PRE-INFORME DEL EXPERIMENTO

TITULO: Produccin de Bioetanol a partir de Fructuosa en presencia de Kloyveromyces

Marxianus NRRL Y-7571 en un proceso de fermentacin Batch
I.OBJETIVOS
GENERAL:
Determinar la productividad de Bioetanol a partir de Fructuosa.
ESPECIFICOS:
Evaluar el crecimiento de la levadura Kloyveromyces Marxianus NRRL Y-7571 en
un cultivo Batch.
Evaluar el consumo de sustrato a travs del tiempo de fermentacin.
II.METODOLOGIA EXPERIMENTAL
DISEO DE MEDIOS DE CULTIVO:
Crecimiento de Biomasa (mx. 2 g/l)
Composicin de medio de cultivo: nutrientes especficos, factores de crecimiento.
Disponibilidad de materia prima.
Costo
Necesidades ambientales
Composicin qumica del m.o.
PREPARACION DE MEDIOS:
pH Homogneo de Sustrato
Temperatura ambiente
Condiciones de Asepxia
Esterilizacin de Sustrato y medio
Esterilizacin de materiales de vidrio necesarios

CULTIVO DEL m.o:

Inoculacin de m.o.
Su crecimiento del m.o es: Es el incremento ordenado de todos los componentes de
la clula viva, arribando a la duplicacin de todas las estructuras, orgnulos y
componentes celulares, as como la biognesis de mitocondrias y cromoplastos
cuando ciertos microorganismos se ven sbitamente expuestos a las condiciones en
que dichos orgnulos son esenciales. En la mayora de los organismos unicelulares,
la reproduccin es consecuencia del crecimiento y lleva al incremento en el nmero
de individuos de la poblacin, mientras que en los pluricelulares el crecimiento
conduce al aumento del tamao del organismo.

La figura muestra una curva general del crecimiento de un microorganismo

unicelular.

Despus de la inoculacin de una porcin de medio con unas pocas clulas, transcurre un
perodo de tiempo (fase de latencia) antes de que se establezca una velocidad constante de
crecimiento, debido a que el microorganismo tiene una intensa actividad metablica para
adaptarse al nuevo medio de cultivo antes de poder duplicarse. Cuando el cultivo alcanz
una velocidad constante de crecimiento se dice que est en la fase exponencial debido a que
el nmero de clulas se puede expresar como funcin de 2n, donde n es el nmero de ciclos
de duplicacin experimentado por la poblacin.

En condiciones ideales el tiempo de generacin de las bacterias puede ser de 20 minutos, de

esta forma una nica clula producir 2.097.152 bacterias al cabo de 7 horas.
Finalmente el cultivo entra en la fase estacionaria del crecimiento, en la que permanece
constante el nmero de clulas. Esta fase puede durar mucho tiempo, por ejemplo dcadas
en el caso de las bacterias endosporuladas, pero siempre ser seguida, ms temprano o ms
tarde, por la fase de muerte.

En los estudios de la cintica del crecimiento individual de los microorganismos

pluricelulares, tales como actinomicetos y mohos, se observ que:
a) la velocidad de extensin de las hifas cortas es proporcional a la longitud de las mismas
y a la velocidad especfica de crecimiento, es decir que estas hifas pueden crecer
exponencialmente.
b) cada pice hifal puede extenderse a una velocidad independiente de la velocidad de
aumento de la biomasa.
c) cuando la capacidad de la hifa para extenderse supera las posibilidades brindadas por los
puntos de crecimiento existentes, se generan otros nuevos.

Inoculacin: Rehidratar la levadura seca en un recipiente antes de su inoculacin.

Espolvorear la totalidad de la levadura en 150 cm3 de agua estril (no utilizar
mosto) a temperatura entre 30 y 35C (No revolver, ni agitar). Una vez
transformada en crema, eso lleva de 15 a 30 minutos. Ir agitando cuidadosamente
durante unos 30 minutos para su oxigenacin. Una vez pasado este tiempo inocular
la crema resultante en el fermentador.

Medio de Activacin de m.o.