12. Congresso da gua / 16.

ENASB / XVI SILUBESA

REMOO DE NITRATO POR RECURSO FITOREMEDIAO EM

ZONA HMIDA ARTIFICIAL PLANTADA COM ARROZ (ORYZA
SATIVA)
Adelaide ALMEIDA1; M.Jos IMAGINRIO2; Carlos RIBEIRO3;Ivone CASTANHEIRA4;
Srgio VICENTE 5
RESUMO
A remoo de nitrato foi estudada numa zona hmida artificial plantada com Oryza sativa
em agregados leves de argila expandida e alimentada em modo vertical. Pretendeu-se
avaliar a possibilidade de utilizar arroz no tratamento de guas com elevados teores de
nitrato (85 mgL-1 7) e baixo teor de carbono (0,23 0,1 C/N 0,34 0,1). A carga
hidrulica variou de 148 3 a 473 Lm-2d-1 3, ocorreu um aumento da carga mssica de
nitrato e decrscimo do tempo de reteno hidrulico (de 3 h 50 min 0,8 at 1 h 10 min
0,1). A remoo mxima de nitrato foi de 3 gm-2d-1 0,4 quando a carga mssica aplicada
foi 7 gm-2d-1 0,4. Subsequentes aumentos nas cargas hidrulicas e mssica reflectiram-se
numa diminuio de carga de nitrato removida. A desnitrificao ocorreu em todos os
ensaios, e eficincia de remoo de nitrato at 47 % 2%, apesar de afluente e efluente se
encontrarem sempre em condies de aerobiose. Os teores em oxignio dissolvido no
afluente variaram entre 4,7 mgO2L-1 2,1 e 7,7 mgO2L-1 0,9, diminuiu no efluente, sem
apresentar diferenas significativas quando comparado com o afluente (p>0,05).

Palavras-chave: desnitrificao, Oryza sativa, zona hmida artificial de fluxo vertical

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1 INTRODUO
O azoto um elemento essencial vida, mas a presena de alguns compostos de azoto em
guas superficiais e subterrneas um problema que tem vindo a aumentar com a
passagem dos anos. A sua origem est frequentemente associada intensificao da
agricultura de regadio e crescimento significativo da utilizao de fertilizantes, sobretudo de
azoto inorgnico. A actividade pecuria intensiva, com consequente deposio de chorumes
no solo, assim como a deposio, nos diversos meios receptores, de guas residuais
urbanas ou industriais com elevados teores de azotados, tm contribudo para um
acrscimo destes compostos, essencialmente o nitrato, em guas subterrneas e algumas
superficiais. Elevados teores de nitratos na gua destinada ao consumo humano (valores
acima de 50 mg/L de NO3) podem ser considerados perigosos para crianas com idade
inferior a 6 meses, pois no intestino o nitrato reduz-se a nitrito formando a metemoglobina,
um molcula que impede a hemoglobina de transportar o oxignio. Esta doena
vulgarmente designada por sndrome do beb azul e caracteriza-se pela falta de oxignio
no organismo e consequente morte por asfixia (Oztrk e Bektas, 2004).
Por forma a evitar problemas de sade pblica necessrio proceder remoo de nitrato
em efluentes e guas destinadas ao consumo humano. A poluio por nitrato pode ser
prevenida atravs da reduo da libertao de nitrato para o ambiente, ou do controlo das
suas fontes e pelo tratamento da gua contaminada. Existem diversas tecnologias utilizadas
para a remoo de nitrato, nomeadamente processos fsicos-qumicos tais como a troca
inica, a osmose inversa, a electrodilise e a adsoro, processos que, para alm de serem
onerosos, tambm produzem subprodutos de difcil tratamento (Chatterjee e Woo, 2009),
sendo a desnitrificao biolgica considerada um mtodo de baixo custo e eficaz (Shrimali e
Singh, 2001). As Zonas Hmidas Artificias (ZHA) podem ser uma alternativa para a remoo
de nitrato de guas superficiais e residuais atravs da desnitrificao microbiana,
assimilao pelas plantas e microrganismos, ou ainda outros processos de fitoremediao
que ocorrem devido presena das plantas (Lin et al., 2008). As plantas mais vulgarmente
utilizadas nas ZHA so a Phragmites, Typha e Scipus.. O arroz compartilha algumas
caractersticas com estas plantas, pelo que tambm se desenvolve bem em condies de
alagamento podendo ser utilizada em ZHA (Hunt et al., 2002).
A desnitrificao o processo atravs do qual ocorre a maior remoo de nitrato em ZHA. O
nitrato pode ser convertido a N2 atravs de uma srie de reaces, em que alguns dos
compostos intermdios so o nitrito (NO2-) e o xido nitroso (N2O) (Kadlec e Wallace, 2008).
um processo mediado por bactrias facultativas heterotrficas em que as plantas das ZHA
tem um papel crucial, porque podem contribuir para a presena de carbono no afluente a
tratar (Matheson e Sukias, 2010). O oxignio dissolvido (OD) deve ser mantido inferior a 1
mg O2L-1 (Metcalf & Eddy, 2003), tendo sido verificada a ocorrncia de desnitrificao em
ZHA com OD entre 0,3 e 1,5 mg O2L-1 (Kadlec and Wallace, 2008).

