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Resumen
En este presente informe se presentaran los resultados obtenidos de la
experiencia de cromatografia liquida de alta resolucin HPLC, Practico n 2
realizado en el laboratorio de analisis instrumental, en las proximas paginas se
mostraran los metodos realizados, resultados y manejos de estos, y por ultimo las
distintas discusiones y conclusiones de este practico.
Introduccin
La cromatografa lquida de alta resolucin, HPLC, es un mtodo de separacin de
mezclas de analitos en el cual la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una
columna de dimensiones reducidas, utilizando una bomba de alta presin para esta
funcin.
La separacin se relaciona principalmente con el coeficiente de reparto de los analitos
entre las fases mvil y estacionaria.
La cromatografa liquida de alta eficacia es la tcnica analtica de separacin ms
ampliamente utilizada en la actualidad debido a su sensibilidad, a su adecuacin para
realizar determinaciones cuantitativas exactas y a su gran aplicabilidad a diferentes
tipos de sustancias.
Un equipo de HPLC, consiste esencialmente de un sistema de inyeccin, un reservorio
para el disolvente, una bomba peristltica, una columna, un detector y un aparato de
registro.
La separacin se relaciona principalmente con el coeficiente de reparto de los analitos
entre las fases mvil y estacionaria.
Materiales
-Matraces aforados de 100 y 50 ml.
- Pirinolas
-Jeringa
-Agua destilada
-Solucin patrn de cafena 100 ppm
-Bolsas de t
-Micropipetas
-Vasos precipitados
-Agua hirviendo
-Equipo HPLC; con fase estacionaria de y fase mvil de.
Mtodo Experimental.
1. Preparacin de soluciones acuosas de cafena, o patrones de
calibracin de concentracin con 0-10- 30- 40- 60- 80 y 100 ppm
(mg/L)
Bolsitas de t
Masar vaso
precipitado vacio
Romper bolsita de t y masar un 1
gramo de este.
Colocar vaso precipitado con
1 gramo de t en la estufa,
durante 2 horas.
T seco.
3. Preparacin soluciones de t
Agregar 10 ml de infusion de
t.
Enrazar hasta 50 ml
Concentracin de cafena
Resultados
Clculo del porcentaje de humedad
En la Tabla 1. se presentan los datos obtenidos:
Tabla 1:
Masa vaso pp vaco
48.1729g
1.0011g
49,1058g
0.9329 g
0,0682
Concentracin
(ppm)
0
10
30
40
60
80
100
Tabla 3:
Solucin
Concentracin
(ppm)
0
10
30
40
60
80
100
1
2
3
4
5
6
7
rea de la
seal
15671
274705
710057
881071
1232543
1808128
2072478
rea
2000000
rea de la seal
1500000
y = 20747x + 50782
R2 = 0,9944
1000000
500000
0
0
50
100
150
Concentracin (ppm)
Lineal (rea de la
seal)
Solucin del t
rea
Muestra
688164
4.44
Contra muestra
809233
4.44
Concentracin muestra:
Concentracin contramuestra:
Discusiones
Conclusiones
Este practico se llev a cabo siguiendo todas las instrucciones tanto
del profesor, ayudante como tambien del profesional que estaba a cargo
del equipo de cromatografia liquida, percatandose de seguir todos los
procedimientos de seguridad para que este practico saliera bien en todos
los aspectos.
Si se presentasen errores en algunos resultados se deberia a una
mala manipulacion de parte de la estudiante o al la calibracion de algun
equipo utilizado
Biblografa.
-
Anexos
1.- Clculo porcentaje de humedad
1,0011 100 %
0,0682 x %
x= 6,813 %
30,72 2g
x 1000g
x= 15360 mg/kg
36,557 2 g
x 1000 g
x= 18278,5 mg/kg