Proposta de Metodologia para Avaliacao Da AHE

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL
INSTITUTO DE PESQUISAS HIDRULICAS
PROPOSTA DE METODOLOGIA PARA DETERMINAO DA

ATIVIDADE HIDROGNICA ESPECFICA.
VIVIANE TREVISAN
Tese submetida ao Programa de Ps Graduao em Recursos Hdricos e Saneamento Ambiental

da Universidade Federal do Rio Grande do Sul como requisito parcial para a obteno do ttulo
de Doutor em Recursos Hdricos e Saneamento Ambiental
Orientador: Prof. Dr. Luiz Olinto Monteggia
Banca examinadora
Prof. Dr. Antonio Domingues Benetti IPH/UFRGS
Prof. Dr. Lademir Luiz Beal - UCS
Prof. Dr. Luis Alcides Schiavo Miranda UNISINOS
Prof. Dr. Marcelo Zaiat - USP
Porto Alegre, Dezembro de 2010.
ii
Nunca deixem que lhe digam

Que no vale a pena
Acreditar no sonho que se tem
Ou que seus planos nunca vo dar certo
Ou que voc nunca vai ser algum (...)
Se voc quiser algum em quem confiar
Confie em si mesmo
Quem acredita sempre alcana (...)
Renato Russo / Flvio Venturini
iii
AGRADECIMENTOS
Agradeo a todos que, de alguma maneira, contriburam para a realizao deste
trabalho, especialmente:
Aos meus pais Nelso e Ani e minha tia Lenis pelo carinho, apoio e incentivo to
importantes nesta etapa.
Ao Prof. Dr. Luiz Olinto Monteggia pela amizade, orientao, apoio e confiana.
Ao PPG em Recursos Hdricos e Saneamento Ambiental / IPH - UFRGS e ao CNPq pela
concesso da bolsa para a realizao deste trabalho.
Aos professores e funcionrios do Instituto de Pesquisas Hidrulicas da
Universidade Federal do Rio Grande do Sul. Em especial ao funcionrio Silvio L. S. de Oliveira
pelo incentivo e auxlio nas coletas e na soluo de alguns probleminhas que surgiram no
decorrer desse trabalho.
Aos professores Dr. Ivo Wentz e Dra. Veronica Schmidt do setor de sunos da
FAVET/UFRGS pelo auxlio no trabalho com os sunos.
Ao colega Guilherme Baumgarten pela ajuda na soluo dos probleminhas do
respirmetro.
Aos colegas do PPG Dayana Agudelo, Felipe K. Leal, Saulo V. Della Giustina,
Andra Souza Castro, Lcia Ribeiro, Eliete Canterle, Viviane Juliano, Simone Oliveira, Carla
Muller, Emilio Wild pela amizade, incentivo, convivncia e trocas de idias pelos corredores e
durante o caf.
Ao bolsista IC Henrique Delabary pelo auxlio e amizade.
Aos amigos Diego Altieri da Silveira, Maria Cristina de Almeida e Silva, Juliana
Nichele, Roberto Perez Campello e Ligia Ukstin Campello pela grande amizade, nascida nas
catacumbas do Laboratrio de Saneamento.
iv
Sumrio
RESUMO
vi
ABSTRACT
vii
Lista de Figuras
viii
Lista de Tabelas
xi
Lista de Abreviaturas
xiv
Apresentao
1 - Introduo
2. Reviso bibliogrfica
2.1. Bioenergia e biomassa
2.2. Hidrognio
2.2.1. Produo biolgica de hidrognio
2.2.1.1. Biofotlise utilizando algas e cianobactrias
10
2.2.1.2. Fotodecomposio de compostos orgnicos por bactrias fotossintticas
11
2.2.1.3. Produo de hidrognio por meio da fermentao de compostos orgnicos
12
2.2.1.4. Sistemas hbridos utilizando bactrias fotossintticas e bactrias fermentativas
13
2.2.2. Fatores que afetam a produo de hidrognio
14
2.2.2.1. pH
14
2.2.2.2. Temperatura
15
2.2.2.3. Mistura
15
2.2.2.4. Caractersticas do lodo
16
2.2.2.5. Composio do efluente
17
2.2.2.6. Meios nutricionais
17
2.2.3. Configurao dos reatores
19
2.3. Testes em batelada para a avaliao da atividade de microrganismos anaerbios
20
3. Objetivos
22
3.1. Objetivo Geral
22
3.2. Objetivos Especficos
22
4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de

lodos
23
5 - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos orgnicos
61
6 - Influncia do controle de pH na produo de hidrognio a partir da glicose
84
7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir de

efluentes da suinocultura
98
8 Discusso geral
124
9 -Concluses
132
10 - Recomendaes
134
11 Referncias bibliogrficas
135
Anexos
145
vi
Resumo
A produo de hidrognio pelo processo fermentativo sofre influncia da concentrao e
das caractersticas do substrato orgnico, do valor do pH do efluente e da concentrao de lodo
no reator. A determinao da atividade hidrognica especfica de substratos orgnicos e de lodos
pode auxiliar na anlise do volume de hidrognio produzido durante a fermentao, na produo
de cidos graxos volteis, no grau de acidificao e avaliar a toxicidade de compostos aos
microrganismos produtores de hidrognio. Para determinao das condies ideais para a medida
da atividade hidrognica especfica foram realizados testes em batelada utilizando glicose como
fonte de matria orgnica nas concentraes de 1.000, 2.000, 4.000, 8.000, 12.000, 16.000 e
20.000 mg.DQO.L-1. Foram testados os valores de pH de 5,0; 5,5; 6,0 e 6,5 e as concentraes de
lodo de 1.250; 2.500; 5.000 e 7.500mgSVT.L-1. A maior atividade hidrognica obtida foi de 483
mLH2.gSVT-1.h-1, para o valor de DQO de 12.000mgO2.L-1, no valor de pH igual a 6,0 e
concentrao de lodo de 2.500mgSVT.L-1. O maior volume de hidrognio produzido foi de
38mL.gDQO-1 no valor de DQO de 16.000mgO2.L-1, no pH de 5,5 e concentrao de lodo de
5.000mgSVT.L-1. A anlise dos cidos graxos volteis indicou que os maiores percentuais de
cido actico e cido propinico foram obtidos quando o valor do pH testado foi de 6,5, na
concentrao SVT de 7.500mg.L-1. Nas demais condies estudadas, o cido butrico foi o cido
graxo voltil predominante no efluente. O valor do grau de acidificao foi influenciado
provavelmente pela matria orgnica proveniente do lodo, resultando em valores acima de 1,0.
Testes de medida da atividade hidrognica especfica realizados com diferentes substratos
orgnicos (cido propinico, cido butrico, efluente protico, glicerol e efluente do processo de
produo de fungicida) permitiram avaliar a aplicabilidade do teste de atividade e o potencial que
os substratos orgnicos possuem para gerar hidrognio. Foram utilizadas as concentraes de
matria orgnica apresentadas acima, valor do pH inicial igual a 6,0 e concentrao de lodo de
2.500mgSVT.L-1 . A maior atividade hidrognica e volume de hidrognio produzido foram
obtidas para o efluente protico, 6,8mLH2.gSVT-1.h-1 e 1,74mL.gDQO-1, respectivamente. O
cido graxo voltil encontrado em maior porcentagem aps a fermentao dos substratos
orgnicos foi o cido actico. Foi observado alto grau de acidificao nos testes com o cido
butrico devido as altas concentraes residuais no efluente. A influncia do controle no valor do
pH sobre os microrganismos produtores de hidrognio foi avaliada em testes com e sem controle
de pH, utilizando glicose como fonte de matria orgnica na concentrao de 12.000mg.DQOL-1,
nos valores de pH de 5,0; 5,5 e 6,0 e na concentrao de lodo de 2.500mgSVT.L-1. Os resultados
indicaram que as maiores porcentagens de hidrognio, produo de cidos graxos volteis, grau
de acidificao e remoo de matria orgnica ocorreram quando no houve o controle do pH,
indicando que h a necessidade de um ajuste inicial no valor do pH, porm o controle pode
prejudicar o desempenho do processo. Alm disso, foi estudada a otimizao do processo de
produo de hidrognio a partir de efluente da suinocultura, utilizando reatores anaerbios
seqenciais em batelada, um reator acidognico e outro metanognico. Foram analisados o
controle do tempo de deteno celular e os efeitos do pH e da temperatura da fase acidognica
sobre a produo de hidrognio. No reator acidognico foram testados os tempos de deteno
celular de 1,4; 1,7 e 2,5 dias, os valores de pH de 5,0 e 6,0 e as temperaturas ambiente (de 15 a
25C), 35C e 55C. A maior concentrao de hidrognio obtida no biogs foi de 21,3 %, para o
tempo de deteno celular de 1,4 dia, o valor do pH inicial ajustado para 5,0 e na temperatura de
35C. Nesta condio foi verificado o aumento na concentrao de cidos graxos volteis no
efluente do reator acidognico, indicando a ocorrncia da hidrlise das substncias complexas e
conseqente aumento na concentrao de hidrognio.
vii
Abstract
Hydrogen production by fermentation process is influenced by the concentration and
characteristics of organic substrate, the effluent pH value and biomass concentration. The
determination of specific hydrogenic activity of organic substrates and biomass can be a tool to
analyze the hydrogen volume produced during the fermentation, the volatile fatty acids
production, the degree of acidification and evaluated compounds toxicity to the hydrogen
producing microorganisms. To determine the ideal conditions for the measurement of specific
hydrogen activity were realized batch tests using glucose as source of organic matter at
concentrations of 1,000, 2,000, 4,000, 8,000, 12,000, 16,000 and 20,000mg.COD.L-1. The pH
values tested were 5.0, 5.5, 6.0 and 6.5 and the biomass concentration of 1,250, 2,500, 5,000 and
7,500mgTVS.L-1. The higher hydrogen activity was 483mLH2.gTVS-1.h-1 for the organic matter
concentration of 12,000mg.L-1, pH value of 6.0 and biomass concentration of 2,500mgTVS.L-1.
The higher hydrogen volume produced was 38mL.gCOD-1 in the initial organic matter
concentration of 16,000mg.L-1, at pH value 5.5 and sludge concentration of 5,000mgTVS.L-1.
Volatile fatty acids analysis indicated that the highest percentage of acetic acid and propionic
acid were obtained when the pH tested was 6.5, at biomass concentration of 7,500mgTVS.L-1. In
other studied conditions, the butyric acid was the predominant volatile fatty acids in the effluent.
The degree of acidification value was probably affected by organic matter from sludge, resulting
in values above 1.0. Tests measuring the specific hydrogen activity were performed with different
organic substrates (propionic acid, butyric acid, proteic effluent, glycerol and fungicide
production effluent) permitted to evaluate the applicability of the activity test and the potential
that organic substrates have to produce hydrogen. Using the organic matter concentrations
presented above, initial pH value equal to 6.0 and biomass concentration of 2,500mgTVS.L-1.
The higher hydrogen activity and hydrogen volume produced were obtained for the proteic
effluent, 6.8mLH2.gTVS-1.h-1 and 1,74mL.gCOD-1, respectively. The volatile fatty acid found in
highest percentage after fermentation of organic substrates was acetic acid. A high degree of
acidification was observed on tests with butyric acid due the high residual concentration in the
effluent. The influence of pH control on hydrogen producing microorganisms was evaluated in
tests with and without pH control, using glucose as organic matter source at concentration of
12,000mg.COD.L-1, the pH values tested was 5.0, 5.5 and 6.0 and the biomass concentration was
2,500mgTVS.L-1. The results indicated that the higher hydrogen percentages, volatile fatty acid
production, degree of acidification and organic matter removal occurred when the pH was not
controlled; indicating that an initial adjustment in the pH was needed, but the control may affect
the process performance. Additional studies about the optimization of hydrogen production from
raw swine waste using two batch anaerobic reactors, one acidogenic reactor and other
methanogenic reactor were performed. The influence of sludge age and the pH and temperature
effects on acidogenic phase were analyzed. In acidogenic reactor were tested the sludge ages of
1.4, 1.7 and 2.5 days, pH values of 5.0 and 6.0 and temperatures: ambient (15 to 25C), 35C and
55C .The higher hydrogen concentration in the biogas was 21.3% for the sludge age of 1.4 days,
initial pH equal to 5.0 and temperature 35 C. In this condition there was an increase in volatile
fatty acids concentration in the acidogenic reactor effluent, indicating the occurrence of complex
substances hydrolysis and consequently the increase in hydrogen concentration.
viii
Lista de figuras
2 Reviso bibliogrfica
Figura 01 Etapas da digesto anaerbia da matria orgnica complexa. As porcentagens
expressam o valor da DQO.
10
4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de lodos

Figura 01 - Esquema do respirmetro anaerbio utilizado nos testes
27
Figura 02 - Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
30

31
Figura 04 Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

32

33
Figura 06 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores

de pH testados para a concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
35

36

36

37
Figura 10 Distribuio percentual mssica dos AGV em funo dos valores de DQO e
pH estudados, na concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
40
42
44
pH estudados, na concentrao de SVT de 7.500 mgSVT.L-1.
46
ix
Figura 14 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a

48

49

50

50
Figura 18 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT

de 1.250mg.L-1.
51

de 2.500mg.L-1.
52

de 5.000mg.L-1.
53

de 7.500mg.L-1.
54

Figura 01 AHE do acetato de sdio, cidos propinico e butrico, glicerol 5% e efluente
de fungicida, em funo dos valores de DQO testados.
68
Figura 02 AHE do efluente protico em funo dos valores de DQO testados
69
Figura 03 AHE obtidas nos testes com glicose em funo dos valores de DQO testadas.
70
Figura 04 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da

DQO adicionada para os substratos orgnicos estudados e para o acetato de sdio.
71
Figura 05 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da

DQO adicionada nos testes realizados com glicose.
72
Figura 06 Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO dos testes que
utilizaram acetato de sdio, cido propinico, cido butrico e glicose como substratos
orgnicos.
73
Figura 07 - Valor do pH final do mixed liquor em funo da DQO dos testes utilizando
efluente protico, glicerol, efluente de fungicida e glicose.
74
Figura 08 Distribuio percentual mssica dos AGV em funo dos valores de DQO
para os substratos orgnicos estudados e para o acetato de sdio.
78
Figura 09 Valores do grau de acidificao em funo da DQO inicial, para cada

substrato orgnico estudado e para o acetato de sdio.
80

Figura 01 Variao do valor do pH em funo do tempo para cada valor de pH estudado.
88
Figura 02 Concentrao dos cidos actico propinico e butrico em funo do valor do

pH inicial para os testes realizados com e sem controle de pH.
92
7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir de efluentes

da suinocultura
Figura 01 Sistema utilizado no tratamento do efluente da suinocultura. 1 tanque de
alimentao, R1 reator acidognico e R2 - reator metanognico.
103
Figura 02 Composio mdia do biogs do reator acidognico para cada TDC testado.
108
Figura 03 Concentrao mdia de metano no biogs formado no reator metanognico

para cada TDC testado no reator acidognico.
109
Figura 04 Porcentagem mdia de hidrognio formado no reator acidognico nos valores
de pH e temperaturas estudados.
114
Figura 05 - Porcentagem mdia de metano obtida no reator acidognico nos valores de pH
e nas temperaturas estudadas.
115
Figura 06 - Porcentagens mdias de metano formado no reator metanognico nos valores
de pH e temperaturas do afluente.
116
xi
Lista de tabelas
2 Reviso bibliogrfica
Tabela 01 Meios nutricionais estudados para produo de hidrognio
18
4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de lodos

Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado nos testes de medida de atividade.
26
Tabela 02 Concentraes de AGV antes da adio do substrato orgnico, para cada

concentrao de SVT utilizada.
39
Tabela 03 Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

concentrao de SVT de 1.250mg.L-1
39

41

43
Tabela 06 - Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

45

Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado na medida da AHE dos substratos
orgnicos.
64
Tabela 02 Caractersticas dos substratos orgnicos testados.
67
Tabela 03 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com acetato de
sdio anidro e cido propinico.
75
Tabela 04 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com cido butrico
e efluente protico.
76
Tabela 05 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com glicerol 5% e
efluente de fungicida.
76
Tabela 06 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com glicose.
77
xii

Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado nos testes de fermentao.
86
Tabela 02 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial

ajustado para 5,0 0,1 nos fermentadores com e sem controle de pH.
89

90

90
Tabela 05 Grau de acidificao obtido para cada valor de pH testado.
93
Tabela 06 Percentual de remoo de matria orgnica, em base DQO, em cada

fermentador para as condies estudadas.
93
7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir de efluentes

da suinocultura
Tabela 01 Caractersticas do efluente coletado na propriedade rural.
102
Tabela 02 Parmetros fsicos e qumicos analisados e suas respectivas metodologias.
105
Tabela 03 Alcalinidade mdia das amostras dos reatores em cada TDC estudados.
106
Tabela 04 Tabela 04 Valores mdios de DQO total obtidos em cada etapa para os
TDC estudados e eficincia global de remoo.
106
Tabela 05 Concentrao de ST e SVT em cada estgio do sistema para os TDC
estudados.
107
Tabela 06 - Percentuais de ST e SVT removidos do sistema em cada TDC estudado.
107
Tabela 07- Variao da alcalinidade nos valores de pH e temperaturas estudadas.
110
Tabela 08 - Variao da DQO total nos valores de pH e temperaturas estudadas.
111
Tabela 09 Percentuais de DQO total removidos em cada estgio e remoo global.
111
Tabela 10 - Variao do teor de slidos nos valores de pH e temperaturas estudadas.
112
Tabela 11 Percentuais mdios de remoo de ST e SVT em cada estgio e remoo

global para as condies estudadas.
113
xiii
Tabela 12 Concentraes dos AGV na entrada e na sada do reator acidognico em cada

condio estudada.
118
xiv
Lista de Abreviaturas
AGV cido graxo voltil
AHE Atividade Hidrognica Especfica
AME atividade metanognica especfica
ATP adenosina tri fosfato
CNTP Condies normais de temperatura e presso
CoA Co-enzima A
DBO5 - demanda bioqumica de oxignio aos 5 dias
DQO demanda qumica de oxignio
FID detector de ionizao por chama
G.A. grau de acidificao
ST slidos totais
SSV slidos suspensos volteis
SVT slidos volteis totais
TCD detector de condutividade trmica
TDC tempo de deteno celular
UASB - reator de manta de lodo com fluxo ascendente
- taxa de multiplicao dos microrganismos
Apresentao
Esta tese est apresentada sob a forma de artigos que sero submetidos
publicao.
Os Captulos 1 e 2 descrevem, respectivamente, uma introduo do trabalho
desenvolvido nesta tese e a reviso bibliogrfica, que aborda alguns dos processos de produo
biolgica de hidrognio, a influncia dos parmetros operacionais que afetam diretamente a
produo de hidrognio e a importncia do desenvolvimento de um teste em batelada para avaliar
a capacidade de produo de hidrognio que diferentes tipos de lodos e de substratos orgnicos
possuem.
No Captulo 3 esto descritos o objetivo geral e os objetivos especficos a serem
atingidos por este trabalho.
O Captulo 4 apresenta uma nova metodologia para determinao da capacidade
de produo de hidrognio que um lodo ou substrato possuem, denominada Atividade
Hidrognica Especfica. Foram realizados testes em batelada a fim de determinar o valor do pH,
a concentrao de matria orgnica, sob a forma de glicose, e a concentrao de slidos volteis
totais ideais para a medida dessa atividade. Alm disso, foi analisado o volume de hidrognio
produzido, a produo de cidos graxos volteis e o valor do grau de acidificao para cada
condio testada
O Captulo 5 relata os resultados obtidos na medida da Atividade Hidrognica
Especfica, utilizando a metodologia apresentada no Captulo 4, de substratos como: glicose,
cido propinico, cido butrico, efluente com alto teor protico, glicerol e efluente proveniente
da fabricao de fungicida. Esto inseridos neste captulo, tambm, a produo de hidrognio, a
concentrao de cidos graxos volteis e o valor do grau de acidificao para cada substrato
testado.
No Captulo 6 foi estudado o comportamento do pH durante o processo de
produo de hidrognio a partir da glicose e avaliada a influncia do controle do mesmo na
porcentagem de hidrognio no biogs, na concentrao dos cidos actico, propinico e butrico e
no valor do grau de acidificao utilizando um fermentador em escala laboratorial.
O Captulo 7 mostra os resultados de um estudo de produo de hidrognio a partir
de dejetos da suinocultura, utilizando um sistema de reatores anaerbios em duas etapas onde
foram analisados o tempo de deteno celular, a influncia do ajuste do pH inicial e da
temperatura na remoo de matria orgnica, no teor slidos, na produo de cidos graxos

volteis e na composio do biogs produzido.
Nos Captulos 8, 9 e 10, esto respectivamente, a discusso geral interrelacionando os resultados descritos em cada captulo, as concluses e recomendaes geradas
por este trabalho.
1 - Introduo
Os efeitos crescentes das mudanas climticas e a diminuio das reservas
energticas fizeram necessria a busca por fontes alternativas de energia como a biomassa, que
inclui plantas, algas, lodos, resduos de animais e esgotos domsticos, em substituio madeira,
ao carvo e ao petrleo e seus derivados.
A bioenergia, considerada a fonte de energia do futuro e est em ascenso devido
a uma combinao de fatores que incluem: um melhor conhecimento do papel atual da biomassa
e suas contribuies como combustvel; sua disponibilidade, sua versatilidade e sustentabilidade;
seus benefcios ambientais, locais e globais e o desenvolvimento de oportunidades empresariais.
O Brasil se destaca entre as economias industrializadas pela elevada participao
das fontes renovveis em sua matriz energtica devido a alguns privilgios da natureza, como
uma bacia hidrogrfica contando com vrios rios de planalto, fundamental na produo de
eletricidade e o fato de ser o pas com maior rea de clima tropical do mundo, um diferencial
positivo para a produo de energia de biomassa.
A decomposio anaerbia da biomassa produz biogs, o qual pode ter sua
capacidade calorfica aumentada pela presena de hidrognio em sua composio. O hidrognio
um carreador energtico promissor e sua obteno e uso vem se destacando nos ltimos anos.
Pesquisas sobre a otimizao da produo biolgica de hidrognio mostram
diferenas significativas em termos de valores de pH ideais para o processo, da utilizao de
diferentes tipos de substratos orgnicos e concentraes de lodos empregados, alm de
tratamentos aplicados ao mesmo com a finalidade de inibir a metanognese. Devido a essas
diferenas, verificou-se a necessidade de desenvolvimento de um teste rpido para quantificar a
capacidade de produo de hidrognio de lodos biolgicos e de substratos orgnicos e auxiliar na
identificao de fatores que possam causar inibio ou toxicidade aos microrganismos produtores
de hidrognio.
Com base nesses aspectos, foi desenvolvido o teste de atividade hidrognica
especfica (AHE) para determinar a influncia dos parmetros supra citados na produo
biolgica de hidrognio.
Alm disso, neste trabalho foi realizada a aplicao do teste para avaliar a
capacidade de produo de hidrognio do cido propinico, cido butrico, efluente protico,
glicerol e efluente do processo de produo de fungicida, como substrato de referncia (branco)

foi utilizada soluo de acetato de sdio anidro.
O efeito do controle do valor do pH sobre a produo de hidrognio tambm foi
avaliado e, finalmente, realizou-se um estudo utilizando sistema de dois reatores seqenciais em
batelada, um reator acidognico e outro metanognico, onde foi determinada a influncia do valor
do pH e da temperatura da fase acidognica na produo biolgica de hidrognio a partir de
efluentes da suinocultura.
2. Reviso bibliogrfica
2.1. Bioenergia e biomassa
A industrializao e o rpido crescimento demogrfico tm contribudo para
aumentar os problemas ambientais no que diz respeito utilizao de energia e gerao de
resduos. Os processos industriais tm gerado uma grande quantidade de produtos e resduos
indesejveis, os quais possuem potencial para produzir energia limpa (Badkoubi et al. 2004).
O Protocolo de Kyoto e as ameaas de mudanas climticas juntamente com as
polticas de reduo da poluio incentivaram a busca por fontes alternativas de energia, as quais
podem substituir a energia derivada do carvo ou do petrleo (Amon et al. 2004). Essas fontes,
alm de reduzirem os impactos ambientais, so o caminho para a formao de uma sociedade
ecologicamente sustentvel (Jonsson & Hillring, 2006; Junginger et.al., 2006).
O Brasil um pas que apresenta tradio no uso de fontes renovveis de energia,
onde se destaca o uso da energia hidreltrica como responsvel pela maior parcela, (acima de
80%), de toda gerao de eletricidade. Em segundo lugar, o etanol, proveniente da cana-deacar, utilizado como mistura na gasolina ou puro. Por outro lado, existem ainda com pouco
aproveitamento, um enorme potencial de fontes renovveis de energia, destacando-se entre elas a
energia solar, elica e biomassa, sendo a ltima definida como toda matria orgnica de origem
animal e vegetal.
As tecnologias com base em fontes renovveis so atrativas no s devido s
vantagens ambientais, mas tambm sociais. A bioenergia, hoje, considerada como a fonte de
energia do futuro e est em ascenso devido a uma combinao de fatores que incluem: um
melhor conhecimento do papel atual da biomassa e suas contribuies potenciais futuras como
combustvel; sua disponibilidade, sua versatilidade e sustentabilidade; seus benefcios ambientais,
locais e globais e o desenvolvimento de oportunidades empresariais (Ayoub et. al., 2007).
A possibilidade de criao de fontes de suprimento descentralizadas e em pequena
escala fundamental para o desenvolvimento sustentvel, tanto em pases desenvolvidos como
em desenvolvimento. No interesse desses ltimos, sobressaem as centrais que utilizam fontes
renovveis e no requerem alta tecnologia para instalao ou tcnicos especializados para sua
operao (Souza, et al., 2004). Alm disso, a cadeia de produo da bioenergia um poderoso
motor da atividade econmica, pois produz energia atravs do uso de matria prima local,
diminuindo a necessidade da utilizao de combustveis fsseis (Ayoub et. al., 2007).
A diversidade de tecnologias em energia renovvel a torna conveniente para

prover potncia a redes eltricas existentes e produzir energia para sistemas isolados ou em ilha.
Por ser um pas tropical, existe aqui um enorme potencial de biomassa, devido grande
produtividade de massa vegetal.
Os processos trmicos para gerao de energia a partir da biomassa so muito
utilizados na Europa e no Canad e incluem a pirlise, a combusto e a gaseificao. Na pirlise
a biomassa decomposta num ambiente sem oxignio, produzindo gs combustvel
(gaseificao), carvo e biocombustvel. No processo de combusto ocorre a queima da biomassa
na presena de oxignio, produzindo energia trmica para uso domstico e industrial. Os
processos biolgicos anaerbios utilizados para a produo de energia so a fermentao a qual
produz lcoois e a digesto da biomassa que gera biogs (Bridgwater, 2006).
Ao contrrio da energia dos combustveis fsseis, a biomassa renovvel e no
contribui para o acmulo de dixido de carbono na atmosfera terrestre, ou melhor, todo dixido
de carbono liberado durante o uso da biomassa absorvido novamente no processo de
fotossntese para formao da mesma. A biomassa oferece muito mais do que apenas o
fornecimento de energia, podendo contribuir significativamente para a reduo das mudanas
climticas (Ayoub et al., 2007).
A biomassa uma das mais promissoras fontes de energia renovvel e inclui
plantas, algas, lodos, resduos rurais e pecurios, esgotos domsticos, em substituio aos
combustveis fsseis (Junginger et.al., 2006).
No Brasil, pode-se citar o exemplo do aproveitamento de resduos da cana de
acar, onde temos usinas com possibilidade de venda de energia para o sistema eltrico, o que
ainda no aconteceu de maneira mais acentuada pela falta de regulamentao no setor eltrico
(Souza et al., 2004).
Os resduos rurais incluem todos os tipos gerados pelas atividades produtivas nas
zonas rurais, os quais so: os resduos agrcolas, florestais e pecurios. Os resduos da pecuria
so constitudos por estercos e outros produtos resultantes da atividade biolgica do gado bovino,
suno, caprino e outros, cuja relevncia local justifica seu aproveitamento energtico. Este tipo de
resduo importante matria prima para a produo de biogs atravs da digesto anaerbia
(Souza et al., 2005).
O biogs um combustvel gasoso com um contedo energtico elevado

semelhante ao gs natural. Esse combustvel pode ser utilizado para gerao de energia eltrica,
trmica ou mecnica em uma propriedade rural, contribuindo para a reduo dos custos de
produo (Chynowet, 1996).
Ele composto de metano e dixido de carbono com traos de sulfeto de
hidrognio, nitrognio e hidrognio. Devido presena de compostos cidos, o biogs requer um
cuidadoso tratamento para remover os mesmos e evitar problemas de corroso. (Metcalf & Eddy,
2003). A utilizao do biogs como combustvel, reduz a necessidade de madeira e de petrleo
para gerao de energia, preservando a natureza e as reservas energticas e sua combusto no
desprende fumaa e no deixa resduos poluidores no ambiente, reduzindo os impactos
ambientais como o aquecimento global, a formao de chuva cida e os danos a vegetao e alm
disso, representa um recurso eficiente para o tratamento de efluentes e melhoria do padro
sanitrio do meio ambiente (Chynowet, 2001, 2004).
Pases como ndia (Chanakya & Moletta, 2004; Yeole et al., 2004), Mxico
(Robles-Martinez et al, 2004), ustria (Amon et al., 2004), Estados Unidos (Parry et al., 2004),
Canad (Chakraborti et al., 2004; Caners et al., 2004), Sri Lanka (Weerasinghe et al., 2004)
possuem plantas de tratamento de efluentes provenientes da agricultura para a obteno do biogs.
Utilizando os mecanismos biolgicos apropriados pode-se obter o hidrognio
como produto da digesto anaerbia da biomassa. A maior vantagem da energia proveniente do
hidrognio a ausncia de emisses poluentes com a sua queima ou utilizao em clulas
combustveis (Davila-Vazquez et al., 2008)
2.2. Hidrognio
O hidrognio o elemento mais abundante no universo, fazendo parte de cerca de
de toda a matria existente. A atmosfera contm cerca de 0,07 % de hidrognio, enquanto que
na superfcie terrestre este valor de 0,14 %, sendo o elemento de menor densidade dentre todos
os demais. Nas condies normais de temperatura e presso (CNTP), a massa de 1 litro do
hidrognio de cerca de 0,09 gramas enquanto que a massa de 1 litro de ar de 1,2 gramas (Das
& Veziroglu, 2001).
Devido a sua baixa densidade ele se dispersa atravs do ar muito mais rapidamente
que os outros combustveis gasosos. um gs incolor, inodoro, inspido e atxico, produz uma
chama quase invisvel quando queima e precisa de pouca quantidade de energia para entrar em
ignio. Como qualquer outro combustvel, o hidrognio inflamvel e potencialmente perigoso,
necessitando de apenas 5 % de oxignio para se manter em combusto quando comparado com os
12 % necessrios para combusto dos hidrocarbonetos. Apesar disso, pouco provvel que ele
entre em combusto espontnea uma vez que sua temperatura de auto ignio de 550C,
enquanto que para os sub produtos do petrleo essa temperatura varia de 228 500 C (AbdelAal et al., 2005).
Durante a sua queima ele produz gua, portanto, considerado um combustvel
limpo, no poluente e inofensivo para as pessoas e para o meio ambiente quando comparado a
outros combustveis (Levin et al., 2004)
De acordo com Midilli & Dincer (2007) dentre as vantagens da utilizao da
energia proveniente do hidrognio destacam-se:
A energia gerada pelo hidrognio limpa, renovvel, no txica e que no produz
emisses nocivas ao meio ambiente e pode ser transportada com segurana atravs de tubulaes;
Pode ser produzido a partir de fontes no fsseis de combustvel utilizando-se vrias
tcnicas de produo e pode ser armazenado por longos perodos de tempo, quando comparado
com a eletricidade;
Garante sustentabilidade industrial devido a sua utilizao como matria prima nas
indstrias petroqumica, alimentcia, microeletrnica, metalrgica e na sntese de polmeros e

produtos qumicos;
Promove benefcios econmicos para pequenas comunidades, pois o sistema em pequena
escala reduz o tempo necessrio para o incio da sua operao, alm de se adaptar facilmente ao
aumento da demanda de energia.
O hidrognio produz mais energia por unidade de peso do que qualquer outro
combustvel, cerca de trs vezes mais que a gasolina e cerca de sete vezes mais que o carvo,
sendo que cada grama de hidrognio produz 120,7 kJ de energia (Busby, 2005).
Os Estados Unidos utilizam mais de 90 bilhes de metros cbicos anuais de gs
hidrognio em aplicaes comerciais como a produo de amnia, sntese de metanol,
hidrogenao de leos e graxas, produo de medicamentos, cosmticos, plsticos, sabes, entre
outros e sua aplicao como combustvel ocorre em veculos automotivos (carros, motos e nibus)
e no lanamento de nibus espaciais (Baykara, 2005; Busby, 2005). O consumo mundial de

hidrognio de cerca de 450 bilhes de metros cbicos por ano (Busby, 2005).
Conforme Baykara (2005), o hidrognio um combustvel que pode ser obtido a
partir de vrias fontes naturais (gs natural, gua, biomassa, carvo, sulfeto de hidrognio, etc.)
utilizando-se tecnologias que dependem dos recursos disponveis em cada pas.
As opes existentes para a produo e utilizao do hidrognio como combustvel
podem adaptar-se as diferentes fontes e a infra-estrutura energtica de cada pas. No leste do
Canad o hidrognio pode facilmente ser produzido a partir da energia hdrica, nos pases do
Mediterrneo obtido a partir da energia solar e no noroeste da Europa a partir da energia elica
(Baykara, 2005).
A transio para a economia baseada no hidrognio e as conseqentes melhorias
ambientais, sociais, tecnolgicas, industriais e econmicas de um pas podem ser as melhores
solues para acelerar e assegurar a sustentabilidade global (Midilli & Dincer, 2007).
2.2.1. Produo biolgica de hidrognio

