir la PNP fueron thiabendazol y carbendazima acidificada;
seguidos por el benomyl, el captafol y el captan. Ploetz et al., (16) mencionan a todos los
productos anteriores pero recomienda el
triadimefon. Py et al (17) mencionan al CGA64250 como otra alternativa para la desinfeccin de frutos. Todos los autores coinciden
en que es necesario realizar la desinfeccin
de los frutos en un tiempo no mayor de 8 - 10
horas despus de cosecha y recomiendan la
desinfeccin de las plantas de empaque, las
canastas de cosecha y todo equipo que pueda tener alguna fuente de inculo usando
cualquiera de los productos mencionados.
Los objetivos del presente trabajo
fueron: identificar el agente causal de la
Pudricin Negra de la Pia variedad Cayena
Lisa en el Per y determinar el mejor tratamiento qumico para la prevencin y control
de la enfermedad.
MATERIALES Y MTODOS
El aislamiento, identificacin, prueba de patogenicidad y prueba de fungicidas
in vitro se realizaron en el laboratorio de
Fitopatologa del Departamento de Entomologa y Fitopatologa de la Universidad Nacional Agraria La Molina.
1.
Aislamiento e Identificacin
del Patgeno
1.1 Aislamiento:
El aislamiento del agente causal de la
PNP se realiz a partir de frutos de pia
261
de la variedad Cayena Lisa cosechados en el Fundo Italia, ubicado en

Chanchamayo.
Las frutas de pia se lavaron con abundante agua potable, luego se sumergieron en una solucin de hipoclorito
de sodio al 0.1% durante 5 minutos.
Las frutas desinfestadas fueron partidas para extraer pequeas porciones
de tejido enfermo, las cuales fueron
desinfestadas en una solucin de
hipoclorito de sodio al 0.1 %, lavndolos luego con agua destilada estril y
una vez que estuvieron secas se cortaron en porciones mucho ms pequeas conteniendo tejido enfermo y tejido sano, y luego se sembraron en placas petri conteniendo el medio de cultivo Papa Dextrosa Agar (PDA).
Las placas sembradas se incubaron a
28 C por tres das. Una vez desarrollado el hongo, se efectuaron repiques
hasta obtener el cultivo puro el cual
fue sembrado en tubos inclinados conteniendo PDA y una vez desarrollado
fue conservado a 8 C. A partir de
este cultivo puro se efectuaron los repiques necesarios para las diversas
pruebas que se realizaron en el presente trabajo.
1.2 Identificacin:
La identificacin del hongo se realiz
de acuerdo las caractersticas
macroscpicas y microscpicas del
hongo aislado. Las caractersticas
macroscpicas que se evaluaron fueron velocidad de crecimiento de la colonia en PDA, color y aspecto de la
colonia. Las caractersticas microscpicas evaluadas fueron tipo, forma,
color y dimensiones de las estructuras presentes. Se utilizaron las claves
262
de Barnett & Hunter (1), Barron (2) y el

descriptor de Morgan & Jones (14) para
Ceratocystis paradoxa.
dosis cada uno, de diversas formulaciones y considerando los productos de contacto y sistmicos. Los
fungicidas utilizados y las dosis respectivas figuran en el Cuadro 1. Se
peso cada uno de los fungicidas segn la dosis recomendada y la mitad
de la dosis recomendada. Cada
funguicida depus de haber sido pesado fue vertido en 100 ml de PDA licuado, homogenizado y plaqueado. Una
vez que el medio solidific se sembr
en cada placa una rodaja de 8 mm de
dimetro conteniendo crecimiento
micelial del hongo. A las placas testigo no se les adicion funguicida alguno. Las placas sembradas se incubaron a 28 C y todos los das se midi
el dimetro de crecimiento, la evaluacin termin cuando en el testigo el
hongo haba desarrollado completamente en el medio de cultivo.
2. Prueba de Patogenicidad
La prueba se realiz en frutos de pia
Cayena Lisa procedentes del Fundo
Italia.
El hongo se multiplic en placas petri
conteniendo medio PDA y de las zonas de crecimiento en la placa se
extrajo, con un sacabocados, rodajas de 8 mm de dimetro las cuales
se utuilizaron para inocular los fruto
que haban sido previamente lavados
con agua potable, desinfestados en
hipoclorito de sodio al 1%, enjuagados con agua estril y secados. Se
realizaron dos tipos de inoculacin:
la primera en la base del pednculo y la segunda fue en la parte lateral del fruto. La inoculacin lateral fue de dos formas: con herida y
sin herida.
Las frutas inoculadas fueron colocadas dentro de bolsas plsticas, la cuales se sellaron para darles un ambiente semejante a una cmara hmeda
durante 4 das y a 26 C. Se realizaron observaciones diarias del desarrollo de los sntomas de la PNP, se compararon con los observados en campo y con los reportados en la literatura. Finalmente, a partir de la fruta inoculada, se procedi a realizar el
reaislamiento y reidentificacin del
agente causal.
3.
Pruebas de Fungicidas in vitro

En el presente experimento se utiliz
la Tcnica del Alimento Envenenado.
Se emplearon trece fungicidas, a dos
El Diseo estadstico usado en el experimento fue un Diseo Completo al

Azar con un total de 27 tratamientos,
constituido por 13 fungicidas, a dos
dosis cada uno y el testigo.
4.
Prueba de Tratamiento Qumico

Post-cosecha de Frutos
En el presente experimento se usaron nueve fungicidas seleccionados de
la Prueba de Fungicidas in vitro.
La cosecha de los frutos de pia se
realiz en un campo del Fundo Italia, San Ramn Chanchamayo, a las
6 a.m. Los frutos fueron llevados al
ambiente de seleccin y enjabado,
all se separ del pednculo mediante un corte al ras y luego se inocul
una porcin del PDA conteniendo
crecimiento micelial del hongo en la
base de fruto sobre el pednculo corta-

do. Previamente se haban preparado las

soluciones de fungicidas en baldes conteniendo 10 litros del preparado. Los
fungicidas y las dosis utilizados estn
presentados en el Cuadro 2 y en el Cuadro 3. Se realiz la inmersin de los frutos en las soluciones fungicidas a dos
tiempos despus de la inoculacin: inmediatamente despus de la inoculacin
(T1) y tres horas despus de la inoculacin (T2). La inmersin de cada fruto fue
de10 segundos. Despus de tratados los
frutos fueron colocados dentro de jabas
de madera, seis frutos por cada jaba,
constituyendo cada jaba un tratamiento. Las jabas fueron identificadas, trasladadas a Lima por carretera y almacenadas en conjunto en un almacn ventilado a condiciones ambientales (promedio de 20 C). A los siete das se procedi a evaluarlas, para lo cual a cada fruto
se le hizo un corte longitudinal para determinar el porcentaje de pudricin. La
escala usada para evaluar la pudricin
de frutos fue la propuesta por Rohrbach
y Schmitt (20), de la Sociedad Americana de Fitopatologa:
El diseo estadstico utilizado fue el
Diseo Completo al Azar (DCA). Usando nueve fungicidas, a dos dosis cada
uno y a dos tiempos de tratamiento despus de la inoculacin, ms un testigo
sin fungicida, en total hubo 37 tratamienGrado de infeccin: Porcentaje de Infeccin
( %)
Grado 1:
1 2
Grado 2:
3 5
Grado 3:
6 10
Grado 4:
11 20
Grado 5:
21 25
Grado 6:
26 50
263
tos ( 9 x 2 x 2 + 1). Cada tratamiento

tuvo 6 repeticiones, cada repeticin estuvo compuesta por un fruto de pia.
RESULTADOS
1.
Aislamiento e Identificacin
del Patgeno.
Las colonias desarrolladas presentaron abundante micelio compacto, inicialmente de color blanquecino y luego se fue tornando de un color marrn
claro hasta a un color negro. El patgeno creci sobre toda la superficie de
la placa petri a los 4 o 5 das de sembrado. Las observaciones microscpicas revelaron la presencia de micelio
constituido por hifas delgadas, rectas,
hialinas, de 6.2 um de grosor promedio, aunque algunas veces moderadamente divergentes. Los conidiforos
eran filides delgadas, originados lateralmente de las hifas, y separados por
una o dos septas basales, color hialino
a crema claro, con longitud promedio
de 190 um y dimetro de 9 um, disminuyendo en grosor hacia el pice. Las
conidias son cilndricas a ovaladas,
generalmente hialinas, tienen una longitud promedio de 12 um y un ancho
de 4 um. Tambin se observ la presencia de abundantes clamidosporas, las cuales se forman en cadenas siendo en su mayora cilndricas
a ovaladas, de color marrn claro a
oscuro, con un largo promedio de 20
um y un ancho de 14 um. (Figura 1).
No se observ el desarrollo de otros
tipos de estructuras.
Las caractersticas macroscpicas y
microscpicas observadas del hongo
aislado coinciden con lo reportado en
la literatura para el hongo Thielaviopsis
paradoxa.(1,2,14).
264
5.
Prueba de Patogenicidad:
Los sntomas que se observaron en
las frutas inoculadas fueron externamente exudacin de un lquido gelatinoso, ablandamiento del fruto, e internamente pudricin blanda en la pulpa,
de color amarillo oscuro a gris negruzco; los sntomas observados coinciden
con los reportados para la PNP. La enfermedad se desarroll ms rpido en
los frutos inoculados lateralmente.
3.
Prueba de fungicidas in vitro.

En la figura 2 se muestran los resultados de la prueba de fungicidas in vitro.
Los fungicidas que no permitieron o permitieron en un mnimo el crecimiento
del hongo en las dos dosis, fueron seleccionados para la prueba de tratamientos qumicos postcosecha de frutos.
El Anlisis de Variancia (ANVA) para la
prueba del Alimento Envenenado in vitro
indica que existen diferencias significativas entre tratamientos, entre fungicidas,
entre las dosis y entre la interaccin de
fungicidas y dosis. El Anlisis de Significacin Estadsticas de Duncan, determin similaridad entre los siguientes
fungicidas que inhibieron el crecimiento
de T. paradoxa a las dos dosis empleadas: clorotalonil, captan, benomil, tiofanatometil, bromuconazol, difenoconazol,
triadimefon, procloraz y triflumizole.
4.
Prueba de Tratamiento Qumico en

Postcosecha de Frutos de Pia
4.1 Inmediatamente despus de
la inoculacin:
En la figura 3 se puede observar los
porcentajes de pudricin causado por
T. paradoxa, en frutos de pia en los
diferentes tratamientos, a los siete das

despus de la inoculacin.
El Anlisis de Variancia (ANVA) para
la prueba de Tratamientos Qumicos
Postcosecha de Frutos desinfestados
inmediatamente despus de la inoculacin, indican que existen diferencias
significativas entre tratamientos,
fungicidas, entre dosis y entre la
interaccin de fungicidas y dosis.
4.2 Desinfectados tres horas despus de la inoculacin.
En la figura 4 se pueden observar los
pudricin causados por T. paradoxa, en
frutos de pia en los diferentes tratamientos, a los siete das despus de
la inoculacin.
El Anlisis de Variancia (ANVA) para
la prueba de Tratamientos Qumicos
Postcosecha de Frutos desinfestados
tres horas despus de la inoculacin,
indican que existen diferencias significativas entre tratamientos, fungicidas,
entre dosis y entre la interaccin de
fungicidas y dosis.
DISCUSION
Las caractersticas culturales y microscpicas del microorganismo aislado, coincidieron con lo reportado por los autores
como Barnett & Hunter (1), Barron (1),
Morgan & Jones (14), Ploetz & Zentmyer et
al (16) y Snowdon (21), para la especie
Thielaviopsis paradoxa. La forma encontrada
del hongo en el presente trabajo fue siempre
de fase anamrfica: Thielaviopsis. paradoxa
(De Seyn) Hohn; no encontrndose la forma
teleomrfica: Ceratocystis paradoxa (Dade)
Moreau, la cual nunca se encontr ni en los
frutos con sntomas de PNP ni en el cultivo
en PDA.

