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Rsum

Le but du laboratoire est d'tre capable de se servir d'un microscope et avec l'aide de
certains colorants, identifier les structures de diffrentes cellules. L'observation d'un
protozoaire cill, la tetrahymena pyriformis, a t facilit par du mthocel. Ce procd
ralenti considrablement la vitesse l'aquelle le protozoaire se dplace. Ainsi,
l'observation de la vacuole contractile est facilite. Pour ce qui est de l'pithlium
buccale, l'addition du bleu de mthyle a permit de voir le noyau.

Une goutte de sang a

galement t observe au microscope l'aide d'une solution de teinture de Wright. Cette


mthode colore les leucocytes en mauve ple transparent et leur noyau en mauve
visiblement plus fonc. La cellule d'piderme interne d'oignon a subit trois montages
diffrents. Le premier est l'observation de cette cellule vgtale courte d'une goutte d'eau.
Le deuxime est un montage dans une solution iode et la dernire dans une soution de
vert de mthyle actique. eau permet observer la cellule en gnrale sans identifier
spcifiquement un organite en particulier, tandis que la solution eau iode colore
certaines organisations intracellulaires. La solution de vert de mthyle actique colore le
noyau. La lame de la pulpe de pomme de terre a t couverte eau iode. Cette coloration
permet observation des amyloplastes. Ce sont de petites boules colore en bleu trs
foncs. Pour observation des cellules de la pulpe de tomate a t conu sans coloration.
Les chromatoplastes appraissent rouges. Bref, ilmest plus facile observer les organites
et les membranes de cellules vgtales que celles des cellules animales et du protozoaire.

Introduction
- Microscopie optique : Ce type de microscopie utilise la lumire visible ainsi qu'une
srie de lentilles afin d'agrandir l'image d'un chantillon observer. La lumire provient
d'une source lumineuse situe prs de la base du microscope et passe ensuite par le
diaphragme. Ce dernier permet l'ajustement de la quantit de lumire passant travers le
condenseur, qui lui, focalise les rayons lumineux sur l'objet observer. Ces rayons
passent ensuite travers l'objectif, qui agrandit une premire fois l'image, puis par
l'oculaire, qui agrandit l'image produite par l'objectif. Le grossissement total d'un objet est
donc calculable partir du produit des grossissements respectifs de l'objectif (10X, 40X
et 100X) et de l'oculaire (gnralement 10X).
- Microscopie contraste de phase : Il s'agit d'un type de microscopie optique, mais qui
ne ncessite ni coloration, ni fixation. Ceci permet ainsi l'observation de microorganismes
vivants. Le microscope contraste de phase, comme le suggre son nom, permet la
diffrentiation de structures en fonction de la phase des rayons lumineux qui les traverse.
Chaque structure d'un organisme possde une lgre diffrence au niveau de l'indice de
rfraction, ce qui affecte de manire unique la phase des ondes lumineuses qui la traverse.
Les rayons en phases forment une interfrence constructive et paraissent plus brillants,
tandis que les ondes dphases produisent un effet de noirceur du aux interfrences
destructives. Ce type de microscope dispose d'un diaphragme annulaire et d'une lame de
phase au niveau de l'objectif. Ces deux dispositifs ont pour but de filtrer la lumire afin
de produire des zones de brillances distinctes.
- Microscopie lectronique : Ce type de microscopie permet l'observation d'objets
mesurant moins de 0,2 m, ce que la rsolution maximale du microscope optique ne

permet pas. La microscopie lectronique procde par mission d'un faisceau d'lectrons
libres, dont la trs courte longueur d'onde permet un pouvoir de rsolution immense. La
focalisation de ce faisceau se fait l'aide d'aimants lectromagntiques et produit une
image en noir et blanc, qui peut tre subsquemment colore.
- Coloration et contraste de phase : Le principe du contraste de phase fut expliqu
brivement ci-haut et son avantage principal est le fait qu'il permet l'observation
d'organismes vivants en ne ncessitant ni coloration, ni fixation de l'chantillon, ce qui a
pour effet de tuer les microorganismes. La coloration permet, quant elle, l'observation
de microorganismes au microscope optique sans contraste de phase. Elle ncessite tout
d'abord une fixation de l'chantillon, qui peut tre faite l'aide de chaleur ou d'un agent
de fixation. Ceci assure l'adhrence permanente de l'chantillon la lame puisque sans
cette tape prliminaire, le colorant dtacherait les microorganismes de cette lame. Une
fois l'chantillon sec, on y applique un colorant qui se greffe certaines structures
prcises de l'organisme et permet leur observation.
- But et matriel biologique : L'objectif de ce laboratoire est l'observation, l'aide d'un
microscope optique, de diffrentes cellules animales et vgtales ainsi que l'identification
de certaines structures qui les composent. Les cellules animales observer sont celles de
l'pithlium buccal, du sang de boeuf, ainsi que d'un protozoaire (organisme
unicellulaire). En ce qui concerne les cellules vgtales, ce sont celles de l'oignon, de la
tomate et de la pomme de terre qui sont les sujets notre exprience.

