VIROLOGA:

VIROLOGA Dr. Amrico Leyva Rojas

EVOLUCIN VIRAL:
EVOLUCIN VIRAL Desde principios de la dcada de
1950, los virlogos observaron la importancia
potencial de los estudios evolutivos, en particular,
el anlisis de la variacin viral (diferentes
caractersticas fenotpicas, como tamao de placa,
termosensibilidad o rango de hospedadores) y su
asociacin con virulencia y patogenia. Pero la
limitada calidad y cantidad de informacin til que
se tena por entonces restringa el estudio de la
evolucin, ya que en virologa, adems de la
ausencia de fsiles virales, las caractersticas
fenotpicas antes mencionadas tienen una utilidad
limitada. Hoy, en cambio, es un tiempo promisorio
para el estudio de la evolucin viral, debido al
incremento significativo de la informacin
disponible como resultado de las continuas mejoras
en las tcnicas moleculares (fundamentalmente el
secuenciamiento de nucletidos) y en el desarrollo
de instrumentos para el anlisis filogentico.
INTRODUCCIN:
INTRODUCCIN El estudio de los virus representa
un importante apartado dentro de la patologa
infecciosa. Entre los virus ms representativos

destacan el virus causante de la gripe, el virus del

SIDA, el de la hepatitis, etc. Las caractersticas
tcnicas de un laboratorio de virologa son las
siguientes: Deber tener un primer nivel o nivel
bsico en el que slo se realizan tcnicas
serolgicas. Un segundo nivel o intermedio en el
que adems se aslan y cultivan los virus ms
frecuentes. Un tercer nivel en el que se dispone de
alta tecnologa para realizar todo tipo de estudios
de virus. Todo laboratorio de virologa, dado el
potencial patgeno con el que se trabaja, debe
seguir estrictamente las normas de seguridad y
prevencin; estas normas esencialmente son las
siguientes: a) Todas las muestras deben
manipularse como si fuese material de elevado
riesgo patolgico. b) El personal debe seguir
vacunaciones y controles mdicos peridicos. c)
Acceso restringido a personal capacitado, y
sealizacin clara de "zona peligrosa". d) Las
normas para el laboratorio de bacteriologa se
debern extremar en stos. Ejemplo, no comer, no
beber, usar guantes, etc. e) Usar guantes,
mascarillas, batas, lavado exhaustivo de manos. f)
Deben poseer sistemas de esterilizacin autoclave,
cabinas de incineracin, etc., para esterilizar
cualquier producto antes de ser desechado. Equipo
apropiado para conservacin y almacenamiento de
muestras.

INTRODUCCIN:
INTRODUCCIN Los virus son los responsables de
numerosas enfermedades en los seres humanos;
como trmino medio una persona sufre al ao unas
cuantas infecciones vricas y a lo largo de su vida
unas 200, con lo que supone un grave perjuicio
econmico por el coste en asistencia mdica y
medicamentosa, as como falta de productividad de
los pacientes en sus respectivas ocupaciones. Los
virus de bacterias se llaman bacterifagos, otros
virus infectan animales y vegetales. Los
bacterifagos proporcionan a los microbilogos un
modelo para el estudio de los virus y de la biologa
molecular.
LOS VIRUS:
LOS VIRUS A fines del siglo pasado se cumplieron
algo ms de cien aos del aislamiento del primer
agente infeccioso que fuera bautizado con el
nombre de virus. Nombre genrico que fue luego
aplicado a cada agente transmisible capaz de
atravesar los filtros que retenan a las bacterias. De
ese hecho surgi el nombre de virus filtrables, con
el que se los conoci originariamente. Con el
transcurso del tiempo perdieron el aditamiento de
filtrables, dado que esta propiedad no es exclusiva
de los virus. En cambio surgi claramente la nocin

de su parasitismo absoluto, ya que no se

reproducen fuera de una clula viva.
PowerPoint Presentation:
Los virus estn ampliamente distribuidos en la
naturaleza, afectando a los organismos de los reinos
animal y vegetal, protistas, hongos y virus.
Incapaces de vida independiente. Han sido aislados
de plantas superiores, algas, hongos, bacterias,
protozoarios, invertebrados, anfibios, reptiles,
peces,. aves y mamferos. Debido a su capacidad
para producir enfermedad, son causa de epidemias
severas en el hombre y/o en los animales,
ocasionando graves problemas de salud pblica y
cuantiosas prdidas econmicas, cuando afectan al
ganado o a las plantas que se utilizan como
alimento.
DEFINICIONES DE VIRUS:
DEFINICIONES DE VIRUS Los virus son partculas
elementales con vida y lnea germinal propia,
formados por un solo tipo de cido nucleico y
protenas (glico y/o lipo). Son parsitos absolutos y
agentes infecciosos generalmente causantes de
enfermedad. Unidades infecciosas que contienen
RNA o DNA encerrado en una cubierta protectora.
Unidades infecciosas con independencia gentica
que contienen RNA o DNA como genoma asociado a

