UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS UNICAMP

FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA

DEPARTAMENTO DE DIAGNSTICO ORAL
Disciplina de Microbiologia e Imunologia

I INTRODUO MICROBIOLOGIA

* ORIGEM E DESENVOLVIMENTO DA MICROBIOLOGIA

* ESTUDO SOBRE A IMUNIDADE

1 Origem da Microbiologia
2 Biognese X Abiognese
3 Teoria Microbiana da Fermentao
4 Teoria Microbiana da Doena
5 Desenvolvimento da Microbiologia Oral
6 Primeiros Estudos sobre a Imunidade

1 Origens da Microbiologia
1.1 O que microbiologia
A microbiologia o ramo da biologia dedicado ao estudo dos seres
microscpicos, geralmente muito pequenos para serem observados a olho desarmado. A
palavra microbiologia deriva de trs palavras gregas - mikros pequeno; bios vida;
logos cincia.
1.2 Surgimento da microbiologia
A microbiologia nasceu da especulao do homem sobre a origem da vida,
sobre as fontes das doenas epidmicas e transmissveis, da putrefao da matria e
processos de fermentao. O Velho Testamento contm referncias a algumas regras para
evitar doenas. O Livro de Leviticus contm descries detalhadas da lepra:
Se os plos presentes se tornarem brancos e a chagas apresenta ser
mais profunda de que a pele circundante, trata-se da temvel doena de pele ...
[lepra] contudo, se a chagas no parece ser mais profunda do que a pele circundante
e os plos no se tornarem brancos, o sacerdote dever isola-lo por sete dias.
[conceito de quarentena]

Nas antigas civilizaes, as causas das doenas infecciosas eram atribudas a

natureza como o aparecimento de um cometa, ou um desagrado a uma divindade, no
entanto preconizava-se alguns mtodos de higiene e a quarentena.
Hipcrates, mdico grego, estabeleceu alguns conceitos de doena que
influenciaram a prtica at a Idade Mdia e vrios conceitos sobre as doenas infecciosas
ainda datavam da era a. C.. Em 1546, Girolano Francastoro, mdico italiano, definiu que
o contgio ocorria: 1 pelos contatos; 2 atravs de fmites ou objetos; 3 a distncia
(atravs do ar).

1.3 As primeiras observaes ao microscpio

J em 1673, Antony van Leeuwenhoek, aps ter inventado o microscpio,
comeou a fazer observaes dos primeiros seres invisveis ao olho desarmado, chamando
esses seres microscpicos de pequenos animlculos. Entre 1683 a 1695, Leeuwenhoek
enviou cartas a Sociedade Real de Londres fornecendo descries claras das bactrias
encontradas na cavidade oral.

Esboos

de

bactrias

da

cavidade bucal, observadas

por Leeuwenhoek. Tambm
mostrou a motilidade de
algumas

bactrias,

no

traado C-D.

2 Biognese X Abiognese
Aps essas descobertas realizadas por Leeuwenhoek, surgiram calorosas
discusses sobre a origem dos microrganismos. Muitos pesquisadores acreditavam que a
vida surgia de objetos inanimados, sendo este processo denominado de abiognese. Por
outro lado, outros pesquisadores defendiam que os animlculos de Leeuwenhoek se
originariam de outros seres de igual espcie, esse tipo de origem se denominou de
biognese. A idia de gerao espontnea ou abiognese se deu origem na Grcia Antiga,
onde acreditava-se que as rs e minhocas surgiram espontaneamente de pequenos lagos de
lama.