Todos os processos de produo biolgica de hidrognio so dependentes da
presena de uma enzima produtora de hidrognio, a hidrogenase. Entretanto, no h evidncias
de que a quantidade ou atividade dessa enzima um fator limitante na produo de hidrognio.
Em alguns sistemas microbianos, a atividade cataltica supera a quantidade de hidrognio
produzido, sugerindo que outros fatores metablicos limitam esse processo (Hallenbeck &
Benemann, 2002). As hidrogenases catalisam a mais simples das reaes qumicas, mostrada
abaixo.
2H+ + 2e H2
Muitos microrganismos contm as enzimas nquel ferro (NiFe) ou nquel ferro
selnio hidrogenase (NiFeSe hidrogenase) que possuem stios ativos formados por complexos
metlicos, cuja atividade biolgica na produo de hidrognio maior que a dos microrganismos
que possuem apenas e enzima hidrogenase (Hallenbeck & Benemann, 2002).
Na Figura 01 esto mostradas as etapas do processo de digesto anaerbia da
matria orgnica complexa.
10
Matria orgnica complexa

Protenas
21%
Carboidratos
40%
5%
34%
Aminocidos e acares e peptdios

20%
Lipdios
cidos graxos, lcoois
Produtos intermedirios:
propionato, butirato, etc.
11%
12%
8%
35%
Acetato
23%
11%
Hidrognio
70%
30%
Metano
Figura 01 Etapas da digesto anaerbia da matria orgnica complexa. As percentagens

expressam o valor da DQO. Fonte: Gujer & Zehnder, 1983.
De acordo com Das & Veziroglu (2001), os processos de produo biolgica de
hidrognio podem ser classificados em: biofotlise utilizando algas e cianobactrias,
fotodecomposio de compostos orgnicos por bactrias fotossintticas, produo de hidrognio
atravs da fermentao de compostos orgnicos e sistemas hbridos utilizando bactrias
fotossintticas e bactrias fermentativas, os quais esto descritos a seguir.
2.2.1.1. Biofotlise utilizando algas e cianobactrias

Utiliza o mesmo processo da fotossntese das plantas e das algas, mas adaptado
para a gerao hidrognio. A fotossntese envolve a absoro de luz por dois sistemas
fotossintticos que operam em srie: o primeiro a quebra da molcula da gua e a liberao de
oxignio (fotossistema I ou PSII) e o segundo fotossistema (PSI) que produz o agente redutor
para a produo de dixido de carbono. Nestes dois processos, dois ftons, um para cada
fotosistema, so empregados para remover um eltron da gua e us-lo na produo de dixido
de carbono ou na formao de hidrognio (Das & Veziroglu, 2001).
Nas plantas verdes ocorre apenas a produo de dixido de carbono, pois as
mesmas no possuem as enzimas hidrogenases que catalisam a reao de formao do hidrognio.
11
Microalgas, tanto as eucariotas (algas verdes) quanto as procariotas (cianobactrias) possuem a

enzima hidrogenase e podem produzir hidrognio quando submetidas a determinadas condies
ambientais. Entretanto, a quantidade de hidrognio produzido muito menor que a produo de
dixido de carbono. Pequenas quantidades de oxignio inibem a atividade das hidrogenases
durante a biofotlise o que reduz a produo de hidrognio (Das & Veziroglu, 2001).
Muitas espcies de microalgas, particularmente as algas verdes, produzem
hidrognio aps um perodo em ambiente anaerbio e escuro, durante o qual a enzima
hidrogenase ativada. Quando as algas so expostas a luz (mas ainda em condies anaerbias),
a produo de hidrognio diminui at cessar completamente uma vez que a fotossntese
restabelecida (Das & Veziroglu, 2001).
Dentre as algas verdes utilizadas para a produo de hidrognio encontram-se:
Scenedesmus obliquus, Chlamydomonas reinhardii e C. moewusii. No caso das cianobactrias as
mais utilizadas so: Heterocystous Anabaena azollae, Anabaena CA, A. variabilis, A. cylindrica,
Nostoc muscorum, N. spongiaeforme, entre outras (Martinez-Perez et al., 2007).
2.2.1.2. Fotodecomposio de compostos orgnicos por bactrias fotossintticas

Conforme Das & Veziroglu (2001), as bactrias fototrficas (utilizam luz para
produzir energia) so indicadas como os mais promissores sistemas microbianos para a produo
de hidrognio, tendo como benefcios:
a) alta taxa de converso;
b) habilidade para usar uma larga faixa do espectro de luz;
c) habilidade para consumir matria orgnica de efluentes, podendo, ser utilizada no tratamento
de esgotos e produo de hidrognio, simultaneamente.
Um dos maiores obstculos para a obteno de hidrognio nesses sistemas a
gerao fotossinttica de oxignio que inibe a atividade das hidrogenases, reduzindo a produo
de hidrognio (Das & Veziroglu, 2001).
As bactrias fotossintticas mais utilizadas na produo de hidrognio so: R.
capsulatus, R. sulidophilus, Rhodopseudomonas sphaeroides, R. palustris, dentre outras
(Martinez-Perez et al., 2007).
12
2.2.1.3. Produo de hidrognio por meio da fermentao de compostos orgnicos

A produo de hidrognio por bactrias fermentativas tecnicamente mais simples
que a produo realizada pelas bactrias fotossintticas. Os processos fermentativos geram
hidrognio a partir da decomposio dos carboidratos presentes nos resduos orgnicos (Han &
Shin, 2004).
Os polissacardeos como a celulose, a pectina e o amido so hidrolisados e
transformados em compostos de baixo peso molecular tais como os acares e o metanol, sendo
ento transportados para o interior das clulas bacterianas e convertidos em vrios produtos
(McInerney & Bryant, 1980).
De acordo com McInerney & Bryant (1980), os acares so degradados a
piruvato pela via de Embden-Meyerhof-Parnas gerando eltrons, designados como 2H. Os
produtos formados dependero do modo como o piruvato ser metabolizado no interior da clula
bacteriana. Algumas espcies bacterianas produzem acetato, dixido de carbono e hidrognio a
partir do piruvato, em outras culturas o piruvato transformado em propionato, butirato,
succinato, etanol ou lactato. A proporo de cada um desses produtos ser determinada pela
presso parcial de hidrognio no ecossistema. A Acetil CoA e o dixido de carbono so
produzidos a partir do piruvato atravs da ao da enzima ferredoxin oxidoredutase, gerando
eltrons que sero eliminados na forma de hidrognio ou utilizados na produo de propionato,
succinato, lactato ou butirato. Alm disso, a Acetil CoA pode ser reduzida a etanol atravs da
reao com acetaldedo ou pode ser utilizada para formar acetato.
Ainda de acordo com McInerney & Bryant (1980), a formao do butirato ocorre
pela condensao da Acetil CoA e do acetato e est associada a formao de ATP, que
corresponde a energia utilizada para o crescimento celular. O lactato formado a partir da reduo
do piruvato encontrado em grande quantidade em resduos bovinos e resduos vegetais, tendo
importncia tanto como substrato quanto como intermedirio na formao do propionato, o qual
pode ser formado atravs de duas vias metablicas. Na primeira, ocorre a reao do dixido de
carbono com o fosfoenolpiruvato formando o oxaloacetato, em seguida, ocorre a reduo e
transformao do oxaloacetato em succinato, o qual sofrer uma descarboxilao para formar
propionato. Na segunda via, o propionato formado a partir do lactato com influncia de enzimas
como a lactil CoA, a fosfolactil CoA e acrilil CoA.
13
Quando a presso parcial de hidrognio baixa, o fluxo de eltrons gerados

durante a degradao dos acares direcionado para formar o hidrognio, facilitando a
degradao do piruvato em acetato, dixido de carbono e hidrognio (McInerney & Bryant,
1980).
Quando a presso parcial de hidrognio aumenta no ecossistema possvel prever
quais produtos sero formados pelas bactrias fermentativas, a partir da degradao do piruvato.
A produo de propionato a partir do piruvato termodinamicamente a mais favorvel das
reaes (G = -87,0 kJ.mol-1), seguida pelo butirato (G = -77,4 kJ. mol-1), succinato (G = 66,9 kJ. mol-1), etanol (G = -38,9 kJ. mol-1), e lactato (G = -25,1 kJ. mol-1) (Martinez-Perez
et al., 2007).
O propionato e os cidos graxos de cadeia longa so substncias mais importantes
na formao de hidrognio do que o lactato e o etanol. Estudos sugerem que mais de 50% da
matria orgnica do substrato transformada em propionato e em cidos graxos de cadeia longa.
Dentre as bactrias fermentativas utilizadas pra produo de hidrognio esto:
Enterobacter aerogenes, E. cloacae, Clostridium butyricum, C. pasteurianum, Desulfovibrio
vulgaris e Escherichia coli., presentes em culturas mistas encontradas em lodos anaerbios
(Martinez-Perez et al., 2007).
Conforme Das & Veziroglu (2001), a produo industrial de hidrognio por
processos fermentativos possui vrias vantagens, tais como:
(a) bactrias fermentativas possuem uma alta taxa de produo de hidrognio;
(b) podem produzir hidrognio constantemente (dia e noite), a partir de substratos orgnicos;
(c) tem uma taxa de crescimento capaz de prover de microrganismos o sistema de produo.
2.2.1.4. Sistemas hbridos utilizando bactrias fotossintticas e bactrias fermentativas

Os sistemas hbridos compreendem as bactrias fotossintticas e as no
fotossintticas. As no fotossintticas produzem hidrognio a partir da degradao de
carboidratos sem o uso de luz, produzindo cidos orgnicos que servem de fonte para as bactrias
fotossintticas produzirem hidrognio (Das & Veziroglu, 2001).
As bactrias anaerbias decompem os carboidratos para obter energia e eltrons,
porm, os cidos orgnicos formados na reao no so transformados em hidrognio, enquanto
que as bactrias fotossintticas tm a capacidade de utilizar os cidos orgnicos para a produo
14
de hidrognio. A combinao desses dois tipos de bactrias alm de aumentar a produo de

hidrognio, reduz a quantidade de energia luminosa demandada pelas bactrias fotossintticas
(Das & Veziroglu, 2001).
2.2.2. Fatores que afetam a produo de hidrognio

Estudos demonstraram que a produo de hidrognio influenciada por muitos
fatores, tais como: pH, temperatura, agitao, caractersticas do lodo, composio do efluente e
meios nutricionais (Mu et al., 2006).
2.2.2.1. pH
Estudos mostraram que o pH um fator determinante na produo do hidrognio,
devido aos efeitos sobre as enzimas hidrogenases e sobre as rotas metablicas envolvidas no
processo (Fang & Liu, 2002).
De acordo com Li et al. (2007), o pH do meio produz efeitos sobre os
microrganismos, tais como:
(a) mudanas nas caractersticas da membrana celular influenciando na ingesto dos nutrientes;
(b) influncia sobre a atividade enzimtica durante o processo metablico;
(c) influencia o aparecimento de substncias txicas no meio.
No processo de digesto anaerbia, o hidrognio produzido durante a fase
exponencial do crescimento de alguns microrganismos como a Clostridium sp. Quando a sua
populao atinge a fase estacionria de crescimento, as reaes de formao de hidrognio
cessam e isso ocorre quando o valor do pH menor ou igual a 4,5, portanto, importante
remover o excesso de hidrognio do meio lquido e manter o pH numa faixa tima para que sua
produo seja mantida (Khanal et al., 2004). Durante a produo do hidrognio ocorre a
formao dos cidos graxos volteis como o cido actico, o cido propinico e o cido butrico
que, em altas concentraes, podem inibir os microrganismos produtores de hidrognio e, por
conseqncia, diminuem a produo de hidrognio (Wang et al., 2008).
Mudanas no pH podem causar alteraes drsticas em um grande nmero de
espcies de uma populao heterognea presente num reator acidognico. Muitos aspectos do
metabolismo microbiano so fortemente influenciados pelas variaes de pH, incluindo a
15
utilizao de fontes de carbono, a eficincia na degradao do substrato, a sntese de protenas e a

liberao de metablitos pela clula (Zheng & Yu, 2004).
A faixa tima de pH para a produo de hidrognio varia conforme o substrato
orgnico utilizado. A faixa de pH ideal de 4,0 a 4,5 para a sacarose, 4,7 a 5,7 para o amido, 5,5
para glicose (Fang et al., 2002), entre 6 e 7 para xilose (Lin & Chang, 2004) e 6 para guas
residurias da indstria alimentcia (Oh & Logan, 2006).
2.2.2.2. Temperatura
A temperatura outro fator que influencia as atividades fisiolgicas dos
microrganismos e a taxa de formao dos produtos da fermentao. A produo de hidrognio
instvel quando a temperatura do meio sofre variaes, mostrando que os microrganismos
fermentativos so sensveis a essas variaes e que necessitam de um tempo de adaptao para
estabilizar a produo de hidrognio numa certa temperatura (Lin & Chang, 2004).
Estudos realizados por Shin et al. (2004) mostraram que h uma grande diferena
na produo de hidrognio quando a temperatura do meio sofre um aumento gradual em
comparao com a diminuio gradual da mesma. Isso mostra que o aumento e a diminuio da
temperatura tem efeito diversificado na fisiologia dos microrganismos, uma vez que cada clula
de um microrganismo considerada como um microsistema. O aquecimento gradual do meio
mantm o interior da clula ordenado, enquanto que o resfriamento gradual causa uma desordem
no interior da clula provocando uma queda no metabolismo da mesma e conseqente diminuio
da produo de hidrognio.
Zhang & Shen (2006) estudaram o efeito da temperatura na produo de
hidrognio utilizando sucrose como substrato e demonstraram que a elevao brusca da
temperatura do sistema provoca inibio dos microrganismos e conseqente diminuio da
produo de hidrognio. Os resultados indicaram que a temperatura ideal para o processo de
35C.
2.2.2.3. Mistura
A intensidade da mistura considerada um fator importante e que influencia a
produo biolgica de hidrognio. Um contato eficiente entre o substrato e a biomassa pode
16
melhorar a performance do reator alm de aumentar o fluxo da transferncia de massa (Zheng &
Yu, 2007).
Durante a fermentao anaerbia a hidrodinmica gs-lquido e lquido-lquido
nos reatores est relacionada com a velocidade de mistura, alm disso, a mistura pode acelerar a
produo dos gases. A presso parcial do hidrognio na fase lquida um fator crucial durante a
sua produo biolgica, uma vez que a mistura vigorosa capaz de reduzir essa presso parcial,
podendo ser considerada benfica para a produo do gs. Porm, estudos mostraram que o
aumento da velocidade de mistura no garante o aumento da taxa de crescimento e da atividade
dos microrganismos (Zheng & Yu, 2007).
2.2.2.4. Caractersticas do lodo

De acordo com Arooj et al. (2007), as caractersticas do lodo desempenham um
papel importante na produo de hidrognio. Microrganismos no sedimentveis, resultantes da
estratificao do lodo na fase de sedimentao, apresentaram uma maior atividade na produo
de hidrognio quando comparados aos microrganismos sedimentveis, ambos presentes em
reatores seqenciais em batelada.
Alm da estratificao, o tempo de sedimentao tambm um parmetro
operacional importante no processo de produo de hidrognio. Um lodo no sedimentvel
contm maiores concentraes de butirato e menores de propionato quando comparado a um lodo
sedimentvel. O aumento da concentrao do propionato com o tempo causa uma mudana na
comunidade microbiana, promovendo um decrscimo na produo de hidrognio. A alta
produo de hidrognio em lodos no sedimentveis deve-se a presena do microrganismo
Clostridium butyricum sp. e a ausncia do microrganismo Selenomonas sp., cuja presena est
associada a baixas produes de hidrognio (Arooj et al., 2007).
O pr-tratamento do lodo anaerbio uma alternativa que ajuda a acelerar a
hidrlise, reduzindo o impacto dessa etapa limitante e aumentando a produo de hidrognio
durante a digesto anaerbia. Muitos microrganismos produtores de hidrognio formam
endosporos, que se desenvolvem quando so submetidos a condies ambientais desfavorveis e
garantem a sobrevivncia do microrganismo quando submetido a altas temperaturas, radiao ou
oxidantes qumicos (Davila-Vazquez et al., 2008). Os microrganismos metanognicos no
formam endosporos, portanto, o tratamento trmico pode ser utilizado para selecionar apenas
17
microrganismos produtores de hidrognio numa cultura mista (Wang & Wan, 2009). Porm, o
tratamento trmico pode resultar na ruptura da membrana celular do lodo, ocorrendo a liberao
do material intracelular, o que aumenta a quantidade de carbono no afluente (Smith & Goransson,
1992).
2.2.2.5. Composio do efluente

A converso de diferentes tipos de resduos orgnicos em hidrognio, atravs da
digesto anaerbia, ocorre atravs de uma srie de reaes bioqumicas complexas catalizadas
por diversos grupos de microrganismos (Mohan et al., 2007).
Os resduos orgnicos domsticos possuem grande potencial econmico para a
produo de hidrognio, pois alm de fonte energtica, a digesto anaerbia reduz os custos com
tratamento e disposio (Van Ginkel et al., 2005).
Os resduos de processos agrcolas (dejetos animais e restos da colheita) e os
resduos de indstrias alimentcias possuem baixo custo e altas concentraes de carboidratos,
permitindo sua utilizao para o estudo da produo de hidrognio (Yang et al., 2007).
A biodegradabilidade de resduos animais est principalmente relacionada a
quantidade de carboidratos presentes, os quais so a principal matria prima para a produo de
hidrognio. Cada composto presente nesse tipo de resduo degradado em diferentes condies
de pH e tempo de deteno hidrulico, mostrando que a produo de hidrognio depende do
ajuste das condies de processo (Han & Shin, 2004).
2.2.2.6. Meios nutricionais

A produo de hidrognio requer certos micronutrientes essenciais para o
crescimento, a atividade e o metabolismo bacteriano. Diferentes formulaes nutricionais tm
sido usadas na produo biolgica de hidrognio, entretanto, a maioria delas para o
enriquecimento de culturas puras. Os lodos provenientes de estaes de tratamento contm uma
microflora mista que requer um meio nutricional diferente do utilizado para culturas puras. O
estudo de formulaes nutricionais para esse tipo de microflora se faz necessrio para otimizar a
produo de hidrognio a partir de resduos orgnicos (Lin & Lay, 2005)
18
Estudos realizados por Lin & Lay (2005) mostraram que a presena de magnsio,
sdio, zinco e ferro no meio nutricional afetaram significativamente a microflora anaerbia
presente no lodo, aumentando a produo de hidrognio.
Na Tabela 01 esto mostradas as diferentes formulaes nutricionais utilizadas no
estudo da produo biolgica de hidrognio.
Tabela 01 Meios nutricionais estudados para produo de hidrognio.
Nutrientes
-1
Referncias
(mg.L )
FeCl3. 6H2O
14
MgCl2. 6H2O
8,86
16
100
100
180
125
100
CoCl2. 5H2O
0,13
CoCl2. 6H2O
2,5
1,2
2,5
0,13
CaCl2. 2H2O
0,01
160
1000
0,02
20
400
MoCl2. 4H2O
NiCl2. 6H2O
0,5
0,5
MnCl2. 4H2O
2,5
0,5
2,5
CuCl2. 2H2O
4,3
Na2S. 9H2O
250
KI
2,5
NH4Cl
775,4
38,2
500
2.680
2.600
4.740
KCl
370
FeCl2
278
110
NaCl
160
1.000
17,3
100
400
ZnCl2
0,5
0,5
MgCl2
60
CaCl2
1,1
FeSO4. 7H2O
2,21
45
282
25
10
25
Na2SO4.10H2O
260
MgSO4. 7H2O
10.000
200
4.000
MnSO4. 7H2O
1.600
1.500
600
15
MnSO4. 6H2O
15
MnSO4. 4H2O
1,44
2,6
19
Tabela 01 Meios nutricionais estudados para produo de hidrognio (continuao).

Nutrientes
Referncias
-1
(mg.L )
MnSO4. 5H2O
210
15
CuSO4. 5H2O
0,44
0,8
ZnO
Na2MoO4.2H2O
160
1.000
0,5
400
0,075
0,5
Referncias: A Majizat et al., (1997); B Onodera et al., (1999); C Zoetemeyer et al., (1982); D
Nakamura et al., (1993);E Mizuno et al., (2000a) ; F Endo et al., (1982); G Kataoka et al., (1997); H Lay (2000);I Ueno et al., (1995); J Zoetemeyer et al., (1982); K Mizuno et al., (2000b); L Cha & Noike
(1997)
2.2.3. Configurao dos reatores

O reator de mistura contnua a configurao mais freqentemente utilizada em
pesquisas de produo de hidrognio (Ren et al., 2006; Show et al., 2007; Chen & Lin, 2003;
Ren et al., 2010). Nela os microrganismos produtores de hidrognio ficam em suspenso no
mixed liquor, o que facilita a transferncia de massa do efluente para o microrganismo, porm so
sensveis a mudanas no pH e em baixos tempos de deteno hidrulica os microrganismos
podem ser carregados para fora do sistema prejudicando a eficincia do processo (Hallembeck et
al., 2009).
Dessa forma, uma variedade de sistemas de bio-reatores incluindo os reatores de
leito fixo (Chang et al., 2002), reatores de leito empacotado (Rachman et al., 1998; Lee et al.,
2003), reatores UASB (up-flow anaerobic sludge blanket) (Yu & Mu, 2006; Chang & Lin, 2004),
reatores de leito fluidizado (Wu et al., 2003; Lin et al., 2006; Barros et al., 2010) foram utilizados
para a produo de hidrognio com a finalidade de imobilizao e reteno dos microrganismos
dentro do reator.
Geralmente, sistemas de crescimento aderido, embora no apropriados para
afluentes com alta concentrao de slidos, permitem uma melhor reteno da biomassa ativa e a
utilizao de baixos tempos de deteno hidrulica (Gavala et al., 2006).
Estudo realizado por Yu et al. (2002) comparando reatores UASB e de mistura
contnua, mostrou que a produo volumtrica de hidrognio foi maior no reator UASB.
20
Resultado similar ao obtido por Gavala et al. (2006), em que a configurao do reator UASB
apresentou desempenho mais estvel na produo de hidrognio que o reator de mistura completa.
2.3. Testes em batelada para a avaliao da atividade de microrganismos anaerbios

Vrios trabalhos j foram desenvolvidos com a finalidade de otimizar a
metodologia de avaliao da atividade de microrganismos anaerbios. Conforme Monteggia
(1991) a eficincia de um reator anaerbio depende diretamente da atividade biolgica dos
microrganismos envolvidos no processo. O controle de parmetros como pH, alcalinidade, cidos
graxos volteis, produo de gs, remoo de matria orgnica, fornece informaes sobre a
condio operacional do reator. Entretanto, esses parmetros no antecipam desequilbrios no
sistema biolgico, causados por variaes bruscas na vazo ou na composio do afluente.
De acordo com James et al (1990), os testes de medida de atividade podem ser
utilizados para realizar os seguintes estudos:
- avaliar o comportamento da biomassa anaerbia sob a influncia de compostos inibidores;
- observar as mudanas na atividade do lodo devido possibilidade de aumento das
concentraes de materiais inertes, por exemplo, metais;
- avaliar os parmetros cinticos em batelada.
Conforme Monteggia (1997), a determinao da atividade de um lodo realizada
por um teste de laboratrio em batelada, sob condies ambientais controladas. O resultado
calculado a partir da medio direta da taxa de produo de um determinado composto ou
consumo de um substrato, por unidade mssica de biomassa, representada pela medida de slidos
volteis, e pela unidade de tempo.
Para a realizao do teste deve-se ter um ambiente anaerbio, com as condies de
temperatura, pH e potencial redox necessrias, alm de nutrientes (nitrognio, fsforo, potssio,
enxofre, elementos trao) para obteno da atividade biolgica mxima. Faz-se necessrio,
tambm, uma adequada populao de microrganismos e alimento suficiente (substrato teste)
acima de concentraes limitantes, para obteno da taxa mxima de remoo de substrato, e o
uso de um equipamento de laboratrio capaz de monitorar as mudanas da atividade metablica
(produo de gs) ou o consumo do substrato teste durante o ensaio (Monteggia, 1997).
O desenvolvimento de um teste eficiente e capaz de propiciar resultados confiveis
num curto perodo de tempo, para quantificar a capacidade que diferentes tipos de lodos
21
biolgicos e de substratos orgnicos possuem para produo de hidrognio se faz necessrio para
auxiliar na determinao dos parmetros de controle para reatores acidognicos.
Pesquisas sobre a otimizao da produo biolgica de hidrognio mostram
diferenas significativas em termos da utilizao de diferentes tipos de substratos orgnicos,
meios nutricionais, tipos e concentraes de lodos empregados e tratamentos aplicados ao mesmo,
havendo a necessidade de uma padronizao dessa anlise.
22
3. Objetivos
3.1. Objetivo geral

O objetivo geral desse projeto de pesquisa foi desenvolver e padronizar os
procedimentos laboratoriais a serem aplicados na avaliao da atividade hidrognica de diferentes
tipos de lodos e de substratos orgnicos a fim de verificar capacidade mxima de produo de
hidrognio de ambos.
3.2. Objetivos especficos

Os objetivos especficos desse trabalho foram:
- Avaliar o efeito do valor do pH, da concentrao de matria orgnica e da concentrao de lodo
na produo de hidrognio.
- Avaliar a concentrao de cidos graxos volteis produzidos e o grau de acidificao em cada
condio estudada.
- Utilizar o procedimento desenvolvido para determinar a atividade hidrognica, o volume de
hidrognio produzido e de cidos graxos volteis alm do grau de acidificao de diferentes
substratos orgnicos.
- Aplicar os parmetros e critrios estabelecidos no estudo para operao de um fermentador em
escala de laboratrio com e sem controle de pH.
- Avaliar os parmetros operacionais de um sistema de reatores anaerbios em duas etapas,
acidognica e metanognica, na produo de hidrognio utilizando efluentes lquidos gerados na
criao e manejo de sunos.
23
4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica

especfica de lodos
Resumo: A produo de hidrognio pelo processo fermentativo sofre influncia da concentrao
de matria orgnica, da concentrao de lodo e do valor do pH do substrato orgnico. A
determinao da atividade hidrognica especfica de um lodo pode auxiliar na quantificao da
sua capacidade de produo de hidrognio, alm de detectar fatores que causem inibio ao
mesmo. Os cidos graxos volteis (AGV), produzidos durante a fermentao da matria orgnica
e produo de hidrognio, podem ser utilizados na sntese de polmeros biodegradveis ou como
fonte de carbono facilmente biodegradvel no processo de remoo de nutrientes, reduzindo os
custos com a adio de fontes externas de carbono. Na determinao das condies ideais para a
medida da atividade hidrognica especfica foi utilizada glicose como fonte de matria orgnica
nas concentraes de 1.000, 2.000, 4.000, 8.000, 12.000, 16.000 e 20.000mg.DQO.L-1. Foram
testadas as concentraes de lodo de 1.250; 2.500; 5.000 e 7.500mgSVT.L-1 e valores de pH de
5,0; 5,5; 6,0 e 6,5. A maior atividade hidrognica foi de 483mLH2.gSVT-1.h-1, para as seguintes
condies iniciais: concentrao de matria orgnica de 12.000mgDQO.L-1, concentrao de lodo
de 2.500mgSVT.L-1 e pH igual a 6,0. Cabe tambm salientar que o volume de hidrognio
produzido, em relao a matria orgnica adicionada (base DQO), atingiu 38mL.gDQO-1 na
concentrao de matria orgnica de 8.000mgDQO.L-1, concentrao de biomassa de 5.000mg
SVT.L-1 e pH de 5,5. Na determinao dos AGV os maiores percentuais de cido actico foram
obtidos quando o valor do pH inicial foi de 6,5, na concentrao SVT de 7.500mg.L-1. Nas
demais condies, o cido butrico foi o AGV predominante no efluente. O aumento na
concentrao de SVT nos digestores aumentou o percentual de cido propinico nas amostras.
Palavras chave: hidrognio, atividade hidrognica especfica, AGV, pH.
1. Introduo
A produo de hidrognio por bactrias fermentativas tecnicamente mais simples
que a produo realizada pelas bactrias fotossintticas. Os processos fermentativos geram
hidrognio a partir da decomposio dos carboidratos presentes nos resduos orgnicos (Han &
Shin, 2004).
24
Dentre as bactrias fermentativas utilizadas para produo de hidrognio

destacam-se as seguintes espcies: Enterobacter aerogenes, E. cloacae, Clostridium butyricum, C.
pasteurianum, Desulfovibrio vulgaris e Escherichia coli., presentes em culturas mistas
encontradas em lodos anaerbios (Martinez-Perez et al., 2007).
Estudos demostraram que o pH um fator determinante na produo do
hidrognio devido aos efeitos sobre as enzimas hidrogenases e sobre as rotas metablicas
envolvidas no processo (Fang & Liu, 2002; Zheng & Yu, 2004).
A faixa tima de pH para a produo de hidrognio apresenta variao conforme o
resduo orgnico utilizado. A faixa de pH ideal de 4,0 a 4,5 para a sucrose, 4,7 a 5,7 para o
amido, 5,5 para glicose (Fang & Liu, 2002), entre 6,0 e 7,0 para xilose (Lin & Cheng, 2006) e 6
para guas residurias da indstria alimentcia (Oh & Logan, 2005).
A temperatura outro fator que influencia as atividades fisiolgicas dos
microrganismos e a taxa de formao dos produtos da fermentao. A produo de hidrognio
instvel quando a temperatura do meio sofre variaes, indicando que os microrganismos
fermentativos so sensveis a essas variaes e que necessitam de um tempo de adaptao para
estabilizar a produo de hidrognio numa certa temperatura (Lin & Chang, 2004).
As caractersticas do lodo desempenham um papel importante na produo de
hidrognio. Microrganismos no-sedimentveis, resultantes da estratificao do lodo na fase de
sedimentao, apresentaram uma maior atividade na produo de hidrognio quando comparados
aos microrganismos sedimentveis, ambos presentes num reator seqencial em batelada. A alta
produo de hidrognio em lodos no sedimentveis foi atribuda a presena da espcie
Clostridium butyricum sp. e a ausncia da espcie Selenomonas sp., cuja presena est associada
a baixas produes de hidrognio (Arooj et al., 2007).
Os lodos provenientes de estaes de tratamento de efluentes contm uma cultura
mista que requer um meio nutricional diferente do utilizado para culturas puras. O estudo de
formulaes nutricionais para esse tipo de microflora se faz necessrio para otimizar a produo
de hidrognio a partir de resduos orgnicos (Lin & Lay, 2005).
Os AGV so produtos intermedirios que se formam durante a degradao de
carboidratos, protenas e lipdios na etapa acidognica da digesto anaerbia. Os componentes
mais importantes gerados na decomposio da matria orgnica so os cidos volteis de cadeia
25
curta, como os cidos frmico, actico, propinico, butrico, valrico e isovalrico, alm do
hidrognio, dixido de carbono e alguns lcoois. (Grady Jr. et.al., 1999).
Esses compostos podem ser substncias promotoras, inibidoras ou txicas para os
microrganismos fermentativos, dependendo da sua concentrao. Em baixas concentraes os
AGV no causam efeito sobre os microrganismos, entretanto, em altas concentraes, podem se
tornar inibidores do processo fermentativo que produz hidrognio. Os AGV, em sua forma
dissociada, podem atravessar a parede celular dos microrganismos e provocar uma queda do pH
no interior da clula, fazendo com que ela utilize a energia que seria empregada no crescimento
microbiano para estabilizar suas condies fisiolgicas. Desse modo, ocorre a reduo da energia
necessria para o crescimento microbiano, prejudicando-o. Altas concentraes de AGV
dissociados tambm podem aumentar a fora inica do meio lquido provocando a ruptura da
membrana celular dos microrganismos (Zheng & Yu, 2005).
Os AGV originados durante a fermentao e produo do hidrognio podem ser
utilizados em processos de remoo biolgica de nutrientes, uma vez que esses compostos so
uma fonte de carbono facilmente biodegradvel (Ucizik & Henze, 2008). Alm disso, os AGV
podem ser utilizados na indstria qumica para a sntese de polmeros biodegradveis, em
substituio aos derivados do petrleo, agregando maior valor ao processo fermentativo (Liu et
al., 2006; Bengtsson et al., 2008) e como aditivos na produo de fibras resistentes ao calor e a
luz solar (Zhang et al., 2009).
A eficincia global de um reator acidognico pode ser medida pelo grau de
acidificao, o qual corresponde razo entre a DQO de todos os produtos da acidognese no
efluente e no biogs e a DQO do substrato orgnico utilizado (Yu & Fang, 2001).
Este trabalho teve como objetivo desenvolver e padronizar os procedimentos
laboratoriais a serem aplicados na avaliao da atividade hidrognica especfica (AHE) de lodos a
fim de verificar sua capacidade mxima de produo de hidrognio. Alm disso, foi analisada a
produo dos cidos actico, propinico e butrico e o grau de acidificao do digestor. A partir
dos resultados obtidos foram propostos parmetros de controle para maximizao da produo de
hidrognio em reatores acidognicos.
26
2. Materiais e mtodos
2.1. Efluente
O substrato orgnico utilizado consistiu em uma soluo de glicose nas
concentraes de 1.000, 2.000, 4.000, 8.000, 12.000, 16.000 e 20.000mg.L-1, em base DQO.
2.2. Lodo
O lodo granular utilizado nos testes foi coletado num reator UASB de uma
empresa de processamento de soja e autoclavado a 120C durante 30 minutos a fim de eliminar
microrganismos metanognicos, conforme descrito por Xiao & Liu (2009). Foram testadas as
concentraes de slidos volteis totais (SVT) de 1.250; 2.500; 5.000 e 7.500mg.L-1.
2.3. pH
Para as concentraes de SVT de 2.500, 5.000 e 7.500mg.L-1, foram testados os
valores de pH de 5,0; 5,5; 6,0 e 6,5. Devido aos resultados obtidos nos testes com os valores de
pH e concentraes de lodo mencionadas, para a concentrao de 1.250mgSVT.L-1 foram
testados apenas os valores de pH 5,5 e 6,0.
2.4. Meio nutricional

O meio nutricional utilizado foi baseado em estudos realizados por Lin & Lay
(2005) e por Feng et al. (2008) e cuja composio encontra-se descrita na Tabela 01.
Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado nos testes de medida de atividade.
Nutrientes
MgCl2.6H2O
CaCl2.2H2O
NH4Cl
ZnCl2
MnSO4.4H2O
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
KCl
Na2HPO4.12H2O
NaH2PO4.2H2O
NiCl2.6H2O
KI
NaCl
FeSO4.7H2O
CoCl2.6H2O
Concentrao (mg.L-1)
40
1.000
50
2,5
3,8
10
5
130
1.000
2.550
2,5
12,5
1.000
1
2,5
27
2.5. Sistema utilizado na determinao da AHE