La prueba de patogenicidad permiti

cumplir con los postulados de Koch, puesto
que el aislamiento T. paradoxa reprodujo los
sntomas observados inicialmente en campo
y en laboratorio, las caractersticas culturales y microscpicas del hongo reaislado coincidieron con las del hongo inoculado, es
decir T. paradoxa. El cambio de la coloracin
inicial (amarillo oscuro) de la pulpa podrida a
la coloracin final (negro claro) se debe a la
presencia de clamidosporas producidas por
el hongo, las cuales tienen color oscuro. Es
importante anotar que en la prueba de
patogenicidad el avance de la pudricin fue
mayor cuando la inoculacin fue lateral (con
o sin heridas) y menor cuando fue en la base
del pednculo, esto se debi posiblemente al
mayor contenido de carbohidratos en la pulpa el cual favorece el crecimiento rpido del
hongo, en el pednculo hay mayor presencia
de clulas suberficas y tejidos ms compactos el cual no favorece el desarrollo de T.
paradoxa. Lateralmente el hongo puede penetrar por entre las cicatrices de los frutos simples o por heridas, en ambos casos alcanza
rpidamente la pulpa, donde la pudricin progresa ms rpido.
En la prueba in vitro se usaron trece
fungicidas, cada uno a dos dosis, la recomendada por el fabricante y la mitad de dicha
dosis. De este modo si todos los fungicidas
a la mayor dosis inhiban el crecimiento del
hongo tendramos otro parmetro de comparacin para determinar cuales seran los ms
efectivos a menos cantidad del producto.
En el grupo de los fungicidas de contacto tenemos que el Iprodione es el que mejor
funcion debido a que afecta la respiracin
celular del patgeno e inhibe la incorporacin
de timidina a su DNA, afectando la sntesis
del cido nucleico (9). El Clorotalonil tuvo similares resultados que el producto anterior,
acta formando una barrera protectora en la
superficie del fruto aplicado, impidiendo la
265
germinacin de esporas. El Mancozeb y el

Propineb tuvieron resultados similares debido a que actan de la misma forma bsicamente inactivando el proceso de respiracin
en la fase de gliclisis y ciclo de Krebs.
Los funguicidas sistmicos que
inhibieron en un 100% el desarrollo del hongo
fueron Benomil y Tiofanatometil, ambos pertenecientes al grupo de los Benzimidazoles,
y que actan interfiriendo en el proceso de la
divisin celular en la profase e inhibiendo el
proceso de oxidacin de la glucosa y el
acetato (9, 13); el Captan cuyo modo de accin es tanto fungicida como fungisttico favoreci el control del hongo debido a que afecta su actividad enzimtica hasta causar la
muerte celular, adems de inactivar los azufres y otros grupos, afectar el proceso respiratorio, el crecimiento y el metabolismo del
fsforo (13). Dentro del grupo de los triazoles
e imidazoles el nico que control en un 100%
fue el Triflumizole, los otros funguicidas
inhibieron en porcentajes mayores al 95% el
desarrollo micelial del hongo, su actividad
fungitxica es la sntesis del ergosterol de las
membranas celulares, causando la prdida
de los constituyentes citoplasmticos esenciales (9,13).
De todos los fungicidas evaluados,
el Mancozeb tuvo un comportamiento parecido al testigo, seguido muy de cerca por el
Propineb y Procimidona. Algunos fungicidas
a la dosis baja (mitad de recomendada por el
fabricante) no lograron inhibir completamente
el crecimiento del hongo lo cual nos indica
que no seran muy efectivos para un programa de manejo de la enfermedad, porque una
vez que pase el periodo de carencia el hongo
podra desarrollar rpidamente y causar grandes prdidas.
Para la prueba de tratamientos qumicos en campo se usaron nueve fungicidas
(clorotalonil, captan, benomil, tiofanatometil,
266
bromuconazol, difenoconazol, triadimefon,

procloraz y triflumizole) cada uno a dos dosis, la dosis recomendada por el fabricante y
la mitad de dicha dosis. Si todos los
fungicidas a la mayor dosis inhiban el crecimiento del hongo tendramos el otro parmetro
de comparacin, para determinar cuales seran los ms efectivos a menor dosis lo cual
se traduce en menores costos.
Para la prueba de tratamientos qumicos en campo se trat de mantener constante las variables no analizadas, es por eso
que los frutos desinfestados fueron puestos
en jabas iguales, y todas fueron almacenadas a las mismas condiciones medio ambientales y luego trasladadas a Lima por tierra en
un mismo vehculo. Durante el viaje tienen que
pasar por el abra de Anticona, Ticlio, 4800
m.s.n.m., con temperaturas menores a 12
C, segn Handenburg et al (10 ) y Frossard
(8 ) esto puede detener el crecimiento del
hongo mas no causar la muerte del mismo,
cuando las condiciones vuelven a la normalidad el hongo continuar su desarrollo.
Es importante mencionar que segn
Py et al (17) el pednculo debe cortarse al
ras del fruto para as no daar a los dems
frutos al empacarse. Esta prctica se realiza
en el ambiente donde se procesa la fruta, no
al momento de la cosecha, e inmediatamente despus se procede a la desinfestacin.
Este procedimiento se sigui en el presente
trabajo, la cosecha se realiz cortando el pednculo de 4 a 6 cm de la base del fruto y en
el ambiente de procesamiento se les corto al
ras inmediatamente antes de inocular el hongo. De este modo, si el existi inculo del
campo a nivel del pedculo, ste fue eliminado antes de ingresar a la pulpa. Py et al (17)
y Frossard (8) mencionan que es la principal
forma de ingreso al fruto.
Para la evaluacin tambin consideramos que si un fruto es infectado aunque
sea en 1% este ya no es til ya que no puede

ser comercializado en el mercado nacional y
menos an puede ser exportado. Esto quiere
decir que fungicida que no inhiba en un 100%
el desarrollo de la enfermedad no puede ser
recomendado.
Todos los productos utilizados tienen un periodo de carencia promedio de 10
das y considerndose que el fruto no llega
a ser consumido antes de 7 das, no habran problemas para su consumo. De todas
maneras los residuos presentes en un fruto
analizado, son un parmetro importante para
tomar en cuenta en un estudio posterior, especialmente si se destina para el mercado
internacional.
En los dos tratamientos de la prueba
de tratamientos qumicos post-cosecha: inmediatamente despus de la inoculacin
y tres horas despus, los resultados fueron similares entre s. El Captan y
Clorotalonil ambos pertenecientes al grupo de las Phtalamidas no inhibieron el crecimiento del hongo esto se puede deber a
que son productos de contacto, forman una
barrera superficial sobre el fruto pero no
penetran, como la inoculacin fue antes del
tratamiento, entonces el control del hongo no se realiz porque este ya estaba
dentro del tejido, pero en la prueba in vitro
los mismos productos si inhibieron el crecimiento del hongo, es decir, son
netamente de accin preventiva. Tambin
puede deberse a que son fungicidas usados ms en el follaje y al suelo. Es importante recalcar que este fungicida depende
mucho de las dosis en que se use y requiere para su accin de una solubilidad
inicial en lpidos. En este sentido la
fungotoxicidad se incrementa conforme se
incrementa la concentracin externa del
fungicida y encontramos que cuanto ms
grande es la espora, ms ser la cantidad
requerida para poder matarla. (13).

El otro fungicida que no inhibi el crecimiento del hongo fue el Cercobim, perteneciente al grupo de los Tiofanatos, los cuales se
consideran como los de mayor espectro de
accin por ser fungitxicos a una amplia gama
de hongos, pero como su modo de accin no
afecta la germinacin de las esporas puede que
no haya logrado controlar las clamisdosporas
presente en el inculo utilizado. (13).
Los dems fungicidas utilizados s
inhibieron en un 100% el crecimiento del hongo. Los triazoles e imidazoles actan
inhibiendo la sntesis del ergosterol, componente esencial de las membranas celulares
de los hongos, por lo tanto son de un amplio
espectro de accin, adems de ser
sistmicos. El Benomil tambin inhibe en
100% acta interfiriendo el proceso de divisin celular, ha sido recomendado mucho para
este patgeno. El Difenoconazol a la dosis
de 0,05 % tuvo un porcentaje de infeccin de
1 esto puede ser por algn error humano,
pero en todo caso esta dosis no es recomendable para el tratamiento en campo.
Es difcil que se pueda realizar la desinfeccin inmediatamente despus de la inoculacin, ya que en la prctica la inoculacin
puede ocurrir en cualquier momento, incluso
antes de cosechar el fruto, y para la desinfeccin deben de llevarse los frutos al ambiente de procesamiento. Por este motivo se
recomienda terminar de cosechar toda la parcela o todos los frutos maduros y llevarlos
inmediatamente al ambiente de procesamiento, donde deben cortarse todos los pednculos
al ras y debe de prepararse la solucin para
la desinfeccin. Todo este proceso toma tiempo indeterminado que como mnimo puede ser
de tres horas. La desinfeccin inmediatamente despus de la inoculacin se realiz para
ver las diferencias con la desinfeccin despus de tres horas de la inoculacin. Los resultados y las Pruebas estadsticas de
Duncan respectivas demuestran que no
267
existieronn diferencias significativas entre los

tratamientos a dos tiempos.
Segn Py et al (17), Frossard (8),
Snowdon (21) recomiendan que el tratamiento de frutos sea realizado en un tiempo no
mayor de 8 horas despus de la cosecha para
climas clidos.
La prueba de significacin de Duncan
para los parmetros de infeccin de frutos inmediatamente despus de la inoculacin indican que de los tratamientos Clorotalonil 0,2
%, Benomil 0,1 %, Benomil 0,05 %,
Triadimefon 0,1 %, Triadimefon 0,0.5 %,
Procloraz 0,1 %, Procloraz 0,05 %,
Triflumizole 0,1 %, Triflumizole 0,05 %,
Bromuconazol 0,1 %, Bromuconazol 0,05 %,
Difenoconazol 0,1 %, Difenoconazol 0,05 %,
fueron los que inhibieron el crecimiento del
hongo y el desarrollo de la enfermedad.
La prueba de significacin de Duncan
para los parmetros de infeccin de frutos tres
horas despus de la inoculacin indican que
los tratamientos Difenoconazol 0,05 %,
Benomil 0,1 %, Triadimefon 0,1 %, Benomil
0,05 %, Procloraz 0,1 %, Sportak 0,05 %,
Triflumizole 0,1 %, Triflumizole 0,05 %,
Bromuconazol 0,1 %, Bromuconazol 0,05 %,
Difenoconazol 0,1 %, Triadimefon 0,05 %,
tuvieron la misma significacin estadstica y
fueron los que inhibieron el crecimiento del
hongo y desarrollo de la enfermedad.
Para considerar las dosis a utilizar
hay que determinar si las condiciones son
favorables o no para el desarrollo de la enfermedad. Si es favorable debe de usarse las
concentraciones ms altas de lo contrario
pueden ser usadas las dosis ms bajas, acorde con las consideraciones siguientes:
1.
Antecedentes de la enfermedad en el
campo sembrado. Presencia o no presencia de frutos o plantas con sntomas de PNP.
268
2.
Clima, que incluye la presencia de

las condiciones optimas para dicho
patgeno; temperatura (26 C), precipitaciones (grandes cantidades favorecen al patgeno), HR (80-90 %
alta).
LITERATURA CITADA
1.
Barnett, H. L. y B. B. Hunter. 1972.

Illustrated genera of imperfect fungi.
Burgess Publishing Company. Minneapolis. Minnesota. 241 pp.
3.
El pH del suelo y del fruto es importante ya que el patgeno requiere de

un pH de 4-6 para sobrevivir.
2.
Barrn, G. 1968. The Genera of

Hyphomycetes from soil. The Williams
& Wilking Company. Baltimore. USA.
364 pp.
4.
Cuantas veces se a sembrado el cultivo, si se han realizado rotaciones

con otros cultivos no hospedantes del
hongo y que numero de cosecha es.
3.
5.
Tiempo que se demora el fruto desde

la cosecha hasta la desinfeccin.
Cabot, C.H., A. Pinon e J. Boliffinet.

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7.
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temprature et de lactivit sur le
dveloppement en culture de
Thielaviopsis paradoxa, parasite de
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8.
Frossard, P. 1968. Essais de

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9.
La Torre G. G. 1989. Fungicidas y

Nematicidas; Avances y aplicaciones.
Santiago de Chile. 17-27; 29-51 pp.
6.
Personal que realiza la labor de cosecha; debe de ser especializado.
7.
Frecuencia con que realiza la desinfeccin de las jabas cosecheras as

como del lugar de desinfeccin.
CONCLUSIONES
1.
El agente causal de la Pudricin Negra de la Pia es Thielaviopsis

paradoxa.
2.
Los fungicidas que previnieron el desarrollo de la PN en las dosis recomendadas por los fabricantes fueron:
Benomil, Bromuconazol, Difenoconazol, Procloraz, Triadimefon,
Triflumizol.
3.
Los fungicidas que previnieron el desarrollo de la PN a la mitad de la dosis

recomendadas por los fabricantes fueron: Benomil, Bromuconazol,
Procloraz, Triadimefon, Triflumizol.

10.
11.
12.
Hardenburg, R. E., A. E. Watada y C.