macromolculas, fundamentalmente polipptidos,

que definen su estructura y capacidad de asociarse
a la clula que infectan. Son sistemas bioqumicos
complejos.
PowerPoint Presentation:
Tambin las hay ms simples o ingeniosas como: Un
virus es un paquete proteico o liproteico de cido
nucleico genmico. Un virus es un virus (Lwoff). Los
virus son las vctimas de la ignorancia a las que se
les atribuye ser la causa de cualquier enfermedad.
Queda como un ejercicio individual elegir aquella
definicin que ms se adapte a la imagen mental
evocada por la palabra virus. Eso s, no hay que
olvidar que la elegida debe diferenciarlos
claramente de otros microorganismos o agentes
infecciosos.
PROPIEDADES GENERALES DE LOS VIRUS:
PROPIEDADES GENERALES DE LOS VIRUS Los virus
son los agentes infecciosos ms pequeos hasta
ahora conocidos. Casi todas las formas de vida
(animales, plantas y bacterias) son susceptibles de
ser infectados por determinados virus. Son tres las
principales propiedades que diferencian a los virus
de otros microorganismos: 1. Pequeo tamao. Los
virus son ms pequeos que otros organismos,
oscilando su tamao entre los 10 y los 300 nm, a

diferencia de las bacterias, que tienen un dimetro

aproximado de 1.000 nm o de los eritrocitos, con
7.500 nm. 2. Genoma. El genoma vrico puede ser
DNA o RNA; los virus poseen un nico tipo de cido
nucleico. 3. Metablicamente inertes. Carecen de
actividad metablica fuera de la clula husped; no
poseen ribosomas ni otro tipo de estructura de
sntesis proteica, si bien algunos encierran en su
partcula uno o ms enzimas; por todo ello, los virus
no pueden multiplicarse en medios inanimados,
sino slo en el interior de clulas vivas. Sin
embargo, una vez dentro de la clula el cido
nucleico (genoma vrico) es capaz de replicar nuevas
partculas vricas.
CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS VIRUS:
CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS VIRUS Los
virus son microorganismos visibles tan slo con el
microscopio electrnico, pasan a travs de los poros
de filtros que no permiten el paso de las bacterias,
carecen de toda estructura citoplasmtica y
membranosa, as como de todos los orgnulos
celulares y enzimas. Los virus slo se reproducen
dentro de las clulas de animales, vegetales y otros
microorganismos, por eso se les considera como
parsitos obligados. Son incapaces de generar
energa o de sintetizar protenas, dependiendo de
las clulas del hospedador para realizar sus

funciones vitales. Los genes vricos poseen

informacin gentica para la reproduccin y para
apoderarse de los sistemas generadores de energa
y de sntesis de protena de la clula hospedadora.
El material gentico vrico es, o bien ADN, o ARN y
nunca ambos, a diferencia de la clula
hospedadora. El material gentico est encerrado
en una cubierta proteica muy especializada que
protege el virus cuando est fuera de la clula del
hospedador, adems de servir de vehculo de
entrada en una determinada clula. El virus
completo, maduro e infectivo se denomina virin.
Los virus causan multitud de enfermedades
infecciosas agudas y algunas de tipo crnico.
Durante el periodo de reproduccin en las clulas
hospedadoras el virus puede causar enfermedades.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES:
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES 1) Los virus son
partculas compuestas de un centro que contiene
DNA o RNA (pero no los dos), cubierto por una
cpside protenica protectora. Algunos virus
adems tienen una membrana lipoprotenica
exterior, llamada envoltura. 2) Los virus deben
reproducirse (replicarse) dentro de las clulas,
porque no pueden generar energa o sintetizar
protenas; por esta razn se les llama "parsitos
intracelulares obligados". 3) Los virus se replican de

una manera diferente a la de las clulas; es decir, no

experimentan fisin binaria. El cuadro compara
algunos de los atributos de virus y clulas.
PowerPoint Presentation:
Tamao comparativo de los virus con otros agentes
infecciosos Glbulo rojo = 7 u = 7.000 um
Milimicron (mu) nanometro (um) : 10 -9 metros
Tamao promedio de los virus: 20 300 um
Tamao promedio de las bacterias : 0.7 10 um
Linfocito: 10 um
ESTRUCTURAS MORFOLGICAS:
ESTRUCTURAS MORFOLGICAS
PowerPoint Presentation:
a) b)
ESTRUCTURAS ULTRAMICROSCPICAS:
Virus DNA: Virus RNA: ESTRUCTURAS
ULTRAMICROSCPICAS
ESTUCTURA DE UN VIRION. SU ACTIVIDAD
BIOLGICA:
Nucleocapside Nucleoide Cpside Envoltura ADN
ARN Informacin gentica Infectividad Proteccin
del nucleoide Unin a receptores celulares
Determinantes antignicos Proteccin del nucleide

Unin a receptores celulares Determinantes

antignicos en glicoprotenas Protenas
Lipoprotenas ESTUCTURA DE UN VIRION. SU
ACTIVIDAD BIOLGICA
COMPARACIN DE VIRUS Y CLULAS :
COMPARACIN DE VIRUS Y CLULAS Propiedad
Virus Clula Tipo de cido nucleico DNA o RNA, pero
no los dos DNA y RNA Proteinas Algunas Numerosas
Membrana lipoprotenica Envoltura presente en
algunos virus. Membrana celular presente en todas
las clulas. Ribosomas Ausentes* Presentes
Mitocondrias Ausentes Presentes en clulas
eucariontes Enzimas Ninguna o unas cuantas
Numerosas Multiplicacin por fisin binaria No Si (la
mayora de las clulas) Las arenavirus tienen
algunos ribosomas no funcionales
PowerPoint Presentation:
DIFERENCIAS ENTRE VIRUS. BACTERIAS,
MICOPLASMAS, CLAMIDIAS Y RICKETTSIAS Virus
Rickettsias Clamidias Micoplasmas Bacterias Acidos
nucleico Fisin binaria Enzimas metenergtico
Ribosomas Replicacin en medios inertes Tamao
ADN o ARN No No No* No 20-300 um Ambos + + +
No 1 um Ambos + - + No 300 um Ambos + + + + 250
um. Ambos + + + + 0.7 10 um Algunos virus

