ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE FSICA Y MATEMTICAS

CARRERA DE BIOFSICA
ESPECTROSCOPIA
PRINCIPALES MTODOS PTICOS DE
ANLISIS
Nombre: Diana Aguay
Cdigo: 496
Fecha: El 03 de abril del 2014
Riobamba - Ecuador 2014

MTODOS PTICOS DE ANLISIS

Introduccin
Los mtodos pticos de anlisis cubren un amplio campo de aplicacin incluyndose
bajo su denominacin todos aquellos que implican la medida de la radiacin
electromagntica emitida por la materia o que interacciona con ella. (Hernndez
Hernndez & Gonzlez Prez, 2002)
Se incluyen, por lo tanto, todos los campos del espectro electromagntico desde los
rayos gamma a las ondas de radio. Tambin se estudian todas las formas de
obtencin de radiacin electromagntica, as como su interaccin con la materiaincluyndose la emisin, la absorcin, la dispersin (<<scattering>>), la refraccin, la
dispersin refractiva (<<dispersin>>), la reflexin, las interferencias, la difraccin y la
polarizacin, y se describen los mtodos basados en cada uno de los mecanismos.
(Olsen, 1990)
Actualmente el uso de mtodos pticos est generalizado, debido a su rapidez, a la
gama de instrumentacin disponible y sus grandes posibilidades de automatizacin.
En muchos casos es posible la resolucin de un problema analtico sin necesidad de
recurrir a mtodos de otro tipo. (Hernndez Hernndez & Gonzlez Prez, 2002)
Resulta adecuado dividir los mtodos pticos de anlisis en dos tipos fundamentales,
los espectroscopios y los no espectroscpicos.

Los mtodos espectroscpicos se basan en la medida de la intensidad y la

longitud de onda de la energa radiante. La caracterstica comn a todos los
mtodos espectroscpicos es que se miden espectros y adems, que estos
son debidos a transiciones entre estados de energa caractersticos.
Por otro lado, los mtodos no espectroscpicos no miden espectros ni estn
relacionadas con las transiciones entre estados de energa caractersticos sino
que se basan en una interaccin entre la radiacin electromagntica y la
materia que produce como resultado un cambio en la direccin o en las
propiedades fsicas de la radiacin electromagntica. Los mecanismos
especficos de la interaccin que intervienen en los mtodos no
espectroscpicos son la refraccin, reflexin, la dispersin refractiva, la
dispersin, las interferencias, la difraccin y la polarizacin. Son ejemplos de
tcnicas no espectroscpicas la refractometra, la difraccin de rayos X y la
polarimetra.
Los mtodos pticos ms utilizados son los espectroscpicos y en la mayora
de ellos el mecanismo de interaccin se basa en la absorcin o emisin de
energa. Los mtodos espectroscpicos se identifican fcilmente ya que llevan
el prefijo espectro.
Podramos decir que dos de los mtodos espectroscpicos son excepcionales
en el sentido de que el principal mecanismo de interaccin no es ni la
absorcin ni la emisin, stos son la espectroscopa Raman, que se basa en

un tipo especial de interaccin de dispersin, y la espectropolarimetra que

mide la polarizacin en funcin de la longitud de onda. (Olsen, 1990)
Propiedades de la radiacin electromagntica
Podemos definir la radiacin electromagntica como la propagacin de energa a
travs del espacio sin el soporte de materia. Clsicamente el comportamiento de la
radiacin se ha atribuido a su naturaleza ondulatoria, ahora bien, existen fenmenos,
como el efecto fotoelctrico, que no pueden explicarse por la teora ondulatoria, y que
requieren que la radiacin se comporte como pequeos haces de energa o como
partculas, llamadas fotones. Existen algunos fenmenos como la propagacin de la
luz en lnea recta, la reflexin, la refraccin y la dispersin de Rayleigh, que pueden
explicarse por ambas teoras, ondas o fotones. (Olsen, 1990)
Propiedades ondulatorias
La fsica clsica define la radiacin electromagntica como un campo de fuerzas en el
espacio con su frecuencia caracterstica, su velocidad y su intensidad. Se produce
radiacin siempre que se acelera una partcula que se encuentra en un campo
elctrico y/o magntico. El campo produce entonces una perturbacin que se mueve
en el vaco con la velocidad de la luz y en otros medios con una velocidad algo menor.
(Olsen, 1990)