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17.
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16.
269
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Eds.. 1994. Compendium of tropical
fruit diseases. The American Phytopathological Society. St. Paul. Minnesota USA. pp 27-28.
270
FIGURA 1: FIALIDES, CONIDIAS Y CLAMIDOSPORAS DE Thielaviopsis paradoxa.
T E ST IG O
1 ,0
0
2,00
3,00
4,00
5,00
6,00
7,00
8,00

0,00
C LO R O T A LO N IL (2/oo)
C LO R O T A LO N IL (1 /oo)
M A N C O ZE B (2/oo)
M A N C O ZE B (1 /oo)
IP R O D IO N E (1 /oo)
IP R O D IO N E (0.5/oo)
P R O C IM ID O N A (1 /oo)
P R O C IM ID O N A (0.5/oo)
P R O P IN E B (2/oo)
P R O P IN E B (1 /oo)
T R IA D IM E FO N (1 /oo)
T R IA D IM E FO N (0.5/oo)
B E N O M IL (1 /oo)
B E N O M IL (0.5/oo)
C A P T A N (2/oo)
C A P T A N (1 /oo)
T IO FA N A T O M E T IL (1 /oo)
T IO FA N A T O M E T IL (0.5/oo)
B R O M U C O N A ZO L (1 /oo)
B R O M U C O N A ZO L (0.5/oo)
D IFE N O C O N A ZO L (1 /oo)
D IFE N O C O N A ZO L (0.5/oo)
P R O C LO R A Z (1 /oo)
P R O C LO R A Z (0.5/oo)
T R IFLU M IZO LE (1 /oo)
T R IFLU M IZO LE (0.5/oo)
FIGURA 2: CRECIMIENTO MICELIAL DE Thielaviopsis paradoxa

EN LA PRUEBA DEL ALIMENTO ENVENENADO
271
272

273
TESTIGO
DIFENOCONAZOL (0.5/00)
DIFENOCONAZOL (1/00)
BROM UCONAZOL (0.5/00)
BROM UCONAZOL (1/00)
TRIFLUM IZOLE (0.5/00)
TRIFLUM IZOLE (1/00)
PROCLORAZ (0.5/00)
PROCLORAZ (1/00)
TRIADIM EFON (0.5/00)
TRIADIM EFON (1/00)
TIOFANATOM ETIL (0.5/00)
TIOFANATOM ETIL (1/00)
CLOROTALONIL (1/00)
CLOROTALONIL (2/00)
BENOM IL (0.5/00)
BENOM IL (1/00)
CAPTAN (1/00)
CAPTAN (2/00)
0,00
FIGURA3:
5,00
10,0
0
15,0
0
20,00
25,00
PORCENTAJEDEINFECCIONDE FRUTOSTRATADOSINMEDIATAMENTE DESPUS DE LA INOCULACIN DE Thielaviopsis paradoxa.

BAJO CONDICIONES DE CAMPO.
274
TESTIGO
DIFENOCONAZOL (0.5/00)
DIFENOCONAZOL (1/00)
BROM UCONAZOL (0.5/00)
BROM UCONAZOL (1/00)
TRIFLUM IZOLE (0.5/00)
TRIFLUM IZOLE (1/00)
PROCLORAZ (0.5/00)
PROCLORAZ (1/00)
TRIADIM EFON (0.5/00)
TRIADIM EFON (1/00)
TIOFANATOM ETIL (0.5/00)
TIOFANATOM ETIL (1/00)
CLOROTALONIL (1/00)
CLOROTALONIL (2/00)
BENOM IL (0.5/00)
BENOM IL (1/00)
CAPTAN(1/00)
CAPTAN(2/00)
0,00
FIGURA4:
2,00
4,00
6,00
8,00
10,00
12,00
14,00
PORCENTAJE DE INFECCION DE FRUTOS TRATADOS DESPUS DE TRES

HORAS DE LA INOCULACIN DE Thielaviopsis paradoxa, BAJO
CONDICIONES DE CAMPO.

275
276
DISEO DE UNA MQUINA PELADORA DE AJOS (Allium sativum)

POR VA SECA
Alberto Torres Flores1
Jorge Roman Luna2
RESUMEN
El presente trabajo se refiere al diseo de una mquina peladora de ajos por va seca
para una capacidad industrial de 900 Kg/hora de materia prima.
Para el diseo se ha efectuado primero una prueba experimental de pelado mecnico empleando rodillos de PVC de 4 pulg. de dimetro revestidos con un jebe sanitario de
superficie irregular semejante a pequeos dedos y a accionamiento manual mediante una
manivela, en el que se consideraron las variables; distanciamiento entre los rodillos del
bastidor superior y del inferior, velocidad de giro de los rodillos y nmero de stos en la
operacin de pelado.
Se lleg a distanciamientos convenientes entre los rodillos de 3-5 cm y velocidad de
giro del rodillo inferior en 180 rpm. Los rodillos superiores giran en el mismo sentido pero a 130
rpm y su distancia entre ellos es de 1 cm.
Los esfuerzos de friccin y corte que actuaron sobre el material permitieron obtener
un producto con un pelado satisfactorio en un 70% del peso total. No se observ rompimiento de los dientes de ajo o chancado. El tiempo de operacin vari de 1 a 1.5 min hasta
obtener un ajo pelado convenientemente.
En base a las pruebas realizadas se hizo en una forma ms completa y a escala
industrial el esquema general de una mquina peladora de ajos. Luego, con los clculos se
lleg a un dimensionamiento de sus partes.
1 Profesor Principal de la Facultad de Industrias Alimentarias. UNALM.

2 Egresado de la Facultad de Industrias Alimentarias. UNALM.

POR VA SECA
277
La contribucin del presente trabajo deriva en que actualmente no existe en el

mercado una mquina que pele el ajo. Esta operacin se hace a mano, es tediosa, larga y
en muchos casos el proceso en s favorece una contaminacin excesiva del producto y
disminucin de su calidad final.
Con la mquina propuesta se evitar todos los problemas relacionados con el pelado
manual y se llenar n vaco urgente para el aprovechamiento industrial del ajo en forma semi
o procesada.
ABSTRACT
This work is about the design of a garlic peeler machine by a dry way basic for an
industrial capacity of 900 kg/h of raw material.
For the design an experimental operation was just made with a simple peeling
machine built with 4 rollers of PVC and 4 inches in diameters. It has a cylinder shape
and it was covered with a sanitary rubber sheet whose surface appeared like small
fingers. The movement was made with a manual operation. For the right peeling it was
considered:
The estrangement between he superior and inferior frames rollers, the speed of the
rollers turn and how many turns they do in the peeling operation.
For 3-5 centimeter of the estrangement between the rollers and a speed up to 180
revolution per minute, the results were good.
The superior rollers turn in the same sense but the speed is from 130 rpm and the
distance between them is 1 cm.
The efforts about the friction and the cut that act upon the material, let to get a
product with a satisfactory peeling in 70% from total weight. The cloves of garlic dont
break or crush with this process. The operation time varies from 1 to 1.5 minutes until
getting suitable peeling garlic.
According of the test, it was possible to design a more complete garlic peeler machine
to an industrial scale. After this calculations were made in order to have the correct size for
each par and arrive to the final design.
The importance of this work is the contribution to have available in the market a
garlic peeler machine which it does not exist at the present time. So far this operation
has been doing using the hands, so the work becomes tedious and time lasting causing
in many cases a contamination which diminishes the final quality.
Using the peeling machine we avoid all kind of problems derived of manual peeling.
On the other hand we solve an urgent need making a good use of the garlic in the processing
industry.
278
II.
INTRODUCCION
En la industria alimentaria es de especial importancia que los procesos de transformacin sean efectuados en el menor tiempo
posible, mnimo el manipuleo del material y los
riesgos de contaminacin, mxima la capacidad o rendimiento en cada operacin y la obtencin de un producto de calidad estndar. Todo
esto est relacionado con la mecanizacin del
proceso y de ser posible efectuarlo en todas
las operaciones que intervienen en el proceso.
La tendencia actual en la moderna
industria de alimentos es mecanizar todas las
operaciones a fin de tener un control total en
todas las variables del proceso y llegar a obtener un producto final de la mxima calidad
al costo ms bajo.
La oferta y demanda del ajo (Allium
sativum) es creciente ya que es un producto
culinario de uso obligado en la cocina. Se le consume al estado fresco o procesado y en ambos
casos se tiene el problema del pelado el que es
efectuado a mano.
El pelado a mano conlleva una operacin de bajo rendimiento de trabajo, excesivo
manipuleo del producto, alta contaminacin y
costos operativos elevados.
De ofertarse en el mercado una mquina de capacidad industrial que pueda efectuar el
pelado mecnico, llenar un gran vaco en esta
operacin con todas las ventajas que conlleva.
III. MATERIALES Y METODOS
2.1 MATERIALES
2.1.1
Mecnica de los
materiales
En un proceso mecnico los
cuerpos pueden estar sometidos a fuerzas de traccin, com-
presin, esfuerzo cortante o desgarramiento, flexin y de torsin.

Su comportamiento mecnico
estar determinado tambin por
el estado de tensiones (uniaxial,
pluriaxial) que determina la carga, el modo de actuar de la carga (esttico, dinmico, percusin)
su velocidad de aplicacin y tem
peratura que tiene el material du
rante el proceso (Hutte, 1964).
Sometidos a carga exterior, los
materiales sufren cierta deformacin, esta deformacin desaparece al desaparecer la carga en los cuerpos elsticos,
pero al rebasar cierto lmite de
carga, los tomos del material
pueden pasar a nuevas posiciones de equilibrio estable (deformacin plstica); o puede tambin anularse la fuerza interior
que los una dando lugar a una
rotura o fractura del material, por
traccin pura o la fractura por
desgarramiento.
En los cuerpos de estructura cristalina las deformaciones plsicas
siguenunaorientacinuniforme.
El aumento de la temperatura
incrementa el movimiento de los
tomos, facilitando el fenmeno
de deslizamiento al reducirse la
resistencia a las deformaciones.
En el caso de los materiales cristalinos tiene influencia el tiempo ya que puede producirse una
recristalizacin del material.
En el trabajo de pelado mecnico del ajo se tiene como mate-

POR VA SECA
rial una sustancia no cristalina,

orgnica, de composicin compleja y de resultados diferentes
al ser sometidos a diferentes
cargas, debido a su estado y
composicin qumica.
El ajo puede estar sometido al
ser pelado por va mecnica, a
cargas pluriaxiales en el que se
da especial importancia a la de
corte o desgarramiento. Como
la mquina trabajar con rodillos, el movimiento predominan
te es el de giro en el que su punto mximo de corte se logra a
los 45 (OBrien, 1981).
Es difcil y casi imposible lograr
un diseo funcional de una mquina peladora de ajos que opere aplicando los principios tericos en que se basa el presente
trabajo. Debido a la complejidad
de fuerzas interactivas tanto exteriores como interiores del material, as como la composicin
y numerosas variables de operacin es que se generaran muchas causas de incertidumbre
tanto en los clculos como en
los resultados obtenidos.
El trabajo que se presenta, se
basa en el pelado mecnico del
ajo en el que, primeramente se
han efectuado pruebas fsicas
experimentales, tomando en
consideracin las variables ms
importantes que se presentan en
la operacin, considerando el
sistema empleado propuesto, y
luego, de acuerdo a los resultados obtenidos plantearlo en una
forma ms completa y orientada hacia el campo industrial.
2.1.2
279
Elementos de los que

se hace uso
La mquina peladora de ajos
que se propone es completa en
su operacin, ya que trabaja en
un proceso continuo en el que
se aprecian en sus partes que
lo integran, elementos y componentes mecnicos diversos
tales como: rodillos que ejercen
esfuerzos de corte y de friccin,
separacin por vibracin de una
plataforma para una alimentacin regular y continua de material, uso de resortes, cojinetes, ruedas dentadas, poleas,
fajas de transmisin, ventilado
res, cadenas de transmisin,
etc.
A continuacin se da informacin de algunos de los elementos empleados.
a.
-
Materiales
Planchas de acero inoxidable
Se emplear planchas de
acero inoxidable AISI-304
(2B) de espesor de plancha
1/16 en las plataformas de
alimentacin y descarga
del material, en la construccin de la tolva y rodillo de
alimentacin y en la tolva
de descarga, lo mismo que
en la plataforma cribada de
la zaranda de alimentacin.
Tubos y perfiles
Los tubos que conforman
los rodillos de la peladora
de ajo en s sern de fierro
280
fundido dulce estructural

