NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOTECNOLOGAAGROINDUSTRIAL Y

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES, EQUIPOS Y CALCULOS BASICOS

RESUMEN
La presente prctica se realiz en el laboratorio Biotecnologa Agroindustrial perteneciente a la escuela
Acadmico Profesional de Ingeniera Agroindustrial de la Universidad Nacional Micaela Bastidas de Apurmac;
con el objetivo de conocer e identificar las diferentes reas, equipos bsicos normas de seguridad en un
laboratorio de esta ndole, para ello se empez a escuchando una pequea charla por parte del docente
encargado, acerca de las pautas para la presentacin de informes de laboratorio y tambin acerca de la
normas que se deben seguir para llevar un trabajo eficiente, con esa parte introductoria seguidamente hizo
un recorrido por el laboratorio, describiendo donde se encontraba cada rea y los materiales y equipos que
hay en cada una de ellas. El resultado de esto fue conocer como est organizado el laboratorio de
Biotecnologa, as como las funciones de las reas, que reactivos se encuentran en ellas y cul es el cuidado,
manejo y mantenimiento de las reas. Con esto se puede concluir que al conocer todo el funcionamiento de
equipos y materias adems de normas de seguridad y pautas para la presentacin de reportes en funcin a
este este laboratorio se podrn realizar las prcticas de manera adecuada y esto har que se tengan los
resultados deseados, sabiendo de que el laboratorio solo cuenta con la implementacin bsica.
I.

INTRODUCCIN.

Generalmente todos los laboratorios que tengan que ver con los anlisis qumicos y biolgicos (bioqumicos,
microbiolgicos y biotecnolgicos), estn expuestas a contraer riesgos biolgicos qumicos y fsicos contar el
hombre u en otras palabras accidentes puesto que si los anlisis y experimentos se realizan si tener en
cuenta algunos conocimientos especficos de normas de laboratorio y manipuleo de instrumentos; es as
que se hace indispensable instruirse lo ms correctamente en materia de laboratorios, conociendo algunas
normas bsicas de seguridad en el laboratorio adems de tener la capacidad de conocer la funcionalidad
de los diferentes materiales, equipos e insumos as de como operarlos o emplearlos en una determinada
investigacin.
El conocimiento de las normas de seguridad y de la operacin de materiales, equipos e insumos en el
laboratorio de Biotecnologa Agroindustrial no solamente contribuir en evitar y prevenir accidentes si no
tambin permitir que la prctica o el anlisis biotecnolgico se desarrolle de manera correcta evitando los
errores y mostrando resultados ptimos.

II.
OBJETIVOS.
El alumno conocer el reglamento de Laboratorio de Biotecnologa Agroindustrial y comprender la
importancia de respetarlo para optimizar el trabajo experimental as como minimizar las
posibilidades de sufrir u ocasionar accidentes.
El alumno revisara las medidas de seguridad ms importantes que se utilizan en un laboratorio de
Biotecnologa Agroindustrial para minimizar la posibilidad de accidentes.
Identificar los materiales y equipos ms usados en el laboratorio y sus funciones.
Manipular materiales y equipos de uso y cuidados especficos.
El alumno realizara algunos clculos bsicos de los ms utilizados en el laboratorio de
biotecnologa Agroindustrial, para aislar, identificar y prepara soluciones.

III.

MARCO TERICO

En este presente informe se detallara de una manera resumida y coherente algunas normas bsicas de
bioseguridad en laboratorio adems de una descripcin bsica de la funcionalidad de los materiales y equipos
vistos en el Laboratorio de Biotecnologa Agroindustrial y algunos otros ms que son necesarios de tenerlos
en conocimiento.
3.1.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN UN LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA.

Este presente informe recoge las indicaciones necesarias para llevar a cabo un trabajo seguro y eficiente en
el laboratorio. Cualquiera puede imaginarse fcilmente que en el trabajo cotidiano en un laboratorio de
Biotecnologa, uno de los problemas que hay que cuidar es el de las contaminaciones con microorganismos
no deseables, ya que su presencia en un cultivo es origen, en el mejor de los casos, de errores en las pautas
de identificacin, cuando no atentan contra la seguridad del microbilogo y de su entorno.
Los siguientes prrafos fueron adaptados de (Montealegre, 2002)
Las normas bsicas de actuacin se concretan en:
3.1.1. De Manipuladores.
La prenda adecuada para trabajar en un laboratorio de Biotecnologa es la bata blanca, que debe
estar siempre limpia y usarse slo en el interior de los laboratorios.
Normas generales de higiene:
Limpieza de manos antes y despus del trabajo.
Si la longitud de los cabellos es notable, stos debern estar recogidos.
Normas generales de comportamiento:
El material, mobiliario y dems utensilios deben cuidarse con el mayor esmero.
No se puede fumar, beber o comer en el laboratorio bajo ningn concepto.
Hay que evitar desplazamientos intiles y movimientos bruscos.
3.1.2. Del lugar de trabajo.
o Cada alumno dispone de un puesto de trabajo en el que podr encontrar:
Un papel de filtro que cubre el lugar de trabajo.
Un mechero de gas emplazado en el centro. El mechero debe permanecer encendido durante la
realizacin de los experimentos que requieran su utilizacin, apagndose cuando no sea
necesario.
Los instrumentos y elementos especficos para la realizacin de cada prctica concreta.
3.1.3. Del trabajo
No se debe comenzar el trabajo hasta haber recibido las instrucciones precisas.
Se deben preguntar siempre todas las dudas que aparezcan antes de realizar el trabajo.
La esterilizacin de algunos utensilios (asas de platino, boca de los tubos, etc) se consigue
mantenindolos en posicin oblicua sobre la llama. Estas operaciones se realizan siempre antes y
despus de utilizar tales instrumentos.
La organizacin del trabajo vara segn la prctica que se est realizando, pero en general:
Deben evitarse las precipitaciones.
Deben evitarse riesgos de confusin etiquetando o marcando el material.