Discussion
- Mesures obtenues : La valeur de la vitesse de dplacement obtenue lors du laboratoires
pour les cellules de ttrahymena pyriformis est de 166,67 um/s et la frquence de
contraction est de 12 contractions/s. Nous n'avons pas t en mesure de trouver des
valeurs de rfrences dans les livres que nous avons consults. En effet, ils se dplacent
parfois en tournant sur eux mme et sans avoir une trajectoire linaires. De plus, nous les
avons baignes dans une solution qui ralentis considrablement leur dplacement pour
tre en mesure de les observer, ce qui a pour effet de rendre les valeurs plus ou moins
fiables. Les mesures exprimentales des vacuoles de pulpes de tomate sont de 75 um,
95um et 62,5um. Les valeurs thoriques pour une cellule vgtale se situe autour de entre
10 et 15um. Nous avons remarqus que nos cellules taient normes comparativement
aux cellules de l'oignon, ce qui exliquerait ces valeurs excessives. Il se peut que nous
ayons pris les proportions d'une mauvaise faon tant donn les difficults rencontrs
avec le microscope. En effet, il nous tait impossible d'utiliser l'immersion car, tout
devenait gris et l'observation tait infaisable. Cette dfectuosit peut avoir fausser nos
donnes. Les mesures des noyaux de cellules d'oignons concordent par contre avec la
littrature. Selon celle-ci, elle devrait se situer entre 10 et 100um et les valeurs
exprimentales sont de 20um, 27,5um et 30um. De plus, les valeurs exprimentales des
noyaux de cellules de tomates condordent galement avec la thorie car, elles sont de
32,5um, 25um et 27,5um. Les mesures des amyloplastes du frottis de pulpe de pomme de
terre obtenues en laboratoire sont de 10um, 7,5um et 10um. Nous n'avons pas t en
mesure de trouver de valeurs thoriques pour ces cellules. Les valeurs exprimentales du
noyau de l'pithlium buccal sont de 2,75um, 3,75um, 3,5um, 5,25um et 4,25um. Les

valeurs thoriques se situent entre 3 et 10um, donc il est possible d'affirmer que les
valeurs obtenues sont justes. Les valeurs des cellules sont de 10,5um, 14,5um,12,3um,
18,0um et 20,3um. Les valeurs thoriques pour la grosseur d'une cellule animale est entre
10 et 30um. Nos valeurs sont comprises dans cette cart et sont prcises. De plus, les
valeurs des globules blanc observs en laboratoire sont de 11,4um, 11,8um, 13,3um,
10,5um et 12,4um. Ces valeurs sont prvises et concordent avec les valeurs thoriques
qui se situes entre 10 et 20um. Les valeurs de grosseurs des globules rouges sont de
7,2um, 7,6um, 7,0um, 6,3um et 8,0um. Ces donnes exprimentales sont prcises et
concordent avec les valeurs thoriques qui se situes entre 6 8um.
- Colorants : 1. Bleu/vert de mthyle : Ces deux colorants sont galement des fixateurs
cellulaire. Ils se lient l'ADN du noyau des cellules et les colore ainsi de leur couleur
respective. Dans le cadre de ce laboratoire, nous nous servons de ces colorants pour
observer les cellules pithliales buccales ainsi que celles de l'piderme interne de
l'oignon.
2. Solution Iode (Lugol) : L'iode agit galement titre de fixateur cellulaire et fixe le
cytoplasme ainsi que le noyau de la cellule. Dans le cas de l'piderme interne de l'oignon,
il donne la couleur jaune certaines composantes du cytoplasme, ce qui permet d'ajouter
du contraste l'image observe. Dans le cas du frottis de pomme de terre cependant, la
solution colore les amyloplastes (rserves d'amidon) en bleu fonc.
3. Teinture de Wright : Encore un fois, il s'agit d'une solution fixatrice en plus d'un
colorant. Elle permet de diffrencier les diffrents types de cellules sanguines, puisqu'elle
colore les noyaux des globules blancs en mauve/bleu. Ceci nous permet facilement de