standard, para presiones interiores bajas de circulacin
de fluido esto es N Schedule 40 y de dimetro no
minal de 4.
Las bases de apoyo de la
mquina peladora lo mismo
que de la tolva de alimentacin y zaranda vibradora
sern de ngulos, perfiles
en V o plantinas de fierro
segn convenga en el diseo. El fierro ser fundido,
standard y de clasificacin
como perfiles de hierro comercial estructurales.
b.
Resortes
Los resortes mecnicos se
utilizan en las mquinas
con el objeto de ejercer fuerzas, proporcionar flexibilidad y almacenar o absorber energa.
La seleccin del adecuado

tamao y tipo de rodamiento a emplear se har haciendo uso del catlogo de
los fabricantes en base a los
esfuerzos de operacin
(Shigley, 1990).
d.
Transmisiones Mecnicas
Cojinetes
Se hace uso de elementos

de mquina de estructura
flexible como bandas o correas, fajas y cadenas cuando se va a transmitir potencia mecnica a distancia.
Estos elementos vienen a
sustituir a los engranajes,
ejes, cables y otros dispositivos de transmisin me
cnica rgidos. Esto permite una simplificacin en el
diseo de la mquina y una
disminucin de los costos.
Tienen una ventaja complementaria en el que por ser
elsticos pueden absorber
las cargas iniciales en el
arranque de la mquina, los
choques y vibraciones que
se produzcan.
Los cojinetes o rodamientos

a emplear sern para trabajar con cargas radiales. Se
recomienda el uso de coji
netes de bola y sellados.
Se emplear en el diseo
de la mquina un sistema
de transmisin de potencia
mecnica del motor hacia
la tolva de alimentacin y
La mquina emplear resorte helicoidal de compre

sin hecho de alambre de
acero redondo. El dimetro
del alambre y tamao o dimetro exterior del resorte
ser de acuerdo a la carga
que soporte. Esto se relaciona fcilmente empleando talas proporcionadas por
los fabricantes.
c.
La carga de trabajo en la
operacin de la mquina es
relativamente baja para el diseo y resistencia de un cojinete comercial por lo que
puede considerarse una duracin muy larga de vida
neta de los rodajes.

POR VA SECA
hacia los rodillos de mando en la mquina peladora

formado por fajas de jebe
en las que se har uso de
poleas acanaladas de un
surco o dos segn la necesidad.
Para efectuar este trabajo

desde la concepcin de una
idea sobre una necesidad
real hasta el trabajo final se
ha seguido una secuencia
de fases que coinciden con
la sealada por Shigley,
1990.
Se emplear cadenas de
rodillo para la transmisin
del giro por parte del rodillo
de mando a todos los dems en la mquina peladora de ajos.
Su caracterstica es de que
se trabajar con una relacin de velocidad constante en donde no hay deslizamiento ni distensin, y
tienen larga vida til sobre
todo considerando la velocidad relativamente baja a
la que van a trabajar.
Se usar cadenas de rodillo de material acero ANSI
B-29 en el que el N de cadena a elegir con todas sus
caractersticas tcnicas se
hallarn fcilmente en tablas de fabricantes para rodillos estndares estado
unidenses (Shigley, 1990).
281
2.2.2
Fases del Diseo

Breve explicacin de cada
fase.
A. Reconocimiento de
la necesidad
Se identifica una necesidad

real sea mediante un anlisis de lo ya existente o de
bido a una circunstancia
adversa. Una necesidad se
identifica con facilidad des
pus de que alguien la ha
planteado.
B.Definicin del problema
2.2 METODO
Existe clara diferencia entre el planteamiento de la

necesidad y la definicin del
problema. El problema es
ms especfico y abarca todas las condiciones o caractersticas a ser tomadas
en cuenta en el diseo.
2.2.1
Diseo mecnico
C. Sntesis
La mquina peladora de
ajos requiere un diseo mecnico en el que para su
concepcin se hace uso de
las matemticas, la ciencia
de los materiales y la ciencia mecnica aplicada.
Viene a ser la sntesis de

una solucin ptima hallada. La sntesis no podr
efectuarse antes de hacer
el anlisis y la optimizacin, debido a que se debe
analizar el sistema a dise-
282
Fuente: Shigley, 1990

POR VA SECA
ar con el fin de determinar

si su funcionamiento cumplir las especificaciones.
El anlisis podra revelar
que el sistema no es ptimo. Si el diseo no resultase satisfactorio en una de
dichas pruebas o en ambas, el procedimiento de
sntesis deber iniciarse
otra vez.
El diseo es un proceso
iterativo en el que se pasa
por varias etapas, se evalan los resultados y luego
se vuelve a una fase anterior del proceso. En esta
forma es posible sintetizar
varios componentes de un
sistema,analizarlosyver que
efecto tiene esto sobre las
partes restantes del sistema.
D. Anlisis y optimizacin
Se puede hacer uso de mo
de los abstractos del sistema en el que se utilizan en
alguna forma el anlisis
matemtico. Tales consideraciones reciben el nombre
de modelos matemticos
en el que se espera encontrar alguno que reproduzca
lo mejor posible el sistema
fsico real.
283
prototipo en el laboratorio.
La comunicacin del diseo a otras personas es el
paso final y vital en el pro
ceso del diseo, expresado como presentacin.
III.
3.1 PRINCIPIOS DE OPERACIN
Partiendo de lo elemental y
primario como es el pelado
a mano, el operador primero separa los dientes del ajo
de la cabeza partiendo desde la punta de la cabeza del
bulbo. l ejerce presin con
los dedos y a la vez va separando los dientes y desgranndolos uno por uno.
Pude ayudarse esta operacin con el empleo de un
cuchillo. Se entiende que
primero ya se ha pelado o
sacado las cutculas externas del bulbo.
E. Evaluacin y presentacin
En una segunda etapa se

debe pelar cada diente de
ajo por separado. Ayuda el
hecho de que el material
est algo desecado de tal
manera que la envoltura o
cutcula del diente no est
pegado al cuerpo o que el
diente est bastante hme
do de tal forma que sea
ms fcil separar la cutcula del cuerpo del diente.
La evaluacin es una fase

significativa del proceso to
tal del diseo. Es la demostracin de que un sistema
es acertado y por lo general incluye pruebas de un
En ambos casos se puede

hacer uso de un cuchillo adems de que la cutcula est
fuertemente unida en la base
del bulbo y es necesario
efectuar un corte.
284
FIG. 1 ESQUEMA EXPERIMENTAL DEL PELADO

DE AJOS POR ACCIONAMIENTO MANUAL
LEYENDA
1.- RODILLOS GIRATORIOS
2.- BASTIDOR SUPERIOR
3.- SOPORTE CON RESORTE
4.- BASTIDOR INFERIOR
5.- EJES DE GIRO
6.- CADENAS DE TRASMISION
7.- MOVIMENTO DE GIRO CON MANIVELA
8.- SOPORTE Y REGULADOR DE DISTANCIAMIENTO
DE LOS BASTIDORES
Considerando lo expuesto,
es que se ide una operacin
de pelado mecnico en el
que el proceso sea bastante
semejante al manual en sus
dos etapas.
Se tiene en la Fig. 1 una vista en corte de una maquinita
experimental que se construy para apreciar el resultado de un pelado mecnico
siguiendo el procedimiento
ya indicado.
Est formado por 2 marcos
de madera listones de 2
x de grosor cada una) en
el que el marco superior lleva 3 cilindros (4 y 14 pulg
longitud) formados con tubos
plsticos de PVC semiduro,
en el que utilizando el pegamento comercial Terokal se
ha pegado una plancha de
jebe que por la cara interior
es lisa (en contacto con el
tubo) y por la cara superior
tiene protuberancias de jebe
semejantes a dedos de
aprox. 1 cm de dimetro y
1.5 cm de altura. Estos, son

usados como superficie de
escurrimiento en la industria
textil, pero en todo caso se
podran mandar a confeccionar en el tamao, material y
caractersticas que uno desee.
Mediante el recorte de discos de plstico se fabric los
apoyos de los cilindros y con
el empleo de fierro liso de
construccin de ruedas
dentadas de 2 (halladas
en un depsito de chatarra
se confeccion el marco superior (2).
El marco inferior (4) es de
igual tamao que el superior
pero tiene 4 discos de igual
dimetro que los otros. El
objeto es de que sean colocados en un distanciamien
to entre ellos de tal modo
que se pueda emplear la distancia entre discos apropiada y que el ngulo de incidencia de corte entre los cilindros sea el mximo (45).

POR VA SECA
La unin de los 2 marcos se

hace en la parte delantera con
un mecanismo de sujecin y
ajuste de distanciamiento (8) for
mado por un vstago de fierro
redondo de 3/8 (con rosca en
su parte inferior). Mediante una
manivela (7) se puede regular el
distanciamiento entre los dos
bastidores.
En la parte posterior, la sujecin
de los dos marcos es mediante
un resorte (3). Esto permite darle
una cierta vibracin.
Los cilindros tienen a un lado
unas ruedas dentadas pequeas
que permiten se mantenga un
movimiento de giro al unirlas con
un sistema de cadenas (6).
Mediante el uso de una manivela (indicada en la Figura 1 con
el N7) se da movimiento circular a todos los cilindros.
Los cilindros del marco superior
tienen una velocidad que es el
75% de los del marco inferior.
Esto se logra mediante el uso
de ruedas dentadas de mayor
dimetro.
3.1.1
Variables en uso
Para una operacin de pelado
mecnico se tom en consideracin el empleo de 3 variables
(las ms importantes) y son:
a. El tamao de los dedos de

jebe a emplear con respecto al
dimetro de los cilindros.
b. El distanciamiento entre los cilindros
c. Velocidad de giro de los cilindros.
285
a. El tamao de lo dedos de jebe

En un comienzo se emple escobillas pero el resultado experimental no fue positivo adems
de que la abrasin era excesiva
y malograba el cuerpo del diente del ajo.
Se busc planchas de jebe de
superficie irregular y se hall
unos retazos descartados (fue
ra de uso) de jebe con protuberancias semejantes a dedos. La
flexibilidad de los dedos, su dureza y tamao se prestaron con
venientemente al experimento.
b. El distanciamiento entre los
cilindros
Se tom en cuenta que la mquina deber efectuar dos operaciones. Una el desgranado de
los dientes de ajo procedentes
de los dientes de ajo. Para ello
se consider los rangos de dimetro de las cabezas las que
varan desde la clasificacin de
ajos de segunda (3.5 cm), hasta los 6.0 cm para las de clase
jumbo (Cuadro 1). Es de considerar que la mquina trabajar
mejor en el tamao promedio de
4.5 cm de dimetro.
Luego se regul el distanciamiento de los rodillos o cilindros
para 4.0 cm en su punto de corte.
En el dibujo de la Fig. 1 la distancia entre rodillos del mismo
bastidor no est a escala por lo
que parece que los bulbos podran caer por gravedad una vez
pasado uno de los rodillos. En
la prctica esta distancia es de
solo 1 cm.
286
CUADRO 1: CLASIFICACION DEL AJO POR TAMAO
Fuente: Balvn, 1985.
Se regula la distancia de separacin entre los marcos de apoyo y en consecuencia de los rodillos, mediante el empleo del
soporte regulado indicado con el
N 8 en la Fig. 1.
Para el pelado de los dientes de
ajo se tuvo que disminuir an
ms el distanciamiento entre los
rodillos. Se tuvo en realidad difi
cultades con los dientes muy
pequeos y esto corrobora lo ya
expresado, en que los ajos para
proceso deben ser de buen tamao.
c. Velocidad de giro de los cilindros
Es importante determinar la velocidad de giro apropiado de los
cilindros ya que a una alta velo
cidad puede deteriorar el producto y con una velocidad muy
baja no se conseguira el esfuerzo cortante necesario entre los
rodillos para el pelado del producto.
Esta velocidad de giro ser de

acuerdo al dimetro de los cilindros, caractersticas fsicas de
la materia prima ajo, y conformacin de la superficie rugosa
de jebe o dedos que cubren los
cilindros.
Por medio de la manivela indicada con el N7 en la Fig. 1 se
accion manualmente y se observ el comportamiento de los
dedos en el pelado. Del mismo
modo se fue regulando el distanciamiento entre los rodillos
para observar la eficiencia del
pelado.
Se apreci que el ajo con una
previa desecacin se iban pelan
do poco a poco los dientes y al
llegar a un punto de velocidad
de pelado apropiado, se midi
con un contmetro la velocidad
de giro de los rodillos inferiores
el que fue 180 rpm pasando el
ajo dos a tres veces para lograr
un pelado completo.