poseen ribosomas de origen celular. Por ejemplo

arenavirus.
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS DNA:
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS DNA Familia de virus
Envolvura Simetra de la cpside Tamao de la
partcula (nm) DNA PM (x10 6 ) Estructura del DNA*
Virus importantes en medicina Parvovirus No
Icosadrica 22 2 TS, lineal Virus B19 Papovavirus No
Icosadrica 55 3 a 5 TD, circular superenrollado
Virus del papiloma Adenovirus No Icosadrica 75 23
TD, lineal Adenovirus Hepadnavirus Si Icosadrica
42 1.5 TD, circular incompleta Virus de la hepatitis B
Herpesvirus Si Icosadrica 100+ 100 a 150 TD, lineal
Virus del herpes simple, virus de varicela-zoster,
citomegalovirus y virus de Epstein-Barr Poxvirus Si
Compleja 250x400 125 a 185 TD, lineal Virus de la
viruela y virus de la vaccinia * TS, tira sencilla; TD,
tira doble + La nucleocpside de los herpesvirus
tiene 100 nm, pero su envoltura vara de tamao. El
virus entero puede ser tan grande como 200 nm de
dimetro.
CLASIFICACIN DEL DNA DE VIRUS ANIMALES::
CLASIFICACIN DEL DNA DE VIRUS ANIMALES:
FAMILIA ESTRUCTURA DEL VIRIN ESTRUCTURA Y
PESO MOLECULAR DEL GENOMA MIEMBROS
REPRESENTATIVOS Parvovirus Hepatitis B

Papovavirus Adenovirus Virus del herpes Poxvirus

Cbica, desnuda Cbica, con cubierta Cbica,
desnuda Cbica, desnuda Cbica, con cubierta
Helicoidal, con cubierta cu lineal (1-3x10 6 ) cd
ciruclar (2x10 6 ), brecha en una cadena; protena
unida cd circular (3-5 x 10 6 ) cd lineal (20-25x10 6 );
protena unida cd lineal (80-130x10 6 ) cd lineal
(160-200x10 6 ) Virus diminuto de ratn; adenovirus
relacionados Virus de la hepatitis B en seres
humanos, virus de la hepatitis woodchuck
Papilomavirus , poliomavirus (ratn), SV40 (mono)
Virus de la enfermedad respiratoria humana y
animal Tipos de virus del herpes simple 1 y 2; virus
de la varicela zoster; citomegalovirus ; virus de
Epstein- Barr ; virus del herpes humano 6, virus del
herpes humano 8 (sarcoma de Kaposi Viruela;
vaccinia ; molusco contagioso; virus de fibroma y
mixoma de conejo Abreviaturas: cu, de cadena
nica; cd, de cadena doble.
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS MAS IMPORTANTES
CLNICAMENTE:
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS MAS IMPORTANTES
CLNICAMENTE Familia Genero Enfermedad
causada cido nucleico Simetra 1 Envoltura
Piconaviridae Enetrovrus Rhinovrus Infecciones
intestinales, Polio, Resfriados RNA Icosadrica No
Reoviridae Reo virus Infecciones intestinales y

respiratorias RNA Icosadrica No Togaviridae

Alphavrus Fiebre amarilla RNA Icosadrica S
Orthomyxoviridae Influenzavrus Gripe RNA
Helicoidal S Paramyxoviridae Mobilvirus
Sarampin, Pareras, Infecciones respiratorias RNA
Helicoidal S Rhabdoviridae Lyssa virus Rabia RNA
Helicoidal S Retroviridae Ninguno Tumores de
animales RNA S Arenavirudae Arenavirus
Meningitis RNA S Bunyaviridae Bunyavirus
Encefalitis RNA S Coronaviridae Coronavrus
Infecciones respiratorias RNA si Parvoviridae
Parvovrus Coinfecciones con adenovirus DNA
Icosadrica no Papovaviridae Papillomavirus
Verrugas DNA Icosadrica No Adenoviridae
Mastadenovrus Infecciones respiratorias DNA
Icosadrica No Herpesviridae. Herpesvirus Herpes
genital, Herpes zoster, Varicela DNA Icosadrica S
Poxviridae Orthopovrus Viruela DNA Compleja
Cubierta compleja
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS ANIMALES DE RNA::
CLASIFICACIN DE LOS VIRUS ANIMALES DE RNA:
Familia Estructura del virin Estructura y peso
molecular del genoma Miembros representantivos
Hepatitis B Picornavirus Arenavirus Calicivirus
Rabdovirus Retrovirus Togavirus Ortomixovirus
Coronavirus Filovirus Bunyavirus Paramixovirus
Reovirus Cbica, con cubierta Cbica, desnuda