O sistema utilizado neste estudo foi o equipamento denominado respirmetro
anaerbio, desenvolvido por Monteggia (1991) para realizao do teste de Atividade
Metanognica Especifica (AME).
O equipamento consiste em 8 digestores com volume til de 450mL cada, com
agitao magntica e mantidos em ambiente com temperatura controlada. O controle e liberao
do gs resultante da fermentao nos digestores foram realizados atravs de vlvulas solenides
de trs vias, com controle de abertura por manmetro calibrado contendo contato eltrico para
energizao do sistema de abertura das vlvulas.
A medida do volume de gs produzido durante o teste foi realizada de forma semicontnua pelo monitoramento do nmero de pulsos referentes descarga de volume prdeterminado de biogs em funo da presso e temperatura.
Os dados de produo de biogs foram captados e armazenados por um software
desenvolvido especialmente para o processamento desses resultados. O esquema do respirmetro
anaerbio est mostrado na Figura 01.
Figura 01 Esquema do respirmetro anaerbio utilizado nos testes.
2.5.1. Procedimento operacional

Os testes para determinar a AHE dos lodos foram realizados conforme a seqncia
a seguir:
28
- Autoclavagem do lodo;
- Adio de quantidade pr-determinada de lodo e do meio nutricional, em igual volume,
conforme descrito por Lin & Lay (2005);
- Ajuste do pH utilizando cido clordrico (HCl) 1mol.L-1 ou hidrxido de sdio (NaOH) 1mol.L-1;
- Borbulhamento de gs nitrognio no interior dos digestores durante 1 minuto, para eliminar o ar
atmosfrico;
- Ajuste da temperatura do teste para 35C;
- Aclimatao do lodo durante o perodo noturno;
- Colocao do substrato orgnico (glicose) em concentrao pr-estabelecida;
- Ajuste do pH utilizando HCl 1mol.L-1 ou NaOH 1mol.L-1,
- Procedimento adicional de eliminao do ar atmosfrico atravs da insero de gs nitrognio
no interior dos digestores;
- Coleta de amostras do biogs a cada duas horas, para determinao da porcentagem de
hidrognio.
O final do teste foi determinado pelas redues na porcentagem de hidrognio no
biogs e no volume de biogs produzido.
2.5.2. Procedimentos analticos

A anlise da composio do biogs foi realizada utilizando cromatgrafo gasoso
Dani GC 1000 com detector de condutividade trmica (TCD) e coluna Molecular Sieve 80/100.
As condies cromatogrficas utilizadas foram: T injetor: 50C; T detector: 50C; T coluna:
40C; o gs de arraste utilizado foi Hlio com fluxo de 25mL.min-1 e o volume de amostra
injetada foi de 1mL, conforme metodologia adaptada de Morimoto et al. (2004).
A anlise das concentraes dos cidos graxos actico, propinico e butrico foram
realizadas por cromatografia gasosa, conforme metodologia adaptada do Standard Methods
(2005). Utilizou-se um cromatgrafo gasoso Dani GC 1000, com detector de ionizao de chama
(FID) e coluna capilar AT 1000 (30m x 0,32mm x 0,25m). As condies cromatogrficas
utilizadas foram: T injetor: 150C; T detector: 240C; T forno: 95C por 2min., 140C a
10C.min.-1, 200C a 40C.min.-1, 200C por 5min; o gs de arraste utilizado foi Hlio com fluxo
de 1mL.min-1 e o volume de amostra injetada foi de 1L. Antes da anlise, as amostras foram
29
centrifugadas por 30 minutos e filtradas utilizando filtro de fibra de vidro com dimetro de poro
de 0,6m, a fim de eliminar a interferncia dos slidos suspensos.
Para verificar a contribuio de AGV proveniente do lodo autoclavado foi coletada
uma alquota do sobrenadante antes da colocao do substrato orgnico, a qual foi analisada para
determinar a concentrao de AGV.
O grau de acidificao foi determinado pela razo entre a DQO dos produtos da
acidognese no efluente (cido actico, cido propinico e cido butrico) e no biogs
(hidrognio) e a DQO inicial dentro do digestor, conforme metodologia descrita por Bengtsson et
al. (2008).
2.5.3. Clculo da AHE

A metodologia de clculo da atividade hidrognica foi adaptada daquela proposta
por Beal & Monteggia (2009) para o clculo da atividade metanognica, onde foi utilizado o
Mtodo da Tangente para a determinao da atividade mxima em cada condio estudada. A
seqncia de passos para o clculo foi a seguinte:
1. Anlise da composio do gs gerado via cromatografia gasosa;
2. Construo da curva que representa a Composio percentual de hidrognio x Tempo;
3. Modelagem da curva obtida;
4. Clculo do volume produzido de hidrognio a cada pulso registrado, utilizando a curva obtida
no item 3;
5. Construo do grfico de Produo acumulada de hidrognio x Tempo;
7. Derivao da equao que melhor representou a curva obtida, no perodo de tempo do teste;
8. Clculo das inclinaes das tangentes da curva a cada intervalo de tempo de 0,1h, utilizando a
equao derivada obtida no item 7;
9. Identificao do maior volume de hidrognio produzido por hora, correspondente ao maior
valor da inclinao das tangentes obtidas;
10. Determinao da AHE, expressa em mLH2.gSVT-1.h-1, atravs da razo entre o valor
encontrado no item 9 e a concentrao de biomassa inserida no digestor.
30
3. Resultados e discusso
3.1. Atividade Hidrognica Especfica
A Figura 02 apresenta os resultados das AHE obtidas em funo dos valores
iniciais de DQO e pH para a concentrao de SVT de 1.250mg.L-1 .
-1 -1
AHE (mLH2.gSVT h )
500
400
pH = 5,5
pH = 6,0
300
200
100
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

O pH afetou drasticamente a AHE, a qual apresentou um decrscimo significativo
quando o valor do pH inicial dos testes foi ajustado para 6,0. No pH inicial de 5,5 o valor
mximo da atividade foi de 392,5mLH2.gSVT-1.h-1, para a DQO de 16.000mgO2.L-1, enquanto
que para a mesma DQO mas com o pH inicial ajustado para 6,0 a atividade foi de
20,3mLH2.gSVT-1.h-1, representando um decrscimo de 95%. Zheng e Yu (2004) relataram
decrscimo de 51% na produo especfica de hidrognio quando o valor do pH foi elevado de
5,5 para 6,0, na concentrao de SVT de 800mg.L-1.
As baixas atividades observadas nos valores de DQO abaixo de 4.000mgO2.L-1
indicaram que a quantidade de matria orgnica pode ter sido insuficiente para os
microrganismos presentes no digestor.
A Figura 03 apresenta as AHE em funo dos valores iniciais de DQO em cada pH
inicial testado para a concentrao de SVT de 2.500mg.L-1.
31
-1 -1
AHE (mLH2.gSVT h )
500
400
300
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
200
100
0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

A partir dos resultados apresentados na Figura 03, verificou-se um aumento na
atividade quando os valores do pH inicial foram iguais a 5,5 e 6,0, valores que esto dentro da
faixa considerada ideal para o crescimento de microrganismos fermentativos (de 5,0 a 6,0). Fang
& Liu (2002) e Cheong & Hansen (2006) avaliaram o efeito do pH inicial na degradao da
glicose e constataram que o pH ideal para a degradao da glicose e produo de hidrognio
corresponde a faixa entre 5,5 e 5,7. O teste realizado com o pH inicial ajustado para 6,0 resultou
no maior valor da AHE (483mLH2.gSVT-1.h-1) no valor de DQO de 12.000mgO2.L-1.
A variao da AHE em funo do pH inicial tem relao com as comunidades
microbianas presentes nos digestores as quais, de acordo com os resultados obtidos, tiveram sua
atividade prejudicada quando o valor do pH inicial foi ajustado para 6,5.
Outro fator determinante na medida da atividade foi a DQO utilizada nos testes, a
qual influencia diretamente na taxa de crescimento dos microrganismos. Os microrganismos
fermentativos possuem elevada taxa de crescimento especfico ( = 2,0d-1) por isso necessitam de
quantidades maiores de matria orgnica. As baixas atividades observadas nos valores de DQO
abaixo de 4.000mgO2.L-1 indicaram que a quantidade de matria orgnica pode ter sido
insuficiente para prover a demanda energtica necessria para o crescimento adequado dos
microrganismos presentes no digestor. J para as DQO acima de 12.000mgO2.L-1 as AHE
32
tambm apresentaram reduo. van Ginkel et al. (2001) testando diferentes concentraes de
matria orgnica observou um aumento na presso parcial do hidrognio nos digestores com o
aumento da concentrao de matria orgnica inserida nos mesmos. No estudo citado foi
verificado, tambm, que o aumento da concentrao de matria orgnica causou um decrscimo
na eficincia da converso da mesma em hidrognio, sugerindo que o excesso pode ter sido
convertido em lcoois ao invs de cidos graxos e hidrognio.
Na Figura 04 esto os resultados das AHE em funo dos valores iniciais de DQO
em cada pH inicial testado para a concentrao de SVT de 5.000mg.L-1.
-1 -1
AHE (mLH2.gSVT h )
500
400
300
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
200
100
0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

O aumento na concentrao de SVT no digestor provocou alterao na condio
ambiental em que foi obtida a maior AHE, em comparao com os testes realizados com a
concentrao de SVT de 2.500mg.L-1. Para o teste com a concentrao de SVT de 5.000mg.L-1 a
atividade mxima (389,5mLH2.gSVT-1.h-1) foi verificada quando o pH inicial foi ajustado para
5,5 e a DQO foi de 16.000mgO2.L-1, demonstrando a necessidade de maior quantidade de matria
orgnica para que os microrganismos possam atingir sua atividade mxima.
Neste caso, as baixas atividades foram observadas nos valores de DQO inferiores a
12.000mgO2.L-1 indicando que essas concentraes estavam abaixo das quantidades requeridas
pelos microrganismos produtores de hidrognio.
33
Novamente os testes resultaram em baixas AHE para os valores de pH de 5,0 e 6,5,

os quais apresentaram AHE mximas de 21 e 26mLH2.gSVT-1.h-1, respectivamente, no valor de
DQO de 12.000mgO2.L-1.
A Figura 05 apresenta os resultados das AHE em funo dos valores iniciais de
DQO e pH testado para a concentrao de SVT de 7.500mg.L-1.
-1 -1
AHE (mLH2.gSVT h )
500
400
300
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
200
100
0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

O aumento na concentrao de SVT nos digestores reduziu a AHE para valores
abaixo de 150mLH2.gSVT-1.h-1. A maior AHE (150mLH2.gSVT-1.h-1) foi medida quando o pH
dos digestores foi ajustado para 5,5 e o valor da DQO inicial foi de 12.000mgO2.L-1. Para a
mesma DQO, porm com o pH inicial ajustado para 6,5 verificou-se um decrscimo de 99,8% na
AHE.
Para os valores de pH inicial de 5,0 e 5,5 verificou-se que a DQO abaixo de
12.000mgO2.L-1 foi um fator limitante para a medida da atividade devido a pouca quantidade de
matria orgnica disponvel, em relao a quantidade de microrganismos presentes no digestor.
Os valores de DQO acima de 12.000mgO2.L-1 tambm provocaram reduo da AHE.
O teste realizado com pH inicial de 6,0 apresentou maior atividade no valor de
DQO mais elevado, indicando que as comunidades microbianas ativas nesse valor de pH no
foram influenciadas com o aumento da DQO.
34
Os resultados obtidos em todas as condies testadas mostraram a influncia do

pH sobre a atividade hidrognica. Valores inferiores a 5,5 ou superiores a 6,0 inibiram a ao dos
microrganismos produtores de hidrognio. Os resultados obtidos neste estudo sobre o efeito do
pH na produo de hidrognio esto de acordo com os resultados relatados por Mu et al. (2009),
nos quais o pH foi identificado como o parmetro mais importante no processo de produo de
hidrognio a partir da glicose.
A concentrao insuficiente de matria orgnica foi uma das causas das baixas
atividades medidas nos valores de DQO abaixo de 4.000mgO2.L-1. Alguns modelos cinticos
descrevem o efeito da concentrao do substrato sobre o crescimento dos microrganismos
produtores de hidrognio e sobre a produo de hidrognio, entre eles est o modelo clssico de
Monod, o qual estabelece que a taxa de reao aumenta com o aumento da concentrao da
matria orgnica at alcanar um valor mximo. Tambm prope que em baixas concentraes
de matria orgnica a taxa de reao proporcional a concentrao da mesma, enquanto que em
altas concentraes de matria orgnica a taxa torna-se independente da concentrao da mesma
(Wang & Wan, 2009).
Os resultados obtidos nesse estudo tambm demonstraram que as altas DQO
prejudicaram a atividade dos microrganismos. van Ginkel et al. (2001), relata que altas
concentraes de matria orgnica diminuem a converso da matria orgnica em hidrognio
devido queda brusca no valor do pH do meio e produo de cidos em quantidades elevadas.
Para concentraes de SVT acima de 2.500mg.L-1 constatou-se uma reduo na
atividade hidrognica. De acordo com Monteggia (1997) e Tsygankov (2007), o uso de
quantidade excessiva de lodo pode causar decrscimo na atividade mxima, devido a limitaes
na transferncia de massa do substrato para os microrganismos. Alm disso, essa limitao pode
aumentar pelo fato dos microrganismos fermentativos possurem elevada velocidade de
multiplicao (horas ao invs de dias) o que provoca um aumento na concentrao de SVT
presente no digestor num curto perodo de tempo.
3.2. Volume de hidrognio produzido no teste de AHE

Os volumes de hidrognio produzido por massa de matria orgnica adicionada,
em base DQO, para cada valor de pH testado na concentrao de SVT de 1.250mg.L-1 esto
mostrados na Figura 06.
35
pH = 5,5
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
40
pH = 6,0
30
20
10
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 06 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores de pH

testados para a concentrao de SVT de 1.250mg. L-1.
O maior volume de hidrognio produzido por unidade de matria orgnica
(28mL.gDQO-1) foi observadoa quando o pH inicial dos testes foi ajustado para 6,0 e a DQO
adicionada no digestor foi de 2.000mgO2.L-1. Para o mesmo valor de DQO, porm com o pH
inicial igual a 5,5 verificou-se um decrscimo de 39% na produo de hidrognio, indicando a
influencia do valor do pH no processo.
A baixa concentrao de microrganismos nos digestores fez com que os maiores
volumes de hidrognio fossem obtidos nos valores de DQO mais baixos. Na DQO acima de
4.000mgO2.L-1, a produo de hidrognio foi inibida pelo excesso de matria orgnica nos
digestores.
A Figura 07 apresenta os volumes de hidrognio produzido por grama de DQO
adicionada, na concentrao de SVT de 2.500mg.L-1, para cada valor de pH testado.
A maior produo volumtrica (31mL.gDQO-1) foi observada quando o valor do
pH foi ajustado para 5,5 e a DQO inicial foi de 4.000mgO2.L-1.
O valor da DQO tambm influenciou na produo volumtrica de hidrognio
apresentando-se como fator limitante em baixas concentraes e como inibidor em altas
concentraes. Para a DQO acima de 4.000mgO2.L-1 verificou-se o decrscimo na produo
hidrognio por grama de matria orgnica adicionada, que pode estar relacionado ao desvio da
36
rota metablica de converso da mesma. Conforme van Ginkel et al. (2001), o excesso de matria
orgnica pode provocar o aumento na presso parcial do hidrognio no head space do digestor,
provocando o desvio da rota metablica na direo da formao de lcoois ao invs da formao
do hidrognio.
pH = 5,0
pH = 5,5
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
40
30
pH = 6,0
pH = 6,5
20
10
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 07 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores de pH

testados para a concentrao de SVT de 2.500mg.L-1.
Na Figura 08 esto mostrados os volumes de hidrognio produzidos em funo das
DQO adicionadas nos digestores para cada pH testado.
pH = 5,0
pH = 5,5
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
40
30
pH = 6,0
pH = 6,5
20
10
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 08 Volume de hidrognio produzido em funo DQO adicionada nos valores de pH

37
Verificou-se nessa condio o maior volume de hidrognio produzido dentre todos

os valores de SVT testados, o qual foi de 38mL.gDQO-1 quando as condies iniciais do digestor
foram: pH igual a 5,5 e DQO de 8.000mgO2.L-1.
Novamente observou-se a influncia do pH inicial na produo volumtrica de
hidrognio. Comparando o resultado obtido na condio em que ocorreu a produo mxima com
o resultado obtido para o mesmo valor de DQO, porm com pH inicial ajustado para 6,5,
verificou-se uma reduo de 68% na produo volumtrica com o aumento de 1 unidade de pH.
Na faixa de DQO entre 1.000 e 8.000mgO2.L-1 ocorreu o aumento gradual no
volume de hidrognio produzido acompanhando o aumento da concentrao da matria orgnica
at alcanar o valor mximo no valor de DQO de 8.000mgO2.L-1. Nos valores maiores que
8.000mgO2.L-1 o volume de hidrognio produzido em relao a DQO adicionada decaiu.
Os resultados do volume de hidrognio produzido por grama de DQO adicionada,
em cada condio de pH estudada e na concentrao de SVT de 7.500mg.L-1 esto apresentados
na Figura 09.
pH = 5,0
pH = 5,5
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
40
30
pH = 6,0
pH = 6,5
20
10
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 09 Volume de hidrognio produzido em funo DQO adicionada nos valores de pH

O maior volume de hidrognio produzido foi observado para a concentrao de
SVT de 7.500mg.L-1 foi de 26mL.gDQO-1 quando as condies iniciais do digestor foram: pH
igual a 5,5 e DQO igual a 8.000mgO2.L-1.
38
Baixos volumes de hidrognio foram verificados quando os valores do pH

utilizados foram de 5,0 e 6,5. Nesse caso, os maiores volumes de hidrognio ocorreram quando o
pH dos digestores foi ajustado para 5,5.
Novamente observa-se o decrscimo no volume de hidrognio produzido com o
aumento na DQO. O excesso de matria orgnica prejudicou a transferncia de massa do
substrato orgnico para os microrganismos.
Os efeitos do pH inicial sobre a atividade dos microrganismos e sobre a produo
volumtrica de hidrognio indicaram que valores de pH abaixo de 5,5 e acima de 6,0
apresentaram forte influncia sobre os resultados obtidos. De acordo com Wang e Wan (2009),
esse comportamento pode ser explicado utilizando o modelo cintico de Andrew que descreve a
influncia da concentrao de ons hidrognio (H+) sobre a sua produo especfica. Conforme o
modelo citado, nas baixas concentraes de ons H+ e, por conseqncia, em altos valores de pH,
a produo de hidrognio apresenta tendncia a zero. Enquanto que nas altas concentraes de
ons H+, e consequentemente em baixos valores de pH, a produo de hidrognio decresce at
atingir o nvel em que ocorre a estabilizao.
Alm disso, mudanas na atividade da enzima hidrogenase, responsvel pela
reao de produo de hidrognio, dependem do pH, sendo que a atividade mxima da enzima
ocorre quando o valor do pH permanece entre 5,5 e 6,0. Estudos realizados por Tsygankov et al.
(2007) mostraram que em situaes cujo valor do pH foi ajustado para valores abaixo de 5,5 as
enzimas apresentaram atividade instvel.
Em todas as condies estudadas observou-se que o volume de hidrognio
produzido foi influenciado pela DQO inserida nos digestores. A influncia da concentrao de
matria orgnica sobre a produo de hidrognio segue o modelo cintico de Monod, o qual
sugere que em baixas concentraes de matria orgnica a taxa de converso da mesma em
hidrognio proporcional a sua concentrao, enquanto que em altas concentraes de matria
orgnica a taxa de converso independente da concentrao da mesma (Wang e Wan, 2009).
O excesso de lodo dentro dos digestores prejudicou a produo de hidrognio,
devido a limitaes na transferncia do substrato orgnico para os microrganismos.
39
3.3. Concentrao de AGV no mixed liquor antes da adio do substrato orgnico

Na Tabela 02 esto apresentadas as concentraes de AGVs do mixed liquor antes
da adio do substrato orgnico, para cada concentrao de SVT utilizada nos testes.
Tabela 02 Concentraes de AGV antes da adio do substrato orgnico, para cada
concentrao de SVT utilizada.
SVT
(mg.L-1)
1.250
2.500
5.000
7.500
c. actico
76,1
257,2
419,7
1.056,8
AGV (mg.L-1)
c. propinico
82,0
90,1
117,3
360,0
Ac. butrico
85,2
57,0
56,9
87
3.4. Teor dos AGV obtidos nos testes com concentrao de SVT de 1.250mg.L-1
Na Tabela 03 esto mostradas as concentraes dos cidos actico, propinico e
butrico determinadas ao final dos testes com glicose para cada valor de DQO e de pH estudados.
pH
5,5
6,0
AGV
(mg.L-1)
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
1.000
2.000
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000
12.000
721,9
412,3
3.433,7
1.297,7
2.235,8
1.102,7
3.654,5
82,9
73,7
91,7
38,0
107,6
59,1
151,1
154,3
427,5
5.627,1
2.218,0
2.813,3
1.934,5
4.791,0
2.428,0
2.320,7
1.830,0
2.461,7
893,7
3.306,5
3.990,7
98,1
121,5
83,9
149,5
88,1
26,9
221,4
537,7
1.150,5
1.457,1
3.885,8
1.015,4
2.942,2
6.807,5
16.000
20.000
O aumento no valor da DQO e o valor do pH no demonstraram influncia sobre a

concentrao dos cidos actico, propinico e butrico analisada, uma vez que os teores desses
compostos indicaram uma produo aleatria, sem relao com as variveis estudadas.
40
A distribuio percentual mssico dos AGV em funo da DQO para cada valor de
pH estudado, na concentrao de SVT de 1.250mg.L-1 est mostrada na Figura 10.
pH = 6,0
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
pH = 5,5
100%
60%
40%
60%
40%
20%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000
1.000
20.000
-1
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
-1
DQO (mgO2.L )
cido actico
2.000
DQO (mgO2.L )
cido butrico
cido propinico
Figura 10 Distribuio percentual mssica dos AGV em funo dos valores de DQO e pH
estudados, na concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
Nos testes realizados com o valor do pH ajustado para 5,5, foi observado que o
percentual de cido actico decresceu com o aumento da DQO, enquanto que o percentual de
cido butrico apresentou comportamento inverso, sendo o AGV predominante nas amostras com
valores de DQO acima de 4.000mgO2.L-1.
Nas amostras em que o valor do pH foi ajustado para 6,0, verificou-se decrscimo
nos percentuais de cido actico at a DQO de 8.000mgO2.L-1, e conseqente aumento na
porcentagem de cido butrico. Acima dessa concentrao foi observada uma oscilao nos
valores percentuais de ambos os cidos.
A Tabela 04 apresenta as concentraes dos cidos actico, propinico e butrico
determinadas ao final dos testes com glicose para cada valor de DQO e de pH estudados.
Verificou-se oscilao nas concentraes dos AGV com o aumento no valor da
DQO, no sendo verificada uma tendncia a produo dos mesmos com o acrscimo de matria
orgnica nos digestores.
41

pH
5,0
5,5
6,0
6,5
AGV
(mg.L-1)
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
Ac.
Actico
Ac.
Propinico
Ac.
Butrico
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000
12.000
1.000
2.000
16.000
20.000
3.380,2
656,2
1.858,2
4.740,4
3.585,5
2.959,5
3.257,2
348,4
79,3
87,5
26,9
226,0
170,0
215,8
266,3
911,8
1.446,2
5.217,3
4.421,8
3.232,7
2.856,4
3.722,8
2.391,6
5.014,7
8.500,9
3.200,8
4.934,0
3.271,6
499,2
282,2
581,9
820,8
302,8
368,6
320,3
1.394,4
1.655,0
5.568,5
10.141,7
3.717,7
5.970,9
3.842,6
511,1
763,2
1.869,0
4.702,7
2.740,0
2.467,6
1.018,0
3,1
90,4
299,8
516,7
242,2
363,0
171,9
75,2
392,2
2.569,7
6.747,0
3.599,9
3.667,6
2.726,3
3.001,7
2.549,4
2.644,5
2.274,2
3.510,9
2.774,3
3.363,9
406,2
367,9
435,6
312,5
546,9
362,4
332,3
1.053,5
1.348,5
4.371,4
3.293,2
5.797,5
5.399,7
3.937,2
A Figura 11 apresenta a distribuio percentual mssico dos AGV em funo da

DQO para os valores de pH estudados, na concentrao de SVT de 2.500mg.L-1.
Em todos os valores de pH testados verificou-se o decrscimo na porcentagem de
cido actico com o aumento da DQO at o valor de 8.000mgO2.L-1. Nos valores de DQO
maiores que 8.000mgO2.L-1 verificou-se tendncia a estabilizao no percentual de cido actico
presente nas amostras. Em contrapartida, a formao do cido butrico foi beneficiada pelo
aumento da DQO, resultando num percentual mais alto que o cido actico quando a DQO
utilizada foi acima de 4.000mgO2.L-1. Acima dessa condio, o percentual de cido butrico
formado tambm apresentaou tendncia a estabilizao, indicando que tanto a sua a formao
quanto a formao do cido actico foram inibidas pelo excesso de matria orgnica nos
digestores. Moosey (1983), relatou que sobrecargas orgnicas provocam o acmulo de hidrognio
42
no digestor fazendo com que os microrganismos acidognicos alterem a rota metablica na

direo da formao de cido butrico, em detrimento a formao do cido actico.
pH = 5,0
pH = 5,5
80%
80%
AGV (%)
100%
AGV (%)
100%
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
1.000
2.000
DQO (mgO2.L-1)
8.000
12.000
16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
pH = 6,5
pH = 6,0
100%
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
4.000
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
1.000
DQO (mgO2.L-1)
cido actico
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido butrico
cido propinico
Figura 11 - Distribuio percentual mssico dos AGV em funo da DQO e do pH estudados, na

concentrao de SVT de 2.500mgSVT.L-1.
A porcentagem de cido propinico apresentou-se abaixo de 9% nas amostras
analisadas, sendo os maiores valores verificados quando o pH inicial dos digestores foi ajustado
para 6,5 e na DQO de 1.000mgO2.L-1.
No foi verificada influncia do ajuste do pH inicial na produo dos AGV
analisados, uma vez que no foram observadas mudanas expressivas na concentrao dos
mesmos com as variaes de pH.
Na Tabela 05 esto as concentraes dos cidos actico, propinico e butrico
determinadas ao final dos testes com glicose para cada valor de DQO e de pH estudados para a
43

pH
5,0
5,5
6,0
6,5
AGV
(mg.L-1)
1.000
Ac.
4.010,6
Actico
Ac.
701,2
Propinico
Ac.
1.388,8
Butrico
Ac.
1.522,3
Actico
Ac.
149,5
Propinico
Ac.
469,5
Butrico
Ac.
4.021,7
Actico
Ac.
62,7
Propinico
Ac.
1.467,6
Butrico
Ac.
7.762,5
Actico
Ac.
1. 011,3
Propinico
Ac.
1.405,5
Butrico
2.000
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
5.257,4
2.093,5
4.226,7
3.308,8
7.289,5
1.356,6
843,9
158,2
346,9
367,9
1.040,2
182,7
2.407,9
1.083,2
5.083,1
4.199,0
8.178,4
1.544,5
4.672,8
3.016,0
1.010,7
5.806,9
3.053,6
4.022,1
566,8
430,6
414,9
543,6
147,1
289,9
2.809,7
2.889,6
998,0
5.745,8
2.530,5
3.760,7
4.025,5
5.975,8
4.505,5
3.962,2
6.641,9
9.321,2
541,0
941,5
501,2
561,9
786,1
1.177,2
1.408,4
4.386,4
4.548,1
5.229,5
8.443,9
11.658
7.201,6
5.205,2
4.042,4
2.879,6
5.635,0
3.615,4
1.141,1
915,0
800,0
686,6
756,7
512,5
1.210,1
3.467,4
4.856,1
6.244,4
3.400,8
2.739,1
Assim como observado nos testes com as concentraes de SVT de 1.250 e

2.500mg.L-1, no foi constatada tendncia entre o aumento da concentrao de matria orgnica
nos digestores e a produo de AGV.
A distribuio percentual mssico dos AGV em funo dos valores de DQO e pH
estudados, na concentrao de SVT de 5.000mg.L-1 est apresentada na Figura 12.
Nas condies em que o valor do pH inicial foi ajustado para 5,0; 5,5 e 6,0
observou-se a diminuio gradual na porcentagem de cido actico com o aumento gradual da
DQO at o valor de 8.000mgO2.L-1. Acima desse valor verificou-se que a porcentagem de cido
actico permaneceu estvel, mesmo com o aumento da concentrao de matria orgnica nos
digestores. Nas mesmas condies de pH, a porcentagem de cido butrico formado durante a
fermentao apresentou aumento gradual at a DQO de 8.000mgO2.L-l, mantendo-se estvel e
44
com percentuais muito prximos aos do cido actico nas concentraes posteriores. Esse
comportamento pode ser atribudo ao excesso de matria orgnica no digestor, que compromete a
atividade dos microrganismos produtores de cidos.
pH = 5,5
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
pH = 5,0
100%
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
1.000
2.000
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000
DQO (mgO2.L-1)
pH = 6,5
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
pH = 6,0
100%
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido actico
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido butrico
cido propinico
Figura 12 - Distribuio percentual mssico dos AGV em funo da DQO e do pH estudados, na

concentrao de SVT de 5.000 mgSVT.L-1.
Os resultados obtidos nos testes realizados com o pH inicial do digestor ajustado
pra 6,5 demonstraram decrscimo gradual no percentual de cido actico formado at o valor de
DQO de 8.000mgO2.L-1, apresentando oscilao nas concentraes posteriores. Nesta condio,
observou-se maior produo de cido actico do que de cido butrico ao final do perodo.
Estudos realizados por Horiuchi et al., (2002) com reatores acidognicos alimentados com
glicose, verificaram que quando o pH do reator foi ajustado para valores acima de 6,0, houve a
predominncia da produo de cido actico sobre a produo de cido butrico, indicando que o
pH provocou mudanas nos microrganismos dominantes dentro do digestor.
45
Verificou-se que o acrscimo na concentrao de SVT provocou um aumento no

percentual de cido propinico, cujo valor mximo apresentou-se em 12 % nas amostras
analisadas, sendo o maior valor verificado quando o pH inicial dos digestores foi ajustado para
6,5.
A concentrao dos cidos actico, propinico e butrico determinadas ao final dos
testes com glicose para cada valor de DQO e de pH estudados na concentrao de SVT de
7.500mg.L-1 esto na Tabela 06.
Tabela 06 - Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na
pH
5,0
5,5
6,0
6,5
AGV
(mg.L-1)
1.000
Ac.
5.143,1
Actico
Ac.
495,4
Propinico
Ac.
745,8
Butrico
Ac.
1.906,5
Actico
Ac.
156,7
Propinico
Ac.
484,7
Butrico
Ac.
1.516,4
Actico
Ac.
43,1
Propinico
Ac.
429,8
Butrico
Ac.
3.581,9
Actico
Ac.
323,5
Propinico
Ac.
589,0
Butrico
2.000
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
3.918,1
4.691,7
6.008,9
3.013,8
4.142,4
5.297,1
1.437,1
497,0
180,4
358,3
403,6
1.065,7
1.723,5
3.587,4
2.781,1
4.779,9
227,9
4.157,6
2.029,9
2.827,2
4.399,6
4.313,2
3.745,5
1.387,1
107,0
539,2
920,2
533,9
403,7
355,9
721,5
2.554,4
5.704,0
5.261,6
4.455,2
1.282,8
3.366,0
8.200,8
4.687,6
5.130,5
9.125,9
13.122
57,4
1.712,2
384,8
762,7
1.415,1
2.067,3
650,5
4.868,9
1.711,9
3.416,0
6.325,0
9.232,4
11.527,7
9.276,6
7.546,6
6.377,5
10.342
7.772,6
1.846,4
1.374,4
1.183,0
637,7
1.179,7
1.026,9
2.306,8
3.381,2
6.135,1
2.899,6
3.581,8
3.080,9
46
Novamente foi observada oscilao na produo dos AGV com o aumento da

DQO para cada valor de pH estudado. Os resultados obtidos em todas as concentraes de SVT
estudadas indicaram que a produo dos cidos analisados ocorre, provavelmente, de maneira
aleatria, no sofrendo influncia da concentrao de matria orgnica utilizada e do valor do pH
inicial.
A Figura 13 mostra a distribuio percentual mssica dos AGVs em funo das
CMOs para os valores de pH estudados, na concentrao de SVT de 7.500mg.L-1.
pH = 5,5
pH = 5,0
80%
80%
AGV (%)
100%
AGV (%)
100%
60%
40%
60%
40%
20%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
1.000
2.000
DQO (mgO2.L-1)
8.000
12.000 16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
pH = 6,0
pH = 6,5
100%
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
4.000
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido actico
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido butrico
cido propinico
Figura 13 Distribuio percentual mssica dos AGV em funo da DQO e do pH estudados, na

concentrao de SVT de 7.500mgSVT.L-1.
Nos testes realizados com o valor do pH dos digestores ajustado para 5,0
observou-se oscilaes nas porcentagens dos AGVs em funo da DQO, sendo esse
comportamento atribudo ao excesso de lodo utilizado que causou limitaes na transferncia de
massa do substrato para os microrganismos.
47
Para os valores de pH iguais a 5,5; 6,0 e 6,5 o aumento no valor da DQO provocou
o decrscimo nos percentuais de cido actico, sendo que os mesmos resultaram em valores
constantes para as DQO acima de 12.000mgO2.L-1.
Verificou-se que o cido actico foi o AGV predominante nos testes realizados
com pH ajustado para 5,0; 6,0 e 6,5, para os testes realizados com o pH inicial de 5,5 o cido
butrico apresentou-se em maior porcentagem.
A elevada concentrao de SVT pode ter provocado o aumento na quantidade de
microrganismos responsveis pela produo de cido propinico dentro do digestor, favorecendo
a produo do mesmo que resultou num percentual mximo de 20 % nas amostras analisadas.
As maiores concentraes de cido actico foram obtidas quando o valor do pH
dos digestores foi ajustado para 6,5. Para o cido butrico e o cido propinico, as maiores
concentraes foram observadas quando o valor do pH inicial foi de 6,0. Valores semelhantes aos
encontrados por Horiuchi et al. (2002) que observaram que o reator acidognico, alimentado com
glicose, produziu maior quantidade de cido butrico quando o valor do seu pH foi ajustado para
6,0 e quando o valor do pH foi ajustado para valores acima de 6,0 os autores verificaram a
predominncia do cido actico dentro do reator.
As maiores porcentagens de cido actico foram verificadas em baixos valores de
DQO. Conforme descrito por Mosey (1983), esse comportamento um indicativo de que a
limitao da quantidade de matria orgnica disponvel fez com que os microrganismos
acidognicos convertessem a mesma em cido actico, uma vez que nesse processo h maior
rendimento energtico para o crescimento e multiplicao celular, conforme mostrado na equao
(1):
C6H12O6 (glicose) + H2O 2CH3COOH (c. Actico) + 2CO2 + 4H2 + 4ATP (adenosina trifosfato) (1)
Ainda de acordo com Mosey (1983), o aumento na DQO provoca sobrecarga

orgnica e conseqente desvio na rota metablica, fazendo com que a glicose seja transformada
em cido butrico e cido propinico de acordo com as equaes (2) e (3):
C6H12O6 CH3CH2CH2COOH (c. butrico) + 2CO2 + 2H2 + 2ATP
(2)
C6H12O6 + H2O 2CH3CH2COOH (c. propinico) + 2H2O + 2ATP
(3)
48
A concentrao de SVT influenciou nos AGV formados durante a fermentao da

glicose. Para as concentraes de SVT de 1.250, 2.500 e 5.000mg.L-1 o cido predominante nas
amostras foi o cido butrico, o qual foi produzido em maior quantidade na concentrao de SVT
de 5.000mg.L-1, enquanto que na concentrao de 7.500mgSVT.L-1 o cido predominante nas
amostras foi o cido actico. Alm disso, na concentrao mais alta de SVT o percentual de cido
propinico nas amostras foi maior que nas demais concentraes de SVT testados.
O excesso de microrganismos acidognicos nos digestores e sua elevada taxa de
multiplicao necessitavam de quantidades mais altas de matria orgnica que as utilizadas nos
testes, o que provocou o desvio na rota metablica de produo de AGV na direo da produo
de cido actico, conforme mostrado pela equao (1).
De acordo com estudos realizados por Mu et al. (2007) o lodo tratado
termicamente caracteriza-se, principalmente, por possuir microrganismos produtores dos cidos
actico e butrico. Esse comportamento foi observado neste trabalho, uma vez que em todas as
concentraes de SVT testadas os AGV produzidos em maior quantidade foram os cidos actico
e butrico. A presena desses cidos considerada benfica, pois na sua formao ocorre a
produo de hidrognio, conforme mostrado nas equaes (1) e (2).
3.6. Variao do pH do mixed liquor ao final do teste