POR VA SECA
287
288
3.1.2
Descripcin de la mquina
peladora de ajos
En la Fig. 2 se tiene una vista
general en perspectiva de la
peladora en el que se pueden
diferenciar 4 partes:
a. La tolva de alimentacin con

mecanismo de salida
Al fondo de la tolva se tiene un
rodillo con paletas el cual al girar a velocidad controlada va alimentando con materia prima en
una forma continua y uniforme
a la zaranda.
b.
Zaranda vibratoria
Recibe del rodillo de alimentacin el ajo en bulbos enteros.
El mecanismo de vibracin de
la zaranda hace que los bulbos
se distribuyan en forma uniforme en toda la superficie de esta,
aprovechndose para eliminar el
polvillo y pajas que caern por
gravedad a travs de los orificios.
Al final la zaranda entregar en
forma regulada y uniforme el material hacia la mquina peladora
en s.
c. Mquina peladora de ajos

Conformado por dos bastidores.
El superior con 11 rodillos y el
inferior con 12 rodillos que giran
a 180 rpm. Los superiores giran
a 130 rpm. El bastidor superior
est apoyado en una excntrica que determina en este un
movimiento regulado y pequeo
en el sentido horizontal y verti-
cal. Este movimiento se ve ayudado por los apoyos de resortes en el otro extremo del bastidor. Su funcin es ayudar con
un esfuerzo de friccin y esfuer
zo de corte que se realiza en
los rodillos.
Los bulbos caen por gravedad
de la zaranda vibratoria y son cogidos por el primer rodillo del
bastidor inferior. Con su movimiento de giro hacen avanzar al
material y este se encuentra con
el rodillo superior en su punto
de mayor cercana en donde
sufre el proceso de aplastamiento (regulado) y de corte. La cabeza de ajo que viene a representar una unidad conformada
por unos 12 dientes muy bien
unidos por sus hojas y cutculas
sufre un cierto ablandamiento en
una direccin y al pasar al siguiente par de rodillos sufre otro
esfuerzo de compresin y de
corte en otra posicin, lo que
hace que la unin de los dientes entre s se vaya debilitando.
Al llegar a la mitad del recorrido, la cabeza est desgajada,
la mayor parte de sus dientes
separados y listos para ingresar
a la segunda etapa que es el
pelado de los dientes propiamente dichos.
En esta segunda etapa los rodillos tienen menor distanciamiento entre s y actan sobre cada
diente en diferentes partes o secciones de acuerdo al avance entre los pares de rodillos.
En la ltima etapa la mayor parte de dientes estn pelados por

POR VA SECA
completo (65%) en los dientes

de buen tamao (4 5 cm) hay
abundante cscara y sta es eliminada en forma transversal por
la corriente de aire generada por
un ventilador.
La cscara de los dientes pequeos se halla adherida en
parte en la mayora, por lo que
es necesario un acabado manual despus del pelado mecnico.
d. Separacin de la cscara
Mediante el empleo de un ventilador axial se pude generar una
corriente de aire suficiente para
que evacue toda cscara formada
sin arrastrar a los dientes de ajo.
La cscara se puede recibir en
un recipiente en forma de un
cuarto o habitacin rectangular
en el que el aire sale por la parte
superior que estar cubierta por
una tela y la cscara se ir depositando en el fondo por gravedad.
e. Tolva de salida del producto pelado
En la Fig. 2 la tolva es de simple cada pero en la prctica se
289
recomienda que el material caiga sobre un transportador de faja

de tal manera que pase por un
proceso de acabado y seleccin
posterior.
3.2 CAPACIDAD DE LA PELADORA
DE AJOS
La mquina est conformada
por unos rodillos apoyados en
los extremos a unos bastidores
de madera.
Long. bastidor = 1.65 m neto
En 1.5 min el ajo recorre 1.65 m
En 1 min ser = 110 m
Densidad de alimentacin
= 4 Kg por cada 0.30 m de
longitud
Para 1.10 m ser = 14.66 (15
Kg/min)
Para 1 hora ser 15 Kg/min x
60 min/hr = 900 Kg/hora que vie
ne a ser la capacidad de pelado
de la mquina.
La velocidad de alimentacin por
medio del rodillo con paleta
(rpm) y su distribucin en la zaranda vibratoria ser de acuerdo a esta capacidad.
Las medidas de la mquina peladora de ajos estn dadas en
la Fig. 3
290

POR VA SECA
IV. CONCLUSIONES
291
REFERENCIA
1.
La mquina peladora de ajos de

tamao industrial trabaja 900 Kg/
hora de materia prima para un
tiempo de 1.5 minutos de permanencia.
1.
BALVIN, E., 1985. Evaluacin de la

calidad odorfica de ajos por
el mtodo de aire caliente.
Tesis U.N.A. La Molina. LimaPer.
2.
Se ha observado que en ajos de

tamao extra que son los ms comerciales y apropiados para el
proceso mecnico el tiempo es de
1 minuto, luego, la capacidad real
de la mquina podr ser un 50%
mayor.
2.
HUTTE, 1964. Manual del Ingeniero.

Tomo I. Edit. Gustavo Gili,
S.A., Barcelona Espaa. 29
edicin.
3.
OBRIEN, ROBERT. 1981. Mquinas

Coleccin Cientfica de TIMELIFE. Edit. TIME-Life
International. 2da. Edic. Mxico.
4.
SHIGLEY J. Y MISCHKE CHARLES.

1990. Diseo en Ingeniera
Mecnica. Edit. Mc GrawHill. 5ta. Edicin. Mxico
3.
Se ha considerado materiales en su
construccin tales como el pino
para los marcos del bastidor, el
acero para las partes en contacto
con el material al momento del pelado, lo mismo que el uso del jebe
sanitario.
4.
La tolva de alimentacin ser de

plancha de fierro galvanizada pero
tambin podra ser hecho de hacer.
5.
se podr contar por consiguiente

con una mquina de diseo simple,
fuerte en su construccin y durable
por los materiales empleados. Estos son requisitos importantes y
necesarios en una mquina agroindustrial.
6.
Sobre los resultados que podra

dar la utilizacin de esta mquina, se ha hecho el diseo y clculos en base a una mquina similar piloto pero de construccin
mucho ms simple y se ha hallado resultados positivos en la operacin del pelado.
292
ANALISIS DE UN DISEO DE BLOQUES INCOMPLETOS

CON UN TRATAMIENTO REFERENCIAL
Raphael Flix Valencia Chacn1
RESUMEN
En un Diseo Bloque Incompleto Balanceado no todas las combinaciones de tratamientos estn presentes en un bloque y suele suceder que alguna de esas combinaciones sea de
mucho inters para el investigador, por esa razn sera importante que los tratamientos de prueba sean evaluados con referencia a un control o a un estndar. En este trabajo de investigacin,
el Diseo de Bloques Incompletos Balanceados modificado por la incorporacin del tratamiento
de prueba en todo bloque es revisado en el aspecto de su potencial uso en el campo de la
agronoma, biologa e industria. Ejemplos del diseo y anlisis estadstico son proporcionados.
SUMMARY
Not all the combinations of treatment are present into a block in a Balanced Incomplete
Block Design and could happen that some of these combinations had a great interest to the
researcher. For this reason would be important that the treatments of the test are evaluated in
reference to a control or standard. In this research paper, the Balanced Incomplete Block
Design modified with the trial test sample incorporation en each block is verified in the way of its
potential use en the field of agronomic, biologics and industry. Examples for this design and
statistical analysis are given.
INTRODUCCION
En experimentos conducidos en Diseo Bloque Incompleto Balanceado algunas de
las combinaciones de tratamientos no estn presentes en todo el bloque, pero suele suceder
que alguna de ellas sea de inters para el investigador.
1
Profesor contratado Clase C, Dpto. Estadistica e Informtica, Facultad de Economa

y Planificacin

293
Cuando uno de los objetivos del estudio es comparar un tratamiento de referencia

tratamiento estndar o control, entonces es necesario que el tratamiento referencial aparezca
en todo bloque incompleto.
El propsito de este artculo es describir el Diseo Bloque Incompleto Balanceado (BIBD)
y su anlisis estadstico cuando un tratamiento de referencia es contenido en cada bloque. Para el
conocimiento del autor, este diseo no est disponible en libros de texto hoy en da.
Diseo balanceado de bloques incompletos (BIBD).
Desde la introduccin de Diseos de Bloques Incompletos dado por Yates (16), numerosas publicaciones que tratan con estos diseos han aparecido en libros de texto por
Kempthorne (9), Federer (3) and Cochran y Cox (2); estas se han convertido en las referencias
estndar de esta rea. El uso potencial del BIBD ha sido descrito por Galinat and Everett (6);
Hanson et al., (8); Marquardt et al., (10) y Gacula and Kubala, (5). Con el fin de comprender las
siguientes secciones, revisaremos brevemente algunas propiedades del BIBD.
El BIBD, conocido en nuestros das, es definido por 5 valores enteros llamados
parmetros del diseo:
t
k
b
r
l
=
=
=
=
=
Nmero de tratamientos
Nmero de tratamientos que aparece en un bloque, k<t
Nmero de bloques.
Nmero de repeticiones o juicios por tratamiento.
Nmero de veces par de tratamientos aparece en el mismo bloque.
A continuacin se presenta en la Tabla N 1, la distribucin de los tratamientos para un

BIBD, donde cada X (aspa) representa al bloque que esta siendo sometido al tratamiento
respectivo.
TABLA N 1: DISEO BASICO PARA UN BIBD :
Los parmetros de este diseo son:

t=4
r=3
=1
k=2
b=6
n= bk = 12
294
En la siguiente Tabla N 2, se presenta la construccin de un BIBD con muestras

referenciales, es decir existe un nico Tratamiento ( R ) el cul se aplicar a todos los bloques
y cuya metodologa pasaremos a desarrollar.
TABLA N 2 : DIBD AUMENTADO CON UN TRATAMIENTO REFERENCIAL R
Los parmetros de este nuevo diseo son:

t+1=5
r=3
=1
k+1=3
b=6
n = b(k+1) = 18
El valor de estos parmetros debe ser conocido antes de que el anlisis estadstico
sea procesado. Cuando t y k son dadas, Yates (16) demostr que r, b y l son obtenidas
tomando todas las posibles selecciones de k a partir de t como sigue:

=
=

=
=

(2)
(1)
(3)
Considere un BIBD con t= 4 y k= 2. Substituyendo los valores de t y k dentro de la

frmula (1) a (3), obtenemos r= 3, b= 6 y = 1. La disposicin del diseo con estos parmetros
es dado en la Tabla N 1, donde la letra X denota los tratamientos particulares que son comparados dentro del bloque. Esta disposicin es con frecuencia referida como diseo bsico,
Federer (3). Si el diseo es repetido p veces para ejecutar la adecuada repeticin, los parmetros

295
de diseo b, r y son multiplicados por p convirtindose en pb, pr y p. Un catlogo del

esquema de BIBD es encontrado en Cochran y Cox (2) y Fisher y Yates (4). Gonzales (7 )
desarrolla una metodologa de anlisis combinado intra-bloque para un Diseo Incompleto de
Bloques Balanceados fijos.
El clculo de los parmetros del diseo para BIBD con una referencia estndar es
complejo. Por lo tanto es apropiado introducir un procedimiento general aplicable a ambos
diseos incompletos con y sin referencia estndar; Pearce (11) , Searle, (15) , Trail and Weeks
(13). El procedimiento general empieza con la construccin de la matriz de incidencia de la
disposicin del diseo. Utilizando la disposicin del BIBD en la Tabla 1, la matriz de incidencia
N es:
(4)
dnde un 1 denota la presencia del tratamiento y 0 la ausencia del tratamiento en el esquema.

La transpuesta de N, simbolizada por el intercambio de las filas y las columnas Searle
(15) a leer.
(5)
Y el producto entre N y N, si todos los elementos son 0 o 1 Pearce (11), produce una
matriz con los elementos de la diagonal principal igual a r y los elementos de fuera de la
diagonal iguales a :
(6)
Solamente la mitad superior de la matriz es mostrada porque la matriz es simtrica.
296
MODELO ADITIVO LINEAL
Para el presente trabajo de investigacin se plantea el siguiente modelo aditivo lineal:
= + + +
(I)
i = 1 , 2 , ... , t + 1
j = 1 , 2 , ... , b
l = 1 , 2 , ... , p
Donde:
Yijl =
Representa el resultado observado del i-simo tratamiento en el j-simo bloque, en

la l-sima repeticin.
Media General.
Efecto del i-simo tratamiento.
jl =
Efecto del j-simo bloque dentro de la l-sima repeticin.
Efecto de la l-sima repeticin.
ijl =
Error Experimental.
Supuestos del modelo:

1) El modelo estadstico es aditivo y lineal.
2) Los
ijl se distribuyen normal e independientemente con media cero y variancia .
3) Existe Homogeneidad de Variancias.