(Olsen, 1990)
En la figura 1-1 se representa el tipo ms sencillo de tren de onda electromagntico,
que corresponde a uno que esta polarizado en un plano y de un nica frecuencia. El
que sea polarizado en un plano significa que el vector de campo elctrico <<E>> vibra
en un nico plano y que el vector del campo magntico <<H>> vibra en otro plano
perpendicular al del campo electico. En la prctica la mayor parte de la radiacin
electromagntica no est polarizada, esto significa que presenta vectores elctricos y
magnticos en todas las direcciones perpendiculares a la direccin de propagacin. Al
atravesar la materia la radiacin puede interaccionar con alguna partcula que tenga
una carga elctrica c un momento magntico producindose una transferencia de
energa entre la radiacin y la materia. (Olsen, 1990)
Para caracterizar una onda pueden usarse los siguientes parmetros:
Longitud de onda : es la distancia entre dos puntos de la onda que han pasa un
ciclo completo; esto es, por ejemplo la distancia entre mximos o mnimos

sucesivos. Se expresa en cualquier unidad de longitud, siendo la ms frecuente

el metro, centmetro, angstrom, nanmetros y micrmetro.
Frecuencia : es el nmero de ciclos por unidad de tiempo; por ejemplo, veces
que pasa por un determinado punto en 1 segundo. La unidad de frecuencia es el
segundo reciproco s-1 o Hertz (Hz).
Nmero de onda : que se define como el inverso de la longitud de onda. Su
unidad ms utilizada es el cm-1.
La relacin entre los parmetros mencionados es:

Siendo c la velocidad de propagacin, que en el vaco es de 2,9979*1010 cm/s.

Aunque cualquiera de los trminos anteriores puede utilizarse para caracterizar una
onda, es necesario indicas que la verdadera caracterstica de una radiacin es la
frecuencia, ya que la velocidad y la longitud de onda dependen del medio en el cual se
propaga la onda.
Hasta ahora se ha considerado la radiacin desde el punto de vista ondulatorio. Sin
embrago, para describir cuantitativamente determinadas interacciones con la materia
se hace necesario considerarla como un flujo e partculas o corpsculos, llamados
fotones. La energa del fotn es proporcional a la frecuencia de la radiacin (relacin
de Einstein- Planck):

Donde h es la constante de Planck (6,63*10-34J.s).

La relacin anterior indica que la energa de un fotn de radiacin monocromtica ideal
(una sola frecuencia) depende nicamente de su longitud de onda o de su frecuencia,
de forma que un haz de radiacin puede ser ms o menos intenso en funcin de la
cantidad de fotones por unidad de rea, pero la energa del fotn es siempre la misma
para una determinada frecuencia.
En la figura 2-2 se muestra las regiones ms importantes del espectro
electromagntico. Es necesario tener en cuenta que las zonas de separacin entre
regiones no estn establecidas de modo rgido, y al pasar de una regin a otra no
existen discontinuidades en las propiedades de la radiacin. (Hernndez Hernndez &
Gonzlez Prez, 2002)

(Hernndez Hernndez & Gonzlez Prez, 2002)

Interaccin materia- radiacin electromagntica
Cuando incide radiacin electromagntica sobre una muestra material puede ser
absorbida por ella (generalmente de forma parcial), transformndose, en muchas
ocasiones, en energa trmica. Sin embargo, otras veces, parte de la radiacin puede
ser dispersada o re-emitida, con o in cambio en la longitud de onda. Incluso es posible
que, como consecuencia de la interaccin, se origine simplemente un cambio en las
propiedades de la radiacin, sin necesidad de producirse absorcin y emisin. Por otra
parte, la muestra puede emitir radiacin electromagntica si se la excita bajo
determinadas condiciones.
Cuando la materia interacciona con energa trmica o electromagntica los tomos o
molculas pueden pasar a un estado activado en el que permanecen durante un
periodo de tiempo muy corto regresando a su estado fundamental. En este proceso
ceden la energa previamente absorbida a su entrono en forma de calor, o en forma de
fotones, de la misma longitud de onda o menos. (Hernndez Hernndez & Gonzlez
Prez, 2002)
Clasificacin de los mtodos pticos
Teniendo en cuenta las consideraciones anteriores es posible clasificar los mtodos
pticos en espectroscpicos y no espectroscpicos.
Mtodos espectroscpicos: son aquellos en los que existe intercambio de
energa entre la radiacin electromagntica y la materia. En estos mtodos se
miden espectros, siendo estos debidos a transiciones entre distintos niveles
energticos.
Mtodos no espectroscpicos: se caracterizan por no tener lugar intercambio
de energa como consecuencias de la interaccin materia- radiacin
electromagntica. No se producen transiciones entre los diferentes estados
energticos, sino que lo que realmente ocurre son cambios en la direccin o en
las propiedades fsicas de la radiacin electromagntica.
Los primeros pueden basarse en procesos de absorcin y emisin, mientras
que las transiciones entre distintos niveles energticos pueden tener lugar a
nivel atmico o molecular. En los segundos, los principales mecanismos de
interaccin implicados son la dispersin, difraccin, refraccin y polarizacin.