Os valores do pH final do mixed liquor em funo do valor da DQO, na
concentrao de SVT de 1.250mg.L-1 esto relatados na Figura 14.
7,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH
6,0
5,0
4,0
0
2.000
4.000
6.000
8.000 10.000 12.000 14.000 16.000 18.000 20.000 22.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 14 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a concentrao
de SVT de 1.250mg.L-1.
49
Nos valores de DQO compreendidos entre 1.000 e 8.000mgO2.L-1 verificou-se um

decrscimo gradual no valor do pH final de at 1 unidade, em relao ao valor inicial. O valor do
pH final mostrou variao de 0,1 unidades para a faixa de DQO compreendida entre 8.000 e
20.000mgO2.L-1, mantendo-se estvel mesmo com o aumento da DQO em todos os valores de pH
estudados.
A Figura 15 apresenta os valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO
para a concentrao de SVT de 2.500mg.L-1.
7,0
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
pH
6,0
5,0
4,0
0
2.000
4.000
6.000
8.000 10.000 12.000 14.000 16.000 18.000 20.000 22.000

-1
DQO (mgO2.L )
Em todos os valores de pH estudados verificou-se que o valor do pH final do
mixed liquor, para os valores de DQO acima de 8.000mgO2.L-1, apresentou tendncia
estabilidade mesmo com o aumento da concentrao da mesma. A variao no valor do pH final
para a faixa de DQO entre 8.000mgO2.L-1 e 20.000mgO2.L-1 foi de 0,1 unidade, a qual foi
observada em todos os valores de pH testados. Para as DQO menores que 4.000mgO2.L-1,
ocorreu o decrscimo gradual no valor do pH final com o aumento da concentrao da mesma.
Na Figura 16 esto apresentados os valores do pH final do mixed liquor em funo
da DQO inicial para a concentrao de SVT de 5.000mg.L-1.
50
7,0
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
pH
6,0
5,0
4,0
0
2.000
4.000
6.000
8.000 10.000 12.000 14.000 16.000 18.000 20.000 22.000

-1
DQO (mgO2.L )
Novamente foi observado que para a DQO compreendida entre 1.000 e
-1
8.000mgO2.L ocorreu o decrscimo gradual no valor do pH final de at 1 unidade, em relao

ao valor inicial. O valor do pH final apresentou variao de 0,2 unidades para a faixa de DQO
entre 8.000 e 20.000mgO2.L-1, mantendo-se estvel mesmo com o aumento da mesma. Esse
comportamento foi observado em todos os valores de pH testados.
Os valores do pH final do mixed liquor para cada valor de DQO testado, na
concentrao de SVT de 7.500mg.L-1 esto mostrados na Figura 17.
7,0
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
pH
6,0
5,0
4,0
0
2.000
4.000
6.000
8.000 10.000 12.000 14.000 16.000 18.000 20.000 22.000

-1
DQO (mgO2.L )
51
Como ocorrido nas demais concentraes de SVT testadas verificou-se o

decrscimo no valor do pH final do mixed liquor na faixa de DQO entre 1.000 e 8.000mgO2.L-1
seguida sua pela estabilizao nos valores acima de 8.000mgO2.L-1, para todos os valores de pH
testados.
A estabilizao do valor do pH final, independente do acrscimo na DQO, indicou
que o excesso de matria orgnica nos digestores causou saturao no meio, prejudicando a
converso do substrato orgnico pelos microrganismos. Esse efeito adverso pode ser observado
nos resultados dos percentuais dos cidos actico e butrico determinados nas amostras, os quais,
na maior parte dos testes, permaneceram constantes para valores de DQO acima de 8.000mgO2.L1
.
No foi verificada influncia da concentrao de SVT sobre o valor do pH final do
mixed liquor, indicando que a concentrao de matria orgnica nos digestores foi o parmetro
determinante no decrscimo do mesmo.
3.7. Grau de acidificao

Na Figura 18 esto mostrados os valores do grau de acidificao (G.A.) obtidos
em cada condio de pH e DOO estudados, quando foi utilizada a concentrao de SVT de
1.250mg.L-1.
pH = 5,5
pH = 6,0
-1
G.A. (gDQOAGV.gDQOafl )
2,0
1,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 18 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT de

1.250mg.L-1.
52
Os valores do grau de acidificao foram mais altos quando o valor do pH inicial

dos testes foi ajustado para 6,0. O valor mximo ocorreu quando o valor da DQO foi de
8.000mgO2.L-1, decrescendo nas concentraes mais altas.
No teste realizado com pH ajustado para 5,5 observou-se o maior valor no grau de
acidificao quando na DQO de 4.000mgO2.L-1, o qual decresceu em concentraes acima desse
valor, provavelmente devido a inibio da produo de cidos provocada pelo excesso de matria
orgnica.
Os valores do grau de acidificao em funo da DQO inicial para cada valor de
pH estudado na concentrao de SVT de 2.500mg.L-1 esto representados na Figura 19.
pH = 5,0
pH = 5,5
-1
2,0
pH = 6,0
pH = 6,5
1,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

2.500mg.L-1.
Para os valores de pH iguais a 5,0; 5,5 e 6,0 o valor do grau de acidificao
apresentou crescimento at a DQO de 8.000mgO2.L-1, onde atingiu seu valor mximo, seguido
pelo decrscimo nos valores acima desta concentrao. Para o valor de pH igual a 6,5 o grau de
acidificao foi mais alto no valor de DQO de 4.000mgO2.L-1, decrescendo nas concentraes
posteriores.
O decrscimo no valor do grau de acidificao observado nas DQO mais elevadas
est relacionado ao excesso de matria orgnica. Estudo realizado por Yu & Fang (2001) sugere
que o decrscimo no valor do grau de acidificao com o aumento da concentrao de matria
53
orgnica ocorre devido a mudana na rota metablica dos microrganismos, que em altos valores
de DQO passam a produzir lcoois ao invs de AGV e hidrognio.
A Figura 20 apresenta os valores do grau de acidificao em funo da DQO para
cada valor de pH estudado na concentrao de SVT de 5.000mg.L-1.
2,0
1
G.A. (gDQOAGV.gDQOafl- )
pH = 5,0
pH = 5,5
pH = 6,0
pH = 6,5
1,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

5.000mg.L-1.
Verificou-se oscilao nos valores do grau de acidificao com o aumento da
DQO quando os valores iniciais de pH foram ajustados para 5,0 e 5,5, indicando que para a
concentrao de SVT de 5.000mg.L-1 esse valores de pH causaram instabilidade nas rotas
metablicas de converso da matria orgnica em cidos.
Nos valores de pH iguais a 6,0 e 6,5 foi observada, respectivamente, tendncia a
estabilizao e ao decrscimo do grau de acidificao nos valores de DQO acima de
4.000mgO2.L-1, devido ao excesso de matria orgnica nos digestores.
Na Figura 21 esto os valores dos graus de acidificao em funo da DQO inicial
para cada valor de pH estudado na concentrao de SVT de 7.500mg.L-1.
Os maiores valores do grau de acidificao, na concentrao de SVT de
-1
7.500mg.L , foram obtidos quando o valor do pH inicial dos testes foi ajustado para 6,5.
Nos valores de pH de 5,0; 5,5 e 6,5 verificou-se o decrscimo no valor do grau de
acidificao para a DQO acima de 4.000mgO2.L-1, novamente indicando que altas concentraes
de matria orgnica prejudicaram a acidificao dos digestores. Para o valor de pH igual a 6,0 foi
54
observado o acrscimo no valor do grau de acidificao at o valor de DQO de 4.000mgO2.L-1,

seguido pelo decrscimo na DQO de 8.000mgO2.L-1, acima dessa concentrao o valor do grau
de acidificao mostrou-se novamente crescente.
pH = 5,0
pH = 5,5
-1
G.A.(gDQOAGV.gDQOafl )
2,0
pH = 6,0
pH = 6,5
1,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )

7.500mg.L-1.
Os decrscimos observados nos valores do grau de acidificao com o aumento da
DQO podem ter ocorrido devido ao excesso de matria orgnica que, por causa de limitaes na
transferncia de massa do substrato para os microrganismos, reduziu a produo de AGV e
hidrognio.
Foram observados valores do grau de acidificao acima de 1,0, indicando que a
produo de AGV foi maior que a quantidade de matria orgnica adicionada nos digestores.
Essa discrepncia nos valores pode ser um indcio de que ocorreu interferncia da matria
orgnica liberada do interior das clulas dos microrganismos devido a autoclavagem do lodo, que
pode ter sido transformada em cidos durante o processo fermentativo.
Dentre os valores de pH testados, os valores de 6,0 e 6,5 apresentaram maiores
graus de acidificao. Borja et al. (2005) obtiveram resultados semelhantes em testes utilizando
efluente rico em carboidratos.
55
4. Concluses
A metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica, mostrou-se
eficiente para medir a capacidade de produo de hidrognio de um lodo, a partir de um substrato
orgnico solvel, de fcil degradao.
O tratamento trmico do lodo utilizando a autoclavagem por 30 minutos eliminou
os microrganismos metanognicos, uma vez que no houve produo de metano em nenhuma das
condies testadas. Porm, a autoclavagem provocou o rompimento da membrana celular dos
microrganismos do lodo causando a liberao do material contido em seu interior para o meio
reacional, prejudicando a sedimentao ao final do teste.
O valor do pH inicial foi um fator determinante na converso do substrato
orgnico em hidrognio. Os resultados desse estudo demonstraram que a maior atividade
hidrognica e a maior produo volumtrica ocorreram quando o pH inicial permaneceu na faixa
entre 5,5 e 6,0. A formao dos AGV tambm foi influenciada pelo valor do pH provavelmente
devido a mudanas nas rotas metablicas, as quais produziram cido actico em maior
quantidade quando o valor do pH inicial foi ajustado para 6,5 e cido butrico em quantidade
superior para os demais valores de pH estudados.
Os valores de DQO abaixo de 4.000mgO2.L-1 limitaram a atividade dos
microrganismos e a produo volumtrica de hidrognio, porm favoreceram a produo de cido
actico, enquanto que os valores acima de 12.000mgO2.L-1 provocaram inibio da atividade dos
microrganismos e da produo volumtrica de hidrognio alm de favorecerem a produo de
cido butirico.
As altas concentraes de SVT inseridas nos digestores prejudicaram a atividade
hidrognica e a produo de hidrognio, devido a elevada taxa de multiplicao dos
microrganismos fermentativos ( = 2,0d-1), o que provocou um aumento na concentrao de SVT
no digestor e inibiu o processo. Alm disso, o excesso de microrganismos provocou desvio da
rota metablica na direo da produo de cido actico, uma vez que havia pouca quantidade de
matria orgnica disponvel para a alta populao microbiana presente nos digestores.
As condies operacionais recomendadas para a realizao do teste de AHE so as
seguintes: utilizao de glicose como substrato orgnico, valor do pH inicial de 6,0, DQO igual a
12.000mgO2.L-1 e concentrao de SVT de 2.500mg.L-1.
56
O maior volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica

adicionada foi de 38mL.gDQO-1 observado no pH de 5,5, DQO igual a 8.000mgO2.L-1 e
Valores do grau de acidificao acima de 1,0 ocorreram possivelmente devido a
interferncia da matria orgnica dissolvida proveniente do lodo autoclavado, a qual pode ter sido
transformada em AGV.
A melhor condio para a produo de cido actico, o qual a fonte de carbono
preferencial dos microrganismos em processos de remoo biolgica de nutrientes, ocorreu
quando o valor do pH foi ajustado para 6,5, na concentrao de SVT de 7.500mg.L-1 e na DQO
de 2.000mgO2.L-1.
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61
5 - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos

orgnicos
Resumo: Efluentes provenientes de processos industriais podem ser aproveitados como fonte de
matria orgnica para a gerao de hidrognio. Neste trabalho foi avaliada a capacidade de
produo de hidrognio dos substratos orgnicos: cido propinico, cido butrico, efluente
protico, glicerol, efluente da produo do fungicida Tebuconasol e glicose. Foram tambm
avaliados a produo de cidos graxos volteis (AGV) e o grau de acidificao de cada substrato.
As condies utilizadas no estudo foram: concentrao de matria orgnica de 1.000, 2.000, 4.000,
8.000, 12.000, 16.000 e 20.000mg.DQOL-1; concentrao de lodo de 2.500mgSVT.L-1 e pH inicial
igual a 6,0. A maior atividade hidrognica foi obtida para a glicose (483mLH2.gSVT-1.h-1),
seguida do efluente protico (6,8mLH2.gSVT-1.h-1), para os demais substratos orgnicos a
atividade hidrognica apresentou-se abaixo de 0,26mLH2.gSVT-1.h-1. O maior volume de
hidrognio produzido ocorreu quando o substrato utilizado foi a glicose (24,8mL.gDQO-1) seguido
pelo efluente protico (1,74mL.gDQO-1). O cido graxo voltil encontrado em maior porcentagem
aps a fermentao dos substratos orgnicos foi o cido actico, exceto quando o substrato
utilizado foi o cido butrico que sofreu degradao parcial e ficou acumulado no efluente. Foi
observado alto grau de acidificao no teste utilizando o cido butrico devido a alta concentrao
residual do mesmo no efluente.
Palavras chave: hidrognio, atividade hidrognica especfica, substratos orgnicos, cidos
graxos volteis
1. Introduo
A necessidade de mudana na matriz energtica que atualmente se baseia na
utilizao de fontes no renovveis, para sistemas que utilizam energia proveniente do hidrognio
no est apenas fundamentada nos riscos associados s mudanas climticas, mas tambm na
escassez das reservas de combustveis fsseis (Baykara, 2005).
O uso do hidrognio como carreador energtico apresenta vantagens quando
comparado aos combustveis fsseis, pois sua combusto produz apenas gua, sem gerao de
62
dixido de carbono; alm de possuir capacidade calorfica quase 3 vezes maior que a gasolina
(van Ginkel et al., 2001).
A produo de hidrognio por via biolgica pode ocorrer durante a degradao
anaerbia de substratos orgnicos complexos, onde polissacardeos, protenas e lipdios so
hidrolizados por enzimas, formando acares, aminocidos e cidos graxos que so degradados
por microrganismos acidognicos que os transformam em cidos graxos volteis, dixido de
carbono e hidrognio (Yu & Fang, 2001).
Os critrios utilizados na seleo de substratos orgnicos para a produo de
hidrognio incluem sua disponibilidade, seu custo e sua biodegradabilidade. Acares simples
como a glicose, a sucrose e a lactose so facilmente biodegradveis e so os substratos mais
estudados para a produo de hidrognio, entretanto so fontes de matria orgnica com alto
valor comercial (Kapdam & Kargi, 2006).
O hidrognio pode ser produzido a partir de resduos orgnicos domsticos,
agrcolas, pecurios e industriais. Os efluentes provenientes de indstrias alimentcias, de
indstrias de biocombustveis e de indstrias de bioinseticidas possuem potencial para a produo
de hidrognio por possurem altas concentraes de carboidratos e protenas. Porm a natureza
complexa desses substratos pode causar um efeito adverso na sua biodegradabilidade, uma vez
que cada componente requer diferentes condies ambientais para produzir hidrognio (Kapdam
& Kargi, 2006). Em alguns casos, o pr-tratamento do substrato orgnico (acidificao,
tratamento trmico, etc.) pode beneficiar o processo de produo de hidrognio (Wang & Wan,
2009).
O teste de medida da atividade hidrognica especfica (AHE) apresenta-se como
uma ferramenta til para avaliar a capacidade de produo de hidrognio de um lodo, bem como
avaliar o potencial que um substrato orgnico possui para gerar hidrognio. Alm disso, o teste
permite observar alteraes no comportamento do lodo anaerbio, quando submetido a
compostos inibidores ou txicos.
Os objetivos desse estudo foram determinar a atividade hidrognica especfica,
avaliar o volume de hidrognio produzido, determinar o percentual dos cidos graxos volteis
produzidos e o grau de acidificao para cada substrato orgnico nas condies testadas.
63
2.1. Efluente
Os substratos orgnicos utilizados neste trabalho foram solues de cido
propinico, cido butrico e glicerol com elevado grau de impurezas e, por conseqncia com
baixo valor comercial, proveniente de uma empresa fabricante de biodiesel. Foram utilizados
tambm: efluente protico oriundo de uma indstria de processamento de soja; efluente
proveniente do processo de produo do fungicida Tebuconasol, o qual continha compostos
qumicos de estrutura complexa; e glicose. Todos os efluentes foram utilizados nas concentraes,
representadas em funo da demanda qumica de oxignio (DQO), de 1.000, 2.000, 4.000, 8.000,
12.000, 16.000 e 20.000mg.L-1. Alm destes substratos orgnicos foram realizados testes com
acetato de sdio anidro nas mesmas concentraes. Este teste foi empregado como referncia,
uma vez que durante a fermentao do acetato no h produo de hidrognio.
2.2. Lodo
A concentrao de slidos volteis totais (SVT) utilizada no teste foi de
2.500mg.L-1, considerada ideal aps testes de padronizao da medida da atividade hidrognica
especfica. O lodo granular, proveniente de um reator UASB de uma indstria de processamento
de soja, foi autoclavado a 120C durante 30 minutos para eliminar microrganismos
metanognicos, conforme descrito por Xiao & Liu (2009).
2.3. pH
O valor do pH utilizado nos testes foi igual a 6,0, considerado ideal para a medida
da atividade hidrognica especfica de acordo com testes preliminares.

O meio nutricional utilizado foi baseado em estudos realizados por Lin & Lay
(2005) e por Feng et al. (2008) e cuja composio est descrita na Tabela 01.
64
Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado na medida da AHE dos substratos

orgnicos.
Nutrientes
MgCl2.6H2O
CaCl2.2H2O
NH4Cl
ZnCl2
MnSO4.4H2O
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
KCl
Na2HPO4.12H2O
NaH2PO4.2H2O
NiCl2.6H2O
KI
NaCl
FeSO4.7H2O
CoCl2.6H2O
Concentrao (mg.L-1)
40
1.000
50
2,5
3,8
10
5
130
1.000
2.550
2,5
12,5
1.000
1
2,5
2.5. Sistema utilizado na determinao da AHE

O sistema utilizado no estudo foi o equipamento denominado respirmetro
anaerbio, desenvolvido por Monteggia (1991) para realizao do teste de Atividade
Metanognica Especifica (AME).
O equipamento era formado por 8 digestores de vidro com volume til de 450 mL
cada, com agitao magntica e mantidos em ambiente com temperatura controlada. O controle e
liberao do gs resultante da fermentao dos digestores foi realizado por vlvulas solenides de
trs vias, conectadas a manmetros com possibilidade de ajuste da presso de operao do
sistema.
A medida do volume de gs produzido durante o teste foi realizada de forma semicontnua pelo monitoramento do nmero de pulsos referentes descarga de volume prdeterminado de biogs em funo da presso e temperatura.
2.5.1. Procedimento operacional

Os testes para determinar a atividade hidrognica dos substratos orgnicos foram
realizados conforme a seqncia a seguir:
65
- Adio da quantidade de lodo necessria ao teste e do meio nutricional, em igual volume,

- Ajuste do pH para 6,0 utilizando HCl 1mol.L-1 ou NaOH 1mol.L-1;
- Insero de gs nitrognio no interior dos frascos durante 1 minuto, a fim de eliminar o ar
atmosfrico;
- Adaptao do lodo durante o perodo noturno;
- Colocao do substrato orgnico em concentrao pr-estabelecida;
- Ajuste do pH utilizando HCl 1mol.L-1 ou NaOH 1mol.L-1
- Procedimento adicional de eliminao do ar atmosfrico atravs da insero de gs nitrognio
no interior dos digestores;
- Coleta de amostras do biogs a cada duas horas, para determinao da porcentagem de
hidrognio.
O final do teste foi determinado pelas redues na porcentagem de hidrognio e no
volume de biogs produzido.
2.5.2. Procedimentos analticos

A caracterizao dos substratos orgnicos foi realizada conforme metodologias
descritas no Standard Methods (2005).
Para a anlise da composio do biogs foi utilizado cromatgrafo gasoso Dani
GC 1000 com detector de condutividade trmica (TCD) e coluna Molecular Sieve 80/100. As
condies cromatogrficas utilizadas foram: T injetor: 50C; T detector: 50C; T coluna: 40C; o
gs de arraste utilizado foi Hlio com fluxo de 25mL.min-1 e o volume de amostra injetada foi de
1mL, conforme metodologia adaptada de Morimoto et al. (2004).
A concentrao dos cidos graxos actico, propinico e butrico foi determinada
por cromatografia gasosa, conforme metodologia descrita no Standard Methods (2005). Utilizouse cromatgrafo gasoso Dani GC 1000, com detector de ionizao de chama (FID) e coluna
capilar AT 1000 (30m x 0,32mm x 0,25m). As condies cromatogrficas utilizadas foram: T
injetor: 150C; T detector: 240C; T forno: 95C por 2 min., 140C a 10C.min.-1., 200C a
40C.min.-1, 200C por 5 min. e retorno a temperatura inicial; o gs de arraste utilizado foi Hlio
com fluxo de 1mL.min-1 e o volume de amostra injetada foi de 1L. Antes da injeo no
66
cromatgrafo, as amostras foram centrifugadas por 30 minutos e filtradas utilizando filtro de fibra
de vidro com dimetro de poro de 0,6m, para eliminar os slidos suspensos.
A fim de verificar a contribuio de AGV provenientes do lodo autoclavado foi
coletada uma alquota do sobrenadante do mixed liquor para anlise antes da adio do substrato
orgnico.
O grau de acidificao foi determinado pela razo entre a demanda qumica de
oxignio (DQO) dos produtos da acidognese no efluente (cido actico, cido propinico e
cido butrico) e no biogs (hidrognio) e a DQO inicial dentro do digestor, conforme
metodologia descrita por Bengtsson et al. (2008).
2.5.3. Clculo da AHE

O clculo da atividade hidrognica foi adaptado da metodologia proposta por Beal
& Monteggia (2009) para o clculo da atividade metanognica, onde foi utilizado o Mtodo da
Tangente para a determinao da atividade mxima em cada condio estudada. A seqncia de
passos para o clculo foi a seguinte:
1. Anlise da composio do gs gerado via cromatografia gasosa;
2. Construo da curva que representa a Composio percentual de hidrognio x Tempo;
4. Clculo do volume produzido de hidrognio a cada pulso registrado, utilizando a curva obtida
no item 3;
5. Construo do grfico de Produo acumulada de hidrognio x Tempo;
7. Derivao da equao que melhor representou a curva obtida, no perodo de tempo do teste;
8. Clculo das inclinaes das tangentes da curva a cada intervalo de tempo de 0,1h, utilizando a
equao derivada obtida no item 7, no perodo de tempo do teste;
9. Identificao do maior volume de hidrognio produzido por hora, correspondente ao maior
valor da inclinao das tangentes obtidas;
10. Determinao da AHE, expressa em mLH2.gSVT-1.h-1, atravs da razo entre o valor
encontrado no item 9 e a concentrao de biomassa inserida no digestor.
67
3.1. Caracterizao dos substratos orgnicos industriais
Na Tabela 02 esto caracterizados os substratos orgnicos industriais utilizados no
estudo.
Tabela 02 Caractersticas dos substratos orgnicos testados.
Parmetro
Efl. Protico
Glicerol 5%
Efl. fungicida
Alcalinidade (mgCaCO3.L-1)
598
149
52.090
Amnia (mgNH4-N.L-1)
6,1
3,9
2.625
Nitrognio total Kjedahl (mgN.L-1)
297
ND
2.692
Slidos totais (mg.L-1)
22.764
ND
10.759
Slidos volteis totais (mg.L-1)
17.092
ND
4.853
DQO solvel (mgO2.L-1)
26.182
57.818
76.753
pH
4,8
6,6
11,2
ND no determinado.
3.2. AHE dos substratos orgnicos

Na Figura 01 esto apresentados os resultados das atividades hidrognicas, em
funo da DQO para os substratos orgnicos testados e para o acetato de sdio que foi empregado
como referncia para o teste de AHE.
A atividade hidrognica para o acetato de sdio apresentou-se abaixo de
0,06mLH2.gSVT-1.h-1, que pode estar relacionada ao consumo da matria orgnica proveniente
do material celular liberado durante a autoclavagem do lodo, uma vez que no processo de
digesto anaerbia o acetato transformado apenas em metano e monxido de carbono, sem a
gerao de hidrognio.
Verificou-se que dentre os cidos graxos volteis testados a maior atividade
ocorreu na concentrao de matria orgnica de 2.000mgDQO.L-1 quando foi utilizado cido
propinico (0,26mLH2.gSVT-1.h-1) como substrato orgnico. Foi observado que para DQO acima
de 2.000mgO2.L-1, a atividade sofreu um decrscimo aproximando-se de zero quando a DQO
utilizada foi igual a 20.000mgO2.L-1. Estudos realizados por Zheng & Yu (2005) relataram
inibio dos microrganismos produtores de hidrognio com o aumento da concentrao dos
cidos graxos volteis em digestores anaerbios.
68
Acetato de sdio
-1
AHE (mLH2.gSVT .h )
0,3
-1
Ac. propionico
Ac. butrico
0,2
Glicerol 5%
Efl. fungicida
0,1
0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 01 AHE do acetato de sdio, cidos propinico e butrico, glicerol 5% e efluente de

fungicida, em funo dos valores de DQO testados.
Os resultados obtidos com a soluo de glicerol 5% demonstraram atividade
mxima de 0,11mLH2.gSVT-1.h-1 na DQO de 12.000mgO2.L-1. Para DQO acima desse valor
ocorreu decaimento na AHE, de acordo com trabalho realizado por Seifert et al. (2009) o
aumento da concentrao de glicerol de 5 para 10mg.L-1 aumentou a produo especfica de
hidrognio, semelhante aos resultados obtidos neste trabalho, onde as concentraes de glicerol
descritas correspondem aos valores de DQO entre 8.000 e 12.000mgO2.L-1 e que apresentaram
AHE crescentes.
Estudos realizados por Papanikolau et al (2000) utilizando glicerol como substrato
orgnico indicaram que a presena do microrganismo Clostridium butyricum nos digestores
provocou decrscimo na formao de hidrognio e aumento significativo da produo de 1,3propanodiol. A presena desse microrganismo aliada ao excesso de matria orgnica, podem ter
provocado desvio da rota metablica na direo da produo desse lcool.
O efluente oriundo do processo de produo de fungicidas obteve atividade
hidrognica mxima semelhante ao observado nos testes realizados com cido propinico
(0,26mLH2.gSVT-1.h-1), porm na DQO de 12.000mgO2.L-1. A AHE decaiu com o aumento da
DQO provavelmente devido a toxicidade do efluente, o qual possui em sua composio
elementos aromticos como o tebuconazole e o propiconazole, que podem afetar a atividade
enzimtica dos microrganismos.
69
Na Figura 02 esto apresentados os resultados das atividades hidrognicas, em

funo da DQO para o efluente protico.
Efl. proteico
-1
-1
AHE (mLH2.gSVT .h )
8,0
6,0
4,0
2,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
-1
DQO (mgO2.L )
Figura 02 AHE do efluente protico em funo dos valores de DQO testados.