Notacin:
Para el desarrollo metodolgico del modelo es necesario adoptar la siguiente notacin:

297
BIBD con tratamiento referencial.

La idea de tener un tratamiento referencial en todo bloque de BIBD viene del trabajo
independiente de Pearce (11) y Basson (1). La construccin de BIBD con un tratamiento
referencial es ejecutado simplemente por la simple adicin del tratamiento referencial en todos
los bloques de BIBD en una forma que es presentado en la Tabla N 2. El anlisis de los tres
tratamientos dentro de cada bloque es determinado aleatoriamente y no como es presentado
en la disposicin (o esquema). La condicin del tratamiento referencial modifica los parmetros
t y k a t+1 y k+1 respectivamente. Los BIBD son largamente catalogados, por lo tanto la
construccin del diseo aumentado, que viene a ser el BIBD con la adicin del tratamiento
referencial es grandemente facilitado.
La matriz de incidencia del diseo aumentado (Tabla N 2) es:
(7)
(8)
y la transpuesta,
y NN1 es presentado por Pearce (11) a ser,
(9)
298
En (9), el valor de los parmetros del diseo son b= sR=6, r=s=3, =1 y R=3. El parmetro R es
usado en un anlisis del BIBD con tratamiento referencial. El nmero de repeticiones para la
referencia estndar es siempre igual a b.
= + + +
+
i = 1 , 2 , ... , t
j = 1 , 2 , ... , b
k = 1 , 2 , ... , p
donde:
son los estimadores de los correspondientes parmetros:
, i , jl , l , ijl , respectivamente. Para obtener las ecuaciones normales y los estima-
dores de los parmetros se aplicar el mtodo de los mnimos cuadrados, que para este caso
consiste en minimizar la siguiente expresin:
+
=
=
con respecto a cada uno de los estimadores.

La suma de cuadrados del error experimental est dada por la siguiente expresin:
+
=
=
Despus, se aplica el Mtodo de Mnimos Cuadrados , para obtener los estimadores de los
parmetros.
Se deriva la expresin C (suma de cuadrados del error experimental) en funcin de cada uno
de los parmetros incluidos en el modelo y se generan las siguientes ecuaciones normales:
( +
( +
)+
)+
+
=

299
Luego aplicando las restricciones:

+
Se obtiene el estimador para el efecto de los tratamientos, el cual tendr dos formas; una para
el efecto del Tratamiento Referencial y otra para el efecto de los dems tratamientos analizados.
Efecto del Tratamiento Referencial:
Efecto del i-simo Tratamiento:
)
(
SUMAS DE CUADRADOS:
Suma de Cuadrados de Total (S.C. Total)
Suma de Cuadrados de Tratamientos (S.C. Trat)
Suma de Cuadrados de Bloque dentro de Repeticin (S.C. Bloq(Rep.))
=
=
)
= (
300
Suma de Cuadrados del Error (S.C.EE.)

S.C.EE. = Por Diferencia
TABLA N 3: CUADRO DE ANALISIS DE VARIANCIA DE UN DISEO BLOQUE

INCOMPLETO CON UN TRATAMIENTO REFERENCIAL
La Tabla N 3 contiene el ANVA intrabloque para BIBD con un tratamiento referencial.

En esta tabla, el Factor de Correccin (CF), SST, SSp, SSt adj. y SSe son calculados por los
procedimientos estndar descritos por Yates (16), Rao (12) y Cochran y Cox (2). Debido que el
bloqueo incompleto, tal como es, no todos los tratamientos no estn en un bloque dado (k<t),
es bien sabido que el total de tratamientos Ti deben ser ajustados para los efectos de bloque
acompaado por el clculo de
donde B(i) refiere bloquear los totales en donde el tratamiento i ocurre. Los clculos del
efecto debido a los tratamientos y tratamiento referencial, as como sus variancias, son
obtenidos por la frmula derivada por Basson (1) y son dados como frmulas desde (11) a
(15) definido abajo.
Los estimados de los efectos debido al tratamiento referencial (tR) es
con variancia
(11)

301
(12)
Y para el i-esimo tratamiento
con variancia
)(
)
(
(13)
(14)
Si se desea el contraste entre el i-simo tratamiento y el tratamiento referencial, la variancia de

contraste es:
)(
(15)
El error estndar de un efecto es la raz cuadrada de su variancia. El valor de en la frmula

de arriba es estimada por el cuadrado medio del error en el ANVA. Debe ser reconocido que
cuando el diseo bsico es repetido p veces, el valor de b , r y que aparecen en la frmula (11) ,
deben ser multiplicados por p.
= + , i =1,2,3,...t donde es
La media del tratamiento ajustado es obtenido por
el promedio total excluyendo el tratamiento referencial, y la media del tratamiento referencial
= + . Procedimientos estndar como la Prueba de los mltiples rangos de
es
Duncan, la Prueba las mnimas Diferencias Significativas (LSD), son usados para elaborar
comparaciones mltiples de los efectos o de las medias de los tratamientos ajustados.
RESULTADOS
Para la aplicacin prctica de la metodologa descrita se tom un experimento en el
que se desea verificar si existen diferencias significativas en cinco tipos de Yogurt para beber.
Se emple un Diseo de Bloque Incompleto con un tratamiento referencial en cada bloque, en
el que el tipo de Yogurt ms difundido se consider como el tratamiento referencial. Se tomaron seis laboratorios, en los cuales se midi el contenido de cido ascrbico (en miligramos
por litro), para cada muestra asignada aleatoriamente.
302
Nmero de Tratamientos: t + 1 = 5
Nmero de Tratamientos por Bloque: k + 1 = 3
Nmero de Repeticiones: p = 2
Nmero de Bloques por Tratamiento: b = 6
Nmero de Repeticiones por Tratamiento: r = 3
Nmero de veces que un mismo par de tratamientos aparece en un mismo bloque: = 1
El paso inicial del anlisis es calcular los totales marginales y sus cantidades B(i) y Q(i),
i=1,2,3, t+1. Por ejemplo, para el tratamiento 1:
+
=
de la frmula (13),

303
y de la frmula (11),
Las medias ajustadas para el tratamiento 1 es

para el estndar es
=
.
=
=
El ANVA para los tipos de Yogurt para beber, es expuesto en la Tabla N 4. Con 4 y 20 grados
de libertad, El valor F con un 5% tabular es 2.87 la cual no excede por 2.04/1.22=1.672. Por lo
tanto no hay evidencia de que los 5 promedios son estadsticamente diferentes.
PRUEBA DE HIPOTESIS
Hp: Los 5 tipos de Yogurt no presentan diferencias significativas.
Ha: Al menos uno de los 5 tipos de Yogurt presenta diferencias significativas con respecto a
los dems.
TABLA N 4: CUADRO DE ANVA
Las evidencias estadsticas muestrales nos indican que no existen diferencias significativas
entre los cinco tipos de Yogurt para beber (incluido el tratamiento referencial) al evaluar el
contenido de cido ascrbico (en miligramos por litro).
304
CONCLUSIONES
La metodologa presentada en este artculo para un anlisis del Diseo de Bloques
Incompletos Balanceados (BIBD) con un tratamiento en todo bloque, se podr aplicar cuando
adems de los tratamientos a comparar se tenga un tratamiento que sirva de control de
comparacin con los dems tratamientos y a dicho tratamiento se le llamar tratamiento
referencial.
En un Diseo de Bloques Incompletos Balanceados no todos los tratamientos son
contenidos en cada bloque, entonces un tratamiento referencial estndar es altamente recomendado y es til para realizar pruebas de comparacin.
En casos en que se encuentren diferencias significativas entre las medias de los
tratamientos en estudio, se recomienda realizar las pruebas de comparacin de medias
respectivas, usando segn sea el caso la correspondiente variancia del error , es decir,
cuando se comparen dos medias de tratamientos se tendr una variancia del error y cuando
se compare dos medias de tratamientos en donde uno de ellos sea el tratamiento referencial
se tendr que usar una variancia del error diferente. El resto del procedimiento para la prueba
de comparacin ser el utilizado convencionalmente para un BIBD.
BIBLIOGRAFIA
1. Basson, R.P. 1959. Incomplete block designs augmented with a repeated control. M.S.,
thesis, Iowa State University, Ames, I.A.
2. Cochran, W.G. and Cox G.M. 1957. Experimental Design. John Wiley and Sons, New
York.
3. Federer, W. T. 1955. Experimental Design. The Mac Millan Co., Inc. , New York.
4. Fisher R. A. and Yates F. 1963. Statistical Tables for Biological, Agricultural and Medical
Research. Hafner Publishing Co., Inc., New York.
5. Gacula, M.C. Jr. and Kubala, J.J. 1972. Data analysis Interblock and intrablock estimates
of variance on taste panel data. J. Food Sci. 37: 832
6. Galinat, W. C. and Everett, H. L. 1949. A technique for testing flavor in sweet. Agronomy J.
41: 443.
7. Gonzales, Celso. 1991 . Anlisis combinado intra-bloque de experimentos repetidos en
Diseo Bloques Incompletos Balanceados con efectos fijos. Tesis para obtener el ttulo
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305
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306
REACCION DE CULTIVARES DE CEBOLLA A LA PUDRICION DEL DISCO BASAL

CAUSADA POR Fusarium oxysporum f.sp. cepae
Walter E. Apaza1 y Leonor Mattos2
ABSTRACT
Two methods of inoculation with Fusarium oxysporum f.sp. cepae.: a) planting in

soil infested with the pathogen b) puncture of the basal plate and plantlet immersion in a
conidial suspension. This last method was the best. Nine inoculum densities were tested,
with 105 conidia/ml giving the best result. Twenty two onion cultivars were evaluated by the
basal plate puncture method with a concentration of 105 conidia/ml. The cultivars evaluated
were: XPH6700, Columbia 15179, Atena, AG33, Granex 33, Granex 429, RG-ER 074,
Mercedes, RCR 1919, TG438, Mr. Max, PSR 1190, Sweet Dixie, Rio Enrique, Linda Vista,
Lara, Sweet Sunrise, Hybrid Onion Rojo, XPH 6712, Roja Arequipea, Red Bone and Red
Fano. Only Atena was resistant and XPH6700 was moderately resistant. All of the others
cultivars were susceptible.
RESUMEN
Se probaron dos mtodos de inoculacin para Fusarium oxysporum f.sp. cepae:

a) transplante al suelo infestado con el patgeno b) puncin en el disco basal e inmersin
en suspensin de conidias. Este ltimo mtodo fue el mejor. Con este mtodo, se evaluaron nueve densidades de inculo, siendo la densidad 105 conidias/ml la de mejor resultado. Se evaluaron 22 cultivares de cebolla, los cuales fueron inoculados mediante la tcnica
de puncin del disco basal y posterior inmersin en una suspensin de 105 conidias/ml.
Los cultivares evaluados fueron: XPH6700, Columbia 15179, Atena, AG33, Granex 33,
Granex 429, RG-ER 074, Mercedes, RCR 1919, TG438, Mr. Max, PSR 1190, Sweet Dixie,
Rio Enrique, Linda Vista, Lara, Sweet Sunrise, Hybrid Onion Rojo, XPH 6712, Roja
1
2
Docente del Departamento Acadmico de Entomologa y Fitopatologa

Profesor Principal, DepartamentoAcadmico de Entomologa y Fitopatologa

307
Arequipea, Red Bone y Red Fano. Slo Atena fue el cultivar que tuvo un comportamiento
de resistente. Mientras que XPH6700 fue moderadamente resistente. El resto de cultivares
fueron susceptibles.
INTRODUCCION
La pudricin del disco basal de los

bulbos de la cebolla causada por Fusarium
oxysporum Schlechtend.:Fr. f.sp. cepae (H.N.
Hans.)W.C. Snynder and H.N. Hans. es una
de las principales enfermedades que afectan
a este cultivo (1,7,12). En los ltimos aos
se ha observado una alta incidencia de este
patgeno en todas las zonas de produccin
ocasionando prdidas severas a los agricultores. Los sntomas de esta enfermedad son
diversos, afectando todos los estados
fenolgicos. En plntulas, la infeccin es a
nivel de la radcula ocasionando la muerte de
la plntula antes y despus de la emergencia. El patgeno penetra al disco basal a travs de heridas en las races y ocasiona una
necrosis del sistema vascular. En la parte
area se observa amarillamiento seguido de
muerte de las hojas basales y finalmente de
toda la planta ( 1,2,12).
Se colectaron bulbos de cebolla con

sntomas de pudricin de disco basal. El hongo Fusarium oxysporum f.sp. cepae se aisl
en medio papa dextrosa agar oxitetraciclina
(PDAO)(6). La especie fue identificada siguiendo a Nelson et al (9). Con este aislamiento se
evalo previamente dos mtodos de inoculacin. Todas las pruebas se hicieron bajo condiciones de invernadero con temperaturas promedio mnima de 22C y mxima de 26C.
Los cultivares de cebolla (Allium cepa

