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UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHO

CENTRO DE CINCIAS EXATAS E TECNOLOGIA


DEPARTAMENTO DE QUMICA
DISCIPLINA:QUMICA BIOLGICA

RELATRIO 05
CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS

SO LUIS-MA
2014

EIRILANY MESQUITA DA SILVA

RELATRIO 05
CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS

Relatrio apresentado disciplina


de Qumica Biolgica do curso de
Qumica Bacharelado como
requisito parcial para obteno de
nota sob orientao dos
professores: Joselene e Celcione.

SO LUS-MA
2014

II

1. INTRODUO
Os carboidratos so molculas orgnicas mais abundantes na natureza,conhecidos tambm como
poliidroxialdedos ou poliidroxicetonas,ou substncias que liberam tais compostos por hidrolise
(CHAMPE et al, 2009 ; MARZZOCO, 2007).O termo carboidrato denota hidratos de
carbono,designao oriunda da frmula geral (CH2O)n apresentada pela maioria dessas molculas, estes
podem ser divididos em trs classes principais de acordo com o numero de ligaes glicosdicas.

Monossacardeos:
So carboidratos simples.Exemplo:Manose um monossacardeo convertida em manose-6-fosfato pela
hexocinase que isomerizada pela enzima fosfomanose isomerase fosfomanose isomerase formando a
frutose-6-fosfato que prossegue no metabolismo glicoltico (VIEIRA, 2011).
Principais monossacardeos:

Frutose: Presentena maioria das frutas e tambm no mel. Sua principal funo fornecer energia para o
corpo humano.
Glicose: Tambm possui funo energtica. Encontrado tambm no mel e nas frutas.
Galactose:presente na lactose (acar do leite). Fornece energia para o corpo humano.
Ribose: compem a estrutura do RNA (cido ribonuclico).

Oligossacardeos
So polmeros compostos de resduos de monossacardeos unidos por ligaes
hemiacetlicas,denominadas ligaes glicosdios em numero que variam de duas at aproximadamente
dez unidade (FRANCISCO JR., 2008; RODRIGUES & SANTOS, 2011).
Exemplos: Maltose que constituda de duas glicoses, encontradas em alguns vegetais.
A sacarose sintetizada nos vegetais a partir da UDP-glicose sendo a frutose-6-fosfato unida UDPglicose pela ao da enzimasacarose-6-fosfato-sintase, formando a sacarose-6-fosfato que tem seu Pi
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removido pela enzima sacarose-6-fosfatase disponibilizando a sacarose no citoplasma dos vegetais


(VIEIRA, 2011).E os polissacardeos so molculas maiores, formadas por vrios monossacardeos
reunidos (SILVA-JNIOR & SASSON, 2005)
Exemplo: Amido um polissacardeo de reserva da clula vegetal, formado por molculas de glicose
ligadas entre si atravs de numerosas ligaes alfa (1,4) e poucas ligaes alfa (1,6), ou "pontos de
ramificao" da cadeia sua molcula muito linear, e forma hlice em soluo aquosa (LEHNINGER,
et al 2006).
Os carboidratos,que compreendem os acares,so moleculas orgnicas constituidas por
carbono,hidrognio e oxignio,sendo as principais substncias produzidas pelas plantas durante o
processo de fotossntese.Costuman ser usados pelas clulas tanto animais quanto vegetais,como
combustvel (SILVA-JNIOR & SASSON, 2005).
Nas estruturas cclicas dos monossacardeos os tomos de carbono anomrico(C1 na aldoses e C2 nas
cetose)so susceptveis de oxidao por varios agentes oxidantes contendo ons cpricos (Cu2+),como as
solues de Fehling ou Benedict.Assim,os monossacardeos com tomos de carbono anomricos
livres,so designados acares redutores,os envolvidos por ligaes glicosdicas so chamados de
acares no redutores (MOTTA, 2011).
Uma das propriedades qumicas apresentadas pelos carboidratos capacidade de participar de processos
de xido-reduo das solues que contm ctions matlicos como o cobre,podendo ser perceptvel esse
proceso pela alterao na cor da soluo.
Uma das principais funes desses processos oxidativos transformar os metais em estado adequado
para o emprego como componentes emm reagente analticos.
O Cu2+,de caracterstica cor azul anil quando em soluo alcalina,ao ser reduzidos estequiometricamente
a Cu2+ proporciona ao meio de reao um precipitado vermelho-tijolo;este o fundamento qumico do
reagente conhecido como licor de Fehling o mtodo de Lane-Eynon baseia-se no fato de que os sais
cpricos,em soluo tartria alcalina(soluo de Fehling),podem ser reduzidos a quente por aldoses ou

