Resultados y Discusiones

1. Desnaturalizacin de las Protenas:

ALBMINA
CUADRO DE RESULTADOS

Tubo N

Someter a:

Bao mara

Acetona

cido sulfhdrico

Observacin: ha
cambiado algo en los
tubos de ensayo?

Desnaturalizacin
(+) (-)

Color lechoso y burbujas.

NaCl

HNO3

Control

(+)
La mezcla se condenso,
con un color lechoso.
Color lechoso un tono
ms oscuro, sin presencia
de burbujas.
Sin color (incoloro) y en
estado lquido.
2 fases, una en forma
gelatinizada con color
amarillo y la otra de color
blanco ms liquida.
Un color turbio lechoso.

(+)

(+)

(+)

(+)

(-)

DISCUSIONES:
1.1 Para el primer tubo de ensayo el aumento de temperatura genera una prdida de la
estabilidad y la actividad de la protena, cuando esta ltima adquiere una temperatura de 40C
50C la protena adquiere una forma inestable e inactiva. El calentamiento llega a originar un
incremento en la vibracin y la rotacin de la cadena, llegando a modificar el estado de
equilibrio de las interacciones dbiles que estabilizan la conformacin plegada funcional.
1.2 en el caso del segundo tubo de ensayo que fue sometido a un solvente menos polar que el
agua, (acetona) provoca la disminucin del grado de hidratacin de los grupos inicos
superficiales de la molcula proteica, provocando la agregacin y precipitacin. La Acetona
(que es un disolvente orgnico) interacciona con el interior hidrofbico de las protenas y
desorganiza la estructura terciaria, provocando su desnaturalizacin y precipitacin.
1.3 Cuando aadimos cido sulfhdrico al tercer tubo de ensayo adems de afectar a la
envoltura acuosa de las protenas tambin afectan a la carga elctrica de los grupos cidos y
bsicos de las cadenas laterales de los aminocidos presentes en la albmina. Esta alteracin

de la carga superficial de las protenas elimina las interacciones electrostticas que estabilizan
la estructura terciaria de la albmina y a menudo provoca su precipitacin.
1.4. Para el caso del NaCl, al agregarlo junto a la albmina, se produce un aumento de la fuerza
inica del medio (que podra ser tambin por adicin de sulfato amnico, urea o hidrocloruro
de guanidinio) provocando una disminucin en el grado de hidratacin de los grupos inicos
superficiales de la protena, ya que este soluto compite por el agua y rompe los puentes de
hidrgeno o las interacciones electrostticas, de forma que las molculas proteicas se agregan
y precipitan.
1.5. Antes de entrar a explicar la desnaturalizacin con cido ntrico es necesario recordar que
La reaccin xantoproteica es un mtodo que se utiliza para determinar la cantidad de protena
soluble en una solucin, empleando cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo
en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos o bencnicos. La
coloracin amarilla que adquiere la solucin es debido a la formacin de un compuesto
aromtico nitrado de color amarillo. Las protenas son muy sensibles a las variaciones de pH
del medio donde se encuentren, es por ello que, cuando aadimos cido ntrico, tambin
afectan a la carga elctrica de los grupos cidos y bsicos de las cadenas laterales de los
aminocidos presentes en la albmina. Esta alteracin de la carga superficial elimina las
interacciones electrostticas que estabilizan su estructura terciaria.

2. REACCIN DE BIURET
CUADRO DE RESULTADOS
MUESTRA
Albmina
Agua

OBSERVACIN
Coloracin Violeta
Coloracin celeste oscuro

REACCIN ( + ) O ( -)
+
-

DISCUSIONES:
2.1 En el primer experimento, entre la albmina y la solucin fuertemente alcalina de sulfato
cprico (CuSO4) se forma un complejo entre el in cprico y los enlaces peptdicos,
produciendo una coloracin violeta o prpura, esto se debe a que el cobre tiene la propiedad
de formar iones complejos, especialmente entre los enlaces peptdicos. Especficamente la
solucin de sulfato de cobre en medio alcalino reconoce el enlace peptdico de las protenas
mediante la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos, lo que
produce una coloracin rojo-violeta. En resumen, la coloracin violeta se debe a la presencia
del grupo -C=O(NH-) produce un color purpura violceo. Demostrando algo que ya sabamos,
que
la
albmina
es
una
protena.