Deben tomarse todas las precauciones posibles para evitar accidentes (cortaduras,
quemaduras, etc.).
Despus del trabajo, tambin debe seguirse un plan ordenado.
El material utilizado debe transportarse al lugar donde contine su procesamiento.
El material y utensilios utilizados deben ser lavados y esterilizados para su posterior uso o bien
eliminarse previa esterilizacin si son de un solo uso.
El puesto de trabajo debe quedar al final ordenado y limpio, tal como se encontral inicio de la
sesin.

3.2.

MEDIDAS DE SEGURIDAD

Precauciones y condiciones de trabajo en el Laboratorio (Normas de bioseguridad)

Lavarse las manos al entrar y salir de la unidad.

Usar guantes segn actividad ( retirar al salir)
Para evitar posibles contaminaciones, es esencial mantener la limpieza y el orden dentro del
laboratorio.
Antes de comenzar a trabajar se debe limpiar el rea limpia con una solucin de hipoclorito de sodio
5% o una solucin de amonio cuaternario.
Se debe trabajar en las proximidades de un mechero.
No pipetee con la boca, use un pipeteador
No use durante las prcticas anillos, cadenas, prendedores, pulseras o collares

3.3.

MATERIALES.

Para mejor comprensin procederemos a describirlos de acurdo a la clasificacin de acuerdo al material del
que estn fabricados.
3.3.1.

Materiales de Vidrio.

Esta parte instrumental es indispensable en todo laboratorio de microbiologa general, de alimentos e

industrial (biotecnologa) en el cual se distinguen los siguientes:
a) Vasos de precipitado:Tiene forma cilndrica con base plana y en su borde superior una ranura
triangular que le sirve para verter los lquidos son graduados en diferentes capacidades. (Caimanque
y Escudero, 2008)
Son aquellos recipientes de boca y cuerpo ancho que se utilizan para preparar disoluciones y
reactivos. En su pared existe una escala graduada aproximada, puesto que no se utilizan para
medir volmenes (Mendo, 1995)
b) Tubos de ensayo: Consiste en tubo de cristal con base convexa y en el otro extremo una apertura
que puede ser lisa o en rosca, se puede encontrar en diversos tamaos, sirven para contener
sustancias liquidas, slidas o semislidas. (Caimanque y Escudero, 2008), como su nombre lo indica
para ensayos o anlisis pues en su interior se pueden generar que se produzcan reacciones
qumicas y bioqumicas, otros ms especiales se utilizan para contener muestras y someterlos en
la centrifuga. (Tellado, et, al 2007).En microbiologa se utilizan para estudios de hemolisis, estudios
de fermentacin y pruebas bioqumicas de microorganismos. (Mendo, 1995)

c) Probetas: Son cilindros de dimetro variable. La base de la probeta es amplia y plana y en el

extremo superior generalmente tiene doblado el borde en forma de pico su capacidad es muy
variable ya que hay desde 10ml hasta 1000 ml o ms. Graduada en su exterior con unidades
variables (Caimanque y Escudero, 2008).
d) Pipetas aforadas: Son de vidrio o de plstico, sirven para transferir pequos volmenes, en
microbiologa para generalmente se utiliza para la siembra y aislamiento de cepas; existen de
desde 1, 2, 5 y 10ml (Mendo, 1995).
e) Pipetas serolgicas: Se utilizan para anlisis que tengan que ver con transferencia de volmenes
de precisin, generalmente tiene un error tolerable de 0.01 a 0.02% dependiendo a la marca el que
esta fabricada.(Mendo, 1995)
f) Placa Petri: Tiene la forma de un cilindro aplanado con bordes elevados que consta de una base y
una tapa. Contiene medios de cultivo slidos (Agar), que sirven para el crecimiento, desarrollo y
aislamiento de microorganismos. (Mendo, 1995)
g) Bureta: son recipientes alargados, tubulares y graduados que disponen de una llave de paso en
su parte inferior, se utilizan generalmente para realizar anlisis de volumetra qumica (titulacin)
(Tellado, et, al 2007).
h) Matraz Erlenmeyer:Tiene forma acampanada con el fondo plano, graduado, sirve para preparar
medios de cultivo, reactivos, colorantes, soluciones o para mantener en medio liquido una gran
cantidad de microorganismos. No mide correctamente los lquidos. (Caimanque y Escudero, 2008).
i) Fiola o matraz aforada: Idnticos a los matraces, aunque tiene el cuello alargado estn calibrados
a medida exacta con un aforo en la parte superior del cuellos, se emplean para preparar soluciones,
de preferencia soluciones buffer. (Mendo, 1995)
j) Esptula de Drigalsky:Esta confeccionada de una varilla delgada en forma de esptula, que se
utiliza para la siembra y aislamiento de microorganismos(Mendo, 1995).
k) Bagueta: Fragmento de una varilla de vidrio delgada de 20 a 50 cm de longitud en promedio, se
utilizan como agitadores. (Mendo, 1995)
l) Porta y cubre objetos: Los portaobjetos son lminas de vidrio transparente de forma rectangular
y de pequeo grosor; los cubreobjetos son finsimas lminas de mucho menor tamao que el
portaobjeto. Ambos son materiales indispensables para la observacin microscpica de los
microorganismos. (Mendo, 1995)
3.3.2. Otros materiales
Existen otros materiales que pueden ser de vidrio, plstico, madera y metal o la mezcla de algunos o todos
de estos; describiremos algunos de ellos que son indispensables en un laboratorio de Biotecnologa
Agroindustrial
a) Mechero de Bunsen: Es un tubo con un dimetro de 1.5 cm. con una base redonda de
aproximadamente 10 cm. de dimetro, que en la parte baja del tubo se encuentra una entrada para
el gas butano y un anillo regulador. Por la parte superior del tubo se forma la flama del mechero la
cual brinda un margen de seguridad al formar un rea de esterilidad de aproximadamente 15 a 25
cm. de radio. (Caimanque y Escudero, 2008).
b) Esptula: Consiste en una plancha delgada de metal inoxidable con mango de madera, su uso se
hace frecuentemente en la transferencia de sustancias slidas. (Mendo, 1995).
c) Gradillas: Pueden ser de metal, plstico o madera, sirven para sostener los tubos de ensayo.
d) Trpode: Sirve como soporte.