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cetoses transformando-se em sais cuprosos vermelhos,que se precipitam,perdendo sua cor azul


primitiva.O tartarato, ao unir-se ao cobre, forma um complexo solvel, impedindo a formao de
hidrxido cprico insolvel que teria lugar se existisse cobre livre na soluo alcalina. Como critrio de
positividade da reao verifica-se a formao de xido cuproso vermelho tijolo, que precipita (IAL,
1976; BOBBIO & BOBBIO, 1995 apud ROCHA, 2012).Dissacardeos:
So carboidratos ditos glicosdeos, pois so formados a partir da ligao de 2 monossacardeos atravs
de ligaes especiais denominadosLigaes glicosdicas.A ligao glicosdicas ocorre entre o carbono
anomrico de um monossacardeo e qualquer outro carbono do monossacardeo seguinte,atravs de suas
hidroxilas e com sada de uma molcula de gua.
Polissacarideos
So carboidratos complexos,macromolculares formadas por milhares de unidades monossacardeos
unidas em cadeias longas ramificadas ou lineares.

Os polissacardeos mais importantes so:

Amido: armazenamento energtico

Glicognio

Celulose

Reao de Fehling
um teste para acares redutores,o grupo carbonila oxidado carboxxila e o on metlico
reduzido.Os glicdios que contm um grupo aldedo ou cetona potencialmente livre existem em soluo
aquosa em equilbrio com uma forma enodiol, que um agente redutor ativo. Em meio ligeiramente
alcalino esta forma favorecida e a sua presena assegura a reduo de ons cobre II a cobre I com a

formao de hidrxido cuproso que, por aquecimento, se converte em xido cuproso, um composto
insolvel de cor vermelha que precipita. Para manter os ons cobre II em soluo em meio alcalino o
reagente de Fehling contm um agente complexante, o on tartarato.
Reaes com Lugol
Tanto no amido como no glicognio, a cadeia polissacardica assume a forma helicoidal,em decorrncia
do grande nmero de unidades de glucose ligadas por ligaes do tipo (1_4). Devido a essa
caracterstica estrutural, ambos os polissacardeos formam complexos de coordenao com o iodeto,
presente na soluo de lugol. Entretanto, a cor do complexo formado geralmente azul para o amido e
avermelhada para o glicognio. A cor varia de acordo com a quantidade de polissacardeo que assume,
quando em soluo, a conformao de hlice.Quando se aquece a soluo de amido,a estrutura
helicoidal se desfaz,consequentemente,no mais possvel a formao do complexo entre o amido e o
iodeto.Ao resfriar a soluo,o amido recupera a sua forma helicoidal.O amido no pode ser detectado
pelos testes de reduo,porque dispe de um numero muito reduzido de resduos de glicose livre,para
determinao da atividade redutora.Na estrutura do amido,a cadeia linear constituda por resduos de
glicose ligados entre si por ligaes (1,4), enquanto na cadeia ramificada ocorrem ligaes (1,4) e (1,6).
A cadeia linear (amilose) solvel e a cadeia ramificada (amilopectina), insolvel. Na presena de
iodo,o amido forma um complexo de cor azulada, de composio incerta. Esse complexo se desfaz sob
aquecimento, perdendo a cor azul, mas refeito quando resfriado.

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2.OBJETIVO

Ao final da prtica o aluno dever ser capaz de executar testes para o reconhecimento de
carboidratos.

VII

3 .MATERIAL UTILIZADOS:

3.1 Vidrarias e outros utenslios

Tubos de ensaio

Pipetas graduadas

Pipetas Pasteur plsticos

Bqueres

Copos de plsticos

Basto de vidro

Esptula

Proveta

3.2 Reagentes

Solues de carboidratos a 1%(glicose,amido,sacarose e maltose);

Soluo de Lugol (iodo a 5% em iodeto de potssio a 10%);