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2 MATERIAIS E MTODOS
2.1 Condies operatrias
Uma ZHA piloto composta por um leito de fluxo vertical (0,24m20,70m), plantado com
Oryza sativa (arroz) em agregados leves de argila expandida (Leca NR10/20) (Figura 1),
foi utilizada para o desenvolvimento experimental deste trabalho (Almeida, 2012).

Figura 1. Esquema da ZHA piloto plantada com Oryza sativa, alimentada com frutose e nitrato de
potssio em modo contnuo vertical.

A ZHA foi alimentada com efluente sinttico preparado diariamente, de acordo com (Hunter
et al,. 2001), utilizando nitrato de potssio e frutose, com fonte de nitrato e carbono,
respectivamente. A ZHA foi alimentada de forma contnua em modo vertical, com taxa de
inundao de 50% (Almeida, 2012). As condies operatrias aplicadas ao sistema
encontram-se indicadas no Quadro 1.

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Quadro 1. Condies de alimentao aplicadas ao leito piloto: carga hidrulica (Ch), concentrao de
azoto total (NT), nitrato (N-NO3 ), nitrito (N-NO2 ), CQO, razo C/N, taxa de inundao do leito de
50%. Temperatura do ar e do solo (T ar e T solo).
Ch
-2

NT

N-NO3
-

-1

N-NO2
-

CQO

C/N

T ar

-1

(L m d )

(mg L )

T solo
(C)

1483

191,9

191,6

0,30,1

18963

0,230,1

263

183

2392

191,9

191,8

0,10,1

12045

0,310,1

223

163

3502

192,5

192,5

0,10,1

14753

0,340,1

242

152

4733

181,3

181,3

0,10,1

15442

0,300,1

192

143

Mdia Desvio Padro, calculada para nvel de confiana de 95%; Nmero de determinaes (n10).

Nesta fase inicial do estudo, e para garantir que eventuais efeitos txicos estariam
relacionados com a [N-NO3-], preparou-se efluente sinttico com KNO3 e micronutrientes
(Hunter et al. 2001). O efluente foi preparado diariamente e a alimentao ao leito foi
efectuada de modo contnuo, atravs de bomba submersvel, efectuando-se tambm a
homogeneizao do afluente. A distribuio homognea superfcie do leito foi efectuada
atravs de dispersores equidistantes colocados superfcie do mesmo, em modo vertical.
2.2 Monitorizao do sistema
O sistema foi sempre monitorizado, durante o perodo de realizao dos ensaios. As leituras
da Temperatura do solo (T solo), foram efectuadas com um termmetro colocado no seu
interior, a uma profundidade de aproximadamente 10 cm, mediu-se tambm a Temperatura
do ar (T ar), com um termmetro colocado numa parede junto ao leito.
A observao visual do sistema foi efectuada com o objectivo de detectar eventuais efeitos
de toxicidade nas plantas. Foram recolhidas amostras de biomassa foliar no incio e final dos
ensaios, para posterior determinao do teor de humidade e azoto.
A recolha de efluente foi efectuada entrada e sada do leito e as amostras foram
transportadas de imediato para o laboratrio para determinao de pH, condutividade
elctrica (CE), potencial redox (Eh), e oxignio dissolvido (OD). Para os restantes
parmetros, quando no foi possvel analis-los de imediato, foram conservadas a -20C.
2.3 Mtodos analticos
A condutividade elctrica (CE), pH, potencial redox (Eh), oxignio dissolvido (OD), carncia
qumica de oxignio (CQO), nitrito (N-NO2-) e nitrato (N-NO3-) foram determinados de acordo
com Standard Methods (APHA, 2005). Determinou-se tambm o azoto e a humidade, na
biomassa foliar de acordo com Miller, (1998).