e) Termmetro: Medir la temperatura es una de las operaciones fundamentales en los laboratorios de

microbiologa y biotecnologa, as como en una gran cantidad de procesos biolgicos. El termmetro
esta formado de un tubo de vidrio de paredes gruesas, graduado con un bulbo lleno de mercurio o
alcohol en uno de sus extremos el cual al dilatarse pasa por un tubo capilar en el interior del t al
reaccionar a los cambios de temperatura. (Caimanque y Escudero, 2008).
f) Asa Bacteriolgica: Est formada de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y
un filamento que puede ser de nicromo, tungsteno o platino que termina o en aro o en punta, este
instrumento de laboratorio nos ayuda transportar o arrastrar microorganismos de un medio a otro
medio para su adecuado desarrollo, as como para la realizacin de frotis. (Caimanque y Escudero,
2008)
g) Pro pipeta: Se trata de accesorios fabricados en goma y especialmente diseados para asegurar
transferencia de lquidos corrosivos, txicos u odorferos.
3.4.

EQUIPOS.

En esta seccin se realizara una breve descripcin de algunos equipos necesarios en un laboratorio de
biotecnologa.
3.4.1.

Autoclave.

Son equipos que sirven para esterilizar materiales con vapor de presin y tienen dos sistemas de
calentamiento: a base de gas o de electricidad. Los modelos de autoclave son de tipo horizontal o vertical. La
esterilizacin de algodn, gas, papel para envoltura (aluminio, manila), filtros Seitz, millipore, pipetas probetas,
matraces aforados, agua y medio de cultivo se hace en autoclave(Puche, 2012).
Este equipo genera vapor internamente, cuando este se produce, desplaza el aire el cual se sale atreves
de un orificio teniendo en cuenta que esto se produce a 1atm de presin el cual corresponde a una
temperatura de 121 0C, que nos indica que debemos de realizar el tratamiento entre 15 a 20 min o 134 0C
por 7 min pues esta destruye todas la formas vegetativas y esporuladas. (Mendo, 1995).
3.4.2.

Bioreactor.

Consiste en un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente activo. En algunos casos, un
biorreactor es un recipiente en el que se lleva a cabo un proceso qumico que involucra organismos o
sustancias bioqumicamente activas derivadas de dichos organismos. Este proceso puede
ser aerbico o anaerbico. Estos biorreactores son comnmente cilndricos, variando en tamao fabricados
en acero inoxidable.
En trminos generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales propicias (pH,
temperatura, concentracin de oxgeno, etctera) al organismo o sustancia qumica que se cultiva. En funcin
de los flujos de entrada y salida.
El conjunto biorreactor-sistema de cultivo debe cumplir con los siguientes objetivos:
a) Mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo.
b) Mantener constante y homognea la temperatura.
c) Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.

d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)

Prevenir la sedimentacin y la floculacin.

Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo.
Mantener el cultivo puro.
Mantener un ambiente asptico.
Maximizar el rendimiento y la produccin.
Minimizar el gasto y los costos de produccin.
Reducir al mximo el tiempo.

3.4.3.

Balanza Analtica.

La preparacin del medio requiere de realizar el pesaje con precisin de todos los componentes que lo
integran con precisin y de acuerdo al tipo y a la cantidad del constituyente que se agregue al medio, as ser
el tipo de balanza que se emple. Existe una gran diversidad de este equipo, sin embargo, hay dos tipos de
balanza que son muy usuales en el laboratorio: granatarias y analticas, ambas de precisin la analtica con
una sensibilidad de hasta 0.0001g. (Puche, 2012).
3.4.4.

Centrifuga.

Una centrfuga o centrifugadora es una mquina que pone en rotacin una muestra para acelerar por fuerza
centrfuga la decantacin o sedimentacin de sus componentes o fases (generalmente una slida y una
lquida), en funcin de su densidad.
3.4.5.