Dentre os substratos orgnicos provenientes da indstria (efluente protico,
glicerol e efluente de fungicida), o efluente protico foi o que apresentou melhor desempenho na
medida de atividade hidrognica dentre os testados, a qual chegou a 6,8mLH2.gSVT-1.h-1 para o
valor de DQO de 2.000mgO2.L-1 decaindo nas concentraes acima desse valor. Estudos
realizados por Okamoto et al. (2000) relataram que efluentes industriais ricos em protenas no
so facilmente fermentados pelos microrganismos produtores de hidrognio. No processo de
digesto anaerbia a quebra das protenas libera amnia que, em altas concentraes, causa
toxicidade aos microrganismos. O aumento na DQO pode ter provocado o aumento na
concentrao de amnia dentro dos digestores causando a reduo na AHE.
A Figura 03 mostra os resultados das atividades hidrognicas, em funo da DQO
obtidas nos testes com a glicose.
A maior AHE, dentre os substratos orgnicos industriais e sintticos testados, foi
obtida quando o substrato utilizado foi a glicose, a qual resultou em 483mLH2.gSVT-1.h-1.
Observou-se que a variao nas DQO influenciou a AHE, a qual apresentou comportamento
crescente at atingir seu valor mximo quando a DQO inicial foi igual a 12.000mgO2.L-1,
decrescendo nas concentraes posteriores. A AHE foi muito superior ao observado nos testes
70
com os outros substratos orgnicos, uma vez que a glicose facilmente biodegradvel e a
principal fonte de energia para o crescimento dos microrganismos fermentativos.
-1
-1
AHE (mLH2.gSVT .h )
500
Glicose
400
300
200
100
0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
-1
DQO (mgO2.L )
Figura 03 AHE obtidas nos testes com glicose em funo dos valores de DQO testadas.
3.3. Volume de hidrognio produzido no teste de AHE

Na Figura 04 est o volume de hidrognio produzido em funo da DQO
adicionada nos digestores, para os substratos orgnicos testados e para o acetato de sdio.
A utilizao do acetato de sdio como substrato permitiu verificar a eficincia do
processo de autoclavagem do lodo na eliminao dos microrganismos metanognicos, uma vez
que esse composto o precursor de 70 a 75% do gs metano gerado em condies anaerbias.
Como a digesto anaerbia do acetato produz metano, o qual no foi detectado em nenhum dos
testes realizados, o hidrognio encontrado no biogs provavelmente teve origem da digesto do
material celular liberado pelo tratamento trmico.
O aumento da concentrao de matria orgnica nos digestores, quando foi
utilizado o cido propinico e o cido butrico como substratos orgnicos, provocou decrscimo
na produo volumtrica de hidrognio, indicando que esses substratos provocam inibio dos
microrganismos produtores de hidrognio. Resultados semelhantes foram obtidos por Wang et al.
(2008) e van Niel et al. (2003) em estudos sobre o efeito inibidor dessas substncias no processo
de produo de hidrognio.
71
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
1,8
Acet. de sdio
Ac. propinico
1,5
Ac. butrico
1,2
Efl. proteico
Glicerol
0,9
Efl. fungicida
0,6
0,3
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 04 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da DQO
adicionada para os substratos orgnicos estudados e para o acetato de sdio.
Estudos realizados por van Ginkel et al. (2005) mostraram que a presena do cido
butrico no meio mais prejudicial para a produo de hidrognio do que a presena do cido
actico. Durante a produo de acetato ocorre a liberao de hidrognio, enquanto que na
produo de butirato o hidrognio produzido rapidamente consumido para a produo de
solventes.
Para o efluente protico verificou-se que a produo volumtrica de hidrognio foi
mais elevada, atingindo 1,74mL.gDQO-1. O valor da DQO inicial influenciou na produo de
hidrognio, sendo que abaixo de 4.000mgO2.L-1 foram produzidos baixos volumes de hidrognio
devido a pouca quantidade de matria orgnica disponvel para os microrganismos. O decrscimo
na produo de hidrognio na DQO acima de 8.000mgO2.L-1 pode ser atribuda a formao de
amnia dentro dos digestores. Xiao et al., (2010), relatam decrscimo na produo de hidrognio
uma vez que durante a degradao da protena ocorre a formao de alguns produtos
intermedirios como o glutamato, que pode agir como doador de eltrons, a prolina que pode agir
como aceptor de eltrons e a treonina que age como doador e aceptor de eltrons. Esses produtos
so responsveis pela formao de hidrognio seguida pelo seu consumo parcial com a finalidade
de dar continuidade ao processo de digesto anaerbia.
72
O volume de hidrognio produzido foi menor que 0,15mL.gDQO-1 quando o

substrato orgnico utilizado foi a soluo de glicerol 5% , conforme Papanikolau et al. (2000) a
fermentao do glicerol produz baixos volumes de hidrognio, uma vez que o sub produto de sua
degradao o 1,3-propanodiol.
Quando o substrato orgnico utilizado foi o efluente da produo de fungicida a
presena de compostos aromticos como o tebuconazole e o propiconazole podem ter provocado
toxicidade aos microrganismos, comprometendo a produo de hidrognio, principalmente na
DQO acima de 4.000mgO2.L-1. A baixa produo volumtrica observada quando a DQO
apresentava-se abaixo de 4.000mgO2.L-1, provavelmente ocorreu devido a limitao na
concentrao do substrato orgnico.
A Figura 05 mostra o volume de hidrognio produzido em funo da DQO
adicionada nos digestores, nos testes realizados com glicose.
-1
Prod.H2 (mL.gDQO )
30,0
Glicose
24,0
18,0
12,0
6,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 05 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da DQO
adicionada nos testes realizados com glicose.
Por ser um substrato facilmente biodegradvel, a glicose produziu o maior volume
de hidrognio dentre todos os substratos orgnicos testados, 24,8mL.gDQO-1, que foi limitada
nos valores de DQO abaixo de 4.000mgO2.L-1, e inibida nos valores de DQO acima de
12.000mgO2.L-1, conforme observado nos testes de medida da AHE.
73
3.4. Variao do pH nos testes de medida da AHE

A Figura 06 mostra os resultados das medidas de pH do mixed liquour realizadas
ao final de cada um dos testes onde foram utilizados como efluentes solues de acetato de sdio,
cido propinico, cido butrico e glicose.
8,0
pH
6,0
4,0
2,0
Acet. de sdio
Ac. propionico
Ac. butirico
Glicose
0,0
0
3.000
6.000
9.000
12.000 15.000 18.000 21.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 06 Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO dos testes que utilizaram
acetato de sdio, cido propinico, cido butrico e glicose como substratos orgnicos.
Verificou-se que para o acetato de sdio e para os cidos propinico e butrico a
variao no valor do pH ao final do teste, em relao ao valor do pH inicial, foi de 0,2 unidades
independentemente do aumento na DQO. A maior variao, 0,8 unidades de pH para cima,
ocorreu quando foi utilizado cido butrico na DQO de 4.000mgO2.L-1.
No teste realizado utilizando glicose como substrato orgnico foi observado que o
aumento da DQO dentro dos digestores provocou decrscimo mais acentuado no valor do pH
final do mixed liquor, indicando que houve a fermentao da glicose e conseqente produo de
AGVs.
Na Figura 07 esto os resultados da variao do valor do pH ao final dos testes
realizados com efluente protico, glicerol 5% e efluente do processo de produo de fungicida,
comparados com a variao observada nos testes com glicose.
74
8,0
pH
6,0
4,0
2,0
Efl. proteico
Glicerol 5%
Efl. fungicida
Glicose
0,0
0
3.000
6.000
9.000
12.000 15.000 18.000 21.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 07 - Valor do pH final do mixed liquor em funo da DQO dos testes utilizando efluente
protico, glicerol, efluente de fungicida e glicose.
A fermentao do efluente protico e do glicerol 5% provocou decrscimo no
valor do pH ao final do teste, o qual diminuiu gradualmente com o aumento da DQO de ambos os
efluentes. Foi verificada a reduo de 1,6 unidades de pH para o efluente protico e 1 unidade
para a soluo de glicerol na DQO de 20.000mO2.L-1, comportamento semelhante ao observado
no teste com a glicose.
No teste com efluente do processo de produo de fungicida foi observada a
variao de 0,1 unidade no pH final do mixed liquor, independente da DQO estudada. Esse
comportamento pode ser explicado pela elevada capacidade de tamponamento apresentada pelo
efluente o que dificultou o ajuste do seu pH antes do incio do teste. Alm disso, essa capacidade
tampo pode ter influenciado na produo de hidrognio, uma vez que, em testes preliminares,
verificou-se a necessidade da queda no valor do pH para que houvesse a formao do hidrognio.
A estabilizao do valor do pH final, independente do acrscimo no valor das
DQO, indicou que o excesso de matria orgnica nos digestores pode ter causado saturao no
meio, prejudicando a converso do substrato orgnico pelos microrganismos. Este efeito adverso
pode ser observado nos resultados de AHE e no volume de hidrognio produzido onde se
verificou decrscimo em ambos os parmetros nos valores de DQO mais elevados.
75
3.5. Produo de cidos graxos

3.5.1. Distribuio percentual dos AGV nos substratos orgnicos estudados
Antes da adio dos substratos orgnicos foram analizadas as concentraes de
AGV no sobrenadante do mixed liquor para o teor de SVT de 2.500mg.L-1. As concentraes dos
cidos actico, propinico e butrico determinadas foram de 257,2; 90,1 e 57,0mg.L-1
respectivamente.
As Tabelas 03, 04 e 05 descrevem as concentraes dos AGV analisadas ao final
dos testes com os substratos orgnicos estudados.
Tabela 03 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com acetato de sdio
anidro e cido propinico.
1.000
Acetato de sdio anidro

cido
cido
cido
actico
propinico
butrico
(mg.L-1)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
3.476,1
179,9
183,2
2.000
5.766,1
1.110,9
767,8
461,5
87,5
43,9
4.000
10.346,1
960,5
600,4
1.560,3
226,7
150,7
8.000
19.505,9
375,8
274,0
992,0
156,5
99,5
12.000
19.617,8
231,2
149,2
863,1
263,4
118,3
16.000
37.826,1
542,7
296,6
1.148,6
268,4
147,2
20.000
46.986,1
26,9
327,9
1.494,6
356,3
167,0
DQO
(mgO2.L-1)
cido Propinico
cido
cido
cido
actico
propinico
butrico
(mg.L-1)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
1.800,5
216,6
139,8
Observando os resultados descritos na Tabela 03 foi constatada uma oscilao nas

concentraes dos AGV analisados, com o aumento do valor da DQO. Esse comportamento
indica que a composio qumica dos substratos orgnicos estudados pode ter provocado
influncia sobre o metabolismo dos microrganismos produtores de cidos. Nas Tabelas 04 e 05
observou-se comportamento semelhante.
76
Tabela 04 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com cido butrico e
efluente protico.
1.000
cido Butrico
cido
cido
cido
propinico
butrico
actico
(mg.L-1)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
785,0
119,2
512,5
Efluente protico
cido
cido
actico
propinico
(mg.L-1)
(mg.L-1)
10.238,5
588,1
2.000
2.215,4
424,1
2.806,4
1.839,2
90,3
405,5
4.000
3.756,8
717,7
7.631,5
3.770,5
431,7
1.292,2
8.000
813,5
51,0
2.870,6
2.934,1
382,2
1.695,8
12.000
1.200,1
222,4
9.595,0
2.768,9
353,5
420,4
16.000
1.544,0
454,8
13.184,8
3.713,8
358,7
367,2
20.000
660,4
267,9
16.774,1
2.624,2
248,2
116,9
DQO
(mgO2.L-1)
cido
butrico
(mg.L-1)
636,6
Tabela 05 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com glicerol 5% e
1.000
cido
actico
(mg.L-1)
453,3
Glicerol 5%
cido
propinico
(mg.L-1)
45,5
cido
butrico
(mg.L-1)
73,7
Efluente fungicida
cido
cido
cido
propinico
butrico
actico
(mg.L-1)
(mg.L-1)
(mg.L-1)
1.228,5
32,2
61,7
2.000
2.030,7
451,8
1.165,9
2.687,7
165,9
212,9
4.000
1.697,2
319,0
784,8
7.020,2
519,2
466,3
8.000
1.111,6
289,8
612,3
10.447,0
352,9
253,5
12.000
533,9
26,9
183,5
11.603,5
188,7
279,4
16.000
1.345,3
522,8
1.007,2
21.412,7
357,5
218,7
20.000
1.654,6
696,9
846,6
7.278,8
34,4
59,7
DQO
(mgO2.L-1)
A Tabela 06 mostra os resultados das anlises dos AGV ao final do teste que
utilizou glicose como substrato orgnico. Foi observado um acrscimo gradual na concentrao
dos AGV analisados at o valor de DQO igual a 8.000mgO2.L-1, acima dessa concentrao de
matria orgnica verificou-se decrscimo nos valores das concentraes dos AGV com o
aumento no valor da DQO.
77
Tabela 06 Concentrao dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com glicose.
1.000
cido actico
(mg.L-1)
511,1
Glicose
cido propinico
(mg.L-1)
3,1
cido butrico
(mg.L-1)
75,2
2.000
763,2
90,4
392,2
4.000
1.869,0
299,8
2.569,7
8.000
4.702,7
516,7
6.747,0
12.000
2.740,0
242,2
3.599,9
16.000
2.467,6
363,0
3.667,6
20.000
1.018,0
171,9
2.726,3
DQO
(mgO2.L-1)
Na Figura 08 esto apresentadas as distribuies percentuais mssicas dos cidos

actico, propinico e butrico em funo dos valores de DQO para cada substrato orgnico
estudado e para o acetato de sdio.
No teste realizado com o acetato de sdio foi observada a formao dos cidos
propinico e butrico, principalmente nas DQO mais baixas, os quais podem ter se originados da
matria orgnica liberada do interior das clulas microbianas para o mixed liquor por ocasio da
autoclavagem do lodo, porm esse aspecto necessita de estudos posteriores.
O AGV predominante na fermentao do cido propinico foi o cido actico,
correspondendo a mais de 69% do total de cidos produzidos. Sua porcentagem manteve-se
constante mesmo com o aumento da DQO. Verificou-se a presena de cido butrico no efluente
o qual provavelmente teve origem a partir do material celular liberado com a autoclavagem do
lodo, uma vez que as rotas metablicas de degradao do cido propinico no resultam na
formao do cido butrico.
Quando o cido butrico foi o substrato orgnico estudado verificou-se um
decrscimo no percentual de cido actico com o aumento da DQO, por outro lado, nessa mesma
condio, a porcentagem de cido butrico sofreu um acrscimo gradual, indicando que o
aumento da concentrao do mesmo no digestor provocou toxicidade aos microrganismos
fermentativos. Estudo realizado por Zheng & Yu (2005) apresentou resultados semelhantes de
decrscimo na produo de cido actico com o aumento na concentrao de cido butrico no
digestor.
78
Ac. propinico
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
Acetato de sdio
100%
60%
40%
60%
40%
20%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
1.000
2.000
4.000
DQO (mgO2.L-1)
12.000 16.000 20.000
Efl.proteico
100%
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
Ac. butrico
60%
40%
60%
40%
20%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000
1.000
20.000
2.000
DQO (mgO2.L-1)
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
DQO (mgO2.L-1)
Efl. fungicida
Glicerol 5%
100%
100%
80%
80%
AGV (%)
AGV (%)
8.000
DQO (mgO2.L-1)
60%
40%
20%
60%
40%
20%
0%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
1.000
DQO (mgO2.L-1)
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
DQO (mgO2.L-1)
Glicose
100%
AGV (%)
80%
60%
40%
20%
0%
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000 16.000 20.000
DQO (mgO2.L-1)
cido actico
cido butrico
cido propinico
Figura 08 Distribuio percentual mssica dos AGV em funo dos valores de DQO para os
substratos orgnicos estudados e para o acetato de sdio.
79
A porcentagem dos AGV obtidos na fermentao do glicerol foi varivel e sem

relao aparente com o aumento na DQO. O cido actico foi o subproduto predominante em
todas as concentraes de substrato testadas, variando de 47 a 79%.
O efluente do processo de fabricao de fungicida foi considerado, dentre os
substratos orgnicos provenientes da indstria, ideal para a produo de cido actico, uma vez
que a variao percentual desse cido ficou entre 87,7 e 98,7% no efluente do digestor,
apresentando comportamento crescente com o aumento da DQO. As porcentagens dos cidos
propinico e butrico apresentaram-se abaixo de 6,5 e 7,0%, respectivamente, as quais sofreram
reduo com o aumento da DQO.
Nos testes realizados utilizando glicose como substrato orgnico observou-se que a
porcentagem de cido actico apresentou decrscimo com o aumento da DQO at 4.000mgO2.L-1,
acima dessa concentrao a percentagem de cido actico manteve-se constante at a DQO de
20.000mgO2.L-1 quando sofreu novo decrscimo. Por outro lado, a porcentagem de cido butrico
sofreu acrscimo com o aumento da DQO, apresentando-se em maior quantidade que o cido
actico nas DQO acima de 4.000mgO2.L-1. Esse comportamento um indicativo da presena do
microrganismo Clostridium butyricum no lodo, o qual transforma a matria orgnica em cido
butrico.
3.6. Grau de acidificao

A Figura 09 mostra os valores do grau de acidificao (G.A.) em funo da DQO
inicial, para cada substrato orgnico estudado e para o acetato de sdio.
No teste realizado com acetato de sdio provavelmente houve a contribuio da
DQO proveniente do material celular, liberado durante o processo de autoclavagem do lodo, no
aumento da concentrao de cido actico no efluente. Esta influncia foi detectada nas anlises
de AGV e no clculo do grau de acidificao.
Os menores graus de acidificao foram observados quando os substratos
orgnicos utilizados nos testes foram o cido propinico, o efluente protico e o glicerol 5%.
Nesses casos, verificou-se que o aumento da DQO provocou decrscimo no grau de acidificao,
uma vez que a produo de cidos foi inibida pelo excesso de matria orgnica. De acordo com
estudos realizados por Yu & Fang (2001) a acidificao de carboidratos, protenas e lipdeos
decresce com o aumento da concentrao do substrato orgnico.
80
Acet. de sdio
c. propinico
-1
3,0
c. butrico
Efl. proteico
2,0
Glicerol 5%
Efl. fungicida
Glicose
1,0
0,0
1.000
2.000
4.000
8.000 12.000 16.000 20.000

-1
DQO (mgO2.L )
Figura 09 Valores do grau de acidificao em funo da DQO inicial, para cada substrato
orgnico estudado e para o acetato de sdio.
O grau de acidificao da glicose foi crescente at a DQO atingir 8.000mgO2.L-1,
ocorrendo decrscimo nas concentraes posteriores. Esse comportamento indica que valores de
DQO abaixo de 8.000mgO2.L-1 limitou a converso da glicose em AGV, enquanto que para as
DQO acima desse valor houve inibio do processo de converso da glicose em AGV.
4. Concluses
A AHE foi influenciada pela composio dos substratos orgnicos estudados,
sendo que os melhores resultados foram obtidos com a glicose e com o efluente protico. Os
demais substratos orgnicos apresentaram baixa capacidade de produo de hidrognio, uma vez
que nas DQO estudadas provocaram toxicidade aos microrganismos produtores de hidrognio.
As variaes da AHE e no volume de hidrognio produzido em funo da DQO
para os substratos orgnicos testados reportaram que as baixas DQO provocaram limitaes na
atividade dos microrganismos e na produo volumtrica de hidrognio, enquanto que as altas
DQO provocaram inibio da atividade dos microrganismos e da produo volumtrica de
hidrognio.
81
O AGV produzido em maior porcentagem na fermentao dos substratos: cido

propinico, efluente protico, glicerol e efluente da produo de fungicida foi o cido actico.
Quando o cido butrico foi o substrato utilizado, verificou-se pouca degradao do mesmo
devido as suas altas porcentagens determinadas no efluente ao final do teste. No caso da glicose
observou-se que a variao da DQO provocou alteraes nos AGV produzidos, nas
concentraes mais baixas de substrato a porcentagem de cido actico apresentou-se maior que a
de cido butrico, porm o aumento gradual da DQO provocou mudanas no metabolismo dos
microrganismos causando inverso no cido graxo predominante, que passou a ser o cido
butrico.
O clculo do grau de acidificao pode ter sofrido influncia da matria orgnica
liberada do interior das clulas microbianas por ocasio da autoclavagem do lodo, uma vez que
em alguns casos foi observada a concentrao de AGV acima da DQO adicionada.
Apesar dos substratos orgnicos: cido propinico, cido butrico, efluente
protico, glicerol e efluente da produo de fungicida produzirem baixos volumes de hidrognio,
os AGV formados durante a fermentao podem ser aproveitados na remoo biolgica de
nutrientes, uma vez que esses compostos so fontes de carbono facilmente biodegradvel.
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84

Resumo: Os microrganismos anaerbios produtores de hidrognio sofrem influncia de fatores
ambientais principalmente do pH. O comportamento do pH durante o processo de digesto
anaerbia pode influenciar na porcentagem de hidrognio no biogs e na produo de cidos
graxos volteis (AGV). Para verificar esta influncia foram realizados testes com fermentadores
com controle de pH e sem controle de pH, utilizando glicose como fonte de matria orgnica na
concentrao de 12.000mgDQO.L-1, concentrao de lodo de 2.500mgSVT.L-1 e testados os
valores de pH de 5,0; 5,5 e 6,0. As maiores porcentagens de hidrognio, produo de AGV, grau
de acidificao e remoo de matria orgnica ocorreram quando no houve o controle do pH ao
longo do teste.
Palavras chave: hidrognio, controle de pH, AGV, glicose
1. Introduo
O hidrognio um carreador energtico que, durante sua combusto, produz
energia limpa sem a emisso dos gases responsveis pelo efeito estufa. Existem diversos
processos de produo de hidrognio, dentre os quais est a converso biolgica da matria
orgnica. Um grande nmero de espcies de microrganismos anaerbios obrigatrios e
facultativos, cianobactrias e bactrias fotossintticas tm-se mostrado excelentes produtores de
hidrognio. A produo biolgica de hidrognio a partir da biomassa apresenta-se como soluo
promissora no que diz respeito ao aproveitamento de resduos que normalmente so dispostos no
meio ambiente, na maior parte dos casos, sem o tratamento adequado (Cheong & Hansen, 2006).
Microrganismos acidognicos do gnero Clostridium sp. tm sido estudados
devido ao seu potencial para gerar hidrognio e podem ser classificados como microrganismos
proteolticos ou sacarolticos dependendo do substrato orgnico que ser degradado.
Microrganismos acidognicos proteolticos degradam protenas e aminocidos, enquanto que os
acidognicos sacarolticos degradam carboidratos e so amplamente estudados devido a sua
habilidade em produzir altas quantidades de hidrognio (Khanal et al., 2004).
O mecanismo da fermentao acidognica da matria orgnica envolve a
solubilizao da matria em suspenso, a hidrlise de compostos solveis como os acares,
85
aminocidos e cidos graxos de cadeia longa e a formao de cidos graxos volteis como os
cidos actico, propinico, butrico e valrico (Borja et al., 2005).
De acordo com Mosche & Jordening (1999), a cintica da fermentao
acidognica pode ser descrita considerando dois aspectos: a assimilao do substrato baseado na
reduo da demanda qumica de oxignio (DQO) e na formao de produtos baseados na
produo de cidos volteis. O mecanismo da utilizao do substrato pela clula microbiana
descrito como uma seqncia de trs processos complexos: contato do microrganismo com a
molcula do substrato; transporte para o interior da clula e metabolismo do substrato.
Muitos aspectos do metabolismo microbiano so influenciados por variaes do
pH, incluindo: a utilizao de fontes de carbono, eficincia na degradao do substrato, sntese de
protenas e liberao de produtos do metabolismo celular. Estudos mostraram que o pH um
fator importante para a formao de produtos intermedirios, alm de afetar a atividade das
enzimas hidrogenases e das rotas metablicas de produo de hidrognio (Zheng & Yu, 2004).
Alteraes no pH provocam mudanas num grande nmero de espcies de uma
populao microbiana presente num reator acidognico, causando diferenas na faixa tima de
pH para a produo de hidrognio, a qual varia conforme o resduo orgnico utilizado (Zheng &
Yu, 2004). De acordo com Fang & Liu (2002), a faixa de pH ideal para produo de hidrognio
utilizando sucrose de 4,0 a 4,5; para o amido varia de 4,7 a 5,7 e para glicose 5,5. Conforme Lin
& Cheng (2006) para xilose o pH ideal est entre 6,0 e 7,0. Para guas residurias da indstria
alimentcia o valor fica em torno de 6,0 (Oh & Logan, 2006).
Este trabalho teve como objetivos estudar o comportamento do pH durante o
processo de produo de hidrognio e avaliar a influncia do controle externo do pH na
porcentagem de hidrognio no biogs, na produo dos cidos actico, propinico e butrico, no
grau de acidificao e na remoo de matria orgnica do fermentador.
2.1. Efluente
Foi utilizado como efluente soluo de glicose na concentrao, representada em
base DQO, de 12.000mgO2.L-1, determinada em testes de padronizao da medida da atividade
hidrognica de lodos.
86
2.2. Lodo
O lodo granular empregado nos testes foi oriundo de um reator UASB utilizado no
tratamento de efluentes de uma indstria de processamento de soja. O lodo foi submetido ao
processo de autoclavagem a 120C durante 30 minutos, para eliminar os microrganismos
metanognicos, conforme descrito por Xiao & Liu (2009). Foi testada a concentrao de slidos
volteis totais (SVT) de 2.500mg.L-1, a qual apresentou melhor desempenho em testes de medida
de atividade realizados anteriormente.
2.3. pH
Foram testados os seguintes valores de pH inicial: 5,0; 5,5 e 6,0. Nos testes com
controle a variao no valor do pH em relao ao seu valor inicial foi de 0,1 unidade. Para
controle do pH utilizou-se soluo de NaOH 1 mol.L-1.

A soluo nutricional utilizada nos testes, composta por micro e macro nutrientes,
foi baseada em trabalhos realizados por Lin & Lay (2005) e por Feng et al. (2008) e cuja
composio est descrita na Tabela 01.
Tabela 01 Composio do meio nutricional utilizado nos testes de fermentao.
Nutrientes
MgCl2.6H2O
CaCl2.2H2O
NH4Cl
ZnCl2
MnSO4.4H2O
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
KCl
Na2HPO4.12H2O
NaH2PO4.2H2O
NiCl2.6H2O
KI
NaCl
FeSO4.7H2O
CoCl2.6H2O
Concentrao (mg.L-1)
40
1.000
50
2,5
3,8
10
5
130
1.000
2.550
2,5
12,5
1.000
1
2,5
87
2.5. Procedimento operacional

Os testes foram realizados utilizando fermentadores New Brunswick modelo
BioFlo 110 com volume til de 4L, de acordo com o seguinte procedimento:
- Adio da quantidade de lodo necessria ao teste e de igual volume de meio nutricional,
- Ajuste do pH utilizando HCl 1mol.L-1 ou NaOH 1mol.L-1;
- Insero de gs nitrognio no interior dos fermentadores, para eliminar o ar atmosfrico;
- Adaptao do lodo as condies operacionais durante o perodo noturno;
- Colocao do substrato orgnico (glicose) nos fermentadores;
- Ajuste do pH utilizando HCl 1mol.L-1 ou NaOH 1mol.L-1;
- Insero de gs nitrognio no interior dos fermentadores para eliminao do ar atmosfrico.
O final do teste foi determinado pelo decrscimo na porcentagem de hidrognio no
biogs produzido.
2.6. Procedimentos analticos

injetado foi de 1mL, conforme adaptao da metodologia descrita por Morimoto et al. (2004).
A anlise da concentrao dos cidos graxos actico, propinico e butrico foi
realizada atravs de cromatografia gasosa, conforme metodologia descrita no Standard Methods
(2005). Utilizou-se o cromatgrafo gasoso Dani GC 1000, com detector de ionizao de chama
(FID) e coluna capilar AT 1000 (30m x 0,32mm x 0,25m). As condies cromatogrficas
utilizadas foram: T injetor: 150C; T detector: 240C; T forno: 95C por 2 min., 140C a
10C.min.-1, 200C a 40C.min.-1, 200C por 5min e retorno a temperatura inicial; o gs de
arraste utilizado foi Hlio com fluxo de 1mL.min-1 e o volume de amostra injetada foi de 1L.
Antes da anlise no cromatgrafo, as amostras foram centrifugadas por 30 minutos e filtradas
88
utilizando filtro de fibra de vidro com dimetro de poro de 0,6m, a fim de eliminar a
interferncia dos slidos suspensos.
Para verificar a concentrao de AGV proveniente do lodo autoclavado foi
coletada uma alquota do sobrenadante do mixed liquor antes da adio do substrato orgnico.
O mesmo procedimento de preparao de amostra utilizdo para a anlise de AGV
foi adotado para a anlise da concentrao de matria orgnica, em base DQO, determinada
conforme procedimento descrito no Standard Methods (2005).
O grau de acidificao foi determinado pela razo entre a DQO dos produtos da
acidognese no efluente (cido actico, cido propinico e cido butrico) e no biogs
(hidrognio) e a DQO inicial dentro do fermentador, conforme metodologia descrita por
Bengtsson et al. (2008).
3.1. Variao do pH no fermentador sem controle
A Figura 01 mostra a variao observada no valor do pH em funo do tempo nos
valores de pH estudados.
6,5
pH = 5,0
pH = 5,5
6
pH
pH = 6,0
5,5
5
4,5
4
0
10
15
20
25
30
35
Tempo (h)
Figura 01 Variao do valor do pH em funo do tempo para cada valor de pH estudado.

Nos testes realizados com valores iniciais de pH iguais a 5,0 e 5,5 foi observado
um aumento de 0,4 unidades de pH nas primeiras 5 horas do teste. Transcorrido esse perodo
89
verificou-se o decrscimo gradual nos valores do pH, que ao final dos testes apresentou-se em 4,6
0,1.
Assim como ocorrido nos testes com os valores de pH de 5,0 e 5,5, no teste
realizado com o valor do pH ajustado para 6,0 tambm foi observado um acrscimo de 0,2
unidades no valor do mesmo, porm esse comportamento foi observado nas 3 primeiras horas de
teste. Ao final do teste o valor do pH apresentou-se em 4,8.
Nos testes realizados observou-se um pequeno aumento no valor do pH no incio
do processo fermentativo, provavelmente devido a adaptao dos microrganismos a condio
ambiental imposta. A produo de hidrognio e o acmulo dos AGV dentro do fermentador
provocaram uma queda gradual nos valores do pH do mixed liquor, os quais permaneceram na
faixa entre 4,5 a 4,8 ao final do teste.
3.2. Porcentagem de hidrognio no biogs

A partir das anlises cromatogrficas realizadas durante o perodo de testes, foi
calculada a porcentagem de hidrognio no biogs ao longo do processo de fermentao. Nas Tabelas
02, 03 e 04 esto os percentuais de hidrognio em funo do tempo para os testes realizados nos
valores de pH inicial de 5,0; 5,5 e 6,0, respectivamente, nos fermentadores com e sem controle de
pH.
Tabela 02 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial ajustado para 5,0
0,1 nos fermentadores com e sem controle de pH.
Hidrognio (%)
Tempo (h)
2,4
3,3
5,6
6,7
7,9
8,7
25,5
26,6
27,5
28,8
Fermentador sem controle de pH
Fermentador com controle de pH
0,00
0,23
1,52
2,83
6,95
12,45
21,44
20,61
20,23
19,81
0,12
0,26
0,71
0,94
0,61
0,99
19,14
19,73
20,38
20,14
90
Tabela 03 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial ajustado para
5,5 0,1 nos fermentadores com e sem controle de pH.
Hidrognio (%)
Tempo (h)
2,6
3,4
4,9
6
7
8,2
26,2
27,2
29,9
0,00
0,15
0,27
1,17
3,08
1,23
20,69
20,50
20,06
0,44
0,29
0,59
1,45
1,23
2,88
20,06
20,51
19,83
Tabela 04 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial ajustado para
6,0 0,1 nos fermentadores com e sem controle de pH.
Hidrognio (%)
Tempo (h)
1,6
2,7
4,6
6
7,2
8
26
26,7
28,2
0,19
0,24
1,14
4,46
6,70
9,10
19,90
20,90
20,03
0,90
1,42
2,65
1,91
1,86
1,65
19,72
19,02
19,31
Em todos os valores de pH estudados, a porcentagem de hidrognio determinada

no biogs do fermentador sem controle de pH apresentou aumento acentuado nas primeiras 8
horas, enquanto que no fermentador com controle de pH este aumento foi menor, indicando forte
interferncia do controle do pH na partida do processo fermentativo.
O valor do pH inicial mostrou influncia na produo de hidrognio do
fermentador sem controle. Para o pH inicial de 5,0 a porcentagem de hidrognio atingiu o valor
91
mximo de 12,5%, enquanto que para os valores de pH inicial igual a 5,5 e 6,0 essa porcentagem
foi de 1,23 e 9,1%, respectivamente, nas 8 horas inicias dos testes.
Dentre os valores de pH testados, foi verificado que a condio que resultou na
maior porcentagem de hidrognio no biogs ocorreu quando o pH inicial foi ajustado para 5,0,
corroborando o estudo realizado por van Ginkel et al. (2001) onde os autores estabeleceram,
utilizando testes em batelada, que o valor de pH ideal para a mxima produo de hidrognio foi
igual a 5,0.
Os resultados indicaram que a produo de hidrognio nos fermentadores com
controle de pH foi inibida nas primeiras horas, provavelmente devido a necessidade de um tempo
de aclimatao dos microrganismos nova condio de pH antes do incio da produo de
hidrognio. Os percentuais de hidrognio no perodo final dos testes variaram entre 19,0 e
21,44%, independentemente do valor de pH testado e do controle ou no do mesmo, sendo esse
resultado mais um indicativo da provvel necessidade de adaptao inicial dos microrganismos s
condies de processo. Conforme Li et al. (2007), o pH um fator que influencia as atividades
dos microrganismos fermentativos os quais necessitam alterar sua fisiologia para adequarem-se
as variaes ambientais.
A adio de NaOH ao mixed liquor para o controle do pH no deve ter causado
efeito adverso aos microrganismos uma vez que a concentrao mxima de sdio adicionada aos
fermentadores foi de 600 mg.L-1. Conforme descrito por Grady Jr. (1999), a concentrao a partir
da qual observada toxicidade causada pelo sdio em processos anaerbios situa-se na faixa de
3.500 a 8.000 mg.L-1.
Os efeitos negativos do controle do pH sobre o processo de fermentao de
efluentes domsticos foram observados por Cokgor et al. (2009). Os autores verificaram
decrscimo na eficincia do processo fermentativo e aumento no tempo de partida do processo
quando o valor do pH foi controlado durante todo o perodo dos testes.
3.3. Produo dos AGV