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2.4 Tratamento dos resultados obtidos

Os resultados obtidos foram tratados estatisticamente no programa Statistica (verso 8)
sendo em todos os testes usado um limiar de significncia de 5%. A comparao das
diferenas entre os valores de entrada e sada dos leitos, para os diversos parmetros
fsico-qumicos monitorizados, foi efectuada por anlise de varincia (ANOVA) a dois
factores, sendo as suas mdias avaliadas posteriormente pelo teste de Tuckey. As
eficincias de remoo foram analisadas por ANOVA a um factor e comparadas pelo teste
de Tuckey.
Optou-se por calcular as respectivas cargas mssicas porque torna mais perceptvel a
quantidade de azoto (g d-1) possvel de aplicar a cada ZHA, bem como a respectiva carga
removida e eficincia de remoo.
No entanto, toda a legislao nacional referente a normas de descarga de efluentes tem
como base a concentrao de cada parmetro permitida e no a respectiva carga. Sendo
portanto, necessrio, ter isso em ateno quando se pretende efectuar o dimensionamento
de uma ZHA.

3 RESULTADOS E DISCUSSO
O principal objectivo deste trabalho foi a avaliao da possibilidade de utilizar arroz (Oryza
sativa) para tratar um efluente com concentraes de nitrato (de 85 mgL-1 7, com baixo
teor de carbono (0,23 0,1 C/N 0,34 0,1) e carga hidrulica (Ch) aplicada ZHA
crescente (148 3 Ch 473 Lm-2d-1 3).

3.1 Crescimento e produtividade da biomassa vegetal

O crescimento da biomassa foliar foi monitorizado durante todo o perodo experimental. O
leito foi plantado em Maio, as plantas tinham uma altura de cerca 30 cm. Apresentaram uma
taxa de crescimento de 6 mm d-1, quando a T ar variou de 192 a 263 C e dias com
bastante intensidade luminosa. Atravs da inspeco visual feita s plantas, nunca se
detectaram eventuais sinais de toxicidade devido aos elevados teores de nitrato no afluente
([NO3-] 85 mgL-1 7).
Foi determinado o teor em azoto na biomassa vegetal, no incio e no final dos ensaios,
constatou-se que ocorreu assimilao de azoto pelo arroz. A variao do teor em azoto foi
de 6,8 1,1 mgN/g biomassa seca, o que corresponde a uma assimilao de azoto de 0,31 mg
0,1 mgNm-2 d-1.

3.2 Variao de Eh, OD, pH e CE

O Eh medido no efluente entrada e sada do leito foi sempre positivo, mas sem diferenas
significativas entre Eh no afluente e efluente do leito (p>0,05).