Em 1745, John Needham cozinhou pedaos de carne para destruir os

microrganismos preexistentes e colocou em frascos abertos, posteriormente ele observou
colnias de microrganismos crescendo na carne e concluindo que, em cada partcula de
matria orgnica, havia uma fora vegetativa capaz de levar a matria orgnica a brotar
uma vida. Spallanzani (1765-1776) concluiu, corretamente que no bastava fechar
hermeticamente os frascos contendo as infuses aquecidas, pois era importante que o ar
acumulado acima do lquido no contivesse animlculos ou germes. No havia
crescimento de microrganismos na infuses fervidas quando o ar, livre de germes pelo
aquecimento, penetrava nos frascos. Seus oponentes replicaram que o aquecimento havia
viciado o ar, deixando-o incapaz de vitalizar a matria orgnica.
Mas, no sculo XVII, pensadores e crticos foram discordando dessa idia. Aps
quase cem anos depois do primeiro experimento de Needham, Franz Schulze (1815-1873),
em 1835 e Theodor Schwann (1810-1882), no ano seguinte, tentaram resolver a
controvrsia da essencialidade do ar. O primeiro fez passar o ar por uma soluo de cido
forte e depois passava por uma infuso de carne previamente fervida em um frasco fechado.
O segundo, Schwann, fez o ar passar por um tubo aquecido ao rubro e ento aerizava o
caldo, matando assim, nos dois casos, os micrbios do ar e evitando a contaminao dos
meios.
Porm os defensores da gerao espontnea no ficaram convencidos com tais
experimentos. Eles diziam que o cido e o calor alteravam o ar no permitindo o
crescimento microbiano. At o ano de 1854, os cientistas no haviam resolvido esse debate
sobre a passagem do ar. Para isso colocaram algodo em um tubo e o ar passava livremente
at um caldo nutriente estril, no havendo crescimento microbiano, o que forneceu ainda
mais os argumentos para os defensores da biognese.

2.2 Demonstrao da Biognese

Essa discusso durou at meados de 1860, quando um qumico francs
chamado Louis Pasteur realizou seus experimentos clssicos que derrubaram
definitivamente a teoria da gerao espontnea. Ele utilizou frascos com um pescoo
semelhante a um pescoo de cisne, preenchidos com caldo nutritivo e fervidos. Demostrou
com isso, que a poeira do ar continham muitos microrganismos e que os mesmos,
contaminavam os meios nutritivos. Essas infuses fervidas permaneciam estreis
indefinidamente pois o frasco com o gargalo semelhante a um S evitavam a passagem
dos microrganismos, mais no do ar propriamente dito.
O fsico John Tyndall, em 1881, contribuiu para a confirmao da teoria da
biognese realizando um experimento onde usou uma cmara de cultivo ou caixa, onde
demostrou que o ar poderia ficar sem microrganismo simplesmente por permitir que as
partculas de poeira se sedimentassem no fundo de uma caixa fechada.

Vrios tipos de frascos utilizados por Pasteur em suas pesquisas.

Cmara de Tyndall utilizada para confirmar a teoria da biognese.

3 Teoria Microbiana da Fermentao

A fermentao j era utilizada na Grcia antiga para a fabricao de vinho, na
China (2.300 a. C.) uma cerveja chamada de kiu e no Japo o saqu bebida derivada da
fermentao microbiana do arroz. Por volta de 1850, Pasteur foi solicitado pela industria
do vinho francs para examinar lotes de vinho, encontrando microrganismos diferentes no
vinho de qualidade superior e no lote de qualidade inferior. Para resolver o problema ele
aqueceu o suco de uva por vrios minutos e depois resfriou.
Com isso, eliminou os microrganismos existentes no suco, e em seguida,
inoculou no mesmo os microrganismos que estavam presentes nos vinhos de boa qualidade.
Observou-se ento que a qualidade dos produtos fermentados no se baseava na tentativa e
no erro, mas sim no tipo de microrganismo que realizava a fermentao. O processo
utilizado para a eliminao dos microrganismos presentes no suco foi denominado,
posteriormente de pasteurizao.

4 Teoria Microbiana da Doena

4.1 Histrico
Girolamo Francastoro (1483-1553): sugeriu que as doenas surgiam devido a organismos,
pequenos demais para serem vistos, se propagavam de uma pessoa para outra e foram
baseadas em fatos narrados por marinheiros sobre a propagao das doenas.

Anton von Plenciz (1705-1786): aps 200 anos, alm de estabelecer que seres vivos eram
causadores de doena, como diferentes agentes eram responsveis por diferentes doenas,
vivendo um no outro, retirando seus nutrientes (parasitismo).

Louis Pasteur (1822-1895): foi requisitado para investigar a doena do bicho-da-seda e

durante seis anos tentou provar que um protozorio causava a doena. Tambm estudou o
papel dos microrganismos nas doenas dos seres humanos e dos animais. Em 1880 ele
descobriu o que bactrias atenuadas conferiram proteo contra a clera aviria e em 1884,
relatou que os vrus atenuados protegiam contra a raiva. Pasteur com a finalidade de matar
esporos, iniciou a prtica de esterilizar as infuses empregando o vapor sob presso (15
libras a 121oC), enquanto que materiais estveis eram esterilizados em fornos com calor
seco na temperatura de 160oC.