Antes da adio do substrato orgnico no fermentador foram determinadas as
concentraes dos cidos actico, propinico e butrico no sobrenadante do mixed liquor, as quais
resultaram em 257,2mg.L-1; 90,1mg.L-1 e 57mg.L-1, respectivamente.
92
Na Figura 02 esto os resultados das anlises dos AGV para os valores de pH

testados com e sem controle.
12.000
9.000
6.000
3.000
Sem controle
-1
Com controle
Ac. propinico (mg.L )
Sem controle
-1
Ac. actico (mg.L )
12.000
Com controle
9.000
6.000
3.000
0
5,0
5,5
6,0
5,0
pH
5,5
6,0
pH
Ac. butrico (mg.L-1)
12.000
Sem controle
Com controle
9.000
6.000
3.000
0
5,0
5,5
6,0
pH
Figura 02 Concentrao dos cidos actico propinico e butrico em funo do valor do pH

inicial para os testes realizados com e sem controle de pH.
Os resultados obtidos demonstraram que o controle de pH durante o perodo do
teste prejudicou a produo dos AGV. As maiores concentraes dos cidos actico, propinico e
butrico foram observadas quando o pH inicial foi ajustado para 5,5 e o processo foi mantido sem
controle do pH.
O teste em que o valor do pH no foi controlado apresentou as concentraes
mximas de cido actico, propinico e butrico de 10.264, 1.655 e 10.791mg.L-1,
respectivamente. Para o teste realizado com controle do valor do pH durante o processo de
fermentao, os respectivos valores das concentraes dos AGV foram de 4.629, 677 e
5.993mg.L-1. O cido butrico foi o AGV encontrado em maior quantidade ao final do teste,
seguido pelo cido actico e cido propinico, indicando a presena de microrganismos do
gnero Clostridium sp. no lodo utilizado, os quais conforme Kong et al. (2006), so responsveis
pela presena, em altas concentraes, dos cidos actico e butrico em processos anaerbios.
Estudos realizados por Ylmaz & Demirer (2008) e Cokgor et al. (2009) com reatores controlados
93
e sem controle de pH apresentaram resultados semelhantes em termos da diminuio na produo

de AGV influenciada pelo controle de pH.
Durante o teste com pH controlado observou-se a formao de espuma na
superfcie do mixed liquor quando a porcentagem de hidrognio no biogs superou 10%. A
constante adio de NaOH para controlar o pH no valor determinado pode ter provocado a
saponificao dos cidos graxos produzidos no interior do fermentador, diminuindo sua
porcentagem ao final do teste. No foi observada formao de espuma no reator sem controle de
pH.
Na Tabela 05 esto apresentados os graus de acidificao obtidos em cada valor de
pH testado.
Tabela 05 Grau de acidificao obtido para cada valor de pH testado.
Fermentador
Sem controle de pH
Com controle de pH
Grau de acidificao (gDQOAGV.gDQO-1afl)

pH inicial = 5,0
pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
0,36
2,05
0,41
0,40
1,03
0,33
Verificou-se que o grau de acidificao foi influenciado pelo valor do pH inicial

do teste e pelo controle do mesmo. O maior grau de acidificao foi observado quando o valor do
pH inicial foi ajustado para 5,5 e o fermentador foi mantido sem o controle do pH, indicando que
essas condies so ideais para a produo de cidos que posteriormente podem ser aproveitados
em outros processos. Ylmaz & Demirer (2008) e Cokgor et al. (2009) verificaram que o controle
de pH diminuiu a acidificao dos efluentes testados em comparao aos efluentes fermentados
sem controle de pH, comportamento semelhante ao que foi observado nesse trabalho.
Na Tabela 06 esto apresentados os percentuais de remoo de matria orgnica
em cada fermentador para as condies estudadas.
Tabela 06 Percentual de remoo de matria orgnica, em base DQO, em cada fermentador
para as condies estudadas.
Fermentador
Sem controle de pH
Com controle de pH
Remoo de DQO solvel (%)

pH inicial = 5,0
pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
21,7
57,6
84,3
11,5
15,2
42,5
94
Os maiores percentuais de remoo de matria orgnica ocorreram quando no

houve controle do pH. O pH inicial tambm influenciou nesse percentual, sendo que o valor de
pH mais elevado (6,0) propiciou maior remoo de matria orgnica ao final do teste.
4. Concluses
O percentual de hidrognio no biogs produzido nos fermentadore sem controle de
pH foi influenciado pelo valor do pH inicial, sendo a maior produo observada no valor mais
baixo de pH. O controle no valor do pH tambm influenciou a produo de hidrognio, o qual
decresceu quando o pH foi controlado durante o perodo dos testes. Alm disso, verificou-se que
o controle do pH retardou o tempo de partida do processo fermentativo, bem como o aumento da
porcentagem de hidrognio no biogs quando comparado com o fermentador sem controle de pH.
A produo de AGV, principalmente os cidos actico e butrico, foi maior quando
o pH inicial foi de 5,5 e os fermentadores foram mantidos sem controle de pH. O controle do pH
prejudicou a produo de AGV provavelmente devido a adio constante de lcali, que pode ter
provocado a saponificao desses compostos.
Novamente o controle de pH apresentou efeito negativo sobre o grau de
acidificao dos fermentadores o qual foi maior quando o pH inicial foi ajustado para 5,5 e
mantido sem controle.
A remoo de matria orgnica tambm foi prejudicada pelo controle do pH,
sendo menor quando o pH do fermentador foi controlado durante todo o perodo do teste.
O ajuste do pH inicial dos testes demonstrou um papel fundamental no processo de
produo de hidrognio, porm seu controle durante o todo o processo de fermentao causou
prejuzos na produo do hidrognio, na produo de AGV e na remoo de matria orgnica.
Esses resultados demonstraram que o controle do pH durante a fermentao no apresenta efeitos
positivos sobre os microrganismos envolvidos no processo. Entretanto, so necessrios estudos
adicionais para determinar quais so as reais causas deste comportamento.
95
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98
7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a

partir de efluentes da suinocultura
Resumo: O aumento na produo de sunos provocou a gerao de grandes quantidades de
dejetos em pequenas extenses de terra. Os dejetos sunos so classificados como resduos de
grande potencial poluidor por possurem alta concentrao de matria orgnica a qual pode ser
utilizada para a produo de biogs. O hidrognio contido no biogs produzido a partir da
decomposio anaerbia desses dejetos pode ser utilizado como carreador energtico limpo e
renovvel. O hidrognio apresenta-se como uma alternativa promissora para a reduo das
emisses de gases oriundos da queima de combustveis fsseis. Neste trabalho foram analisados o
efeito do tempo de deteno celular na composio do biogs e os efeitos do pH e da temperatura
da fase acidognica na remoo de matria orgnica, na otimizao da produo de hidrognio e
no aumento da concentrao de cidos graxos volteis utilizando efluentes gerados na criao de
sunos. Foram empregados no processo reatores anaerbios em dois estgios, um reator
acidognico e outro metanognico. No reator acidognico foram testados os tempos de deteno
celular de 1,4; 1,7 e 2,5 dias, os valores de pH de 5,0 e 6,0 e as temperaturas: ambiente (de 15C
a 25C), 35C e 55C. A maior remoo de matria orgnica foi de 55%, para o tempo de
deteno celular de 1,4 dia, valor de pH igual a 5,0 e temperatura de 35C; nessas mesmas
condies foi observada a maior concentrao de hidrognio obtida no biogs: 21,3% e a maior
concentrao de cidos graxos no efluente do reator acidognico.
Palavras-chave: hidrognio, dejeto suno, temperatura, pH.
1. Introduo
Os sistemas de produo de animais tm sofrido grandes transformaes ao longo
do tempo para suprir a crescente demanda por seus produtos. As caractersticas e tendncias dos
sistemas produtivos modernos apontam para um modelo de confinamento em unidades restritas,
com aumento de escala de produo (Kunz, 2005).
Esta situao cria, em muitos casos, grandes problemas ambientais nas regies
produtoras, devido a alta gerao de resduos que na maioria dos casos tem como destino a
simples disposio no solo. Esta prtica faz com que se tenha um excesso de elementos no solo
99
(matria orgnica, slidos, nutrientes e patgenos), tornando difcil a absoro mesma taxa em
que estes elementos so aplicados. Este fato acarreta a lixiviao e/ou percolao destes
elementos para os corpos dgua superficiais e subterrneos, causando a poluio destes
ambientes (Leneman et al. 1993; Sevrin-Reyssac, 1998; Kunz, 2005).
O lanamento indiscriminado das guas residurias da suinocultura pode ocasionar
srios problemas sanitrios, com a ocorrncia de verminoses, alergias, hepatites; e ambientais,
com a morte de peixes e animais, toxicidade em plantas e eutrofizao dos recursos hdricos,
alm da proliferao de insetos e ocorrncia de mau cheiro (Perdomo, et al. 2007).
A poluio nas regies produtoras de sunos alta, pois, enquanto o valor da
demanda bioqumica de oxignio aos 5 dias (DBO5) do esgoto domstico est entre 200 e
500mgO2.L-1, a DBO5 dos dejetos de sunos oscila entre 30.000 e 52.000mgO2.L-1, ou seja, em
torno de 260 vezes superior (Fernandes & Oliveira, 2006).
Antes de se escolher o sistema de tratamento importante voltar as atenes para
dentro do sistema de produo. O manejo e o tratamento do dejeto devem ser vistos como parte
do processo produtivo. Tudo que for feito dentro das instalaes influenciar positiva ou
negativamente a eficincia do sistema de manejo e o tratamento de dejetos (Kunz, 2005).
Os sistemas de tratamento mais utilizados para os efluentes suincolas so
constitudos, essencialmente, por uma etapa inicial de separao da frao slida seguido por
lagoas interligadas em srie. Uma das principais dificuldades para implantao desses sistemas de
tratamento nas condies de campo a disponibilidade de reas para a sua construo, uma vez
que o tempo de residncia necessrio para estes tratamentos encontra-se, na maioria dos casos,
acima de 100 dias, exigindo uma grande capacidade de armazenamento das lagoas e,
conseqentemente, ocupando extensas reas (Higarashi et al., 2004).
Estudos realizados por Belli Filho et al. (2001) avaliaram a aplicao dos reatores
de manta de lodo com fluxo ascendente (UASB) para tratar dejetos de sunos, em comparao s
lagoas anaerbias. Os resultados indicaram que o UASB pode apresentar-se como alternativa s
lagoas anaerbias, uma vez que sua eficincia na remoo de matria orgnica foi semelhante a
das lagoas, porm com tempo de deteno hidrulica (TDH) inferior (36 horas no UASB contra
120 dias nas lagoas).
Os reatores UASB possuem caractersticas operacionais e hidrodinmicas mais
eficiente que as lagoas e boa adaptao s condies climticas do Brasil, para o tratamento de
100
diversos efluentes lquidos. Limitaes do processo anaerbio nos reatores UASB esto
relacionadas hidrlise dos slidos suspensos volteis (SSV) do afluente, considerados
prejudiciais ao desenvolvimento do lodo granular, e que esto presentes em altas concentraes
nas guas residurias da suinocultura (Fernandes & Oliveira, 2006).
Os dejetos sunos direcionados a um biodigestor para serem decompostos reduzem
em at 60% sua carga poluente e obtido o biogs que pode substituir o gs de cozinha no
aquecimento de avirios, entre outras utilidades. Com alto teor nutriente, os resduos slidos do
biodigestor podem ser transformados em fertilizante natural para plantas (Perdomo et al., 2007).
Devido a recente ratificao do protocolo de Kyoto, a biodigesto anaerbia tem
se difundido rapidamente dentro da suinocultura, pela possibilidade dos produtores obterem
algum retorno financeiro pela venda de crditos de carbono. No que diz respeito a frao lquida,
o processo de biodigesto anaerbia apresenta grandes limitaes, principalmente quando se trata
da remoo de nutrientes, sendo necessrio um tratamento complementar (Kunz, 2005).
Para tratar guas residurias com altos teores de SSV vantajoso aplicar o
processo anaerbio em dois estgios, o qual consiste em dois reatores em srie, um para hidrlise
parcial do material orgnico complexo (acidognico) e o outro para digerir os compostos solveis
formados no primeiro reator (metanognico). Esse processo apresenta vantagens como: tempo de
processo reduzido; baixa razo alimento/microrganismo o que favorece a biodegradao, a
floculao biolgica e a sedimentao; permite o tratamento de efluentes a altas taxas; o processo
apresenta melhor desempenho quando comparado com a digesto realizada em um nico reator
devido aos baixos volume e custo dos reatores. Alm disso, apresenta a vantagem de ser
desnecessrio um sedimentador em separado, bem como a recirculao externa de lodo biolgico,
como o caso do reator anaerbio de contato. (Gosh, 1991, 1996; Azbar & Speece, 2001; Han et
al., 2002).
O dejeto suno um excelente resduo para ser utilizado na obteno de hidrognio
por decomposio anaerbia, pois apresenta uma composio mdia de 54% de carboidratos e
21% de protenas. Porm essa composio pode apresentar grandes variaes dependendo do
sistema de manejo adotado e, principalmente, da quantidade de gua e nutrientes excretados pelos
animais. O dejeto lquido dos sunos contm matria orgnica, N, P, K, Ca, Na, Mg, Mn, Fe, Zn,
Cu e outros elementos includos nas dietas dos animais (Diesel et al., 2002).
101
De acordo com Choi (2007), as reaes qumicas envolvidas na converso do

dejeto suno em hidrognio so as seguintes:
Hidrlise do dejeto
C6H13NO5 (dejeto) + H2O + H+ C6H12O6 (glicose) + NH4+
Acetognese
C6H12O6 + 0,1115NH4+ 0,1115C5H7NO2 + 0,744CH3COOH + 0,5CH3CH2COOH +
0,5CH3CH2CH2COOH + 0,454CO2 + 0,446H+
Hidrognese do propionato
CH3CH2COOH + 1,786H2O + 0,0458NH4+ 0,0458C5H7NO2 + 0,924CH3COOH + 2,778H2 +
0,183H+ + 0,0924CO2
Hidrognese do butirato
CH3CH2CH2COOH + 1,84H2O + 0,0545NH4+ 0,0545C5H7NO2 + 1,86CH3COOH + 1,92H2 +
0,2180H+
A biodegradabilidade de resduos animais est principalmente relacionada a
quantidade de carboidratos presentes, os quais so a principal matria prima para a produo de
hidrognio. Cada composto presente no resduo degradado em diferentes condies de pH e
tempo de deteno hidrulico, mostrando que a produo de hidrognio depende do ajuste das
condies de processo (Han & Shin, 2004).
O hidrognio considerado um combustvel limpo, no poluente e inofensivo para
as pessoas e para o meio ambiente quando comparado a outros combustveis, pois durante sua
queima ocorre a produo de gua (Levin et al., 2004).
O hidrognio produz mais energia por unidade de peso do que qualquer outro
combustvel, cerca de trs vezes mais que a gasolina e cerca de sete vezes mais que o carvo,
sendo que cada grama de hidrognio produz 120,7kJ de energia (Busby, 2005).
Neste trabalho foram avaliados o tempo de deteno celular (TDC) adequado
produo de hidrognio e os efeitos do pH e da temperatura da fase acidognica no tratamento do
102
efluente da suinocultura, na concentrao de hidrognio no biogs formado e na produo de

cidos graxos volteis (AGV), utilizando um sistema de dois reatores em srie.
2.1. Efluente
O efluente utilizado foi coletado numa propriedade rural que possua uma criao
de sunos composta por aproximadamente 100 animais, localizada no interior de Porto Alegre, o
mesmo est caracterizado na Tabela 01. Foram utilizadas 6 amostragens para o clculo do valor
mdio e do desvio padro de cada parmetro caracterizado, os quais esto mostrados nos Anexos,
Tabela D.1.
O manejo dos animais consistiu na lavagem das pocilgas sem a ocorrncia de
raspagem preliminar, gerando um efluente com alto teor de matria orgnica. O efluente foi
coletado semanalmente e peneirado utilizando-se uma peneira com malha de 5mm, a fim de
remover slidos mais grosseiros, e posteriormente armazenado sob condies de refrigerao na
temperatura de 4C.
Tabela 01 Caractersticas do efluente coletado na propriedade rural.
Parmetro
Valor mdio
Desvio padro
3.047,0
526,9
Amnia (mgNH4-N.L-1)
727,7
77,8
Nitrognio total Kjedahl (mgN.L-1)
1.673,8
340,9
Slidos totais (mg.L-1)
23.868,5
1.425,2
Slidos volteis totais (mg.L-1)
17.652,8
1.990,4
DQO total (mgO2.L-1)
50.838,2
10.268,1
pH
6,5
0,5
2.2. Sistema operacional utilizado

O sistema, operado em batelada, foi constitudo de um tanque para armazenamento
do efluente lquido; um reator anaerbio acidognico com capacidade para 23L e um reator
anaerbio metanognico com capacidade para 46L, ambos em acrlico. A mistura foi promovida
por um agitador mecnico instalado na parte superior dos reatores. O sistema est mostrado na
Figura 01.
103
R1
R2
1
Figura 01 Sistema utilizado no tratamento do efluente da suinocultura. 1 tanque de

alimentao, R1 reator acidognico e R2 - reator metanognico.
2.3. Operao do reator acidognico

Para a autoinoculao e enriquecimento de 1,5L de lodo acidognico no reator,
foram utilizados 18L de efluente, com tempo de reao de 24 horas. A temperatura do efluente
foi mantida em 35C 2C durante todo o perodo do teste e o pH do efluente foi ajustado para
5,0 0,2, por meio da adio de HCl ou NaOH 1mol.L-1. Este procedimento foi repetido por um
perodo de 45 dias.
O tempo de reao utilizado foi baixo, pois a fermentao dos acares simples e
aminocidos em cidos actico, priopinico e butrico e hidrognio completa-se em 24 horas
(Grady Jr. et al., 1999).
Os tempos de deteno celular (TDC) testados no reator acidognico foram de 2,5;
1,7 e 1,4 dias, correspondendo ao descarte de 2; 3 e 3,5L de lodo acidognico, sendo o limite
superior estabelecido em funo da necessidade de controle do desenvolvimento das bactrias
Methanosarcina, que ocorre a partir do terceiro dia (Grady Jr. et al., 1999). Durante os testes de
controle do TDC manteve-se o reator a 35C 2C (Gavala et. al., 2006) e o pH do efluente na
entrada foi ajustado para 5,0 0,2 (Van Ginkel & Sung, 2001).
Aps o controle do TDC a operao do reator acidognico foi realizada de acordo
com o seguinte procedimento:
1 Preparo de 18 litros de afluente, composto por 80% de dejeto suno e 20% de gua;
104
2 Ajuste do valor do pH do afluente para 5,0 ou 6,0 por meio da adio de NaOH (1mol.L-1) ou
HCl (1mol.L-1);
3 Bombeamento do afluente para dentro do reator acidognico;
4 Aps 23 horas, a agitao foi desligada e o efluente foi deixado em processo de sedimentao
por 1 hora;
5 Transferncia de 14,5L de efluente do reator acidognico para o reator metanognico;
6 Retirada, sob agitao, de 3,5L de lodo acidognico;
7 Insero de nova batelada de afluente no reator acidognico.
Foram testadas, no reator acidognico, as temperaturas: ambiente (de 15C a 25C),
35C e 55C. Estudos realizados por Souza (2005) mostraram forte influncia da temperatura
sobre o tempo gasto para atingir o nvel mximo de produo de biogs utilizando efluente suno.
2.4. Operao do reator metanognico

O lodo utilizado para finalizar o processo de digesto iniciado no reator
acidognico foi proveniente de uma indstria de processamento de gelatina.
A inoculao se deu com o reator vazio para onde transferiu-se 5 L de lodo e 25 L
de efluente com diluio de 50%, os quais ficaram em agitao por 23 horas. Passado esse tempo
o efluente permaneceu em repouso por uma hora e o sobrenadante foi descartado antes de receber
a prxima carga de efluente. Esse procedimento foi repetido durante 30 dias. Para finalizar a
adaptao do lodo, nos 15 dias subseqentes o reator recebeu o efluente oriundo do reator
acidognico.
A operao do reator metanognico durante o teste consistiu na retirada diria de
14,5L de efluente, aps 1 hora de sedimentao, e adio de 14,5L de afluente oriundo do reator
acidognico. O tempo de reao utilizado foi de 48 horas, a temperatura do reator metanognico
foi mantida em 35C 2C e o valor do pH do afluente no foi ajustado. O parmetro idade do
lodo no foi controlado durante o teste, uma vez que o foco principal do estudo estava na
operao do reator acidognico.
2.5. Procedimentos analticos

Nos testes de produo de hidrognio utilizando efluente da suinocultura foram
analisados os parmetros descritos na Tabela 02, sendo o efluente analisado na entrada e na sada
105
dos reatores anaerbios, alm da anlise da composio do biogs em cada uma das etapas do
processo e a formao dos cidos graxos actico, propinico e butrico.
Tabela 02 Parmetros fsicos e qumicos analisados e suas respectivas metodologias.
Parmetro
Mtodo
Referncia
Alcalinidade
Potenciomtrico
Standard Methods (2005)
pH
Potenciomtrico
Slidos totais (ST)
Gravimtrico
Slidos volteis totais (SVT)
Gravimtrico
Demanda Qumica de Oxignio (DQO)
Titulomtrico
cidos graxos volteis (AGV)
Cromatogrfico
O sistema foi operado durante 7 meses, incluindo a partida dos reatores e a

aclimatao entre as etapas. Foram realizadas 8 repeties de cada ensaio, aps a estabilizao
das condies operacionais.
injetada foi de 1mL, conforme metodologia adaptada de Morimoto et al. (2004).
3.1. Controle do TDC no reator acidognico
Durante o controle do TDC ideal para o processo de produo de hidrognio foram
analisados: alcalinidade, DQO total, teor de slidos e concentrao dos gases gerados. Nas
tabelas e figuras a seguir esto os resultados obtidos nas anlises do efluente inicial e nas sadas
dos reatores acidognico e metanognico em cada um dos TDC estudados. Foram realizadas 4
repeties para cada condio estudada.
A Tabela 03 apresenta os dados de alcalinidade medida em cada ponto do sistema.
Os valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro amostral esto contidos nos
Anexos, Tabelas D.2 e D.3.
106
Tabela 03 Alcalinidade mdia das amostras dos reatores em cada TDC estudados.
TDC
(dias)
Afluente
Efluente acidognico
Efluente metanognico
2,5
2.305,5
1.316,2
3.070,3
1,7
2.548,5
1.883,9
3.280,2
1,4
2.218,8
1.434,1
2.260,7
n=4
Verifica-se uma reduo na alcalinidade do efluente que sai do reator acidognico,
em relao ao efluente inicial, variando de 26% para 1,7 dias de TDC a 43% para o TDC de 2,5
dias, indicando que houve consumo da alcalinidade devido a produo de cidos.
Na Tabela 04 esto os valores mdios de DQO medidos em cada estgio do
sistema e a eficincia global de remoo, obtida aps a sada do efluente do reator metanognico.
Os valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro amostral esto mostrados nos
Anexos, Tabelas D.4 e D.5.
Tabela 04 Valores mdios de DQO total obtidos em cada etapa para os TDC estudados e
eficincia global de remoo.
Efluente
Efluente
acidognico
metanognico
38.210,5
18.235,8
TDC
(dias)
Afluente
2,5
52.736,8
1,7
46.736,8
33.789,5
22.736,8
51
1,4
36.766,6
28.891,1
11.688,4
68
Eficincia global
de remoo (%)
65
n=4
Foi observado um decrscimo de mais de 20% na concentrao da matria
orgnica na sada do reator acidognico em todos os TDC estudados. A remoo global da DQO
total, que corresponde a passagem do efluente pelos dois reatores, foi maior para o TDC de 1,4
dia (68%) indicando que nesta condio o reator acidognico maximizou a hidrlise dos
compostos presentes no efluente, facilitando a sua degradao no reator metanognico, o qual
para essa condio removeu 59% da DQO total do efluente proveniente do reator acidognico.
107
Para o tratamento de efluentes complexos, como o efluente da suinocultura, so

necessrios TDC mais elevados a fim de hidrolisar os compostos com velocidade de degradao
lenta e, assim, aumentar a eficincia do processo de remoo de matria orgnica.
Na Tabela 05 esto mostrados os dados de ST e SVT em cada estgio do sistema
nos TDCs estudados. Os valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro amostral
esto contidos nos Anexos, Tabelas D.6, D.7, D.8 e D.9.
Tabela 05 Concentrao de ST e SVT em cada estgio do sistema para os TDC estudados.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Concentrao (mg.L-1)
Efluente
Efluente
acidognico
metanognico
24.150,0
12.017,0
Slidos
Afluente
ST
27.576,0
SVT
21.709
18.477,0
7.990,0
ST
24.223,0
19.143,0
11.735,0
SVT
18.597
13.562,0
6.636,0
ST
22.450,0
18.674,0
9.273,0
SVT
17.201,0
15.158,0
5.599,0
n=4
Na Tabela 06 esto os percentuais de ST e SVT removidos do sistema para os
TDCs estudados.
Tabela 06 - Percentuais de ST e SVT removidos do sistema em cada TDC estudado.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
ST
Reator
acidognico
12
Remoo (%)
Reator
metanognico
50
SVT
15
57
63
ST
21
39
52
SVT
27
51
64
ST
17
11
50
SVT
12
63
67
Slidos
Global
56
108
A remoo global de SVT variou entre 63 e 67% para os TDC estudados Foi
observado o decrscimo na eficincia do reator metanognico na remoo de SVT do efluente
oriundo do reator acidognico para o TDC de 1,7 dia, enquanto que para os TDCs de 1,4 e 2,5
dias as eficincias de remoo foram maiores que 57%.
Na Figura 02 est a composio mdia do biogs formado no reator acidognico
em cada TDC estudados. Os valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro
amostral esto mostrados nos Anexos, Tabelas D.10 e D.11. Foram analisadas 4 amostras em
cada condio estudada.
Composio do biogs (%)
15
2,5 d
12,5
1,7 d
12
1,4 d
8,5
9
6
4,6
3,6
2,2
2,9
0
H2
CH4
Figura 02 Composio mdia do biogs do reator acidognico para cada TDC testado.
A maior concentrao de hidrognio e a menor concentrao de metano foram
obtidas quando o TDC foi de 1,4 dia, indicando que a ao dos microrganismos metanognicos
foi parcialmente inibida. De acordo com Hawkes et al. (2002), os altos tempos de deteno
celular no processo de produo de hidrognio facilitam o crescimento de microrganismos que
competem com as bactrias acidognicas pela utilizao do substrato e que so consumidoras de
hidrognio, como as bactrias metanognicas. Os estudos realizados por Khanal et al. (2004)
mostraram que a fase metanognica pode ser inibida atravs de baixos TDC.
A concentrao mdia de metano no biogs formado no reator metanognico para
cada TDC testado no reator acidognico foi menor quando o TDC no reator acidognico foi mais
baixo, conforme mostrado na Figura 03.
109
Os valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro amostral esto nos
Anexos, Tabelas D.10 e D.11. Foram analisadas 4 amostras em cada condio estudada.
100
Metano (%)
75
58,6
60,6
44,2
50
25
0
2,5
1,7
1,4
TDC (dias)
Figura 03 - Concentrao mdia de metano no biogs formado no reator metanognico para cada
TDC testado no reator acidognico.
A queda na concentrao mdia de metano produzido no reator metanognico
pode ter ocorrido devido a entrada de efluente com alto teor de compostos orgnicos insolveis,
uma vez que o processo de hidrlise no reator acidognico no ocorreu de maneira adequada
devido ao baixo TDC, o que dificultou sua utilizao pelos microrganismos metanognicos
(Borja et al., 2005).
Yilmaz & Demirer (2008) estudaram o efeito do TDC na acidificao de reatores
anaerbios que utilizaram dejeto bovino como efluente e observaram uma queda significativa no
pH do efluente e maior acidificao quando o TDC foi de 2 dias.
Com base nos resultados obtidos verificou-se que, nas condies estudadas, o
menor TDC (1,4 dia) favoreceu a produo de hidrognio no reator acidognico, porm
prejudicou a remoo global de DQO e de SVT do efluente, alm de diminuir a concentrao de
metano no biogs produzido no reator metanognico.
Entretanto, a utilizao de TDC elevados propiciou o desenvolvimento de
microrganismos consumidores de hidrognio e microrganismos metanognicos, os quais so os
responsveis pela transformao do hidrognio em metano.
110
Uma vez que o objetivo deste trabalho foi a obteno de hidrognio a partir da
degradao anaerbia do efluente da suinocultura, optou-se por utilizar o TDC menor, 1,4 dia,
mesmo com a perda da eficincia global do tratamento. Com o TDC controlado, estudou-se a
influncia do pH e da temperatura na formao do hidrognio.
3.2. Influncia do pH e da temperatura na formao do hidrognio

Utilizando o TDC determinado no item anterior verificou-se a influncia exercida
pelo pH e pela temperatura na produo de hidrognio. Foram realizadas 8 repeties em cada
condio estudada e em cada uma delas foram analisados: alcalinidade, DQO, teor de slidos,
concentrao dos gases gerados e concentrao de AGV.
Os valores mdios de alcalinidade em cada ponto do sistema para os valores de pH
e as temperaturas estudadas esto na Tabela 07. Os valores utilizados para o clculo da mdia e o
desvio padro amostral esto mostrados nos Anexos, Tabelas D.12 e D.13.
Quando o pH inicial do afluente foi ajustado para 6,0 observou-se a reduo da
alcalinidade de, no mximo, 24% no efluente oriundo do reator acidognico, em relao ao
afluente.
No valor de pH igual a 5,0 foi constatada reduo da alcalinidade entre 43 e 59%
quando a temperatura do reator permaneceu em 55C indicando que a condio termoflica
favoreceu a ao dos microrganismos acidognicos produtores de cidos, que so menos afetados
pelas altas temperaturas que os microrganismos metanognicos.
Tabela 07- Variao da alcalinidade nos valores de pH e temperaturas estudadas.
pH
5,0
6,0
1
T (C)1
Efluente acidognico Efluente metanognico
1.244,5
2.000,2
Ambiente
Afluente
2.826,3
35
2.213,4
1.258,8
2.532,2
55
3.911,0
1.590,8
2.814,9
Ambiente
3.785,8
3.972,7
4.150,1
35
3.137,7
2.955,4
3.374,8
55
4.664,0
3.544,5
4.386,8
Temperatura de operao do reator acidognico e do afluente do reator metanognico.n = 8
111
O ajuste do pH e a temperatura provocaram alteraes no consumo de DQO total

em cada estgio do processo. A Tabela 08 mostra as concentraes de matria orgnica inicial e
na sada de cada estgio para cada valor de pH e temperaturas estudadas. Os valores utilizados
para o clculo da mdia e o desvio padro amostral esto contidos nos Anexos, Tabelas D.14 e
D.15.
Tabela 08 - Variao da DQO total nos valores de pH e temperaturas estudadas.
pH
5,0
6,0
1
T (C)
Afluente
Efluente acidognico
Ambiente
50.958,2
36.291,7
28.852,5
35
45.470,8
33.762,5
20.206,9
55
48.195,9
41.613,4
24.519,3
Ambiente
47.829,3
40.134,2
24.413,8
35
53.523,6
40.595,7
29.407,1
55
51.510,6
41.260,7
26.896,5
Temperatura de operao do reator acidognico e do afluente do reator metanognico. n= 8.

Na Tabela 09 esto os percentuais de remoo de DQO total em cada estgio do
processo e a remoo global.

Tabela 09 Percentuais de DQO total removidos em cada estgio e remoo global.
pH
5,0
6,0
1
Remoo de DQO total (%)
T (C)1
Reator acidognico
Reator metanognico
Global
Ambiente
28,8
20,5
43,4
35
25,7
40,1
55,6
55
13,7
41,2
49,2
Ambiente
16,1
39,2
48,9
35
24,1
27,6
45,0
55
19,9
34,8
47,8
Temperatura de operao do reator acidognico e do afluente do reator metanognico.
n = 8.
112
O menor percentual de remoo de DQO total observado na etapa acidognica,

para todos os valores de pH e temperaturas testadas, ocorreu quando o valor do pH do efluente
foi ajustado para 5,0 e a temperatura do reator foi mantida em 55C, isso ocorreu uma vez que a
alta temperatura diminuiu a taxa de utilizao do substrato pelos microrganismos que estavam em
processo de aclimatao a fase termoflica. Estudos realizados por Speece (1996) relataram que o
perodo de adaptao do lodo s condies termoflicas pode levar at um ano para ocorrer.
No comparativo realizado entre os valores de pH testados, a maior remoo de
DQO total na etapa acidognica ocorreu para o afluente que teve o valor do pH foi ajustado para
5,0 e o reator foi mantido a temperatura ambiente. Com base nesses resultados, verificou-se que
as temperaturas testadas influenciaram a remoo de DQO total para um mesmo valor de pH.
A maior remoo global de DQO total, 55,6%, ocorreu quando o pH do afluente
foi ajustado para 5,0 e quando a temperatura do reator acidognico ficou em 35 C.
O ajuste do pH e a temperatura tambm afetaram a frao de slidos orgnicos que
foi metabolizada no processo de digesto anaerbia. Na Tabela 10 esto relatados os dados
mdios de ST e SVT em cada estgio do sistema nos valores de pH e temperaturas estudadas. Os
valores utilizados para o clculo da mdia e o desvio padro amostral esto mostrados nos
Anexos, Tabelas D.16, D.17, D.18 e D.19.
Tabela 10 - Variao do teor de slidos nos valores de pH e temperaturas estudadas.
Concentrao (mg.L-1)
pH
T (C)
Slidos
Afluente
Efluente
Efluente
acidognico
metanognico
ST
22.779,5
22.662,5
21.169,5
Ambiente
17.272,5
16.925,0
15.457,0
SVT
ST
22.740,5
19.313,0
18.397,1
5,0
35
SVT
17.766,0
14.401,0
12.210,5
ST
22.285,7
18.859,4
11.740,6
55
SVT
17.298,9
14.282,9
7.950,3
ST
25.703,5
24.041,5
13.991,0
Ambiente
SVT
19.935,0
18.153,5
9.475,0
ST
24.571,5
22.881,1
17.847,0
6,0
35
SVT
19.058,5
16.986,0
12.253,0
ST
20.745,5
19.266,5
11.974,0
55
SVT
15.042,0
13.977,0
7.692,5
1
Temperatura de operao do reator acidognico e do afluente do reator metanognico. n = 8.
1
113
Os percentuais mdios de remoo de ST e SVT em cada estgio e remoo global

esto na Tabela 11.
Tabela 11 Percentuais mdios de remoo de ST e SVT em cada estgio e remoo global para
as condies estudadas.
pH
T (C)1
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
ST
Reator
acidognico
0,5
Remoo (%)
Reator
metanognico
6,6
SVT
2,0
8,7
10,5
ST
15,1
4,7
19,1
SVT
18,9
15,2
31,3
ST
15,4
37,7
47,3
SVT
17,4
44,3
54,0
ST
6,5
41,8
45,6
SVT
8,9
47,8
52,5
ST
6,9
21,8
27,4
SVT
10,9
27,9
35,7
ST
7,1
37,8
42,3
SVT
7,0
44,9
48,8
Slidos
Global
7,1
Temperatura de operao do reator acidognico e do afluente do reator metanognico.n = 8.