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Os teores em oxignio dissolvido (OD) no afluente variaram entre 4,7 mgO2L-1 2,1 e 7,7
mgO2L-1 0,9. OD do efluente diminuiu, mas no apresentou diferenas significativas
quando comparado com o afluente (p>0,05) (Figura 2a). Ocorreu remoo de nitrato em
todos os ensaios, com uma eficincia de remoo de 27 5,7 a 47 1,8 %, como se poder
constatar mais adiante. O leito foi operado em modo vertical, apesar da TI (taxa de
inundao) de 50%, o efluente nunca se apresentou em condies de anaerobiose. O tipo
de escoamento, bem como a planta utilizada podem ter contribudo para a transferncia de
oxignio por difuso (Cooper, 2005) para o interior do leito, onde as temperaturas foram
inferiores s do ar. Tambm, o facto da realizao destes ensaios ser coincidente com um
perodo de grande crescimento da planta (cerca de 6 mm d-1) de grande intensidade
luminosa, causando o aumento da actividade fotossinttica que pode ter contribudo para o
aumento do teor em OD no efluente. Tambm as menores temperaturas no interior do leito,
comparadas com as do ar, so um factor a considerar.
O pH no efluente diminuiu, quando comparado com o afluente, em cada ensaio, sem
diferenas significativas, entre o pH do efluente e afluente do leito (p>0,05) (Figura 2b). A
variao de pH neste trabalho parece depender, entre outros, do balano entre o aumento
da concentrao de ies OH-, causado pela desnitrificao, que teoricamente faz subir o
pH, com outras reaces que ocorreram, nomeadamente a oxidao aerbia da frutose,
com libertao de CO2 e consequente abaixamento de pH (Kyambadde et al., 2004), assim
como o consumo de alcalinidade do afluente.
No se verificaram alteraes significativas da CE, entre a entrada (1 mScm-1 0,7) e a
sada do leito (1 mScm-1 0,1) (p>0,05), deduz-se que concentrao de SST se manteve
constante denotando que no ter ocorrido precipitao de sais no interior do leito.

Figura 2. Variao OD (a) e pH (b) no afluente e efluente vs carga mssica de nitrato aplicada
(Cm(N-NO3 )).

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3.3 Evoluo dos compostos de azoto vs razo C/N

Quando se planearam estes ensaios, e porque o efluente sinttico no tinha carbono,
procedeu-se adio de frutose de forma a promover de modo mais eficiente a
desnitrificao. No tratamento de efluentes em ZHAs o carbono pode existir na gua a tratar
ou ser proveniente do decaimento da biomassa vegetal e exsudados das razes das plantas
(Songliu et al., 2009).
A quantidade de frutose presente no afluente e efluente do leito foi quantificada atravs da
CQO. No Quadro 1, encontram-se indicadas as relaes entre o carbono e o azoto
aplicadas, em cada ensaio, e as concentraes de CQO. A matria orgnica foi oxidada e
observou-se que no foi reagente limitante para a desnitrificao dado ainda estar presente
no efluente.
Nestes ensaios os valores de C/N foram de 0,23 0,1 C/N 0,34 0,1 (Figura 3b), muito
inferiores aos valores considerados ideais para que o processo possa ocorrer, e que deve
ser da ordem de 1,25 gC/gN (Metcalf & Eddy, 2003). A razo C/N no efluente diminuiu
relativamente ao valor presente no afluente bruto. Provavelmente ocorreu oxidao aerbia
do carbono, pela comunidade microbiana, com consequente descida de pH. Assim,
podemos concluir que o carbono adicionado ao afluente no foi limitante para o processo e
provavelmente no foi utilizado para a desnitrificao. O decrscimo de OD (Figura 2a)
observado deveu-se provavelmente ao seu consumo pelos microrganismos presentes para
oxidar a frutose adicionada.
Estes ensaios foram realizados com o objectivo de manter a concentrao de nitrato
afluente ao leite constante (85 mgL-1 7 de NO3-) e variar o caudal de alimentao, por
forma a fazer variar a carga hidrulica (Ch), o tempo de reteno hidrulico (TRH) e a carga
mssica de nitrato aplicada (CmN-NO3-).
Assim, a Cm(N-NO3-) aplicada variou entre 3 gm-2d-1 0,3 a 9 gm-2d-1 0,6. Observou-se
que o sistema apresentou uma capacidade de remoo de nitrato mxima de 3 gm-2d-1 0,4
quando a Cm(N-NO3-) aplicada foi de 7 gm-2d-1 0,4 (Figura 3a). A eficincia de
desnitrificao mxima obtida foi de 47 % 2%. O tempo de reteno hidrulico (TRH)
neste ensaio foi de 1 h 40 min 0,4.

Figura 3. Variao Cm(N-NO3 ) removida Vs Cm(N-NO3 ) no afluente (a); variao da razo C/N no
afluente e afluente do leito Vs Cm(N-NO3 ) no afluente.