diffrencier ces derniers des rythrocytes qui sont anucls et donc non colors par la
teinture.
- talonnage du microscope : Cette tape est essentiel accomplir si l'on veut tre en
mesure de prendre des mesures prcises, qu'il s'agisse du diamtre d'un spcimen observ
ou de la vitesse de dplacement d'un organisme vivant comme il en est question dans ce
laboratoire. l'aide d'une lame micromtrique, il nous est possible d'tablir la valeur (en
m) de chaque subdivision du micromtre oculaire et ca, chaque grossissement de
l'objectif. Nous pouvons donc ensuite faire la conversion en m pour chacune des
mesures prise l'aide du micromtre oculaire.
- L'importance de l'huile immersion : L'utilisation de l'objectif 100X (grossissement de
1000X) ncessite l'utilisation d'une huile immersion, ce qui est du au fait qu'afin
d'obtenir une rsolution leve, l'objectif doit avoir un trs faible diamtre. Ceci a pour
effet indsirable que plusieurs rayons ayant travers l'chantillon sont rfracts hors du
champ de l'objectif une fois qu'ils atteignent l'air libre. Afin d'viter la perte de ces
rayons, on applique une huile d'immersion sur la lame observer. Cette huile a le mme
indice de rfraction que le verre et permet un contact toute fin pratique direct entre
l'objectif et la lame. Les rayons ne sont donc jamais en contact avec l'air et pntrent
directement dans l'objectif.
- Les plastes : Chez la pomme de terre, les amyloplastes ne sont pas pigments. Il faut les
colorer afin de pouvoir les distinguer au microscope optique. Ils reprsentent la source de
synthse et d'entreposage d'amidon pour les cellules de la pomme de terre. l'inverse, les
chromoplastes de la tomate sont naturellement colors en rouge et sont visibles sans
coloration. Ce sont les lycopnes qui leur donnent cette couleur rougetre et ces derniers

sont impliqus dans le processus photosynthtique de la tomate. Enfin, bien que nous
n'ayons pas pu observer les feuilles d'lodes, celles-ci renferment des chloroplastes de
couleur verte. Ceux-ci interviennent galement dans le processus de photosynthse de la
plante et renferment la chlorophylle, qui leur donne cette couleur.
- Structure des cellules observes : Le protozoaire se distingue tout d'abord des autres
organismes observs par le fait qu'il est unicellulaire. De plus, la prsence de cils qui
facilite son dplacement et son adhrence diverses surfaces lui est galement unique
parmi les cellules observes. Enfin, la ttrahymena dispose d'une vacuole contractile qui
lui permet d'vacuer les surplus d'eau et ainsi viter l'explosion. La cellule de l'piderme
de l'oignon dipose galement d'une vacuole, mais celle-ci, comme chez la plupart des
vgtaux, sert principalement de lieux d'entreposage des nutriments. On distingue
galement des plasmodesmes chez l'oignons, qui permettent la communication directe
entre les cytoplasmes de cellules adjacentes. On peut observer une paroi cellulaire chez
toutes les cellules vgtales. La tomate et la pomme de terre dispose de plates,
respectivement appels chromoplastes et amyloplates, qui servent de lieux d'entreposage.
En ce qui concerne les cellules de sang de boeuf, on y distingue de types de cellules
sanguines, les rythrocytes et les globules blancs. On les distingue tout d'abord par leur
gorsseur (les globules blancs tant plus larges), leur nombre (les rythrocytes sont
beaucoup plus nombreux), ainsi que par le fait que les globules blancs sont les seuls
disposer d'un noyaux. Les structures communes tous les types de cellules sont : la
membrane (animales) et la paroi (vgtales), le noyau (except pour les globules rouges)
et le cytoplasme.

- La cellule : La cellules est l'unit fondamentale des tres vivants car elle est la plus
petite unit vivante en soit. En effet, on retrouve des organismes unicellulaires comme les
protozoaires, qui sont en mesure de manire autonome, de subsister par leurs propres
moyens. Il y a galement bien videmment les organismes multicellulaires complexes. La
cellule possde elle mme la machinerie ncessaire sa propre survie et celle de
l'organisme dont elle fait partie. Elle est donc la source mme de ce que l'on considre
comme tant un tre vivant.

Conclusion
En conclusion, l'objectif de ce laboratoire tait d'apprendre utiliser l'outil qu'est le
microscope afin d'observer diffrents types de cellules et tre en mesure d'identifier les
structures qui les distinguent. Nous avons galement procd la mesure des dimensions
de certaines de ces structures afin de les comparer des valeurs de rfrence. Les
rsultats obtenus semblent concorder majoritairement avec les valeurs attendues, mais
certains carts sont toutefois observables. Ceci peut se traduire par une erreur de prise de
mesure ou d'talonnage du microscope, mais galement par le fait que nous disposions
d'un microscope lgrement dfectueux avec lequel il tait presqu'impossible d'observer
au grossissement maximal. Ceci tant dit, nous avons t en mesure de constater les
diffrences existantes entre les diffrents types de cellules observes, ce qui tait
l'objectif initial de cette exprience.

Bibliographie

1. Alberts, Bruce. Molecular Biology of the Cell. New York:


Garland Science, 2002. Print.
2. Reece, Jane B., and Neil A. Campbell. Campbell Biology / Jane
B. Reece ... Boston: Benjamin Cummings, 2011. Print.
3. Tortora, Gerard J., Berdell R. Funke, and Christine L. Case.
Microbiology: An Introduction. Redwood City, CA:
Benjamin/Cummings Pub., 1995. Print.