A continuacin se muestra una clasificacin de los mtodos pticos indicando

algunos de los ms utilizados. (Hernndez Hernndez & Gonzlez Prez,
2002)

(Hernndez Hernndez & Gonzlez Prez, 2002)

(Olsen, 1990)

Los mtodos de absorcin han sido, hasta el momento, los que uso mas gernerlizado.
Se basan en la absorcion slectiva de radiacion por la misma especie a detemrinar o
por un porducot de transformacin de dicha especie. En los mtodos de aborcion
molecular las transiciones se producen entre niveles elecronicos, vibracionales y
rotacionales, por absorcion de radiacion ultravioleta, visible, infraroja y de mircoondas.
El espectro en las regiones visible y ultravioleta esta constitudio por bandas
represnttvivas de un gran numero de transciones. Como, con la instrumentacin
ordinaria, la resolucin de las diferentes badas no puede tenr lugar, las aplicaciones
cualittatqavas de estas tenciacas son bastante limitadas.Sin embrazo, la snesiblidad
es relativcamete alta, caracterisitca adecuada para aplicaciones cuantitativas.
La absrocion de enrgia correspondiente al infrarrojo produce cambiso en la enrgia de
vibracin y raotacion de los enlaces en las moelculas.Como los disitnos grupso
fucnionales estan cosntidtudidos por configuraciones atomicas definifas, la absrocion
de los deifernetes grupso tiene ligar a longitudes de onda caractrisricas. De aqu,
lavalisoa informatcion cualittatica y estructural que se ovriene con este tipo de
espectros. El talon de Aquiles de esta tcnica es su aspecto cuatitativo, pues la
sensibilidad es relativamente pequea, salvo para ciertos grupos qumicos, tales como
huidroxido e isocianato que presentan fuertes abssroviones.
Uno de los progresos mas notables que ha experimentado la espectrofotometra
infrarroja en poca reciente ha sido el empleop del sistema de tranformadas de
Fourier, modalidad con la que se mejoran caracterisitcas en cuanto a rapidez,
precisin y posibilidad de automatizacin.
La absroocion de radacion a nievl atomicpo orginia transiciones entre nieveesles
externos o entre niveles internos de lso atomos, segn la radiacion absrobida sea
iltravioleta. visible y de rayos X respectiavemtene.
La mayor utilidad de la espectrocopia de absorcion de rayos X se presenta en el
estudio de espesores de materiales, pues en el terreno piramente analtico la
aplicaciones son escasa, debido fundamentalemnte a su baja sensibilidad.
El fundamento fsico-quimico de la espectrofotometra de absorcion atmica reside en
el hecho de que caudno una radiacion de una determinada longitud de onda ser pone
en contacto con atomos en fass de vapor, estos absroben radiaicaones enrgeticas
corrspondientes a sis lienas de resonancia, pasando a estados excitados en cantidad
proporcional a su concentracin. La atomizacin se procidce con frecuencia en una
llama o con mtodos elctrotermicos y la radaicion icnidente se orignia en las llamdas
lamapras de catodo huevo, que estan construidas utilziando el mismo elemlemnto a
determinar .
La tencia se carateriza pos us sencillez,rapidez y selectividad. Por otra pare, el
instrumental necesario suele ser bastane asequible desde el punto de vista
econocmico y la cantidad de muestra necesatia para una determinacin es muy
pequea.