Espectrofotmetro.

Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la
longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de
radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en
los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.(Montealegre, 2002)
Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa y
visuales. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una
muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.
Esto le permite al operador realizar dos funciones:
Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra
Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra.
3.4.6. Estufa.
Conocidos tambin como hornos de secado se usan especialmente para el secado del material de vidriera
lavado y para la esterilizacin de instrumentos usados para el cultivo. Para la esterilizacin por secado, la
temperatura que se debe conservar es de 140C durante 4h o bien a 150C 180C por una hora, por lo que
se requiere de un termostato que sea preciso. Sin embargo, la esterilizacin por este proceso no es
recomendable para cristalera de medicin de precisin, como probetas, pipetas, debido a que el vidrio sufre
dilatacin por el calor, lo que altera los volmenes que se miden.(Puche, 2012).

En microbiologa y biotecnologa las estufas o cmaras de cultivo son unos equipos indispensables en la
seccin de bacteriologa, se utilizan a una temperatura de 37C para realizar cultivos de bacterias, hongos a
una temperatura igual a la del cuerpo humano.(Caimanque y Escudero, 2008)
3.4.7.

Microscopio.

Es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista.
El tipo ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento ptico que
contiene dos o ms lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por
refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama
microscopa.(Montalvo, 2010)

Microscopio ptico.
Microscopio simple.
Microscopio de luz ultravioleta.
Microscopio de fluorescencia.
Microscopio petrogrfico.
Microscopio electrnico.

El ms usado es el de campo claro. Este utiliza como fuente de iluminacin la luz blanca, cuyo haz pasa
directamente a travs del objeto que se desea observar. (Caimanque y Escudero, 2008).
3.4.8.

Potencimetro.

Para ajustar el pH de los medidores de cultivo se utilizan indicadores de papel y qumicos, pero lo ms
conveniente es usar un potencimetro con electrodos de vidrio. El potencimetro no slo se usa para medir el
pH de los medio al prepararse, sino tambin para medir el pH de los medios durante el perodo de incubacin.
Recientemente se usan aparatos con control automtico de pH para los cultivos en suspensin. (Puche,
2012).
3.4.9. Refrigeradores.
Unidades de refrigeracin, cuya utilidad es la mantencin de los medios de cultivos La temperatura para
mantencin de medios es de 4 0C. . (Caimanque y Escudero, 2008).
3.5.

MARCO CONCEPTUAL.

En esta seccin trataremos de ampliar ms conceptos tcnicos para la mejor compresin del lector.
3.5.1.

Bacterias Esporuladas.

Las bacterias esporuladasson formas bacterianas como las endsporas que son tipos de perdurabilidad
frente al calor, la desecacin, la radiacin y las influencias qumicas. La termo resistencia es una de sus
principales caractersticas. Mientras que las bacterias o las formas vegetativas de las bacterias esporuladoras
sometidas a 80 C durante diez minutos (pasteurizacin) mueren. (lcazar, 2002)

3.5.2.

Cepa.

Conjunto de clulas o microorganismos procedentes de nica clula inicial mediante reproducciones

sucesivas, se utiliza para obtener cultivos puros. (lcazar, 2002)
3.5.3.

Esterilizacin.

Consiste en la destruccin total de microorganismos y enzimas, mediante un tratamiento trmico hmedo a

temperaturas por encima del punto de ebullicin del agua (100 0C), generalmente se aplica en autoclaves a
1210C por 30 min. (lcazar, 2002).
IV.
4.1.

MATERIALES Y METODOLOGIA.
Materiales.

Los materiales que se utilizaron en el desarrollo de la prctica fueron los siguientes:

4.2.

Cuaderno de anotes
Mandil o guardapolvo
Procedimiento.
Como primer paso se organiz a los estudiantes por equipos para el reconocimiento del
laboratorio de biotecnologa.
Luego se atendi a las indicaciones del docente, en el cual indico los procedimientos por los
cuales se va a realizar la prctica y las metodologas empleadas, como la observacin,
anlisis y discusiones de la realidad del laboratorio de biotecnologa.
Posteriormente despus de un tiempo, se discuti en forma grupal aspectos del laboratorio
como: reglamentos, medidas de seguridad y todos los aspectos positivos y rescatables del
laboratorio.
En seguida se realizara un recordatorio de los materiales, equipos y reactivos con sus
determinados usos y precauciones.
Realizar los clculos bsicos y apuntes por equipo.

V.

RESULTADOS.

Los resultados que se obtuvieron de la inspeccin del laboratorio de biotecnologa son los siguientes:
5.1.

Instalacin del laboratorio.

El laboratorio de biotecnologa de la escuela profesional de ingeniera agroindustrial cuenta con las
siguientes reas :
Sala de fermentacin
Sala de esterilizacin
Gabinete
Sala de experimentacin

 El laboratorio de biotecnologa no cuenta con las normas adecuadas para llevar a cabo las prcticas
como: las medidas de seguridad, reglamentos para manipulacin de equipos y materiales,
sealizaciones en el ambiente.
El laboratorio cuenta con dos mesas en las cuales se encuentran 12 instalaciones de suministro de
gas para la instalacin de mechero bunsen.
5.2.