Reagente de Fehling

Carbonato anidro a 10%

Sulfato Cprico pentahidratado a 1,73%

Leite

Amido de milho

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4.PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
4.1 Teste de Fehling
Os monossacardeos podem ser oxidados por agentes oxidantes suaves como ons frricos(Fe3+) e
cprico (Cu 2+).O grupo carbonilico oxidado a cido carboxlico.Estes acares so chamados de
acares redutores.Essa propriedade til na anlise de monossacardeos e dissacardeos.O reagente de
Benedict utilizado geralmente no lugar da soluo de Fehling para detectar a presena de acar
redutor na urina e detectar uma possvel diabete.A presena de acares redutores confere colorao
castanha no teste de Benedict devido a reao de reduo do on Cu 2+.
Soluo A: Soluo aquosa de CuSO4 . 5H2O
Soluo B: Soluo aquosa Sal de Rochelle + NaOH
Reao: CuSO4 + 2 NaOH Cu(OH)2 + Na2SO4
Procedimento:
Colocou-se em dois tubos de ensaio 5 ml (2,5 ml da soluo A + 2,5 ml da soluo B)de soluo de
Fehling,identificou os tubos em A e B.Aqueceu-se brandamente ate a ebulio.Em outro tubo colocouse 0,1g do carboidrato e 2 ml de gua destilada e misturou-se o conteudo dos dois tubos de ensaio e
aqueceu-se brandamente por 2 min.Se o acar for redutor a soluo a colorao ficar vermelho-tijolo.

4.2 Teste de Iodo para deteco de Amido


O amido um polissacardeo de reserva energtica de plantas.Ele formado por dois tipos de polmeros
de glicose:amilose e amilopectina.A amilose consiste de uma cadeia longa,no ramificada de resduos
de glicose( 14) que interage com o iodo,formando um complexo de colorao azul escura violcea.
Soluo de Lugol: Soluo aquosa de I2 + KI

IX

Procedimento:
Colocou-se em 5 tubos de ensaio 1,0 ml da soluocontendo carboidratos.Preparou-se um tubocontrole(negativo) usando 1 ml de guae preparou um tubo-controle( positivo) usando 1 ml do acar
redutor padro(glicose).
Adicionou-se a cada tubo de ensaio umas gotas de Lugol,e observou-se o aparecimento da cor azul
violcea Anotou-se no roteiro os resultados positivos(+) ou negativos(-) para os tubos que continham e
que no continham amido,respectivamente.Tomou-se apenas o tubo com a soluo de amido/iodo
aqueceu-se e observou-se;resfriou-se o tubo observou-se novamente.

4.3 Deteco de Amido em Alimentos


O amido um polissacardeo de reserva energtica de plantas.Desta forma podemos detectar a presena
do amido em diferentes alimentos de origem vegetal.
Alguns produtores de leite costumam adulterar seus produtos adicionando gua e para disfarar a
diluio o leite adulterado tambm com amido de milho.
Assim,o consumidor pode identificar se o leite foi adulterado com amido adicionando algumas gotas de
iodo ao produto.
Procedimento:
Preparou-se um tubo-controle(positivo) usando 1 ml de amido padro,e prepaou tambm um tubocontrole(negativo) usando 1 ml de gua.Colocou-se em uma placa de Petri ou bquer diferentes
alimentos:leite e leite com amido.Pingou-se uma gota diretamente nas amostras e nos tuboscontroles.Comparou-se a colorao obtida nas amostras com a obtida nos controles.

4.4 Hidrlise Enzimtica do Amido


Os oligassacardeos e polissacardeos so formados por unidades de monossacardeos unidos por ligao
O-glicosdica.Estas ligaes podem ser hidrolisadas pela quebra da ligao O-glicosdica liberando os
monossacardeos que os compem.
Procedimentos:
Colocou-se 1 ml de soluo de amido em dois copos plsticos;recolheu-se um pouco de saliva em um
copo;esperou-se 30 min e pingou-se uma gota de iodo em cada tubo e observou-se e anotou-se.

XI

RESULTADOS E DISCUSSO
Teste de Fehling:
No teste,o cobre presente na soluo reduzido pela ao do acares redutores.A extremidade redutora
do acar reduz o on cprico-trtaro de sodio potssio a tartro de sodio potssio e xido cuproso.Este
composto se precipita em soluo dando origem a colorao avermelhada caracteristica.A glicose
exemplo caracterstico de glcidios mais simples carcterizado corretamente pela sua capacidade que
pode ser facilmente observada atraves da mudana de cor de indicadores de oxirreduo.A soluo
inicialmente de colorao azul-escuro foi colocado para aquecer e esperado o aquecimento,com o
aumento da temperatura a soluoadquirido a cor vermelho-tijolo.
A sacarose por ser um dissacardeo,noglicose.Isso acontece uma vez que os grupos funcionais
encontados na molecula esto ocupadas na ligao glicosdicas. A soluo inicialmente de colorao
azul-escuro foi colocado no aquecimento e esperado uns minutos,com o aumento da temperatura no
houve a formao de precipitado vermelho-tijolommas a soluo permaneceu azul-escuro.