Robert Koch (1843-1910): mdico e rival de Pasteur, provou que as bactrias eram
responsveis pela doena do carbnculo. Foi o primeiro a provar que um tipo especfico de
micrbio causa um tipo definido de doena. Em 1877 foi o primeiro a utilizar o cristal
violeta com sucesso para a colorao do antraz, Paul Ehrlich utilizou o azul de metileno e F
Ziehl e F. Neelsen desenvolveram a colorao pelo cido, permitindo que Koch observasse
mais tarde o bacilo da tuberculose. Introduziu tambm o meio contendo gar, identificou o
bacilo da tuberculose e foi o primeiro a isolar as bactrias causadoras do antraz e da clera
asitica. Koch, por volta de 1880, organizou postulados baseado em quatro critrios
necessrios para provar que um micrbio especfico causa uma doena particular.
Postulados de Koch:
1 - Um microrganismo especfico deve sempre estar associado a uma doena.
2 - O microrganismo deve ser isolado e cultivado em cultura pura, em condies
laboratoriais.
3 - A cultura pura do microrganismo produzir a doena quando inoculada em animal
susceptvel.

possvel

recuperar

microrganismo

inoculado

do

animal

infectado

experimentalmente.
Devaine (1863): utilizando sangue de animais infectados pelo antraz, transmitiu infeces
em camundongos, carneiros e gados sadios. A filtrao do sangue infectado em filtros de
barro removia os organismos do filtrado e dessa forma no induzia a doena, enquanto os
depsitos sobre o filtro produzia a doena.

Oliver W. Holmes (1809-1894): mdico americano, insistiu em 1843 que a febre de

parturiente era contagiosa e , portanto, era transmitida de uma mulher para outra pelas mos
dos mdicos e das parteiras

Ignaz Philipp Semmelweis (1818-1865) pesquisava uma maneira de manter as incises

cirrgicas livre de contaminao pelos microrganismos usando solues cloradas na antisepsia das mos dos mdicos.
Aps a descoberta dos vrus, agentes que no crescem em laboratrio, como
fazem as bactrias, foram requeridas algumas alteraes dos postulados de Koch. Dentro de
um curto perodo de tempo depois do estabelecimento da teoria microbiana, o postulado
conduziu descoberta da maioria das bactrias que causam a doena humana.

Dmitri Ivanovski (1864-1920): em 1892, descobriu que o agente do mosaico do tabaco

podia ser transmitido por um suco filtrado da planta doente. Esse agente era o vrus,
palavra derivada do latim que significa lquido viscoso ou veneno
A partir do conhecimento de que os microrganismos causam doenas, os
cientistas comearam a dar maior ateno a sua preveno e tratamento, surgindo conceitos

como anti-sepsia, imunizao e quimioterapia. A descoberta do microscpio eletrnico,

por volta de 1934, introduziu uma nova era na citologia molecular, estimulando o sucesso a
renovao da pesquisa, com aplicao de tcnicas histoqumicas estabelecidas. A era da
antibitica deu incio com a descoberta da penicilina por Fleming (1929) que foi
desenvolvida durante a segunda Guerra Mundial.

5 O Desenvolvimento da Microbiologia Oral

W. D. Miller, publicou em 1890 um trabalho intitulado Os microrganismos
da cavidade oral humana, propondo que os carboidratos da dieta eram degradados pelas
bactrias orais e os cidos resultantes causavam a dissoluo do esmalte dental, acreditando
que a matriz descalcificada da dentina, em particular, era destruda pela ao
peptonizante de microrganismos proteolticos. Assim, foi Miller quem mostrou
experimentalmente pela primeira como as bactrias causam a crie dental. Essa
conceituao foi chamada de teoria qumico-parasitria.
Outro pesquisador que descreveu a flora bucal, especulando os seus efeitos na
cavidade foi G. V. Black, que aprendeu odontologia e microbiologia por vontade prpria e
menos formal.(1883). Em 1924, J. K. Clark, identificou cocos em leses de crie, no qual
chamou de Streptococcus mutans, porm naquele tempo outros cientistas no
reproduziram os seus achados.
Robert Stephan mediu o pH da placa com eletrodos de antimnio especiais e
descobriu que dentro de poucos minutos aps o enxge bucal com uma soluo de glicose
o pH da placa caa, porm mais naqueles com experincia anterior de crie, isso foi
demonstrado na dcada de 30 e 40. Paul Keys tratou hamsters com penicilina e
eritromicina para prevenir a crie, enquanto a prole no tratada desenvolvia a leso na