Los mtodos de emisin son menos utilzaisos que los de absrocion y en el esquema
anterior se idnican algunos. en ellos se utiliza la radiacin electromagntica emitida por
la materia, independientemente de las causas que origina dicaha emisin.
Se producen luminiscencia cuadno una especia molecular; que ha adquirido un estado
electrnico yvibracional exvitado mediante una readiacion externa (fluorimetra y
fosforimetra) o como cosnecuencua de una reaccin qumica (quimioluminicencia),
pierden el exeso de energa virbracional mediente colisiones y a continuacin veulve al
estado dundamental, emitiendo radiacion ultravioleta o visble. La caracterstica mas
importante de estas tcnica des de el punto de vista analticos es us gran sensibilidad.
De todas las tenciacs luminicentes, la mas importante, sin duda, es la floorimetria,
habindose desarrolldado distintas modlaidades, tales como florimetria de lases( con
la que es posible el anlsis de compestos florrecentes a nuvees de partes por trillon),
floriemetia en mdicos micelsares, atrimepo resuelto, sincronica, trideimensional,etc.
En cuanto a la fosforiemtria, puede indicarse que en los ltimos tiempo se ha
apreciado un notable incremteno en su utilizacin, debido a mejoras que permiten
trabjar a temprttua ambiente.
La quimioluminiscencia no es una tencica de empleo masivo, si bien se ofrecen cada
vez mejores osviblidades en el anslisis de trazas y en inmunoensayos.
En la espectometria de emisin, la excitacin de la muestra se lleva a cabo medainete
un arco o una chispa electrica.Geeneralmente la enrgia necesatia para la exicaitacion
es tna alta que las expceies moleculares se disocian,con lo cual se emiten espectros
atomicos o ionicos caracterisiticos. Obvaiamente estas trecanicas no sern de
utiliadad para la dermiancion del estado de combonacion qumica de los elementos.
La excitacin por arco o chispapresente ventjas e inconveneientes, lo cual delimiata
sus campos de aplicaicon. Asi, elarco proporciona una enrgia mayor, lo que hace que
sea mas sensible,auqnue su reproducibilidad es peorp que al de la chiaspa, de dnse
se infiere que en anlisis cualitaios se prefiere el arco y en anlisis cuantitatio la
chispa.
Caunado se utiliza una llama como fuente de excitacin, la tenica se denomina
fotometra de llama.debdio a que la llama es menos enrgetica que el arco o chispa, la
fotometra de llama limita su campo de aplicaicon a nos pocos elementos; los mas
facilemte excitados ,como alcalinos y alcalinotrreos.
La utilziacion de un plasma como fuente de exitacion, ICP, presnte indudables ventjas
relacioandas con su lata sensibilidad, gran intevalo ybuena selectividad.
La fluorescencia atmica es una tcnica relativamente reciente y se puede sonsiderr
relacionada con la espectrofotometra de abrosorcion atomoica, pues en lugar de
medir las absrocion por atomos dormados en la llma se mide la misin de resonacnia o
fliorenciaa de resonancoa que tiene lugar en todas dirrrecciones depeus de la
absrocion. Su principalventaja frente a la absrocion atmica radia en que la snesiblidad
es diretamrente porporcional a la internsidad de la fuente lunimosa, femnnomenos que
no ocurre en absorcion atmica.

La florecencia de rayos X cosniste en gernear reyos X en una mustesra usando otrosd