Helicoidal, con cubierta Cbica, desnuda Helicoidal,

con cubierta Cbica, con cubierta Cbica, con
cubierta Helicoidal, con cubierta Helicoidal, con
cubierta Helicoidal, con cubierta Helicoidal, con
cubierta Helicoidal, con cubierta Cbica, desnuda cu
circular (-) (6 x 10 3 ) cu lineal (+) (2-3 x 10 6 );
protenas unidas 2 segmentos cu lineales (+/-) (3 x
10 6 ) cu lineal (+) (2.6 x 10 6 ) cu lineal (-) (3-4 x 10
6 ) cu lineal (+), diploide (3-4 x 10 6 ) cu lineal (+) (4
x 10 6 ) 8 segmentos cu lineales (-) (5 x 10 6 ) cu
lineal (+) (5-6 x 10 6 ) cu lineal (-) (5 x 10 6 ) 3
segmentos cu lineales (+/-) (6 x 10 6 ) cu lineal (-) (68 x 10 6 ) 10 segmentos cd lineales (15 x 10 6 ) Virus
de la hepatitis humana Enterovirus humanos:
virus de polio, coxsackievirus , ecovirus ; rinovirus;
virus de fiebre aosa de bovino; hepatitis A Virus de
Lassa; virus de coriomeningitis linfoctica de ratn
Virus de exantema vesicular; virus similares al
Norwaik de seres humanos Virus de la rabia; virus
de estomatitis vesicular bovina Virus tumoral de
RNA de ratn, aves y gatos; virus visna de las ovejas;
virus de inmunodeficiencia humana (leucemia de
clulas T humanas y sndrome de inmunodeficiencia
adquirida) Alfavirus : virus de Sindbis y virus del
bosque de Semliki ; flavivirus ; virus del dengue y
virus de la fiebre amarilla; virus de la rubola; virus
de enfermedad mucosa Virus de influenza tipos A, B
y C en ser humano, cerdo y caballo Virus

respiratorio de ser humano; virus de diarrea de

becerro; virus entrico de cerdo; virus de hepatitis
de ratn Virus de Marburg y bola Virus de la fiebre
del Valle de Rift ; virus de bunyamwera ; hantavirus
Virus del sarampin; paperas; virus de la
enfermedad de Newcastle; virus del moquillo
canino Reovirus humanos; orbivirus ; virus de la
fiebre de garrapata de Colorado; virus de
enfermedad africana del caballo; rotavirus humano
BASES BIOGENTICAS:
BASES BIOGENTICAS En la siguiente discusin se
presentan las bases biolgicas y genticas de estos
fenmenos, con particular atencin a tres temas. 1.
Los distintos virus tienen estructura gentica muy
diferente y esta diversidad se refleja en sus
procedimientos de replicacin. 2. Por su tamao
pequeo, los virus han logrado un grado muy alto
de economa gentica. 3. Los virus dependen en
buena medida de las funciones de la clula husped
y por lo tanto son difciles de combatir en el campo
mdico. Sin embargo, presentan pasos singulares
en sus ciclos de replicacin que constituyen blancos
potenciales para la terapia antiviral. La ventaja de la
construccin de la partcula viral a partir de
subunidades protenica idnticas es doble: 1)
reduce la necesidad de informacin gentica y 2)
favorece el autoensamblaje; es decir, no se

requieren enzimas ni energa. De hecho, se han

acoplado partculas virales funcionales en un tubo
de ensayo mediante la combinacin de cido
nucleico purificado con protenas tambin
purificadas, en ausencia de clulas, fuente
energtica y enzimas. PROTENAS VIRALES b) Las
protenas virales desempean varias funciones
importantes. Las de la capsides protegen el material
gentico y median la adherencia del virus a
receptores especficos en la superficie de la clula
husped. Esta interaccin de las protenas virales
con el receptor celular es el principal determinante
de la especie y de la especificidad de rgano.
Algunas de las protenas interiores se asocian con el
cido nucleico, por ejemplo, cido nucleico
polimerasas, que son esenciales para la replicacin.
Las protenas similares a las histonas tienen una
funcin reguladora o pueden neutralizar la carga
negativa del cido nucleico durante el ensamblaje
de la partcula viral y tambin se localizan
internamente.
EFECTO DE LOS AGENTES FSICOS Y QUMICOS
SOBR LOS VIRUS:
EFECTO DE LOS AGENTES FSICOS Y QUMICOS
SOBR LOS VIRUS Calor . La mayora se inactivan a
56C durante 30 min. a 100C en pocos segundos.
Fro. Dada su estabilidad frente a bajas

temperaturas, muchos virus pueden almacenarse a

40 C o preferiblemente a 70 C; algunos son
parcialmente inactivados en el proceso de
congelacin y descongelacin. Sequedad. Variable;
algunos sobreviven a sta, mientras que otros
quedan inmediatamente inactivados. Radiacin
ultravioleta. Los inactiva. Cloroformo y ter. Los
virus con envoltura lipdica son inactivados,
mientras que el resto son resistentes. Este
procedimiento se utiliza como criterio de
clasificacin de los virus. Agentes oxidantes. Los
virus son inactivados por formaldehido, cloro, yodo
y perxido de hidrgeno. Fenoles. La mayora son
relativamente resistentes.
EFECTOS DEL VIRUS EN LA CLULA:
EFECTOS DEL VIRUS EN LA CLULA Los virus pueden
afectar a las clulas de tres maneras: Muerte celular
. La infeccin es letal y mata a la clula causando un
efecto citoptico (ECP). Transformacin celular . La
clula no muere, pero es transformada en otra con
caracteres de malignida (clula cancerosa).
Infeccin latente . El virus permanece en el interior
de la clula en estado de actividad potencial, pero n
produce efecto detectable sobre su funcin.
ETAPAS DEL CICLO DE CRECIMIENTO VIRAL:

ETAPAS DEL CICLO DE CRECIMIENTO VIRAL

Adherencia y penetracin por el virin precursor
Desnudamiento del genoma viral Sntesis* de
mRNA temprano** Sntesis de protena viral
temprana Replicacin del genoma viral Sntesis de
mRNA viral tardo Sntesis de protena viral tardo
Sntesis de protena viral tardo Ensamblaje de
la progenie viral Liberacin de viriones de la clula
* En algunos casos, el genoma viral es
fundamentalmente equivalente al mRNA; por tanto,
no se requiere sntesis temprana de mRNA. **
Temprano se define como el periodo anterior a la
replicacin del genoma. No todos los virus
muestran una distincin entre funciones tempranas
y tardas. En general, las protenas tempranas son
enzimas, en tanto que las tardas son componentes
estructurales del virus.
PowerPoint Presentation:
INVASION E INFECCION POR VIRUS
PowerPoint Presentation:
Por lo general, el ciclo de multiplicacin viral se
divide en las siguientes fases: a) adsorcin a la
clula husped, b) penetracin o entrada, c) rotura
de la cubierta para liberar el genoma, d) produccin
de los componentes del virin, e) ensamblaje y f)
liberacin de la clula. Esta serie de sucesos, en

ocasiones con ligeras variaciones, describe lo que se

llama respuesta productiva o ltica; empero, ste no
es el nico resultado posible de la infeccin viral,
Algunos virus entran a un tipo de relacin muy
distinto con la clula husped, en el cual no se
producen nuevos virus, la clula sobrevive y se
divide y el material gentico viral persiste de forma
indefinida en estado de latencia. Este resultado de
una infeccin se denomina respuesta no productiva,
a la cual tambin se da el nombre de lisogenia en el
caso de bacterifagos y ciertas veces se vincula con
transformacin oncgena por virus animales. (El
uso del trmino transformacin debe diferenciarse
de la transformacin del DNA bacteriano). El efecto
de una infeccin depende de la combinacin
especfica virus-husped y otros factores, como el
entorno extracelular, la multiplicidad de la infeccin
y la fisiologa y estado de desarrollo de la clula. Los
virus que slo pueden penetrar en relacin
productiva se denominan virus lticos o virulentos.
Los virus que pueden establecer ya sea una relacin
productiva o no productiva con sus clulas husped
se conoce como virus templados. Algunos virus
templados pueden reactivarse o "inducirse" para
salir del estado de latencia e ingresar a la respuesta
productiva. El hecho de que la induccin ocurra
depende de la combinacin especfica virus-

husped, la fisiologa de la clula y la presencia de

estmulos extracelulares.
Ejemplo de receptores virales::
Ejemplo de receptores virales: Virus Receptor
Funcin celular Influenza A Reovirus Adenovirus
Epstein-Barr Herpes simple Herpes humano 7 HIV
Coronavirus humano Rinovirus humano Sarampin
Virus de la polio Virus de la rabia SV40 Vaccinio
Acido silico cido silico Receptor EGF Integrina.s
CR2 Sulfato de heparina CD4 CD4 CXCR4 y CCR5
Aminopeptidasa N ICAM-1 CD46 PVR Receptor de
acetilcolina MHC I Receptor EGF Glucoprotena
Glucoprotena Sealizacin . Enlace con la matriz
extracelular Receptor de complemento
Glucoprotena Superfamilia de las
inmunoglobulinas. Superfamilia de las
inmunoglobulinas Quimiocinas receptoras Proteasa
Superfamilia de las inmunoglobulinas Regulacin de
complemento Superfamilia de las inmunoglobulinas
Sealizacin Superfamilia de las inmunoglobulinas :
Sealizacin Abreviaturas. EQF. factor de
crecimiento endotelial; HIV. Virus de
inmunodeficiencia humana: ICAM, molcula de
adhesin intercelular; MHC. complejo mayor de
histocompatibilidad; PVR, receptor del virus de la
polio.

TCNICAS EMPLEADAS EN EL DIAGNSTICO

VRICO:
TCNICAS EMPLEADAS EN EL DIAGNSTICO VRICO
1. Tcnicas microscpicas: * Microscopio ptico.
Para observacin del efecto citoptico de los virus
sobre cultivos celulares, Microscopio electrnico. 2.
Tcnicas de cultivo y aislamiento de virus:
Tcnicas de inoculacin en animales de laboratorio.
Tcnicas de inoculacin en embrin de pollo.
Tcnicas de cultivo celular. 3. Tcnicas
inmunolgicas: * Reaccin de fijacin del
complemento. * Mtodo RIA. * Mtodo ELISA. *
Hemaglutinacin e inhibicin de la
hemaglutinacin. * Determinacin de la
inmunoglobulina M. * Reacciones de neutralizacin.
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE INFECCIONES
POR VIRUS:
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE INFECCIONES
POR VIRUS Salvo raras excepciones, el diagnstico
de laboratorio de las infecciones virales es lento, de
modo que por lo general el paciente se encuentra
ya en fase de convalecencia al obtener el resultado.
Pero, aunque el diagnstico de laboratorio se
encuentra limitado en cada caso particular, es de
gran importancia en la investigacin mdica y
epidemiolgica. El virus de la viruela es una
excepcin, ya que tiene un rpido diagnstico, lo