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Um subsequente aumento de Cm(N-NO3-) para 9 gm-2d-1 0,6, reflectiu-se num decrscimo

considervel de remoo de nitrato, e reduo da eficincia de desnitrificao para 27%
3%. Esta diminuio na Cm(N-NO3-) removida pode ter sido causada pelo teor de OD no
afluente que foi de 7,7 mgO2L-1 0,9, tendo, no efluente, diminudo para 5,6 mgO2L-1 0,7
(Figura 2a), eventualmente devido ao seu consumo para oxidar o carbono presente, fazendo
com que o carbono seja, neste ensaio, um factor limitante do processo. O TRH diminui
ligeiramente e foi de 1 h 10 min 0,1 (praticamente idntico ao valor do ensaio
imediatamente anterior, que foi de 1 h 40 min 0,4).
No entanto o aumento da carga hidrulica (Ch) aplicada ao leito e consequente aumento da
carga mssica de nitrato pode contribuir para a diminuio de remoo de nitrato observada.
Existe alguma controvrsia na comunidade cientfica quanto ao efeito do aumento da Ch na
desnitrificao. Alguns autores referem-na como positiva, devido ao aumento do aporte de
nitrato comunidade microbiana e s plantas presentes na ZHA (Kadlec, 2010), outros
referem exactamente o contrrio, isto , que o aumento da Ch implica o aumento da
oxigenao e a resuspenso de substancias orgnicas dos sedimentos (Spieles and Mitsch
1999), bem como a diminuio do TRH.
O TRH geralmente utilizado em ZHA, quando se pretende efectuar a remoo de azotados,
geralmente entre 2 e 10 dias, muito superior aos valores utilizados neste trabalho (de 3 h
50 min 0,8 a 1 h 10 min 0,1) (Saeed et al., 2012).
Lin et al., (2008) em sistemas com diferentes tipos de escoamento hidrulico (escoamento
em superfcie livre e sub-superficial), observaram que o aumento da Ch, at 120 e 70 Lm-2d1
, respectivamente, aumentava a eficincia de remoo de nitrato. Quando a Ch foi superior
a estes valores, constataram uma diminuio de eficincia de desnitrificao que atriburam
ao aumento da carga de nitrato e reduo da relao C/N.
A inibio de remoo de nitrato parece dever-se ao aumento da carga mssica de nitrato
aplicada (9 gm-2d-1 0,6). Nestes ensaios a razo C/N no efluente no diferiu
significativamente entre cada um dos ensaios que foram efectuados, no entanto, dados os
valores de OD no afluente, pode ter ocorrido oxidao aerbia da matria orgnica com
consequente diminuio da desnitrificao.
Todos os ensaios foram efectuados em condies aerbias (afluente e efluente. O teor em
OD no afluente pode ser um factor a ter em conta, dado que no ensaio em que ocorreu
inibio de remoo de nitrato, foi aquele em que o seu teor no afluente foi mais elevada
(7,7 mgO2L-1 0,9) e significativamente diferente dos outros ensaios (p<0,05).

4 CONCLUSES
Verificou-se ser possvel a utilizao de uma ZHA, plantada com arroz (Oryza sativa) para
tratar uma gua com concentrao de nitrato de 85 mgL-1 7 e baixo teor de carbono (0,23
0,1 C/N 0,34 0,1), em condies aerbias. A eficincia de remoo de nitrato atingiu
47 % 2% , para uma carga mssica de nitrato aplicada de 7 gm-2d-1 0,4. No se notaram
quaisquer efeitos de toxicidade sobre a planta utilizada, no entanto quando a carga mssica
de nitrato aplicada foi de 9 gm-2d-1 0,6 observou-se diminuio na carga mssica de nitrato
removida. importante prosseguir estes estudos com o objectivo de avaliar, quais os
factores que interferiram nesta inibio, se o excesso de substrato (nitrato), se a presena
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de OD ou outros. O arroz provou ter capacidade de incorporao de azoto na sua biomassa

vegetal, podendo ser posteriormente valorizado na alimentao animal.
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