L.) muestran diferentes reacciones a la infeccin por Fusarium oxysporum f.sp. cepae
(1,2,3), pero se desconoce el mecanismo
exacto de la resistencia. En algunos casos
la resistencia proviene de genes de otras especies de Allium, como el caso de cultivares
que son hbridos con Allium fistulosum (1).
El aislamiento puro del patgeno fue

propagado, utilizando porciones de la colonia
desarrollada en PDAO e introducida en bolsas de polipropileno conteniendo trigo cocido
y estril. Luego las bolsas fueron incubadas
por 10 das a 28C. En cada maceta de 1 kg
conteniendo suelo desinfestado se adicion
25 g de trigo con micelio y conidias del hongo. Posteriormente se transplant tres
plntulas de cebolla del cultivar Linda Vista,
desarrolladas en un almcigo preparado en
suelo desinfestado.
En el Per no existen trabajos previos sobre la reaccin de cultivares de cebolla a la pudricin basal. Los trabajos se restringen al problema de raz rosada causada
por Phoma terrestris (5) . El objetivo del presente trabajo fue evaluar el comportamiento
de 22 cultivares de cebolla a la infeccin de
Fusarium oxysporum f.sp. cepae, bajo condiciones de invernadero.
1. Mtodos de Inoculacin
En los dos mtodos de inoculacin
utilizados se evalu el nmero de plntulas
muertas a los 15 y 60 das de transplantadas.
El mejor mtodo de inoculacin y la mejor
concentracin de conidias fueron seleccionadas para la evaluacin de los cultivares.
1.1. Preparados del inculo en suelo
1.2. Inmersin con una suspensin de

conidias
Se procedi a multiplicar el hongo en placas
petri con medio PDAO. Para favorecer la
308
esporulacin, el cultivo desarrollado fue colocado 12 horas a la luz durante 8 das. Una vez
observada la esporulacin del patgeno, se
adicion a cada placa 20 ml de agua estril y
se procedi a recolectar las conidias. Se probaron 10 concentraciones de conidias por
mililitro (10 a 1010 conidias/ml.). Todas las
concentraciones fueron estandarizadas usando la cmara de Neubauer (6). De un almcigo con sustrato desinfestado, se extrajeron
plntulas de cebolla de 45 das de edad. Luego de lavarlas con agua estril y haciendo
uso de un estilete se efectu cinco punciones en el disco basal (tallo) e inmediatamente
se sumergieron en la suspensin de conidias
durante 10 minutos. Luego se transplantaron
a macetas conteniendo 1 kg de suelo desinfestado. En cada maceta se colocaron tres
plntulas y en total se tuvieron cuatro repeticiones.
2. Evaluacin de Cultivares
Se evaluaron 22 cultivares de cebolla (Cuadro 1), los cuales fueron inoculados
mediante la tcnica de puncin del disco basal
e inmersin en una suspensin de 10 5
conidias/ml. Las plntulas inoculadas se
transplantaron en macetas conteniendo 1
kg de suelo desinfestado y se tuvieron 5 repeticiones con tres plntulas por maceta.
Cada cultivar tuvo un testigo sin inocular. La
evaluacin se realiz hasta los 60 das despus del transplante. Los parmetros evaluados fueron: nmero de plntulas muertas
y grados de severidad de ataque segn la escala de Rengwalska (11) (Cuadro 2).
Los cultivares fueron clasificados en
muy susceptibles, susceptibles, moderadamente resistentes y resistentes en funcin a
una adaptacin de la clasificacin realizada
por Abawi et al. (1). En el presente trabajo se
consider como cultivar muy susceptible
aquel que tuvo un porcentaje de mortandad
de 100 %, susceptible entre 40 y 100 %, mo-
deradamente resistente entre 20 y 40 % y

resistente menos del 20%.
RESULTADOS
Mtodos de inoculacin
Transplante del suelo infestado con el patgeno. A los 45 das de evaluacin no se
encontr plntulas muertas, slo el 25% de
plntulas mostraron sntomas iniciales de la
enfermedad(amarillamiento de hojas
basales). A los 60 das se observ un 10%
de plntulas muertas y 90% de plantas con
sntomas iniciales.
Inmersin en una suspensin de conidias.
A los 45 das de instalado el experimento, en
la concentracin de 105 conidias/ml se observ muerte de las doce plntulas. A densidades menores no se obtuvo un 100% de
plntulas muertas, y a las mayores concentraciones se obtuvo los mismos resultados que para la concentracin de 10 5
conidias/ml (Fig.1).
Seleccin de mtodos de inoculacin. De
ambos mtodos, el de puncin al disco basal
de plntulas y posterior inmersin en la suspensin de conidias fue el mtodo que dio
sntomas visibles y diferenciables a los 45
das de la evaluacin, por lo que fue seleccionado como el mtodo para la evaluacin de
los cultivares.
Evaluacin de cultivares
Todos los cultivares presentaron
muerte de plntulas y un grado variable de
severidad de ataque por Fusarium oxysporum
f.sp. cepae, pero se encontraron diferencias
estadsticamente significativas entre los distintos cultivares (Cuadro 3). Con respecto al
porcentaje de plntulas muertas (Fig. 2), el
cultivar Atena fue el que mostr menor porcentaje de mortandad (16.67%), compor-

tndose como resistente. Este cultivar tuvo

diferencias significativas con el resto de
cultivares y un menor grado (2.25) de severidad. Un segundo grupo estuvo integrado por
el cultivar XPH6700, considerado como moderadamente resistente. Un tercer grupo por
TG438, AG33, seguidos de Roja Arequipea,
Granex 33, Red Fano, XPH6712, Columbia
15179 y Onion Rojo como susceptibles. El
resto mostr un 100% de plantlas muertas
comportndose como muy susceptibles(Cuadro 3 y Fig. 2).
DISCUSION
En la evaluacin de cultivares, los
parmetros de porcentaje de plntulas muertas y grados de severidad mostraron que todos los cultivares permiten un desarrollo de
la enfermedad, pero existen diferencias en la
reaccin al comportamiento frente a Fusarium
oxysporum f.sp. cepae. No existen muchos
trabajos de investigacin publicados con respecto a la reaccin de cultivares de cebolla a
este patgeno. Abawi (1), ensay diferentes
cultivares, encontrando que en todos los
cultivares se desarrollaba la enfermedad pero
en diferente grado, observaciones que son
similares al presente trabajo. Ninguno de los
cultivares ensayados por este autor existen
a la fecha, por lo que no pueden ser comparados con los actuales.
309
de las cebollas y en general de las alliaceas

es expresada por genes menores, es decir que
no se trata de una resistencia extrema sino
polignica, que permite un cierto grado de
desarrollo de la enfermedad en las plantas.
Slo Atena result resistente. Este
cultivar es un hbrido de cebollas amarillas de
gran vigor. En campos comerciales se ha
observado su buen comportamiento en prendimiento y vigor, con muy bajos porcentajes
de plantas enfermas. Estas caractersticas
probablemente reflejan un buen comportamiento contra F. oxysporum. Los cultivares
TG438 y Roja Arequipea se comportaron
como susceptibles, ambos cultivares son de
polinizacin abierta. Anculle(4) seala que el
comportamiento de este tipo de cultivares es
muy variable por el hecho de ser de polinizacin abierta resultando en caractersticas
genticas no uniformes. En el caso del cultivar Roja Arequipea, la variabilidad es muy
alta debido a que la mayora de agricultores
tiene sus propias selecciones (4). Todas estas selecciones han sido agrupadas dentro de
un cultivar denominado en forma genrica Roja
Arequipea, siendo muy probable que puedan
existir selecciones de Roja Arequipea que
sean mas o menos susceptibles a la seleccin empleada en este ensayo.
LITERATURA CITADA
No se conoce con exactitud la naturaleza de la resistencia de la cebolla a
Fusarium oxysporum, pero segn el presente ensayo, el desarrollo de la pudricin basal
en todos los cultivares y dentro de cada cultivar indican que la resistencia a F. oxysporum
en cebolla es cunantitativa. Estos resultados
coinciden con lo reportado por Abawi et al.
(1), Lorber et al. (8) y Rabinowitch et al. (9),
quienes encontraron desarrollo de la enfermedad en todos los cultivares probados.
Rabinowitch y Brewster(9) mencionan que
probablemente la resistencia a F. oxysporum
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Cuadro 1.
Caractersticas de 22 cultivares de cebolla inoculados con Fusarium

oxysporum f.sp. cepae. La Molina, 2000
311
Cuadro 2. Escala de severidad de ataque de Fusarium oxysporum f.sp. cepae

en cebolla, propuesta por Rengwalska (10)
Fig.1. Efecto de la densidad de inculo de Fusarium oxysporum f.sp.cepae en la

mortandad de plntulas de cebolla a los 45 das de la inoculacin.

Cuadro 3. Comportamiento de 22 cultivares de cebolla al ataque por Fusarium

oxysporum f.sp. cepae, bajo condiciones de invernadero (Promedios
mnma - mxima de temperatura 22C 26 C).
Cultivar
Plantas muertas (% )*
Grados
de severidad (% )
Comportamiento
Granex 435
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Red Bone
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
RG-ER 074
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Mercedes
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
RCR 1919
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Mr. Max
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
PSR 1190
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Sweet Dixie
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Rio Enrique
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Linda Vista
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Lara
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Sweet Sunrise
100.00 A
5.00
Muy Susceptible
Hybrid Onion Rojo
83.33 ABC
4.58
Columbia 15179
83.33 ABC
4.75
Muy Susceptible
X P H 6712
75.00 ABC
4.42
Muy Susceptible
Red Fano
66.67 ABC
4.33
Muy Susceptible
Granex 33
58.33 BC
3.92
Susceptible
Roja Arequipea
58.33 BC
4.08
Susceptible
A G 33
50.00 CD
4.25
Susceptible
TG438
50.00 D
2.83
Susceptible
XPH6700
33.33 D
3.58
Moderadamente Resisente
Atena
16.67 E
2.25
Resistente
Muy Susceptible
* Valores con letras diferentes presentan diferencias estadsticas altamente significativas de

acuerdo a la Prueba de Duncan (p=0.01) por comparacin mltiple de medias CV = 12.61%,
CME = 0.037
314
Cultivares
Figura 2.
Porcentaje de plntulas muertas de 22 cultivares de cebolla inoculadas

con Fusarium oxysporum f.sp. cepae bajo condiciones de invernadero.
315
IDENTIFICACION DE GRUPOS DE ANASTOMOSIS DE AISLAMIENTOS DE Rhizoctonia

solani KUHN PROCEDENTES DE LAS PRINCIPALES ZONAS
ALGODONERAS DEL PERU
Liliana Aragn y Leonor Mattos1
ABSTRACT
Cotton fields were sampled from the most important production areas on the coast of
Peru (Piura, Huaral and Chincha) and in the experimental land of The Research Departament of
Cotton from La Molina. Seedlings showed typical symptons of sore-shin caused by Rhizoctonia
solani. This survey was conducted in order to identify Rhizoctonia solani anastomosis groups.
From these samples, Rhizoctonia solani isolates were obteined, and characterizade on the
basis of the description made by Parmeter et al and Ogoshi. Before this survey began, the
pathogenicity tests were made according to Kochs postulates.
The anastomosis groups were identified by microcultures. All the isolates belonged to
AG-4. The mechanism of hyphal fusion was observed among all isolates and the type isolate of
AG-4; and the killing reaction, with type isolates AG-1 and AG-5.
RESUMEN
Se colectaron plntulas de algodn con sntomas de chupadera fungosa, procedentes
de las principales zonas de produccin de este cultivo (Piura, Hural y Chincha) y del campo
experimental del P.I.P.S. de Algodn en La Molina. Las plntulas muestreadas presentaban
los sntomas tpicos de la chupadera post-emergente, es decir lesiones hundidas y color rojizo-ocre al nivel del cuello. Este muestreo se realiz con la finalidad de determinar los grupos
de anastomosis de los aislamientos obtenidos de Rhizoctonia solani. Los aislamientos de
Rhizoctonia solani, fueron caracterizados en base a las descripciones hechas por Parmeter et
al y Ogoshi. Se efectuaron las pruebas de patogenicidad correspondientes a los postulados
de Koch antes de iniciar los estudios.
La identificacion de los Grupos de Anastomosis se realiz mediante la tcnica del
microcultivo.
1
Profesor Auxiliar y Profesor Principal, respectivamente del Dpto. de Entomologa y Fitopatologa