que facilita notablemente el control de las

epidemias. El diagnstico de laboratorio se basa en
tres tcnicas fundamentales: * Aislamiento del virus
en histocultivos. * Serologa, o demostracin de
anticuerpos frente al virus. (niveles) * Demostracin
directa del virus o de antgenos vricos a partir de
frotis de las lesiones. (intra/extracelulares).
CULTIVO DE LOS VIRUS:
CULTIVO DE LOS VIRUS El cultivo de virus es un
prerrequisito esencial para su estudio.
Generalmente no se utiliza al husped natural, sino
que se recurre a animales de laboratorio o a
cultivos de clulas in vitro. La multiplicacin de los
virus en ambos sistemas permite el desarrollo de
distintos aspectos virolgicos: aislamiento,
identificacin, multiplicacin, cuantificacin y
determinacin de las propiedades biolgicas,
bioqumicas y serolgicas.
CULTIVO DE CLULAS (HISTOCULTIVO):
CULTIVO DE CLULAS (HISTOCULTIVO) Durante la
primera mitad del siglo pasado predominaba el
misticismo en el desarrollo de cultivos de clulas in
vitro. El xito dependa de condiciones
experimentales muy precisas. Por mucho tiempo
slo se lograba el crecimiento de clulas de cortes
de tejidos extirpados de animales y mantenidos en

cogulos formados por extractos de esos tejidos y

plasma o suero del mismo animal. Las
contaminaciones bacterianas impedan una
continuidad en el crecimiento.
MEDIOS DE CULTIVO DE VIRUS:
MEDIOS DE CULTIVO DE VIRUS Para mantener las
mismas condiciones fisiolgicas, de presin
osmtica, pH, as como las concentraciones
adecuadas de iones inorgnicos esenciales, in vitro
como in vivo, se precisa una solucin de sales
equilibrada (Balanced Salt solution, BSS) que es la
base de todos los medios de cultivo qumicamente
definidos. Algunos medios contienen glucosa que
proporciona los hidratos de carbono necesarios. Los
medios que se emplean en cultivo celular son los
siguientes: BSS de Hanks. BSS de Earle, con
mayor capacidad tampn que el anterior. BSS
suplementado con vitaminas, aminocidos, y otros
nutrientes para formar medios sintticos. Los
medios disponibles en el mercado ms utilizados en
virologa son: N 199. BME: Medio Basal de
Eagle. MEM: Mnimum Esential Mdium. Contiene
las concentraciones ptimas de nutrientes
esenciales, vitaminas, aminocidos, es el ms
utilizado. Se conserva a 4C. Se sabe que la luz
fluorescente va en detrimento de los medios de
cultivo, porque provoca la formacin de

fotoproductos txicos derivados de la riboflavina y

triptfano presentes en el medio. Por lo que se
recomienda que el medio lquido se conserve en la
oscuridad.
TCNICAS DE CULTIVO CELULAR:
El cultivo celular es la tcnica idnea y la ms
utilizada actualmente para el cultivo y aislamiento
de virus, pues presenta muchas ventajas sobre la
inoculacin en animales vivos y en embrin de
pollo. Los cultivos celulares son de tres tipos segn
las clulas que lo constituyen: a) Cultivos primarios:
Se obtienen clulas que proceden de un organismo
vivo. Estas clulas se obtienen por fragmentacin
del tejido y dispersin de las clulas de forma
apropiada para obtener una monocapa en la que se
reproducirn los virus. Se pueden emplear clulas
de rin de mono o de rin embrionario humano.
Las clulas as obtenidas tienen una pequea
capacidad de reproduccin aunque solamente se
pueden emplear durante 2-3 semanas. b) Lneas
celulares diploides: Constituidas por subcultivos
obtenidos a partir de cultivos celulares primarios. Se
reproducen rpidamente y no se pueden exceder
de 50 subcultivos. Ejemplo de estos son las clulas
fbroblsticas embrionarias. c) Lneas celulares
continuas o heteroploides: Son obtenidas a partir
de tumores humanos malignos o de clulas

animales tales como rin de mono, rin de

hmster, etc. Ejemplo de ellas son: lneas HeLa,
Vero, K-13. En las clulas de rin de mono rhessus
pueden aislarse, a travs de cultivos primarios, virus
como Adenovrus, Echovrus, virus de la
poliomelitis, virus Coxackie B, virus de la
Parainfluenza, virus de las paperas, virus
respiratorio sincitial. En clulas de pulmn humano,
a travs de lneas celulares diploides, se pueden
aislar virus como; Adenovirus, virus del Herpes
simple, virus de la poliomelitis, virus Coxackie B,
virus respiratorio sincitial. En clulas de pulmn
humano, a travs de lneas celulares diploides, se
pueden aislar como: adenovirus, virus del Herpes
simple, virus de la poliomelitis, virus Coxackie B,
virus respiratorio sincitial. TCNICAS DE CULTIVO
CELULAR
EMBRIN DE POLLO:
EMBRIN DE POLLO Antes de la generalizacin del
cultivo tisular se utilizaron abundantemente los
huevos frtiles de gallina. En la actualidad este
procedimiento ha perdido vigencia al quedar
reemplazado por el aislamiento del virus mediante
el citado cultivo tisular. Existen tres vas principales
de inoculacin Esquema de embrin de pollo, que
muestra las vas de inoculacin para el aislamiento
vrico. 1. En el interior de la membrana

