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Laboratorio de Microbiologa

Anlisis Microbiolgico de Superficies Vivas

I.

OBJETIVOS

Identificar las bacterias presentes en las manos.

Conocer qu medio de cultivo nos ayuda identificar el Staphylococcus
aureus.
II.

MARCO TEORICO

El Staphylococcus aureus, conocido comnmente como estafilococo ureo o

dorado, es una bacteria anaerobia grampositiva productora de coagulasa y
catalasa que se encuentra ampliamente distribuida por todo el mundo,
estimndose que una de cada tres personas se hallan colonizadas, que no
infectadas,
por
ella.
Puede producir una amplia gama de enfermedades, que van desde infecciones
cutneas y de las mucosas relativamente benignas, tales como foliculitis,
forunculosis o conjuntivitis, hasta enfermedades de riesgo vital, como celulitis,
abscesos profundos, osteomielitis, meningitis, sepsis, endocarditis o neumona.
Adems, tambin puede afectar al aparato gastrointestinal, ya sea por
presencia fsica de Staphylococcus aureus o por la ingesta de la enterotoxina
estafiloccica
secretada
por
la
bacteria.
En la actualidad, este microorganismo se erige como el principal causante de
las infecciones nosocomiales. Esta situacin se ve favorecida por el hecho de
que esta especie habita tanto en las mucosas como en la piel de los seres
humanos, lo que permite que a travs de las heridas quirrgicas pueda
penetrar en el torrente sanguneo del paciente por medio del contacto directo o

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indirecto con el personal sanitario, con un objeto contaminado, o incluso, con

otro paciente.

Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina.

Los estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio;
las colonias aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante. Los estafilococos
coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja o prpura.
Las colonias sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de cloruro de
sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la
fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales, el manitol es el hidrato de
carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se encuentra en alta
concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la flora
acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH.
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan
el manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el
indicador
de
pH
del
color
rojo
al
amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no
fermentar
el
manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como
colonias amarillas rodeadas de una zona del mismo color.

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Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas,

rodeadas de una zona del mismo color o prpura.
III.

MATERIALES

Muestra (Aire del ambiente)

Pipetas de 5 y 10 ml esterilizados
Probeta esterilizada
Guantes, buconasal, y gorro
Tubo de ensayo esterilizado
Vaso precipitado (250ml)
Incubadora regulada
Contador de colonias
Diluyente (solucin salina al 0.7 %)
Placas Petri
IV.

PROCEDIMIENTO

MEDIO: Manitol Salado agar

MUESTRA: 10ml de solucin salina previo lavado de manos

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Preparamos la solucin salina al 0.7%

peso.
Enjuagar las manos en solucin salina de
10ml.
Fundir totalmente el medio de cultivo

Enjuagar las manos en 10ml de solucin salina en una bolsa ziploc.

Verter 1ml de la solucin en la placa Petri y posteriormente agregar
entre 15 y 20 ml del medio de cultivo.

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Colocar a la incubadora

Realizar la lectura.

V.

RESULTADOS

INFORME DE ENSAYO

ANLISIS: Microbiolgico de Superficies vivas (MANOS) (STAPHYLOCOCCUS

AUREUS)
LUGAR: Laboratorio de Microbiologa FIQ UNAC
FECHA DE MUESTREO: 03 de Junio del 2014
FECHA DE EJECUCIN: 03 de Junio del 2014

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RESULTADOS MICROBIOLGICOS

ENSAYOS
Staphylococcus Aureus
VI.

MUESTRA

LIMITE PERMISIBLE

2223 UFC/g

< 100 UFC/g

CONCLUSION

La muestra est fuera de lmite permisible, la razn es que tiene alta

carga microbiana, por consiguiente tiene que realizarse una mayor
dilucin para el conteo microbiano. (Hasta 10-10).

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VII.

RECOMENDACIONES

Asegurarse de que el medio sea el adecuado para sembrar la bacteria a

analizar.
Mantener el rea de trabajo limpia para evitar la contaminacin de la
muestra.

VIII.

BIBLIOGRAFIA

Gladwin, Mark; Bill Trattler (2007). Clinical Microbiology made ridiculously

simple. Miami, FL: MedMaster, Inc. pp. 45. ISBN 978-0-940780-81-1.
http://www.biblioteca.upibi.ipn.mx/Archivos/Material%20Didactico/Microbiol
og%C3%ADa%20ambiental/I.%20Estructura%20y%20Funci%C3%B3n.pd
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