Quando o pH do afluente foi ajustado para 5,0 e a temperatura do reator
acidognico foi mantida em 55C observou-se que a remoo global de SVT foi maior dentre
todas as condies testadas, 54%. A temperatura termoflica do reator acidognico favoreceu a
hidrlise dos compostos orgnicos complexos presentes no efluente, facilitando sua utilizao
pelos microrganismos metanognicos, por ocasio da sua transferncia para o reator
metanognico.
A Figura 04 apresenta as porcentagens mdias de hidrognio formado no reator
acidognico nos valores de pH e temperaturas estudados.
114
28
15 - 25C
35C
55C
Hidrognio (%)
21,3
21
18,3
14,3
14
8,2
7,9
7
5,9
0
5,0
6,0
pH
Figura 04 - Porcentagem mdia de hidrognio formado no reator acidognico nos valores de pH e

temperaturas estudados. Para n = 8.
A porcentagem mdia de hidrognio foi mais alta quando o pH foi ajustado para
5,0 e na temperatura de 35C, sendo possvel verificar que nessa condio h a predominncia da
fermentao cida, e conseqente produo de hidrognio. De acordo com van Haandel (1994), o
pH abaixo de 6,0 promove a fermentao cida e a hidrlise do material orgnico particulado e a
temperatura na faixa dos 35C mantm as condies ideais para a taxa mxima de digesto
anaerbia.
Na temperatura de 55C e com o valor do pH do afluente ajustado para 5,0
observou-se que a porcentagem mdia de hidrognio no biogs foi de 8,2 0,4%, enquanto que
para o mesmo valor de pH e temperatura de 35 C a porcentagem mdia foi de 21,3 1,6%.
Estudos realizados por Hernandez & Rodriguez (2007) utilizando dejeto suno e
testando diferentes valores de pH mostraram que quando o pH do afluente foi mantido em 5,0 o
percentual de hidrognio foi de 10% na fase gasosa; enquanto que para o pH 6,0 a porcentagem
de hidrognio no biogs produzido foi de 31%.
Trabalhos realizados por van Ginkel et al. (2001) e Fang & Liu (2002)
relacionados a produo de hidrognio em funo do pH, utilizando glicose como substrato,
mostraram que a produo mais alta de hidrognio ocorreu no valor de pH igual a 5,5. Entretanto,
experimentos realizados por Oh et al. (2003) e Wu & Lin (2004) concluram que o pH timo para
a produo de hidrognio a partir da digesto de melao estava na faixa entre 6,0 e 7,0.
115
O valor de pH ideal para a produo de hidrognio, utilizando culturas mistas,

varia amplamente, devido a natureza do efluente e a presena de populaes bacterianas
complexas. O controle do pH pode afetar significativamente a produo de hidrognio, valores
muito baixos, menores de 4,0, ou muito elevados, maiores de 7,0, provocam a inibio da
atividade global da enzima hidrogenase responsvel pela produo do hidrognio (Tang et al.,
2008).
Estudos realizados por Tang et al. (2008) utilizando efluentes bovinos mostraram
que a produo de hidrognio foi maior quando o pH do efluente foi mantido em 5,5 e na faixa de
temperatura entre 30 e 45C decrescendo nas temperaturas acima de 45C.
Na Figura 05 esto as porcentagens de metano obtidas no reator acidognico nos
valores de pH e temperaturas estudadas.
Metano (%)
15
15 - 25C
35C
55C
11,1
10
7,1
5
2,9
3,1
1,9
1,6
0
5,0
pH
6,0
Figura 05 - Porcentagem mdia de metano obtida no reator acidognico nos valores de pH e nas
temperaturas estudadas.
A porcentagem mdia de metano no reator acidognico foi maior quando as
condies operacionais aproximaram-se das condies ideais para a metanognese, ou seja,
temperatura de 35C e pH igual a 6,0. Porm, quando a temperatura do reator foi mantida em
55C verificou-se o decrscimo na concentrao de metano no biogs, indicando que a
temperatura provocou um efeito adverso na atividade dos microrganismos metanognicos. Esse
processo foi observado mais claramente quando o valor do pH do afluente foi ajustado para 6,0.
Para o pH 5,0 observou-se a inibio da atividade dos microrganismos
metanognicos provavelmente devido a predominncia da fermentao cida no sistema.
116
A Figura 06 apresenta as porcentagens de metano formados no reator

metanognico nos valores de pH e nas temperaturas do afluente.
80
15 - 25C
35C
Metano (%)
60
55 C
52,2
54,7
54,3
56,7
43,4
40
37,9
20
0
5,0
6,0
pH do afluente do reator acidognico
Figura 06 - Porcentagens mdias de metano formado no reator metanognico nos valores de pH e

temperaturas do afluente.
Ocorreu um decrscimo na porcentagem de metano no biogs produzido no reator
metanognico quando o pH do efluente do reator acidognico foi ajustado para 5,0. Este
decrscimo ocorreu uma vez que o efluente inserido no reator metanognico tinha o valor do pH
prximo a 5,3, valor abaixo da faixa de pH considerada tima para os microrganismos produtores
de metano (entre 6,0 e 8,0) o que provocou o consumo de uma parte da alcalinidade do reator
metanognico e conseqente demora na estabilizao o pH para a faixa ideal.
Quando o valor do pH do afluente do reator acidognico foi ajustado para 6,0 a
porcentagem de metano no biogs do reator metanognico foi maior e manteve-se em torno se
55%, independente da temperatura de entrada do efluente, pois o valor do pH do afluente do
reator metanognico foi de 6,2 no sendo necessrio um perodo para a estabilizao do reator
antes de ocorrer a digesto.
Os resultados obtidos nas anlises de alcalinidade, DQO, ST e SVT e percentagem
de hidrognio e metano no biogs produzido pelos dois reatores, mostraram que o ajuste do pH
do efluente de entrada do reator acidognico influenciou o funcionamento de ambos os reatores.
117
Yu-Qing & Fang (2003) estudaram o efeito da temperatura e do valor do pH sobre

a acidognese, tratando efluente com alto teor de protena e os resultados mostraram que o pH
apresentou um efeito mais significativo na degradao das protenas do que a temperatura. O
trabalho indicou que o controle do pH mais importante do que o controle da temperatura na
acidognese, uma vez que o reator operado em pH prximo a 5,0 favoreceu a produo de
propionato e hidrognio, enquanto que a operao realizada com pH entre 6,0 e 7,0 favoreceu a
produo de acetato, butirato e iso-butirato.
As concentraes dos AGV determinadas no afluente e no efluente de sada do
reator acidognico para cada condio estudada esto na Tabela 12.
Na condio onde foi observada a maior concentrao de hidrognio no biogs
(pH = 5,0 e T = 35C), o afluente apresentou concentraes de AGV menores que nas demais
condies estudadas, indicando que a concentrao inicial desses compostos influenciou na
produo de hidrognio. Estudo realizado por Wang et al. (2009), confirmou essa influncia, pois
o autor observou queda na produo de hidrognio com o aumento da concentrao inicial de
AGV.
Alm disso, nesta mesma condio ocorreu o aumento na concentrao de AGV
na sada do reator acidognico indicando a hidrlise das substncias complexas e, por
consequncia, maior produo de hidrognio.
Na condio onde foi constatada a maior concentrao de metano no biogs do
reator acidognico (pH = 6,0 e T = 35C), verificou-se um decrscimo na concentrao de cido
actico no efluente de sada do reator acidognico, indicando a possvel utilizao desse cido
para a formao do metano.
Conforme estudos realizados por Chin et al., (2003) o crescimento dos
microrganismos produtores de hidrognio e o potencial de produo de hidrognio decrescem
com o aumento da concentrao dos cidos actico, propinico e butrico. De acordo com Wang
et al., (2008), esse decrscimo ocorre porque uma parte dos AGV no dissociados permeiam a
membrana celular dos microrganismos produtores de hidrognio, afetando sua fisiologia e
podendo causar a ruptura da membrana celular.
118
Tabela 12 Concentraes dos AGV na entrada e na sada do reator acidognico em cada

condio estudada.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Afluente
Concentrao (mg.L-1)
Ac.
Ac.
Ac.
actico
propinico
butrico
4.186,4
1.487,6
1.065,7
Efluente
4.100,2
1.089,2
752,0
Afluente
1.744,9
880,6
505,5
Efluente
2.471,7
1.479,0
388,2
Afluente
6.673,7
2.288,3
1.438,0
Efluente
8.730,9
2.651,0
1.853,6
Afluente
8.149,2
4.101,9
3.753,3
Efluente
9.027,8
4.956,2
5.469,4
Afluente
6.160,5
2.115,5
1.500,2
Efluente
4.901,4
2.179,2
2.688,9
Afluente
8.710,1
3.767,7
3.366,6
Efluente
9.623,9
3.855,4
3.922,9
Amostra
4. Concluses
As condies mais favorveis para a operao do sistema anaerbio em dois
estgios, aplicado ao tratamento de efluentes da suinocultura, visando a remoo de matria
orgnica, a produo de hidrognio e a produo de AGV, foram observadas quando o TDC foi
de 1,43 dias, o valor do pH inicial do afluente foi de 5,0 e a temperatura do reator acidognico foi
mantida a 35C.
A mxima porcentagem de hidrognio no biogs produzido no reator acidognico
(21,3%) indicou que a configurao de reatores proposta neste trabalho, reator acidognico
seguido por reator metanognico, possui performance satisfatria para a gerao de energia e
para o tratamento de efluentes da suinocultura.
A concentrao de matria orgnica removida, na forma de DQO total,
apresentou-se na faixa de 45 a 55%, sendo considerada aceitvel uma vez que o afluente possua
alta concentrao de slidos suspensos que poderiam influenciar no processo.
119
O aumento da temperatura do reator acidognico para 55C provocou um aumento

na produo de metano quando o pH do afluente foi ajustado para 5,0. Este comportamento pode
ser um indicativo que os microrganismos produtores de hidrognio necessitavam de um perodo
para aclimatao a nova condio imposta.
O pH foi o parmetro operacional mais importante na produo de hidrognio.
Neste trabalho, o ajuste do pH do afluente para 5,0 resultou numa alta produo de hidrognio e
provocou um efeito adverso na produo de metano. O pH do afluente ajustado para 6,0
proporcionou condies operacionais favorveis para a atividade dos microrganismos
metanognicos.
O reator metanognico produziu biogs com maior concentrao de metano
quando o valor do pH do afluente estava prximo a 6,0.
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8. Discusso Geral
Os testes laboratoriais aplicados para a avaliao da capacidade da produo de
hidrognio, de lodos anaerbios e de substratos orgnicos, permitiram verificar claramente a
influncia do valor do pH inicial, da concentrao de matria orgnica e da concentrao de lodo
sobre os resultados da medida da AHE, do volume de hidrognio e da composio de AGV
produzidos e do grau de acidificao de cada digestor.
A glicose foi escolhida como substrato orgnico para padronizao dos testes por
ser facilmente biodegradvel, pelo conhecimento das reaes que envolvem a formao do
hidrognio e por ser o substrato orgnico mais utilizado nas pesquisas de produo de hidrognio.
O ajuste do pH inicial apresentou grande influncia na atividade dos
microrganismos. Dentre os valores de pH testados os que apresentaram melhor desempenho para
fins de medida da atividade hidrognica e para a produo de hidrognio foram, respectivamente,
6,0 e 5,5. Nos valores de pH de 5,0 e 6,5 foram observadas baixa atividade hidrognica e baixa
produo de hidrognio. Wang & Wan (2009) afirmaram que o comportamento dos
microrganismos produtores de hidrognio frente as variaes de pH segue o modelo cintico de
Andrew, o qual determina que com o aumento no valor do pH, acima de um valor timo
determinado experimentalmente, decresce a produo de hidrognio a valores prximos a zero.
O valor do pH inicial influenciou nos AGV formados durante o processo de
fermentao da glicose. Nos valores de pH 5,0; 5,5 e 6,0 ocorreu a formao preferencial de
cido butrico, enquanto que para o valor de pH igual a 6,5 o cido actico foi predominante,
corroborando estudos realizados por Rodriguez et al.(1998); que afirmam que a formao de
cido actico ocorre em valores neutros de pH, enquanto que o cido butrico formado quando o
valor do pH do reator menor que 6,0; e por Horiuchi et al., (2002), os quais verificaram que o
aumento do valor do pH para valores acima de 6,0 em reatores acidognicos, provocou o
aumento na concentrao de cido actico, em detrimento da produo de cido butrico.
Nos testes em que o valor do pH foi ajustado para 6,5, nos quais foram observadas
concentraes de cido actico acima de 3.000 mg.L-1 (50 mmol.L-1) no efluente final, obteve-se
baixos volumes de hidrognio. Esse resultado apresentou-se semelhante ao obtido por Wang et al.
(2008) em testes que verificaram a influencia dos AGV na produo de hidrognio, utilizando
glicose como substrato. No referido trabalho, os autores constataram que o cido actico em
125
concentraes que variaram de 50 a 200 mmol.L-1 (3.000 a 12.000 mg.L-1) reduziram em mais de
90 % o volume de hidrognio produzido.
Os valores dos graus de acidificao tambm foram influenciados pelo ajuste do
pH inicial. Os testes com valores de pH de 6,0 e 6,5 resultaram em maior grau de acidificao,
uma vez que essas condies foram mais favorveis produo de cidos do que produo de
hidrognio.
Os testes realizados utilizando os fermentadores permitiram verificar a influncia
do controle do valor do pH sobre o processo de fermentao da glicose. O controle do valor do
pH fez com que nas primeiras 8 horas de teste o percentual de hidrognio no biogs ficasse entre
50 e 92% menor em relao ao teste realizado sem controle de pH, no mesmo perodo. A
produo de AGV tambm foi prejudicada pelo controle do pH, sendo essa diferena observada
mais claramente quando o valor de pH testado foi de 5,0. Nesta condio, os AGV produzidos no
fermentador com controle de pH apresentaram concentraes entre 50 e 66 % menores que as
obtidas no fermentador sem controle de pH. Alm do percentual de hidrognio e dos AGV, a
remoo de DQO tambm foi prejudicada pelo controle no valor do pH, apresentando decrscimo
entre 35 e 50% em comparao com o processo fermentativo sem controle de pH. Cokgor et al.
(2009) verificaram decrscimo na eficincia do processo fermentativo e aumento no tempo de
partida do processo quando o valor do pH foi controlado durante todo o perodo dos testes.
A partir da variao na DQO foi possvel verificar em quais concentraes a
matria orgnica apresentou-se como fator limitante e em quais concentraes apresentou-se
como fator inibidor do processo acidognico.
Outro fator que denota limitao provocada pelas baixas DQO foi a produo de
cido actico em altas porcentagens, o qual inibe a atividade dos microrganismos produtores de
hidrognio. Mosey (1983) verificou que a limitao da quantidade de matria orgnica disponvel
fez com que microrganismos acidognicos produzissem altas quantidades de cido actico, uma
vez que nesse processo h maior rendimento energtico para o crescimento e multiplicao
celular.
Em concentraes acima de 12.000mgO2.L-1, a DQO atuou como inibidora da
atividade dos microrganismos, prejudicando o volume de hidrognio produzido e direcionando o
metabolismo microbiano para a formao de cido butrico. Mosey (1983), relatou que
sobrecargas orgnicas provocam alteraes no metabolismo dos microrganismos acidognicos os
126
quais produzem cido butrico em maior concentrao. van Ginkel et al. (2001), props que altas
concentraes de matria orgnica diminuem a converso da mesma em hidrognio devido
queda brusca no valor do pH do meio e produo de cidos em quantidades elevadas.
O decrscimo nos valores do grau de acidificao foi observado quando a DQO
inicial nos digestores foi superior a 12.000mgO2.L-1. De acordo com Yu & Fang (2001), isso
ocorre devido a mudana na rota metablica dos microrganismos, que em altas DQO passam a
produzir lcoois ao invs de AGV e hidrognio.
O excesso de matria orgnica adicionada nos digestores causou saturao no
meio, prejudicando a converso do substrato orgnico pelos microrganismos. Esse efeito adverso
pode ser observado nas concentraes de substrato acima de 8.000mgO2.L-1 onde ocorreu a
estabilizao do valor do pH final, independente do acrscimo nas DQO.
A concentrao inicial de biomassa empregada para avaliao da AHE, estimada
pelo parmetro SVT, influenciou a atividade hidrognica, o volume de hidrognio produzido, a
produo de AGV e o valor do grau de acidificao.
Os testes realizados com concentrao de SVT de 1.250mg.L-1 apresentaram
resultados de atividade, produo de hidrognio e produo de AGV abaixo dos valores
encontrados quando a concentrao de SVT testada foi de 2.500mg.L-1, indicando limitao
provocada pela pouca quantidade de microrganismos nos digestores.
Para concentraes de SVT acima de 2.500mg.L-1 foi observada reduo na
atividade hidrognica. Conforme estudos realizados por Monteggia (1997) e Tsygankov (2007), o
uso de quantidade excessiva de lodo pode causar decrscimo na atividade mxima, devido a
limitaes na transferncia de massa do substrato para os microrganismos. Alm disso, o fato dos
microrganismos fermentativos possurem elevada velocidade de multiplicao ( = 2,0d-1)
provoca um aumento na concentrao de SVT presentes no digestor num curto perodo de tempo,
aumentando essa limitao.
Os AGV formados durante a fermentao da glicose tambm foram influenciados
pela concentrao de SVT inseridas nos digestores. Para a concentrao de 7.500mgSVT.L-1 o
cido predominante nas amostras foi o cido actico, uma vez que a pouca matria orgnica
disponvel, aliada ao excesso de microrganismos acidognicos nos digestores e sua elevada taxa
de multiplicao direcionou a rota metablica de produo dos AGV para a produo desse cido.
Nas demais concentraes de SVT o cido butrico foi o AGV produzido em maior quantidade.
127
Foi verificado o aumento gradual no percentual de cido propinico em funo do

aumento da concentrao de SVT sendo o percentual mximo de 20% na concentrao de
7.500mgSVT.L-1.
O grau de acidificao apresentou acrscimo com o aumento na concentrao de
SVT, chegando ao valor mximo na concentrao de SVT de 5.000mg.L-1.
A autoclavagem do lodo granular eliminou os microrganismos metanognicos que
poderiam interferir na produo de hidrognio e na medida da atividade do lodo, porm o
aquecimento pode ter provocado lise da membrana celular que envolvia os grnulos, liberando o
material celular e dificultando a sedimentabilidade, a medida da DQO do efluente e a medida da
concentrao de slidos ao final do teste, desse modo, no foi possvel efetuar as anlises de
consumo de matria orgnica e de crescimento microbiano em cada condio estudada. A matria
orgnica liberada do interior das clulas microbianas pode ter, tambm, provocado interferncia
na anlise de AGV e no clculo do valor do grau de acidificao dos digestores, pois, em alguns
casos, a concentrao de AGV apresentou-se mais alta que a concentrao de matria orgnica
inserida nos digestores.
A anlise dos parmetros estudados neste trabalho permitiu determinar as
condies mais adequadas para avaliar a AHE, o volume de hidrognio produzido por unidade de
massa, a composio percentual dos AGV produzidos e o grau de acidificao durante a
fermentao da glicose. Entretanto, as condies ideais determinadas nos testes utilizando glicose
podem necessitar de ajustes devido as caractersticas do lodo e dos substratos orgnicos que sero
avaliados.
Os testes de medida da AHE realizados com diferentes substratos orgnicos (cido
propinico, cido butrico, efluente protico, glicerol e efluente do processo de produo de
fungicida) permitiram avaliar a aplicabilidade do teste de AHE e o potencial que os substratos
orgnicos possuem para gerar hidrognio.
O uso do cido propinico e do cido butrico como substratos orgnicos permitiu
verificar que o aumento da concentrao desses substratos nos digestores prejudicou a atividade
dos microrganismos e provocou o decrscimo no volume de hidrognio produzido, indicando que
esses substratos provocaram efeitos adversos sobre os microrganismos produtores de hidrognio,
corroborando estudos de toxicidade realizados por Wang et al. (2008) e van Niel et al. (2003).
128
Os testes utilizando o acetato de sdio anidro como referncia, indicaram que o

processo de autoclavagem do lodo eliminou os microrganismos metanognicos, pois no houve
produo de metano em nenhum dos testes realizados.
O cido butrico provocou toxicidade aos microrganismos, os quais interromperam
o processo de fermentao e provocaram o acmulo desse cido nos digestores. J o cido
propinico no apresentou toxicidade aos microrganismos produtores de cidos, uma vez que sua
fermentao resultou em porcentagens de cido actico acima de 70% no efluente final.
O efluente protico foi o substrato orgnico que apresentou melhor desempenho na
medida de atividade hidrognica dentre os testados, resultando em 6,8mLH2.gSVT-1.h-1. Dentre
os substratos orgnicos testados o efluente protico foi o que produziu maior volume de
hidrognio durante os testes, 1,74mL.gDQO-1. Okamoto et al. (2000) relatam que efluentes ricos
em protenas no so facilmente fermentados pelos microrganismos produtores de hidrognio.
Alm disso, a hidrlise das protenas libera amnia que, em altas concentraes, causa toxicidade
aos microrganismos. O aumento na DQO pode ter provocado o aumento na concentrao de
amnia dentro dos digestores causando a reduo na AHE.
A atividade mxima medida nos testes utilizando glicerol foi de 0,11mLH2.gSVT1
.h-1, na DQO de 12.000mgO2.L-1. Papanikolau et al (2000) verificaram que a produo de
hidrognio utilizando glicerol como substrato orgnico provocou aumento significativo da

produo de 1,3-propanodiol em detrimento a produo de hidrognio.
Nos testes realizados com o efluente da fabricao de fungicida a atividade
mxima observada foi de 0,26mLH2.gSVT-1.h-1, decaindo nas DQO mais elevadas. A presena de
elementos aromticos como o tebuconazole e o propiconazole na composio do efluente pode
ter gerado toxicidade aos microrganismos.
O efluente protico, o glicerol e o efluente do processo de produo de fungicidas
apresentaram-se como substratos ideais para a produo de cido actico, o qual fez parte de mais
de 60 % da composio total dos AGV produzidos durante a fermentao desses compostos. O
efluente do processo de produo de fungicidas foi o substrato orgnico que apresentou maior
concentrao de cido actico ao final do teste e o maior grau de acidificao.
Assim como ocorreu com a glicose, a estabilizao do valor do pH final dos testes
realizados com os efluentes, independente do acrscimo no valor da DQO, indicou que o excesso
de matria orgnica nos digestores apresentou efeito adverso na converso do substrato orgnico
129
em hidrognio. Os baixos valores de AHE e de produo volumtrica de hidrognio nas DQO

mais altas so um indicativo dessa influncia.
Alm dos testes de atividade hidrognica especfica, neste trabalho tambm foi
avaliada a produo de hidrognio a partir de efluentes da suinocultura utilizando dois reatores
anaerbios seqenciais em batelada, um reator acidognico e um reator metanognico.
Devido as caractersticas do efluente da suinocultura, antes do incio do teste fezse necessrio o controle do TDC no reator acidognico devido a presena de microrganismos
metanognicos no lodo, os quais utilizavam o hidrognio produzido para a formao do metano.
O baixo TDC (1,4 dia) minimizou a interferncia dos microrganismos metanognicos sobre a
produo de hidrognio, uma vez que o percentual de metano determinado no biogs foi o menor
dentre todas as condies testadas, 3,1%. Aps o controle do TDC, foi avaliada a influncia
exercida pelo pH e pela temperatura na remoo de DQO e de slidos, na produo de hidrognio
e de AGV.
Dentre os valores de pH testados, a maior remoo de DQO na etapa acidognica
ocorreu quando o valor do pH do afluente foi ajustado para 5,0 e o reator foi mantido a
temperatura ambiente. J a maior remoo global (acidognico + metanognico) de DQO, 55,6%,
foi verificada quando o valor do pH do afluente ao sistema foi ajustado para 5,0 e a temperatura
do reator acidognico foi mantida em 35C.
A remoo global de SVT foi maior (54%) quando o valor do pH do afluente foi
ajustado para 5,0 e a temperatura do reator acidognico foi mantida em 55C, indicando que a
temperatura termoflica no reator acidognico favoreceu a hidrlise dos compostos orgnicos
complexos presentes no efluente, facilitando sua utilizao pelos microrganismos metanognicos.
A porcentagem de hidrognio no biogs foi mais alta (21,3%) quando o valor do
pH do afluente foi ajustado para 5,0 e o reator acidognico mantido a 35C. Hernandez &
Rodriguez (2007) em estudo realizado com dejeto suno obtiveram maior porcentagem de
hidrognio na fase gasosa (31%) quando o valor do pH do efluente foi ajustado para 6,0. O valor
de pH ideal para a produo de hidrognio, apresenta variaes devido a natureza do efluente e a
presena de populaes bacterianas complexas.
Durante os testes com a temperatura do reator acidognico ajustada para 55C foi
observado que a concentrao de hidrognio no biogs manteve-se estvel em todo o perodo do
teste, independente do valor de pH testado. Esse comportamento foi um indicativo que a
130
temperatura termoflica provocou efeito adverso sobre a atividade dos microrganismos

consumidores de hidrognio.
A presena de microrganismos metanognicos no lodo do reator acidognico
provocou a formao de metano, que apresentou-se em maior porcentagem (11,1%) quando as
condies operacionais do reator acidognico foram: valor do pH igual a 6,0 e temperatura de
35C, ou seja, muito prximas das condies ideais para a metanognese. A temperatura
termoflica influenciou negativamente a atividade dos microrganismos metanognicos, uma vez
que nessa condio foi verificado o decrscimo do percentual de metano no biogs. Essa
influncia pode ser observada mais claramente quando o valor do pH do afluente foi ajustado
para 6,0. Para o pH 5,0 observou-se a reduo da atividade dos microrganismos metanognicos
uma vez que a porcentagem mxima de metano verificada no biogs foi de 3,1%.
Quando o pH do efluente do reator acidognico foi ajustado para 5,0 foi observada
a queda na porcentagem de metano no biogs produzido no reator metanognico. Verificou-se
que, neste caso, o efluente proveniente do reator acidognico apresentava valor de pH de 5,3,
abaixo da faixa considerada tima para os microrganismos produtores de metano (entre 6,0 e 8,0),
o que provocou o consumo de uma parte da alcalinidade do reator metanognico e conseqente
necessidade de um perodo para a estabilizao do pH at o valor ideal para a metanognese. O
mesmo no aconteceu quando o valor do pH do afluente do reator acidognico foi ajustado para
6,0, neste caso o efluente foi transferido para o reator metanognico com valor de pH igual a 6,2,
o que provocou um aumento na porcentagem de metano no biogs.
As anlises dos AGV mostraram que o afluente ao reator acidognico apresentava
concentraes de cido actico superior a 4.000mg.L-1, cido propinico e cido butrico acima
de 1.000mg.L-1. Porm, na condio onde foi observada a maior concentrao de hidrognio no
biogs (pH = 5,0 e T = 35C), o afluente apresentou concentraes de AGV menores que as
relatadas acima. Chin et al., (2003) relataram que o excesso de AGV em reatores acidognicos
prejudicou o crescimento dos microrganismos produtores de hidrognio e o potencial de
produo de hidrognio decresce com o aumento da concentrao dos cidos actico, propinico
e butrico. Wang et al., (2008), reportam que esse decrscimo ocorre pois uma parte dos AGV
no dissociados permeiam a membrana celular dos microrganismos produtores de hidrognio,
afetando sua fisiologia e podendo causar a ruptura da mesma.
131
No efluente do reator acidognico foi observado aumento na concentrao de

AGVs indicando a hidrlise das substncias complexas. Alm disso, verificou-se o decrscimo na
concentrao de cido actico no efluente de sada do reator acidognico na condio onde foi
constatada a maior concentrao de metano no biogs do reator acidognico (pH = 6,0 e T =
35C), indicando a possvel utilizao desse cido para a formao do metano.
O reator metanognico obteve melhor desempenho na produo de metano quando
o valor do pH do efluente proveniente do reator acidognico estava acima de 6,0, considerado
prximo do valor ideal para o funcionamento dos microrganismos metanognicos.
132
9. Concluses
A metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica utilizando o
respirmetro anaerbio mostrou-se eficiente para medir a capacidade de produo de hidrognio
de um lodo e de substratos orgnicos, uma vez que num nico teste rpido puderam ser avaliadas
alm da atividade, o volume de hidrognio produzido por grama de matria orgnica adicionada,
a produo de AGV, a influncia do valor do pH, da concentrao de matria orgnica, da
concentrao de lodo e de compostos potencialmente txicos sobre os microrganismos produtores
de hidrognio.
Nos testes realizados empregando glicose como fonte de matria orgnica foi
observado que:
1 - O valor do pH inicial foi um fator determinante na etapa acidognica da digesto
anaerbia, uma vez que variaes de 0,5 unidade de pH provocaram alteraes nas rotas
metablicas dos microrganismos. Essas alteraes foram observadas na atividade dos
microrganismos, no volume de hidrognio produzido e na produo dos AGV. O controle do
valor do pH durante o processo fermentativo afetou negativamente os microrganismos
acidognicos, sendo indicado apenas o ajuste no seu valor inicial sem controle posterior.
Entretanto, estudos adicionais se fazem necessrios para determinar quais as reais causas deste
comportamento.
2 - As concentraes de SVT inseridas nos digestores influenciaram os parmetros
analisados neste trabalho. Os testes realizados com concentrao de SVT de 1.250 mg.L-1
resultaram em baixos valores de atividade, produo de hidrognio e produo de AGV que
indicaram limitao provocada pela pouca quantidade de microrganismos nos digestores,
enquanto que nos testes realizados nas concentraes de SVT de 5.000 mg.L-1 e 7.500 mg.L-1 foi
verificado que o excesso de lodo provocou inibio do processo estudado. A concentrao de
SVT de 2.500 mg.L-1 foi a que se mostrou ideal para a medida da AHE.
Nos testes realizados com glicose e com outros substratos orgnicos, a DQO
apresentou dois efeitos distintos. Em concentraes abaixo de 4.000 mgO2.L-1, atuou como fator
limitante na atividade dos microrganismos e na produo volumtrica de hidrognio, alm de
provocar desvios no metabolismo microbiano a favor da produo de cido actico. Em
concentraes acima de 12.000 mgO2.L-1, atuou como inibidor da atividade dos microrganismos,
133
prejudicando a produo volumtrica de hidrognio e direcionando o metabolismo microbiano

para a formao de cido butrico.
O tratamento trmico do lodo agiu de maneira positiva na eliminao dos
microrganismos metanognicos, porm, pode ter provocado o rompimento da membrana celular
dos microrganismos que compunham o lodo, causando a liberao da matria orgnica no mixed
liquor que prejudicou a sedimentao ao final do teste e comprometeu anlises de DQO e do teor
de slidos, alm das concentraes de alguns AGV e do clculo do valor do grau de acidificao.
As condies consideradas ideais para a medida da atividade hidrognica
especfica so: glicose como substrato orgnico, valor do pH ajustado para 6,0, DQO de 12.000
mgO2.L-1 e SVT na concentrao de 2.500 mg.L-1.
Entretanto as condies descritas como ideais podem necessitar de pequenos
ajustes devido as caractersticas de cada lodo e de cada substrato orgnico que sero estudados.
A configurao de reatores anaerbios em dois estgios, reator acidognico
seguido de reator metanognico, proposta para o tratamento de efluentes da suinocultura
apresentou performance satisfatria para a produo de energia, remoo de matria orgnica,
remoo de slidos e produo de AGV. Os melhores resultados foram observados quando as
condies do reator acidognico foram: TDC de 1,43 dia, valor do pH do afluente ajustado para
5,0 e a temperatura de 35C. O reator metanognico mostrou melhor desempenho na produo de
metano quando o valor do pH do efluente proveniente do reator acidognico estava prximo a 6,0,
considerado dentro da faixa ideal para os microrganismos metanognicos.
134
10. Recomendaes
Recomenda-se o desenvolvimento de estudos adicionais que conduzam a
otimizao do teste de medida da atividade hidrognica especfica, destacando-se:
Testar diferentes composies de meio nutricional buscando identificar os micro e macro
nutrientes mais importantes para os microrganismos produtores de hidrognio provenientes de
lodo anaerbio autoclavado.
Avaliar a atividade hidrognica utilizando concentraes de SVT na faixa compreendida
entre 2.000 e 3.000 mg.L-1 bem como valores intermedirios de pH na faixa entre 5,5 e 6,0.
Verificar a influncia do tratamento cido e alcalino do lodo sobre a AHE, a fim de
otimizar a seleo dos microrganismos produtores de hidrognio.
Analisar a influncia da remoo da matria orgnica dissolvida do lodo autoclavado
sobre a medida da AHE.
Avaliar a produo de hidrognio em digestores operados com alimentao continua com
e sem controle do valor do pH durante o processo fermentativo.
135
11. Referncias Bibliogrficas

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145
ANEXOS
146
ANEXO A - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de

lodos.
Tabela A.1 Atividades hidrognicas especficas para os valores de DQO e de pH estudados, na
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
40,0
37,1
316,0
194,3
293,3
392,5
357,1
pH inicial = 6,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
6,0
19,5
25,2
44,5
32,7
20,3
23,4

DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
0,1
0,3
343,7
293,4
86,1
26,1
3,0
pH inicial = 5,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
10,5
171,2
262,6
445,6
271,7
237,0
203,1
pH inicial = 6,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
13,1
26,1
180,5
331,7
483,0
397,9
312,5
pH inicial = 6,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
11,2
15,7
57,2
51,6
45,9
26,6
7,8

DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
2,2
4,5
5,0
14,2
21,0
20,6
3,3
pH inicial = 5,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
1,2
5,2
114,8
206,4
298,0
389,5
267,5
pH inicial = 6,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
1,4
3,0
59,7
173,5
234,2
138,9
44,0
pH inicial = 6,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
0,2
0,3
11,0
18,5
26,2
19,0
10,7
147

DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
11,0
22,0
44,1
77,8
111,2
60,3
10,0
pH inicial = 5,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
5,6
11,2
22,5
147,9
150,2
78,3
5,9
pH inicial = 6,0
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
1,2
2,3
11,9
39,6
81,2
88,4
95,5
pH inicial = 6,5
AHE
(mLH2.gSVT-1.h-1)
0,01
0,02
0,05
0,13
0,25
0,25
0,24
Tabela A.5 Volume de hidrognio produzido por grama de DQO adicionada nos valores de pH
estudados, para a concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
4,9
17,0
7,7
3,1
1,3
3,1
1,4
pH inicial = 6,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
18,5
27,9
21,5
27,5
15,9
10,2
6,7
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
1,2
13,8
29,6
13,4
8,1
4,7
2,8
pH inicial = 5,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
10,5
20,1
31,1
13,8
13,2
15,1
7,0
pH inicial = 6,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
3,3
3,7
24,8
21,7
20,2
11,0
5,4
pH inicial = 6,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
5,9
6,8
19,9
11,0
9,3
10,5
5,1
148
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
4,4
17,1
28,6
32,6
15,1
12,1
5,9
pH inicial = 5,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
11,0
22,3
28,4
37,9
20,2
21,4
14,2
pH inicial = 6,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
3,3
9,7
19,9
34,4
24,1
18,3
14,8
pH inicial = 6,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
1,4
1,4
8,2
12,2
13,4
6,6
7,2
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
2,8
9,9
5,3
3,0
3,2
1,4
0,5
pH inicial = 5,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
3,3
7,2
25,1
26,2
17,3
12,9
10,2
pH inicial = 6,0
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
2,5
10,4
17,1
6,7
9,2
8,3
7,8
pH inicial = 6,5
Prod. H2
(mL.gDQO-1)
0,1
0,2
0,1
1,6
2,1
0,9
0,4
Tabela A.9 Porcentagem dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com valor de pH inicial
de 5,5 e concentrao de SVT de 1.250mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

75,3
58,7
37,5
36,5
43,3
35,6
42,5
pH inicial = 5,5
Ac. Propinico (%)
8,6
6,1
1,0
1,1
2,1
1,9
1,7
Ac. Butrico (%)

16,1
35,2
61,5
62,4
54,5
62,5
55,7
149
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

79,2
64,6
54,3
37,9
46,6
52,7
36,2
pH inicial = 6,0
Ac. Propinico (%)
3,2
3,4
2,5
2,3
0,4
0,4
2,0
Ac. Butrico (%)

17,5
32,0
43,2
59,8
53,0
46,9
61,8
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

84,6
39,8
54,8
47,5
43,5
46,5
51,5
pH inicial = 5,0
Ac. Propinico (%)
8,7
4,8
2,6
0,3
2,7
2,7
3,4
Ac. Butrico (%)

6,7
55,3
42,6
52,2
53,7
50,8
45,1
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

66,3
55,2
44,9
43,7
44,3
43,8
44,0
pH inicial = 5,5
Ac. Propinico (%)
8,9
6,5
5,2
4,2
4,2
3,3
4,3
Ac. Butrico (%)

24,8
38,2
49,9
52,1
51,5
53,0
51,7
150
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

86,7
61,3
39,4
39,3
41,6
38,0
26,0
pH inicial = 6,0
Ac. Propinico (%)
0,5
7,3
6,3
4,3
3,7
5,6
4,4
Ac. Butrico (%)

12,7
31,5
54,2
56,4
54,7
56,4
69,6
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

67,3
59,8
35,5
38,7
35,6
32,5
44,1
pH inicial = 6,5
Ac. Propinico (%)
9,1
8,6
5,8
5,3
5,5
4,2
4,3
Ac. Butrico (%)

23,6
31,6
58,7
56,0
58,8
63,2
51,6
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

65,7
61,8
62,8
43,8
42,0
44,1
44,0
pH inicial = 5,0
Ac. Propinico (%)
11,5
9,9
4,7
3,6
4,7
6,3
5,9
Ac. Butrico (%)

22,8
28,3
32,5
52,6
53,3
49,5
50,1
151
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

71,1
58,0
47,6
50,2
48,0
53,3
49,8
pH inicial = 5,5
Ac. Propinico (%)
7,0
7,0
6,8
0,2
4,5
2,6
3,6
Ac. Butrico (%)

21,9
34,9
45,6
49,6
47,5
44,1
46,8
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