de la Facultad de Agronoma
316
Todos los aislamientos correspondieron al GA-4, pudo observarse la unin de

citoplasmas entre los cuatro aislamientos y el probador GA-4; ademas, se observ la denominada reaccin de muerte con los probadores GA-1 y GA-5.
INTRODUCCION
El algodonero es un cultivo de mucha importancia econmica en algunos pases tropicales y en las regiones clidas de
Sudamrica. La importancia de este cultivo
radica en la dureza, finura y durabilidad en su
fibra y en las semillas por ser materia prima
en la extraccin de aceite vegetal de alta calidad. Un patgeno que afecta en los primeros estados fenolgicos del cultivo es
Rhizoctonia solani Kuhn, el cual ocasiona la
enfermedad conocida como la chupadera que
es de importancia porque ocasiona la muerte
de 10 a 60% de plntulas. Este hongo es un
patgeno que afecta varios cultivos. Generalmente no ocasiona la muerte de toda la poblacin de plantas, pero puede originar un
desigual y lento desarrollo; adems, puede
afectar la lnea de siembra originando espacios vacos en el campo, exigiendo a veces
el replante.
Rhizoctonia solani Kuhn [cuyo
teleomorfo es Thanatephorus cucumeris
(Frank)Donk] es una especie conformada por
un conjunto de variantes de patgenos de
suelo agrupados intraespecficamente en base
a las caractersticas de patogenicidad, morfologa de la colonia, serologa y, ltimamente, en caractersticas moleculares. Estos grupos pueden ser comparados con las formas
especiales de Fusarium oxysporum. Actualmente se reconocen dentro de la especie
Rhizoctonia solani 11 grupos de anastomosis (GA). Se ha reportado que el GA-4 afecta
al algodonero y a otras especies vegetales,
como la papa, hortalizas, etc. En la Costa de
Per se siembran varias especies vegetales
dentro de las cuales se halla el algodonero,
es por ello de suma importancia el determi-
nar el GA presente en las zonas algodoneras

para brindar informacin que permita efectuar
un mejor programa de rotacin de cultivo, evitando as el incremento en la poblacin de
Rhizoctonia solani en el suelo. Por lo que se
consider importante determinar el grupo de
anastomosis de aislamientos de R. solani
procedentes de las principales zonas algodoneras del pas.
1. Coleccin, aislamiento e identificacin
de Rhizoctonia solani Kuhn.
Se sigui la metodologa utilizada por
Anguiz (1,2). Se colectaron plntulas de algodn de campos de produccin comercial
de algodn de las zonas de Piura, Huaral y
Chincha y, del campo experimental del Programa de Investigacin y Proyeccin Social
de Algodn de la UNALM en La Molina. El
material recolectado mostraba el sntoma de
chupadera post-emergente o lesin hundida
en el cuello. El tejido vegetal fue lavado con
abundante agua de cao y la seccin correspondiente al tejido enfermo fue desinfestada
con hipoclorito de sodio al 10% por 5 minutos, luego se lav con agua destilada estril,
una vez que el material tratado estuvo seco
superficialmente, se sembraron porciones de
tejido enfermo en medio de cultivo Papa Dextrosa - Agar - Oxitetraciclina (PDAO). Las
placas petri conteniendo la siembra fueron
incubadas a 25C por 72 horas (3, 5, 6, 7,
15). Se realizaron observaciones, al microscopio compuesto de luz, de preparaciones en
porta y cubreobjetos de cada uno de los hongos aislados de cada placa petri. Para consignar a un aislamiento como la especie
IDENTIFICACION DE GRUPOS DE ANASTOMOSIS DE AISLAMIENTOS DE Rhizoctonia solani KUHN

PROCEDENTES DE LAS PRINCIPALES ZONAS ALGODONERAS DEL PERU
Rhizoctonia solani se tuvo que observar las

caractersticas de las estructuras vegetativas
similares a las registradas por Parmeter et al
(14). Aquellos aislamientos que correspondan
a Rhizoctonia solani Kuhn, fueron purificados
y almacenados a 5C.
2. Pruebas de patogenicidad.
El inculo de cada uno de los aislamientos de Rhizoctonia solani fue preparado
siguiendo la metodologa descrita por Anguiz
(2, 3) y Papavizas (12).
3. Identificacin de los grupos de anastomosis de Rhizoctonia solani Kuhn.
Se sigui el mtodo de Parmeter et
al (13), el cual consiste en aparear cada aislamiento obtenido con los testigos conocidos
(GA proporcionados por la Micoteca del Departamento de Fitopatologa de la UNALM).
El mtodo utilizado fue el de microcultivos (2,
10), consistente en colocar una pelcula de
Agar - Agua (AA) sobre una de las superficies de un portaobjeto. Sobre esa superficie
se ubicaron bloques de agar procedentes de
colonias de 48 horas de edad, en las que se
hallaban puntas de hifas correspondientes al
aislamiento en estudio y al grupo de anastomosis conocido. El microcultivo fue colocado
en placas petri, conteniendo papel filtro humedecido e incubado a 25C por 48 - 72 horas. La evaluacin del grupo de anastomosis
se efectu observando a travs del microscopio de luz compuesto, marca Nikon, al aumento de 450X (2, 3).
La fusin perfecta (fusin de pared
celular y citoplasma) fue considerada como
la reaccin positiva de anastomosis y la fusin imperfecta (fusin resultante en
plasmlisis o reaccin de muerte) fue considerada como negativa. En cada anastomosis
positiva se observaron por lo menos cinco sitios de fusin. (1, 3, 10, 11, 13, 17).
317
RESULTADOS
Todos los aislamientos obtenidos se
caracterizaron porque las colonias tuvieron un
desarrollo rpido, cubriendo toda la placa (9
cm de dimetro) a las 48 horas. El micelio
inicialmente era de color blanco pero a las 96
horas se torn de un color marrn claro. No
se observ la formacin de esclerotes. Los
aislamientos obtenidos mostraron las caractersticas tpicas de Rhizoctonia solani Kuhn.
En cada uno de los aislamientos se observ
que las hifas mostraban constriccin en la base
de la ramificacin y disposicin en ngulo de
90, la presencia de septas en la ramificacin
y la pigmentacin marrn en el micelio. El dimetro de las hifas se encontraba entre 8 a 10
micras. No se encontr diferencia morfolgica
entre los aislamientos obtenidos de distintas
zonas de cultivo de algodn.
Todos los aislamientos obtenidos
fueron clasificados dentro del GA-4. Se observ la fusin perfecta entre estos aislamientos con el testigo GA-4 y la reaccin de
muerte con los otros testigos utilizados GA1 y GA-5.
DISCUSION
Varios investigadores, inicialmente
(10, 14) propusieron que los aislamientos de
R. solani deberan ser separados en GA-1,
GA-2, GA-3 y GA-4; posteriormente, se han
identificado otros grupos, los cuales han sido
aadidos al grupo inicial, los nuevos grupos
son: GA-5, GA-6, GA-BI, GA-7, GA-8 y GA9, se ha dividido el GA-2 en GA-2-1 y GA-22 (5, 10, 18). Los aislamientos obtenidos en
el presente trabajo se identificaron como GA4; lo cual coincide con los reportes realizados por Anderson (1), Ogoshi (10), Olaya et
al (11), Parmeter et al (13) y Vigalys et al
(17). Melero-Vara & Jimnez-Daz (9) realizaron muestreos en campos cultivados de
algodn del Valle de Guadalquivir, Espaa;
318
de donde llegaron a obtener 37 aislamientos

de Rhizotonia spp; de los cuales 30 fueron
identificados como R. solani grupo GA-4 despus de realizar las pruebas de anastomosis. Bolkan & Ribeiro (3) identificaron en el
Estado de Paran (Brasil) tres aislamientos
de R. solani provenientes de campos cultivados de algodn como GA-4.
En los aislamientos de Chincha,
Huaral, La Molina y Piura no se estableci
la unin de citoplasmas con los probadores
GA-1 y GA-5, sino la denominada reaccin
de muerteque caracteriza las diferencias fisiolgicas entre los distintos grupos de
anastomosis de Rhizoctonia solani (1, 4, 13).
Anderson (1) califica a la reaccin de
muertecomo una reaccin de incompatibilidad somtica o vegetativa. Esser (citado por
Anderson, 1) defini esta incompatibilidad
somtica como una incompatibilidad
heterognica y demostr que los responsables son diferentes alelos de 4 loci. La importancia de esta caracterstica radica en
que un GA puede volverse una especializacin fisiolgica que va evolucionando en el
tiempo; no siendo ya la especie R. solani la
unidad especializada. Sumner et al (16) demostraron una reduccin poblacional de R.
solani GA-4 y de la incidencia de la
chupadera luego de una secuencia rotacional
con triticale (Triticosecale): algodn - triticale
- soya - triticale. En un monocultivo de algodn, la incidencia de chupadera va
incrementando de campaa a campaa, porque el grupo GA-4 dispone de su planta
hospedante, pero con prcticas de rotacin
de cultivos se puede obtener una reduccin
de la incidencia a niveles en los que probablemente puede ser innecesario un tratamiento
qumico a la semilla, la explicacin en este
caso es que la alta especializacin del grupo
GA-4 no le permite hacer uso de otros
hospedantes, se suma a esto la no produccin de estructuras de conservacin
(esclerotes).
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IDENTIFICACION DE GRUPOS DE ANASTOMOSIS DE AISLAMIENTOS DE Rhizoctonia solani KUHN

PROCEDENTES DE LAS PRINCIPALES ZONAS ALGODONERAS DEL PERU
319
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and genetic variation of Rhxoctonia
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320

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SILVIA GUTIRREZ FLORES

Exactitud y eficacia en una prueba interlaboratorio ........................................ 159

Criopreservacin de semen de gallos reproductores de carne (Cornish)

Etiologa de la raiz rosada de la cebolla y su control qumico ................................. 189

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Etiologa de la pudricion negra de la pia y prevencin

Diseo de una mquina peladora de ajos (allium sativum)

Anlisis de un diseo de bloques incompletos

Identificacin de grupos de anastomosis de aislamientos de Rhizoctonia

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

Silvia Gutirrez Flores

Docente de la Facultad de Economa

Anales Cientficos UNALM

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

es el nmero de resultados de ensayo en la celda para el laboratorio

Anales Cientficos UNALM

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

es el nmero de laboratorios (i =1, 2, ... , p).

es el nmero de niveles de ensayo (j =1, 2, ... , q)

para cada laboratorio y luego calcular:

para cada laboratorio dentro de cada nivel.

Anales Cientficos UNALM

donde smax es la desviacin estndar mxima del grupo.

donde, s se obtiene por:

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

Si la estadstica de la prueba es menor o igual a su valor crtico de 5%, el tem

Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico de 5% y menor o igual

Si la estadstica de la prueba es mayor que su valor crtico 1%, al tem probado se

La prueba de Grubbs est basado en el supuesto de normalidad.

Anales Cientficos UNALM

estimado de la variancia entre laboratorios

estimado de la variancia de reproducibilidad

desviacin estndar relativa de repetibilidad

desviacin estndar relativa de reproducibilidad

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

En la tabla N 2 se muestran los promedios y los valores de desviaciones estndar de

Anales Cientficos UNALM

La tabla N 3 muestra los valores de la estadstica de consistencia ENTRE Laboratorios, la

Tabla N 3: Prueba de Mandel (hij)

Tabla N 4 : Estadstica de Mandel, hij

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

Grfico N 1: Estadstica de Consistencia ENTRE Laboratorios, hij de Mandel

En el grfico N 1 se muestran los valores obtenidos de la estadstica hij de Mandel

Anales Cientficos UNALM

Tabla N 5: Prueba de Mandel (kij)

La tabla N 5 muestra los valores de la prueba de consistencia DENTRO de Laboratorios, kij de

Tabla N 6 : Estadstica de Mandel (kij)

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

Grfico N 2: Estadstica de Consistencia dentro del Laboratorio, Mandel kij

Anales Cientficos UNALM

Al analizar la variabilidad ms alta mediante la prueba de Cochran (ver tabla N 2), se

EXACTITUD Y EFICACIA EN UNA PRUEBA INTERLABORATORIO

El cuadro N 1 se ha obtenido a partir del modelo general, que por lo descrito en el

Anales Cientficos UNALM

La desviaciones estndares relativas de repetibilidad y reproducibilidad son :

= 2.09% se considera que proviene de resultados muy homogneos.

= 8.64% se considera que proviene de resultados muy homogneos.

El promedio general estimado, es de 4.7275% de humedad y el error estndar de

5. El error estndar de reproducibilidad no controlado es de 0.408% de humedad. Este

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