Teste de Iodo para deteco de Amido


A reao foi negativas para os tubos 1(glicose),2(gua),4(maltose) e 5(sacarose) onde obteve-se uma
colorao amarelo-claro.No tubo 3 (amido),a reao deu positiva onde a soluo inicialmente tornou-se
azul e com o aquecimento tornou-se amarelo-claro e aps o resfriamento voltou a cor azul . O amido
formado pela combinao de amilose e amilopectina.Sabe-se que o Lugol a base de iodo e capaz de
interagir com a amilose (polmero linear de milhares de resduos de glicose). Ocorre uma interao fraca
entre a amilose e iodo. Esta interao resultante do alojamento do iodo do reagente, dentro da cadeira
do polissacardeo.
O amilose ento perde sua estrutura espiral quando fornecido o aquecimento a amostra (as interaes
fracas so rompidas).Sendo assim, o iodo ento liberado do interior da amilose e o complexo passa a

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adquirir colorao transparente. Quando a amostra resfriada, a forma aspiral da amilose retorna, ou
seja, as interaes fracas so reconstitudas e a colorao azul novamente observada na amostra.

Deteco de amido em alimentos

No leite,est presente a glicose,aminocidos e h lpidios.No experimento ,o tubo que continha a


amostra adulterada por amido,surgiu uma colorao roxa,indicando a contaminao atravs da formao
de complexo de amido e iodo.No tubo com amostra sem contaminao no apresentou colorao.Este
teste feito por que o amido um recontituiente da densidade.
Em adulterao,a adio do amido serve para alterar a densidade do leite diludo,possibilitando a
fraude.Essa tcnica se baseia na propriedade das molculas de amilose e amilopectina(2 polmeros
constituintes do amido) sem sofrerem alteraes de complexao,com formao de compostos
coloridos.Quando se coloca Lugol na soluo,esta apresenta colorao azul intensa ,desenvolvida pela
ocluso(aprisionamento) do iodo nas cadeias lineares da amilose(3 e 4).
Hidrolise enzimtica do amido
Os oligossacardeos e polissacardeos so formados por unidades de monossacardeos unidos por
ligao O-glicosdica.Estas ligaes podem ser hidrolisadas pela quebra da ligao O-glicosdica
liberando os monossacardeos que os compem.
No teste,em relao ao iodo,observou-se que com o passar do tempo de reao de hisrlise,aps adio
do Lugol,e sem precipitado(tempo de 30 min).O copo contendo uma soluo de saliva e amido
primeiramente foi pensado que este reagiria com o Lugol j que o amido tambm um
polissacardeo.Portanto,a saliva possui a enzima citada acima que acelera a degradao do amido em
glicose,restando assim o tubo esta e o Lugol;no havendo reaes entre eles.Contudo o copo com amido
no reagiu com o Lugol.

XIII

CONCLUSO
Conclui-se que atravs de testes qualitativos e conhecendo as estruturas dos carboidratos assim como
suas classificaes e funes foi possvel identificar os acares.Portanto os testes executados nesta
prtica so de fundamental importncia para a bioqumica visto que permitir reconhecer tais
carboidratos tambm podem constatar a organizao dos carboidratos , as etapas do processo de
hidrlise em alguns oligossacardeos e polissacardeos, mostrou-se tambm como suas propriedades
podem variar de acordo com o meio reacional, como se comporta um carboidrato redutor e no reduto.
Entao constatou-se que essa prtica teve grande importncia para a assimilao e complemento dos
assuntos aprendidos nas aulas tericas.

XIV

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

CHAMPE, P.C; HARVEY, R.A. Bioqumica ilustrada. 2 ed. Porto Alegre: Artmed, 1994.

LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M. Princpios de Bioqumica. 2. ed. So Paulo:
Sarvier, 2000. 839p.

MARZZOCO, Anita., TORRES, Bayardo Baptista. Bioqumica Bsica. 2ed. Rio de Janeiro,
1999.

<http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/guia_praticas.htm> Acesso em 30 de nov. de


2014.

<http://intermed99.vilabol.uol.com.br/bioquimica2.html> Acesso em 30 de nov. de 2014.

<http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_ch/benedict.htm> Acesso em 30 de
nov. de 2014.

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