Materiales del laboratorio

Se cuenta con los siguientes materiales entre ellos tenemos:

a. Materiales de vidrio
Frascos de vidrio
Pro pipetas
Tubos de ensayo
Gargantas de cisne: elaboradas en el mismo laboratorio
Micro pipetas
Probeta, que se utiliza para mediciones de sustancias liquidas y viscosas.
Pipetas volumtricas
b. Equipos
Refrigeradora : para sustancias liquidas y viscosas
Autoclave: para la esterilizacin de cultivos y diversos inoculos
Cocina elctrica
Balanza analtica
Biorreactor: estndar de acero inoxidable cuenta con paletas de agitacin, con una capacidad de
24 litros, con carencia de automatizacin como suministro de oxgeno y control de Ph,
Temperatura, acides entre otros.
c. Reactivos
Anaranjado de metilo
Soluciones de NaOH
Soluciones de acido ascrbico
Cristal violeta
Glicerol, etc.
VI.
DISCUSIONES
Segn (Garca L.A. y Villarreal E. 2009.) Menciona que los laboratorios de biotecnologa
representan un riesgo para las personas que manipulan las clulas, y para el medio que los rodea,
estos riesgos dependen del tipo de producto desarrollado y estn clasificadas segn el nivel de
peligro y segn el nivel de riesgo se establece las medidas de contencin necesarias para evitar la
llegada a la naturaleza de agentes biolgicos. Lo que menciona este autor es un aspecto muy
importante, con el justamente carece nuestro laboratorio como: las medidas de seguridad, normas
para manejo de equipos y manipulacin de agentes biolgicos, todo esto es muy importante e
indispensable para para evitar riesgos biolgicos y fsicos en las personas (estudiantes, tesistas) que
laboran en dicha instalacin. Por otro lado (Collins, 1983), menciona que el nivel de riesgo al que los
trabajadores estn expuestos, depende de la naturaleza de la muestra. Entonces se puede decir que
el riesgo va depender de diversos factores.

 Como cualquier lugar de trabajo, los laboratorios de biotecnologa y de tipo biolgico han de
reunir unas condiciones, que si bien pueden variar notablemente en funcin de su finalidad (un
laboratorio dedicado a la obtencin de antgenos monoclonales difiere de uno destinado a la mejora
gentica de vegetales y ste, a su vez, es muy distinto de otro en el que se realizan investigaciones
microbiolgicas), todos ellos deben estar acordes con lo dispuesto en el Real Decreto 486/1997, de
14 de abril, sobre disposiciones mnimas de seguridad y salud en los lugares de trabajo. Analizando
esta disposicin de ley , actualmente el laboratorio de biotecnologa con el que contamos no cuenta
con esas disposiciones mnimas, que menciona el reglamento, pero cabe resaltar que este
laboratorio solo se dedica a investigaciones sobre todo vegetal, pero aun as debe tener las
condiciones mnimas.
Segn Castegnaro, M., et al 1982. Existen cuatro niveles de seguridad para laboratorios de
biotecnologa y afines, que deben cumplir de ellos el principal y el indicado es el nivel 1 en el cual
menciona, que el diseo de la construccin y el equipo de seguridad son apropiados para
estudiantes, laboratorios de prcticas y en general, para trabajar con agentes biolgicos de los que
no se conoce que sean causantes de enfermedades en seres humanos sanos y adultos. Realizando
la comparacin con la instalacin de nuestro laboratorio se pudo observar que no se cuenta con
ningn tipo de norma y cabe resaltar que este es un nivel bsico, con el que todos los laboratorios
de cualquier institucin, deben de contar, as como tambin es requisito indispensable para llevar a
cabo la manipulacin de agentes biolgicos y el desarrollo de prcticas, evitando la contaminacin
ambiental y del personal.

Segn (Guardino X et, al, 1992) cita que el diseo del laboratorio de biotecnologa debe estar
pensado para proteger al personal de laboratorio, como tambin a las personas que trabajan en
otras reas de la institucin y a la comunidad. El diseo y los materiales de laboratorio deben permitir
una fcil limpieza. Cada seccin requiere adems un lavamanos. Para evitar cualquier riesgo es
necesario contar con la mnimas condiciones de cuidado como el mandil, guantes y mascarilla esto
tambin es recomendado por (Mart M C et al, 1997). En el que menciona que los elementos de
contencin primaria deben permitir al operador la preparacin y transferencia del material
potencialmente infeccioso sin romper la barrera. Estos, incluyen elementos simples como guantes,
delantal, mascarilla, tubos de centrfuga con tapn, homogenizadores de tejido con sistemas
cerrados, propipetas, etc, y otros elementos de mayor tecnologa y de mayor importancia como las
cmaras de bioseguridad.

VII.

CONCLUSIONES

Se logr conocer los reglamentos que rigen el laboratorio de biotecnologa agroindustrial y se