corioalantoidea. 2. En la cavidad amnitica. 3. En la

cavidad alantoidea. Se utilizan embriones
comprendido entre los 7 y los 12 das; la edad
ptima para cada va de inoculacin depende del
desarrollo de los distintos tejidos; as, por ejemplo,
la cavidad amnitica tiene su mximo a los 10 12
das.
Sitios potenciales para quimioterapia antiviral:
Sitios potenciales para quimioterapia antiviral Sitio
de accin Medicamentos eficaces Acciones
tempranas (entrada o desnudamiento del virus)
Amantadita, rimantadina Sntesis de cido nucleico
por DNA y RNA polimerasas virales Aciclovir,
ganciclovir, vidarabina, idoxuridina, trifluridina,
foscarnet, azidotimida, dideoxiinosina,.
Didesoxicitidina y ribavirina Otras enzimas
especficas de virus En investigacin Sntesis de
proteinas dirigida de virus Interfern y metisazona
Escisin de polipptidos precursores Fase
experimental Ensamblaje de partcula, incluyendo la
protena de la matriz. En investigacin Liberacin de
la partcula por germinacin. Manipulacin gentica
CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS Y OTROS
AGENTES:
CARACTERSTICAS DE LOS VIRUS Y OTROS AGENTES
Agente cido Nucleico Cpside Envoltura Agente

Patgeno Virus DNA o RNA SI SI o NO SI Viroide RNA

NO NO SI Virusoide RNA NO NO SI Prin NO? Part .
Prot . NO SI
PowerPoint Presentation:
Mecanismo de accin Agente antiviral Espectro vial
Inhibicin del descubrimiento y penetracin virales
Amantadina Rimantadina Flu A Flu A Inhibicin de
neuraminidasa Oseltamivir Zanamivir Flu A, Flu B
Flu A, Flu B Inhibicin de polimerasa de DNA viral
Aciclovir Fanciclovir Penciclovir Valaciclovir
Ganciclovir Foscarnet Cidofovir Trifluridina HSV, VZV
HSV, VZV HSV HSV, VZV CMV, HSV, VZV CMV, HSV
resistente CMV HSV, VZV RESUMEN DE AGENTES
ANTIVIRALES:
PowerPoint Presentation:
Mecanismo de accin Agente antiviral Espectro vial
Inhibicin de transcriptasa inversa viral Cidovudina
Didesoxiinosina Didesoxicitidina Estavudina
Lamivudina Nevirapina Delavirdina Efavirenz HIV
HIV HIV HIV HIV, HBVb HIV HIV HIV Inhibicin de
proteasa viral Saquinavir Indinavir Ritonavir
Nelfinavir Lopinavir HIV HIV HIV HIV HIV Inhibicin
de sntesis proteica Interfern a HBV, HCV, HPV
Inhibicin de polimerasa de RNA Ribavirina RSV,
HCVb, fiebre de Lassa Inhibicin antisentido de
sntesis de mRNA viral Fomivirsn CMV

TIPOS DE ENFERMEDADES VIRALES:

TIPOS DE ENFERMEDADES VIRALES Basndose en
aspectos clnicos , podemos dividir de la siguiente
manera : a) INFECCIONES LOCALES .- Aqu las
lesiones celulares y la multiplicacin del virus solo
afectan el foco inicial, el virus puede afectar
primero una clula y luego pasar de una clula a
otra. b) INFECCIONES OCULTAS .- Pueden ocurrir
muchas infecciones, de tipo tanto citoltico como de
estado estable, sin que aparezca sntomas. Estas
infecciones son importantes en medicina, pues
confieren inmunidad sin enfermedad clnica, se
explican por la naturaleza del virus o el estado
inmunolgico del husped c) INFECCIONES CON
VIRUS LENTOS .- Se pueden definir como un grupo
de entidades que "crecen provocar por virus para
loe cuales los periodos de incubacin son muy
largos y las expresiones clnicas de tipo patolgico
son de progresin relativamente lenta. El signo
principal de estas infecciones es la presencia de un
agente viral oxenoma en un husped que, en ltima
instancia, sufre lesiones celulares y tisulares por
efecto del virus, as las respuestas inmunolgicas en
el husped que normalmente son eficaces para
eliminar los virus comentes no son estimuladas o
resultan inoperantes, adems, en algunos casos
puede producir verdadera lesin celular y tisular a

consecuencia de la propia respuesta inmune, tales

infecciones por virus lentos se han observado en el
hombre y en los animales.
RESPUESTA INMUNITARIA EN INFECCIONES
VIRALES:
RESPUESTA INMUNITARIA EN INFECCIONES VIRALES
Los virus forman una variedad especial de agentes
infecciosos, que son parsitos nter celulares
obligados. Estos se diferencian de los dems tipos
de microorganismos por su: * Organizacin, *
Composicin y * Mecanismo de duplicacin. La
partcula viral completa se puede considerar como
un fragmento bsico de subsnela gentica, de DNA
RNA, rodeada de una capa protectora de
protenas que son agentes de transmisin de una
clula husped a otra. El espectro de enfermedades
producidas va desde las infecciones virales agudas,
en las cuales la interaccin de virus y respuesta
inmune del husped origina aclaramiento del virus
inmunidad, o bien diseminacin, infeccin y
muerte, hasta formas ms crnicas de infeccin
viral, en !as cuales tienen lugar una reproduccin
viral prolongada, junto con respuesta inmune, causa
de lesin y origen de enfermedad. Se lograron
erradicar muchas infecciones virales empleando
vacunas muy eficaces que estimulan las respuestas
inmunolgicas especificas. Es probable que se