2.2 Para la muestra de agua, la coloracin resultante fue celeste oscuro, que es el color
esperado para una muestra sin protenas. La muestra de agua, al no presentar ningn enlace
peptdico, no ha podido formar un complejo con el in cprico y, por lo tanto, la mezcla no ha
adquirido la coloracin violeta.

3. RECONOCIMIENTO DE LA ENZIMA CATALASA

CUADRO DE RESULTADOS
ACTIVIDAD

CONTENIDO DEL TUBO

MUY BUENA ACTIVIDAD

Hgado

BUENA ACTIVIDAD

Carne

POCA ACTIVIDAD

Papa

MUY POCA ACTIVIDAD

Frijol

DISCUSIN
El hgado presenta la mayor reactividad ya que es el rgano donde, se cumplen procesos de
desintoxicacin, como la conversin del perxido de hidrgeno (H2O2, o agua oxigenada) en
agua y oxgeno molecular (Que no son txicos). Es por ello que en el hgado hay ms
perxisomas (la catalasa se encuentra contenida en ellos) ya que la funcin de estos es
proteger a las clulas del hgado del Perxido de Hidrogeno. En el caso de los tejidos vegetales
de la papa y el frejol verde los peroxisomas (especializados) llamados glioxisomas, que se
encargan de convertir las grasas en azcar esa es su principal funcin es por ello que la
reaccin ante el perxido de hdrogeno en ellas es muy dbil y podra tardar muchos minutos.

4 REACCIN AMINOLITICA
COLACA AQU LA FOTO DE LA TABLITA D ELOS CIRCULOS
DISCUSIONES:
4.1 En A. Se colocan 4 gotas de Lugol. Esta muestra permanece sin alteracin (como una
muestra control). El Lugol o solucin de Lugol es una disolucin de I2 y KI en agua destilada. Se
utiliza esta solucin como indicador en la prueba del yodo, que sirve para identificar
polisacridos como los almidones, glucgeno y ciertas dextrinas, formando un complejo de
inclusin termolbil que se caracteriza por ser colorido, dando distintos colores segn las
ramificaciones que presente la molcula. El Lugol no reacciona con azcares simples como la
glucosa o la fructosa.

4.2 En B. Se colocan 15 gotas de almidn + 2 gotas de Lugol.La solucin se torna de un color

morado muy intenso. La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce
entre las espiras de la molcula de almidn. Por lo tanto, no es una verdadera reaccin
qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de
esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.
4.3 En C. Se colocan 15 gotas de almidn + 10 gotas de saliva + 10 min. + 2 gotas de Lugol.Aqu,
el almidn se degrada en maltosa y luego a glucosa gracias a la saliva, que contiene la enzima
Amilasa salival (o Tialina). Luego, al echarle Lugol, la solucin NO se torna azul, debido a que el
Lugol no reacciona con azcares simples como la glucosa o la fructosa, sino con Polisacridos
como el almidn y el glucgeno.
4.4 En D. Se colocan 10 gotas de saliva + 10 gotas de cido sulfhdrico + 10 min. + 10 gotas de
almidn + 7 min. + 2 gotas de Lugol.La amilasa salival (tialina) de la saliva no va a ser
degradada por el cido sulfhdrico, por lo que al mezclarse con el Lugol, la solucin se torna de
color azul.

BIBLIOGRAFIA
http://www.javeriana.edu.co/Facultades/Ciencias/neurobioquimica/libros/celular/peroxisoma
s.html
http://enciclopediaespana.com/Catalasa.html
Apuntes de clase de Bioqumica Ana Kitazono
Manual de laboratorio Qumica Orgnica Unalm
Audesirk, T y G. Audesirk. 1996 Biologa, La vida en la Tierra. Prentice Hall Interamericana.
889pp
Lehninger, A. 1978. Bioqumica Edit. Omega S.A. Espaa. 100 pp
Solomon B. M. 2001. Biologa Edic.Quinta. Edit, Interamericana, Mc Graw Hill, Mxico. 1237 pp