comprendi que es necesario aplicar diversas normas para la manipulacin de equipos, agentes
biolgicos y materiales, as se va lograr evitar riesgos, reduccin de mano de obra y accidentes
cuando se lleve a cabo las practicas dentro del laboratorio.
Se revis todas las medidas de seguridad dentro del laboratorio , todo esto para evitar los riesgos y
peligros y entre los que se debe de tener en cuenta tenemos las normas para :los Manipuladores, el
lugar de trabajo y normas para la realizacin de la practica el procedimiento de operacin debe ser
definido por todos aquellos que trabajan con estos materiales, equipos, etc.,deben acoplarse a las
directrices (procedimientos, operaciones dealmacenamiento y residuos) debiendo identificar, y tener
en cuenta la posibilidad de lapresencia de ms de un peligro en procedimientos que conlleven
riesgo.
Se identific a los materiales y equipos ms usados en el laboratorio de biotecnologa agroindustrial:
TUBOS DE ENSAYO: Se utilizan muy frecuentemente en cultivos con pequeas cantidades de soluciones o
bien para diversos tipos de medios
MATRACES ERLENMEYER: Estos matraces se usan para preparar medios de cultivo slido o lquido; en la
preparacin de medios de cultivo.
CAJAS DE PETRI: Las cajas de petri no slo se utilizan para hacer cultivos en medios slidos, tambin para
germinar semillas esterilizadas o bien para esterilizar tapones de hule, filtros de nylon o de acetato de
celulosa,
BOTELLAS PARA CULTIVO: Para propsitos de cultivar plantas en condiciones in vitro, se utilizan botellas
cilndricas o cuadradas, que pueden ser las botellas de whisky, ron, brandy.
PIPETAS, GOTEROS, PROBETAS Y MATRACES. Para la preparacin de diversas soluciones para la
elaboracin de los medios bsicos para el cultivo de tejidos vegetales.
CMARA DE FLUJO LAMINAR: Para la realizacin de investigacin y docencia en un laboratorio de cultivo
de tejidos se requieren condiciones de aspsia, por lo que se emplea la cmara de flujo laminar que inyecta el
aire ultrafiltrado y esterilizado
HORNOS PARA SECADO: Estos hornos se usan especialmente para el secado del material de vidriera
lavado y para la esterilizacin de instrumentos usados para el cultivo.
AUTOCLAVES. Las autoclaves esterilizan con vapor de presin y tienen dos sistemas de calentamiento: a
base de gas o de electricidad. Los modelos de autoclave son de tipo horizontal o vertical.

VIII.

CUESTIONARIO

8.1.

Dibuje, describa y mencione sus funciones de los materiales, reactivos y equipos del
laboratorio que no observaste en la prctica y que es necesario incluirse en el
laboratorio de biotecnologa.

Entre los materiales y equipos que son indispensables y no se encontr en el laboratorio se encuentran
los siguientes:
8.1.1.

Material de Vidrio

El vidrio corriente no sirve para la fabricacin de instrumentos de laboratorio por ser muy frgil y
vulnerable a los agentes qumicos y fsicos. Por tal razn se construyen de cristal de vidrio, pudiendo ser
este de vidrio grueso o delgado. ( Roca, M.W. 1991)

8.1.2.

Equipos y Aparatos

Para el cultivo de tejidos hay pocos aparatos e instrumentos diseados especialmente para este propsito.
Sin embargo, se pueden escoger varios instrumentos mdicos, as como tambin muchos aparatos de
microbiologa.( Roca, M.W. 1991)

A) CONTADOR DE COLONIAS
Un contador de colonias es un instrumento mayormente utilizado en los laboratorios y
en la industria farmacutica. Este aparato sirve para contar colonias de bacterias y
microorganismos que por lo general crecen en una placa de agar.
Las principales ventajas que ofrece este instrumento se encuentran en el conteo fcil,
rpido y seguro de las colonias bacteriolgicas, as como su fcil manejo. El contador
de colonias permite la visualizacin de colonias bacterianas en un fondo oscuro, ya
sea con o sin sistema de iluminacin, uniforme y brillante. (Hernndez A., Mart C.
1989.)

B) LIOFILIZADOR
Estos liofilizadores han sido diseados especialmente para investigacin avanzada en
biotecnologa y ciencias de la salud. El equipo se ha construido para facilitar el trabajo de
acuerdo a normas GLP.La liofilizacin es un mtodo de conservacin de productos, ideal para
preservar las caractersticas de principios activos (protenas, enzimas), microorganismos,
productos qumicos y naturales, etc.
Principio De Funcionamiento:El equipo dispone de cmara de congelacin y secado, por lo
que el proceso de liofilizacin se realiza de forma totalmente automtica, una vez introducido
el producto en la cmara.(Hernndez A., Mart C. 1989.)

8.2.

Dibuje y explique los smbolos de seguridad que existen en un laboratorio y que smbolos
ms considerara Ud. Y que debe ir en el laboratorio como sealizacin. Por qu.
8.2.1.

Normas para el manejo de reactivos y soluciones

Las siguientes normas deben observarse para prevenir la contaminacin accidental de los reactivos y de las
soluciones.
Seleccionar el reactivo qumico de mejor calidad que se encuentre disponible. Elegir la botella de menor
volumen para obtener la cantidad deseada.
Tapar la botella inmediatamente despus de haber tomado la cantidad deseada. Por ningn motivo delegue
a otro esta accin.
Mantener los tapones de las botellas de los reactivos entre los dedos, nunca debe colocarse un tapn sobre
la mesa. (Dimitri, Mariangela y P. Bet .2001.)
8.2.2.