rayos X(primarios, mas energticos) para su excitacoionm. Los rayos X emitidos
(secuandarios) soncaracterisiticos de la muetra excitacada. El mtodo es, para el
anlisis cualitatiso y cuantittitvao, mas importante que todos los dems mtodos de
rayos X. l anlisis culittrvo se basa en la identidcacion de las radiaciones florecentes
producidad y el cuantitavo en la medaidda de su intensidad , conm ayuda de la
corespondiene curve de calibrado. El mtodo es rpido, de buena sensiblidad
ybasatente exactitud si bien, las mayores ventajs con su espeficaidad y simplicidad.
La turbidimetra y la nefelometra son tcnicas analticas basadas en la disperison de
la luz por partculas en suspensin en el seno de una doslucion. como consecuentcia
de la interaracion entre la radiacion y las partculas, el sistema no se elva a un novel
energticamente excitado, sino que la readiacion icnidenete induce un dipolo elctrico
ocailente, que actua como una ueva fuente emisora de radiacion.
La intensidad de radaicinn que se presren en cualquier anglo depernde del numero de
partculas, de su tamao y foram, de lso idndices de refraccin relativos de las
partculas y del medio y de la longitud de onda de la radiacion icnidente, auqnue es
factible un tratementto teorico que relacione las distintas vairables,d ebido a su gran
complejidad, normalmente se utilzian procediemeintos que son esencialemte
empricos.
Pueden relizarse dos tipos de medidas. Si la disperison es lo sifeietemnte grande
como para origniar una disminuciuioon apreciable en la intensidad de la radiacopn
incidente, puede observarse el rayo transmitido en el mismo sentido que el incidente,
denominndose turbidimetra a la correspondietne tcnica analtica. El modo de
operar es esencialemnte anlogo al espectrofotomtrico.
Si se trabaja con una suspensin que, o es muy diluida, o estacosntituida pro
partculas relativamente pequeas, la relacion entre la intensidad de radaicion
transmitida e incidene ser apreaticamnte la unidad, por lo que no pordra relizarse la
medicin como en el caso anterior, deber medrisre la intensidad de radaicoon en un
cierto angulo con repsecto al haz incidente, opernadondo normalemnte con un
angulode 90. Esta tenica analtica reciebe el nombre de nefelometra, y se caracteriza
por su mayor sensiblidad respecto a la turdimetria.
A pesar de que lso temrinos turebidmietria y nefelometriasuelen restringrse a aquellas
aplicaciones en las que se mide la concentracin e partculas en suspensin, existen
tambin otras paliaciona basadas en las medadidas de dispersin de la luz, entre las
que pueden citarse la detemincion de la foram tamao de las partculas, asi como la
de masas moelcualres, espcialemte en el caso de polmeros.
La tenica basada en la detterminacion del ndice de refraccin es la refractometraetre
las ventajs que presenta esta etecnica cabe citar su carcter no destructivo, empleo de
pequelas cantidades de muestra y medicicones rapidas y sencillas.
Cuando se miden diefernecias entre el ndice de refracion de la muestra y el de una
sustancia patrn se rtiene la interferometra,un
poco mas compleja que la
refratometra, pero con la venta de proprocionar mayor precisicon.

La drifraccion de rayos X es el mtodo de mas utilizadad para estudiar estrcutras

cristalindas de solidos, ciando se hace indiceir un haz monocomatico e de rayos X
sobre una muesta csritalinda se obtiene un epxtro de rayos X dofractados
caracterisitcso y la disposicion de sus lneas o crculos puede usarse con fines
analticos.
Un fundamento anlogo tienen la dirfracion de rayos gamma y de electrones.en
alginos casos, estos tipos de difraccin presnten ventajas mfrente a los rayos X; uno
de ellos puede ser cuando se trata de estudiar la superficie de un solido, pues el
menor poder de penetracin de lso haces electrnicos hace que usando estos se
puede prescindir del interior, c
Cmo se menciono anteriormente, la readiacion eectromagntica puede resolverse en
dos componente que estan polzairzadas en palosn perpendicualres entre so. Por otra
parte, un cierto numero de sustancias guiran el palno de vibracin de una readiacon
polarizada, y la magnitud de la rotaion debida a una suatnacia detminda depende de
sus concentracin . estas sustancias se caracterizan por su asimetra moelcular o
crsitalina y se doice que son opicamente activas. La medida de lac tividad ptica de
una sutancia constituye la bases de l

http://books.google.com.ec/books?id=YDvLEZ3AdLQC&pg=PA47&dq=metodos+opticos+de+an
alisis+espectroscopia&hl=es&sa=X&ei=Iq88U8nHJNXOsATAhYHIAg&ved=0CEwQ6AEwBjgK#v=
onepage&q=metodos%20opticos%20de%20analisis%20espectroscopia&f=false
http://books.google.com.ec/books?id=QChYqMlUlL8C&pg=PA353&dq=metodos+opticos+de+a
nalisis+espectroscopia&hl=es&sa=X&ei=O688U7bSLKmlsQT52IH4DA&ved=0CFsQ6AEwBzgU#v
=onepage&q=metodos%20opticos%20de%20analisis%20espectroscopia&f=false
http://books.google.es/books?id=2DZYwx7p8csC&pg=PA52#v=onepage&q&f=false
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap04/04_01_01.htm
http://books.google.com.ec/books?id=yVYn7_MoaAIC&printsec=frontcover&dq=metodos+opt
icos+de+analisis+pdf&hl=es&sa=X&ei=Oa48U4hKpbGwBPq2gOgE&ved=0CDEQ6AEwAQ#v=one
page&q&f=false
http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2001184/lecciones/Cap04/04_01_01.htm

Referencias