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dcada de 1960.
As descries iniciais das doenas periodontais foram realizadas por Pierre
Fauchard em 1745; John Hunter (1773), descreveu a gengivite e a periodontite; H. A.
Gins em 1934, foi o primeiro a desvendar a natureza anaerbia de algumas bactrias da
cavidade bucal e isoladas de infeces orais.
Em 1956 MacDonald e colaboradores estimularam novas pesquisas, quando
descreveram infeces mistas bactrias produtoras de pigmentos negros, utilizando
mtodos de anaerobiose rotineiramente. Os conhecimentos alcanados com a melhoria das
tcnicas de cultivo e com a sofisticao dos mtodos de identificao bioqumica e
sorolgica levaram a concluso de que bactrias especficas so responsveis pelo
desenvolvimento da periodontite do adulto e da periodontite juvenil.

6 Estudos sobre a Imunidade

O ramo da imunologia desenvolveu-se dos estudos iniciais da bacteriologia.
Porm os chineses, persas e brahmins j praticavam a variolizao, tcnica consistida da
exposio de um indivduo so s crostas secas de um indivduo que se recuperava da
doena. Em 1776, Edward Jenner, introduziu a prtica de imunizao ativa, expondo
indivduos a antgenos da varola humana mais branda, protegendo-os da forma mais
agressiva.
Pasteur, aps 100 anos, estendeu o conceito de imunizao ativa, quando
observou que a clera aviria podia ser evitada inoculando cultura velha de bacilos, com a
sua virulncia reduzida. Em seguida ele aplicou este princpio de imunizao na preveno
do carbnculo, denominando as culturas avirulentas de vacinas (do latim vacca, vaca) e o

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processo de imunizao, com tais culturas, de vacinao. Ele desenvolveu este mtodo
atravs da utilizao de organismos atenuados e preparou vacinas protetoras contra o
antraz, a erisipela suna e contra a raiva.
Koch iniciou estudos sobre as relaes celulares do hospedeiro s infeces, o
clssico de imunidade mediada por clulas foi a observao, que o mesmo fez, quando
injetou um antgeno derivado do organismo causador da tuberculose, ocasionando reaes
inflamatrias tardias em seres humanos e animais quando expostos.
Elie Metchnikoff (1884) observou que os leuccitos eram capazes de ingerir
bactrias (fagocitose) e destru-las atravs da ingesto intracelular. Porm somente depois
dos anos 40 que a imunidade mediada por clulas foi reconhecida totalmente como um
mecanismo imune muito importante. Metchnikoff, enquanto trabalhava no instituto Pasteur,
formulou a teoria que os fagcitos eram a primeira e mais importante linha de defesa contra
a infeco, ganhando o Nobel (1908).

7 - Bibliografia
BIER, O. Microbiologia e Imunologia . v. 1, 30 ed., So Paulo
Melhoramentos, 1994.
NISENGARD, R. J., NEWMAN, M. G. Microbiologia Oral e Imunologia.
2 ed., Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1997.
PELCZAR, M. J., et al. Microbiologia: Conceitos e Aplicaes. v. 1, 2 ed.,
So Paulo: Makron Books, 1997

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8 Objetivos da Aula
-

Apresentar historicamente a origem e o desenvolvimento da Microbiologia e

Imunologia.

Mostrar os principais cientistas, suas pesquisas e seus descobrimentos.

Apresentar as reas relacionadas com a microbiologia.

9 Responder as Questes
9.1 - Quem inventou o primeiro microscpio? Quais foram as primeiras
observaes realizadas? Qual a importncia desse fato?
9.2 Responda:
a - O que significa Gerao Espontnea?
b - Qual a outra teoria que confrontava diretamente com a gerao
espontnea?
c Quais foram os principais pesquisadores e suas experincias, as
quais refutaram a gerao espontnea?
9.3 Cite os postulados de Koch e explique, sucintamente, o que eles
significam.
9.4 Quem foi que criou a teoria qumico-parasitria? E o que ela significa?
9.5 Cite as contribuies dos principais pesquisadores para a Imunologia.