Smbolos de riesgo

Para manejar con seguridad las sustancias qumicas se han ideado diversos cdigos dependiendo de la
casa fabricante, pero en general los sistemas clasifican las sustancias en las siguientes categoras:
Sustancias explosivas
Peligro. Este smbolo sealiza sustancias que pueden explotar bajo determinadas condiciones.
Ejemplo: dicromato de amonio. Precaucin. Evitar choques, percusin, friccin, formacin de chispas
y contacto con el calor.
Sustancias oxidantes (comburentes) Peligro. Los compuestos comburentes pueden inflamar
sustancias combustibles o favorecer la amplitud de incendios. Ejemplo: permanganato de potasio,
perxido de sodio. Precaucin. Evitar cualquier contacto con sustancias combustibles.
Sustancias
fcilmente
inflamables
a.
Sustancias
autoinflamables.
Ejemplo:
alquilos
de
aluminio,
fsforo.
b. Gases fcilmente inflamables. Ejemplo: butano, propano. Precaucin. Evitar la formacin de
mezclas
inflamables
gas-aire
y
aislar
de
fuentes
de
ignicin.
c. Sustancias sensibles a la humedad Productos qumicos que desarrollan emanaciones de gas
inflamable al contacto con el agua. Ejemplo: litio, borohidruro de sodio.

 Lquidos inflamables
En trminos muy sencillos, los lquidos inflamables son aquellos que fcilmente pueden arder. Entre
ms bajo sea este punto ms fcilmente arde el reactivo y por lo tanto mayor cuidado se ha de tener
en su manejo, almacenamiento y transporte.
Sustancias txicas
Peligro. Tras una inhalacin, ingestin o absorcin a travs de la piel pueden presentarse, en
general, trastornos orgnicos de carcter grave o incluso la muerte. Ejemplo: trixido de arsnico,
cloruro
de
mercurio
(II).
Precaucin. Evitar cualquier contacto con el cuerpo
Sustancias nocivas
Peligro. La incorporacin de estas sustancias por el organismo produce efectos nocivos de poca
trascendencia. Ejemplo: tricloroetileno.Precaucin. Evitar el contacto con el cuerpo humano as como
la inhalacin de vapores.
Sustancias corrosivas
Peligro. Por contacto con estas sustancias se destruye el tejido vivo y tambin otros materiales.
Ejemplo: bromo, cido sulfrico.Precaucin. No inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel, los
ojos y la ropa.
Sustancias irritantes
Peligro. Este smbolo destaca en aquellas sustancias que pueden producir accin irritante sobre la
piel, los ojos y sobre los rganos respiratorios. Ejemplo: amonaco, cloruro de bencilo.Precaucin. No
inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel y los ojos. (Dimitri ,Mariangela y P. Bet .2001.)

8.2.3.

Sealizacin.

En los laboratorios de biotecnologa y de tipo biolgico, la sealizacin contribuye a indicar aquellos

riesgos que por su naturaleza y caractersticas no han podido ser eliminados. Considerando los riesgos ms
frecuentes en estos lugares de trabajo, las seales a tener en cuenta son: (Constants, A.)
8.2.3.1.

Seales de advertencia de un peligro

Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor frecuencia se utilizan
son:

Riesgo elctrico. Esta seal debe situarse en todos los armarios y

cuadros elctricos del laboratorio.

Materias txicas. En aquellos laboratorios en los que se manipulen

sustancias clasificadas como muy txicas, txicas, cancergenas o
mutgenas, tales como la colchicina o la azida sdica, se colocar la seal
indicada en los lugares donde se guarden tales sustancias.

Materiales inflamables. Siempre que se manipule este tipo de materiales,

se utilizar la seal indicada a continuacin.

Baja temperatura. Esta seal deber situarse a la entrada de las cmaras

de climatizacin y frigorficas que trabajen a temperaturas bajas.

Riesgo biolgico. En cumplimiento de lo dispuesto en el anexo III del

Real Decreto 664/1997, de 12 de mayo, se colocar esta seal en todos
los laboratorios en los que se manipulen agentes biolgicos de los grupos
2, 3 4.

Riesgo de radiaciones ionizantes. En los laboratorios en que manipulen

istopos radiactivos, se utilizar la seal indicada.(Constants A.)

8.2.3.2.

Seales de prohibicin

De forma redonda con pictograma negro sobre fondo blanco. Presentan el borde del contorno y una banda
transversal descendente de izquierda a derecha de color rojo, formando sta con la horizontal un ngulo de
45.(CDC)

Prohibicin de fumar y de encender fuego. Siempre que en el

laboratorio se utilicen materiales inflamables deber emplazarse la
seal que indica expresamente la citada prohibicin.

8.2.3.3.

Seales de obligacin

Son tambin de forma redonda. Presentan el pictograma blanco sobre fondo azul. (Constants A.).Atendiendo
al tipo de riesgo que tratan de proteger, cabe sealar como ms frecuentes en estos lugares de trabajo, las
siguientes:

Proteccin obligatoria de la cara. Se utilizar siempre y cuando exista

riesgo de salpicaduras a la cara y los ojos, como consecuencia de la
manipulacin de productos corrosivos o irritantes.

Proteccin obligatoria de vas respiratorias. Esta seal se colocar en

aquellas reas de trabajo donde se manipulen productos txicos o
nocivos susceptibles de ser inhalados, sin perjuicio de que deban ser
manipulados bajo campana extractora, siempre que sea posible.

Proteccin obligatoria de las manos. Esta seal debe exhibirse en

aquellos lugares de trabajo donde se manipulen productos corrosivos,
irritantes, sensibilizantes por contactos cutneos o txicos y nocivos, con
posibilidad de ser absorbidos por la piel. (Constants A.)

8.2.3.4.