dispongan pronto, en teraputica, de otros tipos de

agentes que estimulan el sistema inmunolgico
inespecfico, por ejemplo, inmunipotenciadores.
ALTERACIONES INDUCIDAS EN LAS CLULAS
HUSPED:
ALTERACIONES INDUCIDAS EN LAS CLULAS
HUSPED La multiplicacin de los virus en cultivos
de clulas puede comprobarse por procedimientos
bioqumicos o serolgicos que indican el
incremento de macromolculas virales, como
enzimas o antgenos, o de partculas virales. Sin
embargo, para los cultivos que crecen adheridos a
un soporte, los mtodos usados son ms sencillos y
consisten en la evaluacin de alteraciones
morfolgicas de las clulas, modificacin de sus
membranas (hemadsorcin) o por fenmenos de
interferencia viral.
EFECTO CITOPTICO (CPA)::
EFECTO CITOPTICO (CPA): La mayora de los virus
producen alteraciones en las clulas donde
multiplican, de modo tal que los cultivos infectados
desarrollan con el transcurso del tiempo cambios en
su morfologa, que ponen en evidencia la accin
ejercida por el virus sobre la clula. Dichas
alteraciones se conocen con el nombre de accin o
efecto citoptico (ACP), siendo caractersticas de

cada sistema virus-clula. Asimismo, los virus

responsables de esos cambios son llamados
citopatognicos.
PowerPoint Presentation:
Las alteraciones que generalmente se observan son:
Destruccin de la monocapa ; con redondeamiento
y desprendimiento de las clulas debido a la muerte
provocada por el virus. Formacin de clulas
multinucleadas ; llamadas sincicios o policariocitos.
Desarrollo de cuerpos de inclusin ; agrupaciones
de macromolculas virales que se observan en el
citoplasma o en el ncleo, donde el virus de rabia
genera los corpsculos de Negri. Transformacin ; el
cultivo infectado presenta focos de clulas que
crecen en varios planos, los que inducen tumores al
ser inoculados en animales.
PowerPoint Presentation:
Los descubrimientos que posibilitaron simplificar el
cultivo de clulas fueron: El uso de antibiticos para
prevenir la contaminacin bacteriana. La eficacia de
la tripsina, una enzima proteoltica que permite
disociar las masas de tejido en sus clulas
individuales. EL desarrollo realizado por Eagle de
medios definidos que permiten el crecimiento de
muchos cultivos celulares.

PROPIEDADES DISTINTIVAS DE LOS VIRUS EN

RELACIN CON OTROS MICROORGANISMOS:
PROPIEDADES DISTINTIVAS DE LOS VIRUS EN
RELACIN CON OTROS MICROORGANISMOS
Propiedad Bacteria Mollicutes Rickettsias Clamidias
Virus Crecimiento en medio artificial S S No No No
Divisin binaria S S S S No Contiene: DNA + RNA
DNA o RNA S No S No S No S No No S
Reproduccin por AN aislado No S No No S 1
Variacin de tamao S S S S No Sistema
energtico S S S S No Ribosomas S S S S No 2
Contiene ac. Murmico S 3 No S S No No es una
propiedad absoluta, slo la presentan los virus RNA
positivos y los DNA virus. Los arenavirus incluyen
ribosomas en sus partculas, pero no son
funcionales. Hay excepciones.
UBICACIN DE LOS VIRUS EN RELACIN A OTROS
AGENTES:
UBICACIN DE LOS VIRUS EN RELACIN A OTROS
AGENTES RICKETTSIAS CLAMIDIAS VIRUS VIROIDES
VIRUSOIDES PLASMIDOS Y EPISOMAS
TRANSPOSONES ELEMENTOS DE INSERCIN
CONCLUSIONES PASADO, PRESENTE Y FUTURO DE
LA VIROLOGA:
CONCLUSIONES PASADO, PRESENTE Y FUTURO DE
LA VIROLOGA La virologa como toda ciencia

biolgica experimental se ha visto beneficiada por

la aplicacin de las tcnicas moleculares que ensea
la ingeniera gentica. As es como en los ltimos
aos se ha ido develando la intricada relacin del
virus con la clula que parasita, en especial, la
exquisita regulacin de los genes virales, que
deviene en la produccin de nuevos virus. Este
conocimiento ha permitido, por ejemplo, la sntesis
de molculas antivirales que bloquean en forma
especfica pasos de la replicacin, sin afectar al
husped. Dentro de este contexto, los virus no slo
han sido y son responsables de muchas
enfermedades, sino que fueron las herramientas
tiles que permitieron el desarrollo de las tcnicas
moleculares, las que a su vez sirven para su estudio.
PowerPoint Presentation:
Dentro del campo de la virologa mdica, dichas
tcnicas se aplican en el diagnostico virolgico en
estudios de patogenia, anlisis epidemiolgico, en
la produccin de vacunas. A la vez han permitido
rastrear, en muchos casos, al agente responsable de
infecciones emergentes. Los libros y los artculos
que tratan sobre los virus se han enriquecido en
nuevas terminologas (muchas de las cuales ni
siquiera se han traducido), que reflejan el uso
generalizado de las tcnicas moleculares. El
estudiante de ciencias mdicas debe realizar un

esfuerzo para adquirir los conocimientos bsicos

que le permitan la cabal comprensin de algunas
expresiones, como hibridacin molecular, sondas
genticas, expresin de genes en organismos
inferiores, transcripcin reversa, reaccin en cadena
de la polimerasa y muchas otras.

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