72,4
67,4
52,9
47,1
40,6
41,8
42,0
pH inicial = 6,0
Ac. Propinico (%)
1,1
9,0
8,3
5,2
5,8
4,9
5,3
Ac. Butrico (%)

26,4
23,6
38,8
47,6
53,6
53,2
52,6
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

76,2
75,4
54,3
41,7
43,3
57,5
52,6
pH inicial = 6,5
Ac. Propinico (%)
9,9
11,9
9,5
8,2
7,0
7,7
7,5
Ac. Butrico (%)

13,8
12,7
36,2
50,1
49,6
34,7
39,9
152
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

80,5
55,3
53,5
67,0
37,0
86,8
50,3
pH inicial = 5,0
Ac. Propinico (%)
7,8
20,3
5,7
2,0
4,4
8,4
10,1
Ac. Butrico (%)

11,7
24,3
40,9
31,0
58,6
4,8
39,5
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

74,8
71,0
47,7
39,9
42,7
43,5
45,8
pH inicial = 5,5
Ac. Propinico (%)
6,1
3,7
9,1
8,3
5,3
4,7
11,8
Ac. Butrico (%)

19,0
25,2
43,1
51,7
52,0
51,8
42,4
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

76,2
82,6
55,5
69,1
55,1
54,1
53,7
pH inicial = 6,0
Ac. Propinico (%)
2,2
1,4
11,6
5,7
8,2
8,4
8,5
Ac. Butrico (%)

21,6
16,0
32,9
25,2
36,7
37,5
37,8
153
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Ac. Actico (%)

79,7
73,5
66,1
50,8
64,3
68,5
65,4
pH inicial = 6,5
Ac. Propinico (%)
7,2
11,8
9,8
7,9
6,4
7,8
8,6
Ac. Butrico (%)

13,1
14,7
24,1
41,3
29,2
23,7
25,9
Tabela A.23 Valores do pH final nos testes realizados com concentrao de SVT de 1.250
mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,5
pH final
5,29
4,66
4,47
4,42
4,34
4,33
4,30
pH inicial = 6,0
pH final
5,0
4,85
4,76
4,44
4,50
4,43
4,47
mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
pH final
5,40
4,75
4,72
4,43
4,50
4,40
4,30
pH inicial = 5,5
pH final
5,39
5,20
4,83
4,80
4,81
4,75
4,84
pH inicial = 6,0
pH final
5,63
5,31
4,74
4,56
4,47
4,61
4,48
pH inicial = 6,5
pH final
5,60
5,29
4,96
4,77
4,75
4,66
4,72
154
mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
pH final
5,05
5,07
4,73
4,45
4,53
4,58
4,68
pH inicial = 5,5
pH final
5,27
5,00
4,88
4,60
4,54
4,53
4,60
pH inicial = 6,0
pH final
5,70
5,43
5,08
4,70
4,66
4,67
4,60
pH inicial = 6,5
pH final
5,90
5,53
5,31
5,00
4,97
4,91
4,80
mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
pH final
5,14
4,92
4,81
4,58
4,75
4,67
4,5
pH inicial = 5,5
pH final
5,53
5,26
5,05
4,81
4,75
4,7
4,6
pH inicial = 6,0
pH final
5,77
5,66
5,24
4,64
4,64
4,6
4,65
pH inicial = 6,5
pH final
6,02
5,71
5,4
5,2
5,06
5,05
5,03
Tabela A.27 Graus de acidificao medidos nos testes realizados com concentrao de SVT de
1.250mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Grau de acidificao (gDQOAGV. gDQOAfl-1)

pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
0,24
0,76
0,29
0,82
1,11
0,62
0,46
0,86
0,48
0,17
0,24
0,44
0,54
0,70
155
2.500mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
0,51
0,26
0,41
0,94
0,62
0,42
0,32

pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
0,82
0,08
0,62
0,17
1,40
0,62
1,82
1,16
0,54
0,51
0,70
0,41
0,39
0,23
pH inicial = 6,5
0,65
0,58
0,99
0,57
0,77
0,57
0,40
5.000mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
0,73
0,96
0,33
0,83
0,55
0,94
0,16

pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
0,25
0,28
0,94
0,65
0,68
1,16
0,19
0,80
0,81
0,69
0,33
0,93
0,40
0,95
pH inicial = 6,5
1,16
0,97
0,97
0,57
0,73
0,51
0,32
7.500mg.L-1.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
pH inicial = 5,0
0,50
0,61
0,70
0,53
0,49
0,17
0,43

pH inicial = 5,5
pH inicial = 6,0
0,21
0,17
0,22
0,10
0,49
1,16
0,78
0,40
0,60
0,51
0,43
0,58
0,14
1,01
pH inicial = 6,5
0,36
1,20
1,01
0,96
0,49
0,63
0,44
156
ANEXO B - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos

orgnicos
Tabela B.1 Atividades hidrognicas especficas dos efluentes estudados.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Acetato
de sdio
0,007
0,003
0,004
0,057
0,000
0,010
0,000
Acido
propinico
0,005
0,256
0,023
0,060
0,065
0,004
0,000
AHE (mLH2.gSVT-1.h-1)
Efluente
Acido
Protico
butrico
0,022
0,004
0,106
6,820
0,011
0,047
0,003
1,029
0,017
1,235
0,002
0,000
0,000
0,044
Glicerol
5%
0,002
0,015
0,003
0,000
0,117
0,020
0,001
Efluente
fungicida
0,012
0,000
0,123
0,133
0,261
0,034
0,061
Tabela B.2 Produo volumtrica de hidrognio por grama de DQO adicionada para cada
efluente estudado.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Acetato de
sdio
0,030
0,073
0,075
0,890
0,569
0,011
0,003
Produo de hidrognio (mLH2.gDQO-1)

Efluente
Glicerol
Acido
Acido
Protico
5%
propinico
butrico
0,198
0,212
0,110
0,050
0,312
1,534
1,150
0,290
0,028
0,037
2,176
0,050
0,072
0,058
13,942
0,401
0,079
0,059
7,394
0,947
0,006
0,053
3,440
0,120
0,000
0,038
0,430
0,020
Efluente
fungicida
0,014
0,000
0,170
0,170
0,390
0,060
0,080
Tabela B.3 Valor do pH final do mixed liquor de cada efluente testado.

DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Acetato de
sdio
6,08
6,15
5,98
6,14
6,15
6,17
6,14
Acido
propinico
6,04
6,21
6,20
6,24
6,40
6,12
6,14
pH final
Efluente
Acido
Protico
butrico
6,15
5,66
6,27
5,56
6,78
5,27
6,55
5,07
6,35
4,60
6,63
4,49
6,43
4,37
Glicerol
5%
5,68
5,42
5,27
5,15
5,11
5,15
5,00
Efluente
fungicida
6,25
5,78
5,93
6,26
6,01
6,24
6,09
157
Tabela B.4 Porcentagens dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com acetato de sdio
anidro e cido propinico.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Acetato de sdio anidro

Ac. actico
c.
Ac.butrico
(%)
propinico
(%)
(%)
90,5
4,7
4,8
75,4
14,5
10,0
86,9
8,1
5,0
96,8
1,9
1,4
98,1
1,2
0,7
97,8
1,4
0,8
99,3
0,1
0,7
Ac. actico
(%)
83,5
77,8
80,5
79,5
69,3
73,4
74,1
cido Propinico
c.
Ac.butrico
propinico
(%)
(%)
10,0
6,5
14,8
7,4
11,7
7,8
12,5
8,0
21,2
9,5
17,2
9,4
17,7
8,3
Tabela B.5 Porcentagens dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com cido butrico e
efluente protico.
DQO
(mgO2.L-1)
Ac. actico
(%)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
55,4
40,7
31,0
21,8
10,9
10,2
3,7
cido Butrico
c.
Ac.butrico
propinico
(%)
(%)
8,4
36,2
7,8
51,5
5,9
63,0
1,4
76,9
2,0
87,1
3,0
86,8
1,5
94,8
Ac. actico
(%)
89,3
78,8
68,6
58,5
78,2
83,6
87,8
Efluente protico
c.
Ac.butrico
propinico
(%)
(%)
5,1
5,6
3,9
17,4
7,9
23,5
7,6
33,8
10,0
11,9
8,1
8,3
8,3
3,9
Tabela B.6 Porcentagens dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com glicerol 5% e
DQO
(mgO2.L-1)
Ac. actico
(%)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
79,2
55,7
60,6
55,2
71,7
46,8
51,7
Glicerol 5%
Ac.
propinico
(%)
7,9
12,4
11,4
14,4
3,6
18,2
21,8
Ac.butrico
(%)
12,9
32,0
28,0
30,4
24,7
35,0
26,5
Efluente fungicida
Ac. actico
Ac.
Ac.butrico
(%)
propinico
(%)
(%)
92,9
2,4
4,7
87,6
5,4
6,9
87,7
6,5
5,8
94,5
3,2
2,3
96,1
1,6
2,3
97,4
1,6
1,0
98,7
0,5
0,8
158
Tabela B.7 Graus de acidificao medidos nos testes realizados com os efluentes.
DQO
(mgO2.L-1)
1.000
2.000
4.000
8.000
12.000
16.000
20.000
Acetato de
sdio
0,47
2,51
2,21
1,28
1,00
2,09
2,83

Efluente
Glicerol
Acido
Acido
Protico
5%
propinico
butrico
0,27
0,22
1,41
0,08
0,07
0,84
0,28
0,51
0,19
1,63
0,58
0,31
0,09
0,40
0,42
0,17
0,07
0,98
0,20
0,05
0,08
1,89
0,20
0,17
0,08
1,15
0,11
0,15
Efluente
fungicida
0,16
0,34
0,73
0,71
0,61
0,91
0,26
159
ANEXO C - Influncia do controle de pH na produo de hidrognio a partir da glicose

Tabela C.1 Variao do valor do pH durante o teste realizado com o pH inicial ajustado para
5,0 0,1.
Tempo (h)
pH
0
1
2
3
4,5
5,5
6,5
7,5
8,5
9,25
24,75
25,75
26,5
27,5
28,75
5,10
5,31
5,38
5,41
5,41
5,38
5,3
5,21
5,00
4,94
4,52
4,51
4,51
4,51
4,51
5,50,1.
Tempo (h)
pH
0
1
2
3
4,5
5,5
6,5
7,5
8,5
24,5
25,5
26,5
27,5
28,5
29,5
5,60
5,75
5,80
5,81
5,79
5,78
5,75
5,72
5,67
4,72
4,71
4,70
4,69
4,69
4,68
160
6,00,1.
Tempo (h)
pH
0
1
2
3
4
5
6
7
8
24
25
26
27
5,98
6,12
6,14
6,12
6,06
5,99
5,89
5,77
5,68
4,88
4,86
4,84
4,82
Tabela C.4 Concentraes dos cidos graxos volteis obtidos nos testes com os fermentadores
com e sem controle de pH.
pH
Fermentador
Sem controle de pH
Com controle de pH
Sem controle de pH
Com controle de pH
Sem controle de pH
Com controle de pH
5,0
5,5
6,0
Ac. Actico
(mg.L-1)
1.610,4
1.931,8
10.007,2
4.372,1
4.303,6
2.059,2
Ac. Propinico
(mg.L-1)
142,9
290,2
1.565,0
587,2
145,2
248,1
Ac. Butrico
(mg.L-1)
2.068,7
2.097,6
10.733,8
5.935,6
1.067,7
1.524,3
Tabela C.5 Valores das DQO solveis medidas ao final dos testes com os fermentadores com e
sem controle de pH
pH
5,0
5,5
6,0
Fermentador
Sem controle de pH
Com controle de pH
Sem controle de pH
Com controle de pH
Sem controle de pH
Com controle de pH
DQO solvel inicial

(mgO2.L-1)
12.000
12.000
12.000
12.000
12.000
12.000
DQO solvel final

(mgO2.L-1)
9.397,5
10.612,7
5.086,1
10.172,2
1.882,3
6.901,9
161
ANEXO D - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir

de efluentes da suinocultura
Tabela D. 1 Caracterizao do efluente bruto coletado na propriedade rural.
Alcalinidade
(mgCaCO3.L-1)
Amnia
(mgNH4-N.L-1)
2.826,0
2.213,0
3.811,0
3.273,0
3.138,0
3.018,0
642,4
732,3
814,7
661,3
825,5
690,1
Parmetro
Nitrognio
Slidos
total Kjedahl
totais
(mgN.L-1)
(mg.L-1)
1.795,1
23.779,5
1.887,8
24.740,5
1.348,6
22.285,7
1.152,7
25.703,5
2.009,0
24.571,5
1.850,1
22.130,3
Slidos volteis
totais (mg.L-1)
DQO total
(mgO2.L-1)
pH
17.272,5
18.766,0
16.298,9
19.935,0
19.058,5
14.585,7
61.663,8
45.241,4
52.965,5
43.034,5
63.574,4
38.549,3
7,2
6,5
6,0
6,3
5,9
7,1
Tabela D.2 Valores das alcalinidades medidas nos testes de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Afluente
2.132,5
1.966,9
2.235,2
2.886,4
3.256,0
2.795,9
2.147,0
1.995,2
2.253,2
2.666,0
2.597,2
1.358,8
Alcalinidade (mg CaCO3.L-1)

Efluente acidognico
996,7
2.293,2
1.284,8
3.520,0
1.126,4
3.405,6
1.856,8
3.062,4
2.252,9
3.132,8
2.504,9
3.297,2
1.788,8
3.440,0
989,0
3.250,8
808,4
1.823,2
1.935,0
1.698,5
1.874,8
2.064,0
1.118,0
3.457,2
Tabela D.3 Valores das mdias e desvios padro da medida de alcalinidade dos testes de
determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Alcalinidade (mg CaCO3.L-1)

Mdia
2.305,5
1.316,2
3.070,3
2.548,5
1.883,9
3.280,2
2.218,8
1.434,1
2.260,7
Desvio padro
402,9
379,2
553,3
585,7
666,3
127,0
601,1
558,7
811,9
162
Tabela D.4 Valores das DQOs medidas nos testes de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Afluente
48.000,0
55.578,9
63.157,9
44.210,5
54.315,8
63.157,9
40.421,0
29.052,6
15.058,8
27.607,8
58.800,0
45.600,0
DQO (mgO2.L-1)
Efluente acidognico
41.684,2
29.052,6
45.473,7
36.631,6
41.684,2
45.473,7
27.789,5
20.210,5
12.549,0
8.400,0
54.000,0
40.615,4
17.684,2
20.210,5
17.684,2
17.364,2
25.263,2
29.052,6
18.947,4
17.684,2
8.784,3
6.000,0
1.200,0
30.769,2
Tabela D.5 Valores das mdias e desvios padro da medida de DQO dos testes de determinao
do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
DQO (mgO2.L-1)
Mdia
52.736,8
38.210,5
18.235,8
46.736,8
33.798,5
22.736,8
36.766,6
28.891,1
11.688,4
Desvio padro
8.402,6
7.098,8
1.325,1
13.035,7
10.237,6
4.641,1
19.309,9
22.021,7
13.100,6
Tabela D.6 Valores dos slidos totais medidos nos testes de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Afluente
31.520,0
26.792,0
25.664,0
26.328,0
13.688,0
21.204,0
29.496,0
32.504,0
8.504,0
19.080,0
28.184,0
34.032,0
ST (mg.L-1)
Efluente acidognico
25.560,0
25.328,0
22.448,0
23.264,0
11.972,0
14.020,0
24.220,0
26.360,0
9.736,0
13.512,0
29.292,0
22.156,0
10.440,0
12.316,0
13.196,0
12.116,0
10.732,0
11.676,0
13.380,0
11.152,0
8.284,0
8.540,0
9.668,0
10.600,0
163
Tabela D.7 Valores das mdias e desvios padro da medida de slidos totais dos testes de
determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
ST (mg.L-1)
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Mdia
27.576,0
24.150,0
12.017,0
24.233,0
19.143,0
11.735,0
22.450,0
18.674,0
9.273,0
Desvio padro
2.669,8
1.533,8
1.151,2
8.494,7
7.200,2
1.162,6
11.148,5
8.782,6
1.069,6
Tabela D.8 Valores dos slidos volteis totais medidos nos testes de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Afluente
25.476,0
21.160,0
20.800,0
19.400,0
22.340,0
25.724,0
15.816,0
10.508,0
5.508,0
14.236,0
20.916,0
28.144,0
SVT (mg.L-1)
Efluente acidognico
19.984,0
19.588,0
17.572,0
16.764,0
17.544,0
19.204,0
9.128,0
8.372,0
18.920,0
13.080,0
12.432,0
16.200,0
6.768,0
8.116,0
8.564,0
8.512,0
8.208,0
6.100,0
6.312,0
5.924,0
5.364,0
5.452,0
6.084,0
5.496,0
Tabela D.9 Valores das mdias e desvios padro da medida de slidos volteis totais dos testes
de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
SVT (mg.L-1)
Mdia
21.709,0
18.477,0
7.990,0
18.597,0
13.562,0
6.636,0
17.201,0
15.158,0
5.599,0
Desvio padro
2.623,6
1.555,5
838,8
6.781,6
5.606,1
1.059,9
9.644,8
2.999,3
327,9
164
Tabela D.10 Composio do biogs nos reatores acidognico e metanognico nos testes de
determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4
Hidrognio
(%)
Metano reator acidognico

(%)
Metano reator metanognico

(%)
0,0
0,0
4,2
4,4
16,0
12,4
5,4
0,0
6,7
21,0
22,2
0,0
6,4
3,6
3,1
5,1
2,5
3,3
4,8
3,8
5,0
2,4
1,0
3,3
65,5
54,2
60,6
53,9
63,5
63,7
53,1
62,0
50,5
44,0
50,1
32,2
Tabela D.11 Valores das mdias e desvios padro da composio percentual do biogs nos
testes de determinao do TDC.
TDC
(dias)
2,5
1,7
1,4

Amostra
Mdia
2,2
Hidrognio
4,6
58,6
8,5
Hidrognio
3,6
60,6
12,5
Hidrognio
2,9
44,2
Desvio padro
2,5
1,5
5,6
7,1
1,0
5,0
10,9
1,7
8,5
165
Tabela D.12 Alcalinidades das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do

tratamento e valor de pH e temperatura testados.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Afluente
2.820,8
2.545,6
3.301,3
3.187,1
2.844,7
3.116,9
2.563,7
2.230,1
2.072,6
2.253,2
2.666,0
2.597,2
1.358,8
1.092,2
3.087,4
2.580,0
3.161,3
3.818,4
3.862,8
3.836,2
3.552,0
4.262,4
4.884,0
2.679,0
2.603,8
3.769,4
3.703,6
3.045,6
3.985,6
5.207,6
5.292,2
3.573,4
4.390,0
4.152,9
2.344,2
2.838,8
2.726,0
2.820,0
2.256,0
5.683,2
6.073,9
5.364,0
5.220,0
3.960,0
3.015,0
2.313,0
5.683,2
Efluente acidognico
1.298,6
1.883,4
1.167,7
2.045,7
1.492,6
1.957,9
1.633,1
1.694,5
974,6
1.878,9
1.281,9
2.651,6
1.132,6
1.703,3
974,6
2.186,2
860,0
2.150,0
808,4
1.823,2
1.935,0
1.698,5
1.874,8
2.064,0
1.118,0
3.457,2
2.218,8
4.291,4
731,0
2.494,0
524,6
2.279,0
1.589,5
3.232,3
1.554,0
3.276,7
1.456,3
1.580,6
1.527,3
3.374,4
1.021,2
3.241,2
1.749,3
2.228,9
2.237,7
2.770,5
1.974,0
2.726,0
3.243,0
3.224,2
4.380,4
3.299,4
4.183,0
3.985,6
4.634,2
4.681,2
5.245,2
4.399,2
4.521,4
4.972,6
3.600,2
5.912,6
3.599,8
3.134,4
4.047,6
2.686,7
3.478,0
4.681,2
2.440,8
4.144,2
3.055,0
3.271,2
2.472,2
2.932,8
2.218,4
3.036,2
2.331,2
3.111,4
4.440,0
3.862,8
4.455,0
4.185,0
5.130,0
5.157,0
4.014,0
5.490,0
2.655,0
4.905,0
1.872,0
4.158,0
1.350,0
3.474,0
4.440,0
3.862,8
166
Tabela D.13 Valores das mdias e desvios padro da alcalinidade das amostras de efluente da
suinocultura em cada condio testada.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Amostra
Mdia
Afluente
2.826,3
Efluente acidognico
1.244,5
2.000,2
Afluente
2.213,4
Efluente acidognico
1.258,8
2.532,2
Afluente
3.911,0
Efluente acidognico
1.590,8
2.814,9
Afluente
3.785,8
Efluente acidognico
3.972,7
4.150,1
Afluente
3.137,7
Efluente acidognico
2.955,4
3.374,8
Afluente
4.664,0
Efluente acidognico
3.544,5
4.386,8
Desvio padro
367,2
233,3
310,0
682,4
650,0
892,7
544,3
363,2
677,1
1.035,6
1.016,6
1.053,1
806,7
688,9
678,2
1.394,2
1.392,4
712,6
Tabela D.14 DQO total das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do tratamento
e valor de pH e temperatura testados.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Afluente
62.693,9
45.241,4
52.965,5
43.034,5
63.584,4
38.649,3
33.662,3
68.050,6
20.078,4
15.058,8
27.607,8
58.800,0
45.600,0
75.076,9
62.769,2
58.775,5
65.333,3
44.000,0
53.333,3
77.333,3
19.200,0
37.028,6
41.142,8
DQO (mgO2.L-1)
Efluente acidognico
35.310,3
32.000,0
44.137,9
33.662,3
44.883,1
27.428,6
32.810,1
40.101,3
17.568,6
12.549,0
8.400,0
54.000,0
40.615,4
45.538,6
50.938,8
40.489,8
64.000,0
28.000,0
49.333,3
57.600,0
13.714,3
24.685,7
53.960,8
33.103,4
24.275,8
24.225,2
23.688,3
37.402,6
24.935,0
27.949,4
35.240,5
15.058,8
8.784,3
6.000,0
1.200,0
30.769,2
33.230,8
30.040,8
36.571,4
26.666,7
24.000,0
24.350,0
30.171,4
9.600,0
19.200,0
37.647,0
167
Tabela D.14 DQO total das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do tratamento
e valor de pH e temperatura testados (continuao).
pH
T (C)
Ambiente
6,0
35
55
Afluente
29.729,0
37.161,3
43.354,8
63.549,3
45.971,8
58.140,8
49.678,3
55.048,9
54.683,5
52.586,0
45.248,4
58.700,6
45.333,3
64.000,0
54.666,6
50.666,6
57.725,5
66.509,8
66.529,9
38.137,0
48.657,5
40.069,6
36.730,4
57.725,5
DQO (mgO2.L-1)
Efluente acidognico
26.012,9
34.683,9
43.267,6
39.211,3
31.098,6
50.028,2
48.335,6
48.435,4
50.140,1
41.579,6
41.579,6
44.025,5
36.000,0
44.000,0
42.666,7
24.774,2
52.705,9
56.470,6
36.821,9
32.876,7
45.078,2
38.400,0
15.026,1
52.705,9
13.625,8
19.819,3
27.042,2
24.338,0
9.464,8
45.971,8
34.909,1
20.139,8
35.465,0
36.687,9
22.012,7
28.127,4
34.666,7
21.333,3
34.666,7
22.296,8
20.078,4
53.960,8
24.986,3
27.616,4
33.391,3
21.704,3
13.356,5
20.078,4
Tabela D.15 Valores das mdias e desvios padro da DQO total das amostras de efluente da
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
DQO (mgO2.L-1)
Mdia
50.958,2
36.291,7
28.852,5
45.470,8
33.762,5
20.206,9
48.195,9
41.613,4
24.519,3
47.829,3
40.134,2
24.413,8
53.523,6
40.595,7
29.407,1
51.510,6
41.260,7
26.896,5
Desvio padro
12.758,4
6.174,4
5.569,9
22.101,1
18.091,0
13.968.1
19.156,8
19.231,1
8.756,6
11.173,2
8.908,2
11.717,2
6.360,0
7.484,4
6.730,4
12.329,7
13.598,0
12.433,2
168
Tabela D.16 Slidos totais das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Afluente
21.824
20.212
22.776
25.164
18.052
21.288
23.528
28.456
16.308
8.504
19.080
28.184
34.032
35.256
19.148
21.412
25.784
19.464
26.036
19.804
15.872
22.644
26.396
22.904
20.480
25.488
29.280
23.376
29.536
27.528
27.036
29.000
30.452
25.288
23.520
23.348
27.356
16.940
20.668
25.052
23.728
22.128
21.360
27.412
13.696
7.536
25.052
ST (mg.L-1)
Efluente acidognico
19.884
22.316
25.840
25.448
20.832
20.736
23.092
24.088
12.432
9.736
13.512
29.292
22.156
22.424
21.700
23.252
23.448
15.484
22.672
16.936
12.524
16.756
24.196
19.216
22.272
26.052
28.540
20.020
25.724
25.176
25.332
25.836
27.908
22.080
19.268
18.832
28.092
20.584
19.888
27.456
22.068
18.680
15.104
21.504
13.028
8.836
27.456
22.648
23.884
23.060
18.796
22.008
19.268
19.864
19.828
93.96
8.284
8.540
9.668
10.600
32.084
30.328
29.276
12.160
12.544
12.880
10.048
12.960
11.288
10.304
11.776
12.936
13.884
15.948
14.328
14.772
14.612
13.672
20.160
19.736
21.992
19.492
14.732
13.468
15.604
17.592
11.668
11.616
13.032
12.692
12.992
11.996
10.128
11.668
169
Tabela D.17 Valores das mdias e desvios padro dos slidos totais das amostras de efluente da
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
ST (mg.L-1)
Mdia
22.779,5
22.662,5
21.169,5
22.740,5
19.313,0
18.397,1
22.285,7
18.859,4
11.740,6
25.703,5
24.041,5
13.991,0
24.571,5
22.881,1
17.847,0
20.745,5
19.266,5
11.974,0
Desvio padro
3.172,2
2.231,7
1.948,8
9.148,7
6.668,4
11.434,3
4.053,4
4.541,0
1.206,9
3.233,1
3.221,6
1.257,6
4.448,7
3.881,1
2.994,8
6.728,5
6.680,2
955,8
Tabela D.18 Slidos volteis totais das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Afluente
16.460
15.592
16.504
19.196
12.956
15.780
17.156
21.756
13.020
5.508
14.236
20.916
28.144
29.472
14.316
16.516
20.864
14.644
20.964
15.060
11.660
17.260
20.640
SVT (mg.L-1)
Efluente acidognico
14.928
18.968
19.756
19.492
15.684
14.920
16.664
17.768
9.276
6.892
9.308
22.432
16.200
16.344
16.544
18.212
18.836
11.236
17.924
12.404
8.748
12.140
18.692
16.744
17.468
17.240
13.472
16.360
13.788
14.404
14.180
5.804
5.364
5.452
6.084
5.496
24.584
22.628
22.272
8.104
8.644
8.704
6.648
9.240
7.620
6.692
170
Tabela D.18 Slidos volteis totais das amostras de efluente da suinocultura em cada estgio do
tratamento e valor de pH e temperatura testados (continuao)
pH
T (C)
Ambiente
6,0
35
55
Afluente
17.824
16.036
19.872
23.492
17.504
23.436
20.808
20.508
21.740
22.900
19.664
18.300
18.356
22.652
12.772
16.084
18.936
17.408
15.608
15.172
19.468
9.868
4.940
18.936
SVT (mg.L-1)
Efluente acidognico
14.628
17.284
20.276
22.640
14.360
18.916
18.624
18.500
18.436
20.304
16.068
14.004
13.696
22.992
15.256
15.132
21.368
16.096
12.612
9.128
16.248
8.960
6.036
21.368
7.784
8.920
9.740
11.332
9.912
9.872
9.740
8.500
13.832
13.612
15.060
13.284
9.976
8.744
10.884
12.632
7.772
7.372
8.508
7.544
8.608
7.700
6.264
7.772
Tabela D.19 Valores das mdias e desvios padro dos slidos volteis totais das amostras de
efluente da suinocultura em cada condio testada.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Amostra
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
Afluente
Efluente acidognico
SVT (mg.L-1)
Mdia
17.272,5
16.925,0
15.457,0
17.766,0
14.401,0
12.210,5
17.298,9
14.282,9
7.950,3
19.935,0
18.153,5
9.475,0
19.058,5
16.986,0
12.253,0
15.042,0
13.977,0
7.692,5
Desvio padro
2.612,7
2.004,9
1.654,4
8.047,8
5.334,7
9.095,3
3.678,0
4.112,4
1.010,3
2.714,3
2.755,1
1.072,7
3.477,8
3.298,8
2.164,6
5.136,3
5.763,3
725,2
171
Tabela D.20 Composio do biogs nos reatores acidognico e metanognico nos testes
realizados com efluente da suinocultura, em cada condio estudada.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Hidrognio
(%)

(%)
Metano reator metanognico (%)
2,9
0,0
3,5
6,1
5,8
5,9
7,2
10,0
0,0
0,0
19,7
22,3
6,7
20,9
22,2
0,0
0,5
3,7
7,4
6,6
8,4
8,6
8,4
16,1
0,0
0,0
16,3
21,1
16,6
19,1
4,5
2,3
5,8
3,0
8,1
15,5
8,4
0,0
0,0
5,8
22,8
14,1
14,0
14,0
15,4
23,6
16,8
11,4
3,3
2,6
2,7
1,8
5,4
2,5
2,8
2,4
4,9
4,7
2,3
1,3
5,0
2,4
1,0
3,3
0,8
2,3
3,8
0,9
3,7
0,8
3,0
0,4
6,2
5,8
3,6
4,3
9,9
8,8
9,9
8,5
8,9
11,8
9,4
7,1
10,5
14,9
14,8
13,9
3,0
2,9
0,2
3,2
0,7
0,4
0,7
2,8
37,6
31,6
34,9
35,2
39,6
42,3
41,7
40,5
52,1
46,7
46,8
50,5
43,9
50,1
32,2
34,9
58,1
37,4
51,8
50,4
62,7
52,2
57,7
57,6
57,3
49,7
49,7
49,5
62,6
56,5
56,7
55,0
48,8
48,3
47,6
59,5
62,0
54,8
58,7
54,3
61,7
56,0
52,1
59,1
56,0
55,4
58,2
59,7
172
Tabela D.21 Valores das mdias e desvios padro dos componentes do biogs produzido com
efluente da suinocultura em cada condio testada.
pH
T (C)
Ambiente
5,0
35
55
Ambiente
6,0
35
55
Amostra
Mdia
Desvio padro
Hidrognio
Hidrognio
Hidrognio
Hidrognio
Hidrognio
Hidrognio
5,9
2,9
37,9
21,3
3,1
43,4
7,9
1,9
52,2
6,2
7,1
54,7
8,2
11,1
54,3
14,3
1,6
56,7
3,0
1,1
3,8
10,7
1,6
7,4
3,0
1,4
8,1
9,1
2,5
4,7
5,1
2,9
5,6
4,4
1,3
3,0
Figura D.1 Cromatograma do biogs produzido no reator acidognico na temperatura de 35C e

no valor de pH de 5,0.
173
Figura D.2 Cromatograma do biogs produzido no reator metanognico na temperatura de 35C

e no valor de pH do afluente de 5,0.

Proposta de Metodologia para Avaliacao Da AHE

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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

INSTITUTO DE PESQUISAS HIDRULICAS

PROPOSTA DE METODOLOGIA PARA DETERMINAO DA

Tese submetida ao Programa de Ps Graduao em Recursos Hdricos e Saneamento Ambiental

Orientador: Prof. Dr. Luiz Olinto Monteggia

Nunca deixem que lhe digam

2.1. Bioenergia e biomassa

2.2.1. Produo biolgica de hidrognio

2.2.1.1. Biofotlise utilizando algas e cianobactrias

2.2.1.2. Fotodecomposio de compostos orgnicos por bactrias fotossintticas

2.2.1.3. Produo de hidrognio por meio da fermentao de compostos orgnicos

2.2.1.4. Sistemas hbridos utilizando bactrias fotossintticas e bactrias fermentativas

2.2.2. Fatores que afetam a produo de hidrognio

2.2.2.4. Caractersticas do lodo

2.2.2.5. Composio do efluente

2.2.2.6. Meios nutricionais

2.2.3. Configurao dos reatores

2.3. Testes em batelada para a avaliao da atividade de microrganismos anaerbios

3.1. Objetivo Geral

3.2. Objetivos Especficos

4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de

5 - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos orgnicos

6 - Influncia do controle de pH na produo de hidrognio a partir da glicose

7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir de

4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de lodos

Figura 02 - Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

Figura 03 - Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

Figura 04 Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

Figura 05 Valores da AHE em funo de diferentes valores iniciais de DQO e pH para a

Figura 06 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores

Figura 07 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores

Figura 08 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores

Figura 09 Volume de hidrognio produzido em funo da DQO adicionada nos valores

Figura 14 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a

Figura 15 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a

Figura 16 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a

Figura 17 - Valores do pH final do mixed liquor em funo da DQO inicial, para a

Figura 18 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT

Figura 19 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT

Figura 20 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT

Figura 21 Grau de acidificao em funo da DQO inicial para a concentrao de SVT

5 - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos orgnicos

Figura 02 AHE do efluente protico em funo dos valores de DQO testados

Figura 04 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da

Figura 05 Volume de hidrognio produzido por massa de matria orgnica em funo da

Figura 09 Valores do grau de acidificao em funo da DQO inicial, para cada

6 - Influncia do controle de pH na produo de hidrognio a partir da glicose

Figura 02 Concentrao dos cidos actico propinico e butrico em funo do valor do

7 - Efeito do pH e da temperatura na concentrao de hidrognio produzido a partir de efluentes

Figura 03 Concentrao mdia de metano no biogs formado no reator metanognico

4 - Proposta de metodologia para determinao da atividade hidrognica especfica de lodos

Tabela 02 Concentraes de AGV antes da adio do substrato orgnico, para cada

Tabela 03 Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

Tabela 04 Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

Tabela 05 Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

Tabela 06 - Concentrao dos AGV para os valores iniciais de DQO e de pH estudados na

5 - Determinao da atividade hidrognica especfica de diferentes substratos orgnicos

Tabela 02 Caractersticas dos substratos orgnicos testados.

6 - Influncia do controle de pH na produo de hidrognio a partir da glicose

Tabela 02 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial

Tabela 03 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial

Tabela 04 Porcentagem de hidrognio obtido nos testes com o valor do pH inicial

Tabela 05 Grau de acidificao obtido para cada valor de pH testado.