Seales relativas a los equipos de lucha contra incendios

Son de forma rectangular o cuadrada. Presentan el pictograma blanco sobre fondo rojo.
Las ms frecuentes en los laboratorios son las que indican el emplazamiento de
extintores y de mangueras para incendios.(Constants A)
8.2.3.5.

Otras seales

En funcin de las caractersticas del local y teniendo en cuenta sus riesgos especficos,
los laboratorios de biotecnologa y de tipo biolgico deben exhibir aquellas seales que avisen de la
existencia de tales riesgos. Conviene recordar tambin la obligatoriedad de sealizar las salidas de
emergencia y elementos de primeros auxilios (botiqun, duchas de emergencia, lavaojos, etc.).(Universidad
Autnoma de Madrid.)

FLUIDO
Por ltimo, otra sealizacin no menos importante es
TRANSPORTADO
aquella que permite identificar las tuberas por el color con
que estn pintadas, en funcin del fluido por ellas Agua
transportado, a saber:(Universidad Autnoma de Aire
Madrid.)
Gas
Vaco
8.3.

COLOR DE
IDENTIFICACIN
Verde
Azul
Amarillo
Gris

Realiza previamente los clculos necesarios para determinar los gramos necesarios de
NaCl para preparar 40 ml de una solucin al 3%.

Si para preparar 100ml al 3% de NaCl se necesitan 3g de NaCl, entonces decimos:

100ml------------------------3g de NaCl
40ml--------------------------Xg de NaCl; por lo tanto se requieren 1.2g de NaCl
8.4.

Mencione como se debe realizar la limpieza y desinfeccin de un laboratorio de

biotecnologa

De (Berrang, 1996); La limpieza y la desinfeccin tienen como fin asegurar una buena higiene, tanto a nivel
de los locales, los materiales, el personal y el ambiente. Es una de las condiciones necesarias para obtener
un producto sano y de buena calidad sensorial;aahor se definirn los conceptos de:
a) Limpieza: Es el conjunto de operaciones que permiten eliminar la suciedad visible y hasta a veces
la microscpica estas operaciones se realizan mediante productos detergentes elegidos en funcin
del tipo de suciedad y las superficies donde se asienta.
Estado de la suciedad:
Suciedad libre: impurezas no fijadas en una superficie, fcilmente eliminables.
Suciedad adherente: impurezas fijadas, que precisa una accin mecnica o qumica para
desprenderlas.
Suciedad incrustada: Impurezas introducidas en los relieves y recovecos del soporte.
b) Desinfeccin: Es el conjunto de operaciones que tiene como objetivo la reduccin temporal del
nmero total de microorganismos vivos y la destruccin de patgenos y alterantes; sin embargo, la
esterilizacin busca la obtencin definitiva de un medio completamente exento de grmenes.
La limpieza y desinfeccin de un laboratorio de biotecnologa Agroindustrial se realiza o tiene la siguiente
cronologa:

 De lo ms sucio alto ms limpio.

De lo ms alto ato ms bajo.
Primero limpieza en seco, segundo en hmedo y por ltimo la desinfeccin.

IX.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

1. ALCZAR, Jorge.(2002), Diccionario tcnico de industrias alimentarias. Segunda

Cibercopy impresiones offset editor. Cusco,

edicin.

2. BERRANG, J. (1996), Gua para la elaboracin de un plan de limpieza y desinfeccin de aplicacin

en empresas, laboratorios y del sector alimentario. Editorial Acribia, S.A. Zaragoza(Espaa).
3. CAIMANQUE,
J.
(2006)
Manual
de
laboratorio
de
qumica
general,
http://biblioteca.duoc.cl/bdigital/Documentos_Digitales/600/610/39586.pdf (extrado al 13/09/13).

4. CASTEGNARO, M. (1982). Limitations inprotection afforded by gloves in laboratory handling of

aflatoxins. J. Assoc. Off. Anal.Chem.,
5. CONSTANTS A. (2001). Exposicin a agentes biolgicos: seguridad y buenas prcticas de
laboratorio. SIAFA SRL.
6. COLLINS, C.H. (1983). Laboratory acquired infections: History, incidence, causes andprevention.
Butter-worths, and Co. Ltd: Oxford, England.
(en lnea): http://www.siafa.com.ar/notas/nota19/exposiciona-biologicos.htm (extrado al 13/09/13)
7. DIMITRI SOSSAI, Mariangela M., Paola Bet. (2001). Manual de investigadores en laboratorio de
biotecnologa. editorial erga. Pag 90- 96.
8. GUARDINO, X. (1992). Seguridad y condiciones de trabajo en el laboratorio. Barcelona: INSHT,
9. HERNNDEZ A., MART M C.(1989). Evaluacin y control de agentes biolgicos en ambientes
laborales. DT.56.89. Barcelona: INSHT.
10. MONTEALEGRE A. Jaime R. (2002) Introduccin al laboratorio de microbiologa. Ctedra de
microbiologa general. Chile: Universidad de Chile editores,
11. PAZ ASTUDILLO, Isabel Cristina. (2009). Diseo integral de biorreactores continuos de tanque
agitado aplicados a procesos de fermentacin Manizales. Tesis de Doctorado en Ingeniera
Automtica.
Colombia:
Universidad
Nacional
De
Colombia
Sede
Manizales
(enlnea):http://www.bdigital.unal.edu.co/2356/1/isabelcristinapazastudillo.2009.pdf
(extrado al
14/09/13)